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口蹄疫病毒O型全自动磁微粒CLIA抗体定量检测方法的建立
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作者 包艳芳 蒋韬 +8 位作者 何莉 吕律 李涛善 李昕 孙燕燕 杨光 魏婷 潘晓乐 林密 《中国农业科学》 CAS CSCD 2024年第4期810-819,共10页
【背景】口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、烈性传染病,疫苗接种是预防临床口蹄疫的有效措施。免疫抗体水平监测则是评估疫苗免疫效果、制定免疫程序的重要依据,是免疫工作和疫情防控必不可少的... 【背景】口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、烈性传染病,疫苗接种是预防临床口蹄疫的有效措施。免疫抗体水平监测则是评估疫苗免疫效果、制定免疫程序的重要依据,是免疫工作和疫情防控必不可少的关键环节,因此建立高效、快速、全自动的抗体检测方法具有重要意义。【目的】基于磁微粒(micromagnetic particles,MPs)化学发光免疫分析技术(CLIA),建立一种新型、全自动、可定量的口蹄疫病毒O型抗体检测方法,为口蹄疫免疫监测和疫情防控提供技术支撑。【方法】使用纳米材料磁微粒为固相载体和分离载体包被捕获抗体,用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)标记检测抗体,经过条件优化建立了一种新型磁微粒CLIA检测方法(magnetic particle chemiluminescence immunoassay,MP-CLIA)。本方法首先加入磁微粒-兔抗偶联物(magnetic particle-polyclonal antibodies,MPs-p Abs)、待测样本、口蹄疫病毒O型抗原,37℃孵育;再加入适量酶标抗体(ALP-p Abs),37℃孵育;最后加入化学发光底物AMPPD,检测相对发光强度(relative light unit,RLU)。研究通过检测标准品拟合标准曲线,并应用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)确定检测方法的判定标准;利用质控样本进行方法学评价,同时检测田间样本,并和液相阻断ELISA(LPB-ELISA)比对,验证临床检测效果。【结果】优化后最佳反应条件为磁微粒浓度0.25 mg·m L^(-1)、口蹄疫病毒O型抗原1﹕1000稀释、酶标抗体1﹕2000稀释、加样量20μL。整个检测过程均在全自动化学发光免疫分析仪中完成,反应时间20 min,在抗体含量0—1280 U(效价0—1﹕2048)范围内标准曲线R2>0.99,可进行定量检测。该方法敏感性为94.66%;特异性为97.10%,检测口蹄疫A型、Asia I型血清型特异性为97.14%,与塞内卡病毒(SVV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、牛流行热病毒(BEFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、羊痘病毒(QRFV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体阳性血清无交叉反应;重复检测变异系数CV值<10%;田间样本检测结果与LPB-ELISA符合率为94.69%,定量结果相关系数R2为0.8473,P<0.0001,相关性显著。【结论】建立的MP-CLIA方法耗时短、操作简便,配套国产全自动化学发光仪,可进行全自动化检测,是一种新型、高效的口蹄疫病毒O型抗体定量检测方法,本方法对应的试剂盒已经完成中试生产和临床检测试验,在全国不同区域试用效果较好,具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 磁微粒化学发光免疫分析法 口蹄疫 磁微粒 全自动化
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磁微粒化学发光法在肺炎感染患者血清免疫标志物检验中的应用价值
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作者 杨小莹 白薇 +1 位作者 黄婷 杨云侠 《检验医学与临床》 2024年第3期359-362,367,共5页
目的探讨磁微粒化学发光法(CLIA)在肺炎支原体肺炎(MPP)患者血清免疫标志物检验中的应用价值。方法回顾性选取2020年12月值2022年10月在该院就诊的疑似肺炎支原体(MP)感染患者212例为研究对象,根据MP快速培养结果分为MP感染组(112例)和... 目的探讨磁微粒化学发光法(CLIA)在肺炎支原体肺炎(MPP)患者血清免疫标志物检验中的应用价值。方法回顾性选取2020年12月值2022年10月在该院就诊的疑似肺炎支原体(MP)感染患者212例为研究对象,根据MP快速培养结果分为MP感染组(112例)和对照组(100例)。采集两组患者空腹静脉血,分别采用CLIA及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测免疫球蛋白(Ig)G、IgM、IgA水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估IgM、IgA、IgG诊断MPP感染的价值。比较CLIA和ELISA检测IgM、IgA、IgG的阳性率,采用四格表法检测CLIA及ELISA诊断MPP感染的准确率、灵敏度及特异度。结果MP感染组血清IgM水平明显高于对照组,IgA、IgG水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线结果显示,IgM、IgA、IgG诊断MPP的曲线下面积(AUC)分别为0.792、0.708、0.733,IgM+IgA+IgG联合诊断MPP的AUC为0.851,明显高于各指标单独诊断的AUC(P<0.05)。采用CLIA检测血清IgM、IgA、IgG的阳性率分别为72.32%、34.82%、31.25%,采用ELISA检测血清IgM、IgA、IgG的阳性率分别为58.93%、20.54%、18.75%,CLIA检测血清IgM、IgA、IgG的阳性率明显高于ELISA检测(P<0.05)。112例MPP阳性患者中,CLIA、ELISA检测阳性率分别为91.07%(102/112)、84.82%(95/112),100例MPP阴性患者中,CLIA、ELISA检测阴性率分别为84.00%(84/100)、74.00%(74/100)。CLIA检测诊断MPP的准确率、灵敏度及特异度分别为87.74%、91.07%、84.00%;ELISA检测诊断MPP的准确率、灵敏度及特异度分别为79.72%、84.82%、74.00%;CLIA检测准确率均高于ELISA检测(P<0.05)。结论MPP感染患者血清IgM、IgA、IgG明显异常表达,三者在诊断MPP方面具有一定价值;CLIA检测IgM、IgA、IgG的阳性表达率较高,可提高诊断MPP的准确性,可作为临床筛查MP感染的检查方式进行推广应用。 展开更多
关键词 磁微粒化学发光法 肺炎 免疫标志物 价值
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磁微粒化学发光法测定VEGF的性能验证和临床应用效果评估
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作者 屠竞扬 周琰 +3 位作者 邵文琦 潘柏申 王蓓丽 郭玮 《检验医学与临床》 2024年第5期581-585,591,共6页
目的分析磁微粒化学发光法测定血管内皮生长因子(VEGF)的性能并评估临床应用效果。方法选取2023年8月于复旦大学附属中山医院确诊为实体恶性肿瘤患者80例作为癌症组,良性病变患者80例作为良性疾病组,另选取于该院体检的表观健康者20例... 目的分析磁微粒化学发光法测定血管内皮生长因子(VEGF)的性能并评估临床应用效果。方法选取2023年8月于复旦大学附属中山医院确诊为实体恶性肿瘤患者80例作为癌症组,良性病变患者80例作为良性疾病组,另选取于该院体检的表观健康者20例作为健康对照组。采用磁微粒化学发光法测定VEGF的水平,并验证其正确度、重复性、中间精密度、线性范围、可报告范围、参考范围及抗干扰能力。比较3组患者VEGF水平并绘制VEGF诊断恶性肿瘤的受试者工作特征(ROC)曲线。结果低值样本重复检测20次的变异系数(CV)为4.38%,高值样本重复检测20次的CV为1.32%,符合国家卫生健康委员会临床检验中心室间质量评价标准中公布的肿瘤标志物不超过总允许误差(TEa)的1/4的要求(≤6.25%)。低值样本测量10次的CV为2.38%,高值样本测量10次的CV为1.92%,中间精密度符合不超过TEa的1/3的要求(≤8.33%)。重复检测3次国际标准品Z1、Z2的偏差分别为1.43%和-1.45%,其绝对值均未超出目标偏差(≤15%)。线性范围为40~3200 pg/mL。可报告范围为40~16000 pg/mL。20例表观健康人群检测结果均在厂家声明参考范围内,参考范围验证通过。加入干扰物质后,检测结果偏差均符合产品说明书声明的偏差(≤15%),抗干扰验证通过。癌症组VEGF水平高于健康对照和良性疾病组(P<0.05),以160 pg/mL为最佳截断值时,VEGF诊断恶性肿瘤的曲线下面积为0.90,灵敏度为0.69,特异度为0.95。结论磁微粒化学发光法测定VEGF的重复性、中间精密度、正确度、线性范围、可报告范围、参考范围、抗干扰能力均符合实验室质量管理要求,能保证检测质量,满足临床使用需求,可用于恶性肿瘤的辅助诊断。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 磁微粒化学发光法 性能验证 临床应用效果 评估
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纳米磁微粒化学发光法临床检测总IgE抗体和过敏原sIgE抗体的方法学比对
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作者 吴叶丽 闵权 姚煦 《临床检验杂志》 CAS 2024年第3期161-165,共5页
目的对纳米磁微粒化学发光法平台(纳博克)检测临床样本中的总IgE抗体和过敏原特异性IgE抗体进行方法学比对。方法参考美国临床和实验室标准协会的相关文件,针对总IgE抗体以及屋尘螨D1/粉尘螨D2/交链孢霉M6/蟑螂I6/猫上皮E1/艾蒿W6/牛奶... 目的对纳米磁微粒化学发光法平台(纳博克)检测临床样本中的总IgE抗体和过敏原特异性IgE抗体进行方法学比对。方法参考美国临床和实验室标准协会的相关文件,针对总IgE抗体以及屋尘螨D1/粉尘螨D2/交链孢霉M6/蟑螂I6/猫上皮E1/艾蒿W6/牛奶F2/蛋白F1/小麦F4/虾F24/花生F13共计11项过敏原,对纳博克和ImmunoCAP系统的一致性采用卡方检验和Kappa检验进行比较及评价。结果11项过敏原两种方法学比对的Kappa值均>0.75,表明两种方法学具有较好的一致性。除了交链孢霉和小麦两项外,其余项目的阴性、阳性、总符合率和±1级符合率均在90%以上,表明两种方法学的定性一致性良好;Spearman相关系数(r)均位于95%置信区间(CI)内,表明两种方法学的量值具有显著相关性。结论纳博克纳米磁微粒化学发光法过敏原检测平台与ImmunoCAP系统具有良好的一致性,前者的样本用量更少,是一种建议临床推广使用的全定量过敏原检测方法学。 展开更多
关键词 过敏原IgE抗体 方法学比对 纳米磁微粒化学发光法 过敏原检测
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磁微粒化学发光分析法检测血清AMH的性能验证
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作者 孙艾乔 杜琼 +2 位作者 涂云贵 许木丽 陈莉萍 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2024年第1期0147-0151,共5页
对采用磁微粒化学发光分析法的Wan200+全自动化学发光免疫分析仪检测血清抗缪勒氏管激素(AMH)水平并进行性能验证。方法 根据国际标准化组织(ISO)15189和国家卫生行业标准相关要求,对Wan200+全自动化学发光免疫分析仪检测AMH的准确度、... 对采用磁微粒化学发光分析法的Wan200+全自动化学发光免疫分析仪检测血清抗缪勒氏管激素(AMH)水平并进行性能验证。方法 根据国际标准化组织(ISO)15189和国家卫生行业标准相关要求,对Wan200+全自动化学发光免疫分析仪检测AMH的准确度、精密度、线性范围、可报告范围和生物参考区间进行验证和评价。结果 Wan200+全自动化学发光免疫分析仪检测血清AMH的准确度参考品1、2分别为-1.00%、3.34%;批内精密度分别为1.85%、0.93%;批间精密度分别为3.55%、1.57%;线性范围为0.01-25 ng/mL;可报告范围实测值与理论值的回收率均落在90%-110%区间;生物参考区间健康成年男性2.33-12.29 ng/mL;健康成年女性18-24、25-29、30-34、35-39、40-44和≥45岁分别为1.15-8.51、1.04-7.19、0.25-4.89、0.27-3.25、0.19-2.91、0.03-2.15 ng/mL。结论 Wan200+全自动化学发光免疫分析仪检测血清AMH的性能参数(准确度、精密度、线性范围、可报告范围和生物参考区间)均符合厂家声明及国家卫生行业标准相关要求,验证通过,能为临床诊治相关疾病提供依据。 展开更多
关键词 磁微粒化学发光测定法 抗缪勒氏管激素 性能验证
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阿尔茨海默病中Aβ1-42磁微粒化学发光免疫检测方法的建立和应用 被引量:1
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作者 毛骞 李迎 +1 位作者 牧晓梅 马鸿雁 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第3期332-337,共6页
目的建立一种定量检测血清中β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)的磁微粒化学发光免疫检测方法.方法制备活化磁性微球,并标记抗Aβ1-42抗体;制备Aβ1-42抗体-吖啶酯发光试剂,建立一步式定量检测Aβ1-42浓度的磁微粒化学发光免疫检测方法,组装成... 目的建立一种定量检测血清中β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)的磁微粒化学发光免疫检测方法.方法制备活化磁性微球,并标记抗Aβ1-42抗体;制备Aβ1-42抗体-吖啶酯发光试剂,建立一步式定量检测Aβ1-42浓度的磁微粒化学发光免疫检测方法,组装成试剂盒,并评估其灵敏度、准确度、重复性、特异性、稳定性等,推测血清Aβ1-42正常参考区间.结果该方法对血清Aβ1-42检测灵敏度评估的空白限(LoB)为0.03 pg/mL,检测限(LoD)为0.05 pg/mL,功能灵敏度(FS)为0.11 pg/mL,线性范围0.1~5000 pg/mL,加标回收率为103.78%~106.10%;试剂盒检测的分析内精密度为1.06%~2.70%,分析间精密度为3.61%~5.21%,总不精密度为5.93%~8.60%.在试剂盒特异性方面,与血清中常见蛋白的交叉反应率低于2%;同时,样本中常见的3种干扰物在胆红素、甘油三酯、血红蛋白浓度分别低于40 U/L、2 mmol/L、3 g/L时,检测结果基本不受影响.试剂盒在37℃下可稳定保存7 d以上,说明2~8℃下产品有效期不低于12个月.且100例正常人血清检测所得Aβ1-42正常参考区间>654.2 pg/mL.结论本方法建立的Aβ1-42磁微粒化学发光免疫检测方法具有灵敏度高、准确性强、重复性和特异性高等优点,可为血清中Aβ1-42精准定量检测提供新的技术手段. 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 β淀粉样蛋白1-42 化学发光 磁微粒 定量检测
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PCR-金磁微粒层析法检测MTHFR C677T基因多态性方法的建立及评价
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作者 陈锦亮 蓝槐敏 +1 位作者 黄慧莹 陈伟忠 《分子诊断与治疗杂志》 2023年第12期2237-2241,共5页
目的建立一种用于检测亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C667T基因型的方法,并对该方法进行评价。方法以MTHFR基因C667T位点为标靶设计引物,采用PCR-金磁微粒层析法结合扩增受阻突变体系PCR技术(ARMS-PCR)进行基因分型,将所建立的方法应用于... 目的建立一种用于检测亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C667T基因型的方法,并对该方法进行评价。方法以MTHFR基因C667T位点为标靶设计引物,采用PCR-金磁微粒层析法结合扩增受阻突变体系PCR技术(ARMS-PCR)进行基因分型,将所建立的方法应用于临床样本检测。结果ARMS-PCR与金磁微粒层析法联合检测MTHFR C677T基因分型,全程耗时约60 min。检测最低限度为10^(3)copies/μL。PCR-金磁微粒层析法能特异性检测MTHFR基因分型,应用于50份人全血样本MTHFR基因分型检测,其结果与测序结果完全符合,符合率为100%(50/50)。结论PCR-金磁微粒层析法检测MTHFR C677T基因多态性方法具有特异性强、敏感性高、准确率高的特点,无需特殊大型设备,具有快速、便捷、准确、经济等优势,适合在各级医疗机构开展。 展开更多
关键词 亚甲基四氢叶酸还原酶 PCR-金磁微粒层析法 单核苷酸多态
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小反刍兽疫磁微粒化学发光抗体检测方法的建立
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作者 任雪建 李秀梅 +3 位作者 李亚静 杨晓帆 刘近 吕园园 《畜牧兽医科技信息》 2023年第11期56-59,共4页
小反刍兽疫(Peste des petits ruminants,PPR)是由副黏病毒科麻疹病毒属的小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)引起的一种山羊和绵羊的急性、烈性、致死性、高度接触性传染病。目前小反刍兽疫抗体检测方法主要有胶... 小反刍兽疫(Peste des petits ruminants,PPR)是由副黏病毒科麻疹病毒属的小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)引起的一种山羊和绵羊的急性、烈性、致死性、高度接触性传染病。目前小反刍兽疫抗体检测方法主要有胶体金试纸条、酶联免疫ELISA、板式化学发光。本试验利用小反刍兽疫病毒N蛋白和单克隆抗体,建立了小反刍兽疫磁微粒化学发光抗体检测方法,将整个反应过程缩短至15 min。为大批量临床检测小反刍兽疫病毒抗体提供了一种高效便捷的方法。 展开更多
关键词 磁微粒化学发光 吖啶酯 小反刍兽疫
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磁微粒化学发光法检测乙型肝炎血清标志物的临床研究
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作者 刘晓倩 王辉 揭勤琴 《基层医学论坛》 2023年第31期96-98,共3页
目的探讨磁微粒化学发光法检测乙型肝炎血清标志物的临床价值。方法选取2021年3月—2022年1月广昌县人民医院收治的100例乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染患者作为观察组,同期健康体检者100名作为对照组。所有入选对象均于清晨... 目的探讨磁微粒化学发光法检测乙型肝炎血清标志物的临床价值。方法选取2021年3月—2022年1月广昌县人民医院收治的100例乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染患者作为观察组,同期健康体检者100名作为对照组。所有入选对象均于清晨采集6 mL空腹血,离心处理后将血清标本分成2份,分别采用酶联免疫吸附法与磁微粒化学发光法检测血清内乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(hepatitis B surface antibody,HBsAb)、乙型肝炎核心抗体(hepatitis B core antibody,HBcAb)、乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)、乙型肝炎e抗体(hepatitis B e antibody,HBeAb)及前S1抗原(Pre-S1 antigen,Pre-S1Ag)。比较2种方法检测HBV阳性检出率、血清标志物阳性率及诊断效能。结果磁微粒化学发光法检测在观察组中HBV感染阳性检出率高于酶联免疫吸附法,差异有统计学意义(χ^(2)=4.348,P=0.037);2种检测方法在对照组中阳性检出率相比,差异无统计学意义(χ^(2)=0.592,P=0.442);磁微粒化学发光法检测HBsAb阳性率、HBc Ab阳性率高于酶联免疫吸附法,差异有统计学意义(P<0.05);磁微粒化学发光法检测灵敏度、准确度较酶联免疫吸附法高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论2种方法检测乙型肝炎血清标志物均具有良好价值,但磁微粒化学发光法检测阳性检出率、灵敏度、准确度更高,利于提高HBV感染诊断效能,为临床后续治疗工作开展提供参考。 展开更多
关键词 乙型肝炎 磁微粒化学发光法 酶联免疫吸附法 血清标志物
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磁微粒酶联免疫吸附法测定玉米中的伏马毒素B1 被引量:15
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作者 管笛 潘灿平 +1 位作者 王文 武会娟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第8期208-211,共4页
将磁微粒的偶联物替代酶标板作为固定相,用于酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测玉米中的伏马毒素B1(fumonisin B1,FB1).在直接竞争ELISA反应中,分别引入羊抗兔抗体-磁微粒、蛋白A-磁微粒,并比较二者替... 将磁微粒的偶联物替代酶标板作为固定相,用于酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测玉米中的伏马毒素B1(fumonisin B1,FB1).在直接竞争ELISA反应中,分别引入羊抗兔抗体-磁微粒、蛋白A-磁微粒,并比较二者替代效果.通过对检测方法的优化,使用羊抗兔抗体、蛋白A与磁微粒的偶联物作为固定相的检出限分别为0.024μg/mL和0.030 μg/mL.羊抗兔抗体-磁微粒偶联物替代酶标板后具有更低的检出限,为常规ELISA法检测限的三分之一.玉米样品中FB1回收率范围在76.4%~110.6%之间,相对标准偏差小于11%.研究建立了一种灵敏度高、稳定性好的FB1检测方法. 展开更多
关键词 磁微粒 酶联免疫吸附法 伏马毒素 玉米 蛋白A
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鸡卵黄抗体的制备以及金磁微粒为载体去除人血浆部分高丰度蛋白的研究 被引量:8
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作者 林芳 黄建新 +2 位作者 陈超 胡佳 崔亚丽 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期706-709,共4页
目的:以人血浆白蛋白(HSA)和IgG为免疫原,制备特异性鸡卵黄抗体IgY(Egg yolk immunoglobulin),并将其固定于金磁微粒表面,用于HSA和IsG的去除研究。方法:用HSA、IsG以及混合成分分别作免疫原免疫Roman母鸡。制备抗HSA和IsG鸡... 目的:以人血浆白蛋白(HSA)和IgG为免疫原,制备特异性鸡卵黄抗体IgY(Egg yolk immunoglobulin),并将其固定于金磁微粒表面,用于HSA和IsG的去除研究。方法:用HSA、IsG以及混合成分分别作免疫原免疫Roman母鸡。制备抗HSA和IsG鸡卵黄抗体IgY,并对IgY的分离提取条件进行优化。SDS-PAGE和间接ELISA检测IgY的纯度和效价。将高效价IgY固定于金磁颗粒表面进行血浆高丰度蛋白去除研究。结果:免疫后60—120d内,鸡血清抗体效价可达1:15000—1:25000;收获鸡蛋,提取得到的卵黄抗体IgY效价可达1:10000—1:25000,纯度98%以上;采用金磁微粒载体固定IgY,可对血浆中的HSA,IsG进行特异性的去除。结论:人血浆中的高丰度蛋白成分HSA和IsG免疫产蛋母鸡后,可从鸡卵黄中分离提取到高效价、高纯度的卵黄抗体IgY;IgY偶联于金磁微粒表面可特异性的去除人血浆中的HSA和IsG,作为血浆蛋白质组学研究的一种新方法,有较好的应用前景。 展开更多
关键词 人血浆白蛋白 人血浆IgG 卵黄抗体 磁微粒 去除
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一种基于金磁微粒的电化学发光免疫检测方法 被引量:5
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作者 刘冰 童朝阳 +3 位作者 郝兰群 刘威 穆晞惠 黄启斌 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期998-1002,共5页
基于金磁微粒(GoldMag particles)的磁性分离富集性能与良好的生物相容性,直接在金磁微粒表面吸附固定相思子毒素多抗制备捕获探针,以三联吡啶钌标记相思子毒素单抗作为电化学发光探针,两者与相思子毒素发生特异性免疫反应形成夹心复合... 基于金磁微粒(GoldMag particles)的磁性分离富集性能与良好的生物相容性,直接在金磁微粒表面吸附固定相思子毒素多抗制备捕获探针,以三联吡啶钌标记相思子毒素单抗作为电化学发光探针,两者与相思子毒素发生特异性免疫反应形成夹心复合物,成功建立了一种简单、快速、灵敏的相思子毒素电化学发光免疫检测方法。利用此方法检测相思子毒素,其浓度在0.2~1 500μg/L范围内与电化学发光强度成良好的对数线性关系,检出限为0.2μg/L。与生物素-亲和素固定法相比,该法的检出限相当,其线性范围更宽、操作更简化,具有通用性,可以此为基础发展生物毒素及其它蛋白的检测方法,用于临床诊断、环境监测及生物防护等领域。 展开更多
关键词 磁微粒 电化学发光 免疫检测 相思子毒素
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应用量子点及磁微粒技术快速检测阴道毛滴虫抗原 被引量:4
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作者 李蒙 蒲晓允 +1 位作者 李玲 余娟春 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期740-743,共4页
目的以阴道毛滴虫(trichomonas vaginalis,Tv)检测为切入点,构建以量子点和磁微粒技术为基础的夹心法快速检测抗原技术,为同步多项抗原检测作准备。方法针对Tv特异性黏附蛋白AP33制备其抗体,以碳二亚胺交联法,分别连接抗体-量子点及抗体... 目的以阴道毛滴虫(trichomonas vaginalis,Tv)检测为切入点,构建以量子点和磁微粒技术为基础的夹心法快速检测抗原技术,为同步多项抗原检测作准备。方法针对Tv特异性黏附蛋白AP33制备其抗体,以碳二亚胺交联法,分别连接抗体-量子点及抗体-磁微粒加入待测抗原AP33结合后,在荧光显微镜下观测结果。结果确立了本检测系统的最优条件,对AP33的检测与几种阴道常见病原菌无交叉反应,检测限为0.05μg/ml。结论成功构建了量子点磁微粒检测技术,对Tv抗原检测,特异度为90%,准确率为88%。 展开更多
关键词 量子点 磁微粒 阴道毛滴虫 抗原检测
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磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH的性能评估及成年女性AMH参考区间的建立 被引量:4
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作者 岳朝艳 段朝晖 +5 位作者 章迪 韦婕 罗晓红 张倩岚 伍勇 应春妹 《检验医学》 CAS 2021年第1期95-100,共6页
目的评价磁微粒吖啶酯化学发光法检测抗苗勒管激素(AMH)的性能,建立成年女性AMH的参考区间。方法依据美国临床试验室标准化协会(CLSI)相关文件对磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH的性能(空白限、检测限、定量限、精密度,线性范围)进行评... 目的评价磁微粒吖啶酯化学发光法检测抗苗勒管激素(AMH)的性能,建立成年女性AMH的参考区间。方法依据美国临床试验室标准化协会(CLSI)相关文件对磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH的性能(空白限、检测限、定量限、精密度,线性范围)进行评价。采用线性回归分析和相对偏移评估电化学发光法与磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH的一致性。评估血清样本在不同保存条件下的稳定性及不同样本类型之间的差异。采用百分位数法建立成年女性AMH的参考区间。结果磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH的空白限为0.001 ng/mL、检出限为0.02 ng/mL、定量限为0.08 ng/mL,高、低值样本的重复性分别为1.6%、1.3%,批间精密度分别为2.1%、2.2%,总不精密度分别为3.1%、3.2%,线性范围为0.02~27.22 ng/mL。电化学发光法与磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH的相关性良好(r=0.9753)。血清和血浆的检测结果呈线性关系。血清样本在室温(20~25℃)条件下可稳定3 d,在4、-20、-80℃条件下可稳定7 d。20~24、25~29、30~34、35~39、40~44、45~49和≥50岁女性的AMH参考区间分别为1.20~10.21、1.14~9.17、0.55~8.18、0.25~7.02、0.07~4.59、0.01~2.11、<0.39 ng/mL。结论磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH具有良好的分析性能,建立的AMH参考区间可为临床诊治相关疾病提供依据。 展开更多
关键词 抗苗勒管激素 磁微粒吖啶酯化学发光法 参考区间 检测性能评价
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金磁微粒为载体的免疫PCR检测HIV-1 p24 被引量:4
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作者 郑姬 蒋天伦 府伟灵 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期301-304,355,共5页
目的建立以金磁微粒为载体的免疫PCR HIV-1 p24检测体系。方法以金磁微粒作为免疫PCR的载体并通过载体的特异性和非特异性反应验证其可行性;以小鼠抗HIV-1 p24单克隆抗体作为捕获抗体包被金磁微粒,生物素化的羊抗p24多克隆抗体作为检测... 目的建立以金磁微粒为载体的免疫PCR HIV-1 p24检测体系。方法以金磁微粒作为免疫PCR的载体并通过载体的特异性和非特异性反应验证其可行性;以小鼠抗HIV-1 p24单克隆抗体作为捕获抗体包被金磁微粒,生物素化的羊抗p24多克隆抗体作为检测抗体;报告DNA用生物素标记的引物通过PCR扩增预先制备,并通过链亲和素的桥联标记生物素化的多抗,被两抗体夹心捕获的人重组HIV-1 p24抗原通过PCR扩增报告DNA的方式予以检测;并对检测的灵敏度和线性检测范围进行分析。结果金磁微粒上偶联抗体的效率可〉95%,偶联抗体的一致性较好,几乎不产生非特异性吸附,分离与洗涤步骤更简便更彻底;免疫PCR检测p24的灵敏度为0.1ng/L,比ELISA法检测的灵敏度高1.5×10^4倍,线性检测范围为p24浓度在0.1~100ng/L。结论金磁微粒是较理想的免疫PCR反应载体,金磁微粒为载体的免疫PCR检测HIV-1 p24是一种可兹应用的高灵敏度的检测方法。 展开更多
关键词 免疫PCR 磁微粒 HIV-1 P24
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xMag^(TM)异硫氰酸根磁微粒偶联GOD和HRP测定葡萄糖的研究 被引量:3
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作者 吴杰红 张伟 +1 位作者 吴淼 蒲晓允 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第20期2465-2467,共3页
目的建立以xMagTM异硫氰酸根磁微粒为载体的葡萄糖检测体系。方法以xMagTM异硫氰酸根磁微粒作为葡萄糖氧化酶(GOD)和辣根过氧化物酶(HRP)的载体,将葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物酶经偶联法固化于经预处理的磁微粒,从而检测葡萄糖的浓度。... 目的建立以xMagTM异硫氰酸根磁微粒为载体的葡萄糖检测体系。方法以xMagTM异硫氰酸根磁微粒作为葡萄糖氧化酶(GOD)和辣根过氧化物酶(HRP)的载体,将葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物酶经偶联法固化于经预处理的磁微粒,从而检测葡萄糖的浓度。结果用xMagTM异硫氰酸根磁微粒检测葡萄糖浓度与临床结果相符。结论 xMagTM异硫氰酸根磁微粒可作为GOD和HRP的理想载体,作为检测葡萄糖的浓度工具。 展开更多
关键词 异硫氰酸根 磁微粒 葡糖氧化酶 辣根过氧化物酶
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外磁场引导定位秋水仙碱-磁微粒对裸鼠乳腺癌的抑制作用 被引量:3
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作者 张仲海 吴少华 +3 位作者 夏天 朱德生 赵建斌 王文学 《第四军医大学学报》 1995年第2期114-116,共3页
作者用白蛋白包埋法制成具有磁响应的秋水仙碱-白蛋白-磁微粒,并采用MTT法检测了秋水仙碱-白蛋白-磁微粒及游离秋水仙碱对EMT_6细胞的生长抑制作用,对乳癌EMT_6细胞裸鼠移植瘤进行基底部注射和外加磁场定位治疗.结... 作者用白蛋白包埋法制成具有磁响应的秋水仙碱-白蛋白-磁微粒,并采用MTT法检测了秋水仙碱-白蛋白-磁微粒及游离秋水仙碱对EMT_6细胞的生长抑制作用,对乳癌EMT_6细胞裸鼠移植瘤进行基底部注射和外加磁场定位治疗.结果表明:秋水仙碱-白蛋白-磁微粒及游离秋水仙碱在体内、体外实验均对肿瘤细胞有明显的杀伤作用,体外实验在100μg/ml剂量时,灭活率分别为56.16%和58.46%.对乳癌EMT_6细胞裸鼠移植瘤的抑瘤率分别为32.8%和23.6%,提示秋水仙碱-磁微粒外加磁场引导定位对裸鼠乳腺癌有较好的抑制作用. 展开更多
关键词 乳腺癌 磁微粒 定位 秋水仙碱 治疗 抗癌药
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金磁微粒介导的盐酸克伦特罗多克隆抗体的纯化 被引量:2
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作者 汪慧蓉 朱宏莉 +3 位作者 惠文利 张志锋 陈超 崔亚丽 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2006年第5期18-22,26,共6页
以重氮化法制备盐酸克伦特罗-牛血清白蛋白(CBL-BSA)抗原并免疫家兔制备多克隆抗体,将表面固定有BSA的金磁微粒(金磁微粒-BSA)与多克隆抗体反应,抗BSA抗体通过抗原抗体反应被吸附在金磁微粒表面,磁性分离,利用ELISA法对纯化前后抗CBL及... 以重氮化法制备盐酸克伦特罗-牛血清白蛋白(CBL-BSA)抗原并免疫家兔制备多克隆抗体,将表面固定有BSA的金磁微粒(金磁微粒-BSA)与多克隆抗体反应,抗BSA抗体通过抗原抗体反应被吸附在金磁微粒表面,磁性分离,利用ELISA法对纯化前后抗CBL及抗BSA抗体的效价进行测定,确定最佳纯化条件,得到高纯度的抗CBL抗体。结果表明,通过一步反应.可实现载体蛋白BSA在金磁微粒表面的固定化,每毫克金磁微粒固定 BSA的容量可达236 μg;在最佳纯化条件(温度4C,反应时间2h,金磁微粒表面BSA质量与抗体质量比为7:1) 下,金磁微粒-BSA可有效地去除偶联物多克隆抗体中的抗BSA抗体,而纯化前后抗CBL抗体的效价基本保持不变,分离纯化效果较好。该方法可方便、快速地去除多克隆抗体中的无关抗体,对小分子半抗原多克隆抗体的纯化具有重要意义。 展开更多
关键词 盐酸克伦特罗 磁微粒 亲和吸附 抗体纯化
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1例肝癌患者磁微粒化学发光法HIV假阳性分析 被引量:4
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作者 张云燕 仇卫民 江春梅 《国际检验医学杂志》 CAS 2016年第23期3381-3382,共2页
我国艾滋病感染患者人数逐年增加,因此早期诊断和发现人类免疫缺陷病毒(HIV)感染,对预防HIV的传播、控制艾滋病的流行显得尤其重要。目前国内实验室检测HIV抗体多采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行初筛。但是ELISA对一些临床上低浓... 我国艾滋病感染患者人数逐年增加,因此早期诊断和发现人类免疫缺陷病毒(HIV)感染,对预防HIV的传播、控制艾滋病的流行显得尤其重要。目前国内实验室检测HIV抗体多采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行初筛。但是ELISA对一些临床上低浓度标本的检测效果不好,容易出现漏诊或者误诊等问题,而磁微粒化学发光法具有灵敏度和特异度高、检测简便,结果的重复性好、线性范围也宽、并且有着安全无毒、 展开更多
关键词 磁微粒化学发光法 免疫印迹 人类免疫缺陷病毒
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全自动磁微粒化学发光法快速筛查呋喃类药物残留 被引量:3
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作者 梁高道 毛翔 +4 位作者 黄常刚 赵沙沙 金伟 张德军 计梦琴 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期178-183,共6页
文章通过开发硝基呋喃类药物磁微粒化学发光试剂盒,建立了以磁微粒作为固相载体、化学发光作为检测信号的硝基呋喃类药物残留快速检测方法。结合全自动化学发光仪,用磁微粒化学发光酶联免疫法(MCLIA)同时对4种硝基呋喃类药物(呋喃西林... 文章通过开发硝基呋喃类药物磁微粒化学发光试剂盒,建立了以磁微粒作为固相载体、化学发光作为检测信号的硝基呋喃类药物残留快速检测方法。结合全自动化学发光仪,用磁微粒化学发光酶联免疫法(MCLIA)同时对4种硝基呋喃类药物(呋喃西林代谢物(SEM)、呋喃唑酮代谢物(AOZ)、呋喃它酮代谢物(AMOZ)和呋喃妥因代谢物(AHD))在不同来源的鸡肉样、鱼样中的残留量进行定量检测,并与基于超高效液相色谱—三重四极杆串联质谱联用仪的国家标准方法的检测结果进行了对比。共检测鱼肉、猪肉、鸡肉和贝类样品等共计78个样本,与国家标准方法检测结果的符合率在98%以上。结果表明全自动微粒化学发光酶联免疫法具备有自动化程度高,多项目同时检测,检测效率高,检测结果准确可靠等优势,可用于硝基呋喃类药物残留的快速筛查。 展开更多
关键词 硝基呋喃类药物 磁微粒化学发光酶联免疫法 全自动化学发光
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