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CD133免疫磁珠分选脐血内皮祖细胞的培养及鉴定 被引量：7
1
作者 张军霞 李瑞 +4 位作者 赵鹏 石磊 程子昊 尤永平 傅震 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第2期159-162,共4页
目的:建立具备高效增殖、血管生成与迁移能力的脐血内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)分离培养鉴定方法。方法:应用免疫磁珠分选纯化脐血单个核细胞中的CD133+细胞,体外EGM-2MV培养液培养扩增,通过形态学、细胞表面标志及细... 目的:建立具备高效增殖、血管生成与迁移能力的脐血内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)分离培养鉴定方法。方法:应用免疫磁珠分选纯化脐血单个核细胞中的CD133+细胞,体外EGM-2MV培养液培养扩增,通过形态学、细胞表面标志及细胞功能鉴定EPCs,并与脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)作比较。结果:EPCs分离培养7d左右开始出现小集落,21d左右集落扩大、相互融合,并呈现出典型铺路石样改变;培养14d左右,约90%的细胞免疫荧光Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1双阳性,阳性率达90%。CD133和CD34阳性率从86.04%降至2.96%、90.88%降至2.99%,而CD31阳性率从1.12%升至99.88%。在增殖、血管生成与迁移能力上比较,EPCs明显优于HUVECs(P<0.05)。结论:通过CD133免疫磁珠分选脐血单个核细胞,可培养出具有高效增殖、血管生成与迁移能力的EPCs。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 CD133 免疫磁珠分选 增殖 血管生成 迁移
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应用CD138免疫磁珠分选结合荧光原位杂交技术检测多发性骨髓瘤细胞遗传学异常 被引量：12
2
作者 高露 刘清 +13 位作者 师岩 党辉 何琦 王峥 冯麟 李叶 王晓燕 李娜 宋文杰 王燕琳 孔舒 路瑾 黄晓军 赖悦云 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期807-812,共6页
目的:比较直接荧光原位杂交技术(D-FISH)和CD-138磁珠分选结合FISH(MACS-FISH)的方法检测多发性骨髓瘤(MM)的细胞遗传学异常。方法:对31例MM患者进行了传统G显带核型分析,并采用探针组合(1q21,D13S319,RB1,IgH,P53)同时进行D-FISH法和MA... 目的:比较直接荧光原位杂交技术(D-FISH)和CD-138磁珠分选结合FISH(MACS-FISH)的方法检测多发性骨髓瘤(MM)的细胞遗传学异常。方法:对31例MM患者进行了传统G显带核型分析,并采用探针组合(1q21,D13S319,RB1,IgH,P53)同时进行D-FISH法和MACS-FISH法的检测。对17例IgH重组异常的患者,进一步利用IgH/FGFR3,IgH/MAF,IgH/CCND1 3种探针进行FISH检测。结果:31例患者中5例(16.1%)核型分析具有异常克隆。采用直接FISH法有13例(41.9%)检出异常,而采用CD138磁珠分选浆细胞后有25例(80.6%)检出异常。二者异常检出率有显著差异(P=0.042)。采用D-FISH法,1q21,D13S319,RB1,IgH,P53 5种探针的异常检出率分别为22.6%,25.8%,29%,38.7%和9.7%;而采用MACS-FISH法上述5种探针异常检出率分别为48.4%,45.2%,48.4%,67.7%和16.1%。骨髓浆细胞比例≥20%时,D-FISH与MACS-FISH异常检出率一致;骨髓浆细胞比例<20%,MACS-FISH异常检出率明显高于D-FISH法,二者有统计学差异(P=0.00)。结论:利用CD-138磁珠分选后进行FISH检测能显著提高MM细胞遗传学异常的检出率。常规核型分析结合MACS-FISH是MM细胞遗传学异常克隆检测的理想方法,尤其适用于骨髓浆细胞比例小于20%的患者。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 荧光原位杂交 免疫磁珠分选
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从PBMCs及CD133免疫磁珠分选获得内皮祖细胞的体外研究 被引量：8
3
作者 郑伟红 万亚峰 +3 位作者 马小鹏 李兴睿 杨志芳 易继林 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期368-373,共6页
目的:比较从外周血单个核细胞(PBMCs)和CD133免疫磁珠分选体外培养人外周血内皮祖细胞(EPCs)的表型、分化、扩增、功能特点,为EPCs细胞治疗提供临床参考。方法:健康成年人外周血,经Ficoll密度梯度离心法得PBMCs,经直接接种法或免疫磁珠... 目的:比较从外周血单个核细胞(PBMCs)和CD133免疫磁珠分选体外培养人外周血内皮祖细胞(EPCs)的表型、分化、扩增、功能特点,为EPCs细胞治疗提供临床参考。方法:健康成年人外周血,经Ficoll密度梯度离心法得PBMCs,经直接接种法或免疫磁珠分选CD133阳性细胞后置于M199培养基中培养,于第7、14d比较2组细胞表型变化及细胞因子分泌、扩增、体外血管形成及趋化能力。结果:相同血量标本PBMCs组早期集落数高于CD133+组(P<0.01),随着培养时间的推移,流式细胞检测2组细胞均显示造血干细胞标志的表达下调和内皮细胞标志表达上升,但CD133+组内皮标志CD144表达率低于PBMCs组(P<0.01),ELISA法检测到在PBMCs组早期EPCs分泌VEGF的水平高于CD133+组(P<0.01),MTT法显示PBMCs组有较强的增殖能力,基质胶及Tr-answell实验表明PBMCs组细胞参与血管形成的能力较强。结论:CD133+来源的EPCs分化、分泌、增殖及血管形成能力相对较低,推断PBMCs中CD133-细胞可能在形成功能性的EPCs中发挥更重要的作用。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 细胞培养 免疫磁珠分选法
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致敏小鼠CD4^+ CD25^+调节性T细胞磁珠分选及体外扩增 被引量：3
4
作者 潘莉 翁文骏 +2 位作者 许吕宏 魏菁 方建培 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期500-504,共5页
本研究探讨致敏小鼠CD4+ CD25+调节性T细胞的分选及体外扩增。流式细胞术检测致敏小鼠及正常小鼠体内CD4+ CD25+ Treg细胞水平,免疫磁珠分选方法从小鼠脾细胞中分选出CD4+T细胞、CD4+ CD25+ Treg细胞和CD4+ CD25-T细胞,负载抗CD3/CD28... 本研究探讨致敏小鼠CD4+ CD25+调节性T细胞的分选及体外扩增。流式细胞术检测致敏小鼠及正常小鼠体内CD4+ CD25+ Treg细胞水平,免疫磁珠分选方法从小鼠脾细胞中分选出CD4+T细胞、CD4+ CD25+ Treg细胞和CD4+ CD25-T细胞,负载抗CD3/CD28单克隆抗体MACSiBead联合IL-2共同刺激CD4+ CD25+ Treg细胞进行体外扩增培养,用0.4%台盼蓝染色并计数检测细胞的活性,流式细胞术检测分选后细胞纯度、主要表面标记及Foxp3基因的表达。结果表明:致敏小鼠体内CD4+ CD25+ Treg水平较正常小鼠升高(P<0.05)。分选出CD4+ CD25+ Treg细胞纯度平均达到87%,细胞活性大于97%,高表达Foxp3基因。体外扩增2周后细胞数扩增倍数能够达到42倍,CD4+ CD25+ Treg细胞所占比例为85.32%,Foxp3表达由(76.92±1.72)%稍下降至(75.33±2.11)%(P>0.05)。结论:免疫磁珠分选法能够分选出高纯度的CD4+ CD25+ Treg细胞,该分选方法不影响分选靶细胞的细胞活力;体外成功扩增了CD4+ CD25+ Treg细胞,扩增后的CD4+ CD25+ Treg细胞表面标记及Foxp3基因表达无明显改变。 展开更多
关键词 CD4+ CD25+ Treg细胞 免疫磁珠分选 扩增 致敏
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免疫磁珠分选和MLPA技术联合检测多发性骨髓瘤分子遗传学异常系统的建立 被引量：3
5
作者 雷鸣 马莉 +4 位作者 邝丽萍 庞妍 伍九龙 肖芷芳 李力 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1332-1335,共4页
目的探讨联合免疫磁珠分选和多重探针连接依赖性扩增(MLPA)技术检测多发性骨髓瘤(MM)分子遗传学异常的可靠性。方法收集29例初诊MM患者的骨髓细胞,用CD138磁珠进行分选,设计MLPA探针检测分选前后标本TP53和RB1的表达情况,并与FISH检测... 目的探讨联合免疫磁珠分选和多重探针连接依赖性扩增(MLPA)技术检测多发性骨髓瘤(MM)分子遗传学异常的可靠性。方法收集29例初诊MM患者的骨髓细胞,用CD138磁珠进行分选,设计MLPA探针检测分选前后标本TP53和RB1的表达情况,并与FISH检测结果进行对照。结果 MLPA检测成功率100%,与FISH结果吻合度达99.1%,分选后MLPA和FISH阳性率均有显著性提高。结论 MLPA适合临床MM分子遗传学异常检测,标本应在检测前进行磁珠分选。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 多重连接依赖性扩增 荧光原位杂交 免疫磁珠分选
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免疫磁珠分选系统在分离大鼠骨髓干细胞群中的应用 被引量：8
6
作者 舒赛男 魏来 +1 位作者 方峰 王宇 《标记免疫分析与临床》 CAS 2006年第1期35-37,共3页
采用免疫磁珠分选系统(MACS)分离大鼠骨髓Thy-1.1+干细胞群。收集大鼠胫骨和股骨的骨髓细胞,Percoll密度梯度离心分离单个核细胞,Thy1.1单抗标记,间接MACS分离纯化Thy-1.1+干细胞群,流式细胞仪检测其纯度和分选前后CD34+百分比,台盼兰... 采用免疫磁珠分选系统(MACS)分离大鼠骨髓Thy-1.1+干细胞群。收集大鼠胫骨和股骨的骨髓细胞,Percoll密度梯度离心分离单个核细胞,Thy1.1单抗标记,间接MACS分离纯化Thy-1.1+干细胞群,流式细胞仪检测其纯度和分选前后CD34+百分比,台盼兰拒染法检测细胞活力,计算回收率。结果表明分选后的Thy-1.1+细胞纯度达94.2%,回收率64.7%;分选后细胞活力为99.6%,与分选前99.8%无明显差异;分选前CD34+百分比为1.2%,与分选后1.3%无差异。MACS能有效分选大鼠骨髓Thy-1.1+干细胞群,所得细胞纯度高,细胞活力保持好。大鼠Thy-1.1抗原与CD34分子无明显相关性。 展开更多
关键词 骨髓干细胞 Thy-1.1抗原 CD34 免疫磁珠分选系统
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CD138磁珠分选结合间期荧光原位杂交在浆细胞病遗传学诊断中的应用价值 被引量：3
7
作者 梅建刚 李翰卿 +2 位作者 曹红琴 邵靓婧 翟勇平 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1437-1442,共6页
目的:通过CD138磁珠分选(MACS)结合间期荧光原位杂交(I-FISH)技术研究浆细胞病的细胞遗传学特征,阐明MACS-FISH在浆细胞病遗传学诊断中的应用价值,以及探讨我国浆细胞病FISH检测标准化的问题。方法:收集初诊浆细胞病患者232例,其中MM 20... 目的:通过CD138磁珠分选(MACS)结合间期荧光原位杂交(I-FISH)技术研究浆细胞病的细胞遗传学特征,阐明MACS-FISH在浆细胞病遗传学诊断中的应用价值,以及探讨我国浆细胞病FISH检测标准化的问题。方法:收集初诊浆细胞病患者232例,其中MM 203例,AL淀粉样变性24例,意义未明单克隆免疫球蛋白血症(MGUS)5例。应用MACS-FISH检测浆细胞病的细胞遗传学异常。比较染色体核型分析、常规间期FISH(C-FISH)与MACS-FISH细胞遗传学异常检出率的差异。按骨髓浆细胞比例分组,比较C-FISH与MACS-FISH的检测敏感性。分析C-FISH、MACS-FISH异常阳性细胞率与浆细胞比例的相关性,以及比较C-FISH和MACS-FISH克隆大小的检出差异。结果:MACS-FISH检出MM、AL淀粉样变性、MGUS的细胞遗传学异常的发生率为分别为85.9%、62.5%和60%。应用染色体核型分析和C-FISH检出MM细胞遗传学异常的发生率分别为20.0%和64.7%,均显著低于MACS-FISH(P<0.001)。MACS-FISH检出14q32异位、del(14q32)、t(11;14)、+17p13和并存2种及≧3种细胞遗传学异常的阳性率均显著高于C-FISH检测结果(P<0.05)。当骨髓浆细胞比例≦5%时,MACS-FISH的阳性检出率显著高于C-FISH(P=0.001),且MACS-FISH在不同浆细胞比例分组的阳性检出率均无统计学差异;而C-FISH在浆细胞比例≦5%时的阳性检出率显著低于其余3组(P=0.013,P=0.001,P<0.001)。C-FISH组各遗传学异常和MACS-FISH组中+1q21、14q32异位的阳性细胞率与浆细胞比例呈显著正相关(P<0.05)。MACSFISH组各种细胞遗传学异常的克隆大小显著大于C-FISH组(P<0.001)。结论:MACS-FISH可以显著提高浆细胞病细胞遗传学异常的检出率,能更好的反映浆细胞病的细胞遗传学异常发生情况及其克隆大小。MACS-FISH可推荐作为国内浆细胞病遗传学诊断的标准方法,用于MM和SMM的危险分层,以及MGUS、AL淀粉样变性的遗传学诊断和研究。 展开更多
关键词 浆细胞病 多发性骨髓瘤 系统性轻链型淀粉样变性 磁珠分选 荧光原位杂交 细胞遗传学
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人骨关节炎关节软骨间充质祖细胞的免疫磁珠分选和鉴定 被引量：2
8
作者 刘军 戴刚 杨柳 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第47期9239-9242,共4页
背景:从骨关节炎关节软骨中分离培养软骨细胞,再用免疫磁珠分选技术从关节软骨中分选软骨祖细胞,并进行鉴定,经作者检索目前国内没有报道。目的:实验选取人工膝关节置换患者软骨组织体外培养并利用免疫磁珠法分离出具有干细胞特性的软... 背景:从骨关节炎关节软骨中分离培养软骨细胞,再用免疫磁珠分选技术从关节软骨中分选软骨祖细胞,并进行鉴定,经作者检索目前国内没有报道。目的:实验选取人工膝关节置换患者软骨组织体外培养并利用免疫磁珠法分离出具有干细胞特性的软骨间充质祖细胞,拟进一步验证在人软骨组织中含有间充质祖细胞。设计、时间及地点:单一样本观察,实验于2007-06/12在解放军第三军医大学毒理教研室及西南医院烧伤科实验室完成。材料:标本取材于解放军第三军医大学西南医院关节外科中心同期收治的10例人工膝关节置换患者软骨组织(>3cm),患者对治疗及实验均知情同意。方法:统一选用原发性骨关节炎患者关节软骨标本,采用免疫磁珠法分选获得CD105/CD166阳性细胞。并进行成软骨和成脂诱导分化。主要观察指标:①免疫磁珠分选细胞用流式细胞仪和免疫组织化学检测,观察细胞生长特性。②分选细胞成骨和成脂分化后细胞形态和功能的变化。结果:①免疫磁珠分选的关节软骨间充质祖细胞原代和传代细胞均具有干细胞的生长特性。②分选的细胞免疫组织化学检测表达CD105和CD166阳性染色,流式细胞仪检测CD105和CD166阳性细胞比例分别为98.72%和97.5%。④分选细胞经成软骨、成脂诱导后能分化为具有相应细胞表型的细胞。结论:人关节软骨组织中存在具有干细胞特性的软骨间充质祖细胞,利用免疫磁珠技术可成功地将其从关节软骨细胞中分离出来。 展开更多
关键词 软骨 间充质祖细胞 免疫磁珠分选 成脂分化
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全自动免疫磁珠分选系统检测沙门氏菌 被引量：4
9
作者 杜强 屠博文 《食品安全质量检测学报》 CAS 2016年第5期1836-1839,共4页
目的研究全自动免疫磁珠分选系统对国标沙门氏菌检测方法的改进效果。方法从肉鸡专项监测中选取106份样品,采用全自动免疫磁珠分选系统和GB 4789.4-2010《食品微生物学检验沙门菌检验》进行沙门氏菌对比检测。与国标法相比,全自动免疫... 目的研究全自动免疫磁珠分选系统对国标沙门氏菌检测方法的改进效果。方法从肉鸡专项监测中选取106份样品,采用全自动免疫磁珠分选系统和GB 4789.4-2010《食品微生物学检验沙门菌检验》进行沙门氏菌对比检测。与国标法相比,全自动免疫磁珠分选系统取消了SC和TTB增菌,经BPW增菌后直接使用系统富集目标菌并接种显色平板。结果免疫磁珠法阳性检出率为32%,国标法阳性检出率为31%,二者无显著性差异(P>0.05)。但磁珠法取消了二次增菌的步骤,检测时间比国标法节省24 h,且平板上的单个菌落生长率和菌株特异性也更好。采用磁珠法检测的106份样品中,有34份样品检出可疑显色菌株,都有单个可疑菌落生长,最后均鉴定为目标菌沙门氏菌;采用国标法有38份样品检出可疑显色菌株,其中3份无单个可疑菌落生长经再次转种,最后有5株经鉴定为嗜水气单胞菌等干扰性杂菌,仅33株为目标菌沙门氏菌。结论全自动免疫磁珠分选系统特异性好、单个菌落生长率高且检测时间短,可以用于食品中沙门氏菌检验。 展开更多
关键词 全自动免疫磁珠分选系统 沙门氏菌 食源性监测
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免疫磁珠分选人角朊干细胞的实验研究 被引量：1
10
作者 罗海水 彭代智 +5 位作者 周新 刘敬 朱崇涛 严泉 李星 王勇 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第6期812-814,共3页
目的:探索人角朊干细胞(keratinocyte stem cells,KSCs)的免疫磁珠分选(Magnetic Activated Cell Sorting,MACS)的方法。方法:从人包皮组织获得角朊细胞悬液,然后利用人角朊干细胞表面CD49f(整合素α6)和CD71的表达情况(CD49fbriCD71dim... 目的:探索人角朊干细胞(keratinocyte stem cells,KSCs)的免疫磁珠分选(Magnetic Activated Cell Sorting,MACS)的方法。方法:从人包皮组织获得角朊细胞悬液,然后利用人角朊干细胞表面CD49f(整合素α6)和CD71的表达情况(CD49fbriCD71dim)通过MACS法将KSCs分选出来,在荧光显微镜下观察其荧光标记情况,同时将分选所得的CD49fbriCD71dim细胞进行体外无血清培养,观察其形态及克隆形成。结果:人角朊细胞经MACS法分选后所得的CD49fbriCD71dim细胞比率可达12．02(±6．92)%。CD49fbriCD71dim细胞经培养可见细胞为典型的上皮样特征,呈铺路石样形态,高核浆比例,细胞紧密排列,轮廓清楚,折光性好,并可在5-7天左右形成全克隆,符合KSCs的特点。结论:研究表明MACS分选法可以得到较高比例的人角朊干细胞,并能进行后续培养研究,其不失为一种较理想的人角朊干细胞的分选方法。 展开更多
关键词 角朊干细胞 免疫磁珠分选 克隆形成
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免疫磁珠分选联用实时FQ RT-PCR检测前列腺癌患者外周血微转移 被引量：1
11
作者 沈默 陶志华 +3 位作者 何晶晶 吴伟 邓哲宪 陈伟 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期177-179,共3页
目的联用免疫磁珠和实时荧光定量RT-PCR(FQ RT-PCR)检测前列腺癌(PCa)患者外周血PSA mRNA,诊断微转移,评价其临床应用价值。方法抽取53例PCa患者、30例良性前列腺增生(BPH)患者及5例健康对照的外周血,分离单个核细胞,与事先已与鼠抗人... 目的联用免疫磁珠和实时荧光定量RT-PCR(FQ RT-PCR)检测前列腺癌(PCa)患者外周血PSA mRNA,诊断微转移,评价其临床应用价值。方法抽取53例PCa患者、30例良性前列腺增生(BPH)患者及5例健康对照的外周血,分离单个核细胞,与事先已与鼠抗人前列腺特异膜抗原(PSMA)单抗预孵育的包被人抗鼠IgG抗体的磁珠作用,富集PSMA阳性细胞。实时FQ RT-PCR检测富集细胞的PSA mRNA。结果5例健康对照者均为阴性;30例BPH患者中1例阳性;53例PCa患者中有23例(43.4%)阳性,其中ECT证实的27例骨转移癌患者中,有17例(63%)阳性。结论免疫磁珠法联合实时FQ RT-PCR方法检测PSA mRNA判断PCa患者外周血微转移,有助于转移PCa的早期诊断。 展开更多
关键词 免疫磁珠分选 前列腺癌 微转移 前列腺特异抗原 逆转录-聚合酶链反应
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免疫磁珠分选系统在急性髓系白血病干细胞分离中的应用 被引量：5
12
作者 徐瑞荣 王敬毅 +3 位作者 崔兴 王琰 胡述博 李丽珍 《浙江中西医结合杂志》 2008年第10期610-612,共3页
目的:采用免疫磁珠分选系统(MACS)分离人白血病骨髓CD34+、CD38-干细胞群。方法:收集人白血病骨髓,Percoll密度梯度离心分离单个核细胞,CD34、38磁性标记,MACS分离纯化CD34+、CD38-干细胞群,流式细胞仪检测其纯度和分选前后CD34+、CD38... 目的:采用免疫磁珠分选系统(MACS)分离人白血病骨髓CD34+、CD38-干细胞群。方法:收集人白血病骨髓,Percoll密度梯度离心分离单个核细胞,CD34、38磁性标记,MACS分离纯化CD34+、CD38-干细胞群,流式细胞仪检测其纯度和分选前后CD34+、CD38-百分比,计算回收率。结果:分选后的CD34+、CD38-细胞纯度达72.6±3.2%,回收率85.8±1.2%。结论:免疫磁珠分选系统是一种有效的白血病干细胞分离提纯方法,所得细胞纯度比较高。 展开更多
关键词 白血病干细胞CD34^+ CD38^- 免疫磁珠分选系统
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免疫磁珠分选人外周血T淋巴细胞的方法探讨 被引量：2
13
作者 赵品楠 李云 《现代临床医学》 2010年第1期16-17,共2页
目的:探索一种用免疫磁珠分选人外周血T淋巴细胞更高效的方法。方法:用Ficoll密度梯度离心法先分离出人单核细胞(PBMC),选用EasySep正选人CD3试剂盒,用两种不同的操作方法分离T淋巴细胞并进行比较。结果:两种方法有显著差异。结论:用... 目的:探索一种用免疫磁珠分选人外周血T淋巴细胞更高效的方法。方法:用Ficoll密度梯度离心法先分离出人单核细胞(PBMC),选用EasySep正选人CD3试剂盒,用两种不同的操作方法分离T淋巴细胞并进行比较。结果:两种方法有显著差异。结论:用免疫磁珠分选人外周血T淋巴细胞的方法值得推广。 展开更多
关键词 人外周血 T淋巴细胞 免疫磁珠分选法
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磁珠分选U251细胞系中的CD133^＋细胞及其生物学特性
14
作者 邓永文 黄萌异 +3 位作者 舒毓高 杨转移 张明宇 方加胜 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第32期6014-6018,共5页
背景:脑肿瘤干细胞理论认为,脑肿瘤干细胞是脑肿瘤细胞中"种子"细胞,是脑肿瘤发生、浸润和复发的关键细胞。目的:观察人多形性胶质母细胞瘤U251细胞系中CD133+细胞的增殖、分化及体内致瘤性等生物学特性。方法:运用磁珠分选... 背景:脑肿瘤干细胞理论认为,脑肿瘤干细胞是脑肿瘤细胞中"种子"细胞,是脑肿瘤发生、浸润和复发的关键细胞。目的:观察人多形性胶质母细胞瘤U251细胞系中CD133+细胞的增殖、分化及体内致瘤性等生物学特性。方法:运用磁珠分选技术分选U251细胞系中的CD133+和CD133-细胞亚群;MTT法绘制两个亚群细胞的生长曲线;单克隆形成率实验检测2个亚群细胞的增殖能力;免疫荧光检测CD133+细胞亚群的多向分化能力;裸鼠移植实验检测2个亚群细胞在裸鼠体内致瘤性的差异。结果与结论:U251细胞系中只有约4.5%的CD133+细胞;分选后的CD133+细胞能增殖形成典型的脑肿瘤干细胞球,生长曲线显示CD133+细胞增殖能力明显强于CD133-细胞;单克隆形成率实验显示CD133+细胞能形成脑肿瘤干细胞球的细胞比率达到78.5%~92.4%,而CD133-细胞仅有0.8%~2.4%;CD133+细胞能分化为具有GFAP和NeuN成熟表型的肿瘤细胞;CD133+的致瘤率为71.42%,而CD133-细胞无致瘤性。提示U251细胞系中存在少量具有增殖、多向分化与体内致瘤能力的CD133+细胞,CD133+细胞是符合肿瘤干细胞定义的细胞亚群。 展开更多
关键词 脑肿瘤干细胞 磁珠分选 增殖 分化 致瘤性 干细胞
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免疫磁珠分选前列腺肿瘤细胞的方法优化 被引量：1
15
作者 陈伟 王国民 《泌尿外科杂志（电子版）》 2017年第2期5-7,4,共4页
目的优化免疫磁珠分选前列腺肿瘤细胞的方法,提高阳性细胞得率。方法对比静置孵育、连续旋转孵育磁珠对分选后细胞得率的影响,并比较分离柱的大小对细胞得率的影响。结果连续旋转法孵育磁珠后,分选细胞得率显著升高。分离柱大小与分选... 目的优化免疫磁珠分选前列腺肿瘤细胞的方法,提高阳性细胞得率。方法对比静置孵育、连续旋转孵育磁珠对分选后细胞得率的影响,并比较分离柱的大小对细胞得率的影响。结果连续旋转法孵育磁珠后,分选细胞得率显著升高。分离柱大小与分选后细胞得率无显著相关。结论免疫磁珠分选前列腺癌细胞的细胞得率与磁珠和细胞的孵育方式有关。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 免疫磁珠分选 孵育 细胞得率 分选柱
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免疫磁珠分选系统在分离肝癌干细胞中的应用
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作者 葛丽丽 杨小昂 戈士文 《中国现代医生》 2012年第20期18-19,共2页
目的为进一步研究肝癌干细胞的特性,应用免疫磁珠分选系统分离纯化肝癌细胞系Huh-7中的肝癌干细胞。方法采用EpCAM单克隆抗体包被的微小磁珠(平均直径≤50 nm)标记Huh-7细胞,通过免疫磁珠分选系统分离EpCAM(epithelial cell adhesion mo... 目的为进一步研究肝癌干细胞的特性,应用免疫磁珠分选系统分离纯化肝癌细胞系Huh-7中的肝癌干细胞。方法采用EpCAM单克隆抗体包被的微小磁珠(平均直径≤50 nm)标记Huh-7细胞,通过免疫磁珠分选系统分离EpCAM(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)阳性的肝癌干细胞,以流式细胞术检测分离后的肝癌干细胞纯度,以台盼蓝染色法检测细胞活性。结果采用流式细胞仪检测分离前肝癌细胞中EpCAM阳性细胞比率为(13.3±1.106)%,分离后的肝癌干细胞中EpCAM阳性细胞比率达到(99.5±0.200)%,细胞存活率为(96.5±1.518)%。结论采用免疫磁珠分选系统分离肝癌干细胞操作简便、快速有效,为肝癌干细胞的进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 肝癌干细胞 免疫磁珠分选系统 EPCAM
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利用微流控免疫磁珠分选仪高效富集外周血循环肿瘤细胞 被引量：2
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作者 邱林 杜娟 +3 位作者 王海燕 孙剑会 蒋建新 曾灵 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期634-637,共4页
目的观察利用微流控免疫磁珠分选仪富集外周血循环肿瘤细胞（circulating tumor cells,CTCs）的效果。方法采用Iso Flux系统（微流体免疫磁珠分选系统）,对16例肺癌患者（TMN分期法,Ⅰ~Ⅳ各4例患者）外周血中循环肿瘤细胞进行分离富集,... 目的观察利用微流控免疫磁珠分选仪富集外周血循环肿瘤细胞（circulating tumor cells,CTCs）的效果。方法采用Iso Flux系统（微流体免疫磁珠分选系统）,对16例肺癌患者（TMN分期法,Ⅰ~Ⅳ各4例患者）外周血中循环肿瘤细胞进行分离富集,并通过免疫荧光的方法标记CTCs的标记蛋白,对分选出的CTCs细胞进行了鉴定。结果 16位肺癌患者血样中10位患者的血样中均发现了Cytokeratine阳性和CD45阴性的CTCs,Ⅰ~Ⅳ期各4例患者的血样中检出CTCs细胞检出率分别为50%、50%、75%和100%。结论利用微流控免疫磁珠分选仪可以有效地富集外周血中稀有的循环肿瘤细胞,具有较高的灵敏性及特异性。 展开更多
关键词 循环肿瘤细胞 Isoflux 免疫磁珠分选仪 外周血
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免疫磁珠分选的口腔鳞状细胞癌干细胞诱导分化及成瘤活性研究 被引量：4
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作者 廖显翔 房芳 +5 位作者 羊良慧 陈国生 王代友 彭剑波 刘诗奇 麦华明 《中国癌症防治杂志》 CAS 2019年第2期131-137,共7页
目的探讨口腔鳞状细胞癌干细胞的诱导分化及成瘤活性。方法采用免疫磁珠分选法从6例原代培养的口腔鳞状细胞癌细胞中分选出CD133^+、CD44^+细胞,以流式细胞术检测其纯度及细胞周期,并绘制CD133^+细胞生长曲线。将分选出的细胞经诱导向... 目的探讨口腔鳞状细胞癌干细胞的诱导分化及成瘤活性。方法采用免疫磁珠分选法从6例原代培养的口腔鳞状细胞癌细胞中分选出CD133^+、CD44^+细胞,以流式细胞术检测其纯度及细胞周期,并绘制CD133^+细胞生长曲线。将分选出的细胞经诱导向成骨肪细胞及成脂肪细胞分化,将原代鳞癌细胞、分选所得的CD44^+细胞及CD133^+细胞进行体内成瘤实验。结果经免疫磁珠分选法成功获得CD44^+细胞、CD133^+细胞,其纯度经检测均在94%以上,且主要处于G0/G1期。CD133+细胞在接种后第2天进入对数期,细胞倍增时间为3.22 d。经诱导后CD44^+、CD133^+细胞成功分化为成骨细胞及成脂肪细胞。皮下注射后第3天可触及新生肿物,在3种细胞成瘤实验中CD133^+细胞组瘤体体积最大,HE染色显示符合低分化口腔鳞状细胞癌病理表现。结论免疫磁珠分选法可高效获得高纯度的口腔鳞状细胞癌干细胞。CD44^+、CD133^+细胞均具有较强的多向分化能力,CD133^+细胞成瘤性较强。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 磁珠分选 干细胞 CD44 CD133 诱导分化
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免疫磁珠分选对荧光原位杂交检测多发性骨髓瘤细胞遗传学异常的影响 被引量：17
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作者 安刚 李承文 +7 位作者 李倩 易树华 刘旭平 徐燕 李增军 齐军元 邹德慧 邱录贵 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第1期54-58,共5页
本研究旨在明确免疫磁珠浆细胞分选对使用荧光原位杂交(FISH)技术检测多发性骨髓瘤(MM)细胞分子遗传学异常的影响,探索适合我国国情的检测方法。对同一MM患者的标本进行2种方法检测:1种为不经分选,直接进行FISH;另1种为经过CD138免疫磁... 本研究旨在明确免疫磁珠浆细胞分选对使用荧光原位杂交(FISH)技术检测多发性骨髓瘤(MM)细胞分子遗传学异常的影响,探索适合我国国情的检测方法。对同一MM患者的标本进行2种方法检测:1种为不经分选,直接进行FISH;另1种为经过CD138免疫磁珠分选(MACS)富集浆细胞后进行FISH检测;比较2种FISH技术对MM遗传学异常检出率并分析其影响因素。探针类型为13q14(RB-1)和14q32(IGH)。结果表明:①利用13q14(RB-1)探针对42例患者同时进行了分选和不分选的的FISH检测显示,经过CD138磁珠分选后25例(56.8%)检测到13q14缺失;不经分选直接进行FISH检测仅9例(21.4%)患者检出13q14缺失,2种标本处理方法的检出率具有统计学差异(p=0.01);②利用14q32(IGH)探针对22例患者同时进行了分选和不分选的FISH检测显示,经过CD138磁珠分选后14例(63.6%)可以检测到14q32重排,不经分选直接进行FISH检测仅7例(31.8%)患者检出14q32重排,2种标本处理方法的检出率具有统计学差异(p=0.035);③不分选FISH的阳性细胞检出率与骨髓涂片和流式细胞仪所检测的浆细胞比例呈明显的正相关。当骨髓涂片细胞中浆细胞比例超过50%,或者流式细胞仪检测浆细胞比例超过10%时,不分选FISH与磁珠分选FISH结果之间没有统计学差异。结论:MACS-FISH显著提高了MM遗传学异常的检出率,避免了假阴性的发生;直接进行FISH检测的检出率低的主要原因是检测标本中浆细胞比例较低;未经分选直接进行13q14(RB-1)和14q32(IGH)探针FISH检测,其阳性细胞率与骨髓涂片、流式细胞仪所检测出的浆细胞比例呈显著正相关,说明随着所检验标本中浆细胞比例的升高,不进行分选直接进行FISH检测的缺点得到一定弥补。当骨髓涂片细胞中浆细胞比例超过50%,或者流式细胞仪检测浆细胞比例超过10%时,2种检测方法之间没有差异。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 荧光原位杂交 免疫磁珠分选
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密度梯度离心和免疫磁珠分选相结合分离脐血中胎儿有核红细胞 被引量：4
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作者 罗欣 杜颖颖 +1 位作者 张进 马端 《中国产前诊断杂志（电子版）》 2010年第3期4-7,共4页
目的研究密度梯度离心和免疫磁珠分选相结合方法富集脐血中胎儿有核红细胞。方法对5例脐血首先用密度梯度离心和免疫磁珠分选依次进行胎儿有核红细胞分离,用流式细胞检测和细胞染色对分选前后细胞进行分选纯度分析。结果 1.通过流式细... 目的研究密度梯度离心和免疫磁珠分选相结合方法富集脐血中胎儿有核红细胞。方法对5例脐血首先用密度梯度离心和免疫磁珠分选依次进行胎儿有核红细胞分离,用流式细胞检测和细胞染色对分选前后细胞进行分选纯度分析。结果 1.通过流式细胞仪检测发现CD71单克隆抗体磁珠用于脐血中胎儿有核红细胞分选(CD71+,CD45-),分选后的纯度可以达到81%,而分选前CD71阳性细胞只占23.2%。2.分选前脐血涂片可见大量的成熟红细胞,含少量有核红细胞;密度梯度离心后可见绝大多数细胞为单个核细胞(淋巴细胞、单核细胞和有核红细胞),含少量红细胞;CD71单克隆抗体磁珠分选后阳性细胞多为胞浆丰富略嗜碱性的有核红细胞。结论密度梯度离心和免疫磁珠分选相结合可以有效提高脐血中胎儿有核红细胞的分选纯度。 展开更多
关键词 胎儿有核红细胞 密度梯度离心 免疫磁珠分选
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