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全反式维甲酸联合小剂量阿糖胞苷对急性髓系白血病细胞磷脂酰肌醇3激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶信号通路的作用机制研究
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作者 杨白梅 鲁猛 +4 位作者 骆思君 王志华 伍华英 王芳 赵耀顺 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第1期28-31,36,共5页
目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)联合小剂量阿糖胞苷(Ara-C)对急性髓系白血病细胞磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(AKT)信号通路的作用机制。方法:选取人急性髓系白血病细胞HL-60,分为空白对照组(未经任何处理的HL-60细胞)、... 目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)联合小剂量阿糖胞苷(Ara-C)对急性髓系白血病细胞磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(AKT)信号通路的作用机制。方法:选取人急性髓系白血病细胞HL-60,分为空白对照组(未经任何处理的HL-60细胞)、Ara-C组(加入0.5μmol/LAra-C)、ATRA组(加入2μmol/LATRA)、ATRA+Ara-C组(加入2μmol/LATRA和0.5μmol/LAra-C),继续培养24、48、72h,采用CCK8检测HL-60细胞活力,AnnexinV双染法检测HL-60细胞凋亡,qRT-PCR检测PI3K、AKT-mRNA表达,Westernblot检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达,并进行细胞形态学观察。结果:空白对照组HL-60细胞活力高于Ara-C+ATRA组、Ara-C组、ATRA组,Ara-C组、ATRA组HL-60细胞活力高于Ara-C+ATRA组(均P<0.05)。Ara-C+ATRA组HL-60细胞凋亡率高于Ara-C组、ATRA组,Ara-C组、ATRA组HL-60细胞凋亡率高于空白对照组(均P<0.05)。HL-60细胞胞体多呈圆形,可见瘤状突起,胞核多为类圆形,Ara-C组、ATRA组染色质凝聚,颜色变深,部分胞核变小,Ara-C+ATRA组染色质凝聚,颜色变深,可见核固缩、核碎裂。空白对照组HL-60细胞PI3K、AKTmRNA表达高于Ara-C组、ATRA组,Ara-C组、ATRA组HL-60细胞PI3K、AKTmRNA表达高于Ara-C+ATRA组(均P<0.05)。空白对照组HL-60细胞P-PI3K、P-AKT蛋白表达高于Ara-C组、ATRA组,Ara-C组、ATRA组HL-60细胞P-PI3K、P-AKT蛋白表达高于Ara-C+ATRA组(均P<0.05)。结论:Ara-C+ATRA能通过抑制PI3K/AKT信号通路激活,促进HL-60细胞凋亡。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 阿糖胞苷 急性髓系白血病 HL-60细胞 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶信号通路 细胞凋亡
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黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠靶组织磷脂酰肌醇3激酶的影响 被引量:9
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作者 金丹 陆付耳 +2 位作者 陈广 孙焕 陆小红 《中西医结合学报》 CAS 2007年第5期541-545,共5页
目的:观察黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠骨骼肌和脂肪组织磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3- kinase,PI-3K)p85亚基mRNA及蛋白表达的影响,探讨该方治疗2型糖尿病的分子机制。方法:Wistar雄性大鼠以尾静脉注射30 mg/kg链脲佐菌素(str... 目的:观察黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠骨骼肌和脂肪组织磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3- kinase,PI-3K)p85亚基mRNA及蛋白表达的影响,探讨该方治疗2型糖尿病的分子机制。方法:Wistar雄性大鼠以尾静脉注射30 mg/kg链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)配合高脂高热量饮食喂养的方法建立2型糖尿病模型。然后将动物随机分为模型组、阿司匹林组和黄连解毒汤组,分别用药治疗。另设12只正常对照组,不做任何处理。10周后,检测空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)及空腹血清胰岛素(fasting serum insulin,FINS),并进行葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT);采用RT- PCR检测骨骼肌和脂肪组织中胰岛素刺激前后PI-3K p85亚基的mRNA表达;用Western blotting方法检测其蛋白表达水平。结果:黄连解毒汤组FBG和OGTT各时点血糖水平明显低于模型组(P<0.05);其FINS值明显低于正常组(P<0.05),而与模型组相比,差异无统计学意义。黄连解毒汤组骨骼肌和脂肪组织中PI-3K mRNA表达水平和蛋白表达水平较模型组明显增加。结论:黄连解毒汤治疗2型糖尿病的作用可能与其提高2型糖尿病大鼠肌肉和脂肪组织中PI-3K p85亚基mRNA和蛋白表达有关。 展开更多
关键词 黄连解毒汤 2型糖尿病 磷脂酰肌醇3激酶 大鼠
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雷公藤对哮喘大鼠气道重构及磷脂酰肌醇3激酶表达的影响 被引量:5
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作者 莫碧文 王昌明 +4 位作者 张珍祥 徐永健 熊维宁 刘先胜 房春生 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期359-364,I0005,共7页
目的:探讨雷公藤内酯醇对哮喘气道重构及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)表达的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为5组(n=8):A组(正常对照组);B组(哮喘4周组);C组(哮喘6周组);D组(给药4周组);E组(给药6周组)。测定气道反应性并观察气道壁嗜酸性粒... 目的:探讨雷公藤内酯醇对哮喘气道重构及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)表达的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为5组(n=8):A组(正常对照组);B组(哮喘4周组);C组(哮喘6周组);D组(给药4周组);E组(给药6周组)。测定气道反应性并观察气道壁嗜酸性粒细胞浸润;图像分析软件测定支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度及支气管平滑肌细胞核数量;免疫组织化学染色、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测PI3K蛋白及mRNA表达。结果:①B组、C组PI3Kp85α的蛋白及mRNA表达水平显著高于A组(P均<0.01),E组上述指标较B组、C组、D组均显著降低(P<0.01、P<0.01、P<0.05);②B组及C组支气管壁厚度、支气管壁平滑肌厚度、支气管壁平滑肌细胞核数量均较A组明显增加(P均<0.01),而E组上述指标较B组、C组、D组均显著降低(P均<0.01);③B组、C组的气道反应性均高于A组(P均<0.01),E组较B组、C组、D组均显著降低(P<0.01、P<0.01、P<0.05)。结论:气道平滑肌增生是气道重构的一个显著特征,PI3K可能在此起促进作用。雷公藤内酯醇可能通过下调PI3K的表达而减轻哮喘气道高反应性及抑制气道平滑肌增生,对哮喘气道重构有一定治疗作用。 展开更多
关键词 支气管哮喘 气道重构 雷公藤内酯醇 磷脂酰肌醇3激酶
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气道重塑与磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路在支气管哮喘发病机制中的研究进展 被引量:13
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作者 潘凌宇 韩燕全 +2 位作者 柳清 桂洁 汪永忠 《安徽医药》 CAS 2016年第12期2214-2218,共5页
支气管哮喘是一种以可逆性气流受限为特征的气道慢性炎症性疾病。在支气管哮喘众多发病机制中,气道重塑与磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)通路联系紧密。气道重塑与支气管气道平滑肌细胞的增殖和凋亡密切相关。PI3K/PKB信号通路作... 支气管哮喘是一种以可逆性气流受限为特征的气道慢性炎症性疾病。在支气管哮喘众多发病机制中,气道重塑与磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)通路联系紧密。气道重塑与支气管气道平滑肌细胞的增殖和凋亡密切相关。PI3K/PKB信号通路作为细胞内一条重要的信号传导通路,起到抑制细胞凋亡、促进细胞周期的进展,介导细胞增殖等作用,因而可以结合气道重塑与PI3K/PKB通路对支气管哮喘的发病和治疗进行探讨和研究。该研究现对支气管哮喘、气道重塑、PI3K/PKB通路的研究进展进行了综述,以期为支气管哮喘的治疗提供借鉴。 展开更多
关键词 支气管哮喘 气道重塑 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B通路
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化浊颗粒对2型糖尿病大鼠磷脂酰肌醇3激酶和葡萄糖转运蛋白4基因表达的影响 被引量:5
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作者 康学东 李菲 +1 位作者 杨维杰 余臣祖 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2015年第7期67-70,共4页
目的观察化浊颗粒对2型糖尿病(T2DM)大鼠磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)在骨骼肌组织中表达的影响,探讨其对PI-3K及GLUT4信号通路激活的作用。方法采用高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM大鼠模型,随... 目的观察化浊颗粒对2型糖尿病(T2DM)大鼠磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)在骨骼肌组织中表达的影响,探讨其对PI-3K及GLUT4信号通路激活的作用。方法采用高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM大鼠模型,随机分为化浊颗粒组、罗格列酮组、模型组。各给药组给予相应药物灌胃,模型组与空白组予生理盐水灌胃,观察大鼠一般状态、体质量及摄食量。干预10周后,予10%水合氯醛麻醉大鼠,检测大鼠空腹血糖(FBG)、葡萄糖耐量试验餐后2 h血糖(2 h PG)、空腹胰岛素(FINS)水平;RT-PCR检测各组大鼠骨骼肌组织PI-3K和GLUT4 m RNA表达的水平。结果与模型组比较,化浊颗粒组与罗格列酮组大鼠FBG、2 h PG及FINS水平降低(P<0.05),PI-3K及GLUT4 m RNA表达水平升高(P<0.05)。结论化浊颗粒具有提高胰岛素敏感性的作用,与激活骨骼肌组织胰岛素信号传导通路中PI-3K和GLUT4 m RNA的表达有关。 展开更多
关键词 化浊颗粒 2型糖尿病 胰岛素抵抗 磷脂酰肌醇3激酶 葡萄糖转运蛋白4 大鼠
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磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号转导通路在重症急性胰腺炎中性粒细胞活化中的作用 被引量:7
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作者 张成 栾正刚 +1 位作者 葛春林 郭仁宣 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第20期1987-1991,共5页
目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B (PI3K/PKB)信号转导通路在重症急性胰腺炎中性粒细胞活化中的作用.健康成年♂SD大鼠30只,随机分为对照组、SAP组和SAP+wortmannin组,每组10只.胆胰管内逆行注射法制作SAP模型,模型制成6h后采用密... 目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B (PI3K/PKB)信号转导通路在重症急性胰腺炎中性粒细胞活化中的作用.健康成年♂SD大鼠30只,随机分为对照组、SAP组和SAP+wortmannin组,每组10只.胆胰管内逆行注射法制作SAP模型,模型制成6h后采用密度梯度离心方法分离出中性粒细胞,用ELISA法检测血中TNF-α和IL- 1β的含量,RT-PCR技术检测中性粒细胞内TNF-α和IL-1βmRNA的变化,Western blot法检测细胞中PKB的活性变化.结果:胰腺炎大鼠血中TNF-α和IL-1β的含量较对照组明显升高(150.8±31.7ng/L vs 22.4±5.2ng/L,P<0.01;217.5±38.4ng/L vs 43.7±9.6ng/L,P<0.01),同时中性粒细胞内TNF-α和IL-1βmRNA及p-PKB的水平也明显升高(0.72±0.06 vs 0.19±0.03,P<0.01;0.84±0.11 vs 0.14±0.04,P<0.01;0.63±0.08 vs 0.34±0.03,P<0.01),wortmannin能显著抑制血中TNF-α(70.9±11.3 vs 150.8±31.7ng/L)和IL-1β(93.0±11.5 vs 217.5±38.4ng/L)含量,中性粒细胞中TNF-α和IL-1βmRNA(0.32±0.04 vs 0.72±0.06及0.22±0.04 vs 0.84±0.11,P<0.01)的表达及PKB活性(0.38±0.06 vs 0.63±0.08,P<0.01)也显著下降.结论:PI3K/PKB信号转导通路介导了重症急性胰腺炎大鼠中性粒细胞的活化及促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β的产生. 展开更多
关键词 磷脂酰肌醇3激酶 重症急性胰腺炎 中性 粒细胞 信号转导
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17β-雌二醇对子宫内膜癌细胞磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号传导通路的活化 被引量:11
7
作者 郭瑞霞 魏丽惠 王建六 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2005年第4期270-273,共4页
目的:探讨17β雌二醇(E2)对子宫内膜癌细胞系HEC1A磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)信号传导通路的激活作用以及PI3K抑制剂和雌激素受体(ER)拮抗剂对它的影响。方法:应用免疫印迹杂交技术检测1×106mol/LE2作用于HEC1A细胞不同... 目的:探讨17β雌二醇(E2)对子宫内膜癌细胞系HEC1A磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)信号传导通路的激活作用以及PI3K抑制剂和雌激素受体(ER)拮抗剂对它的影响。方法:应用免疫印迹杂交技术检测1×106mol/LE2作用于HEC1A细胞不同时间和不同浓度E2作用细胞15min后PKB的活化情况,同法检测PI3K抑制剂LY294002和ER拮抗剂ICI182780对E2活化PKB的影响。结果:1×106mol/LE2作用于HEC1A细胞15min时,PKB活化最明显,Ser473位点磷酸化PKB和总PKB比值(pPKB/PKB)为0.7877±0.0346,而基础值为0.5198±0.0166(P<0.001),且持续至少达2h,随着E2浓度的增加,PKB活化逐渐增强;随着LY294002作用浓度增加,E2作用HEC1A细胞后PKB的活化水平逐渐下降,浓度为50μmol/L时已完全阻断了E2对HEC1A细胞PKB的活化;而随着ICI182780浓度的增加,E2作用HEC1A细胞后PKB的活化水平无明显改变。结论:E2可通过非转录效应,迅速激活HEC1A细胞的PI3K/PKB信号传导通路,而且是ER非依赖性的。 展开更多
关键词 子宫内膜肿瘤 雌二醇 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号传导通路 受体 雌激素
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磷脂酰肌醇3激酶促进支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖 被引量:6
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作者 莫碧文 王昌明 +3 位作者 张珍祥 徐永健 熊维宁 房春生 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2006年第5期489-493,共5页
目的探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)在支气管哮喘大鼠气道重构中的作用。方法将24只SD大鼠随机分为3组:正常对照组,哮喘4周组和6周组,每组8只。测定气道反应性并观察气道壁嗜酸性粒细胞的浸润情况;图像分析软件测定支气管壁厚度、支气管平... 目的探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)在支气管哮喘大鼠气道重构中的作用。方法将24只SD大鼠随机分为3组:正常对照组,哮喘4周组和6周组,每组8只。测定气道反应性并观察气道壁嗜酸性粒细胞的浸润情况;图像分析软件测定支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度及支气管平滑肌细胞核数量;用免疫组织化学染色方法检测PI3K蛋白表达;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测PI3KmRNA表达。结果PI3K P85α主要在气道上皮细胞、气道平滑肌细胞表达。哮喘4周和6周组PI3K P85α蛋白及mRNA表达显著高于对照组(P<0.01),且6周组高于4周组(P<0.05,P<0.01);哮喘4周和6周组支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度及平滑肌细胞核数量均较对照组明显增加(P<0.01),且6周组高于4周组(P<0.01);哮喘4周和6周组的气道反应性均高于对照组(P<0.01),且6周组高于4周组(P<0.05)。结论PI3K信号通路可能通过促进气道平滑肌细胞增殖参与哮喘气道高反应性及气道重构过程。 展开更多
关键词 支气管哮喘 磷脂酰肌醇3激酶 气道重构
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参附注射液对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注期间磷脂酰肌醇3激酶表达的影响 被引量:7
9
作者 肖业达 夏中元 江梦 《中国中西医结合急救杂志》 CAS 北大核心 2009年第2期69-71,F0003,共4页
目的探讨参附注射液(SFI)对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用及其分子机制。方法采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法建立糖尿病大鼠模型。取制模成功的SD大鼠30只,喂养8周后随机分成假手术(sham)组、I/R组、SFI组... 目的探讨参附注射液(SFI)对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用及其分子机制。方法采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法建立糖尿病大鼠模型。取制模成功的SD大鼠30只,喂养8周后随机分成假手术(sham)组、I/R组、SFI组,每组10只。sham组大鼠对冠状动脉(冠脉)只穿线不结扎;其余两组大鼠通过结扎心脏左冠脉前降支30min、再灌注120min制备I/R模型。SFI组于开胸前持续泵注SFI 10ml·kg^-1·h^-1,开胸后为3ml·kg^-1·h^-1;其余两组泵注等量晶胶液。光镜下进行心肌组织病理学观察,测定各组心肌梗死面积;原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,计算细胞凋亡指数;免疫组化染色检测心肌磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)表达。结果SFI组心肌梗死面积较I/R组明显减少[(36.32±2.72)%比(47.26±3.48)%,P〈0.05]。I/R组凋亡细胞显著增多;SFI组凋亡细胞较I/R组显著减少,而多于sham组(P均〈0.05)。与sham组和I/R组比较,SFI组的心肌PI-3K表达明显升高(P均〈0.05)。结论SFI能明显减轻糖尿病时心肌I/R损伤,其机制可能与激活PI-3K/Akt信号通路而发挥心肌保护作用有关。 展开更多
关键词 糖尿病 缺血/再灌注损伤 心肌 磷脂酰肌醇3激酶 细胞凋亡 参附注射液
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磷脂酰肌醇3激酶抑制剂对17β-雌二醇作用下Ishikawa、HEC-1A细胞增殖和凋亡的影响 被引量:3
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作者 郭瑞霞 乔玉环 +1 位作者 魏丽惠 史惠蓉 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第2期322-326,共5页
目的:观察磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002对17β-雌二醇(E2)作用下子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,初步探讨阻断PI3K/Akt通路治疗子宫内膜癌的可能性。方法:应用MTT法(10-10mol/L、10-8mol/L、10-6mol/L、10-4mol/L的E... 目的:观察磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002对17β-雌二醇(E2)作用下子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,初步探讨阻断PI3K/Akt通路治疗子宫内膜癌的可能性。方法:应用MTT法(10-10mol/L、10-8mol/L、10-6mol/L、10-4mol/L的E2或10-6mol/LE2及0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L、50μmol/L的LY294002)、流式细胞技术(0mol/L、10-8mol/L、10-6mol/LE2或10-6mol/LE2及0μmol/L、1μmol/L、50μmol/LLY294002)观察LY294002对E2作用下子宫内膜癌细胞Ishikawa、HEC-1A增殖、凋亡和细胞周期的影响。结果:随着E2浓度的增加,Ishikawa细胞A(570nm)值逐渐升高并呈时间依赖性(F=3.915,P=0.043),G0-G1期比例下降(F=50.926,P≤0.001),S期比例升高(F=17.836,P=0.001);而HEC-1A细胞周期各期比例无变化(P>0.05)。随着LY294002浓度的增加,2种细胞A(570nm)值逐渐下降并呈现时间依赖性(F=10.398,P=0.001;F=5.542,P=0.043),而且G0-G1期比例(F=32.024,P≤0.005;F=14.725,P≤0.017)升高,S期(F=30.132,P≤0.001;F=24.72,P≤0.01)比例下降。50μmol/L和100μmol/LLY294002作用2种细胞48h后,凋亡细胞百分比均增加(P<0.001)。结论:LY294002可以抑制E2对子宫内膜癌细胞的增殖,促使其发生凋亡,抑制细胞周期进展,使细胞周期停滞在G1期。PI3K/Akt信号传导通路可作为治疗子宫内膜癌的新靶点。 展开更多
关键词 子宫内膜癌细胞 雌二醇 磷脂酰肌醇3激酶抑制剂 细胞周期 细胞凋亡 ISHIKAWA细胞 HEC-1A细胞
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磷脂酰肌醇3激酶和蛋白激酶B在宫颈癌组织中的表达及意义 被引量:12
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作者 姚婷婷 戴玉珍 李胜泽 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第5期525-530,共6页
背景与目的:磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号转导通路具有重要的细胞调节功能,在肿瘤的发生发展中也发挥着重要的作用。但目前对宫颈癌中该通路的研究尚不充分。本研究拟检测不同宫颈病变组织中PI3K和Akt蛋白的表达,探讨PI3K/... 背景与目的:磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号转导通路具有重要的细胞调节功能,在肿瘤的发生发展中也发挥着重要的作用。但目前对宫颈癌中该通路的研究尚不充分。本研究拟检测不同宫颈病变组织中PI3K和Akt蛋白的表达,探讨PI3K/Akt信号转导途径与宫颈癌生物学行为的关系。方法:采用免疫组化SP法检测76例宫颈癌组织,21例宫颈上皮内瘤变组织,10例正常宫颈组织中PI3K、Akt蛋白的表达情况,并分析与宫颈癌临床病理因素的关系。结果:PI3K蛋白在正常宫颈组织中无表达,宫颈上皮内瘤变组织中表达率为42.9%,显著低于宫颈癌组织的69.7%(P<0.01)。Akt蛋白在正常宫颈组织和宫颈上皮内瘤变组织中的表达率分别为10.0%和52.4%,显著低于宫颈癌组织的75.0%(P<0.01)。PI3K和Akt蛋白的表达与宫颈癌患者临床分期、病理分级、淋巴转移有关(P<0.01),与年龄、原发灶大小、组织类型无关(P>0.05)。随着宫颈癌组织中PI3K表达的增强,Akt的阳性率增加。二者呈正相关(r=0.425,χ2=18.96,P<0.01)。结论:PI3K蛋白的高表达和Akt蛋白的高表达与宫颈癌细胞的增殖、浸润和转移有一定的相关性。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 磷脂酰肌醇3激酶 蛋白激酶B 免疫组织化学
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磷脂酰肌醇3激酶及葡萄糖转运蛋白4在巴马小型猪2型糖尿病模型中的表达 被引量:4
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作者 于健 邹迪莎 +2 位作者 叶瑶 谢梦婷 于萍 《中国中西医结合急救杂志》 CAS 北大核心 2016年第4期421-424,共4页
目的观察高脂高糖饮食联合链脲佐菌素(STZ)多次注射诱导巴马小型猪2型糖尿病(T2DM)模型糖脂代谢情况以及骨骼肌、肝脏、胰腺组织磷脂酰肌醇3激酶(P13-K)及葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达变化,探讨该模型的特征。方法10只健康雄... 目的观察高脂高糖饮食联合链脲佐菌素(STZ)多次注射诱导巴马小型猪2型糖尿病(T2DM)模型糖脂代谢情况以及骨骼肌、肝脏、胰腺组织磷脂酰肌醇3激酶(P13-K)及葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达变化,探讨该模型的特征。方法10只健康雄性巴马小型猪,按随机数字表法分为对照组和糖尿病模型组,每组5只。T2DM模型组用高脂高糖饲料(蔗糖37%、猪油10%、胆固醇2%、普通饲料51%)喂养,11个月初腹腔注射STZ100mg/kg,1周后重复1次;对照组喂养普通饲料,同时腹腔注射等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。两组实验期为12个月。检测两组动物空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)及血脂水平,采用胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)评价胰岛素抵抗(IR)情况,并检测骨骼肌、肝脏及胰腺组织P13-K及GLUT4的表达水平。结果给予高脂高糖饲料后模型组小型猪FPG、FINS、HOMA-IR、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平较对照组明显升高,注射STZ后,模型组动物FPG较对照组明显升高(mmol/L:11.46±1.64比4.64±0.47),FINS水平较对照组明显降低(μU/mL:6.57±0.33比8.11±0.28),差异均有统计学意义(均P〈0.01)。模型组骨骼肌、肝脏及胰腺组织P13-K、GLUT4蛋白表达水平较对照组明显降低[骨骼肌:P13-K为(6.55±1.81)%比(13.16±3.66)%,GLUT4为(42.34±10.62)%比(116.10±15.57)%,肝脏:P13-K为(6.79±1.73)%比(14.17±3.73)%,GLUT4为(40.35±16.81)%比(126.17±13.73)%,胰腺:P13-K为(5.71±1.51)%比(10.39±2.57)%,GLUT4为(38.90±16.69)%比(73.41±16.39)%,P〈0.05或P〈0.01]。结论采用高脂高糖饲料联合STZ多次注射可以成功诱导巴马小型猪T2DM模型,模型组小型猪存在明显IR及糖脂代谢紊乱,且模型组骨骼肌、肝脏及胰腺组织P13-K、GLUT4蛋白表达水平降低。 展开更多
关键词 巴马小型猪 2型糖尿病 磷脂酰肌醇3激酶 葡萄糖转运蛋白4
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磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路对MC3T3-E1细胞增殖和周期调控的研究 被引量:5
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作者 范文斌 赵建宁 包倪荣 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第4期347-351,共5页
目的近年的研究显示,磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kenase B,PKB/Akt)信号通路是骨形成和骨重建的关键调控信号,文中研究抑制PI3K/Akt信号通路后对MC3T3-E1细胞增殖和细胞周期的影响。方法用PI3K... 目的近年的研究显示,磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kenase B,PKB/Akt)信号通路是骨形成和骨重建的关键调控信号,文中研究抑制PI3K/Akt信号通路后对MC3T3-E1细胞增殖和细胞周期的影响。方法用PI3K/Akt信号抑制剂PF-04691502处理MC3T3-E1细胞后,通过MTS法检测细胞增殖的活性,流式细胞仪检测细胞周期的变化,Western blot检测细胞周期相关蛋白的表达。结果应用抑制剂抑制PI3K/Akt信号通路后,与对照组细胞存活率(100±5.6)%比较,30、150、750 nmol/L的MC3T3-E1细胞增殖活性明显降低[(64.7±4.1)%、(42.3±1.1)%、(15.9±0.4)%,P<0.01],且随着药物浓度的增加,细胞增殖活性降低越明显。同时,与对照组比较,1μmol/L PF-04691502处理组sub-G1期细胞比例明显升高[(1.45±0.43)vs(0.27±0.21),P<0.01],且细胞周期蛋白D1表达降低。结论抑制PI3K/Akt信号通路能将MC3T3-E1细胞阻滞于G1期,能降低细胞的增殖能力。 展开更多
关键词 成骨细胞 磷脂酰肌醇3激酶 蛋白激酶B信号通路 细胞周期 增殖活性
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磷脂酰肌醇3激酶抑制剂LY294002诱导人胚胎干细胞定向分化为胰岛素分泌细胞的研究 被引量:3
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作者 王亚楠 陆平 +6 位作者 黄筱慧 田晨光 孙丽君 窦倩 谭丽 王武亮 毛跟红 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第8期1222-1225,共4页
目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶抑制剂LY294002对人胚胎干细胞定向分化为成熟胰岛素分泌细胞的影响。方法:体外通过5个阶段诱导人胚胎干细胞定向分化为胰岛素分泌细胞。分别给予尼克酰胺+B27(B27组)为对照组和尼克酰胺+LY294002(LY组)为实验... 目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶抑制剂LY294002对人胚胎干细胞定向分化为成熟胰岛素分泌细胞的影响。方法:体外通过5个阶段诱导人胚胎干细胞定向分化为胰岛素分泌细胞。分别给予尼克酰胺+B27(B27组)为对照组和尼克酰胺+LY294002(LY组)为实验组诱导胰岛素分泌细胞的成熟。显微镜下观察各阶段细胞形态变化,免疫荧光染色鉴定胰岛素、c-肽、生长抑素和胰高血糖素的表达。结果:第5阶段诱导14 d LY组胰岛素单染阳性率与B27组无统计学差别(P﹥0.05),但生长抑素和胰高血糖素单染阳性率,胰岛素/生长抑素共染率均低于B27组(P﹤0.05)。结论:在无血清培养体系下,磷脂酰肌醇3激酶抑制剂LY294002能够诱导人胚胎干细胞分化为更加成熟的胰岛素分泌细胞。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 细胞分化 胰岛素 磷脂酰肌醇3激酶抑制剂
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转染人源Omentin-1、Vaspin妊娠期糖尿病脂肪细胞胰岛素受体底物和磷脂酰肌醇3激酶表达变化 被引量:9
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作者 潘宝龙 马润玫 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第35期9-12,共4页
目的观察转染人源网膜素1(Omentin-1)、内脏脂肪组织源性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)的妊娠期糖尿病(GDM)脂肪细胞胰岛素受体底物1/2(IRS-1/2)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)表达变化。方法复苏、传代及诱导分化GDM前脂肪细胞。构建Omentin-1... 目的观察转染人源网膜素1(Omentin-1)、内脏脂肪组织源性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)的妊娠期糖尿病(GDM)脂肪细胞胰岛素受体底物1/2(IRS-1/2)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)表达变化。方法复苏、传代及诱导分化GDM前脂肪细胞。构建Omentin-1、Vaspin过表达载体,以3个不同过表达梯度(1.0、2.5、5.0μg)转染传代脂肪细胞,以无转染组为对照。采用实时荧光定量PCR法检测各组脂肪细胞Omentin-1、Vaspin、IRS-1/2、PI3K mRNA;采用Western blotting法检测各组脂肪细胞Omentin-1、Vaspin、IRS-1/2、PI3K蛋白及酪氨酸磷酸化IRS-1/2;采用[3H]-2-脱氧-D-葡萄糖摄取测定法测算各组脂肪细胞葡萄糖的摄取率。结果随Omentin-1表达增加,转染人源Omentin-1脂肪细胞中IRS-1、PI3K(P85a)mRNA及蛋白表达增加,IRS-2 mRNA及蛋白表达未发生明显变化,IRS-1酪氨酸磷酸化程度明显升高,IRS-2酪氨酸磷酸化程度未发生明显变化,葡萄糖摄取率上升。随Vaspin表达增加,转染人源Vaspin脂肪细胞IRS-1、IRS-2、PI3K(P85a)mRNA及蛋白表达均未出现明显变化,IRS-1、IRS-2酪氨酸磷酸化程度均未出现明显变化,葡萄糖摄取率变化不明显。结论转染人源Omentin-1的GDM脂肪细胞IRS-1和PI3K(P85a)表达升高,葡萄糖摄取率升高;转染人源Vaspin的GDM脂肪细胞无此变化。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 网膜素1 内脏脂肪组织源性丝氨酸蛋白酶抑制剂 基因转染 胰岛素抵抗 胰岛素受体底物1 胰岛素受体底物2 磷脂酰肌醇3激酶
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PTEN/磷脂酰肌醇3激酶通路参与高压力负荷心肌肥厚的机制 被引量:3
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作者 杨永健 张鑫 +1 位作者 张继红 连亨宁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期823-827,共5页
目的探讨压力负荷下心肌组织PTEN(phosphataseand tensin homologue deleted on chromosom e ten)/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)信号通路的变化,及血管紧张素受体(angio-tensinⅡreceptors)AT1及AT2拮抗剂对它的影响,探讨心肌肥厚的信号转导... 目的探讨压力负荷下心肌组织PTEN(phosphataseand tensin homologue deleted on chromosom e ten)/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)信号通路的变化,及血管紧张素受体(angio-tensinⅡreceptors)AT1及AT2拮抗剂对它的影响,探讨心肌肥厚的信号转导机制。方法腹主动脉缩窄法建立大鼠高压力负荷心肌肥厚模型,实验动物分为手术组(n=8);缬沙坦(valsartan)组(n=8):手术组+valsartan(1 mg.kg-1.d-1);PD123319组(n=8):手术组+PD123319(30 mg.kg-1.d-1);假手术组(n=8)。放免法检测心肌及血浆AngⅡ浓度,测定心指数并对心肌组织作HE染色,免疫沉淀法检测心肌组织PTEN、PI3K、蛋白激酶B(Akt)蛋白表达及磷酸化,α-骨骼肌蛋白(-αskeletal actin)蛋白表达。结果大鼠术后14 d,valsartan组血浆AngⅡ浓度高于假手术组及PD123319组(P<0.05),valsartan组心肌AngⅡ浓度则低于假手术对照组及PD123319组(P<0.05)。手术组PI3K/Akt磷酸化高于假手术组(P<0.01),手术组PTEN蛋白表达低于假手术组(P<0.01);valsartan组PI3K/Akt磷酸化低于手术组及PD123319组(P<0.05),valsartan组PTEN高于手术组及PD123319组(P<0.05),PI3K/Akt磷酸化及PTEN蛋白表达量手术组与PD123319组间差异无显著性(P>0.05)。结论高压力负荷下,PTEN蛋白表达降低,心肌组织PI3K/Akt磷酸化增强,参与心肌重构的病理过程,且主要通过AT1起作用。 展开更多
关键词 心肌重构 PTEN 磷脂酰肌醇3激酶 信号转导
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磷脂酰肌醇3激酶抑制剂LY294002对缺血缺氧心肌细胞的作用研究 被引量:2
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作者 宋华培 颜洪 +3 位作者 党永明 褚志刚 张琼 黄跃生 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第11期1659-1661,共3页
目的:明确P13K/Akt信号通路在缺血缺氧心肌细胞损害中的作用。方法:建立心肌细胞缺血缺氧模型,施加磷脂酰肌醇3激酶抑制剂LY294002干预,观察心肌细胞活力、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量及碘化丙啶(PI)染色阳性细胞比例的变化。结果:模... 目的:明确P13K/Akt信号通路在缺血缺氧心肌细胞损害中的作用。方法:建立心肌细胞缺血缺氧模型,施加磷脂酰肌醇3激酶抑制剂LY294002干预,观察心肌细胞活力、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量及碘化丙啶(PI)染色阳性细胞比例的变化。结果:模拟缺血缺氧后细胞活力下降,LDH及PI染色阳性细胞比例显著增加。LY294002干预复合缺血缺氧后,细胞活力急剧下降,LDH含量及PI染色阳性细胞比例进一步显著增加(P<0.01)。结论:应用LY294002加重了缺血缺氧对心肌细胞的损伤效应,提示PI3K/Akt通路参与了缺血缺氧心肌细胞的内源性保护反应,减轻了缺血缺氧损害。 展开更多
关键词 心肌细胞 磷脂酰肌醇3激酶 LY294002 缺血缺氧
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磷脂酰肌醇3激酶/Akt通路参与TGF-β_1诱导人肾小管上皮细胞间质转分化过程 被引量:7
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作者 张勇 张璟 《医学研究生学报》 CAS 2006年第4期319-322,共4页
目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt通路在转化生长因子β1(TGFβ1)体外诱导的人肾小管上皮细胞(HKC)间质转分化(EMT)过程中的作用及意义。方法:将HKC细胞株细胞分成正常对照组、TGFβ1组及TGFβ1+PI3K特异性抑制剂Wortmannin组,选取... 目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt通路在转化生长因子β1(TGFβ1)体外诱导的人肾小管上皮细胞(HKC)间质转分化(EMT)过程中的作用及意义。方法:将HKC细胞株细胞分成正常对照组、TGFβ1组及TGFβ1+PI3K特异性抑制剂Wortmannin组,选取不同时相,免疫印迹(Westernblot)测定总Akt、磷酸化Akt(pAkt)、α平滑肌肌动蛋白(αSMA)表达的变化;Akt磷酸化水平用磷酸化Akt和总Akt水平的比值表示。结果:正常体外培养的HKC有微量的pAkt、αSMA表达,加入10ng/mlTGFβ1刺激0.5h后pAkt水平显著升高,1h升至顶峰后逐渐减弱;αSMA在10ng/mlTGFβ1诱导48h后表达显著升高。同时加用Wortmannin10nmol/L组pAkt、αSMA表达明显抑制。结论:PI3K/Akt信号系统参与TGFβ1介导的EMT过程,PI3K特异性抑制剂Wortmannin可有效抑制TGFβ1介导的HKC的EMT过程。 展开更多
关键词 肾小管上皮细胞 转分化 转化生长因子Β1 磷脂酰肌醇3激酶 Akt/蛋白激酶B
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多奈哌齐对血管性痴呆小鼠学习记忆及海马磷脂酰肌醇3激酶表达的影响 被引量:2
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作者 杜江 刘宇兵 +1 位作者 王勇 王运杰 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期24-27,共4页
目的探讨盐酸多奈哌齐对血管性痴呆(VD)小鼠学习记忆能力及对海马磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)表达的调节作用。方法采用双侧颈总动脉反复缺血-再灌注法制备小鼠VD模型。90只雄性昆明小鼠随机分为3组,假手术组(30只)、模型组(30只)及盐酸多奈... 目的探讨盐酸多奈哌齐对血管性痴呆(VD)小鼠学习记忆能力及对海马磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)表达的调节作用。方法采用双侧颈总动脉反复缺血-再灌注法制备小鼠VD模型。90只雄性昆明小鼠随机分为3组,假手术组(30只)、模型组(30只)及盐酸多奈哌齐组(30只)。在术后第29天、第30天,经跳台试验和水迷宫试验进行行为学测试,用免疫组化和Western blot方法检测各组小鼠海马PI3K的表达变化。结果盐酸多奈哌齐治疗组小鼠的学习和记忆成绩明显高于VD模型组小鼠(P<0.05);免疫组化和Western blot结果发现,盐酸多奈哌齐治疗组小鼠海马CAl区PI3K蛋白阳性表达的平均光密度值显著高于VD模型组(P<0.05)。结论盐酸多奈哌齐能够上调VD小鼠PI3K的表达,有助于改善学习和记忆功能。 展开更多
关键词 血管性痴呆 多奈哌齐 磷脂酰肌醇3激酶 小鼠
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磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号转导通路在胰蛋白酶激活中性粒细胞中的作用 被引量:1
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作者 张成 孙颖 +1 位作者 葛春林 郭仁宣 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期30-32,37,共4页
目的:探讨胰蛋白酶对中性粒细胞磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)信号转导通路的激活作用及PI3K抑制剂对其的影响。方法:应用Western blot技术检测特定浓度胰蛋白酶(40nmol/L)作用中性粒细胞后及应用PI3K抑制剂Wortmannin和LY29400... 目的:探讨胰蛋白酶对中性粒细胞磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)信号转导通路的激活作用及PI3K抑制剂对其的影响。方法:应用Western blot技术检测特定浓度胰蛋白酶(40nmol/L)作用中性粒细胞后及应用PI3K抑制剂Wortmannin和LY294002后的p-PKB活化情况;同时应用ELISA及RT-PCR技术检测细胞培养液及中性粒细胞内TNF-α、IL-1β蛋白和mRNA的变化。结果:40nmol/L胰蛋白酶作用中性粒细胞后p-PKB的水平显著高于对照组(P<0.01);TNF-α和IL-1β蛋白的表达也出现了同样的趋势;预先应用Wortmannin或LY294002后完全阻断了胰蛋白酶对中性粒细胞p-PKB的激活作用,与胰蛋白酶刺激组比较差异显著(P<0.01);TNF-α和IL-1β蛋白及mRNA也随着p-PKB活性的抑制而表达减弱。结论:胰蛋白酶能够激活中性粒细胞内PI3K/PKB信号传导通路,Wortmannin及LY294002可以抑制胰蛋白酶对此通路的激活。 展开更多
关键词 中性粒细胞 胰蛋白酶 磷脂酰肌醇3激酶 信号转导
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