穿膜肽TAT被证实可用于不同类型药物分子的递送,包括核酸、蛋白质和小分子药物等。TAT可以通过共价连接和非共价连接等形式递送分子。但是迄今TAT采用非共价连接形式递送蛋白质分子的报道较少,也未有研究比较过融合形式和非融合形式下TA...穿膜肽TAT被证实可用于不同类型药物分子的递送,包括核酸、蛋白质和小分子药物等。TAT可以通过共价连接和非共价连接等形式递送分子。但是迄今TAT采用非共价连接形式递送蛋白质分子的报道较少,也未有研究比较过融合形式和非融合形式下TAT递送蛋白质能力的差异。为了探究非融合形式对于TAT递送蛋白质能力的影响,本文采用了荧光显微镜观察和流式细胞检测法在细胞水平上探究了TAT以非融合形式递送增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)进入人非小细胞肺癌细胞A549的能力,发现其可以穿膜递送EGFP,并且递送能力与TAT浓度呈现正相关。同时,本文还表达纯化了TAT与绿色荧光蛋白质EGFP的融合蛋白TAT-EGFP并考察了其穿膜能力。本文将两种形式的递送效果进行定量对比后发现:当TAT以融合蛋白形式递送EGFP时,其递送能力要明显优于TAT以非融合形式递送EGFP的能力。本文报道了TAT能够以非融合形式递送EGFP,尽管其递送效果有待进一步提高,但是该递送形式在操作便捷性上有着不可比拟的优势,是未来一种值得选择的递送方案。展开更多
文摘穿膜肽TAT被证实可用于不同类型药物分子的递送,包括核酸、蛋白质和小分子药物等。TAT可以通过共价连接和非共价连接等形式递送分子。但是迄今TAT采用非共价连接形式递送蛋白质分子的报道较少,也未有研究比较过融合形式和非融合形式下TAT递送蛋白质能力的差异。为了探究非融合形式对于TAT递送蛋白质能力的影响,本文采用了荧光显微镜观察和流式细胞检测法在细胞水平上探究了TAT以非融合形式递送增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)进入人非小细胞肺癌细胞A549的能力,发现其可以穿膜递送EGFP,并且递送能力与TAT浓度呈现正相关。同时,本文还表达纯化了TAT与绿色荧光蛋白质EGFP的融合蛋白TAT-EGFP并考察了其穿膜能力。本文将两种形式的递送效果进行定量对比后发现:当TAT以融合蛋白形式递送EGFP时,其递送能力要明显优于TAT以非融合形式递送EGFP的能力。本文报道了TAT能够以非融合形式递送EGFP,尽管其递送效果有待进一步提高,但是该递送形式在操作便捷性上有着不可比拟的优势,是未来一种值得选择的递送方案。
