间接竞争ELISA法检测牛乳中β-乳球蛋白含量的准确性评价 被引量：15

1

作者 袁水林 熊鼎 +2 位作者 陈红兵 高金燕 李欣 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第18期100-104,共5页

研究建立了以β-乳球蛋白标准品为包被抗原、自制抗体为一抗、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG:HRP为二抗、邻苯二胺为底物的间接竞争酶联免疫检测法(indirect competitive enzyme-linked immu nosorbent,ELISA)。同时以反相高效液相色... 研究建立了以β-乳球蛋白标准品为包被抗原、自制抗体为一抗、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG:HRP为二抗、邻苯二胺为底物的间接竞争酶联免疫检测法(indirect competitive enzyme-linked immu nosorbent,ELISA)。同时以反相高效液相色谱法定量检测相同样品中β-乳球蛋白含量,采用t检验方法来评价间接竞争ELISA的方法定量检测β-乳球蛋白的准确性。t检验方法结果显示:在显著水平α=0.05下,该间接竞争ELISA法检测β-乳球蛋白的测量值较为准确。 展开更多

关键词 牛乳过敏 Β-乳球蛋白 间接竞争elisa法 反相高效液相色谱

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固相抗体直接竞争ELISA法测定氯黄隆在土壤中的残留动态 被引量：4

2

作者 刘曙照 袁树忠 +1 位作者 徐暄 钱传范 《农药学学报》 CAS CSCD 2000年第2期57-62,共6页

采用包被抗体直接竞争 EL ISA法测定了氯黄隆在盆土中的残留动态和农田土壤中氯黄隆的残留量。结果表明 :EL ISA法测定土壤中氯黄隆的检测限 <0 .1ng/ g,标准添加回收率为 85.4 %～ 118% ,变异系数为 8.95%～ 16 .14% ,符合残留分析... 采用包被抗体直接竞争 EL ISA法测定了氯黄隆在盆土中的残留动态和农田土壤中氯黄隆的残留量。结果表明 :EL ISA法测定土壤中氯黄隆的检测限 <0 .1ng/ g,标准添加回收率为 85.4 %～ 118% ,变异系数为 8.95%～ 16 .14% ,符合残留分析的要求。在本实验条件下 ,氯黄隆在土壤中的半衰期为 2 2～ 2 6 d,6 0 d降解 80 %以上。麦茬大田连续两年使用氯黄隆2 2 .5g/ hm2 、4 5g/ hm2 ,第一年麦收时中性沙质土壤和弱碱性沙壤土中氯黄隆的残留量分别为0 .2 4、0 .56 ng/ g和 0 .30、0 .96 ng/ g,第二年分别为 0 .2 8、0 .6 7ng/ g和 0 .38、1.0 9ng/ g,与平行进行的高效液相色谱法、生物测定法测定结果基本一致。 展开更多

关键词 测定 氯黄隆 除草剂 土壤 残留 固相抗体直接竞争elisa法

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一步竞争ELISA法检测HBcAb影响因素的探讨 被引量：1

3

作者 马蔡昀 曾慧敏 凌芸 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第11期2023-2024,共2页

目的:研究操作因素对一步竞争ELISA法检测HBcAb的影响。方法:改变加入酶结合物的量,提供不同的孵育方式和孵育时间,延迟不同的加入酶结合物的时间,研究加样因素﹑孵育因素和延迟加入酶结合物时间因素对一步竞争ELISA法检测HBcAb的影响... 目的:研究操作因素对一步竞争ELISA法检测HBcAb的影响。方法:改变加入酶结合物的量,提供不同的孵育方式和孵育时间,延迟不同的加入酶结合物的时间,研究加样因素﹑孵育因素和延迟加入酶结合物时间因素对一步竞争ELISA法检测HBcAb的影响。结果:随加酶结合物量的增加样本S/cutoff值升高;实验中严格做到阴、阳性及空白对照和样本同时处理,则孵育方式和时间对样本S/cutoff值影响不大;延长加入酶结合物的时间,导致样本S/cutoff值下降。结论:操作因素严重影响一步竞争ELISA法检测HBcAb,规范操作规程可以减少操作因素对结果的影响。 展开更多

关键词 HBCAB 一步竞争elisa法 加样因素 孵育因素 延迟加入酶结合物时间

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基于竞争ELISA法研制CEA胶体金快速检测试纸条 被引量：1

4

作者 黄国庆 曹涤非 +1 位作者 王雷 姜洋 《黑龙江科学》 2019年第12期6-9,14,共5页

为了对肿瘤进行临床快速早期诊断,基于竞争ELISA法,结合胶体金免疫层析技术,研究CEA胶体金检测方法。优化检测阈值等相关数据,使优化后的特异性达95%以上、稳定性达100%、敏感度达85%以上,可在5 min内对CEA进行检测,具有临床推广应用价值。

关键词 癌胚抗原 胶体金 竞争elisa法 免疫层析技术 肿瘤标志物

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延长水浴时间对竞争ELISA法检测HBcAb的影响

5

作者 曾慧敏 赵国兴 柏兵 《现代检验医学杂志》 CAS 2005年第2期74-74,共1页

关键词 HBCAB elisa法检测 水浴 竞争elisa法 CUTOFF值 酶结合物 检测结果 一步检测 时间间隔 血清标本 检测误差 时间延长 结合反应 核心抗原 阳性率 吸光度 反应板

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检测牛乳κ-酪蛋白的间接竞争ELISA法与间接ELISA法比较

6

作者 宋宏新 韩波 +1 位作者 李珊 薛海燕 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第4期1114-1119,共6页

试验旨在建立一种快速简单检测牛乳κ-酪蛋白(κ-CN)含量的酶联免疫吸附(ELISA)方法,为解决牛乳蛋白掺假问题提供一定的技术支持。以牛乳κ-CN为包被抗原,以酶标抗体(HRP-IgG)为检测抗体分别建立间接竞争ELISA法和间接ELISA法,并对两种... 试验旨在建立一种快速简单检测牛乳κ-酪蛋白(κ-CN)含量的酶联免疫吸附(ELISA)方法,为解决牛乳蛋白掺假问题提供一定的技术支持。以牛乳κ-CN为包被抗原,以酶标抗体(HRP-IgG)为检测抗体分别建立间接竞争ELISA法和间接ELISA法,并对两种检测方法进行分析比较。结果表明:对于间接竞争ELISA法,κ-CN抗原包被浓度为2.5μg/mL,线性范围为62.5~1 000.0ng/mL,变异系数<2%,回收率在98.46%~101.68%;对于间接ELISA法,κ-CN抗原包被浓度为1.56μg/mL,线性范围为0.098~3.125μg/mL,变异系数<1%,回收率在99.10%~101.06%。比较两种检测方法,间接竞争ELISA法检测耗时较短,抗体应用量较少,而间接法不需要包被成本较高的目标标准蛋白,相关系数也较高,但其检测体系组成成分较多,且需包被待测样品,较难组成ELISA试剂盒体系,不宜用于现场检测。因此,大规模制备ELISA试剂盒体系用于快速检测蛋白含量时可采用间接竞争法,不仅抗体应用量少、节约成本且快速、简单,可更好地用于科研实践。 展开更多

关键词 牛乳κ-酪蛋白 间接竞争elisa法 间接elisa法

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应用竞争ELISA法诊断牛布氏杆菌病

7

作者 朱其太 《畜牧兽医科技信息》 1997年第20期6-6,共1页

阿根廷学者应用竞争ELISA(C—ELISA)检测2岁以上母牛的血清样本,包括血清阴性母牛235份,在3—8月龄时用流产布氏杆菌19号菌株免疫的血清阴性母牛501份、Rose Bengal试验和缓冲平板抗原试验诊断阳性母牛的186份样本。结果非免疫阴性母牛... 阿根廷学者应用竞争ELISA(C—ELISA)检测2岁以上母牛的血清样本,包括血清阴性母牛235份,在3—8月龄时用流产布氏杆菌19号菌株免疫的血清阴性母牛501份、Rose Bengal试验和缓冲平板抗原试验诊断阳性母牛的186份样本。结果非免疫阴性母牛和免疫阴性母牛的C—ELISA特异性分别为99.6％和99.4％,阳性动物的敏感性为100％。 展开更多

关键词 竞争elisa法 牛布氏杆菌病 血清阴性 流产布氏杆菌 C-elisa 母牛 抗原试验 流行率 血清样本 免疫状况

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应用ELISA竞争法检测疫苗制品中残余的牛血清白蛋白 被引量：4

8

作者 李长贵 周铁群 +1 位作者 王剑锋 邱平 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2002年第2期109-110,共2页

目的 应用ELISA 竞争（cELISA）法检测残余牛血清白蛋白（ESA）。方法 以BSA免疫家兔，获得高滴度的抗BSA血清；以BSA包被酶标板作为固相抗原，以梯度稀释的BSA为游离抗原，二者竞争结合抗体，以游离抗原浓度对数作为横坐标，相应吸收... 目的 应用ELISA 竞争（cELISA）法检测残余牛血清白蛋白（ESA）。方法 以BSA免疫家兔，获得高滴度的抗BSA血清；以BSA包被酶标板作为固相抗原，以梯度稀释的BSA为游离抗原，二者竞争结合抗体，以游离抗原浓度对数作为横坐标，相应吸收值为纵坐标作标准曲线，由对应样品的吸收值，可以求得样品中BSA含量。结果 当检测200、50、20和5ng/ml样品时，其试验内变异系数分别为4．5％、7．8％、5．8％和 14％，试验间变异系数分别为3．4％、8．8％、3.3％和30％。本试验还证明人血清白蛋白与牛血清白蛋白的交叉反应较低。结论cELISA可初步用于疫苗中残余BSA含量的检测。 展开更多

关键词 疫苗 竞争elisa法 牛血清白蛋白 疫苗制品 检测

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洛美沙星间接竞争ELISA检测方法的初步研究

9

作者 赵银丽 王金荣 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第10期75-76,共2页

为了初步研究洛关沙星的间接竞争ELISA检测方法，试验采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法将洛美沙星（LOM）分别与牛血清白蛋白（BSA）和鸡卵清白蛋白（OVA）耦联制备免疫原（LOM—BSA）和包被原（LOM—OVA），并将免疫原免疫Balb／c小鼠，... 为了初步研究洛关沙星的间接竞争ELISA检测方法，试验采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法将洛美沙星（LOM）分别与牛血清白蛋白（BSA）和鸡卵清白蛋白（OVA）耦联制备免疫原（LOM—BSA）和包被原（LOM—OVA），并将免疫原免疫Balb／c小鼠，制备了血清多克隆抗体（LOMpAb），并对其血清抗体效价、半数抑制浓度进行了测定。结果表明：小鼠血清抗体的效价为1：12800，间接竞争ELISA的线性检测范围为1．33—120ng／mL，半数抑制浓度（IC50）为10．87ng／mL。说明制备的小鼠血清抗体可用于动物性食品中洛美沙星的检测。 展开更多

关键词 洛美沙星 完全抗原 间接竞争elisa法 检测

原文传递

竞争抑制ELISA法检测植物中豌豆胰岛素PA1b 被引量：1

10

作者 赵燕英 王建和 +2 位作者 顿新鹏 陈正望 陆婕 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期111-113,共3页

为研究豌豆胰岛素PA1b在植物生长发育中的作用,利用竞争抑制ELISA法,检测PA1b在豌豆、芋头、姜、西红柿、苦瓜、蒜头、洋葱、丝瓜、黄瓜等植物中的分布,以及PA1b在豌豆种子发芽过程中的含量变化。结果显示PA1b在豌豆中含量最高,且随着... 为研究豌豆胰岛素PA1b在植物生长发育中的作用,利用竞争抑制ELISA法,检测PA1b在豌豆、芋头、姜、西红柿、苦瓜、蒜头、洋葱、丝瓜、黄瓜等植物中的分布,以及PA1b在豌豆种子发芽过程中的含量变化。结果显示PA1b在豌豆中含量最高,且随着豌豆种子发芽时间的增加含量逐渐减少,PA1b可能对植物生长发育起调控作用。 展开更多

关键词 豌豆胰岛素PA1b 竞争抑制elisa法 发芽

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加样间隔时间对ELISA竞争抑制法检测结果的影响 被引量：6

11

作者 乔海英 白莲莲 赵琳 《实用医技杂志》 2007年第15期2012-2013,共2页

目的:探讨“加样间隔时间”对酶联免疫吸附试验(ELISA)竞争抑制法检测人血清HBeAb、HBcAb结果的影响。方法:随机检测91份HBeAb、HBcAb阴性的血清样本,加样后室温25℃分别放置0min、5min、10min、15min、20min、30min[1]再加入酶标抗体(H... 目的:探讨“加样间隔时间”对酶联免疫吸附试验(ELISA)竞争抑制法检测人血清HBeAb、HBcAb结果的影响。方法:随机检测91份HBeAb、HBcAb阴性的血清样本,加样后室温25℃分别放置0min、5min、10min、15min、20min、30min[1]再加入酶标抗体(HBeAb组先加中和试剂),其后严格按试剂盒说明操作。结果:0min、5min、10min、15min、20min、30min时,HBeAb组阳性率为0、3.3%、10.9%、16.5%、24.2%、37.3%;HBcAb组阳性率分别为0、4.3%、12%、18.6%、26.3%、40.6%;与加入酶结合物0min组标本A值比较,HBeAb、HBcAb均5min、10min组P>0.05,其余各组P<0.01。结论:随着加入样本与酶标抗体间隔时间的延长,HBeAb、HBcAb测定的假阳性率逐渐增加,应在加样后10min内加入酶标抗体,避免标本先与固相抗原结合引起的假阳性。 展开更多

关键词 elisa竞争抑制法 HBEAB HBCAB 加样时间

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间接竞争ELISA检测大豆11S球蛋白和7S伴球蛋白 被引量：9

12

作者 彭楠 刘建峰 +1 位作者 梁运祥 葛向阳 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期661-664,共4页

采用酸沉淀、亲和层析(ConA-Sepharose 4B)等手段,成功地分离纯化了大豆11S球蛋白和7S伴球蛋白,SDS-PAGE检测表明2种蛋白纯度分别达到95%和90%。将纯化的11S球蛋白和7S伴球蛋白分别免疫大白兔获得抗血清,并建立起间接竞争ELISA检测大豆... 采用酸沉淀、亲和层析(ConA-Sepharose 4B)等手段,成功地分离纯化了大豆11S球蛋白和7S伴球蛋白,SDS-PAGE检测表明2种蛋白纯度分别达到95%和90%。将纯化的11S球蛋白和7S伴球蛋白分别免疫大白兔获得抗血清,并建立起间接竞争ELISA检测大豆豆粕及其深加工产品中11S和7S抗原蛋白含量的方法。 展开更多

关键词 11S球蛋白 7S伴球蛋白 亲和层析 间接竞争elisa法

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柠檬黄的ELISA检测方法的建立 被引量：12

13

作者 邱凯 马国文 +2 位作者 柳增善 任立松 沈庆丰 《内蒙古民族大学学报（自然科学版）》 2008年第3期315-320,共6页

利用免疫学基本原理,获取抗柠檬黄的单克隆抗体,以此建立了从食品中检测柠檬黄的间接竞争ELISA.试验表明:OVA-TE最适包被浓度为1μg/mL;酶标抗体最适工作浓度为1:3000;酶标抗体的作用温度和时间分别为37℃,1h;封闭液为1%明胶;底物显色... 利用免疫学基本原理,获取抗柠檬黄的单克隆抗体,以此建立了从食品中检测柠檬黄的间接竞争ELISA.试验表明:OVA-TE最适包被浓度为1μg/mL;酶标抗体最适工作浓度为1:3000;酶标抗体的作用温度和时间分别为37℃,1h;封闭液为1%明胶;底物显色时间为15min;对柠檬黄的最低检出量为26.34ng/mL;抗体的最适稀释倍数为1:12000倍;对该方法进行交叉性试验和重复性试验,结果表明此法是一种特异、灵敏、快速的检测方法,并适合大批量样品检测. 展开更多

关键词 柠檬黄 间接竞争elisa法 单克隆抗体

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一株人单克隆抗体在快速竞争抗HIV ELISA中的应用

14

作者 Dpel.SH 欧阳笑梅 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第3期65-66,共2页

建立了直接检测抗HIV抗体的ELISA筛选技术。第一代测定法主要是根据夹心法的原理,利用从细胞培养中纯化的病毒,但这样会出现假阳性和假阴性的结果。先前应用的夹心法需要高倍稀释的血清和两步程序,而且只能检出IgG抗体。为了尽早地在感... 建立了直接检测抗HIV抗体的ELISA筛选技术。第一代测定法主要是根据夹心法的原理,利用从细胞培养中纯化的病毒,但这样会出现假阳性和假阴性的结果。先前应用的夹心法需要高倍稀释的血清和两步程序,而且只能检出IgG抗体。为了尽早地在感染后测定IgM抗体,以检出抗HIV的免疫应答,因此;利用吸附在固相的重组HIV囊膜蛋白和酶标人单克隆抗体,建立了一种竞争ELISA法。该法既可检测IgM又能检测IgG抗体,而且不需要预先释稀血清,1小时内可得出结果。 展开更多

关键词 人单克隆抗体 竞争elisa法 IGG抗体 抗HIV抗体 IGM抗体 重组HIV 筛选技术 直接检测 免疫应答 囊膜蛋白 测定法 第一代 假阳性 感染后 心法 血清 检出

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基于异源包被诺氟沙星间接竞争酶联免疫分析方法

15

作者 陆宁 张慧敏 +5 位作者 邢爽 丁德杰 陈鑫 高瑾 张潮 蒲顺昌 《安徽科技学院学报》 2022年第1期50-58,共9页

目的:建立诺氟沙星的间接竞争酶联免疫分析方法。方法:采用活泼酯法将诺氟沙星与牛血清蛋白偶联制备免疫原,与鸡卵清蛋白偶联制备包被原;采用活泼酯法将氧氟沙星与鸡卵清蛋白偶联制备包被原;用紫外吸收光谱法扫描鉴定以上人工抗原是否... 目的:建立诺氟沙星的间接竞争酶联免疫分析方法。方法:采用活泼酯法将诺氟沙星与牛血清蛋白偶联制备免疫原,与鸡卵清蛋白偶联制备包被原;采用活泼酯法将氧氟沙星与鸡卵清蛋白偶联制备包被原;用紫外吸收光谱法扫描鉴定以上人工抗原是否偶联成功。将免疫原通过动物免疫获得诺氟沙星抗体,利用间接竞争酶联免疫分析方法确定最佳包被原、抗体和包被原的最佳工作浓度,优化二抗浓度、反应时间,并对方法特异性和准确度进行评价。结果:选用氧氟沙星包被原时灵敏度较高,当氧氟沙星包被原浓度为125 ng/mL,抗体稀释倍数为500倍,二抗稀释倍数为5000倍,反应时间为30 min时,对诺氟沙星的识别灵敏度最高,半抑制浓度IC_(50)为4.23 ng/mL,定量检测线性范围(IC_(20)~IC_(80))为0.29~61.83 ng/mL,检测限IC_(10)为0.06 ng/mL。对诺氟沙星及其他4种常见氟喹诺酮类物质交叉反应率大于5%,实际样品添加回收率范围在70%~95%之间。结论:该检测方法具有较强的广谱性及较高的灵敏度,可以快速检测鱼肉及蜂蜜中的诺氟沙星及其他4种常见氟喹诺酮类物质总量。 展开更多

关键词 诺氟沙星 异源包被 间接竞争elisa法

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酶联免疫吸附法与二喹啉甲酸法检测核桃蛋白浓度的比较研究 被引量：8

16

作者 李雪娇 赵博 +1 位作者 杨帅 车会莲 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第22期6009-6014,共6页

目的探究间接酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)试剂盒2种方法在核桃蛋白浓度检测中的优缺点和适用范围。方法对本实验室提取的核桃蛋白进行烘烤、高温高压以及微波加热处... 目的探究间接酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)试剂盒2种方法在核桃蛋白浓度检测中的优缺点和适用范围。方法对本实验室提取的核桃蛋白进行烘烤、高温高压以及微波加热处理后,用ELISA法和BCA法2种方法分别检测其蛋白质浓度。结果在不同的热加工处理条件下, ELISA对蛋白浓度测定结果存在显著性差异,高度依赖热处理的类型。与之相比,使用BCA法测定蛋白浓度时,受到热加工处理影响较小。结果提示,在食物加工中的一些剧烈条件下,蛋白质的高级结构很容易遭到破坏,蛋白质结构的改变会干扰其与抗体结合部位的作用,导致ELISA法测定的结果不准确。BCA法测定蛋白质浓度的准确性较高,且受加热影响较小。结论 在剧烈的食品加工条件下,尤其当这种条件引起蛋白结构发生改变后,对其蛋白质浓度进行测定时,可选用BCA法进行测定。 展开更多

关键词 间接竞争elisa法 BCA试剂盒 蛋白浓度检测

原文传递

O型口蹄疫病毒血清抗体竞争ELISA检测方法的建立及验证 被引量：3

17

作者 杨志元 白满元 +4 位作者 张韵 闻晓波 孙世琪 郭慧琛 冉旭华 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第4期438-444,共7页

目的建立O型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)血清抗体的竞争ELISA检测方法,并进行验证。方法采用O型FMDV病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)作为包被抗原,建立用于检测FMDV血清抗体的竞争ELISA方法。对方法的抗原包被... 目的建立O型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)血清抗体的竞争ELISA检测方法,并进行验证。方法采用O型FMDV病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)作为包被抗原,建立用于检测FMDV血清抗体的竞争ELISA方法。对方法的抗原包被浓度(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0μg/mL)、抗原包被温度及时间(4℃过夜、37℃1 h、37℃1.5 h、37℃2 h、37℃2.5 h、37℃3 h)、血清稀释度(1∶2、1∶4、1∶8、1∶16稀释)、HRP-IgG稀释度(1∶10000~1∶20000稀释)、封闭液种类(不封闭、1%BSA封闭、2%BSA封闭、5%脱脂乳封闭)、封闭液作用时间(30、60、90、120 min)、血清与HRP-IgG作用时间(30、60、90、120、150 min)、底物TMB作用时间(10、15、20、25、30 min)进行优化。同时验证方法的交叉反应、特异性及敏感性、精密性。采用建立的方法及O型FMDV抗体液相阻断ELISA检测试剂盒分别检测未知血清背景的138份猪和牛血清,计算两者的符合率。结果方法最适检测条件为:抗原包被浓度0.5μg/mL,抗原包被温度及时间为4℃过夜,血清稀释度为1∶4;HRP-IgG稀释度为1∶18000;封闭液为1%BSA,封闭液作用时间为30 min;HRP-IgG与血清作用时间为30 min;底物作用时间为10 min。21份不同猪病的阳性血清中,除3份O型FMD阳性血清为阳性外,其他血清样品为阴性,该方法无交叉反应;敏感性为90.4%,特异性为95.7%;批内和批间精密性试验变异系数(CV)均<10%。该方法与口蹄疫O型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒检测结果的符合率为97%。结论建立的方法具有良好的特异性及精密性,且操作简便,可用于O型FMDV血清抗体的检测。 展开更多

关键词 O型口蹄疫病毒 病毒样颗粒 血清抗体 竞争elisa法

原文传递

快速检测软骨藻酸的间接ELISA方法 被引量：7

18

作者 刘淑娟 赵晓祥 +2 位作者 程金平 王茜 王文华 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期404-408,共5页

分别对抗原、一抗、二抗的最佳稀释倍数、温育温度与时间、包被条件及其显色条件进行了优化,建立了一种快速检测软骨藻酸(Domoic acid,DA)的酶联免疫分析法(ELISA).结果表明:抗原、一抗和二抗(HRP-IgG)最佳稀释度分别为1∶12800倍、1∶... 分别对抗原、一抗、二抗的最佳稀释倍数、温育温度与时间、包被条件及其显色条件进行了优化,建立了一种快速检测软骨藻酸(Domoic acid,DA)的酶联免疫分析法(ELISA).结果表明:抗原、一抗和二抗(HRP-IgG)最佳稀释度分别为1∶12800倍、1∶400倍和1∶3000倍;最佳包被条件为4℃包被12 h;抗原抗体最佳反应温度为37℃,反应时间为60 min;二抗最佳反应温度为43℃,反应时间为30 min;最佳显色条件为室温不避光显色20 min.该方法的样品加标回收率高达86.8%～103.2%,其最低检测限(LOD)为4.86 ng·mL-1,光吸收值(OD值)的变异系数(CV)在2.46%～7.08%之间. 展开更多

关键词 软骨藻酸 间接竞争elisa法 快速检测

原文传递

氟喹诺酮类药物的多残留酶免疫分析研究 被引量：12

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作者 潘孝成 祁克宗 +1 位作者 朱良强 赵瑞宏 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第11期126-129,共4页

以制备的多抗血清为基础,建立了氧氟沙星（OFL）、二氟沙星（DIF）和诺氟沙星（NOR）的多残留间接竞争酶免疫吸附测定法（Ci-ELISA法）。OFL、DIF和NOR的标准曲线的线性回归方程分别为y=-0.1984x＋0.9687（r=0.9885）、y=-0.1738x＋0.9... 以制备的多抗血清为基础,建立了氧氟沙星（OFL）、二氟沙星（DIF）和诺氟沙星（NOR）的多残留间接竞争酶免疫吸附测定法（Ci-ELISA法）。OFL、DIF和NOR的标准曲线的线性回归方程分别为y=-0.1984x＋0.9687（r=0.9885）、y=-0.1738x＋0.9150（r=0.9985）、y=-0.2004x＋0.9572（r=0.9954）;中值（IC50）分别为231.57、245.321、86.14 ng/ml;最低检测限（LOD）分别为1.62、1.861、.07 ng/ml;标准曲线在2～10000 ng/ml之间均有良好的线性关系（r≥0.9885）。方法的批内CV≤5.44%,批间CV≤12.45%。当OFL、DIF或NOR以浓度15～10000 ng/ml在牛奶中添加时,药物能较好地被回收,回收率均在71.70%～94.53%之间。 展开更多

关键词 氟喹诺酮类药物 多残留 间接竞争elisa法

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大豆皮中大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白和凝集素免疫活性的检测 被引量：3

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作者 王涛 秦贵信 +7 位作者 赵元 孙泽威 王利民 鲍男 张兵 朱丹 孙玲 王合峰 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期158-161,共4页

由于大豆皮具有多种有益的功能,因而被添加于多种动物的饲料中。国内外学者对大豆皮的研究主要集中在大豆皮的可消化性和能量价值,而对大豆皮中抗营养因子组成及含量的研究报告非常的少。本文用竞争ELISA法对大豆皮中具有免疫活性大豆... 由于大豆皮具有多种有益的功能,因而被添加于多种动物的饲料中。国内外学者对大豆皮的研究主要集中在大豆皮的可消化性和能量价值,而对大豆皮中抗营养因子组成及含量的研究报告非常的少。本文用竞争ELISA法对大豆皮中具有免疫活性大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白和凝集素的含量进行了测定,结果显示生大豆皮中具有免疫活性的大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白和凝集素的含量分别为25.3、41.4和12.2mgg-1,说明大豆皮中含有相当高水平的抗营养因子。因此,大豆皮添加到动物饲料中之前,必须经过适当的加工处理,以在最大程度上灭活其中具有免疫活性的抗营养因子,且应该注意添加量等问题。 展开更多

关键词 大豆皮 大豆球蛋白 Β-伴大豆球蛋白 凝集素 竞争elisa法

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