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大鼠过敏性休克死后血清IgE、类胰蛋白酶的变化 被引量：16
1
作者 米丽 高卫民 +3 位作者 杜中波 曹志鹏 张圆 朱宝利 《法医学杂志》 CAS CSCD 2015年第3期181-184,共4页
目的观察大鼠过敏性休克死亡后血清IgE、类胰蛋白酶的变化规律,探讨其与死亡时间(PMI)、尸体及样本保存环境的相关性。方法建立大鼠过敏性休克死亡动物模型并分组,包括室温组、冷藏组、冷冻组、人工溶血组、血清样本保存组,并设立对照... 目的观察大鼠过敏性休克死亡后血清IgE、类胰蛋白酶的变化规律,探讨其与死亡时间(PMI)、尸体及样本保存环境的相关性。方法建立大鼠过敏性休克死亡动物模型并分组,包括室温组、冷藏组、冷冻组、人工溶血组、血清样本保存组,并设立对照组。大鼠处死采血后,按离心后上层血清颜色进行溶血程度分级。通过ELISA法检测血清IgE、类胰蛋白酶在各组中的质量浓度。结果大鼠过敏性休克死亡后血清IgE、类胰蛋白酶水平明显高于对照组;室温、冷冻保存下血清IgE、类胰蛋白酶随PMI的不同有明显变化,冷藏保存下浓度相对稳定;随溶血程度的增加,血清IgE、类胰蛋白酶水平均呈升高趋势。样本不同温度条件下保存25 d,血清IgE、类胰蛋白酶无明显变化。结论大鼠过敏性休克死后血清IgE、类胰蛋白酶明显升高,但其水平受PMI、环境温度影响较大,尤其是室温或冷冻保存。 展开更多
关键词 法医病理学 过敏反应 类胰蛋白酶类 免疫球蛋白E 大鼠
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哮喘支气管黏膜中类胰蛋白酶的表达增强 被引量：6
2
作者 林小平 何韶衡 +3 位作者 赵海涛 陈萍 孙丽 冯新利 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期375-377,共3页
目的 观察含类胰蛋白酶的肥大细胞在豚鼠支气管黏膜的表达和分布特征。方法 Dunkin Hartley豚鼠随机分为哮喘组(A组)和生理盐水组(B组)。用100 mg/mL卵蛋白进行致敏,并于致敏后第5周行抗原特异性支气管激发试验。激发后2h取各组豚鼠支... 目的 观察含类胰蛋白酶的肥大细胞在豚鼠支气管黏膜的表达和分布特征。方法 Dunkin Hartley豚鼠随机分为哮喘组(A组)和生理盐水组(B组)。用100 mg/mL卵蛋白进行致敏,并于致敏后第5周行抗原特异性支气管激发试验。激发后2h取各组豚鼠支气管组织标本,免疫组化染色以抗人类胰蛋白酶(Tryptase)单克隆抗体(AA1)为一抗,过氧化物酶标记的绵羊抗鼠IgG为二抗,并用联苯二胺(Diaminobenzidine,DAB)显色。仅选择阳性染色细胞进行计数。结果 鼠抗人Tryptase单克隆抗体即可识别人支气管Tryptase又可识别豚鼠支气管Tryptase。哮喘支气管组织中Tryptase阳性细胞数明显多于正常支气管组织。相似地,支气管激发试验后的豚鼠支气管组织中的肥大细胞数要比生理盐水吸人组多出2.0倍以上。结论 抗人Tryptase单克隆抗体可以用于识别豚鼠支气管的肥大细胞。哮喘者和激发试验阳性的豚鼠支气管肺组织中的Tryptase阳性肥大细胞数明显多于正常支气管组织,表明肥大细胞在支气管哮喘发病机制中可能起重要作用。 展开更多
关键词 肥大细胞 类胰蛋白酶 哮喘 豚鼠
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凡纳滨对虾幼体胃蛋白酶和类胰蛋白酶活力的研究 被引量：20
3
作者 杨奇慧 周歧存 +1 位作者 马丽莎 迟淑艳 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期6-9,共4页
以酶学分析方法测定了凡纳滨对虾(LitopenaeusvannameiBoone)状幼体(Z2)、糠虾幼体(M2)和仔虾(P1)胃蛋白酶和类胰蛋白酶活力的变化。结果表明,在凡纳滨对虾幼体发育过程中,胃蛋白酶和类胰蛋白酶活力逐渐增大,表现为Z2<M2<P1,各期... 以酶学分析方法测定了凡纳滨对虾(LitopenaeusvannameiBoone)状幼体(Z2)、糠虾幼体(M2)和仔虾(P1)胃蛋白酶和类胰蛋白酶活力的变化。结果表明,在凡纳滨对虾幼体发育过程中,胃蛋白酶和类胰蛋白酶活力逐渐增大,表现为Z2<M2<P1,各期类胰蛋白酶的活力均比同期的胃蛋白酶活力高5倍左右,在食性转换过程中,即P1酶活力比Z2酶活力和M2酶活力显著升高(P<0.05),其中各期类胰蛋白酶活力的递增幅度均大于胃蛋白酶。说明了不同发育阶段,凡纳滨对虾胃蛋白酶和类胰蛋白酶的活力变化差异显著。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei Boone) 幼体 胃蛋白酶 类胰蛋白酶 活力
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血清总IgE、类胰蛋白酶和类糜蛋白酶在药物过敏性休克死亡鉴定中的应用 被引量：11
4
作者 王红杰 宋纬平 +8 位作者 阳宇 黄京璐 郝博 高迪 汤大为 王小广 刘水平 权力 罗斌 《法医学杂志》 CAS CSCD 2012年第3期167-171,共5页
目的探讨血清总IgE、类胰蛋白酶和类糜蛋白酶表达在药物过敏性休克死亡鉴定中的应用价值。方法分析已检测IgE水平案例中非过敏致死案例(235例)和药物过敏性休克致死案例(32例)的基本临床资料,选取非药物过敏案例中冠心病致死和青壮年猝... 目的探讨血清总IgE、类胰蛋白酶和类糜蛋白酶表达在药物过敏性休克死亡鉴定中的应用价值。方法分析已检测IgE水平案例中非过敏致死案例(235例)和药物过敏性休克致死案例(32例)的基本临床资料,选取非药物过敏案例中冠心病致死和青壮年猝死综合征致死各10例为对照组,应用免疫组织化学法对药物过敏性休克组和对照组肺和心肌组织中的类胰蛋白酶与类糜蛋白酶表达进行检测,计算阳性肥大细胞数及积分光密度值。结果药物过敏性休克组中18例(56.25%)血清总IgE值明显高于正常值上限120 IU/mL,非过敏性休克案例中67例(28.51%)高于120 IU/mL。药物过敏性休克组肺与心肌组织中的类胰蛋白酶和类糜蛋白酶的表达均升高(P<0.05)。结论在药物过敏性休克死亡案件的鉴定中,类胰蛋白酶、类糜蛋白酶的免疫组织化学检测比血清总IgE有更大的优势,更适合在实际检案中应用。 展开更多
关键词 法医病理学 过敏反应 免疫球蛋白E 类胰蛋白酶 类糜蛋白酶
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Bt抗性和敏感棉铃虫幼虫中肠类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶基因克隆及半定量测定 被引量：7
5
作者 史艳霞 张永军 +4 位作者 窦宝峰 梁革梅 高继国 吴孔明 郭予元 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期630-633,共4页
克隆了Bt-Cry1Ac抗性和敏感棉铃虫幼虫中肠类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶基因,并进行了半定量RT-PCR测定.定量结果显示,类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶在不同龄期棉铃虫中肠表达量存在差异,其中在5龄棉铃虫体内转录水平最高,3龄棉铃虫次之,而... 克隆了Bt-Cry1Ac抗性和敏感棉铃虫幼虫中肠类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶基因,并进行了半定量RT-PCR测定.定量结果显示,类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶在不同龄期棉铃虫中肠表达量存在差异,其中在5龄棉铃虫体内转录水平最高,3龄棉铃虫次之,而在4龄棉铃虫中肠内转录水平最低.此外,相同龄期的抗性品系棉铃虫体内的类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶转录水平明显高于敏感品系棉铃虫.中肠类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶的mRNA表达量的升高,可能与抗性棉铃虫对Bt杀虫蛋白的抗性演化有关. 展开更多
关键词 棉铃虫 Bt抗性 类胰蛋白酶 类胰凝乳蛋白酶
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虎纹蛙消化道肥大细胞类胰蛋白酶免疫组化研究 被引量：5
6
作者 林旋 王寿昆 +2 位作者 陈梅芳 林树根 黄玉章 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期29-34,共6页
研究采用小鼠抗人肥大细胞类胰蛋白酶单克隆抗体AA1,应用ElivisionTM plus免疫组化染色法对虎纹蛙(Rana tigrina rugulosa)消化道组织中类胰蛋白酶阳性肥大细胞存在的可能性进行研究。研究发现单克隆抗体AAl可与中性缓冲福马林液固定的... 研究采用小鼠抗人肥大细胞类胰蛋白酶单克隆抗体AA1,应用ElivisionTM plus免疫组化染色法对虎纹蛙(Rana tigrina rugulosa)消化道组织中类胰蛋白酶阳性肥大细胞存在的可能性进行研究。研究发现单克隆抗体AAl可与中性缓冲福马林液固定的虎纹蛙组织的肥大细胞获得良好的交叉反应,类胰蛋白酶阳性细胞胞浆染成棕黄色,证实虎纹蛙肥大细胞胞浆颗粒中也存在类胰蛋白酶。虎纹蛙组织中AA1免疫染色阳性细胞的分布,与AB/SO和改良甲苯胺兰染色阳性细胞的分布存在较大的差异:虎纹蛙类胰蛋白酶阳性细胞数量很少,且阳性反应比人胃癌间质肥大细胞弱,主要见于黏膜型肥大细胞(MMC)分布区域,如消化道黏膜上皮下方和固有层,少量分布于肠绒毛基底部及食管腺和胃腺周围。而在结缔组织型肥大细胞(CTMC)分布区域,如消化道黏膜下层结缔组织中却未见类胰蛋白酶阳性细胞。AB/SO和改良甲苯胺兰染色阳性细胞数量多,广泛分布于消化道黏膜固有层、黏膜下层、腺体之间、肌间及外膜结缔组织,说明并不是所有的虎纹蛙肥大细胞都含有类胰蛋白酶。很有可能是虎纹蛙MMC中含有类胰蛋白酶,而CTMC中不含类胰蛋白酶。虎纹蛙类胰蛋白酶阳性细胞数量很少,且阳性反应比人胃癌间质肥大细胞弱,说明虎纹蛙肥大细胞胞浆颗粒类胰蛋白酶含量较少,虎纹蛙属于低等脊椎动物,可能与生物进化水平较低有关,有待进一步研究。 展开更多
关键词 虎纹蛙 肥大细胞 类胰蛋白酶 免疫组化
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类胰蛋白酶与过敏性休克死亡的法医学鉴定 被引量：7
7
作者 沈忆文 陆超 +2 位作者 赵子琴 薛爱民 殷莲华 《法医学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期132-134,共3页
目的探讨类胰蛋白酶与过敏性休克的关系。方法从类胰蛋白酶的生物学特性、正常人分布、检测方法及其与过敏性休克的关系,并应用ELISA方法检测三例尸体血清类胰蛋白酶的浓度,对三例过敏性休克死亡的案例作回顾性分析。结果两例血清中类... 目的探讨类胰蛋白酶与过敏性休克的关系。方法从类胰蛋白酶的生物学特性、正常人分布、检测方法及其与过敏性休克的关系,并应用ELISA方法检测三例尸体血清类胰蛋白酶的浓度,对三例过敏性休克死亡的案例作回顾性分析。结果两例血清中类胰蛋白酶的含量分别为52ng/ml和121ng/ml(高于正常值10倍以上),另一例浓度为0.73ng/ml。结论诊断过敏性休克,类胰蛋白酶含量的检测是很有意义的,但不能单凭检测结果下结论。 展开更多
关键词 类胰蛋白酶 过敏性休克 ELISA 法医学鉴定
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豚鼠过敏性休克类胰蛋白酶活力测定 被引量：14
8
作者 郭薇 陈玉川 +1 位作者 刘水平 成建定 《法医学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期212-213,共2页
目的探索过敏性休克法医学客观诊断标准。方法建立豚鼠异种血清过敏性休克模型,采用专性底物对模型鼠的血清,肺,气管类胰蛋白酶活力进行测定。结果过敏性休克豚鼠血清,肺,气管类胰蛋白酶活力均增加,且三者增加的程度是平行的。结论过敏... 目的探索过敏性休克法医学客观诊断标准。方法建立豚鼠异种血清过敏性休克模型,采用专性底物对模型鼠的血清,肺,气管类胰蛋白酶活力进行测定。结果过敏性休克豚鼠血清,肺,气管类胰蛋白酶活力均增加,且三者增加的程度是平行的。结论过敏性休克时,血清,肺,气管类胰蛋白酶活力增加可作为法医检案客观诊断标准。 展开更多
关键词 过敏性休克 肥大细胞 类胰蛋白酶 酶活力 法医病理学
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哮喘患者血浆类胰蛋白酶、IL-8和嗜酸性粒细胞趋化因子水平与类糜蛋白酶活性测定及相关性分析 被引量：12
9
作者 谢华 何韶衡 +1 位作者 迟秀丽 陈萍 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2004年第16期1502-1505,共4页
目的 :探讨哮喘患者血浆类胰蛋白酶 (tryptase)、白介素 8(IL 8)、嗜酸性粒细胞趋化因子 (eotaxin)水平和类糜蛋白酶 (chymase)活性及相关性 .方法 :分别取健康人、哮喘急性期中度和重度患者各 30例 ,静脉抽取抗凝血 .在UniCAP1 0 0全... 目的 :探讨哮喘患者血浆类胰蛋白酶 (tryptase)、白介素 8(IL 8)、嗜酸性粒细胞趋化因子 (eotaxin)水平和类糜蛋白酶 (chymase)活性及相关性 .方法 :分别取健康人、哮喘急性期中度和重度患者各 30例 ,静脉抽取抗凝血 .在UniCAP1 0 0全自动体外变应原检测仪上进行tryptase测定 ,采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验 (SELISA)检测血浆IL 8,eotaxin水平 .Chymase活性测定 :使用琥珀酰 丙氨酸 丙氨酸 脯氨酸 苯丙氨酸 酰苯氨 (SAAPP)做为底物 ,采用酶标仪在 4 1 0nm连续监测吸光度的变化 .结果 :急性期哮喘患者血浆tryptase(2 .8μg/L)值与对照组 (1 .2 μg/L)比较明显升高 (P <0 .0 5 ) ;IL 8值 (1 4 1 .5 μg/L)显著高于对照组 (6 .5 μg/L) (P <0 .0 5 ) ;Eotaxin值 (1 5 4 .9μg/L)显著高于对照组 (4 9.9μg/L) (P <0 .0 5 ) .1 8.3%的哮喘患者血浆chymase活性[(1 0 9.9± 1 32 .0 )nkat]高于对照组 (0nkat) ,其活性可被类胰蛋白酶抑制剂SBTI和α1 AT分别抑制 87.0 %和 88.2 % .IL 8与Eotaxin之间存在弱相关性 (r=0 .4 ,P =0 .0 4 6 ) ;Tryptase ,Eotaxin ,IL 8与血涂片中的嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞之间均无明显相关性 .结论 :肥大细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及其介质均参? 展开更多
关键词 类胰蛋白酶 类糜蛋白酶 白细胞介素-8 趋化因子 嗜酸细胞 哮喘
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大豆胰蛋白酶抑制剂对南极磷虾类胰蛋白酶的抑制动力学 被引量：3
10
作者 杭虞杰 李学英 +2 位作者 杨宪时 迟海 郭全友 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期635-640,共6页
为了探讨大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)对南极磷虾(Euphausia superba)类胰蛋白酶的抑制动力学,采用邹氏不可逆抑制动力学法,测定了STI对该酶的微观速度常数。结果表明:南极磷虾类胰蛋白酶的Km和Vmax分别为0.155 mmol/L,8.44μmol/(L.min)。... 为了探讨大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)对南极磷虾(Euphausia superba)类胰蛋白酶的抑制动力学,采用邹氏不可逆抑制动力学法,测定了STI对该酶的微观速度常数。结果表明:南极磷虾类胰蛋白酶的Km和Vmax分别为0.155 mmol/L,8.44μmol/(L.min)。酶活力随着STI溶液浓度增大而减小,其IC50约为2.8μg/mL;低浓度的STI溶液对酶的抑制作用为竞争性慢可逆抑制。正向微观速度常数k+0为0.184 mmol/(L.min),逆向微观速度常数k-0为0.039 4 min-1,随着STI溶液浓度的逐渐增大,该酶最终将完全失活。本研究旨为该酶的抑制技术研究提供实验数据。 展开更多
关键词 南极磷虾 抑制动力学 大豆胰蛋白酶抑制剂 类胰蛋白酶
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针刺对佐剂性关节炎大鼠滑膜肥大细胞脱颗粒和类胰蛋白酶表达的影响 被引量：15
11
作者 何天峰 张树辉 +3 位作者 李连波 杨文佳 朱俊 陈云飞 《中西医结合学报》 CAS 2010年第7期670-677,共8页
目的:观察针刺对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织病理改变、滑膜肥大细胞脱颗粒及类胰蛋白酶表达的影响,探讨肥大细胞功能与针刺治疗大鼠佐剂性关节炎的关系。方法:46只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=16)、模型组(n=15)和针刺组(n=15)... 目的:观察针刺对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织病理改变、滑膜肥大细胞脱颗粒及类胰蛋白酶表达的影响,探讨肥大细胞功能与针刺治疗大鼠佐剂性关节炎的关系。方法:46只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=16)、模型组(n=15)和针刺组(n=15)。除正常对照组外,其余大鼠通过足垫部注射0.1mL弗氏完全佐剂建立佐剂性关节炎模型。针刺组隔天针刺双侧足三里、悬钟、肾俞穴,每次15min,共8次。治疗期间,正常对照组和模型组除不予针刺外,其余处理均同针刺组。设造模当天为实验第0天,之后每3天对大鼠的体质量和足跖体积进行测量并记录。治疗结束后,取所有大鼠右后踝关节滑膜组织,HE染色后根据滑膜病理5级评分法评价滑膜组织病理改变,甲苯胺蓝染色法观察滑膜肥大细胞数量及其脱颗粒情况,免疫组织化学法检测类胰蛋白酶在滑膜组织中的表达情况。结果:与模型组比较,针刺组大鼠治疗后体质量明显增加(P<0.05),足跖体积明显减小(P<0.01)。HE染色显示,针刺可显著减轻佐剂性关节炎大鼠滑膜组织中的炎细胞浸润、滑膜细胞增生和滑膜纤维组织增生等病理表现(P<0.05);甲苯胺蓝染色显示,与正常对照组比较,模型组大鼠滑膜肥大细胞数量和脱颗粒率均明显增加(P<0.01),而针刺组大鼠滑膜肥大细胞数量和脱颗粒率的上升得到有效抑制,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01);免疫组织化学检测显示,针刺可显著抑制佐剂性关节炎大鼠滑膜组织中上调的类胰蛋白酶表达(P<0.01)。相关分析显示,滑膜肥大细胞数量及脱颗粒率均与滑膜组织病理改变总评分呈明显的正相关(P<0.01)。结论:针刺具有治疗大鼠早期佐剂性关节炎和调节滑膜肥大细胞功能的作用,由于两者间存在明显的正相关性,因此针刺可能通过抑制滑膜肥大细胞功能,对佐剂性关节炎大鼠起治疗作用。 展开更多
关键词 针刺 肥大细胞 细胞脱颗粒 类胰蛋白酶 关节炎 实验性 大鼠
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类胰蛋白酶与2型糖尿病心肌病发病机制 被引量：5
12
作者 赵娅 刘飞 +3 位作者 古远云 李程 徐勇 万沁 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期997-1000,共4页
目的:通过研究类胰蛋白酶对2型糖尿病心肌病建模成功的Wistar大鼠的影响及可能机制,为进一步治疗糖尿病心肌病提供理论依据。方法:45只雄性Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组(NC组,15只)、2型糖尿病心肌病组(DCM组,15只)、类胰蛋白酶抑... 目的:通过研究类胰蛋白酶对2型糖尿病心肌病建模成功的Wistar大鼠的影响及可能机制,为进一步治疗糖尿病心肌病提供理论依据。方法:45只雄性Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组(NC组,15只)、2型糖尿病心肌病组(DCM组,15只)、类胰蛋白酶抑制剂组(干预组,15只)。后2组通过高脂高糖饮食加一次性腹腔注射链脲佐菌素诱导建立糖尿病心肌病大鼠模型,建模成功后,干预组每只大鼠给予0.025%的酮替芬溶液1 mg/kg腹膜腔内注射,2次/d,连续注射8周,NC和DCM两组给予等体积的生理盐水。实验结束后处死全部大鼠,称取体质量、全心重、左心室重量,测定全心指数和左心室重量指数,在光镜下对各组心肌组织进行观察分析,用ELISA检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α),采用Western blot方法测定各组大鼠左心室心肌组织类胰蛋白酶蛋白表达量。结果:全心指数和左心室重量指数:DCM组全心指数及左心室重量指数明显高于NC组(P<0.05),干预组全心指数及左心室重量指数低于DCM组(P<0.05)。常规HE染色结果显示:与NC组比较,DCM组心肌组织病理变化可见明显的心肌纤维排列紊乱、断裂,心肌细胞肥大,细胞核边缘不清;干预组心肌细胞体积较DCM组有不同程度的缩小,心肌细胞排列规则,断裂现象少见,细胞核大小尚均一。大鼠血清TNF-α水平:DCM组显著高于NC组(P<0.05),干预组低于DCM组(P<0.05)。类胰蛋白酶相对灰度值比较:DCM组高于NC组(P<0.05),干预组低于DCM组(P<0.05)。结论:2型糖尿病大鼠心肌组织存在类胰蛋白酶的表达增强,经类胰蛋白酶抑制剂干预后糖尿病心肌病大鼠模型心肌病理改变减轻,类胰蛋白酶的表达降低。类胰蛋白酶表达的增强可能参与糖尿病心肌病的发生。 展开更多
关键词 糖尿病心肌病 类胰蛋白酶 酮替芬
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类胰蛋白酶阳性肥大细胞在大鼠马兜铃酸肾病模型中的分布及意义 被引量：4
13
作者 左巍 刘亚革 +2 位作者 冯江敏 郑红光 王承利 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期351-352,共2页
关键词 马兜铃 马兜铃酸肾病 肥大细胞 类胰蛋白酶
原文传递
蛋白酶抑制剂对肥大细胞类胰蛋白酶分泌的影响 被引量：18
14
作者 谢华 何韶衡 郑坚 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期284-287,共4页
目的　探讨蛋白酶抑制剂和组胺对肥大细胞类胰蛋白酶分泌的影响。方法　扁桃体组织经酶消化后 ,细胞成份用全HBSS重新悬浮。肥大细胞激发和抑制剂作用的试验在 37℃条件下完成。类胰蛋白酶水平用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定。结果... 目的　探讨蛋白酶抑制剂和组胺对肥大细胞类胰蛋白酶分泌的影响。方法　扁桃体组织经酶消化后 ,细胞成份用全HBSS重新悬浮。肥大细胞激发和抑制剂作用的试验在 37℃条件下完成。类胰蛋白酶水平用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定。结果　鱼精蛋白具有刺激人类扁桃体肥大细胞释放类胰蛋白酶的作用 ,其分泌量可高达基础分泌量的5倍。高浓度TLCK和TPCK可抑制抗 IgE诱导的类胰蛋白酶释放。TLCK在有否预培养的情况下均能抑制钙离子导入剂 (cal ciumionophore ,CI)诱导的类胰蛋白酶释放 ,而TPCK则只有在 2 0min预培养后才能显示此作用。结论　TLCK和TPCK抑制IgE依赖性和非依赖性类胰蛋白酶释放提示具有胰蛋白酶和糜蛋白酶活性的酶参与肥大细胞的激活 分泌偶联过程。 展开更多
关键词 肥大细胞 类胰蛋白酶 蛋白酶抑制剂 组胺 激活-分泌偶联
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玉屏风散对变应性鼻炎肥大细胞释放类胰蛋白酶影响的实验研究 被引量：8
15
作者 张仲林 钟玲 +1 位作者 臧志和 辛志伟 《中国医药导报》 CAS 2009年第4期13-14,共2页
目的:探讨玉屏风散对变应性鼻炎肥大细胞释放类胰蛋白酶的作用。方法:采用血清药理学和体外细胞培养的方法,研究玉屏风散含药血清体外对变应性鼻炎动物模型中腹腔肥大细胞(RPMC)释放类胰蛋白酶的影响。结果:与空白血清组比较,玉屏风散... 目的:探讨玉屏风散对变应性鼻炎肥大细胞释放类胰蛋白酶的作用。方法:采用血清药理学和体外细胞培养的方法,研究玉屏风散含药血清体外对变应性鼻炎动物模型中腹腔肥大细胞(RPMC)释放类胰蛋白酶的影响。结果:与空白血清组比较,玉屏风散血清组RPMC释放类胰蛋白酶的量明显降低。结论:玉屏风散体外可抑制变应性鼻炎RPMC脱颗粒释放类胰蛋白酶,可能是该方通过稳定肥大细胞用于治疗变应性鼻炎的相关机制之一。 展开更多
关键词 玉屏风散 变应性鼻炎 类胰蛋白酶 实验研究
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类胰蛋白酶抑制剂对人大肠肥大细胞组胺释放的影响 被引量：5
16
作者 谢华 何韶衡 +1 位作者 程明华 傅意玲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期678-681,共4页
目的 :研究类胰蛋白酶抑制剂 (TPI)对人大肠肥大细胞释放组胺的影响。方法 :大肠组织经胶原酶和透明质酸酶消化后 ,将细胞成分用全HBSS重新悬浮。肥大细胞在LP4试管中于37℃条件下与各种刺激剂反应 15min而完成激发过程。激发液中的组... 目的 :研究类胰蛋白酶抑制剂 (TPI)对人大肠肥大细胞释放组胺的影响。方法 :大肠组织经胶原酶和透明质酸酶消化后 ,将细胞成分用全HBSS重新悬浮。肥大细胞在LP4试管中于37℃条件下与各种刺激剂反应 15min而完成激发过程。激发液中的组胺水平用以玻璃纤维为基础的荧光方法测定。结果 :4种TPI中 ,高浓度的亮抑酶肽素和鱼精蛋白可刺激人大肠肥大细胞释放组胺 ;而TLCK和乳铁蛋白则无明显的刺激作用。 4种TPI均可以剂量依赖的方式抑制抗IgE抗体诱导的大肠肥大细胞释放组胺。最大浓度的亮抑酶肽素(2 0 0mmol/L)、TLCK(10 0mmol/L)、乳铁蛋白 (30mmol/L)和鱼精蛋白 (10 0mg/L) ,可分别抑制 4 8.7%、36 .7%、4 0 .2 %和 34.1%的组胺释放。在 37℃条件下 ,将 4种TPI同大肠肥大细胞预培养 2 0min ,与未进行预培养相比较 ,它们对抗IgE抗体诱导的组胺释放无明显改变。 4种TPI还可抑制CI诱导的组胺释放 ,抑制范围在 2 5 %～ 32 %之间。与抗IgE抗体诱导的组胺释放则不同 ,与大肠肥大细胞预培养 2 0min ,与未进行预培养相比较 ,亮抑酶肽素和TLCK对CI诱导的组胺释放的抑制作用明显增强 ;而鱼精蛋白则无此作用。结论 :我们首次发现TPI可抑制人大肠肥大细胞IgE抗体依赖和非IgE抗体依赖的组胺释放 。 展开更多
关键词 类胰蛋白酶抑制剂 肥大细胞 组胺
原文传递
绵羊肥大细胞中类胰蛋白酶的证实 被引量：27
17
作者 江萍 许乐仁 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期92-95,共4页
用甲苯胺蓝和阿尔辛蓝常规组织化学方法及特异性酶底物（Ｚ－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－ＭＮＡ）鉴定人肥大细胞类胰蛋白酶的酶组织化学技术，采用小鼠抗人肥大细胞类胰蛋白酶单克隆抗体（ＡＡ１，ＡＡ３和ＡＡ５）通过间接免疫过氧化物... 用甲苯胺蓝和阿尔辛蓝常规组织化学方法及特异性酶底物（Ｚ－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－ＭＮＡ）鉴定人肥大细胞类胰蛋白酶的酶组织化学技术，采用小鼠抗人肥大细胞类胰蛋白酶单克隆抗体（ＡＡ１，ＡＡ３和ＡＡ５）通过间接免疫过氧化物酶技术对绵羊肥大细胞的组织化学特性进行研究，酶组织化学技术及免疫组织化学技术均首次证实了绵羊肥大细胞颗粒中含有类胰蛋白酶，且该酶可作为绵羊肥大细胞的特异性标志。对于绵羊肥大细胞的常规组织化学染色，Ｃａｒｎｏｙ液及中性缓冲福尔马林均为良好的固定液，而甲苯胺蓝及阿尔辛蓝均为优良的染料。 展开更多
关键词 肥大细胞 类胰蛋白酶 组织化学 绵羊
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棉铃虫中肠类胰蛋白酶的部分纯化和性质测定及其对苏云金杆菌δ-内毒素的降解作用 被引量：8
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作者 张继红 王琛柱 钦俊德 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期282-289,共8页
将棉铃虫Helicoverpaarmigera中肠液经SephadexG 75、DEAE SephadexA 50阴离子交换和CM SephadexC 50阳离子交换柱层析进行分离纯化 ,得到部分纯化的 2 4 5kD蛋白。该蛋白可以水解胰蛋白酶的专性底物BApNA和TAME ,不能水解胰凝乳蛋白... 将棉铃虫Helicoverpaarmigera中肠液经SephadexG 75、DEAE SephadexA 50阴离子交换和CM SephadexC 50阳离子交换柱层析进行分离纯化 ,得到部分纯化的 2 4 5kD蛋白。该蛋白可以水解胰蛋白酶的专性底物BApNA和TAME ,不能水解胰凝乳蛋白酶的专性底物BTEE。蛋白酶抑制剂的抑制试验显示 ,TLCK、PMSF、STI及SBBI均可显著抑制该蛋白对BApNA的水解作用 ,而TPCK无抑制作用。由此推断 ,2 4 5kD蛋白是棉铃虫的类胰蛋白酶。以BApNA为底物 ,类胰蛋白酶的最适pH为 10 5～ 11 0。SephadexG 75分离得到了 4个洗脱峰 ,电泳结果显示 ,各洗脱峰均能使苏云金杆菌库斯塔克变种Bacillusthuringiensisvar.kurstakiHD 1原毒素降解为 60 5kD的活力片段。峰Ⅳ虽然不能水解BApNA和TAME ,但仍可对原毒素进行降解。而类胰蛋白酶活力最高的峰Ⅱ已将 60 5kD蛋白完全降解 ,当减小用量至 1 3时 ,才出现 60 5kD蛋白。因此 ,苏云金杆菌δ 内毒素在棉铃虫中肠内的降解有多种蛋白酶参与 ,类胰蛋白酶在其中起重要作用。CM SephadexC 50进一步分离得到的类胰蛋白酶可对原毒素进行降解 ,其降解作用受到TLCK、PMSF、STI及SBBI的显著抑制 。 展开更多
关键词 棉铃虫 类胰蛋白酶 苏云金杆菌 降解 δ-内毒素
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人肥大细胞的IgE依赖性组胺和类胰蛋白酶分泌 被引量：5
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作者 何韶衡 何永松 谢华 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期353-356,共4页
目的　利用人结肠组织的肥大细胞和肥大细胞激活的体外研究系统评价人肥大细胞释放类胰蛋白酶和组胺的能力及其机制。方法　经酶悬浮的人结肠肥大细胞与抗IgE抗体共同培养后记录浓度相关曲线和时间关系曲线。类胰蛋白酶用酶联免疫吸附... 目的　利用人结肠组织的肥大细胞和肥大细胞激活的体外研究系统评价人肥大细胞释放类胰蛋白酶和组胺的能力及其机制。方法　经酶悬浮的人结肠肥大细胞与抗IgE抗体共同培养后记录浓度相关曲线和时间关系曲线。类胰蛋白酶用酶联免疫吸附试验的方法测量 ,而组胺则由一种以玻璃纤维为基础的荧光比色法测量。结果　抗IgE抗体可引起浓度相关性的组胺和类胰蛋白酶释放 ,最大组胺和类胰蛋白酶分泌量分别比基础分泌量超出 2 .7和 2 .5倍以上。抗IgE抗体的作用从加样后 10s开始 ,6min后达高峰并至少持续 15min。百日咳毒素和代谢抑制剂能够分别抑制抗IgE抗体引起的组胺和类胰蛋白酶释放。百日咳毒素还能够减少自发性类胰蛋白酶释放。结论　人结肠肥大细胞在受到抗IgE抗体刺激时具有平行释放类胰蛋白酶和组胺的能力 ,这个过程与肥大细胞膜G蛋白偶联受体的激活有关 ,并消耗能量。肥大细胞自发性释放组胺和类胰蛋白酶的功能可能是通过不同的机制实现的。 展开更多
关键词 组胺 类胰蛋白酶 肥大细胞 IGE
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蛋白酶激活受体2(PAR-2)激动剂对肥大细胞释放类胰蛋白酶的影响 被引量：12
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作者 何韶衡 谢华 何永松 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期531-534,共4页
研究反肉桂酰 亮 异亮 甘 精 亮 鸟 [酰胺 ](tc LIGRLO) ,一种PAR 2激动剂 ,对肥大细胞类胰蛋白酶释放的影响。结果显示 ,经过 15min的培养 ,tc LIGRLO可引起比基础分泌量增加 1倍以上的类胰蛋白酶释放 ,作用强度超过抗IgE抗体和钙... 研究反肉桂酰 亮 异亮 甘 精 亮 鸟 [酰胺 ](tc LIGRLO) ,一种PAR 2激动剂 ,对肥大细胞类胰蛋白酶释放的影响。结果显示 ,经过 15min的培养 ,tc LIGRLO可引起比基础分泌量增加 1倍以上的类胰蛋白酶释放 ,作用强度超过抗IgE抗体和钙离子导入剂 (calciumionophoreA2 3 187,CI)。而反PAR 2激动剂 反肉桂酰 鸟 亮 精 甘 异亮 亮 [酰胺 ](tc OLRGIL)无此作用。培养时间延长到 3 0min时对tc LIGRLO的作用无明显影响。其时间关系曲线表明 ,tc LIGRLO的作用从 1min开始 ,3min后达高峰。结果表明 ,PAR 2激动剂tc LIGR LO是一种高效类胰蛋白酶释放刺激剂 ,在肥大细胞上可能有PAR 展开更多
关键词 蛋白酶激活受体2 PAR-2 激动剂 肥大细胞 释放类胰蛋白酶
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