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黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子基因启动子甲基化特异性PCR法的建立与初步应用 被引量：1
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作者 钱震 林江 +5 位作者 钱军 姚冬明 王雅丽 韩兰秀 朱照辉 肖高飞 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期408-410,共3页
目的建立甲基化特异性PCR(MSP)技术检测黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子(GRAF)基因启动子甲基化。方法设计针对GRAF基因启动子的MSP引物,建立MSP检测体系,对不同DNA模板进行检测,评价方法的特异性、重复性和灵敏度;对10例急性髓... 目的建立甲基化特异性PCR(MSP)技术检测黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子(GRAF)基因启动子甲基化。方法设计针对GRAF基因启动子的MSP引物,建立MSP检测体系,对不同DNA模板进行检测,评价方法的特异性、重复性和灵敏度;对10例急性髓系白血病(AML)标本进行检测。结果建立的MSP方法仅能扩增出甲基化阳性模板,不能扩增出未甲基化阳性模板和未硫化处理的DNA模板;检测不同稀释度的甲基化阳性模板,其最大灵敏度可达2%;在不同时间进行MSP检测的结果均一致;对10例AML患者的初步检测发现7例存在着GRAF基因启动子甲基化。结论成功建立了检测GRAF基因启动子甲基化的MSP方法,有良好的特异性、灵敏度和重复性,可用于临床AML标本的批量检测。 展开更多
关键词 黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子 甲基化特异性PCR 甲基化
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EvaGreen实时定量PCR检测急性髓系白血病GRAF基因表达 被引量：1
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作者 钱震 林江 +5 位作者 钱军 姚冬明 王雅丽 韩兰秀 朱照辉 肖高飞 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期290-293,共4页
目的 研究急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）中粘着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子（GTPase regulator associated with the focal adhesion kinase,GRAF）基因的表达及其临床意义.方法 建立EvaGreen染料法实时定量聚合... 目的 研究急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）中粘着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子（GTPase regulator associated with the focal adhesion kinase,GRAF）基因的表达及其临床意义.方法 建立EvaGreen染料法实时定量聚合酶链反应（real-time quantitative PCR,RQ-PCR）,对71例AML患者和21例良性血液病患者中GRAF转录本水平进行检测,分析其临床相关性.结果 所建立的EvaGreen RQ-PCR方法具有良好的特异性、重复性,敏感度达102拷贝/μL.AML患者中GRAF转录本水平（0.01%～169.75%,中位3.82%）较对照组（14.49%～126.85%,中位56.04%）显著降低（P〈0.05）,GRAF基因表达量与患者性别、年龄、外周血白细胞计数、血红蛋白、血小板计数、FAB亚型、染色体核型分组均无相关性（P〉0.05）.结论 AML患者中GRAF基因表达下调,可能与其发病有关. 展开更多
关键词 粘着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子 急性髓系白血病 EvaGreen染料 实时定量聚合酶链反应
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