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O⁃GlcNAc糖基化修饰在免疫系统中的作用
1
作者 薛俊杰 孙慧 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期474-483,共10页
O-GlcNAc糖基化修饰是一种广泛存在于细胞内蛋白质上的翻译后修饰,与一般的蛋白质糖基化修饰不同,催化该修饰的O-GlcNAc糖基转移酶将GlcNAc糖单元添加在蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上后便不再延伸。自被发现以来,已有大量研究表明,O-Glc... O-GlcNAc糖基化修饰是一种广泛存在于细胞内蛋白质上的翻译后修饰,与一般的蛋白质糖基化修饰不同,催化该修饰的O-GlcNAc糖基转移酶将GlcNAc糖单元添加在蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上后便不再延伸。自被发现以来,已有大量研究表明,O-GlcNAc糖基化修饰广泛参与了细胞生长发育、基因转录调控、免疫反应和应激反应等诸多基础性的生理过程。在免疫系统中,O-GlcNAc糖基化修饰通过多种途径调控免疫细胞的活化、分化以及功能发挥。巨噬细胞的分化与表型维持依赖O-GlcNAc糖基化修饰的稳态,葡萄糖代谢水平的改变或OGT的缺失都会导致巨噬细胞极化发生转变。此外,O-GlcNAc糖基化修饰通过改变NF-κB等转录因子的活性调节细胞因子的转录维持巨噬细胞炎性,亦可影响MAVS蛋白泛素化以响应病原体感染。在其他先天性免疫细胞中,O-GlcNAc糖基化修饰水平的降低都会不同程度地影响细胞免疫功能。T细胞和B细胞中的NF-κB、NFAT和c-Myc等转录因子上均受到该修饰的调控,从而影响细胞因子与代谢相关基因的表达,并伴随着较高水平的葡萄糖摄入和O-GlcNAc糖基化修饰,以满足细胞活化与增殖。O-GlcNAc糖基化修饰在免疫系统中的异常变化与慢性炎症、肿瘤等相关疾病的发生发展密切相关,或成为肿瘤免疫逃逸的手段。深入了解O-GlcNAc糖基化修饰在免疫系统中的作用,将有助于揭示免疫调控的分子机制,为新型免疫治疗策略的开发提供理论基础。 展开更多
关键词 O-GlcNAc糖基化修饰 O-GlcNAc糖基转移酶 免疫细胞 炎症反应 肿瘤逃逸
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靶向编辑O⁃GlcNAc糖基化修饰的化学生物学技术
2
作者 潘雅文 王贞超 沈大成 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期453-462,共10页
糖基化修饰是最丰富和最复杂的蛋白质翻译后修饰之一。其中,氧连-N-乙酰氨基葡萄糖基化修饰(O-GlcNAcylation)作为广泛存在于真核细胞质或线粒体的蛋白质糖修饰,影响了蛋白质性质、细胞功能和疾病状态等方面,因此,在活细胞中的靶蛋白质... 糖基化修饰是最丰富和最复杂的蛋白质翻译后修饰之一。其中,氧连-N-乙酰氨基葡萄糖基化修饰(O-GlcNAcylation)作为广泛存在于真核细胞质或线粒体的蛋白质糖修饰,影响了蛋白质性质、细胞功能和疾病状态等方面,因此,在活细胞中的靶蛋白质上进行编辑O-GlcNAc糖基化对于与其相关的功能调控至关重要。这些在细胞靶蛋白质上操控O-GlcNAc糖基化修饰的新技术,将在很大程度上加速O-GlcNAc功能研究的发展。本文简要介绍了近年来靶向编辑O-GlcNAc糖基化修饰化学生物学技术的研究进展,讨论了目前可用的O-GlcNAc编辑策略并进行了分析,展望了相关技术的未来发展前景。这些技术组成了一个强大的化学生物学工具箱,并有望用于与O-GlcNAc糖基化相关疾病的诊断与治疗。 展开更多
关键词 O-GLCNAC 糖基化修饰 靶向编辑 化学生物学
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O-GlcNAc糖基化修饰在恶性肿瘤中作用的研究进展
3
作者 彭佳欣 张自辉 +1 位作者 刘婧纯 洪莉 《山东医药》 CAS 2024年第13期98-102,共5页
O连接N-乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)糖基化修饰是一种动态可逆的蛋白质翻译后单糖修饰,通过β-糖苷键将GlcNAc连接到蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上,对维持正常的细胞功能至关重要。近年研究发现,在结肠癌、肝癌、宫颈癌、乳腺癌等实体肿瘤... O连接N-乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)糖基化修饰是一种动态可逆的蛋白质翻译后单糖修饰,通过β-糖苷键将GlcNAc连接到蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上,对维持正常的细胞功能至关重要。近年研究发现,在结肠癌、肝癌、宫颈癌、乳腺癌等实体肿瘤中O-GlcNAc糖基化修饰异常。O-GlcNAc糖基化修饰异常是肿瘤细胞的重要特征之一,不仅能促进肿瘤细胞恶性增殖、侵袭、迁移以及血管生成和免疫逃逸,增强干细胞特性和耐药性,还能干扰细胞内葡萄糖、脂质和氨基酸代谢。但目前O-GlcNAc糖基化修饰在恶性肿瘤中的确切作用机制尚不完全清楚,还有待于进一步研究。 展开更多
关键词 恶性肿瘤 蛋白质翻译后修饰 糖基化修饰 O连接N-乙酰氨基葡萄糖
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O-GlcNAc糖基化修饰的研究进展
4
作者 王梦荷 郑路 +1 位作者 孟领航 王佳佳 《聊城大学学报（自然科学版）》 2024年第1期92-101,共10页
蛋白质的N-乙酰氨基葡萄糖(O-linked-N-acetylglucosamine,GlcNAc)修饰是一种广泛存在于真核细胞内的O-连接的单糖修饰,其通过β-糖苷键将GlcNAc与细胞质或核蛋白上的丝氨酸或苏氨酸残基结合。O-GlcNAc糖基化修饰可以调控基因的表达、... 蛋白质的N-乙酰氨基葡萄糖(O-linked-N-acetylglucosamine,GlcNAc)修饰是一种广泛存在于真核细胞内的O-连接的单糖修饰,其通过β-糖苷键将GlcNAc与细胞质或核蛋白上的丝氨酸或苏氨酸残基结合。O-GlcNAc糖基化修饰可以调控基因的表达、调节信号转导、参与免疫保护和细胞代谢等生理过程,其异常表达与某些疾病相关,如糖尿病、癌症、心血管和神经退行性疾病等,明确蛋白质的糖基化修饰位点对阐明疾病的发生具有重要意义。由于O-GlcNAc修饰是一种动态、化学计量的修饰,质谱检测信号响应低,导致位点鉴定困难。本文将基于O-GlcNAc的生物学功能,对O-GlcNAc糖蛋白的富集方法进行归纳总结,为未来O-GlcNAc相关研究提供思路。 展开更多
关键词 O-GlcNAc糖基化修饰 分子探针 代谢标记
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唾液酸糖表位类人源化N-糖基化修饰治疗性重组蛋白的研究进展
5
作者 李威 付达 +4 位作者 陆龙臻 包紫鑫 吴琼 胡学军 丁宁 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期40-47,共8页
唾液酸化N-糖基化修饰重组蛋白能提高治疗性蛋白的理化性质,如延长半衰期、增强组织穿透性以及抑制炎症反应等。但迄今为止糖蛋白的N-糖基化修饰效率和唾液酸化效率都很难达到100%,这导致了唾液酸修饰糖基化重组蛋白的均质化、规模化生... 唾液酸化N-糖基化修饰重组蛋白能提高治疗性蛋白的理化性质,如延长半衰期、增强组织穿透性以及抑制炎症反应等。但迄今为止糖蛋白的N-糖基化修饰效率和唾液酸化效率都很难达到100%,这导致了唾液酸修饰糖基化重组蛋白的均质化、规模化生产非常困难。因而提高类人源化N-糖基化修饰治疗性重组蛋白的均质性仍是目前糖蛋白药物研发任务之一。该文围绕提高唾液酸糖表位N-糖基化修饰治疗性重组蛋白效率的方法及均质化类人源化唾液酸糖表位治疗性重组蛋白的生产途径展开综述。 展开更多
关键词 N-糖基化修饰 唾液酸糖表位 大肠杆菌 重组蛋白
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IgG N-糖基化修饰在糖尿病视网膜病变中作用的研究进展
6
作者 张艺馨 蔡善君 +2 位作者 李智立 于伟泓 张华 《基础医学与临床》 2023年第3期509-513,共5页
糖尿病视网膜病变(DR)是免疫炎性疾病,免疫球蛋白G(IgG) N-糖基化修饰与DR密切相关。其中,IgG的半乳糖基化修饰、岩藻糖基化修饰、唾液酸化和平分型N-乙酰葡糖胺修饰发生变化,导致机体处于促炎状态,诱导视网膜发生病变。
关键词 糖尿病视网膜病变 免疫球蛋白G 糖基化修饰
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蛋白质O-GlcNAc糖基化修饰对tau蛋白磷酸化修饰的影响 被引量：10
7
作者 钱慰 刘飞 +2 位作者 朱俐 龚成新 金淑仪 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第4期623-628,共6页
蛋白质的O位N 乙酰葡萄糖胺 (O GlcNAc)糖基化修饰是一种新近发现的广泛存在于细胞核蛋白与细胞浆蛋白的蛋白质翻译后修饰 .其性质与经典的膜蛋白和分泌蛋白的糖基化修饰不同 ,而与蛋白质磷酸化修饰更相似 .O GlcNAc糖基化和磷酸化均修... 蛋白质的O位N 乙酰葡萄糖胺 (O GlcNAc)糖基化修饰是一种新近发现的广泛存在于细胞核蛋白与细胞浆蛋白的蛋白质翻译后修饰 .其性质与经典的膜蛋白和分泌蛋白的糖基化修饰不同 ,而与蛋白质磷酸化修饰更相似 .O GlcNAc糖基化和磷酸化均修饰tau蛋白的丝氨酸和苏氨酸残基 ,通过改变O GlcNAc糖基化供体底物浓度以及其关键酶活性等方法 ,改变分化后成神经细胞样的PC12细胞中的蛋白质O GlcNAc糖基化修饰水平 ,然后用特异性识别不同位点磷酸化的tau蛋白抗体 ,进行蛋白质印迹分析来检测tau蛋白磷酸化水平的变化 .结果发现细胞内蛋白质O GlcNAc糖基化对tau蛋白磷酸化的影响 ,在不同的磷酸化位点其影响不同 .增加蛋白质O GlcNAc糖基化修饰导致tau蛋白大多数磷酸位点的磷酸化水平降低 ,反之亦然 .这些结果说明 ,tau磷酸化在大多数位点受到O GlcNAc糖基化修饰的负性调节 . 展开更多
关键词 蛋白质 糖基化修饰 TAU蛋白 磷酸化修饰
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洗心汤对散发性老年性痴呆大鼠脑内tau蛋白O-GlcNAc糖基化修饰的影响 被引量：13
8
作者 第五永长 田金洲 时晶 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1620-1625,共6页
目的研究洗心汤(人参、半夏、茯神、附子、菖蒲)对散发性老年性痴呆模型大鼠脑组织tau蛋白O位N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)糖基化修饰水平的影响。方法 SPF级健康雄性SD大鼠侧脑室注射链脲佐菌素(ICV-STZ),随机分为模型组、多奈哌齐对照组... 目的研究洗心汤(人参、半夏、茯神、附子、菖蒲)对散发性老年性痴呆模型大鼠脑组织tau蛋白O位N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)糖基化修饰水平的影响。方法 SPF级健康雄性SD大鼠侧脑室注射链脲佐菌素(ICV-STZ),随机分为模型组、多奈哌齐对照组、洗心汤小、中、大剂量组并设假手术组作为对照。治疗结束及行为学测试之后,以免疫组化及蛋白印迹方法检测大鼠脑组织tau蛋白O-GlcNAc糖基化修饰水平。结果洗心汤能明显提高散发性老年性痴呆大鼠海马组织以琥珀酸化凝集素富集的O-GlcNAc糖基化蛋白质以及用RL2、CTD110.6检测的O-GlcNAc糖基化tau蛋白表达,组间差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。多奈哌齐对照组与散发性老年性痴呆模型组相比则无显著性差异(P>0.05)。结论洗心汤能够明显提高散发性老年性痴呆大鼠海马组织tau蛋白O-GlcNAc糖基化修饰水平,从而可能起到抑制tau蛋白在重要位点的过度磷酸化及其tau毒性,防止散发性老年性痴呆病理进展的作用。 展开更多
关键词 散发性老年性痴呆 洗心汤 侧脑室注射链脲佐菌素模型 TAU蛋白 O-GlcNAc糖基化修饰
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基于质谱技术的贝伐珠单抗及其糖基化修饰的表征、定量与药代动力学分析 被引量：4
9
作者 丛宇婷 胡良海 +2 位作者 叶明亮 顾景凯 邹汉法 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1678-1685,共8页
利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术以及Shot-gun蛋白质组学策略对贝伐珠单克隆抗体药物及其糖基化修饰进行了全面表征,共发现17种糖型并确定了特征肽段序列。利用液相色谱-串联质谱联用技术,采用... 利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术以及Shot-gun蛋白质组学策略对贝伐珠单克隆抗体药物及其糖基化修饰进行了全面表征,共发现17种糖型并确定了特征肽段序列。利用液相色谱-串联质谱联用技术,采用平行反应检测模式,通过测定单抗水解后产生的特征肽段,实现了对大鼠血浆样品中单抗药物含量的绝对定量分析,获得不同给药计量下的贝伐珠单抗的药物浓度-时间曲线,同时实现了对单抗糖基化修饰各糖型的相对定量分析。本实验首先建立标准工作曲线,对大鼠血浆样品中的贝伐珠单抗进行定量分析,在线性范围内,相关系数R2=0.998,定量限为66 fmol,线性关系良好。对大鼠血浆样品的测定结果表明,高、低计量给药的贝伐珠单抗药物浓度-时间曲线趋势基本一致,浓度均为直接下降,与理论趋势相符。但是大多数糖型呈现浓度先上升的现象,之后的代谢情况因糖型差异而有所不同。 展开更多
关键词 贝伐珠单抗 糖基化修饰 液相色谱-串联质谱联用 平行反应监测 药代动力学
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病毒与宿主细胞的糖基化修饰及相关功能 被引量：8
10
作者 向田 章晓联 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第10期898-907,共10页
病毒的复制和对宿主的入侵与自身结构蛋白的糖基化修饰密切相关.对于宿主而言,在病毒感染宿主和宿主抗病毒的过程中,宿主的糖基化过程一方面可抑制病毒的复制和入侵,另一方面可促进病毒对宿主的感染,抑制宿主糖苷酶可抑制病毒的复制.从... 病毒的复制和对宿主的入侵与自身结构蛋白的糖基化修饰密切相关.对于宿主而言,在病毒感染宿主和宿主抗病毒的过程中,宿主的糖基化过程一方面可抑制病毒的复制和入侵,另一方面可促进病毒对宿主的感染,抑制宿主糖苷酶可抑制病毒的复制.从病毒方面来看,由于病毒自身缺乏糖基化修饰系统,病毒的糖基化过程是借宿主细胞内的合成系统对自身进行糖基化修饰.病毒的糖基化过程对病毒蛋白的折叠与稳定、病毒的感染和入侵、参与识别宿主细胞受体和参与病毒的免疫逃逸等过程起着重要的作用.随着糖基化研究技术的发展,以糖基化为基础的功能应用也越来越深入:如新型病毒疫苗和新型抗病毒药物的研制,以糖蛋白质组学研究为基础的质谱技术和生物信息学方法的发展,以及利用糖基化对病毒性疾病的诊断和治疗等,这些均为糖基化深入研究发展奠定了基础.本文就病毒与宿主细胞糖基化过程、相关功能以及研究应用等进展作一综述. 展开更多
关键词 糖基化修饰 病毒 宿主
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单克隆抗体药物糖基化修饰分析研究进展 被引量：5
11
作者 丛宇婷 胡良海 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1186-1191,共6页
单克隆抗体药物是一类以免疫球蛋白G的结构为基础的大分子糖蛋白药物,为癌症、自身免疫疾病以及病毒感染等多种疾病的治疗提供了全新的途径。单抗药物的糖基化修饰类型及水平对其稳定性、清除率、免疫原性、抗体依赖细胞毒性及补体依赖... 单克隆抗体药物是一类以免疫球蛋白G的结构为基础的大分子糖蛋白药物,为癌症、自身免疫疾病以及病毒感染等多种疾病的治疗提供了全新的途径。单抗药物的糖基化修饰类型及水平对其稳定性、清除率、免疫原性、抗体依赖细胞毒性及补体依赖细胞毒性等都有一定的影响。单抗药物的迅速发展及其在多种疾病治疗中日益凸显的重要性都对单抗药物的研发及用药安全等方面提出了更高的要求。因此,建立规范可靠的单抗药物糖基化修饰分析方法有着十分重要的意义。该综述将简要介绍单克隆抗体药物糖基化修饰及相关的定性、定量分析方法。 展开更多
关键词 单克隆抗体药物 糖基化修饰 质谱 蛋白质组学 综述
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糖基化修饰后人血小板形态、超微结构及功能的研究 被引量：2
12
作者 郭永 韩颖 +2 位作者 权国波 刘敏霞 刘安 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期411-415,共5页
经糖基化修饰可使4℃保存的血小板在输入体内后延长其存活。本研究探讨尿苷二磷酸半乳糖(UDP-Gal)糖基化修饰对血小板形态、结构、功能以及其膜糖蛋白的影响。实验分为室温对照组、冷藏对照组和修饰组。用荧光标记的特异凝集素(FITC-RCA... 经糖基化修饰可使4℃保存的血小板在输入体内后延长其存活。本研究探讨尿苷二磷酸半乳糖(UDP-Gal)糖基化修饰对血小板形态、结构、功能以及其膜糖蛋白的影响。实验分为室温对照组、冷藏对照组和修饰组。用荧光标记的特异凝集素(FITC-RCAⅠ)检测膜糖蛋白糖残基变化,用扫描、透射电镜观察修饰后血小板形态和超微结构的变化,用比浊法测定血小板聚集率,用流式细胞术检测血小板膜蛋白CD42b、膜表面标志CD62P以及血小板凋亡标志annexin Ⅴ结合率。结果表明,UDP-Gal修饰组RCAⅠ结合率显著高于室温对照组和冷藏对照组(p<0.01);与新鲜血小板相比,UDP-Gal处理后的血小板超微结构无明显变化,而冷藏对照组则有伪足延伸等形态学改变;修饰后最大聚集率可达新鲜血小板的50%以上;血小板膜蛋白CD42b、膜表面标志CD62P及annexin Ⅴ结合率与室温对照组相比均无明显差异。结论:UDP-Gal可使β-半乳糖有效地结合于链聚糖末端,糖基化血小板仍然具有较强的聚集活性和相对完整的超微结构,功能基本正常。 展开更多
关键词 血小板 糖基化修饰 超微结构 功能评价
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糖基化修饰对大米蛋白功能性质影响 被引量：8
13
作者 鲁倩 林亲录 梁盈 《粮食与油脂》 北大核心 2013年第4期11-14,共4页
大米蛋白溶解性、乳化性及起泡性都较低,使其在加工利用中受到限制。采用糖基化修饰大米蛋白,在单因素基础上,通过四因素三水平正交试验确定最优修饰组合;结果表明,通过正交法所得最优糖基化修饰组合,其复合物溶解度由3.43%增至32.75%,... 大米蛋白溶解性、乳化性及起泡性都较低,使其在加工利用中受到限制。采用糖基化修饰大米蛋白,在单因素基础上,通过四因素三水平正交试验确定最优修饰组合;结果表明,通过正交法所得最优糖基化修饰组合,其复合物溶解度由3.43%增至32.75%,乳化度由33.85%提高至48.96%,起泡性由16.9%提升到30.9%。说明经糖基化修饰能有效改善大米蛋白溶解性、乳化性、起泡性等功能,有助于进一步加工利用大米蛋白,并为后续研究奠定良好理论基础。 展开更多
关键词 糖基化修饰 大米蛋白 大米蛋白改性
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蛋白质糖基化修饰在自身免疫反应中的研究进展 被引量：3
14
作者 王健(综述) 李晞(审校) 《检验医学与临床》 CAS 2021年第1期128-131,共4页
糖链基团具有广泛的生物活性,在机体结构与功能等方面起重要作用。蛋白质糖基化修饰是最常见的翻译后修饰之一,目前已知蛋白序列有半数以上属于糖基化蛋白[1]。蛋白质附着的聚糖不仅影响蛋白质结构组成、性质稳定等方面,而且在细胞信号... 糖链基团具有广泛的生物活性,在机体结构与功能等方面起重要作用。蛋白质糖基化修饰是最常见的翻译后修饰之一,目前已知蛋白序列有半数以上属于糖基化蛋白[1]。蛋白质附着的聚糖不仅影响蛋白质结构组成、性质稳定等方面,而且在细胞信号传导、免疫调节、肿瘤发生及转移等环节也发挥重要功能[2-3]。近年来随着糖组学及糖蛋白组学的研究进展,糖链基团在免疫及自身免疫反应中的调节作用及功能机制逐渐成为免疫学的研究热点。本文就蛋白质糖基化修饰在机体自身免疫反应中的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 糖基化修饰 糖链基团 自身免疫 系统性红斑狼疮
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N-糖基化修饰对极端嗜热酸性α-淀粉酶ApkA酶学性质的影响 被引量：1
15
作者 曾静 郭建军 袁林 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第6期48-54,共7页
为探索N-糖基化修饰对极端嗜热酸性α-淀粉酶Apk A酶学性质的影响,同时为构建酵母工程菌奠定基础,将Apk A缺失信号肽突变体Apk Ads及含有2个潜在N-糖基化修饰位点的突变体Apk Ads D182N/G373S在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中进行表... 为探索N-糖基化修饰对极端嗜热酸性α-淀粉酶Apk A酶学性质的影响,同时为构建酵母工程菌奠定基础,将Apk A缺失信号肽突变体Apk Ads及含有2个潜在N-糖基化修饰位点的突变体Apk Ads D182N/G373S在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中进行表达。Apk Ads和Apk Ads D182N/G373S在Pichia pastoris GS115中大量表达并分泌到胞外,Apk Ads的表观分子质量约为45 k D,Apk Ads D182N/G373S的表观分子质量约为55 k D。酶学性质分析表明,与Apk Ads相比,Apk Ads D182N/G373S的酶学性质发生了一定的变化。其最适反应p H值由6.5降低至5.5~6.0,酸性条件下稳定性增强;最适反应温度由90℃提高至100℃;于90℃的半衰期由5 h增加至5.5 h,于100℃保温10 min后的相对酶活力由32.03%增加至49.04%。结果表明N-糖基化修饰可适当提高Apk A的酸性条件下酶活力和稳定性、最适反应温度、热稳定性。突变体Apk Ads D182N/G373S的酶学性质使其适于淀粉液化工艺的应用。 展开更多
关键词 极端嗜热酸性α-淀粉酶 毕赤酵母GS115 N-糖基化修饰 分泌表达
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昆虫与哺乳动物蛋白质N-糖基化修饰异同的比较及其潜在的应用意义 被引量：2
16
作者 韦亚东 牛淼淼 +2 位作者 刘子瑜 车凤玉 张国政 《中国蚕业》 2011年第2期8-13,共6页
基于过去多年来所积累的关于昆虫蛋白质糖基化修饰的研究成果,对昆虫与哺乳动物的蛋白质N-糖基化修饰途径与分子机制的异同进行了比较分析,同时进一步讨论如何在人们前期研究的基础上,对昆虫杆状病毒表达系统的蛋白质糖基化修饰途径做... 基于过去多年来所积累的关于昆虫蛋白质糖基化修饰的研究成果,对昆虫与哺乳动物的蛋白质N-糖基化修饰途径与分子机制的异同进行了比较分析,同时进一步讨论如何在人们前期研究的基础上,对昆虫杆状病毒表达系统的蛋白质糖基化修饰途径做些改造性工作,以期能够直接利用该昆虫杆状病毒表达系统生产人源化糖蛋白。 展开更多
关键词 昆虫 哺乳动物 杆状病毒 表达系统 N-糖基化修饰 人源化糖蛋白
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糖基化修饰血小板冷藏稳定性研究
17
作者 郭永 韩颖 +3 位作者 扈文博 权国波 刘敏霞 刘安 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期681-686,共6页
本研究旨在观察尿苷二磷酸半乳糖(UDP-Gal)糖基化修饰人血小板的稳定性、理化指标及体外功能变化。实验分为室温对照组、冷藏对照组以及修饰组(U+4组和4+U组)。机采人浓缩血小板悬液,4℃保存前或后添加适量UDP-Gal,进行糖基化修饰,分别... 本研究旨在观察尿苷二磷酸半乳糖(UDP-Gal)糖基化修饰人血小板的稳定性、理化指标及体外功能变化。实验分为室温对照组、冷藏对照组以及修饰组(U+4组和4+U组)。机采人浓缩血小板悬液,4℃保存前或后添加适量UDP-Gal,进行糖基化修饰,分别于0、1、3、5、7、14天,通过荧光标记识别血小板膜糖蛋白末端半乳糖残基的凝集素(FITC-RCAⅠ)检测糖基化修饰效果;pH计检测血小板悬液pH值;血细胞计数仪检测血小板平均体积;比浊法测定血小板聚集率;流式细胞术检测血小板活化标志CD62P、血小板膜蛋白CD42b及PS的表达。结果表明:保存14天时,修饰组血小板RCAⅠ结合率是室温组的5-6倍;修饰组血小板悬液pH低于室温组,但二者之间无显著性差异(p>0.05);保存14天时室温组和修饰组血小板平均体积分别为10.6±1.9fL和11.14±1.1fL,二者之间无显著性差异(p>0.05);各组体外聚集活性在保存过程中均逐渐下降,但修饰组优于室温组(p<0.05);流式检测结果显示,保存1-5天修饰组CD62P、CD42b和PS表达的阳性率与新鲜血小板无显著性差异(p>0·05),但保存14天时,CD62P和PS表达的阳性率升高,CD42b表达的阳性率降低,与新鲜血小板相比差异极显著(p<0.01)。结论:在修饰血小板保存过程中,糖基化修饰的效果稳定,修饰血小板的pH和平均体积均处于正常值范围之内,聚集活性良好,优于室温保存组,但在保存5天后表现出不同程度的活化。 展开更多
关键词 血小板 糖基化修饰血小板 修饰稳定性
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人朊蛋白不同N-糖基化修饰突变体的构建及其在哺乳动物细胞中表达
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作者 杨洋 陈岚 +2 位作者 韩兵社 许彩民 潘华珍 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期373-377,共5页
构建并表达人朊蛋白N-糖基化修饰位点突变的真核表达载体,有助于进一步研究朊蛋白N-糖基化修饰的生物学功能。定点突变野生型人朊蛋白基因PRNP,将获得的突变体亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1中,并在人宫颈癌细胞株HeLa中瞬时表达各种朊... 构建并表达人朊蛋白N-糖基化修饰位点突变的真核表达载体,有助于进一步研究朊蛋白N-糖基化修饰的生物学功能。定点突变野生型人朊蛋白基因PRNP,将获得的突变体亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1中,并在人宫颈癌细胞株HeLa中瞬时表达各种朊蛋白糖基化修饰位点突变体,利用免疫印迹和糖苷酶消化等糖蛋白分析方法鉴定表达产物的糖基化形式。经Western blot鉴定,野生型和突变型朊蛋白表达产物出现不同形式的泳动特征,分别出现特异性糖基化修饰的多个条带,单糖基化修饰的两条条带和无糖基化修饰的一条条带。经PNGase F糖苷酶消化,野生型和糖基化单点突变型表达产物均能被糖苷酶消化,其分子量下移,去糖基化突变型表达产物的分子条带位置不变。通过突变野生型人朊蛋白基因PRNP的N-糖基化修饰位点,获得单糖基化修饰和去N-糖基化修饰的6种人朊蛋白突变体,并能够在HeLa细胞株中瞬时表达单糖基化修饰和去N-糖基化修饰朊蛋白,为进一步研究朊蛋白的相关功能建立良好基础。 展开更多
关键词 朊蛋白 N-糖基化修饰 糖蛋白
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糖基化修饰对血红蛋白在肉制品中稳定性的影响
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作者 马利华 尤敦学 沈石星 《中国调味品》 CAS 北大核心 2020年第4期103-106,共4页
实验以猪血为原料,用葡萄糖进行糖基化修饰,考察了糖基化血红蛋白在光照、温度、pH值、氧化还原剂、金属离子、部分食品添加剂等影响下的稳定性。结果表明:糖基化血红蛋白在常温、酸性条件、部分食品添加剂等条件下都比较稳定,生产与加... 实验以猪血为原料,用葡萄糖进行糖基化修饰,考察了糖基化血红蛋白在光照、温度、pH值、氧化还原剂、金属离子、部分食品添加剂等影响下的稳定性。结果表明:糖基化血红蛋白在常温、酸性条件、部分食品添加剂等条件下都比较稳定,生产与加工时应避免高温、强光照射、接触金属离子。 展开更多
关键词 血红蛋白 糖基化修饰 稳定性
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植物蛋白质N-糖基化修饰研究进展 被引量：3
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作者 叶强 金晓琴 +3 位作者 刘伟娜 韩凤琴 康振 杨莉 《浙江师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2016年第1期80-86,共7页
N-糖基化与植物蛋白质正确折叠、细胞凋亡、器官发育及信号转导等生物学功能密切相关.主要对植物蛋白N-糖基化的结构、生物合成、加工修饰、相关酶生物学功能,以及糖蛋白的分离鉴定方法等进行了综述,并探讨了植物糖基化蛋白功能研究的... N-糖基化与植物蛋白质正确折叠、细胞凋亡、器官发育及信号转导等生物学功能密切相关.主要对植物蛋白N-糖基化的结构、生物合成、加工修饰、相关酶生物学功能,以及糖蛋白的分离鉴定方法等进行了综述,并探讨了植物糖基化蛋白功能研究的应用前景及存在的问题. 展开更多
关键词 植物蛋白质 N-糖基化修饰 糖苷合成 生物学功能
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