抑制长链非编码RNA MALAT1对糖脂毒性诱导的内皮细胞功能障碍的影响及可能机制

1

作者 张志扬 刘芬 +5 位作者 张雪鹤 房彬彬 张冀鑫 谢骞 杨毅宁 李晓梅 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2024年第2期185-193,共9页

目的:探讨糖脂毒性环境中抑制长链非编码RNA(lnc RNA)人类肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)的表达水平对人脐静脉内皮细胞功能影响的分子机制。方法:用葡萄糖和棕榈酸处理人脐静脉内皮细胞,建立体外糖脂毒性内皮细胞模型,并分为对照组、... 目的:探讨糖脂毒性环境中抑制长链非编码RNA(lnc RNA)人类肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)的表达水平对人脐静脉内皮细胞功能影响的分子机制。方法:用葡萄糖和棕榈酸处理人脐静脉内皮细胞,建立体外糖脂毒性内皮细胞模型,并分为对照组、高糖高脂组、高糖高脂对照组以及小干扰RNA(si-RNA)干预的高糖高脂+si-MALAT1组、高糖高脂+si-丝裂原活化蛋白激酶1(si-MAPK1)组。应用实时荧光定量PCR检测MALAT1、MAPK1的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测自噬、线粒体融合分裂、凋亡、通路相关蛋白的表达水平;免疫荧光共聚焦定位检测自噬及溶酶体相关蛋白的荧光共定位情况;透射电镜观察内皮细胞中自噬溶酶体的数目;线粒体探针染色检测线粒体形态;免疫荧光检测细胞内活性氧(ROS)的产生;流式细胞仪检测各组细胞的凋亡;细胞增殖及划痕实验检测不同时间点各组细胞的增殖及迁移能力;血管形成试验检测各组细胞中新生血管数量。结果:与对照组相比,高糖高脂组、高糖高脂对照组的MALAT1 mRNA、磷酸化的丝裂原活化蛋白激酶1(p-MAPK1)的表达水平增加,磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达水平下降,P均<0.05。与高糖高脂对照组相比,高糖高脂+si-MALAT1组微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)、螯合体1(p62)、ROS、剪切后活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase-3)、BCL-2相关X蛋白(BAX)、p-MAPK1的表达水平均下降,线粒体融合蛋白视神经萎缩蛋白1(OPA1)、BCL-2、p-mTOR的表达水平均增加,P均<0.05;LC3和溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)蛋白的荧光共定位阳性颗粒增加(P均<0.01),溶酶体数目减少;细胞增殖、迁移、成管能力均增加(P均<0.01)。与高糖高脂对照组相比,高糖高脂+si-MAPK1组内皮细胞中p-MAPK1的表达下降,p-mTOR的表达上升(P均<0.01)。结论:抑制MALAT1表达,可降低糖脂毒性环境中线粒体的自噬水平,减少内皮细胞的凋亡及改善内皮细胞的功能,可能与调节MAPK1/mTOR信号通路有关。 展开更多

关键词 长链非编码RNA人类肺腺癌转移相关转录本1 丝裂原活化蛋白激酶1 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 糖脂毒性 内皮细胞功能 线粒体自噬 凋亡

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细胞凋亡和线粒体凋亡途径在糖脂毒性导致胰岛β细胞功能衰竭中的作用 被引量：5

2

作者 赵乃倩 余叶蓉 +2 位作者 谭惠文 邓刚 张祥迅 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期2009-2013,共5页

目的探讨糖脂毒性引起高脂肥胖大鼠胰岛β细胞功能障碍的可能机制。方法将高脂肥胖雄性Wistar大鼠18只分为3组。对照组6只经颈静脉插管输入生理盐水;高游离脂肪酸组(FFA组)6只输入脂肪乳+肝素;高糖高FFA组(GS-FFA组)6只输入葡萄糖液及... 目的探讨糖脂毒性引起高脂肥胖大鼠胰岛β细胞功能障碍的可能机制。方法将高脂肥胖雄性Wistar大鼠18只分为3组。对照组6只经颈静脉插管输入生理盐水;高游离脂肪酸组(FFA组)6只输入脂肪乳+肝素;高糖高FFA组(GS-FFA组)6只输入葡萄糖液及脂肪乳+肝素。输注持续时间48h。于输液前及输液结束时经颈动脉采血测定血β-羟丁酸(β-HBA)水平。输液结束后,采用静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT)评价3组动物胰岛β细胞分泌功能。IVGTT后处死动物,留取胰尾组织病理标本,采用TUNEL技术检测胰岛细胞凋亡水平,采用免疫组化技术测定胰岛细胞CytC、凋亡诱导因子、caspase-9和caspase-3表达水平。结果(1)静脉输液结束时,3组大鼠血β-HBA水平均较基础值升高,其中GS-FFA组血β-HBA生成显著增加(P<0.05)。(2)GS-FFA组大鼠IVGTT时胰岛素分泌指数(ΔI/ΔG)较对照组、FFA组明显减低(P<0.05)。(3)3组大鼠中,GS-FFA组胰岛细胞凋亡比例显著增加(P<0.05),同时GS-FFA组胰岛细胞CytC、凋亡诱导因子、caspase-9及caspase-3表达水平显著增高(P<0.05)。结论高血糖与高FFA血症协同作用可严重损害高脂肥胖大鼠胰岛β细胞的胰岛素分泌功能,导致酮体生成显著增加。糖脂毒性严重损害高脂肥胖大鼠胰岛素分泌功能的机制与胰岛β细胞凋亡显著增加及激活线粒体凋亡途径有关。 展开更多

关键词 糖脂毒性 胰岛细胞凋亡 细胞色素C 凋亡诱导因子 CASPASE-9 caspase-3

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2型糖尿病绝经女性患者糖脂毒性与骨质疏松的相关性 被引量：3

3

作者 刘洋 孙成林 +3 位作者 刘玉佳 高影 郭蔚莹 王桂侠 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期596-598,共3页

目的分析2型糖尿病(T2DM)绝经女性患者糖脂代谢紊乱对骨质疏松(OP)的发病风险。方法 846例女性T2DM患者,分为绝经组(576例)、未绝经组(270例),采用Sahara骨密度仪进行骨密度(BMD)测定,收集相关生化结果及一般情况,分析绝经年龄、年限以... 目的分析2型糖尿病(T2DM)绝经女性患者糖脂代谢紊乱对骨质疏松(OP)的发病风险。方法 846例女性T2DM患者,分为绝经组(576例)、未绝经组(270例),采用Sahara骨密度仪进行骨密度(BMD)测定,收集相关生化结果及一般情况,分析绝经年龄、年限以及糖、脂代谢紊乱等因素对OP的发病风险。结果绝经组的OP患病率为8.86%,未绝经组为4.26%,两组有统计学差异(P<0.05);单元线性回归及单元逻辑回归分析中绝经组患者随年龄、绝经年限增加OP患病率有明显增高(P<0.05)。绝经组和未绝经组的糖化血红蛋白(HbAlc),胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)无统计学差异(P>0.05)。绝经组中餐后血糖与BMD呈负相关(P<0.05);BMI与OP患病率呈负相关(P<0.05);TG、TC、高密度胆固醇(HDL-C)、低密度胆固醇(LDL-C)与BMD无明显相关(P>0.05),利用逻辑回归分析比较BMD减低百分比,糖、脂代谢均异常组(48.02%)与单纯糖代谢异常组(57.14%)及单纯脂代谢异常组(46.92%)无统计学差异(均P>0.05)。结论 T2DM绝经女性患者中脂代谢紊乱不是OP发生的主要风险因素,控制餐后血糖、适当提高BMI对T2DM女性绝经患者预防OP有一定意义。 展开更多

关键词 2型糖尿病(T2DM) 绝经 糖脂毒性 骨质疏松(OP)

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内质网应激参与糖脂毒性引起的胰岛β细胞凋亡 被引量：8

4

作者 杨燕丽 向若兰 孙琦 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2009年第12期1337-1340,共4页

胰岛β细胞具有高度发达的内质网,是对内质网应激最敏感的细胞之一。高浓度的游离脂肪酸引起内质网应激反应,进而诱导了β细胞的凋亡,葡萄糖则促进了脂肪酸通过内质网应激引起的β细胞凋亡。总之,内质网应激介导了糖脂毒性引起的β细胞... 胰岛β细胞具有高度发达的内质网,是对内质网应激最敏感的细胞之一。高浓度的游离脂肪酸引起内质网应激反应,进而诱导了β细胞的凋亡,葡萄糖则促进了脂肪酸通过内质网应激引起的β细胞凋亡。总之,内质网应激介导了糖脂毒性引起的β细胞凋亡。 展开更多

关键词 内质网应激 糖脂毒性 Β细胞凋亡

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下调lncRNA NONRATT021972调控TLR4对糖脂毒性诱导的胰岛β细胞炎症反应 被引量：4

5

作者 郑翔宇 付宗强 +1 位作者 张艳敏 郭伟胜 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第11期1150-1157,共8页

目的关于lncRNA NONRATT021972在糖尿病中表达上调对胰岛β细胞影响的研究较少。文中旨在探讨下调lneRNA NONRAT021972调控Toll样受体4(TLR-4)对糖脂毒性诱导的胰岛β细胞炎症因子表达的影响。方法将胰岛β细胞NIT-1分成对照组(正常培... 目的关于lncRNA NONRATT021972在糖尿病中表达上调对胰岛β细胞影响的研究较少。文中旨在探讨下调lneRNA NONRAT021972调控Toll样受体4(TLR-4)对糖脂毒性诱导的胰岛β细胞炎症因子表达的影响。方法将胰岛β细胞NIT-1分成对照组(正常培养的胰岛β细胞)、模型组(用25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸的细胞培养液处理)、sh-NC组(转染shRNA control,然后用25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸处理细胞)、sh-NONRATT021972组(转染sh-NON-RATT021972,然后用25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸处理细胞)。PCR方法检测NONRATTO21972.TLR4和TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA表达;CCK8实验检测细胞增殖活性变化;流式细胞术检测细胞凋亡变化;Westernblot检测C-Caspase-3.C-Caspase-9、TLR4、TNF-α、IL-6、1L-1β蛋白表达。在胰岛β细胞中分别将NONRATT021972 shRNA、阴性对照载体和NON-RATT021972 shRNA.TLR4过表达载体共转染,用含有25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸的细胞培养液处理,分为sh-NON-RATT021972+NC组(共转染NONRATT021972 shRNA和空载体,高糖高脂诱导)和sh-NONRATT021972+TLR4组(共转染NONRATT021972 shRNA和TLR4过表达载体,高糖高脂诱导)。Westerm blot检测C-Caspase-3、C-Caspase-9、TLR4,TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白表达。结果与对照组胰岛β细胞中NONRATTI021972表达水平(1.00±0.11)比较,模型组(2.47±0.12)明显升高(P<0.001);与sh-NC组NONRATT021972表达水平(2.45±0.23)比较,sh-NONRATT021972组(1.12±0.16)明显降低(P<0.001)。与对照组比较,模型组胰岛β细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白表达及TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA和蛋白水平升高(P<0.05);与sh-NC组比较,sh-NONRATT021972组胰岛β细胞增殖活性升高,细胞凋亡率降低,细胞中C-Caspase-3.C-Caspase-9蛋白及TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。与sh-NONRATT021972+NC组比较,sh-NONRATT021972+TLR4组胰岛β细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05),细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白及TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论下调NONRATT021972通过降低TLR4的表达减少糖脂毒性诱导胰岛β细胞炎症因子表达和细胞凋亡,提高细胞增殖活性,为分子靶向治疗糖尿病提供了思路。 展开更多

关键词 胰岛Β细胞 糖脂毒性 NONRATT021972 TOLL样受体4 炎症

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糖脂毒性对胰腺β细胞的功能损伤作用及机制 被引量：8

6

作者 郭莉霞 《生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第3期70-73,共4页

现在关于高糖高脂对胰腺β细胞的毒性机制已经有了明显的进展,但还不完全清楚。实际上,β细胞响应过量营养物质的过程是一个连续的过程,包括β细胞补偿和β细胞功能失调。在早期,β细胞应对高糖高脂的反应是一个积极主动的过程;而到后期... 现在关于高糖高脂对胰腺β细胞的毒性机制已经有了明显的进展,但还不完全清楚。实际上,β细胞响应过量营养物质的过程是一个连续的过程,包括β细胞补偿和β细胞功能失调。在早期,β细胞应对高糖高脂的反应是一个积极主动的过程;而到后期,过量的糖脂会导致胰岛素分泌下降,削弱胰岛素基因表达量,并促进胰岛β细胞凋亡。最终对2型糖尿病的发展有促进作用。综述了近年来细胞水平和分子水平,在葡萄糖存在的条件下,脂肪酸对胰腺β细胞的损伤作用及其机制的研究进展,重在说明葡萄糖和脂肪酸在2型糖尿病发展中的共同作用。 展开更多

关键词 糖脂毒性 Β细胞 损伤 机制

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罗汉果皂苷提取物对INS-1胰岛β细胞糖脂毒性的保护作用研究 被引量：6

7

作者 喻柯柯 刘合生 +4 位作者 张境 杨文康 曹少谦 陈秋平 戚向阳 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期348-355,共8页

为阐明罗汉果皂苷提取物(MGE)对胰岛β细胞糖脂毒性的保护作用,本试验通过噻唑蓝(MTT)比色法、Hoechst 33342/PI荧光染色法和Western blotting研究MGE对高糖、高脂诱导INS-1胰岛β细胞活力降低、凋亡及促凋亡因子caspase 3表达水平的影... 为阐明罗汉果皂苷提取物(MGE)对胰岛β细胞糖脂毒性的保护作用,本试验通过噻唑蓝(MTT)比色法、Hoechst 33342/PI荧光染色法和Western blotting研究MGE对高糖、高脂诱导INS-1胰岛β细胞活力降低、凋亡及促凋亡因子caspase 3表达水平的影响。结果表明,在0.1~100μg·mL-1浓度范围内,MGE对INS-1细胞无明显细胞毒性(P>0.05)。高糖、高脂处理使INS-1胰岛β细胞活力显著降低(P<0.05),而MGE(0.1~100μg·mL-1)干预可明显增强INS-1细胞活力,并呈一定的剂量效应关系。与高糖高脂模型组相比,100μg·mL-1MGE干预使INS-1胰岛β细胞活性上升了15.5%。荧光染色表明,MGE处理明显抑制了高糖、高脂诱导的INS-1胰岛β细胞凋亡。免疫印迹结果表明,高糖、高脂处理的INS-1胰岛β细胞,cleaved caspase 3蛋白表达水平显著上调,而MGE干预显著下调cleaved caspase 3水平(P<0.05)。本研究结果表明,MGE干预改善了胰岛β细胞的糖脂毒性,抑制了细胞凋亡,其抗凋亡作用可能与抑制caspase 3的剪切活化有关。本研究结果为罗汉果高附加值产品的开发及天然、安全降糖功能因子的筛选提供了一定的理论依据。 展开更多

关键词 罗汉果皂苷 胰岛Β细胞 糖脂毒性 CASPASE 3 凋亡

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糖脂毒性诱导胰岛β细胞炎症因子过表达的研究 被引量：9

8

作者 胡朝恩 钟大鹏 艾智华 《检验医学与临床》 CAS 2018年第12期1716-1719,共4页

目的了解高糖、高脂环境对胰岛β细胞功能和Toll受体3(TLR3)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、补体C3及补体C4表达的影响。方法培养小鼠胰岛β细胞株(NIT-1)经高糖高脂刺激后,... 目的了解高糖、高脂环境对胰岛β细胞功能和Toll受体3(TLR3)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、补体C3及补体C4表达的影响。方法培养小鼠胰岛β细胞株(NIT-1)经高糖高脂刺激后,应用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLR3mRNA的表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6、CRP、补体C3及补体C4的表达。结果高糖高脂刺激后,胰岛β细胞增殖被抑制,TLR3mRNA、TNF-α、IL-1β、IL-6、CRP、补体C3及补体C4的表达明显增加;并且高糖高脂(GZ)组胰岛β细胞损伤和炎症因子过表达程度明显高于高糖(G)组和高脂(Z)组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高糖高脂可能通过激活TLR3信号通路等途径产生大量炎症因子和免疫因子,抑制胰岛β细胞增殖,导致胰岛β细胞功能障碍,并且糖、脂协同作用明显大于单独的糖、脂毒性。 展开更多

关键词 糖脂毒性 胰岛Β细胞功能障碍 炎症因子 慢性炎症

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参麦方对心肌细胞糖脂毒性损伤的保护作用 被引量：1

9

作者 关婉辰 戴璐彬 +4 位作者 张栋 周凯旋 刘佳 鲍慧玮 李丽静 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第9期2211-2215,共5页

目的探究参麦方对大鼠心肌细胞糖脂毒性损伤的影响。方法建立体外糖脂毒性对心肌细胞损伤模型,CCK8法检测细胞存活率;Western印迹检测心肌细胞的磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、磷酸化(p)-蛋白激酶B(AKT)/AKT、p-雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/mTOR蛋... 目的探究参麦方对大鼠心肌细胞糖脂毒性损伤的影响。方法建立体外糖脂毒性对心肌细胞损伤模型,CCK8法检测细胞存活率;Western印迹检测心肌细胞的磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、磷酸化(p)-蛋白激酶B(AKT)/AKT、p-雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/mTOR蛋白表达;Hoechst33258观察凋亡染色;Western印迹检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活性半胱天冬酶(Cleaved-Caspase)3表达。结果0.40 mmol/L棕榈酸和30 mmol/L葡萄糖条件下损伤程度可缓解,实验重复性稳定,证明心肌细胞糖脂毒性模型造模成功;与模型组比较,各给药组PI3K、p-AKT/AKT蛋白显著上调,p-mTOR/mTOR蛋白显著下调;模型组玻珠样病变增多,核质发生皱缩,给药后与模型组比较,玻珠样病变减少。与模型组比较,各给药组促凋亡蛋白Bax、Cleaved-Caspase3显著下调,抗凋亡蛋白Bcl-2显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论初步验证参麦方对糖脂毒性损伤的心肌细胞具有保护作用,参麦方可能激活了PI3K/AKT/mTOR通路,调控相关凋亡蛋白,减少心肌细胞凋亡从而改善心肌细胞损伤。 展开更多

关键词 参麦方 心肌细胞 糖脂毒性 细胞凋亡

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糖脂毒性对INS-1E β细胞中胰高血糖素样多肽-1受体表达及其信号通路的影响 被引量：3

10

作者 康战方 植新培 +3 位作者 欧阳一蕙 高军 张恬 印大中 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期1659-1662,共4页

目的研究糖脂毒性对胰岛β细胞中胰高血糖素样多肽-1受体(GLP-1R)的表达及GLP-1R激动剂exendin-4作用的影响。方法以大鼠胰岛β细胞系INS-1E细胞为研究对象,在低糖和高糖条件下单独加入0.4 mmol/L的棕榈酸或者联合50 nmol/L exendin-4,... 目的研究糖脂毒性对胰岛β细胞中胰高血糖素样多肽-1受体(GLP-1R)的表达及GLP-1R激动剂exendin-4作用的影响。方法以大鼠胰岛β细胞系INS-1E细胞为研究对象,在低糖和高糖条件下单独加入0.4 mmol/L的棕榈酸或者联合50 nmol/L exendin-4,培养24 h后,定量PCR检测细胞中GLP-1R mRNA的表达,噻唑蓝(MTT)和BrdU免疫荧光检测细胞增殖,TUNEL染色细胞凋亡。结果高糖、高脂单独能降低INS-1E细胞中GLP-1R的表达,但是糖脂毒性条件下更显著。高脂能降低INS-1E细胞的增殖、增加其细胞凋亡。50 nmol/L exendin-4处理24 h能减弱低糖条件下高脂对INS-1E细胞增殖和凋亡的影响,但在高糖条件下不明显。结论糖脂毒性比单独高糖、高脂对INS-1E细胞GLP-1R及其信号通路损伤更明显。 展开更多

关键词 糖尿病 糖脂毒性 胰高血糖素样多肽-1受体 Β细胞

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LncRNA LEGLTBC/miRNA-199a-3p/FoxM1轴在糖脂毒性诱导胰岛β细胞增殖损伤中的作用 被引量：3

11

作者 程艺 邢宇杰 +3 位作者 周思敏 孙玥 华强 孔祥 《皖南医学院学报》 CAS 2022年第1期9-14,共6页

目的:探索长链非编码RNA(lncRNA)LEGLTBC/miRNA-199a-3p/FoxM1轴在糖脂毒性诱导的大鼠INS-1细胞增殖损伤中的作用。方法:高糖/高脂(HG/PA)孵育INS-1细胞,RT-PCR检测LEGLTBC和miR-199a-3p的表达,Western blot检测FoxM1和细胞周期蛋白cycl... 目的:探索长链非编码RNA(lncRNA)LEGLTBC/miRNA-199a-3p/FoxM1轴在糖脂毒性诱导的大鼠INS-1细胞增殖损伤中的作用。方法:高糖/高脂(HG/PA)孵育INS-1细胞,RT-PCR检测LEGLTBC和miR-199a-3p的表达,Western blot检测FoxM1和细胞周期蛋白cyclinD1的表达,双荧光素酶报告实验验证LEGLTBC和miR-199a-3p以及miR-199a-3p与FoxM1之间的相互作用,EdU染色和CCK-8测定细胞增殖能力。结果:HG/PA孵育后的INS-1细胞LEGLTBC和FoxM1降低,miR-199a-3p表达升高。沉默或过表达LEGLTBC可分别加重或改善糖脂毒性诱导的INS-1细胞增殖能力损伤。功能实验表明LEGLTBC通过竞争性结合miR-199a-3p进而调控FoxM1的表达。过表达LEGLTBC能够降低miR-199a-3p表达,上调FoxM1和cyclinD1蛋白表达,进而恢复HG/PA诱导的INS-1细胞增殖损伤。结论:LEGLTBC作为竞争性内源性RNA与miR-199a-3p相互作用,影响靶基因FoxM1表达,调控糖脂毒性导致的胰岛β细胞增殖损伤。 展开更多

关键词 2型糖尿病 长链非编码RNA 糖脂毒性

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艾塞那肽通过TLR-3信号减轻糖脂毒性对胰岛β细胞的损害 被引量：1

12

作者 朱祎婧 胡朝恩 +2 位作者 钟大鹏 熊倩 艾智华 《西南国防医药》 CAS 2019年第8期823-826,共4页

目的探讨艾塞那肽对糖脂毒性诱导的胰岛β细胞炎症反应和功能损害的保护作用及潜在机制。方法胰岛β细胞株分别在低糖、高糖、高脂、高糖高脂培养基中培养48h后,分别予以不同浓度艾塞那肽(0,10、20、30和100nmol/L)干预24h,检测各组细... 目的探讨艾塞那肽对糖脂毒性诱导的胰岛β细胞炎症反应和功能损害的保护作用及潜在机制。方法胰岛β细胞株分别在低糖、高糖、高脂、高糖高脂培养基中培养48h后,分别予以不同浓度艾塞那肽(0,10、20、30和100nmol/L)干预24h,检测各组细胞增殖情况、Toll样受体3(TLR3)mRNA表达以及炎症因子表达水平。结果与对照组相比,艾塞那肽可改善糖脂毒性对胰岛β细胞的增殖抑制,下调糖脂毒性诱导的TLR3mRNA及相关炎症因子的表达。结论艾塞那肽可通过抑制TLR3信号通路介导的炎症反应,减轻糖脂毒性诱导的胰岛β细胞损害。 展开更多

关键词 艾塞那肽 糖脂毒性 胰岛Β细胞 炎症因子 细胞增殖 TLR3

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糖脂毒性对肥胖大鼠β细胞功能和凋亡的影响研究 被引量：4

13

作者 谭惠文 赵乃倩 +2 位作者 余叶蓉 韩丽娜 张祥迅 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期71-75,共5页

目的探讨葡萄糖和游离脂肪酸(FFA)联合作用对胰岛β细胞功能与凋亡的影响及病理生理机制。方法Wistar大鼠采用高脂饲料喂养制造胰岛素抵抗模型,取造模成功的肥胖胰岛素抵抗模型大鼠分为4个亚组,生理盐水组(OB-NS组,n=7)、高葡萄糖组(OB... 目的探讨葡萄糖和游离脂肪酸(FFA)联合作用对胰岛β细胞功能与凋亡的影响及病理生理机制。方法Wistar大鼠采用高脂饲料喂养制造胰岛素抵抗模型,取造模成功的肥胖胰岛素抵抗模型大鼠分为4个亚组,生理盐水组(OB-NS组,n=7)、高葡萄糖组(OB-GS组,n=9)、高游离脂肪酸组(OB-FFA组,n=8)和高糖高脂肪酸组(OBFG组,n=9)。另取5只Wistar大鼠采用普通饲料喂养作为正常对照组。采用比色法检测FFA和β-羟丁酸(β-HBA)水平,采用静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT)评价胰岛β细胞胰岛素分泌功能,免疫组织化学方法检测β细胞胰岛素储备的能力,并应用原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡的β细胞。结果肥胖大鼠葡萄糖输注率(GIR)低于正常对照〔(10.82±1.8mg/kg·min)vs.(25.21±1.7mg/kg·min),P<0.05〕,提示胰岛素抵抗模型成功建立。OB-FG组大鼠糖负荷后胰岛素分泌达峰时间延后且各时点胰岛素水平明显低于NC组和OB-NS组,差异有统计学意义(P<0.05)。糖负荷后5、10、15和20min时,OB-FG组血胰岛素水平也明显较OB-FFA组、OB-GS组降低,胰岛素和血糖比值及胰岛素释放指数也均低于NC组和OB-NS组,差异有统计学意义。免疫组织化学染色示,OB-FG组胰岛素储备在各高脂肥胖亚组中最低,远低于NC组和OB-NS组(P<0.01),OB-GS组和OB-FFA组胰岛素储备与OB-NS组比较也有不同程度降低(P<0.05)。OB-FG组β细胞凋亡率高于NC组和OB-NS组(P<0.01)。结论糖脂联合毒性在引起肥胖大鼠酮体生成显著增加的同时也导致胰岛细胞分泌功能障碍。 展开更多

关键词 糖脂毒性 胰岛β-细胞功能 酮体生成

原文传递

骨髓间充质干细胞对糖脂毒性诱导的大鼠胰岛素瘤细胞损伤的保护作用 被引量：3

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作者 赵坤 郝好杰 +4 位作者 臧丽 杨国庆 董亮 韩为东 母义明 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 2015年第5期316-320,共5页

目的：探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）对糖脂毒性诱导的大鼠胰岛素瘤细胞（INS-1）损伤的保护作用及其机制。方法 INS-1细胞分为正常对照组、高糖高脂组和高糖高脂＋BMSCs组。高糖高脂＋BMSCs组的INS-1细胞使用高糖高脂（16.7 mmol/L葡... 目的：探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）对糖脂毒性诱导的大鼠胰岛素瘤细胞（INS-1）损伤的保护作用及其机制。方法 INS-1细胞分为正常对照组、高糖高脂组和高糖高脂＋BMSCs组。高糖高脂＋BMSCs组的INS-1细胞使用高糖高脂（16.7 mmol/L葡萄糖、0.4 mmol/L棕榈酸）培养基处理48 h后，与BMSCs共培养24 h，进行检测：（1）CCK8法检测INS-1细胞存活率；（2）Western blotting检测细胞内裂解的半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶（Cleaved Caspase-3）的表达；（3）膜连蛋白V/碘化丙啶（Annexin V/PI）检测细胞凋亡率；（4）放免法检测胰岛素分泌功能；（5） JC-1荧光探针检测线粒体膜电位（MMP）；（6）二氯荧光素双醋酸盐（DCFH-DA）检测细胞内活性氧（ROS）的生成量。两组间比较采用t检验进行统计学分析。结果与正常对照组比较，高糖高脂组INS-1细胞存活率明显下降[（100.0%±0.8%）比（71.9%±3.2%）, t=8.46, P〈0.01]，Cleaved Caspase-3表达量增加（0.248±0.033比1.01±0.066,t=10.28,P〈0.01），凋亡细胞比例增加[（6.9%±0.4%）比（16.4%±1.2%）, t=17.38, P〈0.01]，基础胰岛素分泌量（BIS）与葡萄糖刺激的胰岛素分泌量（GSIS）均减少（t=5.745、13.559，均P〈0.05）。与高糖高脂组相比，高糖高脂＋BMSCs组INS-1细胞的存活率上升，Cleaved Caspase-3表达量和凋亡细胞比例均减少（t=3.98、5.16、13.08，均P〈0.05），BIS及GSIS均显著增加（t=5.674、10.148，均P〈0.05）。高糖高脂损伤INS-1细胞内线粒体功能，表现为线粒体膜电位去极化（96±8比46±4, t=5.239, P〈0.05）、ROS生成量较对照组明显增加[（13.3%±0.9%）比（34.2%±0.8%）, t=17.38, P〈0.01]，而与高糖高脂组相比，BMSCs共培养有效促进线粒体膜电位恢复，并减少细胞内ROS含量[分别为46±4比87±14，（34.2%±0.8%）比（22.5%±0.4%），t=2.822、13.080，均P〈0.05]，改善了高糖高脂损伤的INS-1细胞的线粒体功能。结论 BMSCs可有效保护糖脂毒性损伤的INS-1细胞，其作用机制可能与BMSCs改善线粒体功能有关。 展开更多

关键词 间充质干细胞 糖脂毒性 线粒体 INS-1细胞

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受体相互作用蛋白140对吡格列酮改善胰岛β细胞糖脂毒性损伤的影响 被引量：2

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作者 薛君力 曾姣娥 +2 位作者 代喆 彭湾湾 徐焱成 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1094-1099,共6页

目的探讨过氧化物酶增殖活化受体-γ(PPAR-γ)激动剂吡格列酮对胰岛β细胞糖脂毒性损伤的保护及受体相互作用蛋白140(RIP140)在其中的介导机制。方法将胰岛β细胞株MIN6细胞分为NC组、高糖高脂组、吡格列酮干预组。稳定过表达RIP140的M... 目的探讨过氧化物酶增殖活化受体-γ(PPAR-γ)激动剂吡格列酮对胰岛β细胞糖脂毒性损伤的保护及受体相互作用蛋白140(RIP140)在其中的介导机制。方法将胰岛β细胞株MIN6细胞分为NC组、高糖高脂组、吡格列酮干预组。稳定过表达RIP140的MIN6细胞(O-RIP140-MIN6)和过表达绿色荧光蛋白(GFP)的MIN6细胞(GFP-MIN6)。分别予高糖高脂(25 rmmol/L葡萄糖+500μmol/L棕榈酸)和/或10/μmol/L吡格列酮干预。利用MTT分别检测各组细胞增殖率、流式细胞仪检测凋亡率、RT-PCR检测RIP140 mRNA、Western blot检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达、硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平及黄嘌呤氧化酶法检测超氧化合物歧化酶(SOD)含量。结果 NC组、高糖高脂组及吡格列酮干预组MTT吸光值分别为:24 h(1.80±0.04)、(0.95±0.04)及(0.97±0.03);48 h(2.70±0.11)、(1.04±0.06)及(1.30±0.03)。NC组与高糖高脂组比较,差异有统计学意义(24 h:t=25.94,P<0.01,48 h:t=24.00,P<0.01)。高糖高脂组与吡格列酮干预组比较,差异有统计学意义(48 h:t=9.37,P<0.01)。各组间的24 h凋亡率分别为(2.93±0.66)%、(48.08±3.95)%(vs NC组,t=19.54,P<0.01)及(31.38±3.92)%(vs高糖高脂组,t=5.20,P<0.01)。Bcl-2相对表达量分别为(1.14±0.06)、(0.42±0.02)(vs NC组,t=20.52,P<0.01)及(0.86±0.04)(vs高糖高脂组,t=17.71,P<0.01)。RIP140表达量分别为(1.13±0.11)、(2.34±0.21)(vs NC组,t=9.69,P<0.01)及(1.63±0.13)(vs高糖高脂组(t=5.03,P<0.01);高糖高脂组与NC组比较,MDA[(10.13±0.47vs(5.00±0.26)nmol/mg,t=16.57,P<0.01]、SOD[(5.15±1.07)协(12.25±1.25)nmol/mg,t=7.51,P<0.01]比较,差异均有统计学意义。高糖高脂组与吡格列酮干预组比较,MDA[(10.13±0.47)vs(7.83±0.36)nmol/mg,t=6.77,P<0.01]、SOD[(5.15±1.07)v5(8.74±0.59)nmol/mg,t=5.16,P<0.01)差异有统计学意义。O-RIP140-MIN6和GFP-MIN6细胞分别给予高糖高脂及吡格列酮处理后,两组MTT吸光值:24 h(1.04±0.07)vs(1.40±0.16)(t=5.01,P<0.01),48 h(1.16±0.13)vs(1.98±0.14)(t=10.73,P<0.01)。凋亡率为(41.95±4.88)%vs(31.26±2.86)%(t=2.97,P<0.05)、Bcl-2相对表达为(0.22±0.04)vs(0.76±0.03)(t=21.54,P<0.01),SOD为(7.53±0.71)vs(9.62±0.43)nmol/mg(t=4.36,P<0.05),MDA为(10.23±0.28)vs(8.15±0.38)nmol/mg(t=7.63,P<0.01)。结论高糖高脂促进胰岛β细胞损伤,吡格列酮通过下调RIP140表达来抑制高糖高脂对胰岛β细胞的损伤。 展开更多

关键词 受体相互作用蛋白140 吡格列酮 胰岛Β细胞 糖脂毒性

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糖脂毒性：营养过剩与β细胞功能损害 被引量：2

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作者 马晓伟(译) 钱荣立(校) 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期394-396,共3页

2型糖尿病（T2DM）是多基因遗传的复杂综合征，葡萄糖毒性、脂毒性和糖脂毒性是继发现象，在T2DM的发生发展中发挥作用，高血糖和高血脂可以加重对β细胞功能的损害。当血糖升高至异常时，血浆脂肪酸升高，并常伴有胰岛素抵抗（IR），... 2型糖尿病（T2DM）是多基因遗传的复杂综合征，葡萄糖毒性、脂毒性和糖脂毒性是继发现象，在T2DM的发生发展中发挥作用，高血糖和高血脂可以加重对β细胞功能的损害。当血糖升高至异常时，血浆脂肪酸升高，并常伴有胰岛素抵抗（IR），这可能在疾病的早期起致病作用。高血糖是脂毒性发生的先决条件。 展开更多

关键词 糖脂毒性 营养 Β细胞功能

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糖脂毒性作用下小鼠胰岛miRNA的表达谱变化 被引量：1

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作者 吴倜珺 许茹凤 +1 位作者 韩晓 严虹 《医学分子生物学杂志》 CAS 2016年第6期329-335,共7页

目的：初步探索长期高糖和／或高脂培养对小鼠原代胰岛中miRNA表达的影响。方法选取B6小鼠原代胰岛作为研究对象，提取RNA后通过生物芯片高通量筛选法及RT-PCR法检测并统计胰岛中表达水平变化的miRNA种类；生物信息学方法预测变化显著的... 目的：初步探索长期高糖和／或高脂培养对小鼠原代胰岛中miRNA表达的影响。方法选取B6小鼠原代胰岛作为研究对象，提取RNA后通过生物芯片高通量筛选法及RT-PCR法检测并统计胰岛中表达水平变化的miRNA种类；生物信息学方法预测变化显著的miRNA的下游靶基因并通过Western印迹法验证预测结果。结果生物芯片与定量PCR结果均显示，高糖和／或高脂培养后原代胰岛中相当一部分miRNA的表达发生了显著改变，其中miR320在高糖、高脂和高糖高脂联合培养下表达均呈上升趋势，通过生物信息学方法预测p85α为其下游靶基因，干扰小鼠胰岛β细胞系中miR320表达后p85α表达明显下降。结论在本实验中，高糖和／或高脂培养会引起原代胰岛中miR？320的表达水平升高，提示miR？320可能通过参与免疫系统的调控从而对2型糖尿病的发生发展产生作用。 展开更多

关键词 糖脂毒性 原代胰岛 MIRNA

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从“亢害承制”理论探讨糖脂毒性下β细胞损伤及其ceRNA调控网络 被引量：5

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作者 曹泽标 刘闯 +1 位作者 王保华 李赛美 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2020年第5期406-409,共4页

"亢害承制"理论是中医学认识人体生理制化、病理失衡及指导调燮用药的重要法则。该理论可以概括糖脂与胰岛β细胞之间"亢而自制免其害"的相辅相成生理良性循环,也可以阐明"亢而失制受其害"的糖脂毒性下... "亢害承制"理论是中医学认识人体生理制化、病理失衡及指导调燮用药的重要法则。该理论可以概括糖脂与胰岛β细胞之间"亢而自制免其害"的相辅相成生理良性循环,也可以阐明"亢而失制受其害"的糖脂毒性下胰岛β细胞损伤的病理恶性循环,并与"lncRNA/circRNA克miRNA,miRNA克mRNA,lncRNA/circRNA生mRNA"的ceRNA生克制化网络相似。在这一认识指导下,2型糖尿病可采取祛邪制"亢"和扶正防"害"的思路进行临床治疗和科学研究。 展开更多

关键词 亢害承制 糖脂毒性 胰岛Β细胞损伤 ceRNA网络

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小鼠β细胞系MIN6细胞糖脂毒性模型中Siah1表达变化的研究

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作者 黄琦清 朱云霞 韩晓 《医学分子生物学杂志》 CAS 2016年第4期187-192,共6页

目的： Siah1作为一种E3泛素连接酶，在调控细胞凋亡过程中发挥着重要作用，文章旨在在细胞系水平构建胰岛β细胞糖脂毒性模型，检测其中Siah1的表达水平，并预测此模型下Siah1表达的调控机制。方法用高糖高脂联合处理小鼠胰岛β细胞系M... 目的： Siah1作为一种E3泛素连接酶，在调控细胞凋亡过程中发挥着重要作用，文章旨在在细胞系水平构建胰岛β细胞糖脂毒性模型，检测其中Siah1的表达水平，并预测此模型下Siah1表达的调控机制。方法用高糖高脂联合处理小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞，葡萄糖刺激的胰岛素分泌（ glucose stimula－ted insulin secretion， GSIS）实验检测MIN6细胞胰岛素分泌功能，酸乙醇抽提并检测MIN6细胞内胰岛素含量， Western印迹实验检测Parp1蛋白的剪切情况及Siah1的蛋白表达水平，定量RT－PCR分析Siah1的mR－NA水平。借助miRanda软件预测小鼠、大鼠、人这3个种属中可能调控Siah1表达的microRNAs （ miR－NAs），并在种属间进行对比分析。结果高糖高脂处理可损伤MIN6细胞的GSIS功能、减少MIN6细胞胰岛素含量，并能导致Parp1蛋白的剪切程度显著增加。该模型下， Siah1的蛋白表达水平增高，而mRNA水平几乎没有变化，这提示此过程中Siah1主要受转录后水平的调控。用miRanda软件预测可能调控Siah1表达的miRNAs，其中有19个miRNAs的结合位点在小鼠、大鼠及人这3个种属中具有同源性。结论糖脂毒性可导致MIN6细胞功能障碍及凋亡，并能增高MIN6细胞中Siah1的蛋白表达水平，而不影响Siah1的mRNA水平。 展开更多

关键词 糖脂毒性 胰岛Β细胞 Siahl MICRORNAS 生物信息学

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