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长链非编码RNA Neat1对紫外线B诱导人晶状体上皮细胞焦亡的抑制作用及其机制
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作者 王敏 王妍茜 +3 位作者 陈颖 赵越越 杨涛 康刚劲 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期536-544,共9页
目的研究长链非编码RNA核旁斑长点组装转录本1(Neat1)在紫外线B诱导人晶状体上皮细胞(LECs)焦亡中的作用及其机制。方法体外培养人晶状体上皮细胞系HLE-B3,将处于对数生长期的HLE-B3细胞分别采用紫外线B照射0、2、4和8 h;采用Western b... 目的研究长链非编码RNA核旁斑长点组装转录本1(Neat1)在紫外线B诱导人晶状体上皮细胞(LECs)焦亡中的作用及其机制。方法体外培养人晶状体上皮细胞系HLE-B3,将处于对数生长期的HLE-B3细胞分别采用紫外线B照射0、2、4和8 h;采用Western blot法检测照射不同时长后焦亡相关蛋白胱天蛋白酶1(caspase-1)的表达,采用实时荧光定量PCR法检测照射不同时长后细胞中Neat1 mRNA相对表达量,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞活力并以此筛选紫外线诱导LECs焦亡的最佳照射时长,最终确定为4 h。另将HLE-B3细胞分为阴性siRNA转染组、siRNA Neat1转染组、阴性siRNA转染+照射组和siRNA Neat1转染+照射组,采用相应试剂转染24 h,其中阴性siRNA转染+照射组和siRNA Neat1转染+照射组转染相应试剂后采用紫外线B照射4 h。采用CCK-8法检测各组细胞活力,流式细胞术检测细胞焦亡,Western blot法检测caspase-1、gasdermin D蛋白(GSDMD)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)表达,ELISA法检测白细胞介素(IL)-1β质量浓度,透射电子显微镜下观察各组HLE-B3细胞超微结构变化。结果随照射时间的延长,caspase-1蛋白表达条带灰度呈递增趋势。照射0、2、4、8 h caspase-1蛋白相对表达量分别为0.05±0.01、0.25±0.07、0.51±0.04和0.74±0.02,总体比较差异有统计学意义(F=168.223,P<0.001),其中照射不同时长两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Neat1 mRNA相对表达量随照射时间延长呈递增趋势,细胞活力值呈递减趋势,照射不同时长两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与阴性siRNA转染组比较,siRNA Neat1转染组细胞活力值升高,阴性siRNA转染+照射组细胞活力值降低,差异均有统计学意义(均P<0.01);与阴性siRNA转染+照射组比较,siRNA Neat1转染+照射组细胞活力值升高,差异有统计学意义(P<0.05)。阴性siRNA转染组和siRNA Neat1转染+照射组细胞焦亡率明显低于阴性siRNA转染+照射组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。阴性siRNA转染+照射组caspase-1、NLRP3、GSDMD蛋白相对表达量均较阴性siRNA转染组和siRNA Neat1转染+照射组高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。阴性siRNA转染+照射组IL-1β质量浓度明显高于阴性siRNA转染组和siRNA Neat1转染+照射组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。透射电子显微镜下观察可见,阴性siRNA转染+照射组和siRNA Neat1转染+照射组细胞肿胀,细胞膜孔隙形成,线粒体肿胀,呈空泡状,线粒体嵴模糊,其中与阴性siRNA转染+照射组相比,siRNA Neat1转染+照射组细胞肿胀程度减轻,细胞膜孔隙减少,线粒体肿胀程度亦减轻。结论Neat1通过caspase-1介导的焦亡经典途径参与紫外线B诱导的人LECs焦亡过程,沉默Neat1可以抑制人LECs焦亡。 展开更多
关键词 白内障 晶状体 上皮细胞 细胞焦亡 紫外线b LncRNA Neat1
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姜黄素在抑制紫外线B诱导的人视网膜色素上皮细胞DNA氧化损伤和凋亡中的作用
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作者 汪涛 何琎 +3 位作者 刘亚 卢萍 张梦瑜 刘建军 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2023年第7期530-535,共6页
目的 探讨姜黄素在紫外线B(UVB)诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞DNA氧化损伤和凋亡中的作用机制。方法 将人视网膜色素上皮细胞株(ARPE-19)随机分为空白对照组、二甲基亚砜(DMSO)组、姜黄素组、UVB照射组、UVB+DMSO组和UVB+姜黄素组。C... 目的 探讨姜黄素在紫外线B(UVB)诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞DNA氧化损伤和凋亡中的作用机制。方法 将人视网膜色素上皮细胞株(ARPE-19)随机分为空白对照组、二甲基亚砜(DMSO)组、姜黄素组、UVB照射组、UVB+DMSO组和UVB+姜黄素组。CCK-8实验检测姜黄素对UVB照射前后ARPE-19细胞活力的影响;免疫荧光检测DNA氧化损伤标志蛋白磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)的定位;Western blot检测γH2AX、凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)和BCL-2相关X蛋白(BAX)]的表达变化;使用X-rosamine衍生物(Mito-Tracker Red CMXRos)和异硫氰酸荧光素(FITC)标记的钙离子依赖的磷脂结核蛋白Annexin V(Annexin V-FITC)来检测UVB诱导的ARPE-19细胞线粒体膜电位变化和细胞凋亡情况。结果 与空白对照组相比,DMSO组DMSO处理24 h后的ARPE-19细胞活力无明显改变(P>0.05)。与DMSO组相比,姜黄素组采用15μmol·L^(-1)姜黄素处理24 h后ARPE-19细胞活力轻度升高(P<0.05),表明15μmol·L^(-1)姜黄素对ARPE-19细胞无毒性作用,后续实验采用该浓度处理细胞。与空白对照组相比,UVB照射组ARPE-19细胞活力降低,γH2AX和BAX蛋白表达水平升高,BCL-2蛋白表达水平降低,线粒体膜电位降低,细胞凋亡增加(均为P<0.05)。与UVB照射组相比,UVB+DMSO组ARPE-19细胞活力,γH2AX、BAX以及BCL-2蛋白表达水平均无明显变化(均为P>0.05),线粒体膜电位和细胞凋亡均无明显改变(均为P>0.05)。与UVB+DMSO组相比,UVB+姜黄素组ARPE-19细胞活力升高,γH2AX和BAX蛋白表达水平降低,BCL-2蛋白表达水平升高,线粒体膜电位升高,细胞凋亡减少(均为P<0.05)。结论 姜黄素能减轻UVB诱导的RPE细胞DNA氧化损伤和凋亡,有望为姜黄素在年龄相关性黄斑变性中的作用机制研究提供新的思路。 展开更多
关键词 姜黄素 紫外线b 人视网膜色素上皮细胞 DNA氧化损伤 细胞凋亡
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不同海拔地区紫外线B辐射状况及植物叶片紫外线吸收物质含量的分析 被引量:64
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作者 师生波 贲桂英 韩发 《植物生态学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期529-535,共7页
对不同海拔地区的太阳 UV- B辐射和植物叶片的光学特性进行了比较研究。结果表明 :位于高海拔地区的海北高寒草甸生态系统定位站 ,太阳 UV- B辐射明显高于相近纬度的西宁、兰州和南京地区。UV- B辐射与总辐射和 PAR的日变化规律相似 ,... 对不同海拔地区的太阳 UV- B辐射和植物叶片的光学特性进行了比较研究。结果表明 :位于高海拔地区的海北高寒草甸生态系统定位站 ,太阳 UV- B辐射明显高于相近纬度的西宁、兰州和南京地区。UV- B辐射与总辐射和 PAR的日变化规律相似 ,都受太阳高度角的直接影响 ,在当地太阳正午时最高。UV- B/Q的日变化也为单峰曲线 ,海北站地区的 UV- B/Q高于西宁的同期测定结果。对珠芽蓼等植物的研究表明 ,生长于海北站地区的珠芽蓼 ,其叶片中紫外线吸收物质的含量明显高于西宁的同种植物 ,也略高于海拔较高的达坂山和小达坂山山顶的同种植物。叶绿素含量以海北站珠芽蓼最低 ,达坂山和小达坂山的同种植物最高。珠芽蓼叶片中类胡萝卜素的含量以西宁最低 ,海北站、达坂山和小达坂山依次升高。海北站矮嵩草与从海北站移植到西宁生长 4年的同种植物相比 ,叶片中紫外线吸收物质、叶绿素。 展开更多
关键词 海拔 太阳 紫外线吸收物质 植物叶片 紫外线b
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水稻对紫外线B辐射增强的抗性遗传分析 被引量:9
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作者 林文雄 梁康迳 +3 位作者 梁义元 陈芳育 郭玉春 曾建敏 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期686-692,共7页
采用加性 -显性遗传模型和统计分析方法 ,分析了水稻对 UV - B辐射增强的抗性遗传特点。结果表明 ,水稻对UV - B辐射增强主要性状抗性指标的遗传受加性和显性效应共同控制 ,其中以显性效应为主。除株高抗性指标不存在狭义遗传率外 ,各... 采用加性 -显性遗传模型和统计分析方法 ,分析了水稻对 UV - B辐射增强的抗性遗传特点。结果表明 ,水稻对UV - B辐射增强主要性状抗性指标的遗传受加性和显性效应共同控制 ,其中以显性效应为主。除株高抗性指标不存在狭义遗传率外 ,各个抗性指标的狭义遗传率和广义遗传率均达显著水平。亲本 R6 6 9和密阳 4 6的 9个抗性指标具有明显的正向加性效应和显性效应值 ,可作为改良对 U V- B辐射增强抗性的理想亲本。进一步对主要性状抗性指标与对照的相应性状进行相关分析 ,认为应把植株较高、分蘖力强、根数多。 展开更多
关键词 水稻 紫外线b 辐射 抗性 遗传分析 显效效应 加性效应
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增强紫外线B辐射对小麦叶绿体膜组分和膜流动性的影响 被引量:52
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作者 杨景宏 陈拓 王勋陵 《植物生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期102-105,共4页
研究了温室种植的小麦在 0 k J.m- 2 (对照 )、8.82 k J.m- 2 (处理 1)和 12 .6 k J.m- 2 (处理 2 ) 3种剂量的紫外线 B辐射下叶绿体膜组分和膜流动性的变化。紫外线 B辐射导致了光合色素 (包括叶绿素和类胡萝卜素 )的降解、Hill反应的... 研究了温室种植的小麦在 0 k J.m- 2 (对照 )、8.82 k J.m- 2 (处理 1)和 12 .6 k J.m- 2 (处理 2 ) 3种剂量的紫外线 B辐射下叶绿体膜组分和膜流动性的变化。紫外线 B辐射导致了光合色素 (包括叶绿素和类胡萝卜素 )的降解、Hill反应的抑制、膜脂肪酸组分配比的改变和不饱和度指数 (IUFA)的下降、膜流动性的降低以及丙二醛 (MDA)含量的升高。分析表明 ,紫外线 B辐射诱导的膜脂过氧化是叶绿体膜系统受破坏的主要原因。 展开更多
关键词 小麦 紫外线b辐射 叶绿体膜系统 膜脂过氧化
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紫外线B辐射与植物体内酚类次生代谢的关系 被引量:27
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作者 姚银安 祖艳群 李元 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2003年第2期179-184,共6页
概述了植物酚类次生代谢产物对紫外线B(UV B)增强引起的辐射伤害的防御作用 ,酚类次生代谢与其它防护机制的相互关系。
关键词 植物 酚类次生代谢 紫外线b辐射 辐射伤害 防护机制 分布 防御作用
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紫外线B照射低温冷冻同种异体神经移植的实验研究 被引量:11
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作者 李天侠 袁杰 张晓东 《中国临床康复》 CAS CSCD 2004年第28期6117-6119,i004,共4页
目的:观察低温冷冻加紫外线B照射的大白鼠的异体神经与新鲜自体神经移植的差异,探讨神经移植的再生机制。方法:以30只健康雄性大白鼠为实验对象,随机分成A,B,C3组,每组后肢一侧移植冷冻加紫外线B照射的同种异体坐骨神经,另一侧移植新鲜... 目的:观察低温冷冻加紫外线B照射的大白鼠的异体神经与新鲜自体神经移植的差异,探讨神经移植的再生机制。方法:以30只健康雄性大白鼠为实验对象,随机分成A,B,C3组,每组后肢一侧移植冷冻加紫外线B照射的同种异体坐骨神经,另一侧移植新鲜自体坐骨神经。于术后2,4,6个月,进行肉眼观察、电生理学检查、腓肠肌和比目鱼肌湿质量测定、组织学观察。结果:在术后2个月时,实验侧、对照侧功能均逐渐恢复,肌肉的颜色、体积两侧差异无显著性意义。诱发肌电图在2个月时呈多相性、低振幅波形,4~6个月时多相性波形减少,振幅增大,肌肉收缩力增强,诱发动作电位峰值,实验侧与对照侧差异无显著性意义;运动神经的神经肌肉传导速度、腓肠肌和比鱼肌湿质量测定实验侧与对照侧也差异无显著性意义(P>0.05);组织学观察两侧神经再生状态基本相似。结论:低温冷冻加紫外线B照射可以充分降低异体神经的免疫原性,与新鲜自体神经移植的效果相似,是具有应用前景的神经移植材料。 展开更多
关键词 紫外线b 照射 对照 低温冷冻 腓肠肌 同种异体神经移植 自体神经移植 显著性 差异 结论
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紫外线B照射对小鼠免疫功能影响的研究 被引量:6
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作者 张晓明 苗榕生 +1 位作者 谢蜀生 陆道培 《中国预防医学杂志》 CAS 2002年第3期216-218,共3页
目的 探讨紫外线B(UVB)照射对小鼠免疫功能的抑制效应和程度。方法 UVB照射后小鼠脾细胞对丝裂原反应,混合淋巴细胞培养,溶血空斑形成细胞及脾细胞的白细胞介素-2(IL-2)产生等非特异免疫功能指标的测定。结果 发现UVB照射小鼠可抑制小... 目的 探讨紫外线B(UVB)照射对小鼠免疫功能的抑制效应和程度。方法 UVB照射后小鼠脾细胞对丝裂原反应,混合淋巴细胞培养,溶血空斑形成细胞及脾细胞的白细胞介素-2(IL-2)产生等非特异免疫功能指标的测定。结果 发现UVB照射小鼠可抑制小鼠脾细胞对ConA、LPS刺激的反应。在20kJ/m^2时,分别为36.6%和41.0%。对异型淋巴细胞混合培养的反应也是有明显抑制效应(抑制率为41.0%),并在约两周恢复正常,对溶血空斑形成细胞(PFC)及脾细胞IL-2的产生亦呈抑制效应(抑制率分别为35.5%和75.0%)。结论 UVB照射小鼠可使其机体免疫功能下降。 展开更多
关键词 紫外线b 小鼠 免疫功能 混林巴细胞培养
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扇贝(Chlamys farreri)多肽通过EGFR抑制受紫外线B(UVB)诱导的HaCaT细胞凋亡 被引量:4
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作者 樊洁 王岩 +2 位作者 孙秀萍 韩彦弢 王春波 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期328-334,共7页
利用Hoechst 33258荧光染色法检测紫外线B(UVB)辐射诱导HaCaT细胞凋亡率。结果表明,扇贝多肽(Polypeptide from Chlamys farreri,PCF)可以剂量依赖性抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡;表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂AG1478能明显抑制UVB诱导的... 利用Hoechst 33258荧光染色法检测紫外线B(UVB)辐射诱导HaCaT细胞凋亡率。结果表明,扇贝多肽(Polypeptide from Chlamys farreri,PCF)可以剂量依赖性抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡;表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂AG1478能明显抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡。采用3’-RACE法构建EGFR的cDNA片段,克隆测序检测突变位点。结果表明,UVB照射后EGFR发生碱基突变A→G,A→G,T→C,G→A,G→A;预加入5.69mmol/L的PCF,产生部分抗突变作用,1,2,3突变位点处未发生碱基的突变。 展开更多
关键词 扇贝多肽(Polypeptide from CHLAMYS farreri PCF) 紫外线b(UVb) 表皮生长因子受体(EGFR) 基因突变 细胞凋亡
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人皮肤成纤维细胞在紫外线B照射后的TGF-β和HSP70表达 被引量:3
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作者 曹宇 汤浩 +2 位作者 赵红艳 张番 杨宇 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期166-168,共3页
目的和方法 :采用人体皮肤成纤维细胞 ,观察了紫外线照射后细胞TGF β表达与HSP70表达水平的相关性。结果 :①经不同剂量的紫外线B照射后 ,TGF βmRNA表达与HSP70表达水平呈正相关 (r =0 .90 6 ) ;②应用抗TGF βⅡ型受体抗体后 ,在紫外... 目的和方法 :采用人体皮肤成纤维细胞 ,观察了紫外线照射后细胞TGF β表达与HSP70表达水平的相关性。结果 :①经不同剂量的紫外线B照射后 ,TGF βmRNA表达与HSP70表达水平呈正相关 (r =0 .90 6 ) ;②应用抗TGF βⅡ型受体抗体后 ,在紫外线B照射后细胞培养上清液中的TGF β含量与细胞HSP70表达水平呈负相关 (r =- 0 .995 )。结论 :在紫外线B照射诱导人皮肤成纤维细胞表达HSP70的反应过程中TGF 展开更多
关键词 人皮肤 成纤维细胞 紫外线b照射 TGF-Β HSP70 表达 转化生长因子-β 热休克蛋白70
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紫外线B辐射对几种植物种间竞争的影响 被引量:11
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作者 岳明 王勋陵 《应用生态学报》 CAS CSCD 2003年第8期1322-1326,共5页
对大田条件下增强的紫外线B(UV B 2 80~ 31 5nm ,约相当于 1 5 %臭氧层衰减 )对小麦和野燕麦等 4个种对的竞争性平衡的影响进行了研究 .结果表明 ,对照和UV B处理时小麦和野燕麦的密度制约死亡规律没有显著差异 ,相对较大的竞争压力加... 对大田条件下增强的紫外线B(UV B 2 80~ 31 5nm ,约相当于 1 5 %臭氧层衰减 )对小麦和野燕麦等 4个种对的竞争性平衡的影响进行了研究 .结果表明 ,对照和UV B处理时小麦和野燕麦的密度制约死亡规律没有显著差异 ,相对较大的竞争压力加强了UV B对这两个物种生物量降低的效应 .UV B辐射处理后 ,按单株生物量和地上部生物量 ,UV B增强了小麦对野燕麦的竞争优势 ,但是以单株籽粒数及籽粒重为依据的k1 2 值在紫外辐射处理后却下降 .竞争性平衡的改变伴随着两者总生物量的显著下降 ,特别是在较高的密度条件下 .紫外辐射对其它 3个种对的竞争性平衡有着不同程度与方向上的影响 .一般情况下UV B使竞争性平衡向有利于单子叶植物的方向发展 .这一结果暗示 ,竞争胁迫 ,特别是种间竞争对正确评估UV 展开更多
关键词 紫外线b 竞争 臭氧层减薄 小麦
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紫外线B增强对滇杨、川杨光合参数及暗呼吸的影响 被引量:3
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作者 任健 单贵莲 +2 位作者 代微然 马向丽 杨春勐 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2016年第1期95-100,共6页
在自然条件下利用紫外灯补充紫外线B,模拟臭氧层破坏10%、20%后昆明地区增加的紫外线B强度2.5和5 k J/(m^2·d),研究了紫外线B增加对滇杨(Populus yunnanensis)(2 430 m)和川杨(P.szechuanica)(3 300 m)光合参数、暗呼吸速率、叶片... 在自然条件下利用紫外灯补充紫外线B,模拟臭氧层破坏10%、20%后昆明地区增加的紫外线B强度2.5和5 k J/(m^2·d),研究了紫外线B增加对滇杨(Populus yunnanensis)(2 430 m)和川杨(P.szechuanica)(3 300 m)光合参数、暗呼吸速率、叶片厚度的影响。结果表明:与对照相比,2.5和5 k J/(m^2·d)紫外线B处理使滇杨的净光合速率(Pn)分别降低了32%和51%,川杨则降低了16%和39%;相反,2.5和5 k J/(m^2·d)紫外线B显著提高了暗呼吸速率(Rd)和叶片厚度;相关性分析表明:两种杨树的叶片净光合速率与水分利用效率均呈显著正相关,与暗呼吸速率呈显著的负相关(P<0.01)。此外,2.5 k J/(m^2·d)紫外线B强度对滇杨和川杨的气孔导度、暗呼吸速率及其与净光合效率比值的影响不同;且川杨的净光合速率、暗呼吸速率、叶片厚度都显著大于滇杨,这些差异反映出生长在高海拔环境下的川杨比生长在低海拔的滇杨对紫外线B增强具有更强的耐性。 展开更多
关键词 紫外线b 净光合速率 暗呼吸速率 水分利用效率
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紫外线B对海洋生态系统的影响 被引量:5
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作者 周秋麟 尹卫平 陈宝红 《台湾海峡》 CAS CSCD 2004年第1期107-115,共9页
本文根据国内外的相关研究资料,讨论了紫外线辐射(主要是紫外线B)对海洋生态系统中各个层次的海洋生物(包括浮游植物、细菌、底栖藻类、微型和小型动物以及养殖经济生物等)的影响及其对海洋环境中的污染物的效应,结果表明紫外线辐射不... 本文根据国内外的相关研究资料,讨论了紫外线辐射(主要是紫外线B)对海洋生态系统中各个层次的海洋生物(包括浮游植物、细菌、底栖藻类、微型和小型动物以及养殖经济生物等)的影响及其对海洋环境中的污染物的效应,结果表明紫外线辐射不但对各类海洋生物有比较明显的直接作用,并且通过生态关系进一步影响到整个海洋生态系统的结构,对海洋生态系统造成威胁. 展开更多
关键词 紫外线b 海洋生态系统 海洋科学 污染物 臭氧层损耗
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紫外线B对水稻叶组织中活性氧代谢及膜系统的影响 被引量:114
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作者 晏斌 戴秋杰 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 1996年第4期373-378,共6页
增强UV-B处理下,水稻叶片的O净产生速率、H2O2和MDA含量以及膜透性都显著增加,敏感性弱的品种O2净产生速率和膜伤害程度较低。在UV-B处理初期活性氧清除系统的水平增高,但随着处理时间的延长,SOD、CAT和A... 增强UV-B处理下,水稻叶片的O净产生速率、H2O2和MDA含量以及膜透性都显著增加,敏感性弱的品种O2净产生速率和膜伤害程度较低。在UV-B处理初期活性氧清除系统的水平增高,但随着处理时间的延长,SOD、CAT和AP活性以及ASA含量降低,其中AP和SOD活性的下降最为明显,而敏感性弱的品种SOD活性始终高于敏感性强的品种。处理14d后去掉UV-B,再经则14d上述各指标均恢复到与对照相近的水平。根据这些结果推测,水稻的UV-B伤害可能主要是由于SOD活性的降低而导致O增生和膜脂过氧化。 展开更多
关键词 水稻 紫外线b 膜透性 活性氧代谢 叶片
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紫外线B照射在抑制人视网膜色素上皮细胞自噬中的作用 被引量:3
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作者 石磊 王爱媛 +1 位作者 归东梅 杨宏伟 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2021年第4期306-310,共5页
目的探讨紫外线B(ultraviolet B,UVB)照射在抑制人视网膜色素上皮细胞株ARPE-19细胞自噬中的作用。方法不同剂量UVB照射ARPE-19细胞后不同时间收集细胞,应用MTT法检测UVB照射对细胞存活的影响;Western blot检测细胞中自噬蛋白LC3的表达... 目的探讨紫外线B(ultraviolet B,UVB)照射在抑制人视网膜色素上皮细胞株ARPE-19细胞自噬中的作用。方法不同剂量UVB照射ARPE-19细胞后不同时间收集细胞,应用MTT法检测UVB照射对细胞存活的影响;Western blot检测细胞中自噬蛋白LC3的表达及LC3-II/LC3-I比率、Beclin-1蛋白表达水平;应用细胞自噬增强剂雷帕霉素(rapamycin,RAPA)和细胞自噬抑制剂氯化铵(NH4Cl)进一步验证UVB照射对于细胞自噬的调节;采用环氧霉素(epoxomicin,EPO)检测泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)对于UVB作用的影响。MTT法检测细胞自噬变化对于细胞生存的影响。结果UVB照射组诱导细胞剂量依赖性的死亡,100 mJ·cm^(-2) UVB照射后24 h细胞出现明显死亡,和对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);200 mJ·cm^(-2) UVB照射后24 h和对照组相比差异有显著统计学意义(P<0.01);两种剂量的UVB照射后48 h细胞有一定程度的恢复。和对照组相比,UVB照射组ARPE-19细胞中LC3-II/LC3-I比率和Beclin-1蛋白表达水平均降低(均为P<0.05)。和UVB照射组相比,UVB+RAPA组ARPE-19细胞中明显升高了LC3-II/LC3-I比率,UVB+NH4Cl组进一步降低了LC3-II/LC3-I比率,RAPA和NH4Cl在一定程度上恢复了UVB照射降低的Beclin-1蛋白表达水平(均为P<0.05)。和对照组相比,EPO组明显增加了ARPE-19细胞中LC3-II/LC3-I比率、升高了Beclin-1蛋白表达水平(均为P<0.05)。与UVB照射组相比,UVB+EPO组ARPE-19细胞中LC3-II/LC3-I比率无明显改变(P>0.05),而Beclin-1蛋白表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,RAPA组细胞死亡率增多,两组间差异有统计学意义(P<0.05),NH4Cl组细胞无明显死亡,与UVB照射组相比,UVB+RAPA组和UVB+NH4Cl组细胞死亡率均无明显改变(均为P>0.05)。细胞自噬的改变不能逆转UVB诱导的ARPE-19细胞死亡。结论UVB照射抑制了ARPE-19细胞自噬的启动及自噬流,UPS的改变不影响UVB对于自噬流的抑制。UVB照射可通过减少RPE细胞、损害细胞自噬能力增加RPE细胞变性,增加年龄相关性黄斑变性发生的风险。 展开更多
关键词 紫外线b 年龄相关性黄斑变性 视网膜色素上皮细胞 自噬
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紫外线B照射对人晶状体上皮细胞质膜钙ATP酶3表达的影响 被引量:3
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作者 吴秋欣 郭大东 +1 位作者 毕宏生 王道光 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期485-491,共7页
背景 细胞质膜钙ATP酶3(PMCA3)参与维持晶状体上皮细胞(LECs) Ca2+的平衡,可能与白内障的病理过程有关,紫外线B(UVB)是引起白内障的重要因素之一,但UVB对LECs中PMCA3表达的影响少有报道. 目的 研究UVB对人LECs系B-3(HLE B-3) P... 背景 细胞质膜钙ATP酶3(PMCA3)参与维持晶状体上皮细胞(LECs) Ca2+的平衡,可能与白内障的病理过程有关,紫外线B(UVB)是引起白内障的重要因素之一,但UVB对LECs中PMCA3表达的影响少有报道. 目的 研究UVB对人LECs系B-3(HLE B-3) PMCA3表达的影响. 方法 对HLE B-3细胞进行培养和传代,当细胞达80%以上融合时分别暴露于用不同剂量(0、5、10、20 mJ·s/cm2)的UVB分别照射0、20、40和80 s,然后继续培养24、48和72 h,用MTT法检测不同剂量UVB照射后细胞的生存率;用JC-1染色法检测UVB照射后细胞线粒体膜电位(△ψm)的变化;以DCFH-DA染色法检测UVB照射后细胞内活性氧簇(ROS)的变化;采用annexin V-FITC/PI染色法检测UVB照射后细胞的凋亡情况;用Fluo-3/AM染色法检测细胞内Ca2+浓度的变化;分别采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)法和Western blot法检测UVB照射后细胞中PMCA3 mRNA及PMCA蛋白的表达变化. 结果 随着UVB照射剂量的增加和照射时间的延长,细胞生存率均明显下降,差异均有统计学意义(F分组=72.411,P=0.000; F时间=36.588,P=0.000),其中10 mJ·s/cm2、20 mJ·s/cm2 UVB照射后24 h HLE B-3细胞的生存率分别为(75.3±2.2)%和(48.7±4.5)%,明显低于对照组的(100.0±0.0)%,差异均有统计学意义(P=0.001、0.000);5、10、20 mJ·s/cm2 UVB照射后48 h细胞的生存率分别为(84.9±1.2)%、(69.3±17.4)%和(32.8±4.5)%,均明显低于对照组的(100.0±0.0)%,差异均有统计学意义(P=0.047、0.000、0.000);5、10、20 mJ·s/cm2 UVB照射后72 h细胞的生存率分别为(55.1±3.0)%、(42.1±1.9)%和(26.1±4.7)%,与对照组的(100.0±0.0)%相比生存率明显降低,差异均有统计学意义(均P=0.000).JC-1染色法检测表明,对照组细胞内可见红色荧光,5mJ·s/cm2 UVB照射后细胞内出现绿色荧光,10 mJ·s/cm2及20 mJ·s/cm2 UVB照射组出现绿色荧光增强,红色荧光减弱.5、10、20 mJ· s/cm2 UVB照射后细胞内的ROS由0.4%分别增加至35.8%、51.9%和76.7%.0 mJ·s/cm2 UVB照射组凋亡和坏死细胞比例为2.0%,5、10、20 mJ·s/cm2 UVB照射组凋亡和坏死细胞率分别为4.2%、7.6%和15.1%.10 mJ·s/cm2和20 mJ·s/cm2 UVB照射组细胞内Ca2+水平分别为0 mJ·s/cm2照射组的(1.2±0.1)倍和(1.3±0.1)倍,差异均有统计学意义(P=0.039、0.004).5、10和20 mJ·s/cm2 UVB照射组HLE B-3细胞PMCA3 mRNA表达量均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P=0.001、0.004、0.000),各组细胞中的PMCA蛋白相对表达量也均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P=0.000、0.000、0.001). 结论 UVB照射可导致白内障发生的机制可能与人LECs中PMCA3表达量下降和诱导LECs凋亡有关,UVB的作用呈剂量和时间依赖性. 展开更多
关键词 紫外线b 钙稳态 质膜钙ATP酶3 细胞凋亡 人晶状体上皮细胞
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长期紫外线B辐射对豚鼠角膜的损伤作用 被引量:3
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作者 马璇 黄强 吴开力 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2005年第4期358-360,共3页
目的研究长期紫外线B(UVB)照射作用下,豚鼠角膜受损害的位置及受损后形态结构的变化。方法16只豚鼠随机平均分为UVB照射组和对照组。对前者反复进行UVB照射眼部,每周1或2次,共29周,强度为0·15mW/cm2(总量为8·2J/cm2)。在实验... 目的研究长期紫外线B(UVB)照射作用下,豚鼠角膜受损害的位置及受损后形态结构的变化。方法16只豚鼠随机平均分为UVB照射组和对照组。对前者反复进行UVB照射眼部,每周1或2次,共29周,强度为0·15mW/cm2(总量为8·2J/cm2)。在实验的不同时期,行裂隙灯检查、Scheimpflug眼前部照相、内皮镜照相并分析,最后对角膜切片染色进行组织学观察。结果UVB照射后,可见角膜上皮损伤,基质出现变性样改变,并有新生血管形成;角膜水肿增厚,第16周厚度为0·38mm,30周为0·39mm,同期对照组分别为0·34mm和0·35mm;内皮细胞面积增大、密度下降,第30周细胞面积为(462·8±21·2)μm2,细胞密度为(2168·0±98·9)个/mm2,而同期对照组分别为(397·6±19·4)μm2,和(2508·1±111·2)个/mm2。结论对豚鼠眼部长期反复进行UVB照射可损伤角膜上皮、基质、内皮,以上皮和浅基质层损害最甚。 展开更多
关键词 紫外线b 辐射损伤 豚鼠 角膜损伤 角膜水肿 细胞密度
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日光紫外线B辐射对甜荞苯丙烷代谢的影响 被引量:1
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作者 姚银安 杨爱华 徐刚 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期152-155,共4页
对甜荞(Fagopyrumesculentum Moench)苯丙烷次生代谢受紫外线B辐射的响应进行了研究。结果表明:不仅卢丁、槲皮素等黄酮类化合物含量在紫外线B辐射下显著升高,而且叶片苯丙烷单环酚类化合物,如阿魏酸含量等也大幅度升高,两类化合物的应... 对甜荞(Fagopyrumesculentum Moench)苯丙烷次生代谢受紫外线B辐射的响应进行了研究。结果表明:不仅卢丁、槲皮素等黄酮类化合物含量在紫外线B辐射下显著升高,而且叶片苯丙烷单环酚类化合物,如阿魏酸含量等也大幅度升高,两类化合物的应激提高对甜荞的UV-B胁迫提供了重要的保护作用。 展开更多
关键词 甜荞 紫外线b 次生代谢 卢丁
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紫外线B、臭氧、磁场协同沼泽红假单胞菌降解废水中的苯酚的效果 被引量:1
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作者 吴芳芳 郑有飞 +1 位作者 胡正华 陈魁 《生态环境》 CSCD 北大核心 2008年第1期59-63,共5页
为了提高沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)在降解有机污染物过程中对开放环境的适应性,进一步提高对污染物的降解活性,分别应用紫外线B、臭氧、磁场协同沼泽红假单胞菌对苯酚溶液及炼油厂含酚废水进行降解试验,比较不同协同... 为了提高沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)在降解有机污染物过程中对开放环境的适应性,进一步提高对污染物的降解活性,分别应用紫外线B、臭氧、磁场协同沼泽红假单胞菌对苯酚溶液及炼油厂含酚废水进行降解试验,比较不同协同方式的作用效果。试验得出:在三种方式的协同降解过程中沼泽红假单胞菌的生长量、脱氢酶活性和苯酚的降解率显著高于对照。其中紫外线B协同沼泽红假单胞菌降解苯酚的处理与对照比较,菌体生长量增加了33.53%,在对数生长期的生长速率增加了10%,降解72h时其脱氢酶活性增强了31.77%。协同处理对人工废水和炼油厂含酚废水的降解效率都有显著提高。结果表明:一定强度的紫外线B、臭氧、磁场能促进沼泽红假单胞菌的生长,增强其脱氢酶活性,提高对苯酚的降解。紫外线B、臭氧、磁场协同沼泽红假单胞菌在降解苯酚过程中,沼泽红假单胞菌对开放环境的适应能力提高。 展开更多
关键词 紫外线b 臭氧 磁场 沼泽红假单胞菌 协同降解 苯酚
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紫外线B抑制人角质细胞生长及维生素E的保护作用 被引量:3
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作者 杜华 丁振华 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第4期326-328,共3页
目的观察HaCat人角质细胞在不同剂量紫外线B(UVB)照射下培养不同时间后的存活率及细胞周期分布情况,并探讨维生素E(VE)对其影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)染色法和流式细胞术分析受UVB照射细胞的存活率和细胞周期各时相的变化。结果... 目的观察HaCat人角质细胞在不同剂量紫外线B(UVB)照射下培养不同时间后的存活率及细胞周期分布情况,并探讨维生素E(VE)对其影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)染色法和流式细胞术分析受UVB照射细胞的存活率和细胞周期各时相的变化。结果UVB剂量不同,培养时间相同时,随剂量增加,存活率逐渐减少;照射剂量相同,培养时间不同时,随时间延长,细胞存活率下降到最低值后有恢复(照射15 min除外)。细胞周期结果分析表明:小于5 min的UVB照射剂量,随着细胞培养时间的延长,细胞增殖指数:(S+G2)/(G1+S+G2)不断提高;大于或等于5 min的照射剂量,随培养时间延长细胞增殖指数逐渐减少。VE对UVB照射所致的HaCat细胞生长抑制有保护作用,40 μg/ml为VE最佳剂量。结论UVB在一定的照射剂量和培养时间内抑制人角质细胞的生长,VE对此有拮抗作用。 展开更多
关键词 人角质细胞 紫外线b 维生素E 细胞周期
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