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野生大豆紫色酸性磷酸酶PAP1基因的克隆及分析 被引量:7
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作者 王军卫 侯立江 +4 位作者 李登 程春明 王瑞珍 赵现伟 赵朝森 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期596-600,共5页
以低磷胁迫处理的野生大豆w343叶片为材料,根据大豆的GmPAP1基因设计一对特异引物,采用同源克隆的方法获得了野生大豆紫色酸性磷酸酶PAP1基因的cDNA序列,并将其命名为GsPAP1。该基因与已报道的大豆GmPAP1基因长度一致,均为999 bp,编码33... 以低磷胁迫处理的野生大豆w343叶片为材料,根据大豆的GmPAP1基因设计一对特异引物,采用同源克隆的方法获得了野生大豆紫色酸性磷酸酶PAP1基因的cDNA序列,并将其命名为GsPAP1。该基因与已报道的大豆GmPAP1基因长度一致,均为999 bp,编码332个氨基酸,分子量为37.71 kD,等电点为7.38。但在cDNA的编码区共有9处发生了碱基的替代,其中有5处转换和4处颠换,有7处编码的氨基酸残基不同,其序列一致性达99.38%。系统进化树分析表明,野生大豆GsPAP1基因与大豆、羽扇豆、甘薯、葡萄等植物的PAP1基因有较高同源性。 展开更多
关键词 野生大豆 紫色酸性磷酸酶 耐低磷基因 抗逆性
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西尔斯山羊草紫色酸性磷酸酶PAP1基因的克隆及分析 被引量:3
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作者 侯立江 牛娜 +4 位作者 马守才 宋亚珍 王强 张改生 王军卫 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期105-111,共7页
旨在利用基因工程手段将AeSePAP1基因转入到小麦,为获得耐低磷胁迫的小麦品种奠定基础。以西尔斯山羊草的叶片为材料,根据小麦和二穗短柄草的PAP1基因设计特异引物,采用同源克隆的方法获得西尔斯山羊草紫色酸性磷酸酶PAP1基因的cDNA序列... 旨在利用基因工程手段将AeSePAP1基因转入到小麦,为获得耐低磷胁迫的小麦品种奠定基础。以西尔斯山羊草的叶片为材料,根据小麦和二穗短柄草的PAP1基因设计特异引物,采用同源克隆的方法获得西尔斯山羊草紫色酸性磷酸酶PAP1基因的cDNA序列,并将其命名为AeSePAP1。该基因长1.03kb,编码335个氨基酸,分子质量为37.95ku,等电点为5.55。与小麦PAP1基因相比,西尔斯山羊草PAP1基因的cDNA的编码区有36处发生碱基替代,包括24处转换和12处颠换,有16处编码的氨基酸残基不同,其序列一致性达94.66%。对AeSePAP1基因编码的蛋白质进行生物信息学分析发现,该蛋白具有信号肽和跨膜结构,定位于质膜或分泌到胞外。系统进化树分析表明,西尔斯山羊草紫色酸性磷酸酶PAP1基因与普通小麦、短柄草、谷子的PAP1基因同源性较高。 展开更多
关键词 西尔斯山羊草 紫色酸性磷酸酶 耐低磷基因 抗逆性
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苹果紫色酸性磷酸酶相关基因MdPAP10的克隆及功能鉴定 被引量:1
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作者 李睿 安建平 +2 位作者 由春香 王小非 郝玉金 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1182-1191,共10页
【目的】克隆苹果紫色酸性磷酸酶相关基因Md PAP10,研究其组织表达模式和低磷响应,并进一步研究Md PAP10在低磷条件下的功能,为深入研究Md PAP10在果树中参与紫色酸性磷酸酶分泌和影响磷吸收的分子机理奠定基础。【方法】本研究以‘嘎... 【目的】克隆苹果紫色酸性磷酸酶相关基因Md PAP10,研究其组织表达模式和低磷响应,并进一步研究Md PAP10在低磷条件下的功能,为深入研究Md PAP10在果树中参与紫色酸性磷酸酶分泌和影响磷吸收的分子机理奠定基础。【方法】本研究以‘嘎啦’苹果(Malus×domestica‘Royal Gala’)为试材,利用同源序列比对和PCR技术,克隆苹果紫色酸性磷酸酶相关基因Md PAP10。通过NCBI分析Md PAP10的蛋白质结构并获得白梨、桃和草莓等10个物种的PAP10氨基酸序列,利用MEGA5.0构建系统进化树。利用q RT-PCR检测Md PAP10在苹果不同组织的表达情况和对低磷胁迫的响应特性。将Md PAP10连接到植物过表达载体p BI121,转化LBA4404农杆菌,用于侵染苹果愈伤组织。通过在抗性培养基上筛选和PCR鉴定,获得Md PAP10转基因愈伤组织。在低磷培养基上培养Md PAP10转基因愈伤组织检测其酸性磷酸酶积累情况以及对低磷胁迫的耐受性和磷含量。最后利用q RT-PCR检测Md PAP10转基因愈伤组织中磷相关基因的表达量。【结果】克隆获得苹果紫色酸性磷酸酶基因Md PAP10(基因序列号:MDP0000272096),开放阅读框为1 332 bp,编码含有443个氨基酸的蛋白。蛋白质结构分析显示,Md PAP10包含一个信号肽和一个磷酸酶结构域。基因结构分析显示,Md PAP10含有5个外显子和4个内含子。进化树分析显示,苹果Md PAP10与白梨Pb PAP10同源性最高,亲缘关系最近。表达分析显示,Md PAP10在根、茎、叶、花、果中均有表达,并且在根中的表达量最高。Md PAP10对低磷条件有明显响应,在根中表达量逐渐升高,在6 h达到最大后逐渐下降;在叶中的表达量始终低于对照组。Md PAP10转基因愈伤组织在低磷条件下能够明显促进酸性磷酸酶的分泌。在低磷条件下培养转基因愈伤组织20 d发现过表达Md PAP10提高了愈伤组织对低磷胁迫的耐受性,并且提高了对磷的吸收。q RT-PCR结果显示,过表达Md PAP10能够明显促进苹果磷相关基因的表达。【结论】Md PAP10能够对低磷胁迫有明显响应,在低磷条件下能够促进磷吸收和酸性磷酸酶的分泌。Md PAP10在响应低磷胁迫过程中发挥着重要的正调控作用。 展开更多
关键词 苹果 紫色酸性磷酸酶 MD pap10 表达分析 功能鉴定
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双角山羊草紫色酸性磷酸酶PAP1基因的克隆及生物信息学分析 被引量:1
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作者 侯立江 牛娜 +4 位作者 马守才 王强 宋亚珍 张改生 王军卫 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2015年第2期35-40,共6页
通过对双角山羊草紫色酸性磷酸酶PAP1基因的核酸和氨基酸序列进行相关生物信息学分析,旨在进一步利用基因工程手段将Ae Bi PAP1基因转入到小麦中,为获得耐低磷胁迫能力增强的小麦品种提供种质基因。以双角山羊草叶片为材料,根据小麦中的... 通过对双角山羊草紫色酸性磷酸酶PAP1基因的核酸和氨基酸序列进行相关生物信息学分析,旨在进一步利用基因工程手段将Ae Bi PAP1基因转入到小麦中,为获得耐低磷胁迫能力增强的小麦品种提供种质基因。以双角山羊草叶片为材料,根据小麦中的PAP1基因和二穗短柄草的PAP1基因设计兼并引物,采用同源克隆的方法,获得了双角山羊草紫色酸性磷酸酶PAP1基因的c DNA序列,并将其命名为Ae Bi PAP1,该双角山羊草紫色酸性磷酸酶PAP1基因长1.124 kb,共编码335个氨基酸,相应的氨基酸分子量为38.131 k Da,等电点为5.77。与小麦中的PAP1基因相比,双角山羊草PAP1的c DNA编码区发生碱基替代的地方共有35处,包含13处颠换与22处转换,有15处编码的氨基酸残基不同,其序列一致性达95.52%。对Ae Bi PAP1基因编码的蛋白质进行生物信息学分析发现,该蛋白具有一个信号肽但却没有跨膜结构,对Ae Bi PAP1编码蛋白进行三级结构预测发现,该编码蛋白包含金属离子结合中心,预测它属于金属蛋白。因此,将其定位于质膜比分泌到胞外的概率要高,通过对同源蛋白质氨基酸序列进行系统进化树分析,结果表明,双角山羊草紫色酸性磷酸酶PAP1基因与普通小麦的亲缘关系最近,与粳稻、短柄草、谷子亲缘关系较近,与大麦、乌拉尔图小麦、水稻以及节节麦等植物的亲缘关系较远。 展开更多
关键词 双角山羊草 紫色酸性磷酸酶 耐低磷基因
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马尾松紫色酸性磷酸酶基因PmPAP1的克隆与表达模式分析 被引量:1
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作者 张婷 丁贵杰 文晓鹏 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2016年第6期797-806,共10页
[目的]研究马尾松紫色酸性磷酸酶基因功能及其对低磷胁迫的应答。[方法]采用RACE法克隆马尾松紫色酸性磷酸酶(PAPs)家族成员Pm PAP1,利用软件和数据库,对基因结构功能进行多重分析预测,检测其接种外生真菌及低磷胁迫下的表达模式。[结果... [目的]研究马尾松紫色酸性磷酸酶基因功能及其对低磷胁迫的应答。[方法]采用RACE法克隆马尾松紫色酸性磷酸酶(PAPs)家族成员Pm PAP1,利用软件和数据库,对基因结构功能进行多重分析预测,检测其接种外生真菌及低磷胁迫下的表达模式。[结果]表明,Pm PAP1基因c DNA全长2 520 bp,开放阅读框1 869 bp,编码622个氨基酸残基,具紫色酸性磷酸酶保守结构域特征,属于高分子量PAPs。Pm PAP1有信号肽,无跨膜区,推测定位于细胞质基质或细胞器基质中,它与莲(Nelumbo nucifera)、无油樟(Amborella trichopoda)的亲缘关系最近,相似性分别达71%和69%,进化关系古老、保守性强。时空表达分析表明,Pm PAP1的表达受外生菌根诱导,在不同组织中均有表达,其根中的表达量显著高于茎和叶。在菌根化和非菌根化的幼苗中,Pm PAP1的表达均受基质中磷含量的影响,表现为低磷条件下高效激活,高磷条件下其表达反而受到抑制。低磷胁迫下根系中酸性磷酸酶活性持续增高,说明其活性与磷供给水平和时间有相关性。[结论]首次克隆鉴定了1个受外生菌根诱导的马尾松紫色酸性磷酸酶基因,其参与了对低磷胁迫的应答,为深刻认识马尾松耐低磷的分子机制、遗传改良提供了新信息和新思路。 展开更多
关键词 马尾松 外生菌根 紫色酸性磷酸酶基因 表达分析
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小麦紫色酸性磷酸酶基因TaPAPhyb1的分子特征及在低磷下表达特性 被引量:3
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作者 赵媛媛 崔喜荣 +1 位作者 郭程瑾 肖凯 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期8-12,19,共6页
在富集低磷上调表达的小麦根系cDNA差减文库中,鉴定了1个与大麦紫色酸性磷酸酶基因Hv-PAPhyb1高度同源的表达序列标签TaPAPhyb1-EST。经同源查找获得了该EST对应的基因(TaPAPhyb1)。TaPAPhyb1 cDNA全长2 045bp,编码537个aa。TaPAPhyb1... 在富集低磷上调表达的小麦根系cDNA差减文库中,鉴定了1个与大麦紫色酸性磷酸酶基因Hv-PAPhyb1高度同源的表达序列标签TaPAPhyb1-EST。经同源查找获得了该EST对应的基因(TaPAPhyb1)。TaPAPhyb1 cDNA全长2 045bp,编码537个aa。TaPAPhyb1定位为细胞质膜,含有1个由20个aa组成位于N-端的信号肽和紫色酸性磷酸酶共有的3个保守域。TaPAPhyb1与源于大麦、短柄草、黑麦和一粒小麦等的同源蛋白可能具有相同的祖先。TaPAPhyb1对低磷逆境产生特异性应答,随外源磷水平降低及低磷处理时间延长在根、叶中的表达水平不断上升。低磷下高表达的TaPAPhyb1,在植株恢复正常供磷后其表达水平不断回落。与叶相比,TaPAPhyb1在根中应答低磷能力更强。本研究表明,TaPAPhyb1在调控小麦植株应答和抵御低磷逆境中可能发挥着重要功能。 展开更多
关键词 小麦 紫色酸性磷酸酶基因 养分胁迫 低磷逆境 分子特征 表达
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转紫色酸性磷酸酶基因GmPAP14大豆研究 被引量:2
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作者 毛璐璐 孔佑宾 +1 位作者 李喜焕 张彩英 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2016年第11期25-29,共5页
为获得磷高效利用转基因大豆新材料,构建紫色酸性磷酸酶基因GmPAP14超表达载体pBI121-GmPAP14与pCAMBIA3301-GmPAP14,通过农杆菌介导子叶节转化技术将2个载体分别转入高产优质大豆品种,并分析了GmPAP14在转基因植株内的表达情况。结果显... 为获得磷高效利用转基因大豆新材料,构建紫色酸性磷酸酶基因GmPAP14超表达载体pBI121-GmPAP14与pCAMBIA3301-GmPAP14,通过农杆菌介导子叶节转化技术将2个载体分别转入高产优质大豆品种,并分析了GmPAP14在转基因植株内的表达情况。结果显示,利用PCR和DNA测序分析可检测到转化植株中的目的条带,其中,转入p BI121-GmPAP14载体的保豆3号阳性植株有6株;转入pCAMBIA3301-GmPAP14载体的中豆32有9株,冀豆12有11株,农大豆2号20株。进一步将上述T0植株自交,目前已获得T_1转基因后代;经实时定量PCR检测,部分株系的GmPAP14表达量显著高于野生型对照,说明GmPAP14已整合到大豆基因组,并能够在转录水平正常表达。 展开更多
关键词 大豆 紫色酸性磷酸酶基因 载体构建 遗传转化 基因表达
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杉木紫色酸性磷酸酶基因ClPAP18b的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 周梦岩 赵铭臻 +4 位作者 李亚超 裴志阳 张健 马祥庆 李明 《植物营养与肥料学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1234-1246,共13页
【目的】以速生丰产型杉木无性系洋023、洋036、洋6421和拟南芥为材料,研究杉木中紫色酸性磷酸酶(PAPs)的功能作用,以筛选具有磷素高效利用特性的杉木无性系。【方法】采用PCR技术克隆PAP18b基因,分析其序列特征和同源性,并对杉木无性系... 【目的】以速生丰产型杉木无性系洋023、洋036、洋6421和拟南芥为材料,研究杉木中紫色酸性磷酸酶(PAPs)的功能作用,以筛选具有磷素高效利用特性的杉木无性系。【方法】采用PCR技术克隆PAP18b基因,分析其序列特征和同源性,并对杉木无性系洋023、洋036、洋6421进行正常供磷(1.0 mmol/L KH2PO4)和低磷胁迫(0.1 mmol/L KH_(2)PO_(4),0.9 mmol/L KCl)砂培盆栽处理0、10、15、30和60天,测定酸性磷酸酶活性及全磷含量,定量分析根和叶中ClPAP18b基因表达量、磷含量及酸性磷酸酶活性的关系,并将ClPAP18b基因过表达至拟南芥,进行该基因的功能验证。【结果】成功克隆获得杉木PAP18b基因CDS序列(1212 bp),命名为ClPAP18b,该基因编码404个氨基酸,亚细胞定位于胞间区,这表明ClPAP18b基因可能发挥调控酸性磷酸酶分泌至胞外的功能。酸性磷酸酶活性测定结果表明,30天磷处理后,正常供磷和低磷处理下,杉木洋036和洋6421无性系根中的酸性磷酸酶活性均高于叶,而根中酸性磷酸酶活性低磷处理下高于正常供磷处理;洋023的根和叶中酸性磷酸酶活性在低磷胁迫诱导下多高于正常供磷条件下根和叶中酸性磷酸酶活性。磷含量分析结果表明,杉木洋023、洋036和洋6421无性系的地上部磷含量高于地下部,不同水平供磷处理后,不同杉木无性系或同一杉木不同组织磷含量存在差异。RT-qPCR结果显示,低磷胁迫诱导杉木ClPAP18b基因表达。低磷条件下,ClPAP18b过表达拟南芥植株长势优于对照组,且过表达植株中的酸性磷酸酶活性叶高于对照组,但花青素积累量低于对照组。此外,相比于正常供磷处理植株,过表达ClPAP18b拟南芥中PHT1;2、PHT1;8和AtPAP26等与磷胁迫相关的基因表达量显著高于对照组,而AtPAP12和AtPAP17基因表达量明显降低。【结论】低磷胁迫诱导杉木ClPAP18b基因表达和酸性磷酸酶活性增强,但不同杉木无性系对磷缺乏的适应性存在明显差异,过表达ClPAP18b基因可促进拟南芥植株耐低磷胁迫,ClPAP18b基因可能在杉木低磷胁迫调节机制中发挥调控作用,可作为改良杉木耐低磷的重要候选基因。 展开更多
关键词 紫色酸性磷酸酶 杉木 磷胁迫 Clpap18b基因过表达 RT-QPCR
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大豆紫色酸性磷酸酶GmPAP14克隆与生物信息学分析 被引量:9
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作者 孔佑宾 宁英达 +3 位作者 刘渊 李喜焕 常文锁 张彩英 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期7-11,24,共6页
采用RT-PCR技术克隆大豆紫色酸性磷酸酶(Purple acid phosphatase,PAP)基因,并对基因及其编码蛋白进行生物信息学分析,为植物磷高效转基因育种及分子机制解析提供候选基因。结果表明:从低磷处理14d的‘中黄15’cDNA中克隆获得一条开放... 采用RT-PCR技术克隆大豆紫色酸性磷酸酶(Purple acid phosphatase,PAP)基因,并对基因及其编码蛋白进行生物信息学分析,为植物磷高效转基因育种及分子机制解析提供候选基因。结果表明:从低磷处理14d的‘中黄15’cDNA中克隆获得一条开放阅读框1 395bp的基因,经保守域分析发现该基因属于紫色酸性磷酸酶类,命名为GmPAP14(GenBank No.JN967626)。对基因编码蛋白进行生物信息学分析发现,GmPAP14编码1条含有464个氨基酸残基的多肽链,分子量约53.1kD,理论等电点6.14,且含有紫色酸性磷酸酶所特有的5个保守基序和7个金属离子结合位点。进一步分析发现GmPAP14具有跨膜结构与信号肽,定位于质膜或分泌到胞外。经系统发育树分析显示GmPAP14与苜蓿MtPAP1及大豆GmPAP1具有同源性,预测可能与植物磷素高效吸收利用有关。 展开更多
关键词 低磷胁迫 大豆 紫色酸性磷酸酶(pap)基因 生物信息学
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甘蓝和白菜紫色酸性磷酸酶17基因家族的克隆和比较分析 被引量:9
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作者 卢坤 张凯 +3 位作者 柴友荣 陆俊杏 唐章林 李加纳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期517-525,共9页
从甘蓝和白菜中分别克隆到2个PAP17,根据序列相似性,将PAP17分为类型I(BoPAP17-1和BrPAP17-1)和类型II(BoPAP17-2和BrPAP17-2)。Southern杂交表明,白菜和甘蓝中均只存在2个PAP17成员,与克隆结果吻合。系统发育和分子进化分析表明,PAP17... 从甘蓝和白菜中分别克隆到2个PAP17,根据序列相似性,将PAP17分为类型I(BoPAP17-1和BrPAP17-1)和类型II(BoPAP17-2和BrPAP17-2)。Southern杂交表明,白菜和甘蓝中均只存在2个PAP17成员,与克隆结果吻合。系统发育和分子进化分析表明,PAP17基因家族受纯化选择,编码低分子量PAP蛋白。荧光定量PCR结果表明,PAP17在所检测的9个组织器官中均有表达,尤以花和蕾中的表达量特别高,种子中也有一定程度的表达,表明其与体内储备态磷的动用有关,尤其在花和蕾的发育阶段。磷饥饿诱导表达结果表明,除BrPAP17-2在幼苗叶片中表达受抑制外,BrPAP17和BoPAP17在幼苗根部和叶片中均受磷饥饿诱导,表达量先降后升,诱导4d或8d后达到峰值;恢复供磷4d后,表达量迅速降低至基础表达水平以下。与幼苗叶片相比,白菜和甘蓝幼苗根部的PAP17磷饥饿诱导表达似乎更为强烈。这些结果表明PAP17在白菜和甘蓝根部可能参与了根外磷的活化与吸收及无机磷由根部向其他组织器官的转运。 展开更多
关键词 白菜 甘蓝 紫色酸性磷酸酶 基因家族 磷饥饿
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3个拟南芥紫色酸性磷酸酶基因的cDNA克隆及体外表达 被引量:8
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作者 李东屏 王道文 《湖南师范大学自然科学学报》 EI CAS 北大核心 2003年第3期78-82,共5页
根据拟南芥基因组测序结果,用RT PCR的方法,克隆到3个可能的紫色酸性磷酸酶cDNA的序列(At PAP20,AtPAP21,AtPAP22),半定量PCR的结果表明,3个PAPs在细胞中都是组成型表达的.把PAPs的ORF分别与荧光蛋白基因序列和组氨酸标签融合,并在昆虫... 根据拟南芥基因组测序结果,用RT PCR的方法,克隆到3个可能的紫色酸性磷酸酶cDNA的序列(At PAP20,AtPAP21,AtPAP22),半定量PCR的结果表明,3个PAPs在细胞中都是组成型表达的.把PAPs的ORF分别与荧光蛋白基因序列和组氨酸标签融合,并在昆虫细胞表达系统中得到表达,荧光信号分布在细胞质中,显示这3个基因的产物在细胞质中发挥作用. 展开更多
关键词 拟南芥 紫色酸性磷酸酶基因 CDNA克隆 亚细胞定位 基因表达 基因组测序
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辣椒紫色酸性磷酸酶基因家族的鉴定与表达特征 被引量:1
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作者 庞欣 程远 +2 位作者 郭勤卫 郑佳秋 万红建 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期1498-1505,共8页
紫色酸性磷酸酶(purple acid phosphatases,PAPs)属于金属磷酸酯酶家族,参与了植物大量的生理反应,特别是磷素的吸收与利用。本研究利用已经发表的辣椒基因组数据,采用同源比对方法对辣椒PAP基因家族进行鉴定与表达分析。通过鉴定发现... 紫色酸性磷酸酶(purple acid phosphatases,PAPs)属于金属磷酸酯酶家族,参与了植物大量的生理反应,特别是磷素的吸收与利用。本研究利用已经发表的辣椒基因组数据,采用同源比对方法对辣椒PAP基因家族进行鉴定与表达分析。通过鉴定发现辣椒基因组中至少含有25个PAP基因成员,氨基酸序列长度在264~639 aa,具有1~12个内含子,不均匀地分布在12条染色体上,仅发现1对基因以串联重复的形式存在。系统发育关系表明,辣椒、拟南芥和水稻PAP基因家族成员可以分为3个家族,8个亚家族,每个家族成员的数目是变异的,而且存在6对直系同源基因和20对旁系同源基因,这表明PAP基因家族的存在早于辣椒、拟南芥和水稻的分化。基于RNA-seq数据库和q RT-PCR方法,对辣椒PAP基因的组织表达及果实发育的不同时期进行分析,结果表明PAP家族基因具有组织表达特异性和发育时期表达特异性。 展开更多
关键词 辣椒 紫色酸性磷酸酶 基因家族 生物信息学 表达分析
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花生紫色酸性磷酸酶基因家族的鉴定及表达分析 被引量:1
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作者 杜普旋 刘浩 +3 位作者 胡冬秀 陈小平 洪彦彬 李友国 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期522-531,共10页
紫色酸性磷酸酶(purple acid phosphatase,PAP)是一类金属磷酸酯酶,参与植物的磷素利用、碳代谢、细胞壁合成等多种生理功能,尤其是对磷缺乏的适应。本研究利用生物信息学手段在花生(Arachis hypogaea L.)全基因组水平上对PAP基因家族... 紫色酸性磷酸酶(purple acid phosphatase,PAP)是一类金属磷酸酯酶,参与植物的磷素利用、碳代谢、细胞壁合成等多种生理功能,尤其是对磷缺乏的适应。本研究利用生物信息学手段在花生(Arachis hypogaea L.)全基因组水平上对PAP基因家族进行了鉴定,并对其系统进化关系、保守结构域、基因结构以及它们在22个组织中的表达模式进行了分析。结果表明:花生基因组中有39个AhPAP基因,氨基酸序列长度为205~905,等电点大多数都小于7,蛋白质C端均含有金属磷酸酶结构域。以花生、拟南芥、水稻、苜蓿共74个PAP蛋白构建的系统发育树可分为四组,每组中都含有来自不同物种的PAP,并没有因为物种差异而各自聚为一类。AhPAP基因家族中部分成员的表达具有组织特异性,arahy.P03NME、arahy.DAPS6C在根瘤中表达量最高,而它们在其他组织中表达量较低或未检测到表达。本研究为揭示AhPAP基因家族在花生中的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 花生 紫色酸性磷酸酶 生物信息学 基因家族
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甘蓝型油菜紫色酸性磷酸酶基因类似物的生物信息学分析
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作者 邹春阳 臧新 +2 位作者 杨冬之 曹刚强 焦思凯 《北方园艺》 CAS 北大核心 2016年第13期93-97,共5页
利用生物信息网络数据库,对甘蓝型油菜紫色酸性磷酸酶基因(PAP)类似物编码的蛋白进行生物信息学分析,以预测该蛋白的理化性质、分子结构与生物学功能。结果表明:该基因编码的蛋白含481个氨基酸,其蛋白的分子式为C2520H3714N666O719S19,... 利用生物信息网络数据库,对甘蓝型油菜紫色酸性磷酸酶基因(PAP)类似物编码的蛋白进行生物信息学分析,以预测该蛋白的理化性质、分子结构与生物学功能。结果表明:该基因编码的蛋白含481个氨基酸,其蛋白的分子式为C2520H3714N666O719S19,分子量为55.45kDa,等电点为6.35,为亲水性分泌型蛋白,并且不稳定;存在3个跨膜螺旋区域及3个卷曲螺旋结构,含有1个信号肽、39个潜在磷酸化位点和3个N-糖基化修饰,存在6种类型特定的功能位点,主要定位于高尔基体;氨基酸序列同源性分析表明,该基因编码的蛋白与甘蓝型油菜PAP12家族具有较近的亲缘关系,直系同源于甘蓝型油菜PAP12-5;二级结构主要为无规则卷曲、延伸链和α?螺旋,具有较为明显的10个螺旋和26个折叠;具有PAP的保守结构域,属于金属磷酸二酯酶超家族成员;根据保守结构域及功能位点分析发现该基因属于紫色酸性磷酸酶类,可能属于甘蓝型油菜PAP基因家族成员,预测其编码产物在植物磷高效利用与吸收中发挥重要的生理功能。生物信息学分析及结合蛋白的结构与功能预测分析可为深入研究甘蓝型油菜PAP提供理论指导。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 紫色酸性磷酸酶(pap)基因 生物信息学分析 功能预测
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低分子量紫色酸性磷酸酶多克隆抗体的制备及应用 被引量:1
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作者 范洪宽 郑远志 +1 位作者 Hamilton Susan de Jersery John 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2001年第3期403-406,共4页
将最近从地瓜中提取出来的低分子量紫色酸性磷酸酶 ( sm PAP)基因克隆到 GST融合蛋白表达载体p GEX-2 T中 ,在大肠杆菌 BL 2 1 codon plus中进行表达 ,用表达的融合蛋白免疫兔子产生多克隆抗体 .用抗血清对昆虫细胞中表达的 sm PAP和地... 将最近从地瓜中提取出来的低分子量紫色酸性磷酸酶 ( sm PAP)基因克隆到 GST融合蛋白表达载体p GEX-2 T中 ,在大肠杆菌 BL 2 1 codon plus中进行表达 ,用表达的融合蛋白免疫兔子产生多克隆抗体 .用抗血清对昆虫细胞中表达的 sm PAP和地瓜提取液中分离纯化的 PAP进行检测 ,产生了良好的交叉反应 . 展开更多
关键词 紫色酸性磷酸酶 融合蛋白 多克隆抗体 制备 基因克隆 植物 分离 钝化 大肠杆菌 基因表达
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柑橘紫色酸性磷酸酶PAP基因的低磷胁迫表达特征 被引量:2
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作者 吴娟娟 李先信 +1 位作者 苑平 孔佑涵 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第21期6975-6980,共6页
紫色酸性磷酸酶(purple acid phophatases, PAPs)是一类金属磷酸酯酶,能够在酸性环境下催化磷酸酯或酸酐的水解,在植物应对低磷胁迫的适应性反应中发挥重要作用。本研究从柑橘基因组序列信息中分析出26个柑橘PAP候选基因,聚类为3个家族... 紫色酸性磷酸酶(purple acid phophatases, PAPs)是一类金属磷酸酯酶,能够在酸性环境下催化磷酸酯或酸酐的水解,在植物应对低磷胁迫的适应性反应中发挥重要作用。本研究从柑橘基因组序列信息中分析出26个柑橘PAP候选基因,聚类为3个家族和8个亚家族;组织表达分析显示7个家族成员的表达存在组织差异性,其中CsPAP1在花中表达水平最高,CsPAP18和CsPAP25分别在叶中和幼苗根部表达水平最高;低磷胁迫处理后,CsPAP2、CsPAP3、CsPAP18和CsPAP25在枳幼苗根部具有显著表达差异,其表达上调分别为对照的3.0倍、2.0倍、3.2倍和3.5倍,推测这些基因在柑橘的缺磷适应性反应中发挥作用。 展开更多
关键词 紫色酸性磷酸酶 pap 柑橘
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紫色酸性磷酸酶在植物响应低磷胁迫中的作用研究进展 被引量:3
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作者 周梦岩 何冬梅 +3 位作者 李亚超 刘静 马祥庆 李明 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第11期3763-3770,共8页
紫色酸性磷酸酶(purple acid phosphatase,PAPs)属于酸性磷酸酶(APases)的一种,在酸性条件下能有效地将酸酐、磷酸酯等有机磷催化水解为植物能够直接吸收利用的无机磷。低磷胁迫下根系增强紫色酸性磷酸酶的合成和分泌,是植物适应低磷胁... 紫色酸性磷酸酶(purple acid phosphatase,PAPs)属于酸性磷酸酶(APases)的一种,在酸性条件下能有效地将酸酐、磷酸酯等有机磷催化水解为植物能够直接吸收利用的无机磷。低磷胁迫下根系增强紫色酸性磷酸酶的合成和分泌,是植物适应低磷胁迫的重要机制之一,也是磷高效利用型植物的典型特征。PAPs在不同植物类型及基因型之间存在着功能特性的普遍性和多样性,而目前大多数PAPs及其编码基因的植物在响应低磷胁迫下的具体功能及表达仍有待完善。本综述分析了PAPs的功能结构和蛋白特性,陈述了低磷胁迫下植物根系PAPs的分泌和PAPs编码基因的生物学功能,旨在为深入认识PAPs在植物响应低磷胁迫中的功能特性提供参考。 展开更多
关键词 紫色酸性磷酸酶 papS 植物 低磷胁迫
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miR399a在番茄磷饥饿响应中的作用
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作者 李勤 黄健子 +1 位作者 李紫薇 黄腾波 《深圳大学学报(理工版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期415-424,共10页
磷饥饿胁迫可引起植物生长缓慢进而影响产量.作为植物中参与磷饥饿响应的关键微小核糖核酸(micro ribonucleic acid,microRNA),microRNA399(miR399)在番茄(Solanum lycopersicum)中的功能及作用机制尚待阐明.通过在不同浓度磷水平下培... 磷饥饿胁迫可引起植物生长缓慢进而影响产量.作为植物中参与磷饥饿响应的关键微小核糖核酸(micro ribonucleic acid,microRNA),microRNA399(miR399)在番茄(Solanum lycopersicum)中的功能及作用机制尚待阐明.通过在不同浓度磷水平下培养野生型和过表达miR399a番茄株系,测定各植株根长、侧根数量和根冠比等形态指标,分析各植株中Sly-miR399a和phosphate 2(PHO2)的基因表达量,并检测各植株中无机磷含量、叶绿素和花青素含量、紫色酸性磷酸酶以及过氧化物酶活性等生理指标.结果表明,相较于野生型株系,过表达番茄株系中的Sly-miR399a表达水平显著升高,而PHO2表达水平显著下调;在低磷浓度培养下,野生型和过表达Sly-miR399a番茄植株主根均显著变长,且侧根数量显著增加;而无论磷浓度高低,过表达Sly-miR399a番茄株系植株根长均增加;过表达Sly-miR399a还可以促进植株体内无机磷积累,并引起番茄叶片中叶绿素和花青素含量增加,番茄植株紫色酸性磷酸酶和过氧化物酶活性增强.研究验证了miR399a在番茄中参与磷饥饿胁迫响应,揭示miR399的功能在植物中具有保守性. 展开更多
关键词 植物生理学 番茄 磷饥饿胁迫 Sly-miR399a 基因表达 钼锑抗法 花青素 叶绿素 紫色酸性磷酸酶 过氧化物酶
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磷酸酯桥联和端基配位的双核铁(Ⅲ)配合物
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作者 阎世平 刘斌 +4 位作者 程鹏 刘欣 廖代正 姜宗慧 王耕霖 《中国科学(B辑)》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期201-206,共6页
为了模拟氧化型紫色酸性磷酸酶的活性中心 ,合成出一个分子式为 [Fe2 (HPTB) {μ O2 P(OPh) 2 }{O2 P(OPh) 2 }2 ](ClO4) 2 ,(HPTB =N ,N ,N′,N′ 四双 ( 2 苯并咪唑甲基 ) 2 羟基 1 ,3 二胺丙烷 )的双核铁的配合物 .晶体结构分... 为了模拟氧化型紫色酸性磷酸酶的活性中心 ,合成出一个分子式为 [Fe2 (HPTB) {μ O2 P(OPh) 2 }{O2 P(OPh) 2 }2 ](ClO4) 2 ,(HPTB =N ,N ,N′,N′ 四双 ( 2 苯并咪唑甲基 ) 2 羟基 1 ,3 二胺丙烷 )的双核铁的配合物 .晶体结构分析表明 ,配合物分子中双核铁 (Ⅲ )被一个来自配体的烷氧基和一个双齿配位的磷酸二苯酯桥联 ,同时2个单齿配位的磷酸二苯酯分别与一个铁离子配位 .2个铁离子均为六配位的畸变八面体几何构型 .晶体学数据 :三斜晶系 ,P1空间群 ,a =1 .5 1 2 1 3( 5 )nm ,b =1 5 91 1 9( 5 )nm ,c =1 .890 90 ( 5 )nm .α =6 9.92 5 ( 1 )° ,β =84.35 8( 1 )° ,γ =6 5 .71 2 ( 1 )°,Z =2 .研究了配合物的电子吸收光谱 。 展开更多
关键词 双核 铁配合物 模型化合物 紫色酸性磷酸酶 pap
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