超短纤维突变体纤维内源激素及其相关酶在纤维伸长期的变化 被引量：4

1

作者 邵明彦 王学德 +3 位作者 倪密 程超华 刘英新 袁淑娜 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2011年第5期440-446,共7页

以超短纤维突变体(Ligon lintless)及其野生型这一对遗传等基因系为材料,研究棉纤维伸长与内源激素含量及其相关酶活性的关系。结果表明,在野生型纤维快速伸长阶段,突变体却表现为:纤维中GA3初期的低含量、IAA的峰值出现时间推迟(迟6 d... 以超短纤维突变体(Ligon lintless)及其野生型这一对遗传等基因系为材料,研究棉纤维伸长与内源激素含量及其相关酶活性的关系。结果表明,在野生型纤维快速伸长阶段,突变体却表现为:纤维中GA3初期的低含量、IAA的峰值出现时间推迟(迟6 d)且明显低于野生型、ABA含量的快速降低时期出现迟(迟3 d)且短(短6 d)以及纤维伸长启动期极低含量的ZRs。而突变体纤维中过氧化物酶(POD)和IAA氧化酶含量的高峰均早于野生型,且在纤维快速伸长时期出现;突变体纤维中的色氨酸合成酶活性也低于野生型。推测GA3、IAA和ZRs是纤维伸长的正向影响因子,且IAA作用于整个伸长期,GA3作用于伸长初期,ZRs作用于伸长启动期。而POD、IAA氧化酶和色氨酸合成酶通过调节激素的合成与代谢调控纤维伸长,前两种酶起着抑制作用,后一种酶起着促进作用。 展开更多

关键词 棉花 纤维伸长 内源激素 酶 超短纤维突变体

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棉花纤维突变体胚珠发育过程中主要生化物质的积累特征 被引量：10

2

作者 蒋淑丽 王学德 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期16-21,共6页

采用 4种不同类型的棉花纤维突变体和一个正常对照 TM- 1,分析比较了胚珠发育过程中 ,纤维和种皮内纤维素 ,种仁内脂肪、可溶性糖和蛋白质等成份的积累特征及诸成份与纤维素含量的相关关系 .结果表明 ,棉花纤维突变体的胚珠不仅生化物... 采用 4种不同类型的棉花纤维突变体和一个正常对照 TM- 1,分析比较了胚珠发育过程中 ,纤维和种皮内纤维素 ,种仁内脂肪、可溶性糖和蛋白质等成份的积累特征及诸成份与纤维素含量的相关关系 .结果表明 ,棉花纤维突变体的胚珠不仅生化物质动态变化有着较大的差异 ,而且其生化物质的组成差异也很大 .纤维突变体的纤维素含量低 ,种仁蛋白质含量低 ,脂肪含量高 .纤维素含量与种仁内脂肪含量呈显著或极显著正相关 ;与纤维可溶性糖 ,纤维蛋白质有显著的相关性 。 展开更多

关键词 棉花 纤维突变体 胚珠发育 纤维素 脂肪 可溶性糖 蛋白质 物质积累

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5个棉花纤维突变体胚珠和纤维的离体诱导 被引量：12

3

作者 蒋淑丽 王学德 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2002年第2期71-75,共5页

离体诱导不同类型的纤维突变体胚珠纤维发育 ,研究纤维突变体离体纤维发育的情况。结果表明 :不同基因型突变体的纤维离体发育各不相同 ,纤维诱导率和纤维生长量均较对照差。纤维突变体诱导产生棉纤维的能力依次是 TM- 1 >Li>N1&g... 离体诱导不同类型的纤维突变体胚珠纤维发育 ,研究纤维突变体离体纤维发育的情况。结果表明 :不同基因型突变体的纤维离体发育各不相同 ,纤维诱导率和纤维生长量均较对照差。纤维突变体诱导产生棉纤维的能力依次是 TM- 1 >Li>N1>T- 5 86>H10 。无絮突变体在 Bt培养基上能产生绒状细胞团 ,很少有单细胞纤维的生长。离体培养纤维以同时含 GA3和 IAA的 Bt培养基生长较好 ,一般以 5μmol· L- 1IAA + 0 .5μmol· L- 1GA3的 Bt培养基较合适。不同突变体对 GA3和IAA的浓度组合有特殊性。 GA3对胚珠膨大的作用大于 IAA,并易产生愈伤组织。以 fl、T- 5 86愈伤组织的发生频率较高 ,并以 Bt+ 0 .5μmol· L- 1IAA+ 5μmol· L- 1GA3培养基产生愈伤组织频率最高。 展开更多

关键词 棉花 纤维突变体 胚珠 纤维离体发育 离体培养 激素 诱导作用

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水稻低纤维突变体LCM527-1发育理化性质和亚显微结构特征 被引量：3

4

作者 童杰鹏 童川 +2 位作者 王艳 任三娟 沈圣泉 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期430-436,共7页

细胞壁是植物细胞水平的重要支撑骨架和体现机械强度的关键结构,其主要成分为纤维素。本研究通过测定水稻茎秆突变体细胞壁理化指标,进行胞壁结构超微观察,研究茎秆低纤维脆性的生化特点以及细胞形态变化,以期阐述水稻低抗折断力、易倒... 细胞壁是植物细胞水平的重要支撑骨架和体现机械强度的关键结构,其主要成分为纤维素。本研究通过测定水稻茎秆突变体细胞壁理化指标,进行胞壁结构超微观察,研究茎秆低纤维脆性的生化特点以及细胞形态变化,以期阐述水稻低抗折断力、易倒伏的原因。经60Co-γ射线诱变处理和筛选,获得特异性低纤维突变体LCM527-1,其生物学性状表现为茎、叶、鞘、枝梗均具脆性;抗倒伏指数、茎秆密度(鲜重或干重)以及倒1节和倒2节抗折断力均明显降低;茎秆中Ca、K、Mn、Na、Si、Zn等6种重要组成元素也显著减少。与527(CK)相比,突变体LCM527-1在5个生长发育时期(幼苗期、分蘖期、抽穗期、灌浆期和成熟期)的细胞壁主要成分纤维素含量显著降低,次级修饰物半纤维素和木质素增加。超微结构显示突变体LCM527-1茎、叶的厚壁细胞、薄壁细胞等细胞壁变薄,细胞层数减少,填充效果减弱。由此可知,细胞水平的异常是导致该茎秆易折断的主要原因。本研究将为今后水稻茎秆突变体的研究提供支持,同时为抗倒伏工作开展提供新的思路和途径。 展开更多

关键词 水稻 细胞壁 低纤维突变体 超微结构 发育动态 化学成分

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植物激素对棉花Ligon lintless纤维突变体的调控影响 被引量：3

5

作者 刘晓杰 张杰 +1 位作者 贾银华 杜雄明 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第35期15460-15469,15480,共11页

以棉花野生型及突变体Ligon lintless为试材,研究不同种类和浓度的植物生长物质对大田棉株及胚珠离体培养后,胚珠或愈伤组织中GA、IAA、ABA、ZR等含量的影响。结果表明:经F、IAA、GA、ABA、BR处理后,离体胚珠IAA、GA、ABA、ZR的含量均... 以棉花野生型及突变体Ligon lintless为试材,研究不同种类和浓度的植物生长物质对大田棉株及胚珠离体培养后,胚珠或愈伤组织中GA、IAA、ABA、ZR等含量的影响。结果表明:经F、IAA、GA、ABA、BR处理后,离体胚珠IAA、GA、ABA、ZR的含量均高于对照;突变体和野生型胚珠在0DPA和+1DPA时的发育情况无差异,第1批纤维均在0DPA起始,+3DPA时,野生型胚珠表面的纤维较突变体长,两者第2批纤维均在+5DPA时突起。 展开更多

关键词 纤维突变体 植物激素 胚珠培养

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5个棉花纤维突变体的胚珠形态特征与农艺性状研究

6

作者 蒋淑丽 王学德 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期285-289,共5页

以 TM- 1为对照 ,研究了 5个棉花纤维突变体的形态发生与农艺性状 .结果表明棉花纤维突变体胚珠纤维分化突起与对照 TM- 1同样首先发生在胚珠脊突处 ,然后是合点处及胚珠中部 ,最后在珠孔端 .有短绒有短纤维突变体 ( L i)与对照 TM- 1一... 以 TM- 1为对照 ,研究了 5个棉花纤维突变体的形态发生与农艺性状 .结果表明棉花纤维突变体胚珠纤维分化突起与对照 TM- 1同样首先发生在胚珠脊突处 ,然后是合点处及胚珠中部 ,最后在珠孔端 .有短绒有短纤维突变体 ( L i)与对照 TM- 1一样 ,以在开花当天 ( 0 DPA)突起为主 ;到开花后第 5日5DPA)短绒 (即第二批细胞 )突起 .无短绒有纤维的光籽 ( N1)在开花当天 ( 0 DPA)在合点附近有突起 ,开花后第 1日 ( 1DPA)仍有突起 .纤维突变体的衣分和衣指均较低 ,这是突变体产量低的主要原因 ,但突变体籽指较 TM- 1高 .突变体纤维的比强度较差 。 展开更多

关键词 棉花 纤维突变体 胚珠 形态特征 农艺性状

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几个棉花纤维突变体及纤维发育相关基因的初步分析 被引量：2

7

作者 王晟 杜雄明 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第1期32-35,共4页

用4个陆地棉纤维突变体、1个亚洲棉纤维突变体及其对应的正常型品种作为研究材料,对纤维发育相关基因结构差异比较。根据GenBank公布的基因序列设计基因特异引物,分别在突变体与正常型棉花品种的基因组DNA中进行PCR扩增。经凝胶电泳检... 用4个陆地棉纤维突变体、1个亚洲棉纤维突变体及其对应的正常型品种作为研究材料,对纤维发育相关基因结构差异比较。根据GenBank公布的基因序列设计基因特异引物,分别在突变体与正常型棉花品种的基因组DNA中进行PCR扩增。经凝胶电泳检测发现:部分纤维发育相关基因在突变体与正常型材料之间存在显著的结构差异。用脱水诱导蛋白RD22基因、葡聚糖酶基因和肌动蛋白基因为模板设计引物,并将扩增的片段克隆测序,经B last比对后发现克隆的3条序列与设计引物所用的基因序列同源性均在95%以上。该研究结果可为纤维发育相关基因的分子生物学研究提供依据。 展开更多

关键词 棉花 纤维突变体 纤维发育

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对一个新发现的棉纤维突变体的鉴定及特性分析

8

作者 张锐 吕芬妮 +1 位作者 王海海 郭旺珍 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期36-42,共7页

在农杆菌介导的转基因组织培养再生后代中发现了1个无绒有絮的纤维发育突变体,通过自交选择T3代获得其纯合体,命名为CM突变体。尽管CM突变体从转基因后代中发现,但和转基因插入位点无关,推测是在组织培养过程中产生的点突变所致。通过... 在农杆菌介导的转基因组织培养再生后代中发现了1个无绒有絮的纤维发育突变体,通过自交选择T3代获得其纯合体,命名为CM突变体。尽管CM突变体从转基因后代中发现,但和转基因插入位点无关,推测是在组织培养过程中产生的点突变所致。通过与陆地棉遗传标准系TM-1,海岛棉军海1号,以及新乡小吉无绒有絮(XinFLM),新乡小吉无绒无絮(XinWX),徐州142无绒无絮(XZ142WX),显性光子N1N1,隐性光子n2n2、SL-7-1、MD17及T586等一系列纤维发育突变体分别配制F2组合进行突变基因的遗传及等位性分析,结果表明CM突变体与纤维发育正常的TM-1和军海1号杂交,F1表型均为无绒有絮,F2表现无绒有絮和有绒有絮3:1分离,说明该突变体与纤维发育正常材料相比,在短绒发育方面存在1个位点的差异,该突变性状由单显性基因控制。等位性测验及分子定位均表明,控制该突变体短绒的基因与控制N1N1显性光子的N1基因等位。扫描电镜进一步证明该基因突变会造成纤维起始突起延迟。与N1N1突变体相比,CM突变体的衣分比N1N1显著高,而百粒重比N1N1极显著低。推测CM突变体中的突变基因与显性N1基因为复等位基因。 展开更多

关键词 陆地棉 转基因 纤维发育突变体 鉴定

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棉纤维相关cDNA的克隆及其在4个纤维突变体中的结构变异 被引量：4

9

作者 王学德 朱玉贤 +2 位作者 季道藩 蒋淑丽 李悦有 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第17期1852-1857,共6页

用ＲＴ－ＰＣＲ方法从陆地棉遗传标准系“ＴＭ－ｌ”的纤维细胞ＲＮＡ中克隆了一种纤维细胞优势表达的 ｍＲＮＡ（ｃＤＮＡ，记为 ＴＭ－Ｅ６基因），该基因不舍内含子，可读框长为 ７７１ ｂｐ，可编码 ２４６个氨基酸的多肽．从４个... 用ＲＴ－ＰＣＲ方法从陆地棉遗传标准系“ＴＭ－ｌ”的纤维细胞ＲＮＡ中克隆了一种纤维细胞优势表达的 ｍＲＮＡ（ｃＤＮＡ，记为 ＴＭ－Ｅ６基因），该基因不舍内含子，可读框长为 ７７１ ｂｐ，可编码 ２４６个氨基酸的多肽．从４个纤维突变体中分别克隆同源性基因，并与野生型“ＴＭ－ｌ”的ＴＭ－Ｅ６基因进行了同源性分析，发现纤维突变体不但在基因结构而且在密码组成上有明显变异．在距转录起始位点的第 ２７９碱基对处有 ＧＧＣＴＣＡ（Ｇｌｙ－Ｓｅｒ）串连重复序列的结构；无长、短纤维突变体的 Ｆ１－Ｅ６基因密码子变异率最大（７．０５％），其次是只有短纤维突变体的Ｌｉ－Ｅ６基因（４．９８％），再次是无短纤维突变体的Ｎ－Ｅ６基因和纤维形态正常的“棕色棉”Ｂ１－Ｅ６基因（均为４．１５％）；无长纤维的两个突变体基因的肽链在第ｌ—１７４的氨基酸序列间有高度相似（９９．４％）的变异，而无短纤维的两个突变体则在第１１６—２２０的氨基酸序列变异完全相同；Ｌｉ－Ｅ６和Ｂ１－Ｅ６基因除了在纤维细胞中高效表达外，在种皮中也有部分表达． 展开更多

关键词 棉花 纤维突变体 克隆 CDNA 基因工程 棉纤维

原文传递

棉花纤维特异表达基因(E6)的克隆及其在纤维突变体中的结构变异

10

作者 王学德 《云南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1999年第S3期31-32,共2页

关键词 纤维突变体 特异表达基因 棉花纤维 纤维发育 陆地棉 单碱基突变 特异表达的基因 分子生物学研究 棕色纤维 密码子

原文传递

组织型纤维蛋白溶解酶原激活剂缺失突变体治疗兔视网膜静脉阻塞的疗效

11

作者 翁欢 李秋华 张瑞帆 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期549-552,共4页

目的在兔视网膜静脉阻塞(retinal vein occlusion,RVO)模型上研究组织型纤维蛋白溶解酶原激活剂缺失突变体(reteplase,r-PA)的溶栓效果,并与重组人组织型纤维蛋白溶解酶原激活剂(recombinant tissue-type plasminogen activator,rt-PA)... 目的在兔视网膜静脉阻塞(retinal vein occlusion,RVO)模型上研究组织型纤维蛋白溶解酶原激活剂缺失突变体(reteplase,r-PA)的溶栓效果,并与重组人组织型纤维蛋白溶解酶原激活剂(recombinant tissue-type plasminogen activator,rt-PA)对照,评价两种溶栓药物在静脉应用的疗效。方法光化学法诱导45只兔RVO模型(45只眼),分别静脉注射r-PA(15只眼)、rt-PA(15只眼)和注射用水(15只眼,对照组),4 h后观察血管再通情况,检测溶栓相关血液指标。结果给药后4h,r-PA组与rt-PA组静脉完全再通率分别为77.33%和为66.67%,无统计学意义;两者与对照组比较,完全再通率有统计学意义(P<0.001)。在给药后rt-PA组血浆凝血酶时间较r-PA组延长,血浆纤维蛋白原较r-PA组下降,且有统计学意义。结论静脉注射r-PA对兔RVO模型有治疗效果,疗效与rt-PA无明显区别,r-PA对凝血和纤溶系统的影响比rt-PA小。 展开更多

关键词 视网膜静脉阻塞 组织型纤维蛋白溶解酶原激活剂缺失突变体 重组人组织型纤维蛋白溶解酶原激活剂

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成纤维细胞生长因子受体2剪切突变体Ⅲc在膀胱癌中的表达以及与膀胱癌253J细胞多柔比星耐药的关系

12

作者 李纪华 景治安 +2 位作者 毛长青 刘彦军 孔春艳 《安徽医药》 CAS 2021年第5期962-965,共4页

目的探讨成纤维细胞生长因子受体2的剪切突变体Ⅲc(FGFR2Ⅲc)与膀胱癌发生发展及膀胱癌253J细胞多柔比星耐药的关系。方法选取2016年1月至2018年1月郑州市第一人民医院保存的膀胱癌组织标本143例,同时选取正常膀胱组织70例作为对照,采... 目的探讨成纤维细胞生长因子受体2的剪切突变体Ⅲc(FGFR2Ⅲc)与膀胱癌发生发展及膀胱癌253J细胞多柔比星耐药的关系。方法选取2016年1月至2018年1月郑州市第一人民医院保存的膀胱癌组织标本143例,同时选取正常膀胱组织70例作为对照,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测组织FGFR2Ⅲc表达;选取膀胱癌253J细胞,同时建立耐多柔比星253J细胞,采用MTT法检测最大半数抑制浓度,细胞划痕试验检测细胞迁移。结果膀胱癌组FGFR2Ⅲc mRNA相对表达量为(1.782±0.342),明显高于正常膀胱组(P<0.05);病理分级高级别、病理分期T2~T4期FGFR2Ⅲc mRNA相对表达量分别为(1.945±0.330)和(1.869±0.322),明显高于低级别和Ta~T1期(P<0.05);不同病理分级、病理分期病人性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05);耐多柔比星253J细胞FGFR2Ⅲc mRNA相对表达量和最大半数抑制浓度分别为(2.001±0.291)和(13.02±1.10)g/L,明显高于253J细胞(P<0.05);耐多柔比星253J细胞迁移率为(23.02±3.12)%,明显低于253J细胞(P<0.05);耐多柔比星253J细胞凋亡率为(23.22±5.50)%,明显低于253J细胞(P<0.05)。结论FGFR2Ⅲc mRNA在膀胱癌组织中表达上调,与病理分级和病理分期有关,同时与253J细胞耐多柔比星、迁移有一定关系。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 成纤维细胞生长因子受体2的剪切突变体Ⅲc 253J细胞 多柔比星 耐药

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亚洲棉短纤维发育相关长链非编码RNA的鉴定及表达 被引量：1

13

作者 王晓阳 彭振 +5 位作者 邢爱双 赵盈睿 马欣丽 刘方 杜雄明 何守朴 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第23期4565-4584,I0001-I0003,共23页

【目的】长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一类无蛋白质编码能力,但参与许多重要生命活动调控过程的长度大于200 nt的RNA。通过对亚洲棉无短纤维突变体(GA0149)和野生型(GA0146)纤维发育早期的转录组数据进行分析,挖掘调... 【目的】长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一类无蛋白质编码能力,但参与许多重要生命活动调控过程的长度大于200 nt的RNA。通过对亚洲棉无短纤维突变体(GA0149)和野生型(GA0146)纤维发育早期的转录组数据进行分析,挖掘调控短纤维发育的lncRNA,并明确其调控网络,为进一步解析棉花纤维发育机制奠定基础。【方法】选择GA0146和GA01492个材料在开花后当天(0 DPA)及花后3 d(3 DPA)、5 d(5 DPA)和8 d(8 DPA)的胚珠和纤维为材料进行转录组测序。鉴定lncRNA并预测其调控的靶基因;通过mRNA和lncRNA的差异表达分析,比较2个材料在不同纤维发育时期的差异。进一步利用KOBAS软件预测对差异lncRNA的靶基因进行富集分析并预测其参与的生物过程;最后通过实时荧光定量(RT-qPCR)技术对25个差异表达的lncRNA转录组数据进行验证。【结果】共鉴定获得15339个lncRNA,其中11595个lncRNA位于基因间区,包括2428个反义lncRNA、350个内含子lncRNA及966个正义lncRNA。共有1932个差异表达lncRNA(DE-lncRNA),它们所对应的8134个靶基因中,有788个为差异表达基因(DE-mRNA)。KEGG代谢通路富集分析表明,DE-mRNA主要参与植物激素信号转导(plant hormone signal transduction)和内质网中蛋白质加工过程(protein processing in endoplasmic reticulum)。共表达调控网络分析显示,表达量差异比较显著的lncRNA(MSTRG.454250.3)和其所调控的靶基因表达趋势一致,仅在野生型(GA0146)短纤维发育早期胚珠中特异表达;而lncRNA(MSTRG.454261.4)与其调控的靶基因表达趋势相反,在突变体(GA0149)中的表达量显著高于野生型。RT-qPCR结果证实了转录组数据的真实性。【结论】鉴定了26个与亚洲棉短纤维发育相关的lncRNA,其通过调控植物激素信号转导途径相关的吲哚乙酸合成酶基因(Ga03G2421)和生长素响应蛋白基因(Ga05G1344)的表达而影响短纤维的发育。 展开更多

关键词 亚洲棉 短纤维突变体 长链非编码RNA 调控网络 荧光定量PCR

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FGF21[Tyr^(20)]突变体的克隆、表达及纯化 被引量：1

14

作者 张耀方 万晓珊 +6 位作者 赵宏鑫 邵明龙 杨苹 孔祥鑫 刘敏 李校堃 王会岩 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1088-1093,共6页

目的:将成纤维细胞生长因子21(FGF21)第20位氨基酸进行突变后,在大肠杆菌中表达,并进行纯化和生物活性检测。方法:以野生型的FGF21为模板,将FGF21第20位氨基酸Tyr进行PCR定点突变成Phe后与小分子泛素样修饰物(SUMO)融合,克隆至pET22b表... 目的:将成纤维细胞生长因子21(FGF21)第20位氨基酸进行突变后,在大肠杆菌中表达,并进行纯化和生物活性检测。方法:以野生型的FGF21为模板,将FGF21第20位氨基酸Tyr进行PCR定点突变成Phe后与小分子泛素样修饰物(SUMO)融合,克隆至pET22b表达载体中,构建重组原核表达质粒pET22b-SUMO-FGF21[Tyr20],克隆至BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE电泳及Western blotting法进行鉴定,用Ni-NTA亲和层析柱纯化,SUMO蛋白酶将SUMO切除,SephadexG-50除盐。结果:通过PCR定点突变,成功地将FGF21第20位氨基酸进行了突变,重组质粒pET22b-SUMO-FGF21[Tyr20]经PCR和双酶切鉴定后测序与预期结果相符。经SDS-PAGE电泳分析,蛋白为可溶性,纯化后成功获得FGF21[Tyr20]突变体蛋白,Western blotting分析显示FGF21[Tyr20]突变体蛋白与FGF21抗体有特异性反应。结论:成功构建并高效可溶性表达SUMO-FGF21[Tyr20]的突变体基因,获得FGF21[Tyr20]蛋白。 展开更多

关键词 成纤维细胞生长因子21[Tyr20]突变体基因 克隆 分子 原核表达 纯化

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两个棉纤维发育相关基因的克隆与特征分析(英文)

15

作者 王磊 朱一超 +2 位作者 蔡彩萍 张天真 郭旺珍 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期85-91,共7页

棉纤维发育突变体是克隆棉纤维发育关键基因和阐明其发育分子机理的优异资源。陆地棉李氏超短纤维突变体(Li1li1)是显性单基因突变体,表现为显性纯合体(Li1Li1)致死,显性杂合时(Li1li1)表型为茎秆扭曲、叶片卷曲和纤维短至6mm,而隐性纯... 棉纤维发育突变体是克隆棉纤维发育关键基因和阐明其发育分子机理的优异资源。陆地棉李氏超短纤维突变体(Li1li1)是显性单基因突变体,表现为显性纯合体(Li1Li1)致死,显性杂合时(Li1li1)表型为茎秆扭曲、叶片卷曲和纤维短至6mm,而隐性纯合体(li1li1)则表现为株型和纤维发育都正常。本文对开花后10d的李氏纤维发育正常材料(li1li1)和超短纤维突变体(Li1li1)胚珠纤维混合体进行mRNA差异显示反转录PCR(DDRT-PCR)分析,获得2条在李氏纤维发育正常材料中上调表达的差异片段。测序及DNA序列的生物信息学分析表明该差异片段分别与编码谷氨酸脱羧酶和质子焦磷酸酶的基因有较高同源性。通过电子拼接,5′RACE和全长cDNA序列验证,克隆了棉花的谷氨酸脱羧酶(GhGAD)和质子焦磷酸酶(GhVP1)基因全长cDNA,进一步对其功能和染色体定位进行了初步分析。转录水平分析表明,这两个基因在棉花根、茎、叶和纤维中组成性表达,在棉纤维中优势表达。利用本实验室陆地棉遗传标准系TM-1和海岛棉海7124培育的含140个单株的BC1作图群体,将GhGAD和GhVP1分别定位在第12条染色体和第8条染色体。 展开更多

关键词 棉花 纤维突变体 DDRT-PCR 谷氨酸脱羧酶 质子焦磷酸酶

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棉花阿拉伯半乳糖蛋白基因的克隆、表达与染色体定位分析

16

作者 王磊 田亮亮 +4 位作者 朱一超 蔡彩萍 赵亮 张天真 郭旺珍 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期23-29,共7页

陆地棉李氏超短纤维突变体(Li1li1)是显性单基因突变体,表现为茎秆、叶片卷曲,纤维短至6mm,其隐性纯合体(li1li1)则表现为株型和纤维发育都正常。对开花后10d的李氏纤维发育正常材料(li1li1)和超短纤维突变体(Li1li1)胚珠纤维混合体进行... 陆地棉李氏超短纤维突变体(Li1li1)是显性单基因突变体,表现为茎秆、叶片卷曲,纤维短至6mm,其隐性纯合体(li1li1)则表现为株型和纤维发育都正常。对开花后10d的李氏纤维发育正常材料(li1li1)和超短纤维突变体(Li1li1)胚珠纤维混合体进行mRNA差异显示反转录PCR(DDRT-PCR)分析,获得1条在李氏纤维发育正常材料中上调表达的差异片段。进一步通过5'RACE技术获得全长为621bp的cDNA,测序及DNA序列的生物信息学分析表明该cDNA片段与拟南芥编码阿拉伯半乳糖蛋白基因AGP14有52%相似性,故命名为GhAGP。表达特征分析表明,该基因在陆地棉根、茎、叶和纤维中组成性表达,在棉纤维中优势表达。基因组序列分析显示,该基因在二倍体棉种非洲棉和雷蒙德氏棉中各有1个拷贝,在四倍体棉种陆地棉TM-1和海岛棉海7124中分别存在2个拷贝,表明A、D亚组中各有1个拷贝。利用本实验室陆地棉遗传标准系TM-1和海岛棉海7124培育的含140个单株的BC1作图群体,将GhAGP基因的2个拷贝分别定位在四倍体棉花部分同源转化群染色体6和染色体25上。 展开更多

关键词 棉花 纤维突变体 阿拉伯半乳糖基因 克隆 表达 基因定位

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FGFR2IIIc在膀胱癌化疗耐药细胞株中的表达及意义 被引量：1

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作者 陈玉乐 张林琳 +6 位作者 吴开杰 曾津 高杨 王新阳 李宏宏 张心湜 贺大林 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期8-10,14,共4页

目的探讨成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)的剪切突变体FGFR2Ⅲc对多柔比星耐药的膀胱癌细胞间质-上皮转化的调节作用。方法通过浓度递增法建立人膀胱癌253J细胞系的多柔比星耐药253J/DOX细胞株。分别用MTT实验、Western blot法和实时定... 目的探讨成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)的剪切突变体FGFR2Ⅲc对多柔比星耐药的膀胱癌细胞间质-上皮转化的调节作用。方法通过浓度递增法建立人膀胱癌253J细胞系的多柔比星耐药253J/DOX细胞株。分别用MTT实验、Western blot法和实时定量PCR(qRT-PCR)比较253J细胞和253J/DOX细胞对多柔比星的敏感性、P-糖蛋白表达水平和FGFR2Ⅲc表达水平的差异。Western blot法检测253J细胞和253J/DOX细胞E-cadherin和vimentin表达。划痕愈合实验比较253J细胞和253J/DOX细胞迁移能力的差异。结果与亲代细胞相比,253J/DOX细胞P-糖蛋白表达上调并对多柔比星明显耐药(P<0.05)。FGFR2Ⅲc mRNA在253J/DOX细胞的表达明显高于253J细胞。同时,与亲代细胞相比,253J/DOX细胞E-cadherin表达上调,vimentin表达下调,体外迁移能力下降。结论 FGFR2Ⅲc在化疗耐药的膀胱癌细胞表达上调,可能通过诱导间质-上皮转化促进肿瘤迁移灶形成。 展开更多

关键词 膀胱癌 化疗耐药 成纤维生长因子受体2的剪切突变体Ⅲc 间质-上皮转化 迁移

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