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柴胡提取物对人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度和细胞内VCR蓄积的影响 被引量:17
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作者 韩晓红 盖晓东 +1 位作者 薛延军 陈淼 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期314-317,共4页
目的:测定中药柴胡(BupleurumChineseDC,BCDC)提取物对人肝癌BEL-7402细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)和长春新碱(Vincristine,VCR)浓度的影响,探索柴胡提取物逆转BEL-7402细胞多药耐药的机制。方法:以Fura2/AM为细胞内钙离子的荧光指示... 目的:测定中药柴胡(BupleurumChineseDC,BCDC)提取物对人肝癌BEL-7402细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)和长春新碱(Vincristine,VCR)浓度的影响,探索柴胡提取物逆转BEL-7402细胞多药耐药的机制。方法:以Fura2/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂,用双波长荧光分光光度计分别测定不同条件下的BEL7402细胞内[Ca2+]i。高效液相色谱法测定BCDC作用于BEL-7402后细胞内VCR蓄积情况的变化。结果:柴胡提取物可使人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度下降(P<0.001),可使细胞内VCR浓度升高(P<0.01)。结论:柴胡提取物可以增加VCR在BEL7402细胞内的积聚浓度,部分逆转BEL7402细胞的多药耐药(multidrugresistance,MDR)。钙离子通道阻滞作用可能为柴胡提取物逆转BEL7402细胞多药耐药的机制之一。 展开更多
关键词 柴胡提取物 治疗应用 细胞内游离钙 FURA-2/AM 高效液相色谱法 BEL-7402细胞
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小檗碱对豚鼠结肠平滑肌细胞内游离钙浓度的影响 被引量:15
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作者 操寄望 罗和生 +2 位作者 余保平 沈志祥 于皆平 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期343-346,共4页
采用Ca2 +荧光示踪剂Fura 2 AM和双波长荧光分光光度法 ,观察小檗碱 (berberine ,Ber)对酶法分离的豚鼠结肠平滑肌细胞内游离钙 ([Ca2 +]i)的影响并探讨其机制。在含 1 5mmol/LCaCl2 的HEPES Ringer缓冲液中 ,豚鼠结肠平滑肌细胞 [Ca2 ... 采用Ca2 +荧光示踪剂Fura 2 AM和双波长荧光分光光度法 ,观察小檗碱 (berberine ,Ber)对酶法分离的豚鼠结肠平滑肌细胞内游离钙 ([Ca2 +]i)的影响并探讨其机制。在含 1 5mmol/LCaCl2 的HEPES Ringer缓冲液中 ,豚鼠结肠平滑肌细胞 [Ca2 +]i为 10 8± 9 4nmol/L (n =7) ,Ber对静息 [Ca2 +]i 无明显影响 ,Ber呈浓度依赖性抑制 ,6 0mmol/LKCl引起的 [Ca2 +]i 增高 ,IC50 值为 34 0 9μmol/L。在含 1 5mmol/LCa2 +和无Ca2 +的缓冲液中 ,30、10 0μmol/LBer均显著抑制 10 μmol/LACh所诱发的 [Ca2 +]i 的增高 ,且有浓度依赖性 ;同样Ber对环匹阿尼酸 (CPA)所致的 [Ca2 +]i 增高也有浓度依赖性抑制作用 ,有钙和无钙条件下IC50 分别为 37 97μmol/L和 49 70 μmol/L。结果提示 ,Ber对结肠平滑肌细胞外Ca2 +内流和细胞内钙释放均有抑制作用。 展开更多
关键词 小檗碱 结肠平滑肌细胞 FURA-2 细胞内游离钙
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苯海索对大鼠局灶性脑缺血后细胞内游离钙含量的影响 被引量:10
3
作者 刘萍 姬汴生 +7 位作者 丁爱国 许勇 刘滨 高远 史清秀 唐琳 韦卉 贾丹辉 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期240-241,共2页
目的 探讨苯海索对大鼠局灶性脑缺血细胞内游离钙含量的影响及其机制。方法 采用大鼠大脑中动脉梗塞模型 ,观察苯海索对缺血大鼠的细胞内钙及MDA、SOD含量的影响。结果 苯海索能显著降低细胞内游离钙、MDA的含量 (P <0 .0 1 )并... 目的 探讨苯海索对大鼠局灶性脑缺血细胞内游离钙含量的影响及其机制。方法 采用大鼠大脑中动脉梗塞模型 ,观察苯海索对缺血大鼠的细胞内钙及MDA、SOD含量的影响。结果 苯海索能显著降低细胞内游离钙、MDA的含量 (P <0 .0 1 )并能显著提高SOD的活性 (P <0 .0 1 )。结论 苯海索 3、1 .5、0 .5mg/kg对大鼠局灶性脑缺血可能具有保护作用 ,其作用机制与降低细胞内钙 。 展开更多
关键词 苯海索 大鼠 局灶性脑缺血 细胞内游离钙 作用机制
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心脉龙注射液对大鼠缺氧-复氧心肌细胞内游离钙离子及脂质过氧化物的影响 被引量:28
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作者 彭芳 刘晓波 +1 位作者 方春生 杨再康 《中国药业》 CAS 2003年第1期33-35,共3页
目的:观察心脉龙注射液(XML)对大鼠缺氧及缺氧-复氧心肌细胞[Ca2+]及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响,以进一步阐明其作用机制。 方法:采用Fura-2/AM及相应试剂盒测定该药对大鼠缺氧及缺氧-复氧心肌细胞|Ca2+|i,MDA和SOD的影响... 目的:观察心脉龙注射液(XML)对大鼠缺氧及缺氧-复氧心肌细胞[Ca2+]及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响,以进一步阐明其作用机制。 方法:采用Fura-2/AM及相应试剂盒测定该药对大鼠缺氧及缺氧-复氧心肌细胞|Ca2+|i,MDA和SOD的影响。结果:7.5×102μg/mL XML能升高缺氧及缺氧-复氧心肌细胞|Ca2+|i(P<0.01,P<0.05),此作用与去乙酰毛花苷相当3.75 × 102,1.5×103μg/mL XML则略降低心肌细胞|Ca2+|i(P>0.05),同时应用维拉帕米均不能抑制去乙酰毛花苷及XML各剂量组对细胞内|Ca2+|i的影响。 3.1 ×102,6.3×102,1.25×103μg/mL XML能升高缺氧及缺氧-复氧心肌细胞悬液的SOD含量(P<0.01,P<0.05),虽能降低MDA,但无统计学意义 结论:对缺氧及缺氧-复氧状态的衰竭心脏,在强心时要严格掌握XML的剂量,其强心作用与心肌细胞|Ca2+|i的升高有关,该药同时还具有一定的抗氧化作用。 展开更多
关键词 心脉龙注射液 心肌细胞 细胞内游离钙 丙二醛 超氧化物歧化酶
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蓝萼甲素对小鼠脾细胞内游离钙离子浓度的影响 被引量:5
5
作者 陈子珺 李云森 +3 位作者 周吉燕 曹露晔 胡月娟 李仪奎 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期908-910,共3页
关键词 细胞内游离钙离子浓度 蓝萼甲素 细胞增殖 小鼠脾脏 混合淋巴细胞培养 香茶菜属植物 脂多糖(LPS) 体液免疫反应 细胞免疫反应 淋巴细胞增殖
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Fura-2/AM荧光法测定日本血吸虫培养细胞内游离钙离子浓度 被引量:7
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作者 彭延 董惠芬 +2 位作者 蒋明森 钟沁萍 明珍平 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2003年第2期139-141,F001,共4页
目的 研究用钙荧光探剂 (Fura- 2 / AM)检测静息状态下日本血吸虫培养细胞内的游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i) ,以及β-巯基乙醇对培养细胞 [Ca2 + ]i的影响。方法 将 18d虫龄的日本血吸虫童虫制成细胞悬液 ,贴壁法接种于 30 ml培养瓶中 ... 目的 研究用钙荧光探剂 (Fura- 2 / AM)检测静息状态下日本血吸虫培养细胞内的游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i) ,以及β-巯基乙醇对培养细胞 [Ca2 + ]i的影响。方法 将 18d虫龄的日本血吸虫童虫制成细胞悬液 ,贴壁法接种于 30 ml培养瓶中 ,培养液为 RPMI- 16 4 0含 2 0 %小牛血清及常量抗生素。在培养的 0 - 3d,制备日本血吸虫细胞悬液 ,采用 Fura- 2 / AM钙荧光探剂测定正常静息状态下及加入β-巯基乙醇后日本血吸虫培养细胞内的 [Ca2 + ]i。结果 正常静息状态下 ,培养 0 d的日本血吸虫培养细胞内的 [Ca2 + ]i为 188.2 nmol/ L ;培养 1- 3d的 [Ca2 + ]i两两比较差异无显著性(P>0 .0 5 ) ,它们的平均值为 (187.0± 10 .7) nm ol/ L ,与培养 0 d的 [Ca2 + ]i比较 ,差异也无显著性(P>0 .0 5 )。β-巯基乙醇可使日本血吸虫培养细胞内 [Ca2 + ]i明显升高 (P<0 .0 1) ,并随浓度的增加而升高。结论 培养 1- 3d,静息状态下日本血吸虫培养细胞内的 [Ca2 + ]i比较稳定 ,β-巯基乙醇能影响日本血吸虫培养细胞内的 [Ca2 + 展开更多
关键词 日本血吸虫 FURA-2/AM 细胞内游离钙离子 β-巯基乙醇
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普罗托品对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞内游离钙浓度和蛋白激酶C活性的影响(英文) 被引量:6
7
作者 李斌 吴芹 +2 位作者 石京山 孙安盛 黄燮南 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期240-246,共7页
本实验室先前的研究已证实,普罗托品(protopine,Pro)舒张家兔主动脉的作用,可能与其增加血管平滑肌细胞内cAMP和cGMP水平有关。为了深入探讨Pro的扩血管作用机制,实验采用等张收缩记录大鼠离体血管条张力,利用Fura-2/ AM负载的大鼠胸主... 本实验室先前的研究已证实,普罗托品(protopine,Pro)舒张家兔主动脉的作用,可能与其增加血管平滑肌细胞内cAMP和cGMP水平有关。为了深入探讨Pro的扩血管作用机制,实验采用等张收缩记录大鼠离体血管条张力,利用Fura-2/ AM负载的大鼠胸主动脉培养细胞直接测定细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i),并应用同位素γ-32P-ATP催化活性法测定蛋白激酶C (PKC)活性等方法,分别观察了Pro的相关效应。结果表明,Pro(30和100μmol/L)明显降低去甲肾上腺素(NA)和高钾所致的动脉条收缩幅度,使二者的量效曲线呈非平行右移,最大反应压低;pD21值分别为3.7±0.25和3.97±0.15;Pro(50和100 μmol/L)对静息状态下的[Ca2+]没有任何影响,但对NA和高钾引起的[Ca2+]i升高均有明显抑制作用;Pro(30和100 μmol/L);对未经NA处理血管条的胞浆和胞膜PKC活性均无明显影响:但在NA预处理的血管条,Pro使NA所升高的胞浆内PKC的活性趋于降低,而明显升高胞膜PKC的活性,对PKC的总活性无明显影响。结果提示,在有NA存在的情况下,Pro似能促使PKC从胞浆向细胞膜转移,其扩血管效应似为其降Ca2+作用、升高cAMP和cGMP的作用及其对PKC影响等几方面的综合结果。 展开更多
关键词 普罗托品 细胞内游离钙 大鼠 血管平滑肌细胞 蛋白激酶C
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体外液压冲击伤对大鼠神经细胞内游离钙和pH值的影响 被引量:5
8
作者 陈庆文 张相彤 +2 位作者 张永春 孙建平 杨宝峰 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期339-342,共4页
目的 研究体外液压冲击伤后大鼠神经细胞内游离钙和 pH值的变化及其药物的保护作用。 方法 培养新生乳鼠的大脑皮层神经细胞 ,给予 2 5kPa ,2 0ms的液压冲击伤 ,通过激光扫描共聚焦显微镜检测伤后单个神经细胞内游离 [Ca2 +]i和pH值... 目的 研究体外液压冲击伤后大鼠神经细胞内游离钙和 pH值的变化及其药物的保护作用。 方法 培养新生乳鼠的大脑皮层神经细胞 ,给予 2 5kPa ,2 0ms的液压冲击伤 ,通过激光扫描共聚焦显微镜检测伤后单个神经细胞内游离 [Ca2 +]i和pH值的变化 ,并分别给予尼莫地平和D AP 5 ,观察药物对上述变化的影响。结果 伤后细胞内 [Ca2 +]i迅速升高 ,持续 12h达高峰 ,随后逐渐下降 ,48h接近正常 ;pH值下降较慢 ,于 12h达低谷 ,48h未恢复正常。尼莫地平和D AP 5均可明显抑制细胞内 [Ca2 +]i的升高和pH值的下降。结论 可根据液压冲击伤后神经细胞内游离 [Ca2 +]i及 展开更多
关键词 神经元培养 液压冲击性脑损伤 细胞内游离钙 PH值
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槲芪散及槲寄生提取物对肝癌细胞内游离钙离子浓度的影响 被引量:14
9
作者 王鹏雁 安建多 +3 位作者 王池 王学从 武鑫瑞 王学江 《首都医科大学学报》 CAS 2012年第3期291-296,共6页
目的探讨方剂槲芪散及其君药槲寄生提取物多糖、总碱对人肝癌细胞HepG2生长的抑制作用及其对细胞内游离钙离子浓度的影响。方法采用MTT法测定槲芪散对细胞增生的抑制作用;利用流式细胞仪分析细胞周期、凋亡;利用激光共聚焦显微镜测定细... 目的探讨方剂槲芪散及其君药槲寄生提取物多糖、总碱对人肝癌细胞HepG2生长的抑制作用及其对细胞内游离钙离子浓度的影响。方法采用MTT法测定槲芪散对细胞增生的抑制作用;利用流式细胞仪分析细胞周期、凋亡;利用激光共聚焦显微镜测定细胞内游离钙离子浓度。结果槲芪散及槲寄生提取物有较好的抑制肿瘤细胞增生的作用,高剂量组除了槲芪散和槲寄生总碱48 h时间点外,OA值均较对照组明显降低(P<0.001),呈现出时间-剂量依赖性;经药物作用48 h后,槲寄生多糖及总碱组G1期细胞比例增加,S期细胞和G2期细胞比例降低,槲芪散组G1期细胞比例无明显变化,S期比例降低,G2期比例增加,3者均使细胞凋亡增加;加入不同浓度的槲芪散、槲寄生多糖及总碱,低浓度时荧光增强不明显,而高浓度均导致细胞内荧光强度瞬间增强,升高到一定水平后,基本维持在一高水平,除槲寄生总碱组有略微下降外,其余2组未见明显下降趋势。结论槲芪散、槲寄生多糖及总碱均能抑制肿瘤细胞增生,促进细胞凋亡,且这3种药物引起胞内钙超载可能是诱导HepG2凋亡的机制之一。 展开更多
关键词 槲芪散 槲寄生提取物 细胞周期 细胞凋亡 细胞内游离钙离子
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普罗托品对大鼠血管平滑肌收缩反应及细胞内游离钙浓度的影响 被引量:6
10
作者 李斌 吴芹 +2 位作者 孙安盛 石京山 黄燮南 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1097-1099,共3页
目的 探讨普罗托品(protopine ,Pro)对大鼠血管平滑肌细胞内游离钙浓度的影响。方法 采用无Ca2 + 复Ca2 + 的实验法,间接观察Pro对大鼠血管平滑肌细胞内游离钙浓度([Ca2 + ] i)的可能影响,再利用钙荧光指示剂Fura 2 AM负载的培养大... 目的 探讨普罗托品(protopine ,Pro)对大鼠血管平滑肌细胞内游离钙浓度的影响。方法 采用无Ca2 + 复Ca2 + 的实验法,间接观察Pro对大鼠血管平滑肌细胞内游离钙浓度([Ca2 + ] i)的可能影响,再利用钙荧光指示剂Fura 2 AM负载的培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,直接观察在Pro存在下,对去甲肾上腺素(NA)和高钾所致的[Ca2 + ] i 的升高的影响。结果 在无钙Krebs液中,Pro 10、3 0、10 0 μmol L对NA所致血管条的短暂收缩均有明显的浓度依赖性抑制作用,对复Ca2 + 后NA所诱发的持续收缩也呈剂量依赖性抑制作用。在Fura 2 AM负载血管平滑肌细胞的实验表明,Pro (5 0 μmol L ,10 0 μmol L)对静息时的[Ca2 + ] i 无明显影响;在有外钙存在条件下,Pro 5 0 μmol L能明显降低NA所致[Ca2 + ] i 的升高,对KCl引起的[Ca2 + ] i升高有降低趋势;当Pro的浓度增加到10 0 μmol L时,对NA和KCl引起的[Ca2 + ] i 升高均有明显的抑制作用。结论 Pro可能通过抑制Ca2 + 释放和(或)Ca2 + 内流来降低NA和高钾所致血管平滑肌[Ca2 + ] i 的升高,从而抑制血管平滑肌的收缩反应。 展开更多
关键词 普罗托品 细胞内游离钙 大鼠胸主动脉条 血管平滑肌细胞
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芥子碱对PC12细胞内游离钙升高的影响 被引量:4
11
作者 何玲 刘丽芳 +4 位作者 李海涛 郭胜伟 邱嘉斌 李富 蔡宝昌 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1679-1683,共5页
目的:考察芥子碱对高钾除极和谷氨酸引起细胞外钙内流以及咖啡因和环匹阿尼酸(cyclopia-zonic acid,CPA)引起细胞内钙释放所导致的PC12细胞内游离钙升高的影响。方法:PC12细胞用终浓度为5μmo.lL-1的钙离子荧光指示剂Fluo-3/AM于37℃避... 目的:考察芥子碱对高钾除极和谷氨酸引起细胞外钙内流以及咖啡因和环匹阿尼酸(cyclopia-zonic acid,CPA)引起细胞内钙释放所导致的PC12细胞内游离钙升高的影响。方法:PC12细胞用终浓度为5μmo.lL-1的钙离子荧光指示剂Fluo-3/AM于37℃避光负载孵育。细胞内游离钙([Ca2+]i)用VictorⅡ1420多功能标记分析仪检测,以荧光强度(FI)表示。结果:当有外钙存在时,PC12细胞静息[Ca2+]i的FI值为(1 188±163),75 mmol.L-1KCl和10 mmol.L-1谷氨酸引起细胞外钙内流,使[Ca2+]i增高,FI峰值分别增至(4 270±982)和(3 096±402)。芥子碱(0.01,0.1,1.0,10,100μmol.L-1)对静息[Ca2+]i没有明显的影响,但浓度相关性地抑制高钾和谷氨酸诱发的[Ca2+]i增高,抑制率分别为10.2%,39.5%,53.7%,71.8%,88.4%和30.3%,55.7%,68.5%,79.2%,94.1%。当无外钙存在时,PC12细胞静息[Ca2+]i的FI值为(813±112)。咖啡因(40 mmol.L-1)和CPA(30μmol.L-1)分别引起Caffeine-ryanodine和三磷酸肌醇(InsP3)敏感型-钙池释放而使[Ca2+]i升高,FI值分别增至(2 944±371)和(1 844±332)。芥子碱(0.1,1.0,10,100μmol.L-1)浓度相关性地抑制咖啡因和CPA诱发的[Ca2+]i增高,抑制率分别为23.7%,61.9%,77.5%,88.2%和10.9%,23.8%,44.6%,68.3%。结论:芥子碱能显著抑制电压依赖性和受体依赖性钙通道开放所引起的外钙内流,且对受体依赖性钙通道的抑制作用更强。此外,芥子碱对Caffeine-ryan-odine受体和InsP3敏感型钙池的内钙释放也有明显抑制作用,且对Caffeine-ryanodine受体敏感型钙池的抑制作用更强。这提示芥子碱有望成为很有研发前景的新型钙阻滞剂。 展开更多
关键词 芥子碱 细胞内游离钙 PCI2细胞 Fluo-3/AM 钙阻滞剂
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用Fura-2双波长荧光法测定小鼠海马细胞内游离钙 被引量:3
12
作者 高明奇 张天彪 +1 位作者 滕赞 孙黎光 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期197-198,200,共3页
目的:探讨小鼠海马细胞分离及细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的测定。方法:低浓度胰蛋白酶消化、分离海马细胞,采用Ca2+荧光指示剂Fura2双波长荧光法测定[Ca2+]i。结果:海马细胞存活率超过95%。细胞外Ca2+1.0mmol/L时,静息状态下海马细胞[Ca... 目的:探讨小鼠海马细胞分离及细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的测定。方法:低浓度胰蛋白酶消化、分离海马细胞,采用Ca2+荧光指示剂Fura2双波长荧光法测定[Ca2+]i。结果:海马细胞存活率超过95%。细胞外Ca2+1.0mmol/L时,静息状态下海马细胞[Ca2+]i为(210±10.7)nmol/L。30mmol/LKCl可显著增加[Ca2+]i,并且KCl的这种效应呈一定的剂量依赖关系。结论:低浓度胰蛋白酶消化分离小鼠海马细胞简单、可靠;Fura2建立的双波长荧光法灵敏、可靠。 展开更多
关键词 FURA-2 细胞内游离钙 海马细胞 小鼠
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感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠新模型的建立及其细胞内游离钙的变化 被引量:19
13
作者 韩运峰 苏诚坚 区碧如 《岭南心血管病杂志》 2003年第2期115-120,共6页
目的 建立一种新的感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠模型 ,并探讨该模型细胞内游离钙 ([Ca2 + ]i)的变化。方法 新生Wistar大鼠皮下注射辣椒辣素 (5 0mg/kg) ,对照组则皮下注射对照液 ,哺乳期后挑选出雄性大鼠分成 4组分别给予含盐... 目的 建立一种新的感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠模型 ,并探讨该模型细胞内游离钙 ([Ca2 + ]i)的变化。方法 新生Wistar大鼠皮下注射辣椒辣素 (5 0mg/kg) ,对照组则皮下注射对照液 ,哺乳期后挑选出雄性大鼠分成 4组分别给予含盐不同的饮食 4周 ,检测鼠尾收缩压、体重、淋巴细胞 [Ca2 + ]i 和 2 4h尿量、饮水量、尿钠、尿钾。结果 辣椒辣素处理的新生大鼠在高盐饮食时鼠尾收缩压、淋巴细胞 [Ca2 + ]i 明显增高 ,肾排钠和水功能降低。结论 新生大鼠辣椒辣素敏感性感觉神经损伤可使大鼠在盐负荷时血压显著而持久地升高、细胞 [Ca2 + ]i 明显升高及肾排钠和水功能受损。 展开更多
关键词 [CA^2+]I 辣椒辣素 盐敏感性高血压 细胞内游离钙 感觉神经 收缩压 新生大鼠 升高 淋巴细胞 皮下注射
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烧伤血清对大鼠腹腔巨噬细胞内游离钙浓度及其产生NO的影响 被引量:2
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作者 于宝军 王光毅 +3 位作者 沈洪兴 韦多 陈玉林 夏照帆 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S1期53-55,共3页
目的:观察烧伤血清对分离的大鼠腹腔巨噬细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)和产生NO的影响。方法:收集腹腔巨噬细胞,用Fura-2/AM作为细胞内游离钙离子指示剂测定[Ca2+]i,用烧伤血清刺激体外的腹腔巨噬细胞... 目的:观察烧伤血清对分离的大鼠腹腔巨噬细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)和产生NO的影响。方法:收集腹腔巨噬细胞,用Fura-2/AM作为细胞内游离钙离子指示剂测定[Ca2+]i,用烧伤血清刺激体外的腹腔巨噬细胞即刻进行[Ca2+]i的测定;用同浓度的烧伤血清刺激培养的腹腔巨噬细胞,测定上清NO稳定的代谢产物[NO2-+NO3-]的浓度。结果:烧伤血清能显著地促进巨噬细胞[Ca2+]i的增高,以烧伤后6h血清的作用最为明显,可达正常对照组的9倍,维拉帕米可部分抑制其作用。烧伤血清对腹腔巨噬细胞NO的产生有明显的抑制作用,也以6h烧伤血清为最明显。结论:烧伤血清能显著地升高腹腔巨噬细胞[Ca2+]i,而NO的产生被明显地抑制。细胞内钙超载和NO产生减少可能是烧伤后早期巨噬细胞免疫功能损伤主要因素之一。 展开更多
关键词 烧伤 巨噬细胞 细胞内游离钙浓度 一氧化氮
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青藤碱对家兔主动脉血管平滑肌细胞内游离钙浓度及蛋白激酶C的影响 被引量:7
15
作者 李乐 宋必卫 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期129-132,共4页
目的观测青藤碱对培养家兔血管平滑肌细胞内游离钙浓度及正常和缺血缺氧刺激下蛋白激酶C(PKC)活性的影响。方法Fura-2/AM作Ca2+指示剂,检测青藤碱对培养家兔主动脉血管平滑肌细胞静息Ca2+浓度及去甲肾上腺素,高K+,咖啡因刺激作用下的改... 目的观测青藤碱对培养家兔血管平滑肌细胞内游离钙浓度及正常和缺血缺氧刺激下蛋白激酶C(PKC)活性的影响。方法Fura-2/AM作Ca2+指示剂,检测青藤碱对培养家兔主动脉血管平滑肌细胞静息Ca2+浓度及去甲肾上腺素,高K+,咖啡因刺激作用下的改变,并与钙拮抗剂维拉帕米进行对照研究;复制血管平滑肌细胞缺血缺氧模型,液闪仪测定PKC活性。结果青藤碱剂量依赖性抑制高K+去极化引起[Ca2+]i升高,青藤碱10×10-6mol·L-1、3×10-5mol·L-1、10-4mol·L-1,对NE通过受体介导引起的[Ca2+]i增高也有明显抑制。但对静息状态下及咖啡因刺激的血管平滑肌细胞[Ca2+]i无明显影响。正常时,青藤碱处理后血管平滑肌细胞胞浆、胞膜PKC活性均升高;缺血缺氧状态下,胞浆PKC活性升高,但胞膜PKC活性降低,青藤碱处理后胞浆PKC活性下降,胞膜PKC活性上升。结论青藤碱可能抑制血管平滑肌细胞电压依赖性钙通道和受体操纵性钙通道,降低细胞内游离钙水平,调节缺血缺氧条件下血管平滑肌细胞PKC活性。 展开更多
关键词 青藤碱 血管平滑肌细胞 细胞内游离钙浓度 缺血 缺氧 蛋白激酶C
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石棉表面改性对石棉所致人胚肺细胞内游离钙离子浓度改变的抑制作用 被引量:10
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作者 樊晶光 王起恩 《中国安全生产科学技术》 CAS 2006年第4期12-15,共4页
为了探讨研究温石棉及用柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠预处理的温石棉对人胚肺(HEL)细胞内游离钙离子([Ca2+]i)浓度的影响。用Flou3/AM标记体外培养的HEL细胞内Ca2+后,将不同浓度的温石棉及用柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡过的... 为了探讨研究温石棉及用柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠预处理的温石棉对人胚肺(HEL)细胞内游离钙离子([Ca2+]i)浓度的影响。用Flou3/AM标记体外培养的HEL细胞内Ca2+后,将不同浓度的温石棉及用柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡过的温石棉与HEL细胞作用1h,荧光分光光度计测定细胞内[Ca2+]i。结果显示,20、40、80μg/ml温石棉单独作用于HEL细胞1h,可使HEL细胞内[Ca2+]i浓度分别升高3.0%、53.1%和116.7%,且具有明显的剂量-效应关系(r=0·976,P=0·024)。经三种化合物预处理的温石棉组HEL细胞内[Ca2+]i浓度均明显低于未处理温石棉组。得出结论,温石棉可致人胚肺细胞内游离钙离子浓度升高,但用三种化合物预处理温石棉,均可抑制温石棉所致人胚肺细胞内游离钙离子浓度的升高。 展开更多
关键词 温石棉 表面改性 人胚肺细胞 细胞内游离钙离子
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N-甲基-D-天冬氨酸对神经细胞内游离钙水平的影响 被引量:2
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作者 冯杰 李奎 +1 位作者 刘欣 许梓荣 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期425-427,共3页
目的:探讨N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)对神经细胞内游离钙离子浓度的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采用钙离子荧光指示剂Fura-2/AM和双波长检测技术测定细胞内游离钙的浓度。结果:1×10-8~1×10-4mol/LNMDA可使大鼠神经细胞... 目的:探讨N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)对神经细胞内游离钙离子浓度的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采用钙离子荧光指示剂Fura-2/AM和双波长检测技术测定细胞内游离钙的浓度。结果:1×10-8~1×10-4mol/LNMDA可使大鼠神经细胞内游离钙[Ca2+]i水平显著升高(P<0.05),且呈剂量和时间依赖关系。结论:NMDA升高神经细胞内[Ca2+]i的作用与胞外Ca2+大量内流和胞内Ca2+储池释放有关,且以胞外Ca2+内流为主。胞外Ca2+内流不仅与NMDA受体门控Ca2+通道和电压门控Ca2+通道有关,还与电压依赖性Na+通道有关。 展开更多
关键词 N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA) 细胞内游离钙 神经细胞 荧光指示剂
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中药柴胡提取物对人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度的影响 被引量:3
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作者 韩晓红 盖晓东 薛延军 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2004年第4期323-325,共3页
目的测定中药柴胡(Bupleurun Chinese DC, BCDC)提取物对人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,以探索柴胡逆转BEL-7402细胞多药耐药的机制.方法以Fura-2/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂,用双波长荧光分光光度计分别... 目的测定中药柴胡(Bupleurun Chinese DC, BCDC)提取物对人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,以探索柴胡逆转BEL-7402细胞多药耐药的机制.方法以Fura-2/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂,用双波长荧光分光光度计分别测定不同条件下的BEL-7402细胞内[Ca2+]i.结果柴胡可使人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度下降(P<0.001).结论柴胡可使人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度下降,为一种钙离子通道阻滞剂(Calcium channel blocker, CCB),提示钙离子通道阻滞作用为柴胡逆转BEL-7402细胞多药耐药的机制之一. 展开更多
关键词 柴胡 细胞内游离钙 FURA-2/AM BEL-7402
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创伤后神经元细胞内游离钙的变化及其影响因素的研究 被引量:3
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作者 张相彤 刘恩重 +1 位作者 苏君 戴钦舜 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2002年第3期191-193,共3页
目的 研究液压冲击伤时体外培养的单个大鼠神经细胞内游离钙 ([Ca2 + ]i)的变化 ,探讨尼莫地平 (Nimo dipine)、D 2氨基戊酸 (D AP 5 )和亚低温对创伤后细胞内 [Ca2 + ]i 的影响及其机制。方法 以Fluo 3 AM为细胞内钙离子的荧光指示... 目的 研究液压冲击伤时体外培养的单个大鼠神经细胞内游离钙 ([Ca2 + ]i)的变化 ,探讨尼莫地平 (Nimo dipine)、D 2氨基戊酸 (D AP 5 )和亚低温对创伤后细胞内 [Ca2 + ]i 的影响及其机制。方法 以Fluo 3 AM为细胞内钙离子的荧光指示剂 ,用激光共聚焦显微镜测定液压冲击伤时体外培养的单个大鼠神经细胞内 [Ca2 + ]i 的变化。结果 液压冲击伤后脑皮质细胞内 [Ca2 + ]i 迅速升高 ,2 4h达高峰 ,随后逐渐下降 ,4 8h仍维持较高水平。Nimodip ine、D AP 5于各时相均降低细胞内 [Ca2 + ]i,其中Nimodipine 10h内应用最佳 ,D AP 5于 1~ 10h之间应用较好 ,而亚低温 30min内显著降低细胞内 [Ca2 + ]i(P <0 .0 0 1) ,最佳时机在伤后 15min内 ,伤后 1h以上无效。创伤后神经元细胞内钙超载 ,Nimodipine、D AP 5和亚低温均降低细胞内 [Ca2 + ]i,但各自应用的最佳时间窗不同。结论 对创伤后神经细胞Ca2 + 超载应注意综合治疗 ,并选定各自作用最佳时间窗。 展开更多
关键词 神经元细胞 影响因素 液压冲击性脑损伤 细胞内游离钙 尼莫地平 D-2氨基戊酸 亚低温
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水蛭提取液对视网膜色素上皮细胞内游离钙离子的影响 被引量:9
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作者 郑燕林 陈海燕 +2 位作者 吕帆 王万杰 周春阳 《中国中医眼科杂志》 2007年第1期39-41,共3页
目的观察水蛭提取液对视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)内游离钙离子(Intracellular liber calcium ion,[Ca2+]i)浓度的影响。方法利用体外培养的视网膜色素上皮细胞,采用双波长荧光分光光度计测量法测定视网膜色素... 目的观察水蛭提取液对视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)内游离钙离子(Intracellular liber calcium ion,[Ca2+]i)浓度的影响。方法利用体外培养的视网膜色素上皮细胞,采用双波长荧光分光光度计测量法测定视网膜色素上皮细胞内[Ca2+]i浓度。结果空白组(A)133.4517±13.17789、凝血酶组(A1)192.2037±4.54292、水蛭组(A2)96.9935±8.80148、水蛭和凝血酶同时加组(A3)142.0867±26.47195、先加水蛭后加凝血酶组(A4)162.7284±29.13950、先加凝血酶后加水蛭组(A5)130.4810±20.48673。结论水蛭提取液能使RPE细胞内游离Ca2+浓度下降,为进一步深入研究水蛭提取液抑制RPE细胞增殖的作用机制,防治增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreo-retinopathy,PVR)提供了实验室依据。 展开更多
关键词 水蛭 视网膜色素上皮细胞 细胞内游离钙离子
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