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雄激素受体、细胞周期蛋白D1在非特殊型浸润性乳腺癌中的表达及与患者超声征象的关系
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作者 杜佩 张晓芸 +1 位作者 葛欣 安晓玲 《癌症进展》 2023年第21期2387-2390,共4页
目的 探讨雄激素受体(AR)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在非特殊型浸润性乳腺癌中的表达及与患者超声征象的关系。方法 收集105例非特殊型浸润性乳腺癌患者的非特殊型浸润性乳腺癌组织和癌旁正常组织,采用免疫组织化学染色法检测AR、cycl... 目的 探讨雄激素受体(AR)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在非特殊型浸润性乳腺癌中的表达及与患者超声征象的关系。方法 收集105例非特殊型浸润性乳腺癌患者的非特殊型浸润性乳腺癌组织和癌旁正常组织,采用免疫组织化学染色法检测AR、cyclin D1表达情况。比较非特殊型浸润性乳腺癌组织和癌旁正常组织中AR、cyclin D1表达情况,比较不同组织学分级、AR表达情况、cyclin D1表达情况非特殊型浸润性乳腺癌患者的超声征象。采用Pearson相关分析法分析AR、cyclin D表达情况与非特殊型浸润性乳腺癌患者超声征象的相关性。结果 非特殊型浸润性乳腺癌组织中AR、cyclin D1阳性表达率均明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同组织学分级非特殊型浸润性乳腺癌患者的肿瘤直径、边缘毛刺征、后方回声、周边高回声晕征、腋窝淋巴结转移情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。不同AR、cyclin D1表达情况非特殊型浸润性乳腺癌患者的肿瘤直径、病灶内微钙化情况、病灶内血流情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。AR、cyclin D1表达与非特殊型浸润性乳腺癌患者的肿瘤直径、病灶内微钙化及病灶内血流均呈正相关(P﹤0.01)。结论非特殊型浸润性乳腺癌组织中AR、cyclin D1阳性表达率均较高,且其表达与患者的超声征象有关。 展开更多
关键词 非特殊型浸润性乳腺癌 雄激素受体 细胞周期蛋白d1 超声征象
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细胞周期蛋白D1在乳腺癌、结直肠癌及食管癌中的研究进展 被引量:2
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作者 刘健 王沐廷 《中国医学创新》 CAS 2023年第1期165-169,共5页
细胞周期蛋白D1(CCND1)在细胞周期调节作用获得公认,CCND1的异常表达与癌症的发展、预后的关联受到越来越多的重视。笔者选取了临床上常见的乳腺癌、结直肠癌、食管癌,探讨了CCND1引起癌症发生、进展的内在机制;并对CCND1与乳腺癌、结... 细胞周期蛋白D1(CCND1)在细胞周期调节作用获得公认,CCND1的异常表达与癌症的发展、预后的关联受到越来越多的重视。笔者选取了临床上常见的乳腺癌、结直肠癌、食管癌,探讨了CCND1引起癌症发生、进展的内在机制;并对CCND1与乳腺癌、结直肠癌、食管癌预后的关联开展了相关综述,旨在加深对CCND1认识的同时,为广大学者在肿瘤分子标记物领域的研究提供指导。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白d1 乳腺癌 结直肠癌 食管癌
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miR-134-3p靶向细胞周期蛋白D1抑制胃癌细胞增殖的作用及机制 被引量:3
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作者 蒋林燕 沈晓雯 邵晓轶(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1279-1284,共6页
目的:研究miR-134-3p靶向细胞周期蛋白D1(CCND1)抑制胃癌细胞增殖的作用及机制。方法:收集手术切除的胃癌组织及癌旁组织,培养正常胃黏膜上皮细胞株GES-1及胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901、BGC-823,检测miR-134-3p、CCND1的表达水平;BGC-... 目的:研究miR-134-3p靶向细胞周期蛋白D1(CCND1)抑制胃癌细胞增殖的作用及机制。方法:收集手术切除的胃癌组织及癌旁组织,培养正常胃黏膜上皮细胞株GES-1及胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901、BGC-823,检测miR-134-3p、CCND1的表达水平;BGC-823细胞分组并转染阴性对照(NC)模拟物或miR-134-3p模拟物、感染NC腺病毒或CCND1腺病毒,检测细胞增殖抑制率、细胞周期比例、miR-134-3p及CCND1表达水平;双荧光素酶报告基因验证miR-134-3p与CCND1的靶向结合;饲养BALB/c裸鼠,皮下注射感染NC腺病毒或miR-134-3p腺病毒的BGC-823,成瘤后测定移植瘤质量、体积及CCND1表达水平。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中miR-134-3p表达水平明显降低、CCND1表达水平明显升高(P<0.05),且miR-134-3p与CCND1呈负相关;与GES-1细胞相比,BGC-823、MGC-803、SGC-7901细胞中miR-134-3p表达水平明显降低,CCND1表达水平明显升高(P<0.05),且BGC-823细胞中miR-134-3p、CCND1表达变化最显著。与miR-NC组相比,miR-134-3p组BGC-823细胞的增殖抑制率、G2/M期细胞占比明显升高,G_(0)/G_(1)期及S期细胞占比、CCND1表达水平、CCND1报告基因的荧光活力明显降低(P<0.05);与miR-134-3p+Ad-NC组相比,miR-134-3p+Ad-CCND1组BGC-823细胞的增殖抑制率、G2/M期细胞占比明显降低,G_(0)/G_(1)期及S期细胞占比、CCND1表达水平明显升高(P<0.05);与miR-NC组相比,miR-134-3p组裸鼠移植瘤质量明显减轻,体积明显缩小,移植瘤中CCND1表达水平明显降低(P<0.05)。结论:miR-134-3p通过靶向抑制CCND1途径抑制胃癌细胞增殖及细胞周期。 展开更多
关键词 胃癌 miR-134-3p 细胞周期蛋白d1 增殖 细胞周期 移植瘤
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周围型非小细胞肺癌患者细胞周期蛋白D1、CD147与预后的关系研究 被引量:2
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作者 刘文华 旷菲 +1 位作者 陈小香 范旭 《实用医院临床杂志》 2023年第1期111-114,共4页
目的 分析周围型非小细胞肺癌患者细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、CD147与预后的关系。方法 2017年3月至2020年3月我院收治的周围型非小细胞肺癌患者128例(观察组),以患者癌旁正常组织(距肿瘤切缘至少0.5 cm处且经HE染色检查无癌细胞浸润)... 目的 分析周围型非小细胞肺癌患者细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、CD147与预后的关系。方法 2017年3月至2020年3月我院收治的周围型非小细胞肺癌患者128例(观察组),以患者癌旁正常组织(距肿瘤切缘至少0.5 cm处且经HE染色检查无癌细胞浸润)为癌旁组,选取同期收治非肺部恶性疾病患者71例病理组织作为良性组。随访12个月,收集患者一般资料,了解预后情况。对比不同组织中CyclinD1、CD147表达水平,分析不同临床特征患者CyclinD1、CD147表达情况及影响周围型非小细胞肺癌者预后因素。结果 观察组中CyclinD1、CD147阳性表达高于癌旁组与良性组(P<0.05);不同TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移患者CyclinD1表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),不同TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移、肿瘤直径患者CD147表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);预后良好与预后不良患者肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移及CyclinD1、CD147水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。TNM分期、分化程度、淋巴结转移、CyclinD1、CD147是患者预后不良的影响因素(P<0.05)。结论 CyclinD1、CD147在周围型非小细胞肺癌患者中表达明显上调,且两者均为患者预后不良的影响因素。 展开更多
关键词 周围型非小细胞肺癌 细胞周期蛋白d1 Cd147 预后
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淫羊藿素通过调控黏着斑激酶及下游细胞外信号调节激酶/细胞周期蛋白D1和蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素蛋白信号通路抑制肝癌细胞增殖的作用机制研究
5
作者 李珍 高寒 +4 位作者 赵永康 王梓萱 王婧筱 王伽伯 宋鑫华 《环球中医药》 CAS 2023年第12期2401-2407,共7页
目的探究淫羊藿素(icaritin,ICA)抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法以Huh7肝癌细胞为研究对象并在体外培养;设置200、100、50、20、10、5、2、1、0.5μmol/L不同浓度的ICA给药干预72小时之后,采用0.5%结晶紫染色分析ICA对Huh7肝癌细胞... 目的探究淫羊藿素(icaritin,ICA)抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法以Huh7肝癌细胞为研究对象并在体外培养;设置200、100、50、20、10、5、2、1、0.5μmol/L不同浓度的ICA给药干预72小时之后,采用0.5%结晶紫染色分析ICA对Huh7肝癌细胞生存的影响;将Huh7肝癌细胞给与ICA高(10μmol/L)、中(5μmol/L)、低(2.5μmol/L)三个浓度,每个浓度设置三个复孔,通过克隆形成实验检测ICA对Huh7肝癌细胞增殖能力的影响;Huh7肝癌细胞给与ICA IC 50值浓度,对照孔及ICA给药孔分别在0、6、12、24小时在倒置显微镜下拍照,通过细胞划痕分析ICA对肝癌细胞迁移能力的影响;并且用流式细胞术对细胞周期进行分析。另外,通过蛋白印迹对增殖相关蛋白,如增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、磷酸化黏着斑激酶(phosphorylated focal adhesion kinase,p-FAK)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated protein kinase,p-ERK)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-mTOR)等蛋白的表达水平进行分析。结果ICA可以明显抑制肝癌细胞的增殖及迁移能力,并且使肝癌细胞的细胞周期在G1期发生阻滞(P<0.05)。另外,研究发现ICA可以下调p-FAK及其下游调节蛋白p-ERK、cyclin D1以及p-Akt、p-mTOR、p-S6的表达水平。结论ICA可能通过调控FAK及下游ERK/cyclin D1和Akt/mTOR信号通路从而抑制肝癌细胞的增殖生长。 展开更多
关键词 细胞 淫羊藿素 黏着斑激酶 细胞外信号调节激酶 细胞周期蛋白d1 蛋白激酶B 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
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NIK和IKKβ连接蛋白、C-myc和细胞周期蛋白D1在结肠癌组织中的表达及意义 被引量:13
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作者 李素艳 黄杰安 +7 位作者 谭林 覃蒙斌 刘诗权 刘宝玉 梁梦紫 徐春燕 彭鹏 李佳荃 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第24期2922-2928,共7页
目的检测结肠癌组织中NIK和IKKβ连接蛋白(NIBP)、磷酸化p65(p-p65)和C-myc、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达,并探讨其意义。方法收集广西医科大学第一附属医院结直肠外科2013年2月—2014年2月经外科手术切除及消化内科肠镜活检的部... 目的检测结肠癌组织中NIK和IKKβ连接蛋白(NIBP)、磷酸化p65(p-p65)和C-myc、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达,并探讨其意义。方法收集广西医科大学第一附属医院结直肠外科2013年2月—2014年2月经外科手术切除及消化内科肠镜活检的部分标本151例,其中正常结肠黏膜16例、结肠腺瘤21例、结肠癌114例。采用SP免疫组化法分别检测正常结肠黏膜组织、结肠腺瘤组织及结肠癌组织NIBP、p-p65、C-myc和cyclin D1阳性细胞表达率;分析结肠癌组织中NIBP、C-myc和cyclin D1阳性细胞表达率与p-p65阳性细胞表达率的相关性。结果正常结肠黏膜组织、结肠腺瘤组织、结肠癌组织的NIBP、p-p65、C-myc和cyclin D1阳性细胞表达率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结肠癌组织NIBP、p-p65、C-myc和cyclin D1阳性细胞表达率高于正常结肠黏膜组织和结肠腺瘤组织(P<0.017);正常结肠黏膜组织、结肠腺瘤组织中NIBP、p-p65、C-myc和cyclin D1阳性细胞表达率比较,差异无统计学意义(P>0.017)。不同组织学类型、浸润深度及有无淋巴结转移、远处转移患者结肠癌组织NIBP、p-p65、C-myc和cyclin D1阳性细胞表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。分化程度越低、TNM分期越高、Duke's分期越高患者结肠癌组织NIBP、p-p65、C-myc和cyclin D1阳性细胞表达率越高(P<0.05)。NIBP、C-myc、cyclin D1阳性细胞表达率与p-p65阳性细胞表达率均呈正相关(P<0.05)。结论 NIBP可能通过激活核因子κB(NF-κB)信号转导通路上调C-myc和cyclin D1等的表达而影响结肠癌的治疗发生、发展、侵袭和转移,为临床发现结肠癌的治疗新靶点提供了参考依据。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 NIK和IKKβ连接蛋白 细胞周期蛋白d1 CYCLIN d1
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细胞周期蛋白D1、CDK4在乳腺癌中的表达及其临床意义 被引量:12
7
作者 陆劲松 沈镇宙 +6 位作者 吴炅 江明 沈坤炜 韩企夏 施达仁 张廷璆 邵志敏 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2001年第2期105-108,共4页
目的 :研究乳腺癌组织周期蛋白D1、CDK4的蛋白表达定位、表达水平 ,及与P2 1蛋白表达、与临床病理指标的关系及其预后意义。方法 :①应用免疫组织化学染色方法 ,检测 10 6例乳腺癌组织石蜡切片上的周期蛋白D1、CDK4的蛋白定位和蛋白表... 目的 :研究乳腺癌组织周期蛋白D1、CDK4的蛋白表达定位、表达水平 ,及与P2 1蛋白表达、与临床病理指标的关系及其预后意义。方法 :①应用免疫组织化学染色方法 ,检测 10 6例乳腺癌组织石蜡切片上的周期蛋白D1、CDK4的蛋白定位和蛋白表达 ,比较其与P2 1的蛋白表达 ,与临床病理学指标 ,如病理类型、组织学分型、组织学分级、淋巴结状态、雌激素受体状态、TNM分期等之间的关系 ;②对周期蛋白D1、CDK4、P2 1及临床病理指标如肿瘤的组织学分级、淋巴结状态、TNM分期、ER状态等 ,应用Kaplan Meier法Log rank检验进行单因素生存分析 ,应用Cox比例风险模型进行多因素生存分析。结果 :①周期蛋白D1表达定位于细胞核、CDK4的表达位于细胞质和细胞核 ,周期蛋白D1的阳性率为 30 2 % ,CDK4的阳性率为 5 3 8%。②周期蛋白D1及CDK4的表达与乳腺癌的病理诊断组织学分型、组织学分级、ER状态、临床TNM分期、淋巴结状态、P2 1蛋白表达表达水平无关 (P >0 0 5 )。周期蛋白D1的蛋白表达与CDK4的蛋白表达相关 (P <0 0 5 )。③单因素分析提示影响 140个月无瘤生存率及总生存率的因素有 :临床TNM分期、组织学分级、腋淋巴结状态、周期蛋白D1的蛋白表达 (P <0 0 5 )。在无腋淋巴结转移亚组周期蛋白D1蛋白表达单因素生存分析? 展开更多
关键词 乳腺癌 细胞周期蛋白d1 CdK4 P21 预后因素
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细胞周期蛋白D1基因多态性与肝细胞癌遗传易感性的相关性 被引量:9
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作者 朱忠政 丛文铭 +3 位作者 冼志红 吴伟清 吴孟超 朱冠山 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2007年第20期1521-1523,共3页
目的:探讨细胞周期蛋白D1(Cy-clinD1)基因A870G多态性与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)遗传易感性的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测225例HCC与428名对照的CyclinD1A870G基因型... 目的:探讨细胞周期蛋白D1(Cy-clinD1)基因A870G多态性与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)遗传易感性的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测225例HCC与428名对照的CyclinD1A870G基因型分布及差异。结果:全样本以及男性样本HCC与对照间的基因型分布差异均无统计学意义。但在女性,HCC组870G等位基因频率显著高于对照组(53.2%vs42.0%),P=0.012。与A/A纯合子相比,A/G杂合子的HCC风险增加至1.54倍(95%CI:0.79-3.01),P=0.202,而G/G纯合子的HCC风险显著增加至2.63倍(95%CI:1.20-5.78),P=0.016。结论:CyclinD1870G增加女性HCC发病风险,G/G基因型是女性患HCC的一个遗传易感因素。 展开更多
关键词 肝肿瘤/遗传学 细胞周期蛋白d1 多态性 限制性片段长度 病例对照研究
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丹参对大鼠局灶性脑缺血后神经元内细胞周期蛋白D1表达的影响 被引量:12
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作者 张家堂 郎森阳 +2 位作者 匡培根 张风英 刘洁晓 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2001年第4期272-274,共3页
目的 观察大鼠局灶性脑缺血后神经元内细胞周期蛋白D1(cyclinD1)表达与神经细胞凋亡的关系以及丹参的影响。方法 采用线栓法大鼠大脑中动脉持续阻塞模型 ,应用免疫组织化学和TUNEL染色方法观察假手术组和缺血后不同时间阳性染色神经... 目的 观察大鼠局灶性脑缺血后神经元内细胞周期蛋白D1(cyclinD1)表达与神经细胞凋亡的关系以及丹参的影响。方法 采用线栓法大鼠大脑中动脉持续阻塞模型 ,应用免疫组织化学和TUNEL染色方法观察假手术组和缺血后不同时间阳性染色神经细胞的数量和分布情况及丹参的影响。结果 cyclinD1蛋白表达自缺血后 6h开始出现 ,缺血后 48h达高峰 ;丹参组各相应时间点cyclinD1蛋白表达明显减少 (P <0 .0 1)。凋亡细胞自缺血后 12h开始出现 ,缺血后 72h达高峰 ;丹参组各相应时间点凋亡细胞表达明显减少 (P <0 .0 1)。相邻切片可见cyclinD1蛋白表达和凋亡细胞染色区域基本相同。结论 脑缺血后cyclinD1的异常表达可能诱发了缺血神经细胞的凋亡 。 展开更多
关键词 脑缺血 细胞周期蛋白d1 细胞凋亡 丹参 大鼠
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人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定 被引量:7
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作者 王鸿鹤 朱孝峰 +3 位作者 谢冰芬 冯公侃 沈竞康 刘宗潮 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期444-447,共4页
【目的】构建表达人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段,克隆到pGEM-Teasy载体上。测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体pET-22b(+)上,重组质... 【目的】构建表达人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段,克隆到pGEM-Teasy载体上。测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体pET-22b(+)上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DL3),使之高效表达融合蛋白细胞周期蛋白D1及CDK4。SDS-PAGE电泳及Westernblotting鉴定表达蛋白。【结果】用PCR扩增得到了正确的目的基因片段并构建成pET-cyclinD1和pET-CDK4两个原核表达载体。将其转化大肠杆菌,Westernblot检测证实了转化的大肠杆菌能表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。【结论】本研究成功构建了细胞周期蛋白D1及CDK4原核表达载体,后两者在细胞内能正确表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白d1 细胞周期蛋白激酶CdK4 HL-60细胞 肿瘤
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细胞周期蛋白D1的高表达与雌激素受体表达及乳腺癌患者良好预后相关 被引量:9
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作者 杨成成 南克俊 +2 位作者 张雅敏 陈怡萌 秦思达 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期84-87,共4页
目的探讨细胞周期蛋白D1(cyclin D1)与雌激素受体(ER)在乳腺癌中的表达和临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测102例乳腺癌组织和60例正常乳腺组织标本中cyclin D1及ER蛋白表达,结合临床病理及术后5年随访资料,分析cyclin D1与ER相... 目的探讨细胞周期蛋白D1(cyclin D1)与雌激素受体(ER)在乳腺癌中的表达和临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测102例乳腺癌组织和60例正常乳腺组织标本中cyclin D1及ER蛋白表达,结合临床病理及术后5年随访资料,分析cyclin D1与ER相关性及与预后之间的关系。结果与正常乳腺组织相比,乳腺癌组织中cyclin D1和ER表达显著性增加,且cyclin D1表达与肿瘤组织学分级、TNM分期、ER蛋白表达相关。Spearman相关性分析显示,cyclin D1与ER表达水平呈正相关。Kaplan-Meier生存分析发现,cyclin D1高表达组乳腺癌患者生存期明显高于低表达组。Cox多因素分析表明cyclin D1、ER及TNM分期是影响患者预后的独立因素。结论 Cyclin D1在乳腺癌组织高表达,与ER表达正相关,且指示良好的预后。 展开更多
关键词 乳腺癌 细胞周期蛋白d1 雌激素受体
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p16、细胞周期蛋白D1和pRb在头颈部鳞癌的表达及其意义 被引量:4
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作者 陶泽璋 刘剑锋 +2 位作者 肖伯奎 杨强 华清泉 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第10期902-904,共3页
目的:探讨 p16、细胞周期蛋白 D1( cyclinD1)和 pRb在头颈部鳞癌( head and neck squamous cell carcinoma, HNSCC)的表达及他们的相互关系和其意义。方法:应用免疫组织化学方法检测 32例原发 HNSCC患者癌组织中 p16、 cyclinD1和... 目的:探讨 p16、细胞周期蛋白 D1( cyclinD1)和 pRb在头颈部鳞癌( head and neck squamous cell carcinoma, HNSCC)的表达及他们的相互关系和其意义。方法:应用免疫组织化学方法检测 32例原发 HNSCC患者癌组织中 p16、 cyclinD1和 pRb的蛋白表达。结果: p16、 cyclinD1、 pRb的总异常率为 90.6%( 29/32),其中 p16和 pRb蛋白表达缺失分别为 62.5%( 20/32)和 34.4%( 11/32), cyclinD1过表达为 34.4%( 11/32)。 p16与 pRb呈负相关性( 展开更多
关键词 头颈部鳞癌 细胞周期蛋白d1 P16蛋白 PRB
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哮喘小鼠气道平滑肌细胞增殖及细胞周期蛋白D1表达的差异 被引量:4
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作者 卓致远 黄茂 +3 位作者 葛海燕 王正东 崔学范 殷凯生 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期43-46,F0003,共5页
目的:研究哮喘小鼠气道重建模型中气道平滑肌细胞(ASMC)的细胞增殖、细胞周期及细胞周期蛋白D1(cyclinD1)表达的变化,探讨cyclinD1对支气管哮喘气道重建中平滑肌细胞增殖过程及细胞周期的影响,进而为哮喘的诊断和治疗提供新的依据。方法... 目的:研究哮喘小鼠气道重建模型中气道平滑肌细胞(ASMC)的细胞增殖、细胞周期及细胞周期蛋白D1(cyclinD1)表达的变化,探讨cyclinD1对支气管哮喘气道重建中平滑肌细胞增殖过程及细胞周期的影响,进而为哮喘的诊断和治疗提供新的依据。方法:用Balb/c小鼠建立哮喘气道重建模型后进行ASMC原代培养,并以原代培养的正常小鼠ASMC为对照组,以四唑盐比色试验(MTT)检测细胞增殖能力,流式细胞术(FCM)测定细胞周期,FCM检测cyclinD1表达。结果:与对照组比较,哮喘组细胞的细胞增殖显著增快(P<0.05);细胞周期中S期比例明显增高;cyclinD1在胞质中表达明显增加。结论:在哮喘气道重建过程中ASMC经历了一定程度的过增殖过程,cyclinD1的表达增加参与了细胞增殖,气道重建环境可刺激气道平滑肌细胞增殖能力。 展开更多
关键词 支气管哮喘 气道重建 气道平滑肌细胞 细胞周期蛋白d1 基因表达
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异丹叶大黄素下调膀胱癌细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制研究 被引量:5
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作者 方勇 王章桂 +1 位作者 侯琦 卢瑜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期53-60,共8页
目的:探索异丹叶大黄素(ISO)下调肿瘤细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制。方法:以ISO作用于人源性膀胱癌UMUC3、RT12和RT4细胞后用Western blotting法检测细胞周期蛋白D1表达水平;以RTPCR法检测细胞周期蛋白D1 mRNA的表达水平。稳定... 目的:探索异丹叶大黄素(ISO)下调肿瘤细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制。方法:以ISO作用于人源性膀胱癌UMUC3、RT12和RT4细胞后用Western blotting法检测细胞周期蛋白D1表达水平;以RTPCR法检测细胞周期蛋白D1 mRNA的表达水平。稳定转染细胞周期蛋白D1启动子萤光素酶报告基因至UMUC3细胞并筛选后,检测ISO预处理后萤光素酶活性。ISO预处理UMUC3细胞后,提取核蛋白检测核转录因子表达水平的变化。分别稳定转染GFP和GFP-细胞周期蛋白D1表达构建载体,筛选克隆;ISO预处理后,Western blotting法检测细胞周期蛋白D1的蛋白表达水平,贴壁依赖性细胞生长实验法检测细胞生长能力的变化,流式细胞术检测细胞周期的变化。分别稳定转染人源性细胞周期蛋白D1野生型和-163位点突变型萤光素酶报告基因质粒载体至UMUC3细胞并筛选,ISO预处理后检测细胞的萤光素酶活性。最后利用染色质免疫沉淀的方法,以抗Sp1抗体检测ISO对Sp1与细胞周期蛋白D1启动子结合力的影响。结果:ISO可从mRNA和蛋白水平显著抑制肿瘤细胞的细胞周期蛋白D1水平,并且是从内源性转录水平来抑制细胞周期蛋白D1的转录。ISO可抑制、下调核转录因子Sp1的表达,并抑制Sp1与细胞周期蛋白D1启动子区域的结合力,该结合位点主要位于启动子-92到+27bp的5’-非翻译区。结论:ISO可通过下调Sp1核转录因子表达及其与细胞周期蛋白D1启动子的结合,从内源性转录水平来抑制细胞周期蛋白D1的表达,从而诱导G0/G1细胞周期阻滞并抑制肿瘤细胞增殖。我们的研究将为临床中药单体ISO综合治疗肿瘤提供新的策略。 展开更多
关键词 异丹叶大黄素 膀胱癌 细胞周期蛋白d1 Sp1转录因子 细胞周期阻滞
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白三烯受体拮抗剂对哮喘小鼠气道重塑及细胞周期蛋白D1的表达影响 被引量:6
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作者 葛海燕 黄茂 +1 位作者 姚欣 殷凯生 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期257-261,F0003,共6页
目的:研究应用白三烯受体拮抗剂(孟鲁司特钠)对哮喘小鼠肺组织中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表达影响及对支气管哮喘气道重塑的作用,探讨白三烯受体拮抗剂在哮喘治疗中的作用。方法:将30只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、孟鲁... 目的:研究应用白三烯受体拮抗剂(孟鲁司特钠)对哮喘小鼠肺组织中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表达影响及对支气管哮喘气道重塑的作用,探讨白三烯受体拮抗剂在哮喘治疗中的作用。方法:将30只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、孟鲁司特钠组3组,每组10只;卵蛋白致敏和激发建立哮喘小鼠模型;HE染色观察各组气道炎症发生及气道结构改变情况;免疫组化观察肺组织中CyclinD1的表达及定位;RT-PCR及Western-blot测定各组小鼠肺组织中CyclinD1的mRNA和蛋白表达变化。结果:HE染色提示哮喘组与对照组相比出现嗜酸性粒细胞浸润增多、纤毛脱失、平滑肌细胞层增厚等改变,而治疗组上述改变较哮喘组为轻;免疫组化显示CyclinD1在哮喘小鼠气道平滑肌细胞、内皮细胞、成纤维细胞中皆有表达而在对照组中表达减弱(P<0.05),而治疗组表达量较哮喘组低(P<0.05);RT-PCR及Westernblot检测发现CyclinD1在哮喘组表达较对照组为高(P<0.01),而治疗组表达量低于哮喘组(P<0.01)。结论:哮喘小鼠肺组织中CyclinD1表达量较正常组为高;白三烯受体拮抗剂能够抑制CyclinD1表达,减轻气道炎症反应、延缓气道重塑进程。 展开更多
关键词 支气管哮喘 气道重塑 白三烯受体拈抗剂 细胞周期蛋白d1
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细胞周期蛋白D1重组质粒的构建及其在鼻咽癌细胞中的表达 被引量:3
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作者 柏志全 张海峰 +4 位作者 陈丽新 朱林燕 左婉红 和树同 王立伟 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期202-205,共4页
目的克隆人细胞周期蛋白D1基因,构建真核表达载体,诱导并鉴定其表达。方法利用RT-PCR法,以低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞mRNA为模板,扩增周期蛋白D1基因,构建重组表达载体pIRES2-EGFP-D1和pEGFP-C2-D1,用脂质体LipofectamineTM 2000将重组质... 目的克隆人细胞周期蛋白D1基因,构建真核表达载体,诱导并鉴定其表达。方法利用RT-PCR法,以低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞mRNA为模板,扩增周期蛋白D1基因,构建重组表达载体pIRES2-EGFP-D1和pEGFP-C2-D1,用脂质体LipofectamineTM 2000将重组质粒转染到低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞,诱导其表达,免疫荧光、Western blotting等鉴定其表达。结果电泳获得918bp预期片段,重组质粒经酶切、PCR和测序分析证实含有周期蛋白D1完整读码框,将重组质粒导入CNE-2Z细胞并成功表达,目的蛋白经免疫荧光和Western blotting鉴定具有生物学活性。结论成功克隆并构建含周期蛋白D1基因的真核表达GFP质粒,为进一步研究周期蛋白D1在鼻咽癌CNE-2Z细胞中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白d1 绿色荧光蛋白 质粒构建 免疫荧光 免疫印迹
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凋亡抑制因子Livin和细胞周期蛋白D1在外鼻基底细胞癌的表达及意义 被引量:4
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作者 王世军 姚雅芬 +2 位作者 张爱华 范宗宪 魏晓丽 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期813-816,共4页
目的检测凋亡抑制因子Livin和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在外鼻基底细胞癌中的表达,探讨两者在外鼻基底细胞癌发生、发展过程中的作用及其相关性。方法采用免疫组织化学技术检测凋亡抑制因子Livin和Cyclin D1在30例外鼻基底细胞癌和18... 目的检测凋亡抑制因子Livin和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在外鼻基底细胞癌中的表达,探讨两者在外鼻基底细胞癌发生、发展过程中的作用及其相关性。方法采用免疫组织化学技术检测凋亡抑制因子Livin和Cyclin D1在30例外鼻基底细胞癌和18例外鼻正常组织中的表达,并观察两者在外鼻基底细胞癌表达的相关性。结果 Livin和Cyclin Dl在外鼻基底细胞癌组织中阳性表达率53.33%(16/30)和63.33%(19/30),明显高于外鼻正常组织11.11%(2/18)和16.67%(3/18),差异均有显著性(P<0.01)。两者在外鼻基底细胞癌中的表达呈正相关。结论凋亡抑制因子Livin和Cyclin D1均参与外鼻基底细胞癌的发生、发展过程,并且两者之间存在反馈调节机制,在外鼻基底细胞癌的形成中起协同作用。 展开更多
关键词 基底细胞 凋亡抑制因子LIVIN 细胞周期蛋白d1 免疫组织化学
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核因子κB与细胞周期蛋白D1在骨肉瘤中的表达及相关性研究 被引量:3
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作者 高大新 吕刚 +2 位作者 黄涛 郑玮 杜娃 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期154-155,158,共3页
目的 :探讨骨肉瘤细胞中核因子κB(NF κB)及细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达及其意义。 方法 :应用免疫组织化学SABC法 ,检测 4 6例骨肉瘤、15例骨软骨瘤和 5例正常骨组织中NF κBp6 5亚单位和cyclinD1表达 ,并比较NF κB表达在骨肉瘤... 目的 :探讨骨肉瘤细胞中核因子κB(NF κB)及细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达及其意义。 方法 :应用免疫组织化学SABC法 ,检测 4 6例骨肉瘤、15例骨软骨瘤和 5例正常骨组织中NF κBp6 5亚单位和cyclinD1表达 ,并比较NF κB表达在骨肉瘤组织学分级、分型间的差异及其与cyclinD1表达的关系。 结果 :NF κBp6 5亚单位显著表达于骨肉瘤细胞中 (6 7.4 % ) ,而在正常骨组织和骨软骨瘤中未见表达 ;NF κBp6 5表达与骨肉瘤组织学分级无关 ,在骨内高分化型组表达显著高于普通中心型组 (P<0 .0 5 )。cyclinD1在骨肉瘤中表达率为 73.9% ,显著高于骨软骨瘤组 (33.3% ,P <0 .0 5 ) ;骨肉瘤中NF κB p6 5与cyclinD1蛋白表达显著正相关 (r =0 .4 6 3,P <0 .0 1)。结论 :NF κBp6 5在骨肉瘤细胞中异常活化 ,并与cyclinD1过表达密切相关 ,其可能通过上调cyclinD1表达参与骨肉瘤的发生发展。 展开更多
关键词 核因子ΚB 细胞周期蛋白d1 骨肉瘤 基因表达
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异丹叶大黄素下调膀胱癌细胞的细胞周期蛋白D1表达并诱导G0/G1细胞周期阻滞 被引量:7
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作者 方勇 侯琦 卢瑜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期442-448,共7页
目的:探索异丹叶大黄素(ISO)抑制膀胱癌细胞侵袭、转移和增殖活性的机制。方法:以ISO作用于人源性膀胱癌UMUC3细胞后,倒置相差显微镜下观察并以ATP生物荧光法检测癌细胞增殖活性;以RT-PCR和Western blotting法检测细胞周期蛋白D1表达;... 目的:探索异丹叶大黄素(ISO)抑制膀胱癌细胞侵袭、转移和增殖活性的机制。方法:以ISO作用于人源性膀胱癌UMUC3细胞后,倒置相差显微镜下观察并以ATP生物荧光法检测癌细胞增殖活性;以RT-PCR和Western blotting法检测细胞周期蛋白D1表达;以流式细胞术检测细胞周期的变化;细胞划痕法检测细胞迁移活性。结果:20μmol/L浓度以上ISO可显著抑制UMUC3细胞的增殖,其IC50为(22.5±2.8)μmol/L。同时UMUC3细胞的细胞周期蛋白D1 mRNA和蛋白水平均显著降低。以低浓度5μmol/L ISO预处理UMUC3细胞后,与对照组(47.33%)进行比较,可分别在12 h(58.82%)和24 h(63.94%)显著诱导细胞G0/G1期阻滞(P<0.01)。细胞划痕法检测证实5μmol/L ISO可显著抑制膀胱癌细胞的迁移活性。结论:ISO可抑制膀胱癌细胞增殖,下调细胞周期蛋白D1表达,诱导G0/G1细胞周期阻滞,抑制细胞的迁移能力。 展开更多
关键词 异丹叶大黄素 膀胱肿瘤 细胞周期蛋白d1 细胞周期阻滞
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三氧化二砷抑制人胆囊癌细胞生长及对细胞周期蛋白D1表达的影响 被引量:4
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作者 凌跃新 艾志龙 +2 位作者 锁涛 沈振斌 童赛雄 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2007年第11期867-870,共4页
背景与目的:三氧化二砷(As2O3)在治疗急性早幼粒细胞白血病中取得了突破性成果,近年来它在实体瘤的研究中颇受关注。胆囊癌由于缺乏特异性的临床表现,确诊时多属晚期,手术切除率较低,且常规化疗药物对胆囊癌的疗效较差,因此需寻找治疗... 背景与目的:三氧化二砷(As2O3)在治疗急性早幼粒细胞白血病中取得了突破性成果,近年来它在实体瘤的研究中颇受关注。胆囊癌由于缺乏特异性的临床表现,确诊时多属晚期,手术切除率较低,且常规化疗药物对胆囊癌的疗效较差,因此需寻找治疗胆囊癌新的有效药物。本研究旨在探讨As2O3对人胆囊癌GBC细胞系生长的生物学效应及作用机制。方法:不同浓度As2O3作用于胆囊癌GBC细胞,MTT法检测细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞周期分布。Western blot及RT-PCR检测细胞周期蛋白(cyclin)D1、D2、D3、CDK4和CDK6的表达。构建cyclinD1启动子pGL3重组质粒,并转染GBC细胞,测定不同浓度As2O3作用下pGL3相关的荧光素酶活性。结果:As2O3能抑制体外GBC细胞生长,作用呈时间、剂量-效应关系;流式细胞仪检测发现As2O3可将增殖过程中的GBC细胞阻滞于G1期;Western blot及RT-PCR检测显示cyclin D1表达下降;As2O3能降低cyclin D1启动子的表达,作用呈剂量-效应关系,4μmol/L的As2O3处理后cyclin D1的启动子活性下调近70%。结论:As2O3能明显抑制体外人胆囊癌GBC细胞的生长并引起G1期阻滞,主要通过下调cyclin D1的表达来实现。 展开更多
关键词 三氧化二砷 细胞生长 细胞周期蛋白d1 培养的肿瘤细胞
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