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雄激素受体、细胞周期蛋白D1在非特殊型浸润性乳腺癌中的表达及与患者超声征象的关系
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作者 杜佩 张晓芸 +1 位作者 葛欣 安晓玲 《癌症进展》 2023年第21期2387-2390,共4页
目的 探讨雄激素受体(AR)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在非特殊型浸润性乳腺癌中的表达及与患者超声征象的关系。方法 收集105例非特殊型浸润性乳腺癌患者的非特殊型浸润性乳腺癌组织和癌旁正常组织,采用免疫组织化学染色法检测AR、cycl... 目的 探讨雄激素受体(AR)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在非特殊型浸润性乳腺癌中的表达及与患者超声征象的关系。方法 收集105例非特殊型浸润性乳腺癌患者的非特殊型浸润性乳腺癌组织和癌旁正常组织,采用免疫组织化学染色法检测AR、cyclin D1表达情况。比较非特殊型浸润性乳腺癌组织和癌旁正常组织中AR、cyclin D1表达情况,比较不同组织学分级、AR表达情况、cyclin D1表达情况非特殊型浸润性乳腺癌患者的超声征象。采用Pearson相关分析法分析AR、cyclin D表达情况与非特殊型浸润性乳腺癌患者超声征象的相关性。结果 非特殊型浸润性乳腺癌组织中AR、cyclin D1阳性表达率均明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同组织学分级非特殊型浸润性乳腺癌患者的肿瘤直径、边缘毛刺征、后方回声、周边高回声晕征、腋窝淋巴结转移情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。不同AR、cyclin D1表达情况非特殊型浸润性乳腺癌患者的肿瘤直径、病灶内微钙化情况、病灶内血流情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。AR、cyclin D1表达与非特殊型浸润性乳腺癌患者的肿瘤直径、病灶内微钙化及病灶内血流均呈正相关(P﹤0.01)。结论非特殊型浸润性乳腺癌组织中AR、cyclin D1阳性表达率均较高,且其表达与患者的超声征象有关。 展开更多
关键词 非特殊型浸润性乳腺癌 雄激素受体 细胞周期蛋白d1 超声征象
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细胞周期蛋白D1在乳腺癌、结直肠癌及食管癌中的研究进展 被引量:2
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作者 刘健 王沐廷 《中国医学创新》 CAS 2023年第1期165-169,共5页
细胞周期蛋白D1(CCND1)在细胞周期调节作用获得公认,CCND1的异常表达与癌症的发展、预后的关联受到越来越多的重视。笔者选取了临床上常见的乳腺癌、结直肠癌、食管癌,探讨了CCND1引起癌症发生、进展的内在机制;并对CCND1与乳腺癌、结... 细胞周期蛋白D1(CCND1)在细胞周期调节作用获得公认,CCND1的异常表达与癌症的发展、预后的关联受到越来越多的重视。笔者选取了临床上常见的乳腺癌、结直肠癌、食管癌,探讨了CCND1引起癌症发生、进展的内在机制;并对CCND1与乳腺癌、结直肠癌、食管癌预后的关联开展了相关综述,旨在加深对CCND1认识的同时,为广大学者在肿瘤分子标记物领域的研究提供指导。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白d1 乳腺癌 结直肠癌 食管癌
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miR-134-3p靶向细胞周期蛋白D1抑制胃癌细胞增殖的作用及机制 被引量:3
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作者 蒋林燕 沈晓雯 邵晓轶(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1279-1284,共6页
目的:研究miR-134-3p靶向细胞周期蛋白D1(CCND1)抑制胃癌细胞增殖的作用及机制。方法:收集手术切除的胃癌组织及癌旁组织,培养正常胃黏膜上皮细胞株GES-1及胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901、BGC-823,检测miR-134-3p、CCND1的表达水平;BGC-... 目的:研究miR-134-3p靶向细胞周期蛋白D1(CCND1)抑制胃癌细胞增殖的作用及机制。方法:收集手术切除的胃癌组织及癌旁组织,培养正常胃黏膜上皮细胞株GES-1及胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901、BGC-823,检测miR-134-3p、CCND1的表达水平;BGC-823细胞分组并转染阴性对照(NC)模拟物或miR-134-3p模拟物、感染NC腺病毒或CCND1腺病毒,检测细胞增殖抑制率、细胞周期比例、miR-134-3p及CCND1表达水平;双荧光素酶报告基因验证miR-134-3p与CCND1的靶向结合;饲养BALB/c裸鼠,皮下注射感染NC腺病毒或miR-134-3p腺病毒的BGC-823,成瘤后测定移植瘤质量、体积及CCND1表达水平。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中miR-134-3p表达水平明显降低、CCND1表达水平明显升高(P<0.05),且miR-134-3p与CCND1呈负相关;与GES-1细胞相比,BGC-823、MGC-803、SGC-7901细胞中miR-134-3p表达水平明显降低,CCND1表达水平明显升高(P<0.05),且BGC-823细胞中miR-134-3p、CCND1表达变化最显著。与miR-NC组相比,miR-134-3p组BGC-823细胞的增殖抑制率、G2/M期细胞占比明显升高,G_(0)/G_(1)期及S期细胞占比、CCND1表达水平、CCND1报告基因的荧光活力明显降低(P<0.05);与miR-134-3p+Ad-NC组相比,miR-134-3p+Ad-CCND1组BGC-823细胞的增殖抑制率、G2/M期细胞占比明显降低,G_(0)/G_(1)期及S期细胞占比、CCND1表达水平明显升高(P<0.05);与miR-NC组相比,miR-134-3p组裸鼠移植瘤质量明显减轻,体积明显缩小,移植瘤中CCND1表达水平明显降低(P<0.05)。结论:miR-134-3p通过靶向抑制CCND1途径抑制胃癌细胞增殖及细胞周期。 展开更多
关键词 胃癌 miR-134-3p 细胞周期蛋白d1 增殖 细胞周期 移植瘤
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周围型非小细胞肺癌患者细胞周期蛋白D1、CD147与预后的关系研究 被引量:2
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作者 刘文华 旷菲 +1 位作者 陈小香 范旭 《实用医院临床杂志》 2023年第1期111-114,共4页
目的 分析周围型非小细胞肺癌患者细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、CD147与预后的关系。方法 2017年3月至2020年3月我院收治的周围型非小细胞肺癌患者128例(观察组),以患者癌旁正常组织(距肿瘤切缘至少0.5 cm处且经HE染色检查无癌细胞浸润)... 目的 分析周围型非小细胞肺癌患者细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、CD147与预后的关系。方法 2017年3月至2020年3月我院收治的周围型非小细胞肺癌患者128例(观察组),以患者癌旁正常组织(距肿瘤切缘至少0.5 cm处且经HE染色检查无癌细胞浸润)为癌旁组,选取同期收治非肺部恶性疾病患者71例病理组织作为良性组。随访12个月,收集患者一般资料,了解预后情况。对比不同组织中CyclinD1、CD147表达水平,分析不同临床特征患者CyclinD1、CD147表达情况及影响周围型非小细胞肺癌者预后因素。结果 观察组中CyclinD1、CD147阳性表达高于癌旁组与良性组(P<0.05);不同TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移患者CyclinD1表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),不同TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移、肿瘤直径患者CD147表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);预后良好与预后不良患者肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移及CyclinD1、CD147水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。TNM分期、分化程度、淋巴结转移、CyclinD1、CD147是患者预后不良的影响因素(P<0.05)。结论 CyclinD1、CD147在周围型非小细胞肺癌患者中表达明显上调,且两者均为患者预后不良的影响因素。 展开更多
关键词 周围型非小细胞肺癌 细胞周期蛋白d1 Cd147 预后
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人细胞周期蛋白D1/CDK4基因的真核表达及生物活性鉴定 被引量:2
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作者 王鸿鹤 朱孝峰 +3 位作者 谢冰芬 冯公侃 沈竞康 刘宗潮 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期709-714,共6页
通过生物工程获得人重组细胞周期蛋白 (cyclinD1 )及细胞周期蛋白激酶CDK4蛋白 ,作为抗癌药物筛选的分子靶点 .从人HL 6 0细胞中获得细胞周期蛋白D1 CDK4基因的cDNA ,先克隆至pGEMT Easy载体上 ,再经重组构建供体质粒pFastBac D1和pFas... 通过生物工程获得人重组细胞周期蛋白 (cyclinD1 )及细胞周期蛋白激酶CDK4蛋白 ,作为抗癌药物筛选的分子靶点 .从人HL 6 0细胞中获得细胞周期蛋白D1 CDK4基因的cDNA ,先克隆至pGEMT Easy载体上 ,再经重组构建供体质粒pFastBac D1和pFastBac CDK4 .重组供体质粒转化感受态DH1 0Bac细胞 ,挑取确证为白色克隆的菌落振荡培养 ,分离制备高纯度杆粒DNA .以重组病毒适量感染昆虫细胞Tn 5B1 4 ,利用Bac to Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞Tn 5B1 4 (Hi5 )中表达相应的重组蛋白 .应用昆虫杆状病毒表达系统 (Bac to Bac)在昆虫细胞Tn 5B1 4中分别高效表达了人细胞周期蛋白D1和CDK4蛋白 .SDS PAGE分析表明 ,表达量占细胞可溶性蛋白质的 2 0 %左右 ,表达产物经Ni2 + NTA亲和层析纯化后纯度达 85 %以上 .研究表明 ,昆虫细胞表达的细胞周期蛋白D1和CDK4蛋白能促进Rb蛋白的磷酸化 ,具有生物活性 .成功构建了细胞周期蛋白D1及CDK4真核杆状病毒表达载体 ,并且在昆虫细胞中正确表达了具有生物活性的细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白 . 展开更多
关键词 细胞周期蛋白d1 昆虫杆状病毒表达系统 分子靶点 真核表达 基因表达 生物活性
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淫羊藿素通过调控黏着斑激酶及下游细胞外信号调节激酶/细胞周期蛋白D1和蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素蛋白信号通路抑制肝癌细胞增殖的作用机制研究
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作者 李珍 高寒 +4 位作者 赵永康 王梓萱 王婧筱 王伽伯 宋鑫华 《环球中医药》 CAS 2023年第12期2401-2407,共7页
目的探究淫羊藿素(icaritin,ICA)抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法以Huh7肝癌细胞为研究对象并在体外培养;设置200、100、50、20、10、5、2、1、0.5μmol/L不同浓度的ICA给药干预72小时之后,采用0.5%结晶紫染色分析ICA对Huh7肝癌细胞... 目的探究淫羊藿素(icaritin,ICA)抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法以Huh7肝癌细胞为研究对象并在体外培养;设置200、100、50、20、10、5、2、1、0.5μmol/L不同浓度的ICA给药干预72小时之后,采用0.5%结晶紫染色分析ICA对Huh7肝癌细胞生存的影响;将Huh7肝癌细胞给与ICA高(10μmol/L)、中(5μmol/L)、低(2.5μmol/L)三个浓度,每个浓度设置三个复孔,通过克隆形成实验检测ICA对Huh7肝癌细胞增殖能力的影响;Huh7肝癌细胞给与ICA IC 50值浓度,对照孔及ICA给药孔分别在0、6、12、24小时在倒置显微镜下拍照,通过细胞划痕分析ICA对肝癌细胞迁移能力的影响;并且用流式细胞术对细胞周期进行分析。另外,通过蛋白印迹对增殖相关蛋白,如增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、磷酸化黏着斑激酶(phosphorylated focal adhesion kinase,p-FAK)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated protein kinase,p-ERK)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-mTOR)等蛋白的表达水平进行分析。结果ICA可以明显抑制肝癌细胞的增殖及迁移能力,并且使肝癌细胞的细胞周期在G1期发生阻滞(P<0.05)。另外,研究发现ICA可以下调p-FAK及其下游调节蛋白p-ERK、cyclin D1以及p-Akt、p-mTOR、p-S6的表达水平。结论ICA可能通过调控FAK及下游ERK/cyclin D1和Akt/mTOR信号通路从而抑制肝癌细胞的增殖生长。 展开更多
关键词 细胞 淫羊藿素 黏着斑激酶 细胞外信号调节激酶 细胞周期蛋白d1 蛋白激酶B 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
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弓形虫srs19d基因敲除株的构建及其在宿主细胞中的生物学功能分析
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作者 牛水珠 潘明 +1 位作者 葛层层 黄思扬 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期10-17,共8页
为探究弓形虫表面抗原1相关序列(SRS)蛋白家族新成员SRS19D的功能,本试验以弓形虫Ⅱ型Pru虫株为亲本,运用成簇规律间隔短回文重复-CRISPR相关蛋白9(CRISPR/Cas9)技术构建了PruΔsrs 19 d敲除虫株,并进行了噬斑试验、细胞内增殖试验、体... 为探究弓形虫表面抗原1相关序列(SRS)蛋白家族新成员SRS19D的功能,本试验以弓形虫Ⅱ型Pru虫株为亲本,运用成簇规律间隔短回文重复-CRISPR相关蛋白9(CRISPR/Cas9)技术构建了PruΔsrs 19 d敲除虫株,并进行了噬斑试验、细胞内增殖试验、体外缓殖子转化试验、小鼠毒力试验和小鼠脑包囊检测试验。噬斑试验和细胞内增殖试验结果显示,与Pru虫株相比,PruΔsrs 19 d敲除虫株在人包皮成纤维(HFF)细胞上形成的噬斑显著变小(P<0.05),纳虫泡内形成的速殖子个数显著减少(P<0.05)。体外缓殖子转化试验发现,与Pru虫株相比,PruΔsrs 19 d敲除虫株的体外缓殖子转化率极显著降低(P<0.01)。小鼠毒力试验结果显示,与Pru虫株相比,弓形虫PruΔsrs 19 d敲除虫株不会引起ICR小鼠的死亡(P<0.05)。小鼠脑包囊检测试验结果显示,与Pru虫株相比,PruΔsrs 19 d敲除虫株感染小鼠后形成的脑包囊数量极显著减少(P<0.01)。本试验成功构建了弓形虫PruΔsrs 19 d敲除虫株,发现srs 19 d基因在弓形虫的体外生长、复制、毒力和慢性感染中发挥重要作用,为进一步探究SRS19D的功能和作用机制提供参考。 展开更多
关键词 弓形虫 表面抗原1相关序列(SRS) srs19d 成簇规律间隔短回文重复-CRISPR相关蛋白9(CRISPR/Cas9) 生物学功能
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细胞周期素D1对HBV转录和复制的影响 被引量:1
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作者 彭思雯 关贵文 +3 位作者 张婷 鲁凤民 刘佳 陈香梅 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2023年第2期316-324,共9页
目的 探究细胞周期素D1(cyclin D1,基因名CCND1)对HBV复制的影响及其机制。方法 利用GSE84044数据集,采用Spearman秩相关分析HBV相关肝纤维化患者肝组织基因表达水平与血清HBV DNA载量之间的相关性。在HBV细胞复制模型中瞬时表达cyclin... 目的 探究细胞周期素D1(cyclin D1,基因名CCND1)对HBV复制的影响及其机制。方法 利用GSE84044数据集,采用Spearman秩相关分析HBV相关肝纤维化患者肝组织基因表达水平与血清HBV DNA载量之间的相关性。在HBV细胞复制模型中瞬时表达cyclin D1及cyclin D1持续激活突变体(T286A)蛋白,使用时间分辨免疫荧光及实时荧光定量PCR实验分别检测细胞培养上清液中的HBsAg、HBeAg及HBV DNA水平,Western blot检测细胞内HBV core蛋白,反转录-实时荧光定量PCR法检测细胞内HBV RNA,双荧光素酶报告基因实验检测cyclin D1对HBV基本核心启动子(BCP)活性的影响。利用GSE83148数据集,分析CCND1与HBV相关调控因子表达的相关性。正态分布的计量资料两组间比较采用独立样本t检验;非正态分布的计量资料两组间比较采用Mann-Whitney U检验。结果 在GSE84044数据中,HBV相关肝纤维化患者的肝组织中有7个细胞周期调控基因与HBV DNA载量呈显著负相关(r值均<-0.3,P值均<0.05),其中包括CCND1基因(r=-0.474,P<0.001)。外源表达cyclin D1及cyclin D1 T286A突变体能降低HBV复制细胞模型培养上清液中的HBsAg、HBeAg及HBV DNA水平,以及细胞内core蛋白和HBV RNA水平;外源表达cyclin D1显著抑制了HBV BCP的转录活性;且慢性乙型肝炎患者肝组织中CCND1表达水平与抑制HBV复制的APOBEC3G(r=0.575,P<0.001)、SMC5(r=0.341,P<0.001)和FOXM1(r=0.333,P<0.001)表达呈显著正相关,而与HBV进入受体NTCP(r=-0.511,P<0.001)和HBV复制正向调控转录因子HNF1α(r=-0.430,P<0.001)表达呈显著负相关。在HepG2细胞中过表达cyclin D1降低HNF1α及NTCP转录水平。结论 cyclin D1抑制HBV的转录和复制,可能与其下调HNF1α及NTCP表达有关。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 细胞周期蛋白d1 病毒复制 基因转录
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细胞周期蛋白D1基因对卵巢癌细胞生物学行为的影响 被引量:2
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作者 刘铃铃 刘振贤 程虹 《中国肿瘤外科杂志》 CAS 2022年第2期182-189,共8页
目的基于Oncomine数据库分析细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)基因在卵巢癌中的表达水平及沉默其表达对癌细胞生物学行为的影响。方法利用Oncomine数据库中关于卵巢癌组织中Cyclin D1基因的相关信息,分析Cyclin D1基因在不同肿瘤中的表达情况... 目的基于Oncomine数据库分析细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)基因在卵巢癌中的表达水平及沉默其表达对癌细胞生物学行为的影响。方法利用Oncomine数据库中关于卵巢癌组织中Cyclin D1基因的相关信息,分析Cyclin D1基因在不同肿瘤中的表达情况以及在卵巢癌中的表达情况。使用在线数据库Kaplan-Meier Plotter分析Cyclin D1表达水平与卵巢癌预后的关系。使用qRT-PCR检测各卵巢癌细胞株(SKOV3、CAOV3、A2780、ES2)及正常卵巢上皮细胞中Cyclin D1的表达。取对数生长期卵巢癌细胞SKOV3,将细胞分为空白对照组、阴性对照组(NC siRNA组)和Cyclin D1基因沉默组(Cyclin D1 siRNA组);使用Western blotting检测各组Cyclin D1蛋白表达;分别使用MTT法、细胞划痕实验和Transwell实验检测各组SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果通过挖掘分析Oncomine数据库涉及的Cyclin D1基因发现,与正常卵巢组织比较,在所有差异表达基因中,Cyclin D1基因的中位数值排名为202.0,P<0.001。与Cyclin D1低表达的卵巢癌患者比较,Cyclin D1高表达患者的总生存期和无瘤进展生存期均较短,差异有统计学意义(P<0.01)。与正常卵巢上皮细胞比较,Cyclin D1基因在各卵巢癌细胞(ES2、CAOV3、SKOV3、A2780)中的表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与SKOV3细胞株比较,Cyclin D1基因在CAOV3、A2780、ES2细胞株中的表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Cyclin D1 siRNA组细胞中Cyclin D1的表达量、增殖能力、迁移面积、穿过聚碳酸酯膜的癌细胞数量均明显低于空白对照组和NC siRNA组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Cyclin D1基因在卵巢癌组织中高表达,该基因可能参与卵巢癌的发生发展和转移,并与患者预后密切相关。 展开更多
关键词 Oncomine数据库 细胞周期蛋白d1 卵巢癌 基因沉默
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NIK和IKKβ连接蛋白、C-myc和细胞周期蛋白D1在结肠癌组织中的表达及意义 被引量:13
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作者 李素艳 黄杰安 +7 位作者 谭林 覃蒙斌 刘诗权 刘宝玉 梁梦紫 徐春燕 彭鹏 李佳荃 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第24期2922-2928,共7页
目的检测结肠癌组织中NIK和IKKβ连接蛋白(NIBP)、磷酸化p65(p-p65)和C-myc、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达,并探讨其意义。方法收集广西医科大学第一附属医院结直肠外科2013年2月—2014年2月经外科手术切除及消化内科肠镜活检的部... 目的检测结肠癌组织中NIK和IKKβ连接蛋白(NIBP)、磷酸化p65(p-p65)和C-myc、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达,并探讨其意义。方法收集广西医科大学第一附属医院结直肠外科2013年2月—2014年2月经外科手术切除及消化内科肠镜活检的部分标本151例,其中正常结肠黏膜16例、结肠腺瘤21例、结肠癌114例。采用SP免疫组化法分别检测正常结肠黏膜组织、结肠腺瘤组织及结肠癌组织NIBP、p-p65、C-myc和cyclin D1阳性细胞表达率;分析结肠癌组织中NIBP、C-myc和cyclin D1阳性细胞表达率与p-p65阳性细胞表达率的相关性。结果正常结肠黏膜组织、结肠腺瘤组织、结肠癌组织的NIBP、p-p65、C-myc和cyclin D1阳性细胞表达率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结肠癌组织NIBP、p-p65、C-myc和cyclin D1阳性细胞表达率高于正常结肠黏膜组织和结肠腺瘤组织(P<0.017);正常结肠黏膜组织、结肠腺瘤组织中NIBP、p-p65、C-myc和cyclin D1阳性细胞表达率比较,差异无统计学意义(P>0.017)。不同组织学类型、浸润深度及有无淋巴结转移、远处转移患者结肠癌组织NIBP、p-p65、C-myc和cyclin D1阳性细胞表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。分化程度越低、TNM分期越高、Duke's分期越高患者结肠癌组织NIBP、p-p65、C-myc和cyclin D1阳性细胞表达率越高(P<0.05)。NIBP、C-myc、cyclin D1阳性细胞表达率与p-p65阳性细胞表达率均呈正相关(P<0.05)。结论 NIBP可能通过激活核因子κB(NF-κB)信号转导通路上调C-myc和cyclin D1等的表达而影响结肠癌的治疗发生、发展、侵袭和转移,为临床发现结肠癌的治疗新靶点提供了参考依据。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 NIK和IKKβ连接蛋白 细胞周期蛋白d1 CYCLIN d1
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细胞周期蛋白D1、CDK4在乳腺癌中的表达及其临床意义 被引量:12
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作者 陆劲松 沈镇宙 +6 位作者 吴炅 江明 沈坤炜 韩企夏 施达仁 张廷璆 邵志敏 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2001年第2期105-108,共4页
目的 :研究乳腺癌组织周期蛋白D1、CDK4的蛋白表达定位、表达水平 ,及与P2 1蛋白表达、与临床病理指标的关系及其预后意义。方法 :①应用免疫组织化学染色方法 ,检测 10 6例乳腺癌组织石蜡切片上的周期蛋白D1、CDK4的蛋白定位和蛋白表... 目的 :研究乳腺癌组织周期蛋白D1、CDK4的蛋白表达定位、表达水平 ,及与P2 1蛋白表达、与临床病理指标的关系及其预后意义。方法 :①应用免疫组织化学染色方法 ,检测 10 6例乳腺癌组织石蜡切片上的周期蛋白D1、CDK4的蛋白定位和蛋白表达 ,比较其与P2 1的蛋白表达 ,与临床病理学指标 ,如病理类型、组织学分型、组织学分级、淋巴结状态、雌激素受体状态、TNM分期等之间的关系 ;②对周期蛋白D1、CDK4、P2 1及临床病理指标如肿瘤的组织学分级、淋巴结状态、TNM分期、ER状态等 ,应用Kaplan Meier法Log rank检验进行单因素生存分析 ,应用Cox比例风险模型进行多因素生存分析。结果 :①周期蛋白D1表达定位于细胞核、CDK4的表达位于细胞质和细胞核 ,周期蛋白D1的阳性率为 30 2 % ,CDK4的阳性率为 5 3 8%。②周期蛋白D1及CDK4的表达与乳腺癌的病理诊断组织学分型、组织学分级、ER状态、临床TNM分期、淋巴结状态、P2 1蛋白表达表达水平无关 (P >0 0 5 )。周期蛋白D1的蛋白表达与CDK4的蛋白表达相关 (P <0 0 5 )。③单因素分析提示影响 140个月无瘤生存率及总生存率的因素有 :临床TNM分期、组织学分级、腋淋巴结状态、周期蛋白D1的蛋白表达 (P <0 0 5 )。在无腋淋巴结转移亚组周期蛋白D1蛋白表达单因素生存分析? 展开更多
关键词 乳腺癌 细胞周期蛋白d1 CdK4 P21 预后因素
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胃癌组织中端粒酶活性与细胞周期蛋白D_1表达关系的研究 被引量:7
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作者 陈兵 刘为纹 +3 位作者 府伟灵 房殿春 杨仕明 周来新 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2003年第6期449-451,共3页
目的 探索胃癌组织中端粒酶活性与细胞周期蛋白D1表达之间可能的关系。方法 利用TelomerasePCR ELISAKit测量端粒酶活性 ;利用RT PCRELISA检测细胞周期蛋白D1mRNA表达水平。共检测了 84例胃癌及其相关性的组织标本。结果 周期蛋白D1... 目的 探索胃癌组织中端粒酶活性与细胞周期蛋白D1表达之间可能的关系。方法 利用TelomerasePCR ELISAKit测量端粒酶活性 ;利用RT PCRELISA检测细胞周期蛋白D1mRNA表达水平。共检测了 84例胃癌及其相关性的组织标本。结果 周期蛋白D1异常高表达在胃良性疾病、胃癌前期病变和胃癌组织中均可检出 ,而端粒酶活性仅在胃癌前期病变和胃癌组织中检出。胃癌前期病变和胃癌组织端粒酶活性与周期蛋白D1表达程度明显正相关 (r =0 .713,P <0 .0 5 )。结论 至少在胃癌组织中 ,细胞周期蛋白D1异常高表达可能是端粒酶激活的前提之一。 展开更多
关键词 胃癌 端粒酶活性 细胞周期蛋白d1 表达 癌组织
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人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定 被引量:7
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作者 王鸿鹤 朱孝峰 +3 位作者 谢冰芬 冯公侃 沈竞康 刘宗潮 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期444-447,共4页
【目的】构建表达人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段,克隆到pGEM-Teasy载体上。测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体pET-22b(+)上,重组质... 【目的】构建表达人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段,克隆到pGEM-Teasy载体上。测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体pET-22b(+)上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DL3),使之高效表达融合蛋白细胞周期蛋白D1及CDK4。SDS-PAGE电泳及Westernblotting鉴定表达蛋白。【结果】用PCR扩增得到了正确的目的基因片段并构建成pET-cyclinD1和pET-CDK4两个原核表达载体。将其转化大肠杆菌,Westernblot检测证实了转化的大肠杆菌能表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。【结论】本研究成功构建了细胞周期蛋白D1及CDK4原核表达载体,后两者在细胞内能正确表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白d1 细胞周期蛋白激酶CdK4 HL-60细胞 肿瘤
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丹参对大鼠局灶性脑缺血后神经元内细胞周期蛋白D1表达的影响 被引量:12
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作者 张家堂 郎森阳 +2 位作者 匡培根 张风英 刘洁晓 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2001年第4期272-274,共3页
目的 观察大鼠局灶性脑缺血后神经元内细胞周期蛋白D1(cyclinD1)表达与神经细胞凋亡的关系以及丹参的影响。方法 采用线栓法大鼠大脑中动脉持续阻塞模型 ,应用免疫组织化学和TUNEL染色方法观察假手术组和缺血后不同时间阳性染色神经... 目的 观察大鼠局灶性脑缺血后神经元内细胞周期蛋白D1(cyclinD1)表达与神经细胞凋亡的关系以及丹参的影响。方法 采用线栓法大鼠大脑中动脉持续阻塞模型 ,应用免疫组织化学和TUNEL染色方法观察假手术组和缺血后不同时间阳性染色神经细胞的数量和分布情况及丹参的影响。结果 cyclinD1蛋白表达自缺血后 6h开始出现 ,缺血后 48h达高峰 ;丹参组各相应时间点cyclinD1蛋白表达明显减少 (P <0 .0 1)。凋亡细胞自缺血后 12h开始出现 ,缺血后 72h达高峰 ;丹参组各相应时间点凋亡细胞表达明显减少 (P <0 .0 1)。相邻切片可见cyclinD1蛋白表达和凋亡细胞染色区域基本相同。结论 脑缺血后cyclinD1的异常表达可能诱发了缺血神经细胞的凋亡 。 展开更多
关键词 脑缺血 细胞周期蛋白d1 细胞凋亡 丹参 大鼠
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Rho A蛋白通路在DLC-1基因调控人结肠癌HT29细胞周期中的作用及其机制 被引量:10
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作者 吴平平 苏昀 +3 位作者 金治 吴鹏 徐佳佳 黄培林 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2009年第4期247-251,共5页
目的:探讨Rho A蛋白通路在DLC-1(frequently deleted in liver cancer-1)基因调控人结肠癌HT29细胞周期中的作用及其机制。方法:构建pcDNA3.1-DLC1质粒载体,脂质体法转染HT29细胞,筛选稳定细胞系;pull-down方法分析Rho A蛋白活性;实时定... 目的:探讨Rho A蛋白通路在DLC-1(frequently deleted in liver cancer-1)基因调控人结肠癌HT29细胞周期中的作用及其机制。方法:构建pcDNA3.1-DLC1质粒载体,脂质体法转染HT29细胞,筛选稳定细胞系;pull-down方法分析Rho A蛋白活性;实时定量PCR检测细胞周期相关蛋白Cyclin D1、p21的表达变化;流式细胞仪检测细胞周期分布。结果:野生型人结肠癌HT29细胞DLC-1基因表达呈阴性,经转染获得DLC-1稳定表达细胞系。与野生型及空载组HT29细胞相比,转染组细胞RhoA蛋白活性下降;Cyclin D1表达下调,p21表达上调;G1期及凋亡细胞数增加,而G2期细胞数下降。结论:转染DLC-1基因引起人结肠癌HT29细胞Rho A蛋白活性下调,进而可能通过对Cyclin D1、p21表达的调控使细胞周期G1期阻滞并诱导凋亡,同时分裂前期细胞数减少,细胞增殖受抑。 展开更多
关键词 肝癌缺失基因-1 RHO A蛋白 CYCLIN d1基因 P21基因 细胞周期 HT29细胞
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细胞周期蛋白D1的高表达与雌激素受体表达及乳腺癌患者良好预后相关 被引量:9
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作者 杨成成 南克俊 +2 位作者 张雅敏 陈怡萌 秦思达 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期84-87,共4页
目的探讨细胞周期蛋白D1(cyclin D1)与雌激素受体(ER)在乳腺癌中的表达和临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测102例乳腺癌组织和60例正常乳腺组织标本中cyclin D1及ER蛋白表达,结合临床病理及术后5年随访资料,分析cyclin D1与ER相... 目的探讨细胞周期蛋白D1(cyclin D1)与雌激素受体(ER)在乳腺癌中的表达和临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测102例乳腺癌组织和60例正常乳腺组织标本中cyclin D1及ER蛋白表达,结合临床病理及术后5年随访资料,分析cyclin D1与ER相关性及与预后之间的关系。结果与正常乳腺组织相比,乳腺癌组织中cyclin D1和ER表达显著性增加,且cyclin D1表达与肿瘤组织学分级、TNM分期、ER蛋白表达相关。Spearman相关性分析显示,cyclin D1与ER表达水平呈正相关。Kaplan-Meier生存分析发现,cyclin D1高表达组乳腺癌患者生存期明显高于低表达组。Cox多因素分析表明cyclin D1、ER及TNM分期是影响患者预后的独立因素。结论 Cyclin D1在乳腺癌组织高表达,与ER表达正相关,且指示良好的预后。 展开更多
关键词 乳腺癌 细胞周期蛋白d1 雌激素受体
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上皮钙粘素、β-连环蛋白、细胞周期素D1在进行期寻常型银屑病皮损的表达 被引量:8
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作者 李政霄 纪泛扑 +1 位作者 彭振辉 王珂 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期545-547,共3页
目的通过检测银屑病患者皮损处上皮钙粘素、β-连环蛋白和细胞周期素D1的表达,探讨其在银屑病角质形成细胞高度增殖中的意义。方法用免疫组化方法检测正常组织及进行期银屑病皮损处上皮钙粘素、β-连环蛋白和细胞周期素D1蛋白的表达。... 目的通过检测银屑病患者皮损处上皮钙粘素、β-连环蛋白和细胞周期素D1的表达,探讨其在银屑病角质形成细胞高度增殖中的意义。方法用免疫组化方法检测正常组织及进行期银屑病皮损处上皮钙粘素、β-连环蛋白和细胞周期素D1蛋白的表达。结果银屑病患者皮损增生的表皮细胞上皮钙粘素和β-连环蛋白在颗粒层和基底细胞层表达明显降低,与正常人相比有显著性差异(P<0.01)。而细胞周期素D1在银屑病患者皮损基底细胞层表达显著升高,并与β-连环蛋白的异常表达相关。结论上皮钙粘素和β-连环蛋白表达的下调可能与银屑病角质形成细胞高度增殖有关,Wnt信号转导系统异常可能参与银屑病的发病机制。 展开更多
关键词 银屑病 上皮钙粘素 Β-连环蛋白 细胞周期d1 表皮
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p16、细胞周期蛋白D1和pRb在头颈部鳞癌的表达及其意义 被引量:4
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作者 陶泽璋 刘剑锋 +2 位作者 肖伯奎 杨强 华清泉 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第10期902-904,共3页
目的:探讨 p16、细胞周期蛋白 D1( cyclinD1)和 pRb在头颈部鳞癌( head and neck squamous cell carcinoma, HNSCC)的表达及他们的相互关系和其意义。方法:应用免疫组织化学方法检测 32例原发 HNSCC患者癌组织中 p16、 cyclinD1和... 目的:探讨 p16、细胞周期蛋白 D1( cyclinD1)和 pRb在头颈部鳞癌( head and neck squamous cell carcinoma, HNSCC)的表达及他们的相互关系和其意义。方法:应用免疫组织化学方法检测 32例原发 HNSCC患者癌组织中 p16、 cyclinD1和 pRb的蛋白表达。结果: p16、 cyclinD1、 pRb的总异常率为 90.6%( 29/32),其中 p16和 pRb蛋白表达缺失分别为 62.5%( 20/32)和 34.4%( 11/32), cyclinD1过表达为 34.4%( 11/32)。 p16与 pRb呈负相关性( 展开更多
关键词 头颈部鳞癌 细胞周期蛋白d1 P16蛋白 PRB
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异丹叶大黄素下调膀胱癌细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制研究 被引量:5
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作者 方勇 王章桂 +1 位作者 侯琦 卢瑜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期53-60,共8页
目的:探索异丹叶大黄素(ISO)下调肿瘤细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制。方法:以ISO作用于人源性膀胱癌UMUC3、RT12和RT4细胞后用Western blotting法检测细胞周期蛋白D1表达水平;以RTPCR法检测细胞周期蛋白D1 mRNA的表达水平。稳定... 目的:探索异丹叶大黄素(ISO)下调肿瘤细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制。方法:以ISO作用于人源性膀胱癌UMUC3、RT12和RT4细胞后用Western blotting法检测细胞周期蛋白D1表达水平;以RTPCR法检测细胞周期蛋白D1 mRNA的表达水平。稳定转染细胞周期蛋白D1启动子萤光素酶报告基因至UMUC3细胞并筛选后,检测ISO预处理后萤光素酶活性。ISO预处理UMUC3细胞后,提取核蛋白检测核转录因子表达水平的变化。分别稳定转染GFP和GFP-细胞周期蛋白D1表达构建载体,筛选克隆;ISO预处理后,Western blotting法检测细胞周期蛋白D1的蛋白表达水平,贴壁依赖性细胞生长实验法检测细胞生长能力的变化,流式细胞术检测细胞周期的变化。分别稳定转染人源性细胞周期蛋白D1野生型和-163位点突变型萤光素酶报告基因质粒载体至UMUC3细胞并筛选,ISO预处理后检测细胞的萤光素酶活性。最后利用染色质免疫沉淀的方法,以抗Sp1抗体检测ISO对Sp1与细胞周期蛋白D1启动子结合力的影响。结果:ISO可从mRNA和蛋白水平显著抑制肿瘤细胞的细胞周期蛋白D1水平,并且是从内源性转录水平来抑制细胞周期蛋白D1的转录。ISO可抑制、下调核转录因子Sp1的表达,并抑制Sp1与细胞周期蛋白D1启动子区域的结合力,该结合位点主要位于启动子-92到+27bp的5’-非翻译区。结论:ISO可通过下调Sp1核转录因子表达及其与细胞周期蛋白D1启动子的结合,从内源性转录水平来抑制细胞周期蛋白D1的表达,从而诱导G0/G1细胞周期阻滞并抑制肿瘤细胞增殖。我们的研究将为临床中药单体ISO综合治疗肿瘤提供新的策略。 展开更多
关键词 异丹叶大黄素 膀胱癌 细胞周期蛋白d1 Sp1转录因子 细胞周期阻滞
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细胞周期蛋白D1基因多态性与肝细胞癌遗传易感性的相关性 被引量:9
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作者 朱忠政 丛文铭 +3 位作者 冼志红 吴伟清 吴孟超 朱冠山 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2007年第20期1521-1523,共3页
目的:探讨细胞周期蛋白D1(Cy-clinD1)基因A870G多态性与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)遗传易感性的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测225例HCC与428名对照的CyclinD1A870G基因型... 目的:探讨细胞周期蛋白D1(Cy-clinD1)基因A870G多态性与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)遗传易感性的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测225例HCC与428名对照的CyclinD1A870G基因型分布及差异。结果:全样本以及男性样本HCC与对照间的基因型分布差异均无统计学意义。但在女性,HCC组870G等位基因频率显著高于对照组(53.2%vs42.0%),P=0.012。与A/A纯合子相比,A/G杂合子的HCC风险增加至1.54倍(95%CI:0.79-3.01),P=0.202,而G/G纯合子的HCC风险显著增加至2.63倍(95%CI:1.20-5.78),P=0.016。结论:CyclinD1870G增加女性HCC发病风险,G/G基因型是女性患HCC的一个遗传易感因素。 展开更多
关键词 肝肿瘤/遗传学 细胞周期蛋白d1 多态性 限制性片段长度 病例对照研究
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