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锌指蛋白281抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞上皮间质转化和细胞外基质合成
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作者 侯维玲 乔云阳 +3 位作者 吴小芸 施会敏 曲高婷 张爱青 《天津医药》 CAS 2024年第7期720-726,共7页
目的探讨锌指蛋白281(ZNF281)在高糖(HG)诱导的肾小管上皮细胞(RTECs)上皮间质转化(EMT)和细胞外基质(ECM)合成中的作用及机制。方法使用HG诱导RTECs以构建糖尿病肾病模型,分为Control组、HG组和Mannitol组,使用CCK-8检测细胞增殖活力... 目的探讨锌指蛋白281(ZNF281)在高糖(HG)诱导的肾小管上皮细胞(RTECs)上皮间质转化(EMT)和细胞外基质(ECM)合成中的作用及机制。方法使用HG诱导RTECs以构建糖尿病肾病模型,分为Control组、HG组和Mannitol组,使用CCK-8检测细胞增殖活力。使用小干扰RNA(siRNA)在HG诱导的RTECs中敲低ZNF281的表达水平,分为Control组、HG组、HG+ZNF281 siRNA组和HG+ZNF281 vector组。使用腺苷单磷酸活化蛋白激酶(AMPK)激动剂阿卡地新(AICAR)活化AMPK,分为Control组、HG组、HG+AICAR组和HG+二甲基亚砜组。实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测ZNF281、EMT和ECM合成相关指标表达水平。结果与Control组相比,HG组ZNF281、波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)和Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)的蛋白和mRNA表达水平升高,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平降低;与HG组相比,HG+ZNF281 siRNA组和HG+AICAR组的EMT和ECM合成相关指标的蛋白和mRNA表达水平发生明显变化,同时HG+AICAR组ZNF281的蛋白和mRNA表达水平较HG组降低;在使用AICAR和转染ZNF281过表达质粒共处理的细胞中,AICAR+ZNF281组vimentin、α-SMA、FN、ColⅠ的表达水平较空载组升高,E-cadherin表达水平降低。结论AMPK通过负向调控ZNF281的表达水平进而抑制HG诱导的RTECs中EMT和ECM合成。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 Tristetraprolin蛋白 上皮-间转化 细胞 AMP活化蛋白激酶 肾小管间纤维化 锌指蛋白281
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单细胞转录组联合蛋白质组学分析肝细胞癌的发病机制
2
作者 王谨 朱娟娟 杨芳芳 《河北医药》 CAS 2024年第18期2725-2731,共7页
目的通过单细胞转录组联合蛋白质组学分析,结合体内外实验,探索调节肝细胞癌进展的新颖机制,为肝细胞癌治疗提供新策略。方法利用R语言对公开数据库中肝癌患者单细胞转录组及细胞模型蛋白质组数据进行重分析,筛选响应肝细胞癌微环境变... 目的通过单细胞转录组联合蛋白质组学分析,结合体内外实验,探索调节肝细胞癌进展的新颖机制,为肝细胞癌治疗提供新策略。方法利用R语言对公开数据库中肝癌患者单细胞转录组及细胞模型蛋白质组数据进行重分析,筛选响应肝细胞癌微环境变化的关键细胞亚群,并结合小鼠皮下荷瘤模型及肿瘤细胞共培养,验证该细胞群体对肝细胞癌微环境的调控作用。结果通过生物信息学分析发现肝癌微环境中巨噬细胞与细胞外基质的相互作用与肿瘤进展密切相关;体内及体外实验证实肿瘤相关巨噬细胞相较于非肿瘤浸润的巨噬细胞,与细胞外基质的主要成分胶原蛋白存在更强的相互作用;在荷瘤小鼠模型中,利用BAPN药物解聚细胞外基质,肿瘤生长受限,表现为肿瘤僵硬度降低、血管生成受抑制、骨髓来源抑制性细胞浸润减少(P<0.05)。结论巨噬细胞-细胞外基质互作在调节肝癌微环境中发挥重要作用,靶向肿瘤细胞外基质重构或可成为肝细胞癌实体肿瘤治疗的新策略。 展开更多
关键词 细胞 细胞测序 蛋白质 肿瘤相关巨噬细胞 细胞
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不同基质硬度对树突状细胞免疫功能和胆固醇代谢的影响
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作者 吴翠芳 滕丽晶 +1 位作者 张红红 曾柱 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期680-680,共1页
目的探索树突状细胞(dendritic cells,DCs)感知肝纤维化进程中细胞外基质硬度的变化动态调整其免疫功能的内在机制,有助于为临床上基于DCs开展肝纤维化的预防和治疗的策略的开发提供理论依据。方法四氯化碳诱导12周构建小鼠肝纤维化动... 目的探索树突状细胞(dendritic cells,DCs)感知肝纤维化进程中细胞外基质硬度的变化动态调整其免疫功能的内在机制,有助于为临床上基于DCs开展肝纤维化的预防和治疗的策略的开发提供理论依据。方法四氯化碳诱导12周构建小鼠肝纤维化动物模型,原子力显微镜检测组织的硬度,流式细胞术检测组织中DCs细胞数量;以明胶和透明质酸构建不同硬度的胞外基质模拟肝脏和肝纤维化组织的硬度,在体外探究不同基质硬度对DCs免疫功能(表型、吞噬能力、抗原提呈能力)的影响,免疫荧光染色FilipinⅢ评估DCs中胆固醇代谢情况,并通过干预胆固醇含量检测DCs免疫功能。结果肝纤维化小鼠肝脏的硬度明显高于正常肝脏的,且纤维化肝脏中DCs的浸润增多,抑炎性细胞因子含量降低。高硬度胞外基质微环境中的DCs表达更高的CD40和MHC-Ⅱ分子,同时细胞的吞噬能力降低,抗原呈递能力减弱,并伴随胆固醇的合成增加;抑制DCs中胆固醇含量显著抑制高硬度三维基质诱导的细胞免疫功能。结论在肝纤维化(模拟)硬度下,DCs可能通过增加胆固醇的合成,抑制DCs介导的免疫耐受参与肝纤维化进程。 展开更多
关键词 胆固醇代谢 树突状细胞 吞噬能力 肝纤维化 免疫耐受 细胞 胆固醇含量 免疫功能
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细胞外基质微环境在心脏纤维化发生发展中的作用和机制
4
作者 樊永亮 霍云龙 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期352-353,共2页
目的心脏纤维化与细胞力学微环境关系密切,生物力学刺激通过力学信号转导调控细胞生物功能,促进心脏纤维化的发生发展。本研究的目的是研究巨噬细胞Piezo1在心脏纤维化中的功能。方法对公共数据库心力衰竭数据进行生物信息学分析,该项... 目的心脏纤维化与细胞力学微环境关系密切,生物力学刺激通过力学信号转导调控细胞生物功能,促进心脏纤维化的发生发展。本研究的目的是研究巨噬细胞Piezo1在心脏纤维化中的功能。方法对公共数据库心力衰竭数据进行生物信息学分析,该项研究选择8周龄的SPF级雄性C57BL/6J小鼠为研究对象,随机分成对照组和试验组,每组3只。对照组给予普通饲料以及饮水喂养,试验组予以高脂饲料(含60%脂肪)以及含0.5 g/L Nω-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐(Nω-nitro-Larginine methyl ester hydrochloride,L-NAME)的饮水。持续饲喂4周,成功构建心力衰竭HFp EF模型,采集心脏组织进行单细胞转录组测序,数据下机后使用Cellranger软件进行定量,对捕获的高质量细胞使用经典的细胞Marker进行细胞注释。结果本研究共定义了包括成纤维细胞(Dcn)、内皮细胞(Pecam1)和M1型巨噬细胞(Cd86)在内的10类主要细胞类型;其中HFp EF试验组心脏中的心肌成纤维细胞表现出高代谢和高纤维化表型;Piezo1基因在HFp EF试验组的M1型巨噬细胞特异性高表达。结论本研究对公共数据进行深入分析,明确了分泌促炎性细胞因子和趋化因子的M1巨噬细胞在心脏纤维化发生发展过程中扮演重要角色,靶向Piezo1通道可能是治疗心脏纤维化的潜在策略。 展开更多
关键词 心脏纤维化 促炎性细胞因子 C57BL/6J小鼠 代谢 细胞 公共数据库 生物力学 成纤维细胞
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细胞外基质对大鼠卵巢颗粒细胞分泌激素和合成蛋白质功能的影响 被引量:4
5
作者 贾孟春 杨燕 +2 位作者 曾陶 吴尔若 肖碧莲 《生殖医学杂志》 CAS 1994年第3期140-144,共5页
为了探讨细胞外基质对卵巢颗粒细胞功能的影响。从未成熟SD大鼠分离出卵巢颗粒细胞,以3×105细胞/孔的密度,培养在铺有不同浓度的层粘连蛋白(LN)或纤粘连蛋白(FN)的培养板上,观察细胞贴壁情况。48小时后加入卵... 为了探讨细胞外基质对卵巢颗粒细胞功能的影响。从未成熟SD大鼠分离出卵巢颗粒细胞,以3×105细胞/孔的密度,培养在铺有不同浓度的层粘连蛋白(LN)或纤粘连蛋白(FN)的培养板上,观察细胞贴壁情况。48小时后加入卵泡刺激素和睾酮,再培养48小时,收集培养液,测定雌二醇和孕酮。另外在双池培养系统中,在铺有和未铺matrigel的上池中分别加入不同浓度的颗粒细胞,利用35硫标记蛋氨酸掺入法观察matrigel对颗粒细胞合成蛋白的影响,并利用免疫印迹法鉴定颗粒细胞膜蛋白中LN结合蛋白的分子量。结果显示,4μgLN即可使颗粒细胞在4小时内贴壁及展开,雌二醇和孕酮的产量增加。FN却无显著影响。从matrigel双池培养系统中取上池培养液,测定放射活性,铺有matrigel组显著高于对照组。放射自显影图象显示matrigel显著刺激颗粒细胞合成功能。免疫印迹结果显示颗粒细胞膜蛋白存在着LN的多结合位点。本实验证实:LN对卵巢颗粒细胞的附着、伸展。 展开更多
关键词 细胞 性激素 蛋白质 卵巢颗粒细胞
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老年人皮肤局部应用17β-雌二醇可通过体内途径刺激TGF-β信号增加细胞外基质蛋白质合成 被引量:2
6
作者 Son E.D. Lee J.Y. +2 位作者 Lee S. J.H. Chung 刘安 《世界核心医学期刊文摘(皮肤病学分册)》 2005年第11期3-3,共1页
To investigate the effects of topically applied 17β-estradiol on the expression of extracellular matrix proteins in aged human skin, 17β-estradiol (0.01%) and its vehicle (70%propylene glycol, 30%ethanol) were appli... To investigate the effects of topically applied 17β-estradiol on the expression of extracellular matrix proteins in aged human skin, 17β-estradiol (0.01%) and its vehicle (70%propylene glycol, 30%ethanol) were applied to aged (68-82 y, eight females and five males) human buttock skin under occlusion for 2 wk (three times per week). Topical 17β-estradiol was found to increase the expression of type 1 procollagen mRNA and protein significantly in human aged skin in vivo. In addition, MMP-1 protein levels were reduced by topical 17β-estradiol. The expressions of TGF-β1,TGF-βtype II receptor, and Sma and Mad related (Smad)3 were increased by topical 17β-estradiol in aged human skin, and TGF-β1 neutralizing antibody inhibited 17β-estradiol-induced procollagen synthesis in cultured fibroblasts. We also found that the expressions of tropoelastin and fibrillin-1 mRNA and protein, and elastic fibers in aged skin were also increased by topical 17β-estradiol. Topical 17β-estradiol also increased keratinocyte proliferation and the epidermal thickness in aged human skin. We also observed the same effects of topical 17β-estradiol in young skin. In conclusion, our results suggest that topical 17β-estradiol treatment may improve the cutaneous function of aged human skin by improving the connective tissue and increasing epidermal thickness. 展开更多
关键词 Β-雌二醇 TGF 蛋白质合成 细胞 局部应用 形成细胞 胶原合成 成纤维细胞 前胶原 弹性纤维
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体外循环心内直视术对外周血单个核细胞蛋白质表达谱的作用
7
作者 杨艳琴 唐靖 +4 位作者 古妙宁 郭远波 赵振龙 陈晔明 陈雯婷 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期470-476,共7页
目的:观察体外循环(CPB)心内直视术患者外周血单个核细胞蛋白质表达谱的变化。方法:11例体外循环心内直视术患者,分别于体外循环前(T0)、体外循环主动脉开放后1 h(T1)和术毕(T2)3个时点抽取动脉血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),采用双... 目的:观察体外循环(CPB)心内直视术患者外周血单个核细胞蛋白质表达谱的变化。方法:11例体外循环心内直视术患者,分别于体外循环前(T0)、体外循环主动脉开放后1 h(T1)和术毕(T2)3个时点抽取动脉血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),采用双向电泳和质谱方法比较、分析3个时间点差异蛋白的表达,并采用W estern blot进行验证。结果:双向电泳和质谱鉴定出12个差异蛋白,其中S100A9表达量于CPB后1 h达到高峰,手术结束时开始下降,但未回复到术前水平(P<0.05)。结论:体外循环能上调外周血单个核细胞S100A9等蛋白的表达。 展开更多
关键词 循环 S100蛋白质/代谢 炎症 单核细胞 电泳 凝胶 双向
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联合检测尿核基质蛋白22和尿脱落细胞在监测膀胱癌术后复发中的临床价值 被引量:1
8
作者 杨正平 杨关天 +2 位作者 王伟 胡向农 杨建军 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2023年第3期144-149,共6页
目的探究联合检测尿脱落细胞和尿核基质蛋白22(NMP22)在监测膀胱癌术后复发中的临床应用价值。方法对我院2017年10月至2022年3月收治的106例膀胱癌手术后患者行荧光膀胱镜检查,检查前分别留取尿液样本行NMP22和尿脱落细胞检测;以荧光膀... 目的探究联合检测尿脱落细胞和尿核基质蛋白22(NMP22)在监测膀胱癌术后复发中的临床应用价值。方法对我院2017年10月至2022年3月收治的106例膀胱癌手术后患者行荧光膀胱镜检查,检查前分别留取尿液样本行NMP22和尿脱落细胞检测;以荧光膀胱镜检查和病理结果为金标准,评价单独检测与联合检测NMP22和尿脱落细胞在诊断膀胱癌复发中的敏感性、特异性、准确性、阳性率和癌检出率,以及在不同分期、分级肿瘤中的阳性检出率。结果单独检测NMP22和尿脱落细胞诊断膀胱癌复发的敏感性分别为60.78%和50.98%,特异性分别为78.18%和87.27%,准确性均为69.81%,而联合检测的敏感性高达92.16%、特异性为74.55%、准确性升至83.02%。联合检测NMP22和尿脱落细胞的阳性率(57.55%)、癌检出率(44.34%)均高于单独检测NMP22的阳性率(40.57%)、癌检出率(29.25%)以及单独检测尿脱落细胞的阳性率(31.13%)、癌检出率(24.53%)。在Ta期和G1级肿瘤中,联合检测的阳性率明显高于单独检测尿脱落细胞的阳性率(P<0.05);在T1期肿瘤中,联合检测的阳性率明显高于单独检测NMP22的阳性率(P<0.05);在G2级肿瘤中,联合检测的阳性率明显高于单独检测NMP22和单独检测尿脱落细胞的阳性率(P<0.05)。结论联合检测NMP22和尿脱落细胞可以明显提高诊断膀胱癌复发的敏感性、准确性、阳性率和癌检出率,提高在Ta、T1期和G1、G2级肿瘤中的检出阳性率,可在行膀胱镜复查前为膀胱癌患者提供更充分、全面及准确的评估,具有一定的临床意义。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 相关蛋白质 尿脱落细胞检查
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缺血/再灌注损伤模型心脏细胞外基质重构的蛋白质组分析
9
作者 余国膺 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 2012年第3期260-260,共1页
传统的研究以细胞内的诸种蛋白为重点。本研究与之不同,采用一种全新概念的研究方法,在组织丢失细胞之前或不溶于通常的缓冲提取液的细胞外整合的诸成分未变为可溶解之前,分析新合成的基质蛋白或在细胞外空隙松散地结合的一些因子。
关键词 细胞 蛋白质组分析 缺血/再灌注 损伤模型 心脏 蛋白 细胞 提取液
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两种细胞外基质糖蛋白在鼻息肉中的表达 被引量:9
10
作者 刘争 高起学 +2 位作者 张松 游学俊 崔永华 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期173-176,共4页
目的 探讨细胞外基质 (extracellularmatrix ,ECM)成分纤维粘连蛋白 (fibronectin ,FN)和固生蛋白 (tenascin ,TN)在鼻息肉组织中的表达。方法 采用免疫组织化学法检测 34例鼻息肉和 2 0例下鼻甲组织中TN、FN的表达 ,并分析鼻息肉中... 目的 探讨细胞外基质 (extracellularmatrix ,ECM)成分纤维粘连蛋白 (fibronectin ,FN)和固生蛋白 (tenascin ,TN)在鼻息肉组织中的表达。方法 采用免疫组织化学法检测 34例鼻息肉和 2 0例下鼻甲组织中TN、FN的表达 ,并分析鼻息肉中的表达与鼻息肉组织类型、嗜酸粒细胞 (eosinophlis,EOS)浸润程度和临床分型、分期及大小的关系。结果 ①TN、FN在鼻息肉组织中表达的平均灰度值分别为 16 3 10± 10 5 4、16 3 2 4± 11 5 2 ,而在下鼻甲组织中表达的平均灰度值分别为 175 4 9± 9 2 9、173 93± 7 92 ;两组间的差异有显著性意义 (P <0 0 1) ;②TN、FN在水肿型鼻息肉组织中的表达显著强于在腺囊泡型和纤维型鼻息肉组织中的表达 (P <0 0 5 ) ;③FN表达的灰度值与EOS计数有显著相关 (r=- 0 6 0 ,P <0 0 1) ;④TN、FN的表达与鼻息肉分型、分期及大小无明显关系 (P >0 0 5 )。结论除构成组织的物理支架外 ,ECM还可能通过参与鼻息肉上皮细胞增生。 展开更多
关键词 鼻息肉 细胞 纤连蛋白 腱糖蛋白 表达
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补阳还五汤及有效组分对大鼠增生血管内膜细胞外基质蛋白表达的影响 被引量:20
11
作者 张伟 吴露 +3 位作者 陈北阳 张国民 唐映红 邓常清 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期169-173,共5页
目的:探讨补阳还五汤有效组分生物碱和苷对大鼠主动脉球囊损伤后增生内膜中细胞外基质(ECM)及其调节因子基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达的影响,揭示该方作用的物质基础及其机制。方法:大鼠随机分为... 目的:探讨补阳还五汤有效组分生物碱和苷对大鼠主动脉球囊损伤后增生内膜中细胞外基质(ECM)及其调节因子基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达的影响,揭示该方作用的物质基础及其机制。方法:大鼠随机分为假手术组、模型组、生物碱治疗组、苷治疗组、补阳还五汤原方治疗组和阿托伐他汀治疗组,以球囊导管损伤主动脉内膜后第2d开始灌胃给药,连续14d,未次给药后第2d(术后第16d)取胸主动脉损伤段,以免疫组化法测定增生内膜中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、纤维连接蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)和MMP-9、TIMP-1的表达。结果:(1)模型组Col-Ⅰ表达增强(P<0.01);补阳还五汤原方治疗组、生物碱治疗组、苷治疗组和阿托伐他汀治疗组Col-Ⅰ表达显著低于模型组(P<0.01)。模型组FN表达增强(P<0.01);生物碱治疗组和阿托伐他汀治疗组FN表达强度显著低于模型组(P<0.01)。而各组LN表达强度的变化差异均无显著(P>0.05)。(2)模型组TIMP-1表达增强(P<0.05);生物碱治疗可使TIMP-1表达降低(P<0.05);而原方、苷和阿托伐他汀对TIMP-1表达的增强无显著影响(P>0.05)。模型组MMP-9表达无显著变化(P>0.05);生物碱治疗组、苷治疗组和阿托伐他汀治疗组MMP-9表达强度显著高于模型组(P<0.05);而补阳还五汤原方治疗组MMP-9表达无显著变化(P>0.05)。结论:补阳还五汤及其2种有效组分生物碱和苷可抑制增生内膜中Col-Ⅰ的表达,生物碱还可抑制FN的表达。生物碱和苷可增强MMP-9的表达,生物碱还可抑制TIMP-1的表达。提示补阳还五汤及其2种有效组分生物碱和苷可能通过抑制增生内膜中ECM的合成,促进ECM成分的清除和降解以对抗血管内膜增生。 展开更多
关键词 血管再狭窄 补阳还五汤 细胞 胶原Ⅰ型 纤维蛋白 层黏连蛋白 金属蛋白酶9 金属蛋白酶1组织抑制剂
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细胞外基质在肝内的代谢与肝纤维化的形成 被引量:17
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作者 周光德 赵景民 《世界华人消化杂志》 CAS 2002年第1期57-59,共3页
0引言 肝纤维化(hepatic fibrosis)是肝脏内细胞外基质(extracelluar matrix,ECM)成份弥散性过度沉积性疾病,无假小叶形成.肝纤维化的发生机制主要是肝内ECM合成与降解失衡,表现为ECM大量堆积,肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)在... 0引言 肝纤维化(hepatic fibrosis)是肝脏内细胞外基质(extracelluar matrix,ECM)成份弥散性过度沉积性疾病,无假小叶形成.肝纤维化的发生机制主要是肝内ECM合成与降解失衡,表现为ECM大量堆积,肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)在此过程中起着关键性作用[1-3]. 展开更多
关键词 细胞 肝内 代谢 肝纤维化 形成
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腺相关病毒-1介导增强型绿色荧光蛋白基因在大鼠角膜基质细胞体内外转染的研究 被引量:4
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作者 汤明芳 陆晓和 +5 位作者 周瑾 温茜 周明乾 罗薇 袁伟 宫玉波 《国际眼科杂志》 CAS 2007年第6期1551-1554,共4页
目的:探讨血清1型腺相关病毒(rAAV1)介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因体内、外转染大鼠角膜基质细胞后绿色荧光蛋白(GFP)的表达及转染率。方法:采用携带绿色荧光蛋白报告基因的血清1型腺相关病毒(rAAV1-EGFP)感染原代培养的S... 目的:探讨血清1型腺相关病毒(rAAV1)介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因体内、外转染大鼠角膜基质细胞后绿色荧光蛋白(GFP)的表达及转染率。方法:采用携带绿色荧光蛋白报告基因的血清1型腺相关病毒(rAAV1-EGFP)感染原代培养的SD大鼠角膜基质细胞,通过荧光显微镜和流式细胞仪观察和检测EGFP的表达及阳性率。建立大鼠异体角膜移植模型,用含rAAV1-EGFP转染液的培养基在37℃孵育SD大鼠角膜植片同时浸泡缝线18h,再用此缝线间断缝合,将植片移植到大鼠角膜植床,术后通过荧光体视镜观察Wistar大鼠角膜出现EGFP荧光的起始时间及分布情况。结果:按rAAV1-EGFP不同转染倍数(MOI)转染角膜基质细胞。转染后3d,在倒置荧光显微镜下观察到角膜基质细胞的细胞质有GFP阳性表达。体视荧光显微镜观察到大鼠角膜中开始有GFP阳性表达;随MOI值的增高而增强,转染再7~9d达到高峰,此时检测rAAV1-EGFP对角膜基质细胞的转染效率,MOI=10^时是16.3%,MOI=10^4时是30.3%,MOI=10^5时是43.6%,MOI=10^6时是47.5%.rAA1-ECFP在大鼠角膜中的表达也明显增强。结论:rAAV1-ECFP可以在体内外稳定、有转染大鼠角膜基质细胞,是角膜基质细胞理想的报告基因。 展开更多
关键词 腺相关病毒 绿色荧光蛋白质 角膜细胞 因转染
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细胞外基质的代谢 被引量:16
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作者 辛绍杰 邹正升 《世界华人消化杂志》 CAS 2002年第1期54-56,共3页
0 引言细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)是指位于机体细胞外的非细胞性的有形或无定形成分.ECM的代谢包括ECM的合成与降解,ECM合成与降解失衡是肝纤维化形成的基础.I
关键词 细胞 代谢 转化生长因子
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S100A11-RAGE通过P38MAPK信号转导通路调控小鼠骨关节炎软骨细胞肥大和细胞外基质代谢 被引量:6
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作者 赵晓 黄飞麒 +1 位作者 姚乃婕 陈扬声 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第16期6-11,共6页
目的探讨S100A11-RAGE通过P38MAPK信号转导通路对小鼠骨关节炎软骨细胞肥大和细胞外基质代谢的调控。方法不同浓度的外源性S100A11(0、1.25、2.50、5.00及10.00μg/ml)与小鼠软骨细胞孵育48 h,检测基质金属蛋白酶13(MMP-13)、ADAMTS-5... 目的探讨S100A11-RAGE通过P38MAPK信号转导通路对小鼠骨关节炎软骨细胞肥大和细胞外基质代谢的调控。方法不同浓度的外源性S100A11(0、1.25、2.50、5.00及10.00μg/ml)与小鼠软骨细胞孵育48 h,检测基质金属蛋白酶13(MMP-13)、ADAMTS-5以及Ⅱ型、Ⅹ型胶原蛋白表达,以筛选作用最显著的S100A11浓度。加入不同浓度Anti-P38(0、1.25、2.50、5.00及10.00μg/ml)与小鼠软骨细胞预孵育12 h后,再加入作用最强的外源性S100A11孵育(10μg/ml)48 h,检测MMP-13、ADAMTS-5以及Ⅱ型、Ⅹ型胶原蛋白表达。结果小鼠软骨细胞MMP-13、ADAMTS-5以及Ⅹ型胶原蛋白表达随外源性S100A11浓度的增加而增加,且明显高于对照组;而Ⅱ型胶原蛋白表达随外源性S100A11浓度的增加而减少,且明显低于对照组。加入Anti-P38预处理后,MMP-13、ADAMTS-5以及Ⅹ型胶原蛋白表达均明显低于S100A11单独处理组,而Ⅱ型胶原蛋白表达明显高于S100A11单独处理组。结论外源性S100A11通过与RAGE结合,并经P38MARK信号转导通路诱导软骨细胞肥大和细胞外基质的降解,其机制可能与通过P38MAPK信号转导通路诱导MMP-13、ADAMTS-5以及Ⅹ型胶原蛋白表达,并降低Ⅱ型胶原蛋白表达。 展开更多
关键词 P38MAPK信号转导通路 软骨细胞肥大 细胞代谢
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细胞外基质蛋白1基因在病理性瘢痕中的差异表达 被引量:3
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作者 胡振富 李晓平 宋艳斌 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第27期5266-5268,共3页
目的:病理性瘢痕包括增生性瘢痕和瘢痕疙瘩,比较细胞外基质蛋白1基因在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中的表达差异并分析其意义。方法:实验于2003-05/2005-01在南方医科大学分子生物学研究所完成。病理性瘢痕标本来源于南方医院整形外科手术患者... 目的:病理性瘢痕包括增生性瘢痕和瘢痕疙瘩,比较细胞外基质蛋白1基因在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中的表达差异并分析其意义。方法:实验于2003-05/2005-01在南方医科大学分子生物学研究所完成。病理性瘢痕标本来源于南方医院整形外科手术患者,正常皮肤组织来源于无瘢痕体质趋势及无免疫性疾病的包皮手术标本。术前均征求患者同意后方留取标本。抽提增生性瘢痕和瘢痕疙瘩与正常皮肤组织的总RNA,反转录并双色荧光标记,与含有细胞外基质蛋白1基因的人类基因表达谱芯片杂交,经荧光扫描、数据处理和统计学分析,比较细胞外基质蛋白1基因在3种组织中的表达差异。结果:①芯片杂交图像显示荧光信号强度较高,背景均一,符合重复性和可靠性的要求和分析标准。②细胞外基质蛋白1基因在瘢痕疙瘩组织中的表达为正常皮肤组织的3.32倍,而在增生性瘢痕中的表达仅为正常皮肤组织的1.09倍。结论:细胞外基质蛋白1基因在瘢痕疙瘩中高表达而在增生性瘢痕中无差异表达,提示细胞外基质蛋白1基因在瘢痕疙瘩中呈特异性表达。 展开更多
关键词 瘢痕疙瘩 瘢痕 肥大性 细胞蛋白质 因表达
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血管内皮生长因子与细胞外基质蛋白1在胃癌中的表达及意义研究 被引量:2
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作者 陆朋云 梁伟 +2 位作者 荚卫东 朱志强 陶勇 《中国临床保健杂志》 CAS 2011年第4期373-376,I0002,共5页
目的探讨VEGF、ECM-1在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理特征之间的关系以及之间有无相关性。方法应用免疫组织化学染色技术检测血管内皮生长因子(VEGF)及ECM-1在胃癌及正常胃组织中的表达。结果 (1)VEGF/ECM-1蛋白在胃癌组织中与正... 目的探讨VEGF、ECM-1在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理特征之间的关系以及之间有无相关性。方法应用免疫组织化学染色技术检测血管内皮生长因子(VEGF)及ECM-1在胃癌及正常胃组织中的表达。结果 (1)VEGF/ECM-1蛋白在胃癌组织中与正常胃组织两组间差异有统计学意义(P<0.01)。(2)VEGF/ECM-1阳性表达在不同组织分化程度、不同胃癌浸润深度、不同TNM分期及是否有淋巴结转移间,均差异有统计学意义(P<0.05)。(3)VEGF和ECM-1蛋白的表达存在正相关关系。结论 VEGF、ECM-1在胃癌组织中呈高表达状态,并且两者的表达均与胃癌临床病理特征有相关性。 展开更多
关键词 胃肿瘤 内皮缩血管肽1 细胞蛋白质 因果律
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丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1在糖尿病大鼠肾组织细胞外基质重构中的作用 被引量:4
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作者 王丽晖 吴广礼 +5 位作者 林静 黄旭东 杨新军 汪晶华 陈云爽 赵维 《解放军医药杂志》 CAS 2018年第5期9-14,共6页
目的探讨糖尿病大鼠肾组织丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)的表达特征及在细胞外基质重构中的作用。方法雄性Wister大鼠60只,腹腔一次性注射链脲佐菌素(STZ,65 mg/kg)制备糖尿病大鼠模型,48 h后血糖≥16.7 mmol/L,尿糖3+~4+者入选糖... 目的探讨糖尿病大鼠肾组织丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)的表达特征及在细胞外基质重构中的作用。方法雄性Wister大鼠60只,腹腔一次性注射链脲佐菌素(STZ,65 mg/kg)制备糖尿病大鼠模型,48 h后血糖≥16.7 mmol/L,尿糖3+~4+者入选糖尿病组(DM),DM组造模成功后1、2、4、8、12周各组宰取10只大鼠,另取10只作为对照组。免疫组化检测肾组织MKP-1和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)层粘连蛋白(LN)的表达。Western印迹检测肾组织MKP-1和磷酸化p38 MAPK的水平,RT-PCR检测MKP-1和纤维粘连蛋白(FN)mRNA的表达。结果与对照组相比,糖尿病组大鼠肾组织1~8周MKP-1蛋白及mRNA的表达降低(P<0.01),磷酸化p38 MAPK水平在第1、2、4、8周表达升高(P<0.01),在第12周差异无统计学意义(P>0.05);LN 4~12周均高于对照组(P<0.01),FN mRNA 2~12周均高于对照组(P<0.01)。结论 MKP-1在糖尿病肾组织中表达下降,在细胞外基质重构中发挥一定作用,可能与p38 MAPK的去磷酸化有关。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶 细胞 大鼠 Wister
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细胞外基质降解酶类与胚泡着床的关系 被引量:6
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作者 谭宗建 李尚为 《生殖医学杂志》 CAS 2001年第1期54-57,共4页
关键词 胚泡着床 细胞降解酶 MMPS PA家族
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细胞外基质对血管平滑肌细胞桩蛋白和纽蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 何谢玲 蔡维君 +1 位作者 刘敏 关莹露 《医学临床研究》 CAS 2016年第11期2084-2087,共4页
【目的】探讨细胞外基质(extracellular matrix,ECM)对体外培养的血管平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMCs)黏着斑(focal adhesions,FAs)分子桩蛋白(paxillin)和纽蛋白(vinculin)表达的影响。【方法】将第4~6代大鼠主动... 【目的】探讨细胞外基质(extracellular matrix,ECM)对体外培养的血管平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMCs)黏着斑(focal adhesions,FAs)分子桩蛋白(paxillin)和纽蛋白(vinculin)表达的影响。【方法】将第4~6代大鼠主动脉SMCs分别种植在涂有纤维连接蛋白(fibronectin,FN)或层黏连蛋白(laminin,LN)的盖玻片上或种植在基质胶内进行培养。采用共聚焦免疫荧光技术检测paxillin和vinculin的表达,并通过FAs分子paxillin/F-aetin和vineulin/F-actin的双重荧光染色显示。【结果】种植在FN上的vinculin表达最低,LN次之,而在Matrigel胶中表达最高;在FN上vinculin在胞质分布较多,在FA's较少;而生长在LN基质上和基质胶中vincu1in较多定位在FAs,在胞质分布较少。Vinculin的荧光强度在FN、LN及基质胶中分别为(64.72±7.18)AU/μm2,(89.82±5.11)AU/μm2,(117.19土16.99)AU/μm2,依次增高,且组间比较有统计学意义(P〈0.05)。种植在FN上的paxillin最高,LN上次之,而Matrigel胶中表达最低;基质胶中paxillin主要分布于FAs,而FN上的除分布于FAs外,在胞浆的表达水平也较高。Paxillin的荧光强度在FN、LN及基质胶中分别为(129.87±10.22)AU/μm2、(86.59±9.90)AU/μm2、(56.32±7.54)AU/μm2,依次降低,且组间比较有统计学意义(P〈0.05)。【结论】不同的ECM成分对FAs分子的表达有影响:FN上调paxillin的表达,下调vinculin的表达;而LN和基质胶上调vinculin的表达,下调paxillin的表达。 展开更多
关键词 细胞 平滑 血管 蛋白/代谢 蛋白/代谢
原文传递
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