慢病毒携带的双自杀基因对淋巴瘤细胞杀伤作用的实验研究 被引量：3

1

作者 姜义荣 马道新 +1 位作者 陈学良 刘春生 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第9期916-921,共6页

背景与目的:慢病毒载体具有可感染非分裂细胞、目的基因整合至靶细胞基因组长期表达、免疫原性低等优点,适于体内基因治疗。本研究探讨慢病毒介导的双自杀基因对淋巴瘤细胞Raji的杀伤作用。方法:将表达慢病毒的3种质粒,即包装结构基因质... 背景与目的:慢病毒载体具有可感染非分裂细胞、目的基因整合至靶细胞基因组长期表达、免疫原性低等优点,适于体内基因治疗。本研究探讨慢病毒介导的双自杀基因对淋巴瘤细胞Raji的杀伤作用。方法:将表达慢病毒的3种质粒,即包装结构基因质粒pCMVΔ8.2、包膜基因质粒pCMV.VSVG、目的基因质粒pHR'CS.GFP或pHR'CS.CDglytk分两组(pHR'CS.Cdglytk为实验组、pHR'CS.GFP为对照组),经脂质体导入病毒包装细胞293T,包装成病毒后,收集病毒上清,浓缩后转染Raji细胞,用荧光显微镜及RT-PCR检测基因的表达。给予前体药物5-氟胞嘧啶(5-FC)和/或无环鸟苷(GCV),用MTT法测定Raji细胞的生长抑制率,检测CD和HSV-tk双自杀基因对Raji细胞的作用。结果:表达慢病毒的3种质粒可高效转染入293T细胞。荧光显微镜下观察可见大量的绿色荧光,透射电镜下观察可见富集的病毒颗粒。慢病毒介导的双自杀基因在Raji细胞中高效、稳定表达。单独使用GCV或5-FC对细胞的生长抑制率分别为51%、50%,与未转染组Raji细胞比较,差异有显著性(P<0.01);联合使用5-FC和GCV对细胞的生长抑制率为73%,明显高于单独使用5-FC或GCV(P<0.01)。结论:慢病毒介导的双自杀基因可高效稳定转染淋巴瘤细胞;双自杀基因系统较单一自杀基因系统(CD/5-FC或HSVtk/GCV)对淋巴瘤细? 展开更多

关键词 慢病毒携带 自杀基因 淋巴瘤 细胞杀伤作用 实验研究

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6B11抗独特型微抗体负载树突状细胞对卵巢癌细胞系细胞杀伤作用的体外研究 被引量：6

2

作者 杨文兰 崔恒 +2 位作者 冯捷 昌晓红 李小平 《中国妇产科临床杂志》 2004年第2期127-131,102,F004,共7页

目的　用 6B1 1抗独特型微抗体体外负载树突状细胞 (DC) ,以期诱导出抗原特异性的抗肿瘤免疫反应。方法　分离培养HLA -A2 +健康人外周血树突状细胞 ,培养过程中用 6B1 1微抗体负载 ,无关抗原F (ab)’2负载及未负载组为对照。光镜、电... 目的　用 6B1 1抗独特型微抗体体外负载树突状细胞 (DC) ,以期诱导出抗原特异性的抗肿瘤免疫反应。方法　分离培养HLA -A2 +健康人外周血树突状细胞 ,培养过程中用 6B1 1微抗体负载 ,无关抗原F (ab)’2负载及未负载组为对照。光镜、电镜下观察树突的形态 ;流式细胞仪检测DC表面分子表达 ;3 H -TdR掺入法测DC刺激自体T细胞增殖 ;51 Cr 6h释放试验测激活的T细胞对卵巢癌细胞系的杀伤。结果　培养的树突细胞有典型形态 ,CD80、CD86、HLA -DR等表面分子呈高表达 (分别为 6 5 %、 86 2 %、 93 7% ) ;6B1 1微抗体负载的DC不仅能刺激自体T细胞的增殖 ,而且其诱导的CTL细胞对HLA -A2 +、OC1 6 6 - 9+卵巢癌细胞系HOC1A有特异性的杀伤 ,结论　 6B1 1抗独特型微抗体模拟卵巢癌抗原OC1 6 6 - 9负载树突状细胞在体外可以诱导出抗原特异性的细胞毒T细胞 ,为进一步研究 6B1 展开更多

关键词 6811抗独特型微抗体 树突状细胞 卵巢癌 癌细胞 细胞杀伤作用 免疫反应

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HSV-tk/GCV自杀基因系统对喉癌细胞杀伤作用的体外研究 被引量：3

3

作者 刘志 成诗银 鱼兵 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期582-585,共4页

目的　研究逆转录病毒介导的HSV tk/GCV系统对人喉癌细胞的体外杀伤作用。方法　构建携带HSV tk基因的逆转录病毒载体 ,并以该重组逆转录病毒感染人喉癌细胞Hep 2。以G4 18筛选的抗性克隆 (命名为Hep 2 /tk) ,用MTT比色法观察GCV在体外... 目的　研究逆转录病毒介导的HSV tk/GCV系统对人喉癌细胞的体外杀伤作用。方法　构建携带HSV tk基因的逆转录病毒载体 ,并以该重组逆转录病毒感染人喉癌细胞Hep 2。以G4 18筛选的抗性克隆 (命名为Hep 2 /tk) ,用MTT比色法观察GCV在体外对Hep 2 /tk细胞的杀伤作用。结果　Hep 2 /tk细胞与未转染tk基因的Hep 2 /0、Hep 2细胞相比较 ,三者的生长速度无明显差别。Hep 2 /tk细胞对GCV高度敏感 ,即低浓度GCV(0～ 1mg/L)处理Hep 2 /tk细胞 7d,可将其大部分细胞杀死 ,增加GCV的浓度 (>1mg/L)不能显著增强其对Hep 2 /tk细胞的杀伤作用。 结论　人喉癌细胞Hep 2对HSV tk/GCV系统高度敏感 。 展开更多

关键词 HSV-TK/GCV自杀基因系统 喉癌 细胞杀伤作用 体外研究 基因治疗 更昔洛韦

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CD/5-FC系统对小鼠胃癌细胞杀伤作用的研究

4

作者 姬舒荣 刘晖 +4 位作者 张奕 顾琴龙 刘炳亚 朱正纲 林言箴 《实用癌症杂志》 2002年第5期471-474,共4页

目的 探讨CD5-FC自杀基因系统对小鼠胃癌细胞的体外杀伤作用及其机制。方法以逆转录病毒载体介导CD基因转导小鼠胃癌细胞株MFC,采用MTT法测定CD5-FC系统的体外杀伤作用及其“旁观者”效应;利用Hoechst33258荧光染色法、琼脂糖凝胶电泳... 目的 探讨CD5-FC自杀基因系统对小鼠胃癌细胞的体外杀伤作用及其机制。方法以逆转录病毒载体介导CD基因转导小鼠胃癌细胞株MFC,采用MTT法测定CD5-FC系统的体外杀伤作用及其“旁观者”效应;利用Hoechst33258荧光染色法、琼脂糖凝胶电泳法检测凋亡细胞,同时采用半定量RT-PCR技术检测凋亡相关基因的表达。结果转导CD基因可使MFC对5-FC高度敏感,并且显示出强大的“旁观者”效应。经5-FC作用后,荧光染色可见到典型的凋亡细胞核形态学改变,琼脂糖凝胶电泳出现典型的DNA梯度,同时发现凋亡相关基因bcl-2基因表达下调,而bax与caspase-3基因表达上调。结论CD5-FC自杀基因系统对小鼠胃癌细胞MFC具有强大的杀伤作用。 展开更多

关键词 CD/5-FC系统 小鼠 胃癌 细胞杀伤作用 自杀基因系统 作用机理 胞嘧啶脱胺酶

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CIK细胞对肺腺癌细胞杀伤作用的实验研究

5

作者 赵鑫 刘玉侠 +4 位作者 常颖 王启文 卢卫平 王宝 于鸿 《中国实验诊断学》 2014年第8期1231-1232,共2页

本实验以肺腺癌细胞株SPC-A-1作为靶细胞,通过体外实验观察细胞因子活化的杀伤细胞（cytokine induced killer cell,CIK）对其的杀伤效果,为CIK临床应用治疗肺腺癌提供实验数据。

关键词 肺腺癌细胞株 CIK细胞 实验研究 癌细胞杀伤作用 SPC-A-1 杀伤细胞 细胞因子 实验观察

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不同方法获取的肿瘤细胞提取物对肺癌细胞杀伤作用的实验研究

6

作者 赵鑫 刘玉侠 +5 位作者 常颖 卢卫平 王启文 王宝 段北野 王斌 《中国实验诊断学》 2014年第7期1061-1062,共2页

本实验从抗原提取方法入手，采用梯度盐水法对加热和未加热的肺腺癌细胞 SPC-A-1进行肿瘤细胞提取物提取，以此作为抗原，比较不同方法提取的肿瘤抗原在体外与人外周血淋巴细胞共同培养后对肺腺癌细胞 SPC-A-1的杀伤活性，探讨肿瘤抗原... 本实验从抗原提取方法入手，采用梯度盐水法对加热和未加热的肺腺癌细胞 SPC-A-1进行肿瘤细胞提取物提取，以此作为抗原，比较不同方法提取的肿瘤抗原在体外与人外周血淋巴细胞共同培养后对肺腺癌细胞 SPC-A-1的杀伤活性，探讨肿瘤抗原的有效获取方法以及不同浓度抗原对肿瘤细胞的体外杀伤效果，为肿瘤抗原的获取和临床应用提供实验数据。 展开更多

关键词 瘤细胞提取物 肺腺癌细胞 实验研究 癌细胞杀伤作用 SPC-A-1 人外周血淋巴细胞 抗原提取 肿瘤抗原

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rhTNF－α对昆明种小鼠艾氏腹水癌细胞杀伤作用的研究

7

作者 王建峰 张焕峰 +1 位作者 周丽莉 赵鹏 《河南肿瘤学杂志》 1996年第3期173-175,共3页

昆明种小鼠腹腔接肿艾氏腹水癌细胞，３天后腹腔注射重组肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦ－α），隔日１次，共４次。用药后第７日两剂量组小鼠腹水癌细胞平均浓度分别为１．３±０．２×１０（１０）／Ｌ、１．６±０．２×... 昆明种小鼠腹腔接肿艾氏腹水癌细胞，３天后腹腔注射重组肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦ－α），隔日１次，共４次。用药后第７日两剂量组小鼠腹水癌细胞平均浓度分别为１．３±０．２×１０（１０）／Ｌ、１．６±０．２×１０（１０）／Ｌ，比对照组２．５±０．４×１０（１０）／Ｌ大幅度降低（Ｐ＜０．０１）。苔盼兰染色结果两实验组腹水中瘤细胞平均死亡率分别为４６±６．１％、４３±５．６％，比对照组１９±３．７％显著升高（Ｐ＜０．０１）。用药小鼠平均存活时间分别为２３±３．２天、１９±３．３天，比对照组１３±３．６天有所延长。提示ｒｈＴＮＦ－α对艾氏腹水瘤细胞有杀伤作用。 展开更多

关键词 RHTNF-Α 癌细胞杀伤作用 动物实验 艾氏腹水癌

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墓头回对HL—60细胞杀伤作用的实验研究

8

作者 赵丽 陈龙 赵玲 《世界今日医学杂志》 2003年第2期91-92,共2页

目的 探讨应用细胞培养技术观察墓头回水提物对白血病现—60细胞系的杀伤及凋亡作用。方法 将不同浓度的墓头回水提物与HL-6O细胞进半固体培养，观察对其集落形成的影响，同时进行加药前后HL-60形态学及DNA电泳观察。结果 墓头回水提物... 目的 探讨应用细胞培养技术观察墓头回水提物对白血病现—60细胞系的杀伤及凋亡作用。方法 将不同浓度的墓头回水提物与HL-6O细胞进半固体培养，观察对其集落形成的影响，同时进行加药前后HL-60形态学及DNA电泳观察。结果 墓头回水提物在较大浓度时对肿瘤细胞的形成具有明显的抑制作用，未观察到对HL-60细胞有促凋亡的作用。结论 墓头回水提物对HL-60细胞有明显的抑制作用，但其作用机制有待进一步证实。 展开更多

关键词 墓头回 HL-60 细胞杀伤作用 实验研究

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柞蚕杀菌肽D对人直肠癌细胞的杀伤作用及机制 被引量：25

9

作者 张卫民 彭朝晖 黄自然 《蚕业科学》 CAS CSCD 1998年第3期144-148,共5页

柞蚕杀菌肽D在0．05～200μg／mL浓度范围内对直肠癌细胞的生长有明显抑制作用；用氚标记的胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）对癌细胞的掺入试验，发现能抑制细胞DNA的合成．导致3H-TdR掺入率明显下降。钙离子螯合剂Indo-1-AM能与癌细胞内钙离子... 柞蚕杀菌肽D在0．05～200μg／mL浓度范围内对直肠癌细胞的生长有明显抑制作用；用氚标记的胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）对癌细胞的掺入试验，发现能抑制细胞DNA的合成．导致3H-TdR掺入率明显下降。钙离子螯合剂Indo-1-AM能与癌细胞内钙离子螯合而产生特异性荧光，通过粘附细胞激光定量分析及筛选议的观察，发现杀菌肽能破坏细胞的钙离子通道，钙离子迅速逸出细胞外。采用电子显微镜观察直肠癌细胞超微结构的变化，发现杀菌肽首光破坏细胞膜致微绒毛收缩、融合，继而导致细胞器的破坏，最终细胞崩解死亡。正常猴肾细胞CV1，在1.00μg／mL浓度杀菌肽D作用48h，尚未发现不良影响。 展开更多

关键词 柞蚕 杀菌肽D 直肠癌细胞 细胞杀伤作用

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CD/5-FC系统对结肠癌细胞的杀伤作用 被引量：12

10

作者 黎成金 马庆久 +6 位作者 赖大年 鲁建国 王小军 王青 潘伯荣 武永忠 李金茂 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第5期535-539,共5页

目的:探讨组织特异性胞嘧啶脱氨基酶(cytosinedeaminase,CD)/5-氟胞嘧啶(5-fluorocytosine,5-FC)系统对不同分泌癌胚抗原(carcinoembryonicantigen,CEA)的大肠癌细胞LoVo和SW480的靶向杀伤作用.方法:脂质体法将CEA基因顺式转录调控序列(... 目的:探讨组织特异性胞嘧啶脱氨基酶(cytosinedeaminase,CD)/5-氟胞嘧啶(5-fluorocytosine,5-FC)系统对不同分泌癌胚抗原(carcinoembryonicantigen,CEA)的大肠癌细胞LoVo和SW480的靶向杀伤作用.方法:脂质体法将CEA基因顺式转录调控序列(TRS)驱动CD基因的组织特异性逆转录病毒载体G1CEACDNa及非组织特异性逆转录病毒载体pCD2分别转导入大肠癌细胞LoVo和SW480,以G418筛选阳性克隆扩增后给予前药5-FC进行敏感试验.结果:LoVo-CEACD及LoVo-CD比LoVo对5-FC的敏感性明显提高(P<0.01,t=5.688,n=9;P<0.01,t=3.136,n=9),SW480-CEACD及SW480-CD比SW480对5-FC的敏感性明显提高(P<0.01,t=3.437,n=9;P<0.01,t=3.516,n=9),LoVo-CEACD比LoVo-CD对5-FC的敏感性明显增强(P<0.05,t=2.183,n=9),而SW480-CEACD对5-FC的敏感性小于SW480-CD,SW480-CEACD对前药5-FC的敏感性低于LoVo-CEACD(P<0.05,t=2.504,n=9),转CD基因之LoVo和SW480细胞体外实验均可观察到明显的旁观者效应.结论:组织特异性CD/5-FC系统对LoVo和SW480细胞均有明显的靶向杀伤效果,但对SW480细胞的杀伤作用小于LoVo细胞. 展开更多

关键词 结肠癌 细胞杀伤作用 脂质体法 前药转换基因系统 CD/5-FC系统

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潜伏膜蛋白2A嵌合抗原受体-T细胞的制备及对鼻咽癌细胞杀伤作用的研究 被引量：5

11

作者 陈渊 陈仁杰 +7 位作者 黄骁辰 汤根兄 蒯兴旺 章明炯 张大为 唐奇 朱进 冯振卿 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期925-930,共6页

目的制备靶向潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein2A,LMP2A)的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-T细胞,观察LMP2ACAR-T细胞体内外对鼻咽癌细胞的杀伤作用。方法2016年9月至2017年12月,本研究以基因工程技术构建抗LMP2A慢... 目的制备靶向潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein2A,LMP2A)的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-T细胞,观察LMP2ACAR-T细胞体内外对鼻咽癌细胞的杀伤作用。方法2016年9月至2017年12月,本研究以基因工程技术构建抗LMP2A慢病毒表达载体,测序鉴定并通过Western blot法验证抗LMP2ACAR在293T细胞中的表达;通过质粒包装体系制备LMP2ACAR慢病毒,并感染人T细胞,制备LMP2ACAR-T细胞;CCK-8法检测LMP2ACAR-T细胞对鼻咽癌细胞的杀伤作用。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测LMP2A抗原激活后的LMP2ACAR-T细胞白细胞介素(IL)-2与干扰素(IFN)-γ的分泌水平。体内实验观察LMP2ACAR-T细胞对鼻咽癌移植瘤的抑瘤作用。SPSS21.0统计学软件用于统计分析。结果PCR结果显示抗LMP2ACAR片段大小约为1500bp,与理论值相一致,测序显示序列正确;Westernblot结果显示抗LMP2A慢病毒表达载体能在293T细胞中表达;CCK-8法结果发现在效靶比为20∶1、10∶1与5∶1时,LMP2ACAR-T细胞对LV-LMP2A-CNE1细胞的杀伤率分别为(72.11±9.75)%、(54.65±5.42)%与(36.68±3.80)%,与CD19CAR-T细胞、T细胞相比差异有统计学意义(P<0.05),而对CNE1细胞的杀伤作用与CD19CAR-T细胞和T细胞相比差异无统计学意义;ELISA法结果发现LMP2ACAR-T细胞与LV-LMP2A-CNE1细胞共培养上清中IL-2与IFN-γ的含量,显著高于与CNE1细胞共培养上清,差异具有统计学意义(P<0.05);体内实验中LMP2ACAR-T细胞组瘤体体积为(80.3±10.0)mm3,显著小于各对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论成功制备的LMP2ACAR-T细胞对LMP2A阳性的鼻咽癌细胞具有显著靶向杀伤效应。 展开更多

关键词 293T细胞 细胞杀伤作用 潜伏膜蛋白2A 鼻咽癌细胞 抗原受体 制备 WESTERNBLOT 嵌合

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脂膜微囊承载紫杉醇在体外对C6胶质瘤细胞杀伤作用的实验研究 被引量：7

12

作者 宫崧峰 李新钢 +4 位作者 李刚 张元鹏 王东海 徐淑军 何士玥 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2005年第8期500-503,共4页

目的在体外实验中研究脂膜微囊承载抗胶质瘤药物紫杉醇抑制C6胶质瘤细胞的作用,并探讨脂膜微囊靶向性抗瘤的机理。方法应用紫杉醇-脂膜微囊(Taxol-LCM)或单用脂膜微囊(LCM)处理C6细胞系,后用免疫荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察脂膜... 目的在体外实验中研究脂膜微囊承载抗胶质瘤药物紫杉醇抑制C6胶质瘤细胞的作用,并探讨脂膜微囊靶向性抗瘤的机理。方法应用紫杉醇-脂膜微囊(Taxol-LCM)或单用脂膜微囊(LCM)处理C6细胞系,后用免疫荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察脂膜微囊在肿瘤细胞内的分布特点,用药前后肿瘤细胞形态的改变和细胞内超微结构的变化,以及动态的观察脂膜微囊进入细胞的全过程。结果紫杉醇(Taxol)可结合于脂膜微囊(LCM),可以被胶质瘤细胞内吞,起到很强的的杀伤肿瘤细胞的作用;其内吞过程为脂膜微囊先结合于细胞膜表面,后在细胞内重新分布,最终被细胞浆内的酸性成分所降解。结论脂膜微囊可以承载紫杉醇在体外起到杀伤胶质瘤细胞的作用,且脂膜微囊的代谢与细胞内的酸性成分有关。 展开更多

关键词 脂膜微囊 紫杉醇 胶质瘤 C6胶质瘤细胞 细胞杀伤作用 体外实验 实验研究 肿瘤细胞形态 细胞内吞 杀伤肿瘤细胞

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激活的脐血树突状细胞对肿瘤细胞的直接杀伤作用 被引量：4

13

作者 石军 池田和真 +2 位作者 藤井伸治 李晓 浦权 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期89-92,共4页

探索脐血树突状细胞 (DC)在γ干扰素 (IFN γ )及细菌脂多糖 (LPS )激活前后对肿瘤细胞杀伤活性的差异。分离健康脐血单核细胞 ,用重组粒单细胞集落刺激因子 (GM CSF )、白介素 4 (IL 4 )和α肿瘤坏死因子α (TNF α )诱导为DC。于诱导... 探索脐血树突状细胞 (DC)在γ干扰素 (IFN γ )及细菌脂多糖 (LPS )激活前后对肿瘤细胞杀伤活性的差异。分离健康脐血单核细胞 ,用重组粒单细胞集落刺激因子 (GM CSF )、白介素 4 (IL 4 )和α肿瘤坏死因子α (TNF α )诱导为DC。于诱导第11天在合成培养基中加入LPS或IFN γ继续培养 12h ,将其激活。用流式细胞仪检测DC表面共刺激分子的改变 ,以明确LPS或IFN γ对DC的不同刺激作用 ;同时 ,以恶性血液病细胞株Jurkat及Daudi为靶细胞 ,以不同效靶比 (E∶T )与DC共同培养 18h ,采用51Cr释放试验检测DC激活前后抗肿瘤活性的差异。结果 (1)LPS及IFN γ可不同程度地上调DC表面CD86、CD80、CD83及CD1a的表达 ,尤以LPS刺激组明显 ;(2 )DC在未加刺激因子前能有效杀伤Jurkat细胞 ,在效靶比为 2 0∶1时 ,LPS或IFN γ可使其杀伤活性进一步提高至 5 0 0 %、 36 9% ,均与未加刺激因子前有显著差异 (P <0 0 0 1,P <0 0 2 5 ) ;(3)在效靶比为 2 0∶1时 ,LPS可使DC对Daudi的杀伤率提高至 19 8% (P <0 0 2 5 ) ,而未加刺激因子组及IFN γ刺激组DC对Daudi在任何效靶比均未显示明显的杀伤作用。LPS或IFN 展开更多

关键词 脐血 树突状细胞 肿瘤细胞 细胞杀伤作用 Γ干扰素 细菌脂多糖

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CIK细胞对G_0期急性髓系白血病细胞的杀伤作用 被引量：6

14

作者 惠吴函 徐娟 +2 位作者 万岁桂 孙雪静 刘聪艳 《首都医科大学学报》 CAS 2007年第5期666-667,共2页

关键词 急性髓系白血病细胞 细胞杀伤作用 CIK细胞 血液系统恶性肿瘤 细胞因子诱导 化疗敏感 微小残留病 G0期细胞

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黄芪多糖协同顺铂对BEL-7404人肝癌细胞的杀伤作用 被引量：45

15

作者 赵莲华 李清 +5 位作者 林芃 李坤 陈咏梅 高乐 张宁宁 李密 《实用癌症杂志》 2005年第1期34-35,共2页

目的　探讨黄芪多糖对人肝癌细胞BEL- 740 4细胞株细胞周期的影响及与顺铂联合使用,对BEL- 740 4肝癌细胞的杀伤作用。方法　通过四氮甲唑蓝(MTT )实验检测细胞的增殖抑制率,以观察黄芪多糖对肝癌细胞的增殖抑制作用;应用流式细胞仪检... 目的　探讨黄芪多糖对人肝癌细胞BEL- 740 4细胞株细胞周期的影响及与顺铂联合使用,对BEL- 740 4肝癌细胞的杀伤作用。方法　通过四氮甲唑蓝(MTT )实验检测细胞的增殖抑制率,以观察黄芪多糖对肝癌细胞的增殖抑制作用;应用流式细胞仪检测细胞周期的改变及凋亡率。结果　黄芪多糖可抑制肝癌BEL- 740 4细胞的生长、增殖;与顺铂联合应用对BEL 740 4肝癌细胞杀伤作用强于2种药物单独使用。黄芪多糖处理后的BEL- 740 4细胞出现低于G1期DNA含量的亚二倍体凋亡峰,将细胞周期阻滞于G1期。结论　黄芪多糖对肝癌BEL -740 4细胞有杀伤作用;黄芪多糖与顺铂联合使用具有协同抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 黄芪多糖 人肝癌细胞 BEL-7404细胞 顺铂 肝癌细胞BEL-7404 流式细胞仪检测 癌细胞杀伤作用 协同抗肿瘤作用 增殖抑制作用 细胞周期阻滞 增殖抑制率 DNA含量 联合使用 实验检测 亚二倍体 G1期 细胞株 凋亡率

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胃泌素拮抗剂增加CD自杀基因对结直肠癌细胞的杀伤作用 被引量：4

16

作者 王小军 马庆久 +4 位作者 赖大年 黎成金 李金茂 武永忠 王青 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第9期1385-1388,共4页

目的:研究联合应用胃泌素拮抗剂和胞嘧啶脱氨酶(CD)的基因治疗对结肠癌细胞的杀伤作用.方法:脂质体法转染G1CEACDNa至LoVo细胞.用含1mmol/L 5—FC或/和1× 10^(-8)mmol/L CI-988的100ml/L胎牛血清的RPMI1640培养基培养细胞,测生长曲... 目的:研究联合应用胃泌素拮抗剂和胞嘧啶脱氨酶(CD)的基因治疗对结肠癌细胞的杀伤作用.方法:脂质体法转染G1CEACDNa至LoVo细胞.用含1mmol/L 5—FC或/和1× 10^(-8)mmol/L CI-988的100ml/L胎牛血清的RPMI1640培养基培养细胞,测生长曲线;MTT法测细胞杀伤率;透射电镜观察细胞的超微结构;流式细胞仪annexin V和PI双重染色行凋亡相关检查;Balb/c裸鼠背部皮下接种 CD^+LoVo细胞,5-FC(500 mg/kg)腹腔注射或/和CI-988(10 mg/kg)灌胃处理20 d,处死裸鼠后肿瘤称重,病理切片HE染色,瘤组织透射电镜检查,结果:用 5—FC或/和 CI-988处理 6d后 CD^+LoVo细胞抑制率分别为90％和 50％,二者合用于 3 d和 6 d抑制率分别为40％和97％;MTT法检测联合应用5—FC和CI-988较单用任何一种处理对 CD^+LoVo 细胞杀伤作用更强,有统计学差异(0.53± 0.05 vs 0.49±0.02,0.38± 0.06,F=29.5536,n=5,P<0.01);电镜和流式细胞仪分别显示CD/5—FC和CI-988结合处理72 h后细胞有凋亡现象;用5-FC(500 mg/kg)腹腔注射和 CI-988(10 mg/ke)灌胃处理荷瘤裸鼠均可出现明显的抑瘤作用,抑瘤率分别为69.4％和49.5％,二者合用抑瘤较单用任一种处理更明显,有统计学意义(0.42±0.12vs 0.69±0.11,1.22±0.22,F=33.1709,n=5,P<0.05),抑瘤率达81.5％,电镜下见瘤组织内有凋亡小体.结论:联合应用胃泌素拮抗剂CI-988可以提高CD/5-FC对结肠癌细胞的杀伤作用.凋亡相关过程可能是这种协同作用的原因. 展开更多

关键词 胃泌素拮抗剂 CD自杀基因 结直肠癌 细胞杀伤作用 胞嘧啶脱氨酶 基因治疗 脂质体法

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脐血来源的树突状细胞增强CIK细胞的杀伤作用 被引量：11

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作者 陈静琦 曾波航 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期104-108,共5页

为确认体外诱导出的成熟脐血来源树突状细胞 (CBDC )可以引发强大抗肿瘤免疫反应 ,CBDC培养 12d后用电镜分析形态 ,用流式细胞仪检测其表型。在不同培养时间 ,用3 H TdR掺入法检测CBDC和细胞因子诱导杀伤细胞 (CIK )的扩增功能 ;用MTT... 为确认体外诱导出的成熟脐血来源树突状细胞 (CBDC )可以引发强大抗肿瘤免疫反应 ,CBDC培养 12d后用电镜分析形态 ,用流式细胞仪检测其表型。在不同培养时间 ,用3 H TdR掺入法检测CBDC和细胞因子诱导杀伤细胞 (CIK )的扩增功能 ;用MTT法检测被CBDC激活的CIK抗肿瘤活性。结果表明 ,体外诱导出形态典型的DC ,高表达主要组织相容性抗原I、II类分子、CD5 4 ,也表达CD80、CD83、CD1a,不表达CD6 8。体外培养 12d成熟的CBDC ,能使CIK以最高的比率扩增 ,2种细胞最佳混合比为 1∶10时被激活的CIK杀伤BEL 74 0 2肝癌细胞的功能最强 ,最佳效靶比为 展开更多

关键词 脐血 树突状细胞 CIK细胞 细胞杀伤作用 肿瘤免疫学 流式细胞仪

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CD/5-FC自杀基因治疗系统体外杀伤恶性人脑胶质瘤细胞作用的研究 被引量：2

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作者 吕胜青 刘运生 +2 位作者 杨辉 陈祖林 黄河 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期174-176,180,共4页

目的 :探讨胞嘧啶脱氨酶 / 5 氟胞嘧啶 (CD/ 5 FC)自杀基因治疗系统对恶性人脑胶质瘤细胞的杀伤作用。方法 :采用Lipofectamine2 0 0 0脂质体介导法将CD基因转染U2 5 1恶性人脑胶质瘤细胞 ,G4 1 8筛选获得抗性克隆 (取名为U2 5 1 /CD... 目的 :探讨胞嘧啶脱氨酶 / 5 氟胞嘧啶 (CD/ 5 FC)自杀基因治疗系统对恶性人脑胶质瘤细胞的杀伤作用。方法 :采用Lipofectamine2 0 0 0脂质体介导法将CD基因转染U2 5 1恶性人脑胶质瘤细胞 ,G4 1 8筛选获得抗性克隆 (取名为U2 5 1 /CD细胞 ) ,使用不同浓度的 5 FC作用于U2 5 1 /CD细胞 ,MTT法测定活性细胞比率。采用高效液相色谱法 (HPLC)检测 5 FC培养液内 5 FU的浓度。结果 :U2 5 1细胞获得了质粒的成功转染。基因转染使G4 1 8抗性细胞 (U2 5 1 /CD细胞 )对 5 FC高度敏感。未转染的U2 5 1细胞对 5 FC不敏感 ,IC50 约为 6 5 0 0 μmol/L ,而转染基因后IC50 约为 1 0 μmol/L。并且加入不同浓度的 5 FC后 ,U2 5 1 /CD细胞培养液内均能检测到 5 FU。结论 :5 FC对CD基因修饰U2 5 1细胞具有杀伤作用 ; 展开更多

关键词 胞嘧啶脱氨酶 5-氟胞嘧啶 基因治疗 恶性脑胶质瘤 细胞杀伤作用

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多烯紫杉醇增强放射对宫颈癌细胞杀伤作用的离体观察 被引量：1

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作者 唐丽萍 徐向英 +2 位作者 隋丽华 耿晓星 马荣 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2006年第2期122-123,共2页

关键词 放射增敏作用 多烯紫杉醇 人宫颈鳞癌 癌细胞杀伤作用 离体 肿瘤细胞凋亡 HELA细胞系 紫杉醇衍生物 细胞周期分布 药物提供

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瘦素增强外周血γδT淋巴细胞对肺癌细胞杀伤作用的研究

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作者 李海泉 贾晓民 +3 位作者 赵杰 陈复兴 刘军权 王海清 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期846-846,共1页

瘦素是一种主要由脂肪细胞分泌的激素样细胞因子，有研究证实瘦素具有调节机体免疫及促进血管形成的作用。γδT细胞是体内T细胞固有免疫的一个重要细胞群，它广泛分布于呼吸系统和消化系统上皮组织内，本实验用不同浓度的瘦素对人γδ... 瘦素是一种主要由脂肪细胞分泌的激素样细胞因子，有研究证实瘦素具有调节机体免疫及促进血管形成的作用。γδT细胞是体内T细胞固有免疫的一个重要细胞群，它广泛分布于呼吸系统和消化系统上皮组织内，本实验用不同浓度的瘦素对人γδT细胞增殖、 展开更多

关键词 癌细胞杀伤作用 ΓΔT淋巴细胞 瘦素 人γδT细胞增殖 外周血 脂肪细胞分泌 细胞因子 血管形成

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