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基于CRISPR/Cas9技术构建猪KLF4基因敲除细胞系及其对细胞活性的影响分析
1
作者 董娇 陆繁 +3 位作者 方晓敏 陈瑜哲 包文斌 王海飞 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期893-902,共10页
【目的】试验旨在利用CRISPR/Cas9技术构建Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)基因敲除的猪小肠上皮细胞,并探究KLF4基因敲除对于细胞活性和细胞周期的影响。【方法】在猪KLF4基因转录本第1外显子区域设计3条sgRNAs(... 【目的】试验旨在利用CRISPR/Cas9技术构建Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)基因敲除的猪小肠上皮细胞,并探究KLF4基因敲除对于细胞活性和细胞周期的影响。【方法】在猪KLF4基因转录本第1外显子区域设计3条sgRNAs(sgRNA1、sgRNA2和sgRNA3),经退火形成的双链DNA与线性化pGK1.1载体连接,产物转化大肠杆菌Top10感受态细胞进行鉴定,并将重组载体转染至猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)。PCR扩增敲除位点附近序列,并通过测序判断sgRNA敲除效率;利用CruiserTMEnzyme酶切鉴定阳性细胞克隆,通过TA克隆测序鉴定敲除序列;利用Western blotting检测基因敲除细胞中KLF4蛋白表达情况。利用CCK-8和流式细胞术检测KLF4基因敲除后细胞活性和细胞周期的变化。【结果】重组载体测序结果显示,sgRNAs与pGK1.1成功连接。分析敲除效率发现,3个sgRNAs均可对靶序列进行敲除,其中sgRNA3有较高的敲除效率。PCR产物经CruiserTMEnzyme酶切筛选出2个阳性单克隆细胞。TA克隆测序分析发现,KLF4基因2个等位基因序列分别缺失116和137 bp。Western blotting结果表明,KLF4基因敲除细胞中未见KLF4蛋白表达。细胞活性及细胞周期分析显示,敲除KLF4基因极显著抑制了细胞活性(P<0.01),并导致G0/S细胞周期阻滞。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了KLF4基因敲除的IPEC-J2细胞,且KLF4基因敲除可抑制细胞活性,并引起G0/S细胞周期阻滞。KLF4基因敲除细胞可为进一步探究KLF4基因功能及分子机制提供材料。 展开更多
关键词 猪 KLF4基因 CRISPR/Cas9技术 细胞活性 细胞周期
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基于Caspase3探讨余甘子叶提取物对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道高反应、肺泡上皮细胞活性的影响及作用机制
2
作者 张爱军 刘渊勇 +1 位作者 于丽君 冯平 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期1201-1205,共5页
目的 基于胱天蛋白酶(Caspase)3探讨余甘子叶提取物对慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠气道高反应、肺泡上皮细胞活性的影响及作用机制。方法 选取60只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(A)组、模型(B)组、乙酰半胱氨酸颗粒(富露施,C)组、... 目的 基于胱天蛋白酶(Caspase)3探讨余甘子叶提取物对慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠气道高反应、肺泡上皮细胞活性的影响及作用机制。方法 选取60只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(A)组、模型(B)组、乙酰半胱氨酸颗粒(富露施,C)组、余甘子叶提取物(D)组、Caspase3抑制剂(Z-DEVD-FMK,E)组、余甘子叶提取物+Caspase3抑制剂(F)组,每组10只,对B、C、D、E、F组采用香烟发生器+脂多糖法建立慢阻肺模型,A组不建立该模型,建模成功后,C组灌胃50 g/kg富露施,D组灌胃50 mg/kg余甘子叶提取物,E组灌胃10μg/kg Z-DEVD-FMK,F组给予余甘子叶提取物联合Z-DEVD-FMK,A、B组同期给予灌胃同体积生理盐水,无创肺功能仪检测气道高反应,干湿重法测定肺体脂数(LBF)、肺含水量(LWC),苏木素-伊红(HE)染色法检测肺组织病理形态,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡,免疫组化法检测肺组织中Caspase3蛋白表达。结果 与A组比较,B组气道阻力、LBF、LWC含量、肺泡上皮细胞凋亡、肺组织Caspase3蛋白表达显著升高(P<0.05),肺组织病理形态遭到破坏;与B组比较,C、D、E、F组气道阻力、LBF、LWC含量、肺泡上皮细胞凋亡、肺组织Caspase3蛋白表达明显降低(P<0.05),肺组织病理形态明显改善,且D组较C组变化更显著(P<0.05),E组与D组相比无明显差异(P>0.05),F组较E组变化显著(P<0.05)。结论 余甘子叶提取物可有效改善慢阻肺大鼠气道高反应及肺泡上皮细胞活性,其作用机制可能与抑制Caspase3表达有关。 展开更多
关键词 慢阻肺 余甘子叶提取物 气道高反应 肺泡上皮细胞活性 胱天蛋白酶(Caspase)3
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补中益气汤含药血清抑制肺癌细胞活性及血管生成拟态的机制研究
3
作者 田芳 韩硕 +1 位作者 王翠 孟静 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第6期9-18,共10页
目的探讨补中益气汤含药血清对肺癌细胞活性及血管生成拟态(VM)的影响及机制。方法通过SD大鼠灌胃法制备低剂量(BZ-L组)、中等剂量(BZ-M组)、高剂量(BZ-H组)补中益气汤含药血清,进行肺癌细胞干预。通过CCK-8实验、Edu细胞增殖实验、细... 目的探讨补中益气汤含药血清对肺癌细胞活性及血管生成拟态(VM)的影响及机制。方法通过SD大鼠灌胃法制备低剂量(BZ-L组)、中等剂量(BZ-M组)、高剂量(BZ-H组)补中益气汤含药血清,进行肺癌细胞干预。通过CCK-8实验、Edu细胞增殖实验、细胞克隆形成实验及细胞划痕实验、Transwell实验检测补中益气汤对肺癌A549、HCC827细胞增殖及迁移的影响。采用流式细胞术检测补中益气汤对肺癌细胞凋亡和细胞周期的影响,通过体外VM实验检测补中益气汤对肺癌细胞血管生成的影响。通过RNA-seq测序检测对照组细胞与药物干预细胞的差异表达基因。构建小鼠皮下移植瘤,检测补中益气汤灌胃治疗对肺癌细胞体内生长的抑制作用。结果补中益气汤可呈剂量依赖性地抑制A549、HCC827细胞的活力和增殖活性,并可呈剂量依赖性地促进肺癌细胞凋亡,诱导细胞发生G_2/M期阻滞。经补中益气汤干预后,A549、HCC827细胞的迁移能力显著减弱。随着补中益气汤干预浓度的提高,A549细胞及HCC827细胞的VM逐渐减少。与对照组细胞相比,补中益气汤组细胞有765个差异表达基因,其中p-JNK和p-ERK1/2基因表达显著下调。Western blot检测结果显示,随着补中益气汤浓度的升高,A549、HCC827细胞中JNK/ERK1/2信号通路的磷酸化水平被逐渐抑制。补中益气汤可使小鼠肿瘤的体积和质量均显著减小,使肿瘤组织中细胞凋亡率升高,并使肿瘤组织中p-JNK、p-ERK1、p-ERK2表达降低和E-cadherin表达升高。结论补中益气汤可能通过抑制JNK/ERK1/2信号通路活性,抑制肺癌细胞活性和血管生成。 展开更多
关键词 肺癌 补中益气汤 抑癌 细胞活性 血管生成拟态
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氯胺酮对肝损伤大鼠脑认知功能、肝细胞活性及NO、cGMP水平的作用机制
4
作者 蔡昊彤 陈权 +3 位作者 尤丽娜 尚游 张玲 张存诚 《中国老年学杂志》 北大核心 2024年第2期412-416,共5页
目的探究氯胺酮对肝损伤大鼠脑认知功能、肝细胞活性及一氧化氮(NO)、尿液环磷酸鸟苷(cGMP)水平的作用机制。方法选取正常大鼠40只分成正常组、模型组、氯胺酮组,丙泊酚组各10只,除正常组外其余组别均建立肝损伤大鼠模型,建模成功后,丙... 目的探究氯胺酮对肝损伤大鼠脑认知功能、肝细胞活性及一氧化氮(NO)、尿液环磷酸鸟苷(cGMP)水平的作用机制。方法选取正常大鼠40只分成正常组、模型组、氯胺酮组,丙泊酚组各10只,除正常组外其余组别均建立肝损伤大鼠模型,建模成功后,丙泊酚组使用丙泊酚(1.0 ml/次,1次/d)进行注射,氯胺酮组采用氯胺酮(0.5 mg/次,1次/d)注射,正常组及模型组采用等剂量的生理盐水处理,采用Morris水迷宫检测各组大鼠认知功能,采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组肝组织形态,TUNEL检测各组细胞凋亡,Western印迹检测NO、cGMP蛋白表达。结果与正常组比较,模型组逃避潜伏期明显升高,原平台穿越次数、原平台穿越时间明显降低(P<0.05);与模型组比较,氯胺酮组逃避潜伏期明显升高,原平台穿越次数、原平台穿越时间明显降低(P<0.05);与氯胺酮组比较,丙泊酚组逃避潜伏期降低,原平台穿越次数、原平台穿越时间明显升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组肝组织匀浆Ⅳ型胶原(CⅣ)、血清NO、cGMP水平明显较高(P<0.05);与模型组比较,氯胺酮组以上指标明显降低(P<0.05);与氯胺酮组比较,丙泊酚组以上指标明显升高(P<0.05)。正常组肝板纹理清晰,肝细胞排列整齐有序、索状结构清晰;模型组炎细胞浸润明显,核固缩严重,脂肪滴较多索状结构不清,肝窦间狭窄肝细胞排列紊乱;氯胺酮组肝板纹理较清楚,有少量炎性细胞,肝细胞排列较整齐,索状结构趋于清晰;丙泊酚组肝板纹理稍显清晰,肝细胞仍有肿胀现象、炎性细胞及中央静脉扩张仍有脂肪滴产生。与正常组比较,模型组肝细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与模型组比较,氯胺酮组肝细胞凋亡率明显降低(P<0.05);与氯胺酮组比较,丙泊酚组上述指标升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组NO、cGMP蛋白水平较高(P<0.05),与模型组比较,氯胺酮组以上指标明显降低(P<0.05);与氯胺酮组比较,丙泊酚组以上指标明显升高(P<0.05)。结论氯胺酮对于降低肝损伤肝组织匀浆CⅣ、血清NO、cGMP水平,抑制肝细胞凋亡等具有一定作用,但是氯胺酮对于肝损伤大鼠的认知功能的改善并无显著作用,并能够损害大鼠的学习和记忆功能。 展开更多
关键词 氯胺酮 肝损伤 认知功能 肝细胞活性 一氧化氮(NO) 尿液环磷酸鸟苷(cGMP)
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基于TLR4炎症信号通路探讨针灸对颈性眩晕大鼠中缝背核神经元细胞活性及血管活性物质的影响
5
作者 柳庆明 田利军 +1 位作者 唐乐 巩凤梅 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期962-966,共5页
目的基于Toll样受体(TLR)4炎症信号通路探讨针灸对颈性眩晕大鼠中缝背核神经元细胞活性及血管活性物质的影响。方法选取40只SPF级SD雄性大鼠随机分为正常(N)组、模型(M)组、针灸(A)组、西比灵(W)组,每组10只,M、A、W组采用颈椎失稳法建... 目的基于Toll样受体(TLR)4炎症信号通路探讨针灸对颈性眩晕大鼠中缝背核神经元细胞活性及血管活性物质的影响。方法选取40只SPF级SD雄性大鼠随机分为正常(N)组、模型(M)组、针灸(A)组、西比灵(W)组,每组10只,M、A、W组采用颈椎失稳法建立颈性眩晕模型,N组不建立该模型,建模成功后,对A组给与针灸治疗,对W组灌胃盐酸氟桂利嗪(西比灵)0.5 mg/kg,N、M组灌胃同体积生理盐水,记录各组一般情况,平衡木实验测定行为学,TUNEL法测定缝背核神经元细胞活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血管活性物质,Western印迹检测TLR4蛋白表达。结果N组皮毛光泽,活动自如,一般情况均正常,对外界刺激也反应灵敏,M组皮毛光泽可见降低,且活动明显受限,颈部活动受限最为明显,进食、进水量明显减少,对外界刺激反应可见明显降低,而与M组相比,A、W组一般情况明显改善,饮食逐渐恢复正常,颈部活动也明显恢复;与N组相比,M组平衡木得分显著降低(P<0.05);与M组比较,A、W两组平衡木得分显著升高(P<0.05);W组与A组相比无明显差异(P>0.05);与N组相比,M组中缝背核神经元细胞凋亡显著升高(P<0.05);与M组比较,A、W两组中缝背核神经元细胞凋亡显著降低(P<0.05);W组与A组相比无明显差异(P>0.05);与N组相比,M组血浆中降钙素基因相关肽(CGRP)水平显著降低,内皮素(ET)-1、血栓素(TXB)2、神经肽(NP)Y水平显著升高(P<0.05);与M组比较,S、W两组血浆中CGRP水平显著升高,ET-1、TXB2、NPY水平显著降低(P<0.05);W组与A组相比无明显差异(P>0.05);与N组相比,M组脑组织中TLR4蛋白表达显著升高(P<0.05);与M组比较,A、W两组脑组织中TLR4蛋白表达显著降低(P<0.05);W组与A组相比无明显差异(P>0.05);T组与W组相比无明显差异(P>0.05);U组比T组明显降低(P<0.05)。结论针灸可显著抑制颈性眩晕大鼠中缝背核神经元细胞活性并有效调控血管活性物质水平,其作用机制可能与抑制TLR4炎症信号通路有关。 展开更多
关键词 Toll样受体(TLR)4炎症信号通路 针灸 颈性眩晕 中缝背核神经元细胞活性 血管活性物质
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LncRNA HAGLR靶向miR-143/Hedgehog信号通路对HPV16/18感染的宫颈癌细胞活性作用机制
6
作者 韩杰 郑昌婧 +1 位作者 张玲 刘倩 《中国老年学杂志》 北大核心 2024年第3期633-637,共5页
目的 研究LncRNA HAGLR靶向miR-143/刺猬因子(Hedgehog)信号通路对人乳头瘤病毒(HPV)16/18感染的宫颈癌细胞活性作用机制。方法 CaSki细胞购自美国标准生物品收藏中心。选取宫颈癌患者的癌组织(符合宫颈癌确诊标准)与癌旁5 cm宫颈组织... 目的 研究LncRNA HAGLR靶向miR-143/刺猬因子(Hedgehog)信号通路对人乳头瘤病毒(HPV)16/18感染的宫颈癌细胞活性作用机制。方法 CaSki细胞购自美国标准生物品收藏中心。选取宫颈癌患者的癌组织(符合宫颈癌确诊标准)与癌旁5 cm宫颈组织标本各10例。将LncRNA HAGLR转染到宫颈癌细胞中后分为宫颈癌组、NC组及转染组。实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)检测LncRNA HAGLR、miR-143水平。噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖。流式细胞仪检测细胞凋亡。Western印迹检测音猬因子重组蛋白(Shh)、神经胶质瘤相关基因同源蛋白(Gli)1蛋白水平。双荧光素酶报告检测LncRNA HAGLR、miR-143、Shh、Gli1靶向。结果 宫颈癌组织中LncRNA HAGLR表达明显高于在癌旁组织(P<0.05)。宫颈癌组与NC组各指标对比无明显差异(P>0.05)。与NC组相比,转染组LncRNA HAGLR、增殖能力、Shh、Gli1水平明显降低,miR-143、凋亡率明显增加(P<0.05)。结论 LncRNA HAGLR靶向升高miR-143及抑制Hedgehog信号通路可降低HPV16/18感染的宫颈癌细胞的增殖并诱导凋亡。 展开更多
关键词 LncRNA HAGLR MIR-143 刺猬因子(Hedgehog)信号通路 人乳头瘤病毒(HPV)16/18感染的宫颈癌细胞活性
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Ngn2调节Nrf2/HO-1对脑缺血模型大鼠脑微结构、角质细胞活性的影响 被引量：1
7
作者 王明盛 崔焕喜 +4 位作者 崔红凯 裴观辉 李道广 闫海清 张平 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第33期5298-5303,共6页
背景:研究显示,血红素氧化酶1(heme oxidase-1,HO-1)在脑缺血再灌注损伤中具有重要作用;核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid2-related factor2,Nrf2)能减轻脑缺血再灌注损伤,其作用是通过调控下游抗氧化蛋白实现的;推测Nrf2/H... 背景:研究显示,血红素氧化酶1(heme oxidase-1,HO-1)在脑缺血再灌注损伤中具有重要作用;核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid2-related factor2,Nrf2)能减轻脑缺血再灌注损伤,其作用是通过调控下游抗氧化蛋白实现的;推测Nrf2/HO-1在脑部疾病中均有一定的调控作用。目的:探究神经源素2(neurogenin 2,Ngn2)通过调节Nrf2/HO-1对脑缺血大鼠脑微结构、角质细胞活性的影响。方法:SPF级雄性SD大鼠55只,随机取10只为健康组不进行干预;其余大鼠建立脑缺血模型,将建模成功的40只大鼠随机分为4组:其中模型组大鼠脑内注射生理盐水;Ngn2组大鼠脑内注射Ngn210 mg/kg;Nrf2/HO-1组脑内注射HO-1及Nrf2激动剂莱菔硫烷各10 mg/kg;联合调节组脑内注射Ngn2并联合Nrf2/HO-1组用药,均连续给药3 d。分数各向异性图像观察脑微结构,苏木精-伊红染色观察脑组织的病理形态,TUNEL法检测神经胶质细胞凋亡,免疫印迹和PCR分别检测Nrf2、HO-1的蛋白及mRNA表达。结果与结论:(1)与健康组比较,模型组大鼠脑组织中梗死灶周围皮质、梗死核心相对分数各向异性值表达较低(P<0.05);与模型组比较,Ngn2组及Nrf2/HO-1组上述表达升高(P<0.05);联合调节组上述表达高于Ngn2组及Nrf2/HO-1组(P<0.05);(2)模型组大鼠大量损伤神经元,细胞稀疏,排列紊乱,大量浸润;Ngn2组与Nrf2/HO-1组损伤侧神经元好转,仍见神经细胞缺失紊乱及细胞黏附;联合调节组脑组织神经细胞坏死减轻,浸润改善;(3)与健康组比较,模型组大鼠神经胶质细胞凋亡较高(P<0.05);与模型组比较,Ngn2组及Nrf2/HO-1组神经胶质细胞凋亡降低(P<0.05);联合调节组神经胶质细胞凋亡低于Ngn2组及Nrf2/HO-1组(P<0.05);(4)与健康组比较,模型组大鼠脑组织Ngn2mRNA及Nrf2、HO-1的蛋白和mRNA表达较低(P<0.05);与模型组比较,Ngn2组、Nrf2/HO-1组Ngn2 mRNA及Nrf2、HO-1的蛋白和mRNA表达升高(P<0.05);联合调节组Ngn2 mRNA及Nrf2、HO-1的蛋白和m RNA表达高于Ngn2组及Nrf2/HO-1组(P<0.05);(5)结果说明,Ngn2通过调节Nrf2/HO-1对脑缺血大鼠产生保护作用,其机制可能与改善脑微结构、角质细胞活性以及增强Nrf2、HO-1表达等具有一定相关性。 展开更多
关键词 脑缺血 Ngn2基因 核因子E2相关因子2 血红素氧化酶1 Nrf2/HO-1 脑微结构 角质细胞活性
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沉默miR-146a对颈动脉狭窄模型大鼠血管平滑肌细胞活性的影响及机制
8
作者 池魁 袁涛 +2 位作者 孙欢欢 李烨 张金文 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第4期892-896,共5页
目的 探究沉默微小RNA-146a(miR-146a)对颈动脉狭窄模型大鼠血管平滑肌细胞活性的影响及机制。方法 48只SPF级SD大鼠平均分为4组,其中空白组不做任何处理,模型组、过表达组、沉默组构建颈动脉狭窄模型,做miR-146a慢病毒滴定,采用实时荧... 目的 探究沉默微小RNA-146a(miR-146a)对颈动脉狭窄模型大鼠血管平滑肌细胞活性的影响及机制。方法 48只SPF级SD大鼠平均分为4组,其中空白组不做任何处理,模型组、过表达组、沉默组构建颈动脉狭窄模型,做miR-146a慢病毒滴定,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-146a基因表达量,采用流式细胞仪检测N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA)、同型半胱氨酸(Hcy),四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测血管平滑肌细胞增殖水平,采用细胞划痕实验检测血管平滑肌细胞迁移能力,采用Western印迹法检测L型钙通道蛋白(CaV1.2)、CaV1.3及Toll样受体(TLR)4/髓样分化因子(MyD88)/核转录因子(NF)-κB信号通路蛋白表达量。结果 与过表达组相比,沉默组miR-146a基因表达量、增殖数、TLR4/MyD88/NF-κB信号通路蛋白表达量明显降低(P<0.05)。与过表达组相比,沉默组CaV1.2、CaV1.3、NMDA、Hcy表达水平、迁移数明显升高(P<0.05)。结论 沉默miR-146a可能作用于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,调控TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达量,显著提升颈动脉狭窄模型大鼠血管平滑肌细胞活性。 展开更多
关键词 微小RNA-146a 颈动脉狭窄 血管平滑肌细胞活性
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糖尿病合并颈动脉狭窄患者中AngⅡ调节T细胞活性的相关研究
9
作者 王凯 金凤 《内蒙古医科大学学报》 2023年第1期74-77,82,共5页
目的 本研究主要探究在2型糖尿病合并颈动脉狭窄患者中T细胞活性与AngⅡ水平的相关性。方法选择我院200例患者和30例健康体检者作为研究对象,分为CA组,100例2型糖尿病合并颈动脉狭窄患者;T2DM组,100例2型糖尿病患者;对照组,30例健康体... 目的 本研究主要探究在2型糖尿病合并颈动脉狭窄患者中T细胞活性与AngⅡ水平的相关性。方法选择我院200例患者和30例健康体检者作为研究对象,分为CA组,100例2型糖尿病合并颈动脉狭窄患者;T2DM组,100例2型糖尿病患者;对照组,30例健康体检者。收集病例资料并整理记录,检测T细胞比例,检测其转录因子T-bet、GATA3和RORγt以及其特征因子IFN-γ、IL-4和IL-17的变化;检测健康体检者外周血单核细胞中T细胞的变化。加用AngⅡ刺激剂和AngⅡ拮抗剂后观察T细胞的变化。结果 Th1和Th17阳性细胞数,其转录因子以及其表达因子在CA组明显高于T2DM组和对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。健康体检者的外周血细胞在AngⅡ刺激剂作用下,效应性T细胞活性和T细胞的特征因子以及转录因子的表达明显增多,差异有统计学意义(P <0.05),而在AngⅡ拮抗剂作用下效应性T细胞活性和相关的表达因子表达明显减少,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 通过调整T细胞活性和其表达因子,可能促进2型糖尿病的颈动脉狭窄形成和发展。AngⅡ可以调节T细活性及相关因子的表达,会导致合并高AngⅡ水平的T2DM患者发生颈动脉粥硬化。 展开更多
关键词 2型糖尿病 颈动脉粥样硬化 T细胞活性 AngiotensinⅡ
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基于蛋白质组学研究冷冻干燥对副干酪乳杆菌PC-01细胞活性的影响 被引量：1
10
作者 许家齐 郑新飞 +3 位作者 冯燕 郭琳 于洁 张和平 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第3期177-186,共10页
目的:从蛋白组学的角度剖析冷冻干燥对副干酪乳杆菌PC-01菌体细胞存活的影响。方法:设定培养温度分别为32.5℃与37℃,对副干酪乳杆菌PC-01高密度发酵并冷冻干燥。取冻干前与冻干后的样品,利用TMT技术测定蛋白质含量,对鉴定出的差异蛋白... 目的:从蛋白组学的角度剖析冷冻干燥对副干酪乳杆菌PC-01菌体细胞存活的影响。方法:设定培养温度分别为32.5℃与37℃,对副干酪乳杆菌PC-01高密度发酵并冷冻干燥。取冻干前与冻干后的样品,利用TMT技术测定蛋白质含量,对鉴定出的差异蛋白进行KEGG功能注释与富集分析,研究蛋白的差异表达对两个试验组菌体存活的影响。结果:32.5℃试验组冷冻干燥前、后的活菌数均显著高于37℃试验组,上调蛋白都集中于碳水化合物代谢与膜运输途径上,且冻干前、后差异倍数偏大的蛋白有醛酮还原酶、4-草酰巴豆酸互变异构酶、二肽酶、GNAT家族N-乙酰转移酶、磷酸核糖甘氨酰胺甲酰转移酶等蛋白。结论:冷冻干燥前、后副干酪乳杆菌PC-01内部分子发生变化,据关键差异蛋白的功能,冷冻干燥主要是从抗冷冻性、膜运输能力以及细胞代谢能力等方面影响副干酪乳杆菌PC-01菌株细胞存活。研究结果为副干酪乳杆菌PC-01的工业化生产提供了参考。 展开更多
关键词 副干酪乳杆菌PC-01 蛋白组学 冷冻干燥 细胞活性
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依那普利叶酸干预下肢静脉栓塞模型大鼠血管内皮细胞活性及血管紧张素Ⅱ、血管紧张素转换酶的表达 被引量：2
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作者 岳莹 郝文立 甘永康 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第24期3877-3882,共6页
背景:下肢静脉栓塞易引发静脉血栓、肺栓塞等并发症,如不及时治疗可致患者猝死,因此探寻一种有效的治疗手段就显得尤为重要。目的:探究依那普利叶酸对下肢静脉栓塞大鼠血管内皮细胞活性及血管紧张素Ⅱ、血管紧张素转换酶水平的影响。方... 背景:下肢静脉栓塞易引发静脉血栓、肺栓塞等并发症,如不及时治疗可致患者猝死,因此探寻一种有效的治疗手段就显得尤为重要。目的:探究依那普利叶酸对下肢静脉栓塞大鼠血管内皮细胞活性及血管紧张素Ⅱ、血管紧张素转换酶水平的影响。方法:选取40只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、利伐沙班组及依那普利叶酸组,每组10只,后3组采用改良Reyers法建立下肢静脉栓塞模型,建模成功后,利伐沙班组给予30 mg/kg的利伐沙班灌胃,依那普利叶酸组给予20 mg/kg的马来酸依那普利叶酸片灌胃,正常组、模型组同期灌胃同体积生理盐水,持续30 d。给药过程中应用Tarlov评分评价大鼠下肢运动功能;给药结束后采用苏木精-伊红染色法检测血管组织病理形态,Hladovec法和ELISA法检测内皮细胞活性相关指标,均相竞争放射免疫法检测血管紧张素Ⅱ水平,马尿酸法检测血管紧张素转换酶水平。结果与结论:(1)与正常组比较,模型组大鼠Tarlov评分、血清一氧化氮浓度明显降低(P<0.05),血清中循环内皮细胞个数、内皮素1、肝细胞生长因子、血管紧张素转换酶、血浆中血管紧张素Ⅱ水平显著升高(P<0.05);(2)与模型组比较,利伐沙班组、依那普利叶酸组大鼠Tarlov评分、血清一氧化氮浓度明显升高(P<0.05),血清中循环内皮细胞个数、内皮素1、肝细胞生长因子、血管紧张素转换酶、血浆中血管紧张素Ⅱ水平显著降低(P<0.05),且依那普利叶酸组效果更显著(P<0.05);(3)正常组大鼠血管结构清晰完整,内膜完整;模型组血管壁组织疏松,水肿增厚,可见大量血栓形成,机化明显;与模型组相比,利伐沙班组、依那普利叶酸组血管形态有所改善,血管壁结构基本完整,可见部分血管内皮细胞再生,且依那普利叶酸组比利伐沙班组改善明显;(4)提示依那普利叶酸对下肢静脉栓塞大鼠具有显著治疗效果,可有效改善血管内皮细胞活性,降低血管紧张素Ⅱ、血管紧张素转换酶表达水平。 展开更多
关键词 依那普利叶酸 下肢静脉栓塞 血管内皮细胞活性 血管紧张素Ⅱ 血管紧张素转换酶
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采用胶原酶Ⅱ循环灌流消化法急性分离的成年大鼠心肌细胞活性及瞬时外向钾电流观察 被引量：1
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作者 何水静 徐瀚哲 +5 位作者 胡棣文 孟宪睍 李辛一 王腾 胡丹 黄燕 《山东医药》 CAS 2023年第3期17-21,共5页
目的通过观察采用胶原酶Ⅱ循环灌流消化法急性分离的成年大鼠心肌细胞形态、活性及瞬时外向钾电流,以验证胶原酶Ⅱ循环灌流消化法对心肌细胞急性分离的效果。方法利用自制Langerdorff灌流装置进行主动脉逆行灌流,胶原酶Ⅱ循环灌流消化,... 目的通过观察采用胶原酶Ⅱ循环灌流消化法急性分离的成年大鼠心肌细胞形态、活性及瞬时外向钾电流,以验证胶原酶Ⅱ循环灌流消化法对心肌细胞急性分离的效果。方法利用自制Langerdorff灌流装置进行主动脉逆行灌流,胶原酶Ⅱ循环灌流消化,分离成年大鼠单个心肌细胞;利用逐步梯度复钙法选出耐钙心肌细胞;在共聚焦显微镜下观察单个心肌细胞的形态、舒缩能力,并用全细胞膜片钳记录心肌细胞瞬时外向钾电流。结果胶原酶Ⅱ循环灌流消化法分离大鼠心肌细胞可获取90%质量良好的细胞,分离出来的心肌细胞边缘锐利、横纹清晰,折光性强,舒缩规律;复钙后仍有60%质量良好的活细胞;用全细胞膜片钳可记录到标准的瞬时外向钾电流。结论采用胶原酶Ⅱ循环灌流消化法急性分离的成年大鼠心肌细胞活性较好且耐钙,可记录到标准的瞬时外向钾电流。 展开更多
关键词 心肌细胞分离术 细胞急性分离术 胶原酶Ⅱ循环灌流消化法 心肌细胞 细胞活性 钾电流
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白灵菇的化学成分及其抗宫颈癌细胞活性研究
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作者 贾月梅 马国需 +3 位作者 孙照翠 许旭东 石磊岭 贾培松 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2023年第12期2088-2093,共6页
为研究白灵菇(Pleurotus tuoliensis)的化学成分及其生物活性,运用ODS、硅胶柱柱色谱、半制备高效液相色谱等方法对其进行分离纯化,结合现代波谱技术与理化性质鉴定化合物结构,从白灵菇提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为镰刀吡酮A... 为研究白灵菇(Pleurotus tuoliensis)的化学成分及其生物活性,运用ODS、硅胶柱柱色谱、半制备高效液相色谱等方法对其进行分离纯化,结合现代波谱技术与理化性质鉴定化合物结构,从白灵菇提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为镰刀吡酮A(1)、5-羟基二氢镰刀红素C(2)、3-甲基醚镰刀红素(3)、2-acetonyl-3-methyl-7-methoxynaphthazarin(4)、(-)-cyclonerodiol(5)、2-isopropanol-3-methyl-7-methoxy-naphthazarin(6)、1,2-二羟基薄荷内酯(7)、6,7-dihydroxy-3,6-dimethyl-2-isovaleroyl-4,5,6,7-tetrahydrobenzo furan(8)、二氢-3-外胸膜内酯(9)、5-羟甲基糠醛(10)、6,7-dihydroxy-3,6-dimethyl-2-isovaleroyl-4,5,6,7-tetrahydrobenzofuran(11),所有化合物均为首次从白灵菇中分离。对所得化合物进行抗宫颈癌细胞Hela活性筛选,除化合物5、9、10的活性较弱外,其它化合物均显示出较强的抗宫颈癌细胞活性,其中化合物3的活性最强,IC_(50)为3.78μmol/L,具有进一步开发的价值。 展开更多
关键词 白灵菇 化学成分 结构鉴定 抗宫颈癌细胞活性
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LncRNA FGFR3-AS1在卵巢癌中的预后及对肿瘤细胞活性的影响
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作者 高婉 李亚萍 王燕 《河北医药》 CAS 2023年第3期339-343,共5页
目的探究LncRNA FGFR3-AS1对卵巢癌(OC)的作用及其可能的机制。方法收集治疗的OC患者89例作为本次研究的患者组,另收集同期体检的正常人89例作为对照组。采用qRT-PCR检测患者组织与血清中FGFR3-AS1的相对表达,并分析FGFR3-AS1在OC患者... 目的探究LncRNA FGFR3-AS1对卵巢癌(OC)的作用及其可能的机制。方法收集治疗的OC患者89例作为本次研究的患者组,另收集同期体检的正常人89例作为对照组。采用qRT-PCR检测患者组织与血清中FGFR3-AS1的相对表达,并分析FGFR3-AS1在OC患者中的临床意义与预后价值。通过体外实验分析FGFR3-AS1对OC细胞生物学功能的影响。结果FGFR3-AS1在OC组织和细胞中高表达(P<0.05),具有较好的临床诊断价值,且FGFR3-AS1高表达情况主要集中于Ⅲ+Ⅳ期,淋巴转移,低分化患者中(P<0.05)。COX分析发现FGFR3-AS1、TNM分期、淋巴转移是影响OC患者的独立预后因素。体外实验中,发现抑制FGFR3-AS1的表达可以抑制OC细胞的增殖、侵袭,促进细胞凋亡(P<0.05),而上调FGFR3-AS1的表达可以促进OC细胞的增殖、侵袭,抑制细胞凋亡。结论FGFR3-AS1在OC组织中存在高表达显著,可以促进OC细胞的活性,加速OC的发展,未来有望成为OC的潜在诊断和预后标志物。 展开更多
关键词 FGFR3-AS1 卵巢癌 预后 细胞活性
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金银花含药血清对脂多糖诱导的人牙周膜细胞活性及NLRP3/IL-1β通路的影响
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作者 陆平 岳黎 魏丛丛 《药物流行病学杂志》 CAS 2023年第9期1017-1025,共9页
目的探讨金银花含药血清对脂多糖(LPS)诱导的人牙周膜细胞(HPDLCs)活性及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、白细胞介素1β(IL-1β)通路的影响。方法将20只大鼠按随机数字表法分为对照组(生理盐水)和金银花组(5.0 g·kg^(-... 目的探讨金银花含药血清对脂多糖(LPS)诱导的人牙周膜细胞(HPDLCs)活性及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、白细胞介素1β(IL-1β)通路的影响。方法将20只大鼠按随机数字表法分为对照组(生理盐水)和金银花组(5.0 g·kg^(-1)),每组10只,灌胃给药,1次/d,持续14 d。将HPDLCs分为对照组(空白血清培养)、LPS组(10μg·mL^(-1)LPS+空白血清培养)、金银花低浓度(HPDLCs+10μg·mL^(-1)LPS+75μL空白血清培养+75μL 5%金银花含药血清)、中浓度(HPDLCs+10μg·mL^(-1)LPS+75μL空白血清培养+75μL 10%金银花含药血清)、高浓度(HPDLCs+10μg·mL^(-1)LPS+75μL空白血清培养+75μL 20%金银花含药血清)组。MTT检测HPDLCs细胞增殖率,Transwell小室检测HPDLCs细胞迁移,流式细胞仪检测HPDLCs细胞凋亡率,PCR检测HPDLCs中IL-1β、NLRP3 mRNA的相对表达;Western blotting法检测各组HPDLCs中IL-1β、NLRP3、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)蛋白表达。结果与对照组比较,LPS组HPDLCs在24,48,72 h的细胞增殖率及细胞迁移数量显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、IL-1β、NLRP3 mRNA和IL-1β、NLRP3、Caspase-1蛋白表达显著升高(P<0.05);与LPS组比较,金银花各剂量组HPDLCs在24,48,72 h的细胞增殖率和细胞迁移数量显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、IL-1β、NLRP3 mRNA和IL-1β、NLRP3、Caspase-1蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论金银花对改善LPS诱导的HPDLCs凋亡和促进HPDLCs的增殖和迁移具有一定作用,其机制可能与调控NLRP3、IL-1β及Caspase-1表达水平相关。 展开更多
关键词 金银花 脂多糖 人牙周膜细胞 细胞活性 NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3/白细胞介素1β信号通路
原文传递
穴位刺激联合COX-2抑制剂对乳腺癌骨转移大鼠镇痛、NK细胞活性及PK2蛋白水平的影响
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作者 马强 于珊珊 +2 位作者 孟杰 马跃 张华新 《针灸临床杂志》 2023年第9期80-86,共7页
目的:探究穴位刺激联合COX-2抑制剂对乳腺癌骨转移大鼠镇痛、NK细胞活性及PK2蛋白的作用机制。方法:选取50只SPF级SD雌性大鼠,随机数字表法分为正常(A)组、模型(B)组、穴位刺激(C)组、COX-2抑制剂(D)组与穴位刺激联合COX-2抑制剂(E)组,... 目的:探究穴位刺激联合COX-2抑制剂对乳腺癌骨转移大鼠镇痛、NK细胞活性及PK2蛋白的作用机制。方法:选取50只SPF级SD雌性大鼠,随机数字表法分为正常(A)组、模型(B)组、穴位刺激(C)组、COX-2抑制剂(D)组与穴位刺激联合COX-2抑制剂(E)组,每组10只,对B、C、D与E组采用胫骨内注射乳腺癌细胞建立乳腺癌骨转移模型,A组不建立该模型,建模成功后,对C组给予穴位刺激治疗,对D组给予灌胃25 mg/kg的塞来昔布,对E组给予穴位刺激联合塞来昔布治疗,A组、B组同期给予灌胃同体积生理盐水,观察并记录大鼠疼痛情况,双能线骨密度仪检测大鼠骨密度及骨矿物质含量,HE染色法检测骨组织病理形态,免疫印迹法检测NK细胞活性,免疫组化法检测PK2蛋白表达。结果:与A组比较,B组50%PWT、TWL显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05),双侧后肢负重差值显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05),与B组比较,C组、D组与E组50%PWT、TWL明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05),双侧后肢负重差值显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05),且D组与C组比较差异无统计学意义(P>0.05),E组比D组变化明显,差异具有统计学意义(P<0.05);A组大鼠骨组织形态完整,骨小梁排列整齐,骨皮质连续,无坏死区域,骨髓腔内充满深染的血细胞,B组骨组织形态遭到破坏,骨皮质出现连续性中断,并可见大量肿瘤细胞浸润,瘤细胞形态不规则,且排列紊乱,细胞核大,异型性明显,与B组比较,C组、D组与E组病理形态明显改善;与A组比较,B组BMD、BMC显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05),与B组比较,C组、D组、E组BMD、BMC显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05),且D组与C组比较差异无统计学意义(P>0.05),E组比D组升高显著,差异具有统计学意义(P<0.05);与A组比较,B组大鼠胫骨组织中NKp30、NKp44、NKp46蛋白表达显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05),与B组比较,C组、D组与E组大鼠胫骨组织中NKp30、NKp44及NKp46蛋白表达显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05),且D组与C组比较差异无统计学意义(P>0.05),E组比D组升高显著,差异具有统计学意义(P<0.05);与A组比较,B组大鼠胫骨组织中PK2蛋白表达显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05),与B组比较,C组、D组与E组大鼠胫骨组织中PK2蛋白表达显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05),且D组与C组比较差异无统计学意义(P>0.05),E组比D组升高显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:穴位刺激联合COX-2抑制剂对乳腺癌骨转移大鼠具有显著的镇痛作用,并可显著改善NK细胞活性,促进PK2蛋白表达。 展开更多
关键词 穴位刺激 COX-2抑制剂 乳腺癌 骨转移 镇痛 NK细胞活性 PK2蛋白
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基于JAK/STAT-3通路探究右美托咪定对神经痛大鼠镇痛及星形胶质细胞活性的作用机制
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作者 周启 雷华娟 +1 位作者 宁彧 张慧芳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第24期5996-6001,共6页
目的基于Janus激酶/信号转导与转录激活子(JAK/STAT)-3通路探究右美托咪定(Dex)对神经痛大鼠镇痛及星形胶质细胞活性的作用机制。方法将40只大鼠分为正常组、模型组、Dex组、Ket组,除正常组外,其余大鼠均建立坐骨神经结扎病理性疼痛模型... 目的基于Janus激酶/信号转导与转录激活子(JAK/STAT)-3通路探究右美托咪定(Dex)对神经痛大鼠镇痛及星形胶质细胞活性的作用机制。方法将40只大鼠分为正常组、模型组、Dex组、Ket组,除正常组外,其余大鼠均建立坐骨神经结扎病理性疼痛模型,建模成功后,Dex组坐骨神经周围注射0.2 ml/kg Dex,Ket组腹腔注射10 mg/kg氯胺酮,模型组与正常组注射10 ml/kg生理盐水,分别对大鼠疼痛行为机械性缩足反射减值(MWT)、热缩腿潜伏期(TWL)进行测定,采用TUNEL检测脊髓背角星形胶质细胞凋亡,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠坐骨神经病理组织,Western印迹与PCR分别检测坐骨神经中JAK2、STAT3蛋白和mRNA表达,体外培养星形胶质细胞并检测活性,采用Dex、JAK2抑制剂、STAT-3抑制剂3组干预细胞,MTT检测其增殖活性。结果与正常组比较,模型组MWT、TWL疼痛表达显著降低(P<0.05),与模型组比较,Dex组MWT、TWL疼痛表达升高(P<0.05),与Dex组比较,Ket组MWT、TWL疼痛表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,Dex组星形胶质细胞凋亡表达显著升高(P<0.05),与Dex组比较,Ket组星形胶质细胞凋亡表达显著降低(P<0.05)。正常组坐骨神经的神经纤维结构完整且均匀分布,排列整齐有序,外模和形态完整,髓鞘紧密围绕轴突结构明确;模型组出现髓鞘肿胀的现象,有部分神经鞘膜水中及轴突现象产生导致排列密集紊乱;Dex组神经纤维结构不清晰现象有所缓解,轴突逐渐清晰,水肿现象好转,外膜形态有所显现;Ket组仍有排列紊乱,髓鞘和轴突结构不清晰现象。与正常组比较,模型组坐骨神经中JAK2、STAT3蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,Dex组JAK2、STAT3蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.05);与Dex组比较,Ket组JAK2、STAT3蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05)。干预24、48及72 h时,JAK2抑制剂组、STAT3抑制剂组星形胶质细胞增殖率均显著低于Dex组(P<0.05),JAK2抑制剂组与STAT3抑制剂组比较无显著差异(P>0.05)。结论Dex可提高神经痛大鼠痛阈值,促进星形胶质细胞凋亡改善病理损伤,研究机制可能与抑制JAK2、STAT3蛋白表达相关。 展开更多
关键词 Janus激酶/信号转导与转录激活子(JAK/STAT)-3 右美托咪定 神经痛 镇痛 星形胶质细胞活性
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miR-125a-3p对骨关节炎大鼠软骨细胞活性、氧化应激反应及SIRT1/Foxo1蛋白表达的影响 被引量：1
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作者 王乐 《临床骨科杂志》 2023年第2期293-298,共6页
目的 探讨miR-125a-3p对骨关节炎大鼠软骨细胞活性、氧化应激反应及细胞沉默信息调节因子1/叉头框转录因子o1(SIRT1/Foxo1)蛋白表达的影响。方法 将40只大鼠随机分为对照组(健康大鼠)、模型组(骨关节炎大鼠,造模后不做其他处理及干预)、... 目的 探讨miR-125a-3p对骨关节炎大鼠软骨细胞活性、氧化应激反应及细胞沉默信息调节因子1/叉头框转录因子o1(SIRT1/Foxo1)蛋白表达的影响。方法 将40只大鼠随机分为对照组(健康大鼠)、模型组(骨关节炎大鼠,造模后不做其他处理及干预)、miR-125a-3p组(骨关节炎大鼠,造模成功7 d后于大鼠左膝关节关节腔内注射miR-125a-3p抑制剂)、阿利吉仑组(骨关节炎大鼠,造模成功7 d后给予大鼠50 mg/kg阿利吉仑灌胃),每组10只。通过氧化应激反应检测超氧物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、乳酸脱氢酶(LDH),HE、番红O、Masson染色检查大鼠软骨损伤情况,TUNEL检测软骨细胞凋亡,RT-PCR与免疫印迹检测SIRT1、Foxo1基因及蛋白水平。结果 软骨细胞凋亡率模型组高于miR-125a-3p组与阿利吉仑组(P<0.05),miR-125a-3p组与阿利吉仑组比较差异无统计学意义(P>0.05)。HE、番红O、Masson染色显示,模型组大鼠关节软骨面骨裂隙形成;miR-125a-3p组与阿利吉仑组大鼠关节软骨表面变得光滑,无明显裂隙。RT-PCR与免疫印迹检测显示,与模型组相比,miR-125a-3p组与阿利吉仑组SOD、GSH、SIRT1水平均升高(P<0.05), MDA、LDH、Foxo1水平均降低(P<0.05)。结论 miR-125a-3p通过调控SIRT1/Foxo1信号通路,可降低氧化应激反应,抑制软骨细胞凋亡,改善骨关节炎病情。 展开更多
关键词 miR-125a-3p 骨关节炎大鼠 软骨细胞活性 氧化应激 细胞沉默信息调节因子1/叉头框转录因子o1蛋白
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基于生物阻抗谱的生物细胞活性免标记检测方法
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作者 徐恺杰 叶霞 +2 位作者 丁力 胡松佩 姚佳烽 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2766-2774,共9页
目的 基于生物阻抗谱(bioelectrical impedance spectroscopy,BIS)技术,提出一种免标记的生物细胞活性实时检测方法。该方法依据不同浓度、生理、病理状态下细胞组织的电学特性差异来判断细胞是否具有活性,以协助医师在临床手术中快速... 目的 基于生物阻抗谱(bioelectrical impedance spectroscopy,BIS)技术,提出一种免标记的生物细胞活性实时检测方法。该方法依据不同浓度、生理、病理状态下细胞组织的电学特性差异来判断细胞是否具有活性,以协助医师在临床手术中快速精准定位患者烫伤组织并实现有效切除。方法 使用具有活性的斑马鱼胚胎干细胞来模拟人体烫伤组织,采用生物阻抗谱技术来鉴别细胞组织的生理状态。结果 在不同状态下,细胞的阻抗幅值变化有显著的差异,可以从中发现同等浓度下活性细胞的阻抗幅值比死亡细胞平均高出17.25%,活性细胞发生弛豫频率的时间也比死亡细胞早25%。结论 实验数据表明,生物阻抗谱法能有效区分胚胎干细胞的两类生理状态;从聚类区域中可以看出,BIS检测法具有明显的细胞活性及浓度区分能力,理论上能够快速地协助医师完成对患者烫伤组织检测。 展开更多
关键词 细胞活性检测 生物阻抗谱 弛豫频率 电学特性
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基于散射OCT量化表征组织工程中细胞活性分布的研究
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作者 卢明 王玲 +1 位作者 杨珊珊 徐铭恩 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期189-200,共12页
非侵入且无需标记的细胞活性分布检测在组织工程中具有重要意义。本研究利用散射光学相干层析成像(OCT)技术量化表征三维组织模型中的细胞活性分布,提出优化的深度解析(ODR)散射算法以重建细胞/材料的散射对比增强图像,定量分析散射系... 非侵入且无需标记的细胞活性分布检测在组织工程中具有重要意义。本研究利用散射光学相干层析成像(OCT)技术量化表征三维组织模型中的细胞活性分布,提出优化的深度解析(ODR)散射算法以重建细胞/材料的散射对比增强图像,定量分析散射系数与细胞浓度、存活状态的关联性,表征三维组织内的细胞活性分布。多层样本模型实验结果表明,采用ODR散射算法能够提高样本散射成像的灵敏度和深度;人肝癌细胞C3A和人类真皮成纤维细胞负载的水凝胶实验验证了细胞浓度、细胞活性均和散射系数线性相关,皮尔逊相关系数分别为0.9207和0.9913,表明可用散射系数量化表征水凝胶支架中的细胞浓度和细胞存活状态。基于ODR的散射OCT可以无损无标记检测组织工程支架中的细胞活性分布,可对载细胞支架的细胞活性分布开展长期研究,有望成为疾病模型构建、药物筛选和细胞治疗的监测工具。 展开更多
关键词 光学相干层析成像 散射系数 组织工程 细胞活性分布 水凝胶
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