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基于巨噬细胞自噬探讨畅脉乐胶囊对动脉粥样硬化大鼠斑块稳定性及凝血功能影响的机制
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作者 黄松雄 张玉琴 +3 位作者 刘巧婷 李志 吴帮发 何洪金 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期871-876,共6页
目的基于巨噬细胞自噬探讨畅脉乐胶囊对动脉粥样硬化大鼠斑块稳定性及凝血功能影响的机制。方法选取40只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(CO)组,模型(MO)组,低剂量畅脉乐胶囊(LC)组,高剂量畅脉乐胶囊(HC)组,每组10只,对MO、LC、HC组采用... 目的基于巨噬细胞自噬探讨畅脉乐胶囊对动脉粥样硬化大鼠斑块稳定性及凝血功能影响的机制。方法选取40只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(CO)组,模型(MO)组,低剂量畅脉乐胶囊(LC)组,高剂量畅脉乐胶囊(HC)组,每组10只,对MO、LC、HC组采用饲喂高脂饲料、维生素D3和尼古丁灌胃建立动脉粥样硬化大鼠模型,CO组不建立模。建模成功后,LC组灌胃5 mg/kg的畅脉乐胶囊,HC组灌胃15 mg/kg的畅脉乐胶囊,CO组、MO组同期给予灌胃同体积生理盐水,苏木素-伊红(HE)染色法检测主动脉组织病理形态,凝血检测仪检测血清凝血功能指标,油红O染色法检测巨噬细胞泡沫化情况;电镜观察巨噬细胞中脂滴及自噬体形成,免疫荧光法检测巨噬细胞中斑块稳定相关蛋白细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)及自噬相关蛋白螯合体(SQSTM)1、微管相关蛋白1A/1B-轻链(LC)3的蛋白表达。结果CO组主动脉组织结构正常完整且排列整齐,内、中、外膜层清晰可见,分界清楚,可见数层弹力膜和平滑肌细胞,未见泡沫细胞及明显斑块形成;MO组主动脉结构紊乱,内膜可见明显增厚及脂质斑块弥漫,斑块内有大量泡沫细胞形成,并可见典型的不稳定斑块及大量炎性细胞浸润;与MO组比较,LC、HC组病理结构明显改善,主动脉可见典型的稳定斑块及较少的泡沫细胞,炎性细胞明显减少;与CO组比较,MO组血清中PT、INR、巨噬细胞中LC3显著降低(P<0.05),FIB、巨噬细胞中EMMPRIN及SQSTM1显著升高(P<0.05);与MO组比较,LC、HC组血清中PT、INR、巨噬细胞中LC3显著升高,FIB、巨噬细胞中EMMPRIN及SQSTM1明显降低(P<0.05),且HC组比LC组变化显著(P<0.05);CO组巨噬细胞染色较淡,未见巨噬细胞泡沫化及明显脂滴颗粒;MO组巨噬细胞被染成红色的区域数量明显增加,可见巨噬细胞出现泡沫化;与MO组比较,LC组、HC组脂滴数量明显减少,巨噬细胞泡沫化程度明显减轻;电镜结果显示,与CO组相比,MO组脂滴数量明显增多,自噬体数量明显减少;与MO组相比,LC组、HC组脂滴数量明显减少,自噬体数量明显增多,且HC组比LC组变化明显。结论畅脉乐胶囊可显著改善动脉粥样硬化大鼠斑块稳定性及凝血功能,其作用机制可能与促进巨噬细胞自噬有关。 展开更多
关键词 细胞自噬 畅脉乐胶囊 动脉粥样硬化 斑块稳定性 凝血功能
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基于Akt/mTOR信号通路探讨补肾活血方对去卵巢大鼠软骨细胞自噬的影响
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作者 陶帅 姜宏 周海燕 《中国骨伤》 CAS CSCD 2024年第2期196-206,共11页
目的:研究补肾活血方是否可以通过调控Akt/mTOR信号通路促进去卵巢大鼠软骨细胞自噬反应来保护关节软骨。方法:选取30只SPF级12周龄雌性SD大鼠,体重(247.0±7.0)g,先随机选择6只为空白对照组,剩余大鼠采用卵巢切除术结合右膝关节腔... 目的:研究补肾活血方是否可以通过调控Akt/mTOR信号通路促进去卵巢大鼠软骨细胞自噬反应来保护关节软骨。方法:选取30只SPF级12周龄雌性SD大鼠,体重(247.0±7.0)g,先随机选择6只为空白对照组,剩余大鼠采用卵巢切除术结合右膝关节腔注射碘乙酸钠(monosodium iodoacetate,MIA)建立绝经后膝骨关节炎模型,随机分为模型组、BSHXR-L组、BSHXR-M组、BSHXR-H组,每组6只。运用肉眼观察评分、番红O-固绿染色、免疫组化等方法明确补肾活血方对大鼠关节软骨损伤的保护作用,Western-blot检测自噬相关蛋白的表达,qPCR检测Akt、mTOR及下游自噬基因的相对表达。结果:造模后BSHXR(L、M、H)各组均可减轻软骨组织形态学损伤,免疫组化示Collagen-Ⅱ、Aggrecan表达逐渐升高,基质金属蛋白酶-13(matrix metallopriteinase-13,MMP-13)表达逐渐降低,其中BSHXR-M组和BSHXR-H组与模型组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。Western-blot结果示BSHXR(L、M、H)各组自噬通路蛋白p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR受到抑制,下游蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ表达逐渐升高,而p62逐渐降低,呈剂量效应。qPCR结果示BSHXR(L、M、H)各组均可促进Beclin-1、LC3ⅡmRNA的相对表达,抑制p62、Akt、mTOR mRNA的相对表达,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾活血方可以通过抑制Akt/mTOR信号通路增强软骨细胞自噬反应,进而发挥保护软骨的作用。 展开更多
关键词 补肾活血方 绝经 膝骨关节炎 软骨细胞自噬 Akt/mTOR信号通路
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中药单体调控“细胞自噬”防治皮瓣坏死 被引量:1
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作者 马岁录 何志军 +5 位作者 刘涛 李岩 何元旭 何波 王威威 魏晓涛 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第1期153-158,共6页
背景:近年来,有研究发现部分中药单体通过激活细胞自噬可缓解皮瓣氧化应激与细胞凋亡,促进皮瓣血管再生,防治皮瓣坏死。目的:综述中药单体调控细胞自噬防治皮瓣坏死的研究进展。方法:分别以“中药、细胞自噬、皮瓣”与“Traditional Chi... 背景:近年来,有研究发现部分中药单体通过激活细胞自噬可缓解皮瓣氧化应激与细胞凋亡,促进皮瓣血管再生,防治皮瓣坏死。目的:综述中药单体调控细胞自噬防治皮瓣坏死的研究进展。方法:分别以“中药、细胞自噬、皮瓣”与“Traditional Chinese Medicine (TCM),Autophagy,Skin flaps”为中英文检索词,由第一作者检索2010年1月至2022年10月发表在中国知网与PubMed数据库的相关文献,文献初筛共检索到相关文献196篇,以纳入和排除标准进行筛选,通过阅读文献标题与摘要进行质量评估,最终归纳整理55篇文献进行综述。结果与结论:(1)细胞自噬的调控是由AMPK/mTOR和PI3K/AKT等信号通路介导的,激活细胞自噬可缓解皮瓣氧化应激与细胞凋亡,促进皮瓣血管再生,防治皮瓣坏死。(2)中药单体中的萜类化合物(桦木酸、穿心莲内酯、三七三萜和梓醇)、酚类化合物(白藜芦醇、姜黄素和天麻素)、酚酸类化合物(丹酚酸B)及类固醇类化合物(拟人参皂甙F11)可通过调控相关信号通路激活细胞自噬来缓解皮瓣氧化应激与细胞凋亡,促进皮瓣血管再生,促皮瓣存活。(3)文章通过总结中药单体调控细胞自噬防治皮瓣坏死的研究进展,为临床上中药防治皮瓣坏死、促进皮瓣愈合提供参考与理论依据。 展开更多
关键词 皮瓣 细胞自噬 氧化应激 细胞凋亡 血管再生 中药单体 AMP活化蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素靶点(mTOR) 磷脂肌醇激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT) 研究进展
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miR-144-3p参与高蛋氨酸饮食诱导Cbs^(+/-)小鼠的肝细胞自噬
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作者 盛思琪 谢琳 +6 位作者 赵翔宇 姜怡邓 吴凯 熊建团 杨安宁 郝银菊 焦运 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第8期1289-1294,共6页
背景:高蛋氨酸饮食可导致Cbs^(+/-)小鼠发生肝损伤,高同型半胱氨酸血症与肝脂肪变性、自身免疫性肝炎、酒精性脂肪肝等多种肝脏相关疾病的发生和进展有关。微小RNA(miRNAs)参与细胞存活、分化和细胞自噬等各种细胞过程,具有重要意义。目... 背景:高蛋氨酸饮食可导致Cbs^(+/-)小鼠发生肝损伤,高同型半胱氨酸血症与肝脂肪变性、自身免疫性肝炎、酒精性脂肪肝等多种肝脏相关疾病的发生和进展有关。微小RNA(miRNAs)参与细胞存活、分化和细胞自噬等各种细胞过程,具有重要意义。目的:探讨miR-144-3p在高蛋氨酸饮食诱导Cbs^(+/-)小鼠肝细胞自噬中的关键作用。方法:①选取4周龄体质量相近的雄性胱硫醚β-合成酶基因正常(Cbs^(+/+))小鼠和单基因敲除(Cbs^(+/-))小鼠各10只,均饲以高蛋氨酸饮食,12周后处死,留取肝脏组织。②体外培养人源肝细胞(HL-7702),分为对照组(0μmol/L同型半胱氨酸)、同型半胱氨酸组(100μmol/L同型半胱氨酸)、mimic-NC组(转染mimic-NC)、mimic-NC+同型半胱氨酸组(转染mimic-NC+100μmol/L同型半胱氨酸)、miR-144-3p mimic组(转染miR-144-3p mimic)、miR-144-3p mimic+同型半胱氨酸组(转染miR-144-3p mimic+100μmol/L同型半胱氨酸)、inhibitor-NC组(转染inhibitor-NC)、inhibitor-NC+同型半胱氨酸组(转染inhibitor-NC+100μmol/L同型半胱氨酸)、miR-144-3p inhibitor组(转染miR-144-3p inhibitor)、miR-144-3p inhibitor+同型半胱氨酸组(转染miR-144-3p inhibitor+100μmol/L同型半胱氨酸)。采用荧光定量PCR检测肝组织和肝细胞中miR-144-3p的表达水平;转染miR-144-3p模拟物或抑制剂后,采用荧光定量PCR和Western blot分别检测miR-144-3p的转染效率及其对LC3B和p62蛋白表达的影响;酶联免疫法检测肝细胞上清液中丙氨酸氨基转移酶和门冬氨酸氨基转移酶的表达情况;Pearson相关性分析肝细胞miR-144-3p表达与肝细胞上清液中丙氨酸氨基转移酶和门冬氨酸氨基转移酶含量的相关性。结果与结论:①与Cbs^(+/+)组比较,Cbs^(+/-)组小鼠肝组织和同型半胱氨酸组肝细胞中miR-144-3p的表达水平降低(P<0.01);②转染miR-144-3p模拟物后,与mimic-NC比较,miR-144-3p mimic组中LC3B-Ⅱ/Ⅰ蛋白的表达水平降低,p62蛋白的表达水平升高(P<0.01);转染miR-144-3p inhibitor后,得到相反的结果(P<0.01);③与mimic-NC组相比,miR-144-3p mimic组肝细胞上清液中丙氨酸氨基转移酶和门冬氨酸氨基转移酶的含量降低(P<0.01);与inhibitor-NC组比较,得到相反的结果(P<0.01);④肝细胞中miR-144-3p的表达与肝细胞上清液中丙氨酸氨基转移酶(P<0.01,r=-0.8876)和门冬氨酸氨基转移酶(P<0.01,r=-0.8299)的含量呈负相关;⑤结果表明,同型半胱氨酸通过抑制miR-144-3p的表达促进肝细胞的自噬,进而加重肝损伤。 展开更多
关键词 微小RNA miR-144-3p 同型半胱氨酸 细胞自噬 肝损伤 高蛋氨酸饮食
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METTL3在同型半胱氨酸诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用
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作者 马凌桔 汪乐新 +7 位作者 迟宏扬 张竞文 彭红建 高春兰 姜怡邓 黄晖 杨力 马胜超 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第26期4221-4225,共5页
背景:高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)血症与胰岛β细胞功能密切相关,但其具体分子机制尚不完全明确。目的:探讨METTL3在Hcy诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用。方法:取第3,4代小鼠胰岛β细胞进行实验。①细胞模型建立和分组:对照组细... 背景:高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)血症与胰岛β细胞功能密切相关,但其具体分子机制尚不完全明确。目的:探讨METTL3在Hcy诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用。方法:取第3,4代小鼠胰岛β细胞进行实验。①细胞模型建立和分组:对照组细胞不加入Hcy,Hcy组细胞加入浓度为100µmol/L Hcy干预48h;②按Lipofectamine^(TM) 2000说明书将过表达质粒Ad-METTL3及si-METTL3转染小鼠胰岛β细胞,设计3种不同干扰片段,PCR验证、筛选出干扰效率最好的干扰片段;③转染后实验分组:对照组、Hcy组、Ad-NC(阴性对照)+Hcy组、Ad-METTL3+Hcy组、si-NC(阴性对照)+Hcy组和si-METTL3+Hcy组;④采用qRT-PCR及Western blot检测细胞中METTL3及细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、p62的表达;ELISA法测定胰岛素水平来评价胰岛β细胞胰岛素分泌能力;分别过表达和干扰METTL3后检测细胞自噬相关蛋白及胰岛素水平。结果与结论:①与对照组相比,Hcy组自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ的表达水平升高(P<0.05),而p62表达明显降低(P<0.05),胰岛素分泌能力明显下降(P<0.05);②与对照组相比,Hcy组中METTL3蛋白及mRNA水平表达均降低(P<0.05);③胰岛β细胞中沉默METTL3后,Hcy进一步上调了细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ的表达(P<0.05),而p62表达显著下降(P<0.05),细胞中胰岛素水平增加(P<0.05);过表达METTL3后,Hcy则使LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著降低且p62表达则增高(P<0.05);④结论:METTL3参与了Hcy诱导的胰岛β细胞自噬调控,对胰岛素的分泌发挥着调控作用。 展开更多
关键词 N6-甲基腺苷甲基转移酶3 胰岛Β细胞 同型半胱氨酸 细胞自噬 LC3Ⅱ/Ⅰ
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非编码RNA调控结核分枝杆菌感染巨噬细胞自噬的研究进展
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作者 彭祥琳 浦飞飞 +1 位作者 冯晶 夏平 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期117-122,共6页
结核病(tuberculosis, TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的传染病,巨噬细胞自噬对于清除MTB具有重要作用,但MTB可以通过多种机制干扰宿主自噬,逃避巨噬细胞对其“灭杀”从而在宿主细胞内长期存活繁殖。在MTB感... 结核病(tuberculosis, TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的传染病,巨噬细胞自噬对于清除MTB具有重要作用,但MTB可以通过多种机制干扰宿主自噬,逃避巨噬细胞对其“灭杀”从而在宿主细胞内长期存活繁殖。在MTB感染的巨噬细胞中存在多种差异表达的非编码RNA(non-coding RNA,ncRNAs),这些ncRNAs通过调控自噬相关基因表达在自噬的多个环节影响巨噬细胞清除MTB。因此,阐明这些调控网络对开发新的抗结核药物具有重要意义。该文综述了现阶段研究中ncRNAs调控MTB感染巨噬细胞自噬的相关机制,介绍了细胞自噬的发生过程以及ncRNAs的调控作用,以期为阐明TB的发病机制以及研发抗结核药物提供新的思路。 展开更多
关键词 结核病 结核分枝杆菌 非编码RNA 细胞 细胞自噬
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索拉非尼基于Hippo/YAP及PI3K/Akt/mTOR信号通路介导细胞自噬在肝细胞癌中产生耐药机制研究进展
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作者 曹智 周塏 +3 位作者 陈骋 梁贤文 刘路政 武金才 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第6期475-480,共6页
肝细胞癌(HCC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一,它的形成是一个复杂的过程,其具体形成机制尚不明确,由于大多数HCC患者被诊断出来时已是晚期,通常已丧失良好的手术时机。而靶向药物的出现给当前HCC患者带来了新的希望,同时还可作为术后治... 肝细胞癌(HCC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一,它的形成是一个复杂的过程,其具体形成机制尚不明确,由于大多数HCC患者被诊断出来时已是晚期,通常已丧失良好的手术时机。而靶向药物的出现给当前HCC患者带来了新的希望,同时还可作为术后治疗措施,在HCC中发挥着巨大的作用。索拉非尼是第一个被用于治疗HCC的靶向药物,它可抑制肝肿瘤组织血管生成和细胞增殖,可诱导肝肿瘤细胞凋亡,进而提高部分肝癌患者的生存率。但据目前研究显示,有50%~60%HCC经治患者对该药物出现了敏感性下降。主要是由于索拉非尼使用后会抑制体内相关信号通路,从而致使耐药的发生,故进一步探索索拉非尼耐药机制,使其逆转索拉非尼耐药对于改善肝癌治疗的预后具有极其重要的临床价值。近些年来,许多学者致力研究索拉非尼通过Hippo/YAP及PI3K/Akt/mTOR信号通路介导细胞自噬与耐药性的产生有着密切联系。并探讨其耐药分子机制,使该领域获得了巨大的发展。因此,本篇文章主要从Hippo/YAP及PI3K/Akt/mTOR信号通路展开,探讨其与细胞自噬之间的关系以及介导的耐药机制,为索拉非尼治疗肝癌产生耐药性提供可靠的科学理论依据。 展开更多
关键词 索拉非尼 Hippo/YAP信号通路 PI3K/Akt/mTOR信号通路 细胞自噬 细胞 耐药机制
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m^(6)A修饰调控细胞自噬参与雄性生殖疾病研究进展
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作者 彭芃 戚星宇 +1 位作者 袁峥嵘 马毅 《生命科学研究》 CAS 2024年第1期41-47,70,共8页
N^(6)-甲基腺苷(N^(6)-methyladenosine, m^(6)A)修饰是在腺苷核苷酸N^(6)位置上发生的甲基化,在多种RNA代谢过程如m RNA剪接、翻译、运输、降解中发挥关键作用,进而对各种生命过程产生广泛影响。细胞自噬是真核细胞在自噬相关基因的调... N^(6)-甲基腺苷(N^(6)-methyladenosine, m^(6)A)修饰是在腺苷核苷酸N^(6)位置上发生的甲基化,在多种RNA代谢过程如m RNA剪接、翻译、运输、降解中发挥关键作用,进而对各种生命过程产生广泛影响。细胞自噬是真核细胞在自噬相关基因的调控下通过溶酶体对自身细胞质蛋白质和受损细胞器进行降解的过程。本文总结了m^(6)A修饰调控细胞自噬在雄性生殖疾病发生发展过程中的研究进展,旨在为今后m^(6)A修饰调节自噬水平在雄性生殖中的调控机理研究提供参考资料,为雄性生殖疾病的治疗策略提供新方向。 展开更多
关键词 N^(6)-甲基腺苷(m^(6)A)修饰 RNA修饰 细胞自噬 雄性生殖疾病 男性不育
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LncRNA HOTAIR调节细胞自噬对脊髓损伤模型神经元凋亡的保护作用
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作者 赵俊 陈勇 吴春芳 《中西医结合心脑血管病杂志》 2024年第1期79-87,共9页
目的:探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)HOX转录反义RNA(HOTAIR)在脊髓损伤凋亡和自噬中的作用及相关机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)和模型组(SCI组)。构建缺氧缺糖诱导的SY-SH5Y细胞模型(OGD模型),将SY-SH5Y细胞分为Co... 目的:探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)HOX转录反义RNA(HOTAIR)在脊髓损伤凋亡和自噬中的作用及相关机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)和模型组(SCI组)。构建缺氧缺糖诱导的SY-SH5Y细胞模型(OGD模型),将SY-SH5Y细胞分为Control组、OGD组、OGD+Vector组、OGD+pcDNA-HOTAIR组、OGD+pcDNA-HOTAIR+NC mimic组、OGD+pcDNA-HOTAIR+miR-17 mimic组。通过脊髓损伤运动功能(BBB)评分评估大鼠运动功能的恢复能力;通过双荧光素酶报告基因实验分别检测HOTAIR和miR-17、miR-17和Beclin-1之间的靶向关系;实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测大鼠脊髓组织和细胞中HOTAIR、miR-17、Beclin-1 mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠脊髓组织和细胞中Beclin-1、微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、P62蛋白的表达;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果:与Sham组比较,SCI组大鼠BBB评分下降,脊髓组织中HOTAIR水平降低,miR-17水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与Control组比较,OGD组处理的SY-SH5Y细胞中HOTAIR水平降低,miR-17水平升高,神经元凋亡率升高,LC3Ⅱ蛋白表达降低,P62蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与OGD+Vector组比较,OGD+pcDNA-HOTAIR组细胞中HOTAIR水平升高(P<0.05),神经元凋亡率降低(P<0.05),LC3Ⅱ蛋白表达升高(P<0.05),P62蛋白表达降低(P<0.05),而自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)逆转了这一结果(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,Beclin-1是miR-17的靶基因,miR-17是HOTAIR的靶基因。与OGD+pcDNA-HOTAIR+NC mimic组比较,OGD+pcDNA-HOTAIR+miR-17 mimic组细胞中miR-17表达明显升高,神经元凋亡率明显升高,Beclin-1和LC3Ⅱ蛋白表达降低,P62蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:LncRNA HOTAIR通过靶向miR-17/Beclin-1通路增强自噬,从而减轻神经元凋亡和改善脊髓损伤。 展开更多
关键词 脊髓损伤 长链非编码核糖核酸 HOX转录反义RNA 细胞自噬 神经元凋亡
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钙结合蛋白S100A4对BCG感染THP-1细胞自噬的调控作用
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作者 刘悦阳 李梦媛 +5 位作者 聂雪伊 马亚博 侯雨欣 马伯利 杨易 徐金瑞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期311-322,共12页
本研究旨在探究牛结核分枝杆菌减毒株卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核巨噬细胞THP-1后,钙结合蛋白S100A4对细胞自噬的调控作用。以感染复数为10∶1的BCG感染THP-1细胞不同时间,用Western blot检测S100A4和LC3Ⅱ的... 本研究旨在探究牛结核分枝杆菌减毒株卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核巨噬细胞THP-1后,钙结合蛋白S100A4对细胞自噬的调控作用。以感染复数为10∶1的BCG感染THP-1细胞不同时间,用Western blot检测S100A4和LC3Ⅱ的表达,以确定最佳感染时间,并采用透射电镜观察自噬体数量变化。在BCG单独感染或与S100A4小干扰RNA共处理THP-1细胞12 h后,采用qRT-PCR检测S100A4及自噬相关因子--微管相关蛋白轻链3II (microtubule-associated protein light chain 3Ⅱ, LC3Ⅱ)、自噬相关蛋白7(autophagy-related gene 7, Atg7)、Beclin-1在mRNA水平上的表达,采用Western blot检测S100A4、LC3Ⅱ、Atg7、Beclin-1在蛋白水平的表达。利用mRFP-GFP-LC3检测自噬流,激光共聚焦显微镜观察细胞中mRFP-LC3和mRFP-GFP-LC3点状聚集。结果显示:在BCG感染THP-1细胞不同时间后,S100A4和LC3Ⅱ在蛋白表达水平随感染时间的延长先上升后下降,在12 h时表达最高(P<0.001),且自噬体数量明显增多。在mRNA水平上,与siNC组相比,siNC+BCG感染组S100A4、LC3Ⅱ、Atg7、Beclin-1的mRNA表达水平显著上调(P<0.05),当BCG和siS100A4共处理后,S100A4、LC3Ⅱ、Atg7、Beclin-1在mRNA水平的表达显著(P<0.05)或极显著(P<0.01,P<0.001)下调;在蛋白水平上,与未感染组相比,S100A4、LC3Ⅱ、Atg7、Beclin-1的蛋白表达量显著增多(P<0.05),BCG和siS100A4共处理后,S100A4、LC3Ⅱ、Atg7、Beclin-1的蛋白表达量均极显著减少(P<0.001);与未感染组相比,BCG组自噬体的数量极显著增多(P<0.01),siS100A4+BCG组与siNC+BCG组相比,自噬体的数量显著减少(P<0.05)。S100A4对BCG感染巨噬细胞诱导的自噬具有调控作用,S100A4能够促进BCG诱导的THP-1细胞自噬。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 细胞自噬 S100A4 THP-1细胞
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miR-27b对心力衰竭大鼠心肌细胞自噬、心肌能量代谢及PPARα信号的作用机制
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作者 陈运起 吴钟伟 +3 位作者 赵圣吉 李堪董 王敢 钟江华 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期1679-1683,共5页
目的 研究miR-27b对心力衰竭大鼠心肌细胞自噬、心肌能量代谢及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α信号的作用机制。方法 清洁级SD健康雄性大鼠40只,随机分为4组,每组10只,由于建模时意外死亡3只,因此健康组10只、模型组9只,miR-27b-NC... 目的 研究miR-27b对心力衰竭大鼠心肌细胞自噬、心肌能量代谢及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α信号的作用机制。方法 清洁级SD健康雄性大鼠40只,随机分为4组,每组10只,由于建模时意外死亡3只,因此健康组10只、模型组9只,miR-27b-NC组9只、miR-27b组9只,miR-27b-NC组及miR-27b组于腹主动脉分别注射5μl(20 nmol/L)拮抗剂阴性对照、5μl(20 nmol/L)miR-27b拮抗剂,其余大鼠注射等体积生理盐水,1次/d,共4 w。苏木素-伊红(HE)染色及Masson染色观察大鼠心肌组织病理形态及纤维化,实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-27b、磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)mRNA、PPARα mRNA指标水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测心肌细胞能量代谢指标,TUNEL检测心肌细胞凋亡,免疫印迹检测微管相关轻链蛋白(LC)3Ⅱ、LC3Ⅰ、自噬相关蛋白(Beclin)-1、组织蛋白酶(Cath)D表达。结果 HE染色:健康组心肌细胞形态正常,结构清晰;模型组与miR-27b-NC组心肌细胞水肿并有大量炎性细胞浸润,此外还产生大量的成纤维细胞;miR-27b组与模型组相比,成纤维细胞增生及炎性细胞浸润减少。Masson染色:胶原纤维呈现蓝紫色,心肌细胞及肌纤维呈现红色。健康组心肌组织结构正常,心腔附近有少量胶原纤维;模型组与miR-27b-NC组胶原纤维显著增加;与模型组相比,miR-27b组胶原纤维增生有所减少。上述结果均提示建模成功。与健康组相比,模型组与miR-27b-NC组N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)、游离脂肪酸(FFA)、心肌细胞凋亡、LC3Ⅱ、Beclin-1、CathD、miR-27b水平显著升高,LC3Ⅰ、AMPK、PPARα水平显著降低(P<0.05),在经过抑制miR-27b后,NT-proBNP、FFA、心肌细胞凋亡、LC3Ⅱ、Beclin-1、CathD、miR-27b水平显著降低,LC3Ⅰ、AMPK、PPARα水平显著升高(P<0.05)。结论 沉默miR-27b表达后可抑制心力衰竭大鼠心肌细胞自噬,减少心肌细胞凋亡,同时通过调控AMPK/PPARα通路改善心肌能量代谢水平,从而起到心保护的作用。 展开更多
关键词 miR-27b 心力衰竭 心肌细胞自噬 心肌能量代谢 过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α信号通路
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基于细胞自噬的中医药治疗帕金森病的研究进展
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作者 张敬雯 范仙灵 +4 位作者 王楠 张子腾 杨一帆 贾妮 闫咏梅 《陕西中医药大学学报》 2024年第1期1-6,共6页
现有研究已证实细胞自噬受损可能在帕金森病(parkinson's disease,PD)的发病机制中起着重要的作用。中医药在治疗PD类退行性神经系统疾病方面经验丰富,通过对中药单体、中药复方、针灸等中医药治疗方法回顾目前对PD发病与自噬功能... 现有研究已证实细胞自噬受损可能在帕金森病(parkinson's disease,PD)的发病机制中起着重要的作用。中医药在治疗PD类退行性神经系统疾病方面经验丰富,通过对中药单体、中药复方、针灸等中医药治疗方法回顾目前对PD发病与自噬功能障碍的作用的科学认识,并探讨中医药调节自噬过程的潜力,为PD患者提供新的治疗途径。 展开更多
关键词 细胞自噬 帕金森病 中医药 研究进展
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中医药调控细胞自噬抗肝纤维化的研究进展
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作者 何广英 王燕凤 +3 位作者 张臻 谢婷婷 韦柳婷 胡振斌 《中医学》 2024年第1期188-195,共8页
肝纤维化是机体对各种因素诱导的慢性病肝损伤进行的修复愈合反应,与肝硬化、肝癌的发生存在一定关系,阻止或逆转肝纤维化对于减少肝硬化和肝癌的发生至关重要。在中医学中,这一过程常被归类为“臌胀”和“积聚”等病证,往往涉及到“虚... 肝纤维化是机体对各种因素诱导的慢性病肝损伤进行的修复愈合反应,与肝硬化、肝癌的发生存在一定关系,阻止或逆转肝纤维化对于减少肝硬化和肝癌的发生至关重要。在中医学中,这一过程常被归类为“臌胀”和“积聚”等病证,往往涉及到“虚损生积”的病理机制。自噬是细胞生长、存活及自我平衡的重要过程。自噬的失调参与多种疾病的发生、发展。研究表明,细胞自噬与肝纤维化的发生、发展、转归过程有相关性,因此通过对细胞自噬进行调控可能为逆转肝纤维化提供了新的治疗策略。数十年的研究证明,中医药治疗肝纤维化疗效确切,其作用机制与细胞自噬及其相关因子或通路密切相关。该文通过总结和归纳近年来中医药通过干预细胞自噬过程,进而对肝纤维化发挥治疗作用进行综述,为中医药应用于肝纤维化进程方面提供思路和借鉴。 展开更多
关键词 中药 细胞自噬 肝纤维化 综述 研究进展
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从细胞自噬探讨中医药防治肥胖
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作者 于豆 唐红珍 《中国中医药现代远程教育》 2024年第6期155-157,共3页
肥胖作为多种疾病的危险因素,如胰岛素抵抗、多囊卵巢综合征、糖尿病和心脏病等,已成为现代医学急需解决的一项重要问题。近年来,越来越多的临床研究证实,细胞自噬在肥胖的发生、发展及治疗中扮演着重要角色,并影响肥胖相关的代谢紊乱... 肥胖作为多种疾病的危险因素,如胰岛素抵抗、多囊卵巢综合征、糖尿病和心脏病等,已成为现代医学急需解决的一项重要问题。近年来,越来越多的临床研究证实,细胞自噬在肥胖的发生、发展及治疗中扮演着重要角色,并影响肥胖相关的代谢紊乱。作者研读相关文献,归纳发现中医药在宏观上可针对肥胖病因病机辨证论治,在微观上可通过干预自噬相关基因、信号通路及蛋白活性,进而调控肥胖的自噬过程。文章以细胞自噬为突破口,研讨中医药通过调控自噬对肥胖的影响及作用。 展开更多
关键词 肥胖 细胞自噬 中医药疗法 综述
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基于阴阳运动学说探讨肠上皮化生与细胞自噬的相关性
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作者 莫燕雯 税典奎 《医学理论与实践》 2024年第7期1109-1111,共3页
细胞自噬系指细胞自身为克服不良因素刺激而自体吞噬,是细胞的一种自我保护机制,由自噬相关信号通路调控细胞自我吞噬,对维持细胞稳态至关重要。肠上皮化生是胃黏膜上皮细胞逐渐被肠上皮细胞所取代的过程,且具有癌变倾向,中医学的阴阳... 细胞自噬系指细胞自身为克服不良因素刺激而自体吞噬,是细胞的一种自我保护机制,由自噬相关信号通路调控细胞自我吞噬,对维持细胞稳态至关重要。肠上皮化生是胃黏膜上皮细胞逐渐被肠上皮细胞所取代的过程,且具有癌变倾向,中医学的阴阳运动学说与细胞自噬有密切联系,能完整地诠释细胞自噬这一生理或病理变化。因此,基于中医阴阳运动学说,探讨阴阳运动失调如何导致细胞自噬功能异常,如何进一步间接介导肠上皮化生病变,最终提出调和阴阳运动的中医治法,有效预防癌前病变。 展开更多
关键词 肠上皮化生 细胞自噬 阴阳学说 相关性
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基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨细胞自噬对激素性股骨头缺血性坏死的作用机制研究进展
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作者 田晓兵 陈前琼 +3 位作者 杨静舒 霍琦山 陈军龙 张宏伟 《中医康复》 2024年第5期38-42,46,共6页
激素性股骨头缺血性坏死是长期或过量使用糖皮质激素引起的一种非创伤性疾病。现代研究发现,自噬作为一种细胞内调节机制,其与激素性股骨头缺血性坏死之间存在一定的相关性。而PI3K/Akt/mTOR信号通路是干预细胞自噬的关键环节,对细胞代... 激素性股骨头缺血性坏死是长期或过量使用糖皮质激素引起的一种非创伤性疾病。现代研究发现,自噬作为一种细胞内调节机制,其与激素性股骨头缺血性坏死之间存在一定的相关性。而PI3K/Akt/mTOR信号通路是干预细胞自噬的关键环节,对细胞代谢平衡具有重要的病理生理作用。明确自噬在该通路的调控下对激素性股骨头缺血性坏死致病过程的影响,将有助于从分子水平认识该病,并期望通过靶向调节自噬水平,达到延缓激素性股骨头缺血性坏死进程的目的。因此,本文就PI3K/Akt/mTOR信号通路、细胞自噬及激素性股骨头缺血性坏死三者之间的联系进行综述,以期为临床靶向治疗激素性股骨头缺血性坏死提供新的视角及理论依据。 展开更多
关键词 激素性股骨头缺血性坏死 PI3K/Akt/mTOR信号通路 细胞自噬 机制
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《中国肿瘤临床》文章推荐:细胞自噬调控在肿瘤中作用的研究进展
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《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期54-54,共1页
自噬是溶酶体介导的细胞自行消化,其构成了一个被损坏的细胞器和长寿命蛋白质的循环动态途径,在机体内环境稳态和肿瘤发生机制中发挥着重要作用,以保证细胞在营养不足、肿瘤微环境等应激条件下可获得持续利用的能量,并以此来维持体内平... 自噬是溶酶体介导的细胞自行消化,其构成了一个被损坏的细胞器和长寿命蛋白质的循环动态途径,在机体内环境稳态和肿瘤发生机制中发挥着重要作用,以保证细胞在营养不足、肿瘤微环境等应激条件下可获得持续利用的能量,并以此来维持体内平衡及生存能力。自噬不仅依赖于肿瘤中的环境、细胞种类和阶段,而且还受肿瘤细胞与微环境之间相互串扰的调节。 展开更多
关键词 肿瘤微环境 细胞自噬 内环境稳态 体内平衡 细胞种类 溶酶体 营养不足 肿瘤发生机制
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新疆葡萄酒中的酚类物质对LO2细胞自噬的影响
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作者 王妍凌 陈杉彬 +8 位作者 赵文梅 尹丽萍 黎进雪 张海鹏 张金萍 黄翠 吕嘉伟 武运 薛洁 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期118-125,共8页
为了探究新疆葡萄酒酚类物质对肝细胞自噬的影响,该研究使用体外培养的人正常肝细胞(LO2),通过免疫印迹、实时荧光定量、细胞免疫荧光、流式细胞术等方法观察LO2细胞中微管相关蛋白1A/1B-轻链3(microtubule-associated proteins 1A/1B l... 为了探究新疆葡萄酒酚类物质对肝细胞自噬的影响,该研究使用体外培养的人正常肝细胞(LO2),通过免疫印迹、实时荧光定量、细胞免疫荧光、流式细胞术等方法观察LO2细胞中微管相关蛋白1A/1B-轻链3(microtubule-associated proteins 1A/1B light chain3,LC3)和螯合体1(sequestosome 1,P62)的水平变化,初步评估新疆葡萄酒中酚类物质对LO2细胞自噬的影响作用。免疫印迹结果发现,橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯,可显著提升LO2细胞中LC3蛋白的表达水平,提示橙皮苷和表儿茶素没食子酸酯或对LO2细胞自噬活性有一定影响作用。进一步通过实时荧光定量方法观察橙皮苷和表儿茶素没食子酸酯对LC3和P62蛋白mRNA的影响作用发现,橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯处理细胞后,显著上调了LC3蛋白的mRNA水平,同时降低了P62蛋白的mRNA水平;细胞免疫荧光染色显示橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯处理LO2细胞后,绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)标记的LC3蛋白荧光强度增强,提示细胞内形成自噬小体;流式细胞术结果进一步发现,GFP-LC3/RFP-LC3荧光强度比值减小,表明自噬小体成熟。综上所述,橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯对LO2细胞自噬活性具有一定的促进作用,但其作用机理尚需要进一步深入研究。 展开更多
关键词 新疆葡萄酒 细胞自噬 酚类物质 肝脏保护 LO2细胞
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细胞自噬对肝纤维化的影响及中医药治疗进展
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作者 牛丽娜 刘云霄 +4 位作者 窦婧 张冰 隆强 徐强 王晓忠 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第7期555-560,共6页
自噬是细胞生长、存活及自我平衡的重要过程。自噬的失调参与多种疾病的发生、发展。依据自噬致使的降解成分到达溶酶体的途径,自噬可以分为:巨自噬、微自噬、分子伴侣介导的自噬。其中,巨自噬是目前研究较为广泛的细胞自噬形式,其在肝... 自噬是细胞生长、存活及自我平衡的重要过程。自噬的失调参与多种疾病的发生、发展。依据自噬致使的降解成分到达溶酶体的途径,自噬可以分为:巨自噬、微自噬、分子伴侣介导的自噬。其中,巨自噬是目前研究较为广泛的细胞自噬形式,其在肝纤维化发生、发展中扮演着重要角色。自噬在肝纤维化中的作用取决于细胞的类型和疾病的阶段,因此通过对细胞自噬进行调控可能为逆转肝纤维化提供了新的治疗策略。数十年的研究证明,中医药治疗肝纤维化的效果突出,可提高肝纤维化逆转率。近年来,许多中药复方被报道具有调控细胞自噬改善肝纤维化的作用。因此,明确自噬对肝纤维化的意义以及中医理论对自噬和肝纤维化的认识十分重要,本文将主要阐述细胞自噬对肝纤维化的影响及中医药调控细胞自噬抗肝纤维化治疗进展。 展开更多
关键词 细胞自噬 肝纤维化 分子机制 相关通路 中医药 进展
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阿魏酸对CT-26的细胞凋亡和细胞自噬相关通路的影响
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作者 陈杉彬 赵东 +5 位作者 栾春光 乔宗伟 郑佳 张强 冯政 王德良 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期367-371,共5页
为了深入明晰酚酸类物质阿魏酸的具体功能机理,以其对CT-26细胞自噬、凋亡、细胞增殖和迁移为评价手段,考察阿魏酸对细胞生理活性的影响,阐明酚酸类物质阿魏酸具体作用机理,为中草药中有效成分阿魏酸的具体功效提供实验数据和理论依据... 为了深入明晰酚酸类物质阿魏酸的具体功能机理,以其对CT-26细胞自噬、凋亡、细胞增殖和迁移为评价手段,考察阿魏酸对细胞生理活性的影响,阐明酚酸类物质阿魏酸具体作用机理,为中草药中有效成分阿魏酸的具体功效提供实验数据和理论依据。研究中采用不同浓度梯度的阿魏酸处理CT-26细胞,考察阿魏酸对CT-26细胞生理活性的影响。在一定浓度范围内,阿魏酸能够抑制CT-26细胞的增殖、提高细胞自噬水平,同时在一定程度上抑制CT-26细胞的迁移能力。进一步的研究表明,阿魏酸通过促进凋亡通路上游的caspase3蛋白剪切为Cleaved caspase3,进而调控凋亡关键蛋白Bcl-2和BCL2-Associated X蛋白(Bax)的比值,最终促进了结肠癌细胞凋亡,以此保护细胞的正常生理活动。阿魏酸可通过促进细胞自噬并调控凋亡通路Bcl-2来抑制细胞活性,进而促进细胞凋亡。研究结果为明确中草药中有效成分阿魏酸的生物活性物质作用提供了实验数据。 展开更多
关键词 阿魏酸 CT-26细胞 细胞自噬 凋亡
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