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长链非编码RNA LINC00987通过细胞色素P450途径促进AML细胞凋亡的机制研究
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作者 杨彭月 刘暄 +3 位作者 王艳 徐玲 李扬秋 余锡宝 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期265-273,共9页
目的:探讨长链非编码RNA LINC00987在抗肿瘤药物诱导的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞凋亡中的作用及分子机制。方法:通过RT-qPCR检测AML中的LINC00987表达水平。构建稳定敲减LINC00987基因的Molm13细胞(shLINC00987)... 目的:探讨长链非编码RNA LINC00987在抗肿瘤药物诱导的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞凋亡中的作用及分子机制。方法:通过RT-qPCR检测AML中的LINC00987表达水平。构建稳定敲减LINC00987基因的Molm13细胞(shLINC00987),通过Annexin V/PI检测LINC00987低表达对阿糖胞苷诱导AML细胞凋亡的影响。对LINC00987共表达基因进行信号通路富集,分析LINC00987的表达对细胞色素家族基因的影响。结果:与健康对照组相比,lncRNA LINC00987在AML细胞系和AML病人标本中均显著降低,而在抗AML治疗后缓解组中高表达;此外,低表达LINC00987与AML患者预后不良有关。抗肿瘤药物阿糖胞苷、阿霉素、三氧化二砷和维奈托克可显著诱导AML细胞系Molm13和MV411的LINC00987表达。下调LINC00987的表达可抑制阿糖胞苷诱导的Molm13细胞凋亡。进一步研究发现,LINC00987共表达基因可富集于细胞色素P450(cytochrome,P450,CYP450)介导的氧化应激通路/网络,且LINC00987的表达与CYP450家族基因CYP11B1、CYP2U1和CYP2C9的表达水平呈正相关。下调LINC00987的表达则可抑制阿糖胞苷诱导的CYP11B1、CYP2U1和CYP2C9的mRNA表达。结论:LINC00987可以作为AML的预后标志物,其可能通过CYP450介导的氧化应激途径促进阿糖胞苷诱导的AML细胞凋亡。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 LINC00987 细胞色素P450 阿糖胞苷 细胞凋亡
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核壳结构上转换发光纳米粒子的合成及用于细胞色素C的检测
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作者 董佳瑶 易静 +2 位作者 刘浏 于贺 唐宏武 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期125-131,共7页
本工作合成了三层核壳结构的上转换发光纳米粒子,其中第一层是惰性核,第二层为发光层,为了增强上转换发光强度,又在表面包覆了第三层惰性壳层。该材料粒径均一、分散性良好,其发光层厚度约为2.4nm,惰性壳层厚度约为2.9nm。在其表面修饰... 本工作合成了三层核壳结构的上转换发光纳米粒子,其中第一层是惰性核,第二层为发光层,为了增强上转换发光强度,又在表面包覆了第三层惰性壳层。该材料粒径均一、分散性良好,其发光层厚度约为2.4nm,惰性壳层厚度约为2.9nm。在其表面修饰了细胞色素C的适配体链及互补链,在适配体的3’端修饰了BHQ3基团,能够猝灭上转换纳米粒子在655nm波长处的发光。当细胞色素C存在时,适配体与细胞色素C结合从而离开其表面,使655nm处的发光恢复。在检测过程中,540nm处的发光强度不会发生变化,可以用作细胞色素C的比率荧光检测。结果表明,当细胞色素C浓度在5~80μmol/L范围时,发光信号恢复程度与细胞色素C浓度呈线性相关,相关系数为0.998,检出限为1μmol/L。所建立方法可为细胞色素C的荧光检测提供一种新的技术思路。 展开更多
关键词 上转换发光纳米粒子 细胞色素C 发光共振能量转移
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细胞色素P450的工具药选择及种属差异的研究进展 被引量:15
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作者 张晓璐 乐江 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期697-701,共5页
药物对代谢酶的影响以及代谢产生的药物相互作用与药物安全性密切相关。细胞色素P450(CYP)是参与内、外源性化合物I相代谢反应的重要超家族酶系。特异性探针、诱导剂、抑制剂以及实验动物模型广泛应用于CYP介导的代谢途径以及药物相互... 药物对代谢酶的影响以及代谢产生的药物相互作用与药物安全性密切相关。细胞色素P450(CYP)是参与内、外源性化合物I相代谢反应的重要超家族酶系。特异性探针、诱导剂、抑制剂以及实验动物模型广泛应用于CYP介导的代谢途径以及药物相互作用研究。已知CYP底物存在明显重叠性,且表达调控机制种属差异显著,故研究中选择适当的实验动物以及特异性的探针、诱导剂和抑制剂,成为影响数据外推的关键问题。本文简要综述了CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP3A4/5的常用体内外探针、诱导剂、抑制剂以及动物种属表达调控的差异。 展开更多
关键词 细胞色素P450CYP3A4/5 细胞色素P450CYP1A2 细胞色素P450CYP2C9/19 细胞色素P450CYP2D6
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过表达OMA1通过促进线粒体释放细胞色素C诱导肺腺癌A549细胞凋亡
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作者 孙勇攀 龙谦 +3 位作者 周小江 孔德淼 刘波 鲁战胜 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第8期1414-1419,共6页
目的:探讨OMA1在肺腺癌中的表达水平及其对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及机制。方法:收集2018年01月至2019年10月在本院保存的42例经病理确诊为肺腺癌患者的癌组织样本及其癌旁组织(距离肿瘤边缘≥5 cm),免疫组化染色法检测癌组织及癌旁... 目的:探讨OMA1在肺腺癌中的表达水平及其对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及机制。方法:收集2018年01月至2019年10月在本院保存的42例经病理确诊为肺腺癌患者的癌组织样本及其癌旁组织(距离肿瘤边缘≥5 cm),免疫组化染色法检测癌组织及癌旁组织中OMA1表达情况。体外培养人肺腺癌细胞系NCI-H2009、Calu-3、SPC-A-1、A549及人正常肺上皮细胞BEAS-2B,qRT-PCR和Western blotting检测细胞中OMA1 mRNA和蛋白表达水平。采用OMA1过表达慢病毒及其空载慢病毒感染A549细胞,分为OMA1过表达慢病毒感染组(OMA1组)和空载慢病毒感染组(Vector组),另设置空白对照组(Blank组)。采用MTT检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡水平;JC-10染色法检测细胞线粒体膜电位变化;qRT-PCR法检测细胞中OMA1 mRNA表达水平;Western blotting法检测细胞中OMA1、cleaved caspase-3、OPA1以及细胞线粒体和胞浆中Cyt C蛋白表达水平。结果:肺腺癌患者癌组织中OMA1表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05)。NCI-H2009、Calu-3、SPC-A-1和A549细胞中OMA1 mRNA和蛋白表达水平显著低于BEAS-2B细胞(P<0.05)。与Blank组或Vector组比较,OMA1组细胞中OMA1 mRNA和蛋白表达水平、细胞凋亡率及cleaved caspase-3蛋白和胞浆中Cyt C蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),而细胞增殖活性、线粒体膜电位及OPA1蛋白和线粒体中Cyt C蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:OMA1在肺腺癌组织及其细胞系中低表达,过表达OMA1可通过下调OPA1蛋白表达、破坏线粒体膜电位、加速线粒体Cyt C释放而诱导肺腺癌A549细胞凋亡。 展开更多
关键词 肺腺癌 OMA1 细胞色素C 细胞凋亡 线粒体
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母体用药及母体细胞色素P450遗传多态性与新生儿罹患先天性心脏病的相关性分析
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作者 吴小妹 李慧 +1 位作者 王丽 胡春霞 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期588-594,共7页
目的研究母亲怀孕早期用药及细胞色素P450(CYP450)遗传多态性与后代先天性心脏病(CHD)的关联性。方法选取127名CHD胎儿产妇为观察组,132名非CHD胎儿产妇为对照组。调查双方特征及用药史,检测CYP450多态性。用Logistic回归分析产妇药物... 目的研究母亲怀孕早期用药及细胞色素P450(CYP450)遗传多态性与后代先天性心脏病(CHD)的关联性。方法选取127名CHD胎儿产妇为观察组,132名非CHD胎儿产妇为对照组。调查双方特征及用药史,检测CYP450多态性。用Logistic回归分析产妇药物使用与CYP450基因变异与后代CHD风险关联。结果观察组产妇使用促排卵药、降压药、抗生素、抗抑郁药、预防流产药、中药等后代CHD风险高于对照组(P<0.05)。rs1065852基因型中A/T和T/T及rs16947基因型中C/G和G/G相较各自基因型均增加后代CHD风险。母体CYP450基因rs1065852风险基因型(A/T或T/T)及怀孕早期用药可增加后代CHDs风险(P<0.05);CYP450基因rs16947风险基因型(C/G或G/G)同样会增加后代CHDs风险(P<0.05)。结论母体怀孕早期使用药物可能与后代患CHD有关,CYP450的rs1065852和rs16947位点与子代先天性心脏病风险显著相关。 展开更多
关键词 先天性心脏病 母体用药 细胞色素P450遗传多态性
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基于细胞色素C双通道比率型生物传感器快速测定液体乳中的过氧化氢
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作者 叶青 徐红斌 刘洋 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2023年第7期56-59,共4页
通过将细胞色素C(cytochrome C,Cyt.C)和六-(二茂铁基)-己硫醇(6-(Ferrocenyl)hexanethiol,FcHT)分别修饰在工作通道电极和参比通道电极上,构建一款基于双通道比率技术的过氧化氢生物传感器。通过优化检验条件,液体乳原液和0.1 mol/L的... 通过将细胞色素C(cytochrome C,Cyt.C)和六-(二茂铁基)-己硫醇(6-(Ferrocenyl)hexanethiol,FcHT)分别修饰在工作通道电极和参比通道电极上,构建一款基于双通道比率技术的过氧化氢生物传感器。通过优化检验条件,液体乳原液和0.1 mol/L的磷酸缓冲盐溶液(Phosphate-Buffered Saline,PBS)(pH=7.0)按照体积比1∶11.5混合后,该过氧化氢比率型生物传感器可以直接对样品进行快速测定,大幅度简化了前处理的步骤,缩短前处理的时间。该传感器灵敏度为0.0037 kg/mg、线性范围为8.5~85.0 mg/kg、检出限为0.8 mg/kg,基本可以满足快速检测要求。 展开更多
关键词 比率型 双通道 过氧化氢生物传感器 快速检测技术 细胞色素C
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细胞色素P450家族成员21A2活性与非酒精性脂肪性肝病的关系
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作者 阿丽亚·热哈提 王黎 +1 位作者 谢松 何方平 《成都医学院学报》 CAS 2023年第4期439-443,共5页
目的比较不同人群细胞色素P450家族成员21A2(CYP21A2)表达水平和氧合活性差异,并进一步探索CYP21A2活性缺陷与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)以及NAFLD合并多囊卵巢综合征(PCOS)的相关性。方法选取2021年3月至2022年3月就诊于新疆医科大学... 目的比较不同人群细胞色素P450家族成员21A2(CYP21A2)表达水平和氧合活性差异,并进一步探索CYP21A2活性缺陷与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)以及NAFLD合并多囊卵巢综合征(PCOS)的相关性。方法选取2021年3月至2022年3月就诊于新疆医科大学第一附属医院消化内科的NAFLD患者400例,根据其是否合并PCOS,将其分为NAFLD组(n=200)和NAFLD+PCOS组(n=200);另选取同期健康女性志愿者为对照组(n=100)。采集3组研究对象的外周血样,采用反转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹技术检测其全血CYP21A2 mRNA和蛋白表达水平;分离血清,测定脂代谢标志物甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)含量,氧合活性标志物过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化脂质(LPO)、丙二醛(MDA)、血红素加氧酶-1(HO-1)和髓过氧化物酶(MPO)含量;同时提取外周血DNA,用竞争性等位基因特异性PCR实验分析CYP21A2-rs772588285位点突变情况。结果相较于对照组,NAFLD组与NAFLD+PCOS组患者的CYP21A2 mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05),但NAFLD组与NAFLD+PCOS组间差异无统计学意义(P>0.05);相较于对照组,NAFLD组和NAFLD+PCOS组TG、TC、LDL、LPO、MDA和MPO含量均增多(P<0.05),HDL、CAT含量降低(P<0.05),但NAFLD组与NAFLD+PCOS组间差异无统计学意义(P>0.05);此外,对照组和NAFLD组的CYP21A2基因rs772588285位点G/A基因型分布频率差异有统计学意义(P<0.05)。结论CYP21A2表达水平及氧合活性可能与NAFLD发病存在相关性,与NAFLD是否合并PCOS可能关系不大。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 多囊卵巢综合征 细胞色素P450家族成员21A2 氧化应激 位点突变
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Cocktail探针药物法评价玄参对大鼠细胞色素P450酶的影响
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作者 魏艳丽 应晓倩 +4 位作者 谈文状 吴美玲 江悦娟 丁明星 杜洪建 《分析测试技术与仪器》 CAS 2023年第1期76-82,共7页
采用Cocktail探针药物法研究玄参对大鼠4种细胞色素P450(CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9和CYP1A2)活性的影响.24只健康雄性SD大鼠(Sprague-Dawley rat)随机分为三组:A组为多剂量组,连续7 d给予150 mg/kg玄参.B组为单剂量组,第7 d给予150 mg/kg... 采用Cocktail探针药物法研究玄参对大鼠4种细胞色素P450(CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9和CYP1A2)活性的影响.24只健康雄性SD大鼠(Sprague-Dawley rat)随机分为三组:A组为多剂量组,连续7 d给予150 mg/kg玄参.B组为单剂量组,第7 d给予150 mg/kg玄参.C组为对照组.第7 d,各组在给予玄参30 min后,再给予4种探针药物的混合溶液,其中咪达唑仑3 mg/kg、美托洛尔20 mg/kg、氯沙坦5 mg/kg、非那西汀5 mg/kg,分别用以评价CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9和CYP1A2的活性.根据设定的时间点收集大鼠血浆样品,处理后的样品采用超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)法测定样品中4种探针药物的浓度.结果可见,玄参对大鼠体内氯沙坦和非那西汀的药代动力学参数无显著影响.单剂量的玄参导致咪达唑仑代谢减慢,多剂量给予的玄参显著诱导美托洛尔代谢.玄参对CYP2C9和CYP1A2的酶活性无明显影响,可以抑制CYP3A4或诱导CYP2D6的酶活性. 展开更多
关键词 玄参 鸡尾酒疗法 细胞色素P450 中药-西药相互作用 超高效液相色谱-串联质谱
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细胞色素P450氧化还原酶缺乏症试管助孕1例
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作者 李卓 李洋洋 +2 位作者 苏迪 朱越英 钱聪 《中国实验诊断学》 2023年第10期1230-1232,共3页
细胞色素P450氧化还原酶缺乏症(cytochrome P450 oxidoreductase deficiency,PORD)是先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia,CAH)中罕见的类型,为细胞色素P450氧化还原酶(cytochrome P450 oxidoreductase,POR)基因纯... 细胞色素P450氧化还原酶缺乏症(cytochrome P450 oxidoreductase deficiency,PORD)是先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia,CAH)中罕见的类型,为细胞色素P450氧化还原酶(cytochrome P450 oxidoreductase,POR)基因纯合或杂合变异引起的常染色体隐性遗传病。 展开更多
关键词 先天性肾上腺皮质增生症 细胞色素P450氧化还原酶 常染色体隐性遗传病 缺乏症 基因纯合 P450 CAH
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细胞色素氧化酶P4502C19基因多态检测联合血清肝素辅助因子Ⅱ对下肢动脉硬化闭塞症介入术后再狭窄的预测价值
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作者 张毅 刘林波 +1 位作者 廖智杰 张恒 《血管与腔内血管外科杂志》 2023年第8期950-955,共6页
目的探讨细胞色素氧化酶P4502C19(CYP2C19)基因多态检测联合血清肝素辅助因子Ⅱ(HCⅡ)对下肢动脉硬化闭塞症(ASO)介入术后再狭窄的预测价值。方法收集2017年1月至2021年5月于绵阳市第三人民医院行介入治疗的146例ASO患者的临床资料,根... 目的探讨细胞色素氧化酶P4502C19(CYP2C19)基因多态检测联合血清肝素辅助因子Ⅱ(HCⅡ)对下肢动脉硬化闭塞症(ASO)介入术后再狭窄的预测价值。方法收集2017年1月至2021年5月于绵阳市第三人民医院行介入治疗的146例ASO患者的临床资料,根据随访期间再狭窄发生情况将其分为再狭窄组(n=27)和无再狭窄组(n=119)。收集患者性别、年龄、体重指数(BMI)、吸烟史、心脑血管病史、高同型半胱氨酸病史、病变血管支数、术前狭窄情况、支架植入情况、纤维蛋白原水平、总胆固醇水平、红细胞计数、CYP2C19基因多态性、HCⅡ活性,分析ASO介入术后再狭窄的影响因素。结果有吸烟史、支架植入、CYP2C19慢代谢型及HCⅡ活性均为ASO支架植入术后发生再狭窄的独立危险因素(P﹤0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线结果显示,HCⅡ活性预测ASO支架植入术后再狭窄的截断值为95.80%,曲线下面积(AUC)为0.809(95%CI:0.719~0.900),灵敏度为74.80%,特异度为88.24%,Kappa=0.566。CYP2C19基因多态检测对ASO支架植入术后再狭窄的预测灵敏度为66.67%,特异度为89.07%,Kappa=0.537。联合检测对ASO支架植入术后再狭窄的预测灵敏度为96.30%,特异度为86.55%,Kappa=0.682。结论ASO介入术后再狭窄与吸烟史、支架植入情况、CYP2C19基因多态性及HCⅡ活性有关,CYP2C19基因多态性及HCⅡ活性检测均可用于预测ASO介入术后再狭窄,但联合检测可提高其诊断效能。 展开更多
关键词 细胞色素氧化酶P4502C19 基因多态性 血清肝素辅助因子Ⅱ 下肢动脉硬化闭塞症
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蛋白质的圆二色光谱测量中圆二色值不确定度评估——以细胞色素C为例
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作者 程红 严定策 +1 位作者 武利庆 徐俊 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3105-3110,共6页
圆二色(CD)光谱是一种公认的用于测量蛋白质及其二级结构的生物物理技术,不但被广泛用于测量蛋白质的二级结构,而且可以检测二级及更高级结构的变化,同时用于科学研究和蛋白质产品如生物制药的质量控制。由于对CD光谱测量中的误差来源... 圆二色(CD)光谱是一种公认的用于测量蛋白质及其二级结构的生物物理技术,不但被广泛用于测量蛋白质的二级结构,而且可以检测二级及更高级结构的变化,同时用于科学研究和蛋白质产品如生物制药的质量控制。由于对CD光谱测量中的误差来源定量理解有限,对光谱进行客观比较仍具有挑战性。统计方法可用于比较,但不提供处理系统性以及随机性误差的机制。在任意两台仪器中进行的CD测量,即使在可比较的条件下,相同样品的光谱幅度(elipticity椭圆度,CD scale,也称圆二色值)或波长也可能存在细微差异。光源、最终的光度输出和各个仪器之间入射光偏振的微小差异是导致圆二色值或波长产生差异的可能原因。分析蛋白质CD光谱取决于原始CD数据的质量,CD解卷积分析强烈依赖于CD光谱中谱峰的圆二色值。因此,以一种α-螺旋为主导的蛋白质—细胞色素C为实验对象,在对CD光谱仪进行校准的前提下,对其浓度为0.05 mg·mL^(-1)的水溶液进行圆二色光谱测定,继而建立了0.05 mg·mL^(-1)细胞色素C水溶液的CD光谱测量模型,评估了其在波长222 nm谱峰圆二色值的不确定度。圆二色值的不确定度来源主要有测量重复性、校准溶液及蛋白溶液浓度的不确定度、比色皿光程长的不确定度等。经过仪器校准后,综合考虑这些不确定来源,得到0.05 mg·mL^(-1)细胞色素C水溶液在波长为222 nm处谱峰的圆二色值及不确定度为(-4.53±0.54)mdeg,k=2。通过不确定度评估,发现在不确定分量中较为显着的为1 mm比色皿光程长不确定度和溶液配置过程引入的不确定度分量,设法消除或降低这些因素的影响,可以改进测量方法分析测量过程,以实现CD光谱的客观比较,提高CD谱图的可比性和可靠性,为开展圆二色光谱测量的实验室间比对提供实验参考。 展开更多
关键词 蛋白质 圆二色 光谱 二级结构 圆二色值 不确定度评估 细胞色素C 可比性
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沙棘熊果酸通过调节线粒体-细胞色素c抑制酒精性肝病大鼠模型肝细胞凋亡的作用分析 被引量:2
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作者 包艳红 王强 +4 位作者 张文龙 戈娜 李楠 苏军 李可欣 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期1617-1626,共10页
目的 基于线粒体-细胞色素c途径探讨沙棘熊果酸对酒精性肝病大鼠肝细胞凋亡的抑制作用。方法 根据随机数字表将50只SPF级雄性Wistar大鼠进行完全随机分组,分为正常对照组、酒精模型组、沙棘熊果酸低、中和高剂量组,每组10只。正常对照... 目的 基于线粒体-细胞色素c途径探讨沙棘熊果酸对酒精性肝病大鼠肝细胞凋亡的抑制作用。方法 根据随机数字表将50只SPF级雄性Wistar大鼠进行完全随机分组,分为正常对照组、酒精模型组、沙棘熊果酸低、中和高剂量组,每组10只。正常对照组给予每日1次生理盐水灌胃8周;酒精模型组用阶梯式浓度酒精灌胃的方法持续灌胃8周;沙棘熊果酸组分别按50 mg/kg、100 mg/kg和150 mg/kg灌胃,1 h后再灌喂模型组同等剂量酒精。测定各组大鼠血清肝功能指标;HE染色观察肝组织病理情况;电镜下观察大鼠肝细胞超微结构;TUNEL法检测大鼠肝细胞凋亡情况;Western Blot法检测肝细胞线粒体和胞浆细胞色素c和活化caspase-3蛋白表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 与酒精模型组相比,沙棘熊果酸中、高剂量组大鼠血清ALT、AST和胆碱酯酶水平均下降(P值均<0.05);酒精模型组大鼠肝细胞索排列紊乱,肝细胞水肿、脂肪变性明显,而沙棘熊果酸中、高剂量组大鼠肝细胞索排列逐渐趋于正常、肝脂肪变性明显改善;肝细胞线粒体数目增加、形态明显改善;肝细胞凋亡率、胞浆细胞色素c和活化caspase-3蛋白的表达均低于酒精模型组(P值均<0.05)。结论沙棘熊果酸可改善酒精性肝病大鼠肝功能和肝组织形态,可能与抑制肝细胞线粒体细胞色素c的释放及caspase-3蛋白的活化,通过线粒体-细胞色素c途径抑制肝细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 肝疾病 酒精性 沙棘 细胞凋亡 线粒体 细胞色素C类
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大豆细胞色素P450家族GmCYP78A71固氮功能解析 被引量:1
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作者 杨占武 杜汇 +4 位作者 邢馨竹 李文龙 孔佑宾 李喜焕 张彩英 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期50-57,共8页
大豆可与根瘤菌互作进行共生固氮,有效缓解其对土壤氮素的依赖。细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)是一种血红素单加氧酶,参与植物信号分子、植物激素和黄酮类等多种次生代谢物的合成,为探究其在大豆结瘤固氮中的生物学功能,分析了... 大豆可与根瘤菌互作进行共生固氮,有效缓解其对土壤氮素的依赖。细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)是一种血红素单加氧酶,参与植物信号分子、植物激素和黄酮类等多种次生代谢物的合成,为探究其在大豆结瘤固氮中的生物学功能,分析了该家族GmCYP78A71基因的结构,并对其表达模式及生物学功能进行了深入解析。qRT-PCR和转启动子大豆毛根的根瘤GUS染色表明,GmCYP78A71在根瘤中特异表达,且随着根瘤的发育表达量逐渐增高,在成熟根瘤中达到峰值;与对照相比,超表达复合植株的根瘤个数、鲜重、固氮酶活性等显著提高,而RNAi毛状根的根瘤个数、鲜重、固氮酶活性等显著降低。上述结果表明GmCYP78A71对根瘤的生长发育和固氮发挥重要作用。 展开更多
关键词 大豆 共生固氮 根瘤 细胞色素单加氧酶 优异种质
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细胞色素氧化酶CYP1A2基因多态性及其对代谢的影响 被引量:7
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作者 金剑 肖忠革 陈慧瑾 《中国临床药学杂志》 CAS 2005年第1期60-62,共3页
关键词 细胞色素氧化酶 CYP1A2 基因多态性 细胞色素P450酶 代谢 药物生物转化 细胞色素B5 P450酶系 肝脏微粒体 阿拉伯数字 作用模式 单加氧酶 数字表示 酶系统 H^+ 氧原子 辅酶Ⅱ 氧分子 超家族
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稳定表达人细胞色素P450氧化还原酶(POR)的Flp-In^(TM) CHO细胞系的建立
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作者 刘欢 刘亭 +6 位作者 陆定艳 孙莉 何俊奇 李勇军 王永林 孙佳 席晓岚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期103-108,共6页
目的建立稳定表达人细胞色素P450氧化还原酶(POR)的Flp-In^(TM) CHO细胞系,为进一步建立稳定双表达人POR与人细胞色素P450(CYP)的细胞系奠定基础。方法构建POR重组慢病毒并感染Flp-In^(TM) CHO细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,挑... 目的建立稳定表达人细胞色素P450氧化还原酶(POR)的Flp-In^(TM) CHO细胞系,为进一步建立稳定双表达人POR与人细胞色素P450(CYP)的细胞系奠定基础。方法构建POR重组慢病毒并感染Flp-In^(TM) CHO细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,挑选转染细胞进行嘌呤霉素筛选和单克隆培养,以获得稳定转染细胞株。利用丝裂霉素C(MMC)细胞毒实验、实时荧光定量PCR和Western blot法检测细胞POR的表达,获得稳定表达POR的Flp-In^(TM) CHO-POR细胞株。构建稳定双表达POR和CYP2C19的Flp-In^(TM) CHO-POR细胞(Flp-In^(TM) CHO-POR-2C19)和单表达CYP2C19的Flp-In^(TM) CHO细胞(Flp-In^(TM) CHO-2C19),并用环磷酰胺(CPA)测定CYP2C19酶活性。结果与感染阴性对照病毒的Flp-In^(TM) CHO细胞相比,感染POR重组慢病毒的Flp-In^(TM) CHO细胞MMC代谢活性升高,POR mRNA和蛋白的表达水平增加,说明获得了可稳定表达POR的Flp-In^(TM) CHO-POR细胞。与Flp-In^(TM) CHO细胞相比,Flp-In^(TM) CHO-2C19的CPA代谢活性无显著差异,而Flp-In^(TM) CHO-POR-2C19的CPA代谢活性增加且明显高于Flp-In^(TM) CHO-2C19细胞。结论成功建立了稳定表达POR且可进一步用于CYP转基因细胞构建的Flp-In^(TM) CHO-POR细胞系。 展开更多
关键词 细胞色素P450氧化还原酶(POR) 慢病毒 Flp-In^(TM)CHO-POR细胞
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复方曲肽注射液对细胞色素P450酶活性的体内外影响
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作者 刘凡琪 王婧媛 +3 位作者 李楠 李自强 黄宇虹 王保和 《中国药房》 CAS 北大核心 2023年第16期1972-1978,共7页
目的考察复方曲肽注射液对细胞色素P450(CYP450)酶活性的体内外影响。方法将人肝微粒体与复方曲肽注射液(体积分数0.05%~10%)和CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4的特异性探针底物共孵育30 min,采用超高效液相色... 目的考察复方曲肽注射液对细胞色素P450(CYP450)酶活性的体内外影响。方法将人肝微粒体与复方曲肽注射液(体积分数0.05%~10%)和CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4的特异性探针底物共孵育30 min,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术检测相应代谢产物的生成量,并计算半数抑制浓度(IC_(50));将人原代肝细胞与复方曲肽注射液(体积分数0.05%~10%)或CYP1A2、CYP2B6、CYP3A4阳性诱导剂共孵育48 h后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应法测定上述酶mRNA的相对表达量(即诱导倍数)。将雄性SD大鼠随机分为对照组(生理盐水+CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4探针底物8、2、1、1、10、10、8 mg/kg)和实验组(复方曲肽注射液0.9 mL/kg+CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4探针底物8、2、1、1、10、10、8 mg/kg),每组6只,采用Cocktail探针药物法,以UPLC-MS/MS技术为手段,检测各探针底物的药动学参数。结果经0.05%~10%复方曲肽注射液处理后,人肝微粒体中CYP2B6、CYP2C8、CYP2C19的活性无明显变化,未能拟合出IC50;CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6、CYP3A4的IC50分别为419.90%、97.78%、176.00%、19.42%;经0.05%~10%复方曲肽注射液处理后,人原代肝细胞(批号MHK)中CYP3A4mRNA的平均诱导倍数为4.88(且有2个浓度点的平均诱导倍数>2);经复方曲肽注射液干预后,CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19底物的AUC0-t、AUC0-∞均显著升高,CYP2C8、CYP2C19底物的CL均显著降低,CYP2C9酶底物的t1/2显著延长(P<0.05)。结论复方曲肽注射液对人肝微粒中CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4活性无明显的体外抑制作用,对人原代肝细胞中CYP3A4mRNA的表达有体外诱导作用,对大鼠CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19活性有体内抑制作用。 展开更多
关键词 复方曲肽注射液 细胞色素P450 酶抑制 酶诱导 药物相互作用
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高胆红素血症新生大鼠脑组织凋亡诱导因子、细胞色素C表达的实验研究
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作者 白丹 阴怀清 +3 位作者 武师润 阴崇娟 梁钢 李国婧 《中西医结合心脑血管病杂志》 2023年第15期2785-2789,共5页
目的:探讨高胆红素血症新生大鼠脑组织凋亡诱导因子(AIF)、细胞色素C(Cty-C)表达的实验研究。方法:将120只清洁级7 d龄SD大鼠随机分为对照组、模型组、Z-VAD-FMK干预组,每组40只,3组分别于造模后6、24、48、72、96 h断头取脑组织,每时... 目的:探讨高胆红素血症新生大鼠脑组织凋亡诱导因子(AIF)、细胞色素C(Cty-C)表达的实验研究。方法:将120只清洁级7 d龄SD大鼠随机分为对照组、模型组、Z-VAD-FMK干预组,每组40只,3组分别于造模后6、24、48、72、96 h断头取脑组织,每时间点取8只。模型组制备采用胆红素腹腔注射法(100μg/g)。Z-VAD-FMK干预组在模型组基础上即刻腹腔注射Z-VAD-FMK 3μg/g(处死前每日1次)。分别应用原位缺口末端标记法(TUNEL)、免疫组化法测定脑组织海马(CA1)区不同时间点细胞凋亡和Cty-C和AIF表达情况。结果:模型组、Z-VAD-FMK干预组海马区脑组织6 h开始出现细胞凋亡和Cty-C、AIF表达,模型组、Z-VAD-FMK干预组6 h细胞凋亡指数分别为17.7±2.4、12.9±1.1,Cty-C阳性细胞平均灰度值分别为140.5±11.3、142.9±13.1,AIF阳性细胞平均灰度值分别为169.5±11.9、170.7±10.0;随时间延长,细胞凋亡及Cty-C、AIF表达逐渐增多,96 h达高峰,模型组、Z-VAD-FMK干预组96 h细胞凋亡指数分别为38.0±6.0、33.6±3.8,Cty-C阳性细胞平均灰度值分别为109.6±8.0、127.3±9.8;AIF阳性细胞平均灰度值分别为139.7±9.4、141.0±7.1;对照组各时间点海马区脑组织未见明显细胞凋亡和Cty-C、AIF表达。结论:高胆红素血症所致脑损伤机制与线粒体损伤Cty-C、AIF表达增多有关,且非Caspase依赖性细胞凋亡也在一定程度上参与了此进程。 展开更多
关键词 高胆红素血症 脑组织 细胞色素C 凋亡诱导因子 实验研究
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细胞色素c电子供体SERS活性基底
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作者 唐金萍 赵冰 韩晓霞 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2023年第S01期157-158,共2页
线粒体内细胞色素c存在可相互转化的还原和氧化态两种分子形式。基于之前的研究,发现镍纳米粒子可以作为电子供体特异性还原细胞色素c。镍纳米材料具有一定的表面增强拉曼散射增强能力,但其增强因子较小,限制了其应用。在该研究中,成功... 线粒体内细胞色素c存在可相互转化的还原和氧化态两种分子形式。基于之前的研究,发现镍纳米粒子可以作为电子供体特异性还原细胞色素c。镍纳米材料具有一定的表面增强拉曼散射增强能力,但其增强因子较小,限制了其应用。在该研究中,成功合成了Ag@Ni核壳纳米粒子,借助于Ag核的拉曼信号增强能力和Ni壳的电子供体特性,该SERS基底可用于氧化还原蛋白的电子传递研究。 展开更多
关键词 SERS Ag@Ni纳米粒子 电子传递 细胞色素C
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细胞色素P450基因家族参与植物硫代葡萄糖苷生物合成的研究进展
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作者 费丹丹 王军伟 +4 位作者 吴小媚 黄惠萍 毛舒香 吴秋云 黄科 《中国蔬菜》 北大核心 2023年第5期30-41,共12页
硫代葡萄糖苷是一种主要存在于十字花科植物中的重要次生代谢物,在植物病虫害防御、食品风味形成以及医学癌症治疗等方面均有重要作用。硫代葡萄糖苷的生物合成过程十分复杂,参与其合成调控的因素有很多,如遗传背景、调节基因以及植物... 硫代葡萄糖苷是一种主要存在于十字花科植物中的重要次生代谢物,在植物病虫害防御、食品风味形成以及医学癌症治疗等方面均有重要作用。硫代葡萄糖苷的生物合成过程十分复杂,参与其合成调控的因素有很多,如遗传背景、调节基因以及植物激素等。细胞色素P450酶(CYP450)是一类普遍存在于动植物、微生物以及病毒中的超基因家族编码的酶系,在硫代葡萄糖苷的生物合成中起关键作用。本文综述了CYP450的结构、分类和功能,阐述了CYP450参与硫代葡萄糖苷生物合成的作用,并介绍了CYP450响应外源刺激和环境条件的变化调控硫代葡萄糖苷合成的作用机理,以期为研究硫代葡萄糖苷合成机制提供参考。 展开更多
关键词 细胞色素P450 硫代葡萄糖苷 生物合成 外源刺激 环境条件
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细胞色素P450 3A4基因C239S突变体稳定表达Flp-In^(TM)CHO细胞系的建立
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作者 何俊奇 陆定艳 +4 位作者 陈帅帅 李勇军 王永林 郑江 刘亭 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第12期1454-1458,共5页
目的构建稳定表达细胞色素P450家族3亚家族A成员4(CYP3A4)的C239S突变体(CYP3A4-C239S)的Flp-In^(TM)CHO细胞系。方法使用Lipofectamine2000转染试剂将pcDNA5/FRT-CYP3A4-C239S突变型重组质粒和pcDNA5/FRT-空质粒转染至Flp-In TM CHO细... 目的构建稳定表达细胞色素P450家族3亚家族A成员4(CYP3A4)的C239S突变体(CYP3A4-C239S)的Flp-In^(TM)CHO细胞系。方法使用Lipofectamine2000转染试剂将pcDNA5/FRT-CYP3A4-C239S突变型重组质粒和pcDNA5/FRT-空质粒转染至Flp-In TM CHO细胞,潮霉素B(500 g/L)进行稳定筛选,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质免疫印迹(Western blot)检测细胞中CYP3A4-C239S的mRNA和蛋白表达,采用黄曲霉素B1(AFB1)细胞毒性实验检测细胞活性。结果与Flp-In^(TM)CHO-空质粒组相比,Flp-In^(TM)CHO-3A4-C239S组的CYP3A4-C239S mRNA和蛋白表达水平均显著增加(P<0.001),AFB1细胞毒性实验显示,CYP3A4-C239S细胞组对AFB1的毒性敏感度显著增加(P<0.001)。结论成功构建了稳定表达CYP3A4-C239S的Flp-In^(TM)CHO细胞系,且为后续研究CYP3A4突变对药物代谢的影响支撑基础。 展开更多
关键词 细胞色素P4503A4 黄曲霉毒素B1 突变体 稳定表达 Flp-In^(TM)CHO细胞
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