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细胞色素P450氧化还原酶缺乏症试管助孕1例
1
作者 李卓 李洋洋 +2 位作者 苏迪 朱越英 钱聪 《中国实验诊断学》 2023年第10期1230-1232,共3页
细胞色素P450氧化还原酶缺乏症(cytochrome P450 oxidoreductase deficiency,PORD)是先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia,CAH)中罕见的类型,为细胞色素P450氧化还原酶(cytochrome P450 oxidoreductase,POR)基因纯... 细胞色素P450氧化还原酶缺乏症(cytochrome P450 oxidoreductase deficiency,PORD)是先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia,CAH)中罕见的类型,为细胞色素P450氧化还原酶(cytochrome P450 oxidoreductase,POR)基因纯合或杂合变异引起的常染色体隐性遗传病。 展开更多
关键词 先天性肾上腺皮质增生症 细胞色素p450氧化还原酶 常染色体隐性遗传病 缺乏症 基因纯合 p450 CAH
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稳定表达人细胞色素P450氧化还原酶(POR)的Flp-In^(TM) CHO细胞系的建立
2
作者 刘欢 刘亭 +6 位作者 陆定艳 孙莉 何俊奇 李勇军 王永林 孙佳 席晓岚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期103-108,共6页
目的建立稳定表达人细胞色素P450氧化还原酶(POR)的Flp-In^(TM) CHO细胞系,为进一步建立稳定双表达人POR与人细胞色素P450(CYP)的细胞系奠定基础。方法构建POR重组慢病毒并感染Flp-In^(TM) CHO细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,挑... 目的建立稳定表达人细胞色素P450氧化还原酶(POR)的Flp-In^(TM) CHO细胞系,为进一步建立稳定双表达人POR与人细胞色素P450(CYP)的细胞系奠定基础。方法构建POR重组慢病毒并感染Flp-In^(TM) CHO细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,挑选转染细胞进行嘌呤霉素筛选和单克隆培养,以获得稳定转染细胞株。利用丝裂霉素C(MMC)细胞毒实验、实时荧光定量PCR和Western blot法检测细胞POR的表达,获得稳定表达POR的Flp-In^(TM) CHO-POR细胞株。构建稳定双表达POR和CYP2C19的Flp-In^(TM) CHO-POR细胞(Flp-In^(TM) CHO-POR-2C19)和单表达CYP2C19的Flp-In^(TM) CHO细胞(Flp-In^(TM) CHO-2C19),并用环磷酰胺(CPA)测定CYP2C19酶活性。结果与感染阴性对照病毒的Flp-In^(TM) CHO细胞相比,感染POR重组慢病毒的Flp-In^(TM) CHO细胞MMC代谢活性升高,POR mRNA和蛋白的表达水平增加,说明获得了可稳定表达POR的Flp-In^(TM) CHO-POR细胞。与Flp-In^(TM) CHO细胞相比,Flp-In^(TM) CHO-2C19的CPA代谢活性无显著差异,而Flp-In^(TM) CHO-POR-2C19的CPA代谢活性增加且明显高于Flp-In^(TM) CHO-2C19细胞。结论成功建立了稳定表达POR且可进一步用于CYP转基因细胞构建的Flp-In^(TM) CHO-POR细胞系。 展开更多
关键词 人细胞色素p450氧化还原酶(pOR) 慢病毒 Flp-In^(TM)CHO-pOR细胞系
原文传递
因原发性闭经伴骨骼异常发现细胞色素P450氧化还原酶基因突变1例
3
作者 丁蕾蕾 田秦杰 邓姗 《生殖医学杂志》 CAS 2023年第6期920-924,共5页
细胞色素P450氧化还原酶缺乏症(PORD)是一种罕见的先天性肾上腺皮质增生症(CAH)亚型,可导致两性外生殖器畸形和类固醇合成障碍,且常伴有骨骼畸形。本文通过一例因原发性闭经伴有特殊骨骼畸形的少女就诊而发现细胞色素P450氧化还原酶(POR... 细胞色素P450氧化还原酶缺乏症(PORD)是一种罕见的先天性肾上腺皮质增生症(CAH)亚型,可导致两性外生殖器畸形和类固醇合成障碍,且常伴有骨骼畸形。本文通过一例因原发性闭经伴有特殊骨骼畸形的少女就诊而发现细胞色素P450氧化还原酶(POR)基因突变的病例,深入学习PORD和Antley-Bixler综合征(ABS)的机制和临床表现,并探讨其诊治策略和长期管理。 展开更多
关键词 细胞色素p450氧化还原酶缺乏症 先天性肾上腺皮质增生症 Antley-Bixler综合征
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细胞色素P450氧化还原酶的研究进展 被引量：26
4
作者 程婕 杨凌 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期129-133,共5页
细胞色素P450氧化还原酶(Cytochrom e P450 Reduc-tase,CPR)是细胞色素P450药物代谢酶系中为细胞色素P450提供电子的膜蛋白,本文从电子传递、底物作用及其基因调控三方面的特性对其进行了论述,并探讨了CPR领域一些待研究的问题。
关键词 细胞色素p450氧化还原酶 电子传递 底物作用 基因调控 细胞色素p450
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细胞色素p450氧化还原酶缺乏伴卵巢黄素化囊肿1例 被引量：5
5
作者 王春庆 杨佳欣 田秦杰 《生殖医学杂志》 CAS 2014年第4期325-327,共3页
先天性肾上腺皮质增生症(CAH)是一种临床非常罕见的常染色体隐性遗传病。本文报道我院收治的细胞色素p450氧化还原酶缺乏引起的卵巢黄素化囊肿1例,对病例的临床资料及处理方案进行报告并讨论。
关键词 先天性肾上腺皮质增生 细胞色素p450氧化还原酶缺乏 黄素化囊肿
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表现为高孕酮血症的细胞色素P450氧化还原酶缺陷症治疗后自然妊娠1例 被引量：1
6
作者 郑光耀 卢琳 +3 位作者 郁琦 禹松林 尹逸丛 邱玲 《生殖医学杂志》 CAS 2021年第11期1517-1519,共3页
细胞色素P450氧化还原酶缺陷症(PORD)是先天性肾上腺皮质功能不全中罕见的一种类型,属于常染色隐性遗传病,常引起女性青春发育异常、月经不规律及不孕症。本例患者发育正常,月经不规律,因不孕症进行检查提示黄体生成素和卵泡刺激素水平... 细胞色素P450氧化还原酶缺陷症(PORD)是先天性肾上腺皮质功能不全中罕见的一种类型,属于常染色隐性遗传病,常引起女性青春发育异常、月经不规律及不孕症。本例患者发育正常,月经不规律,因不孕症进行检查提示黄体生成素和卵泡刺激素水平升高伴高孕酮血症,睾酮水平正常,超声检查发现左侧附件区囊性包块,先后诊断为多囊卵巢综合征和21羟化酶缺陷症。后应用串联质谱法检测类固醇激素,并结合中剂量地塞米松抑制实验和基因检测,提示性激素前体物质如孕酮、孕烯醇酮、17羟孕烯醇酮和17羟孕酮均升高,但可被地塞米松完全抑制,抑制率可达到80%以上,基因检测提示POR基因杂合突变(c.C604T),最终确诊为PORD,给予泼尼松治疗后孕酮降至正常水平,并成功自然妊娠。 展开更多
关键词 高孕酮血症 细胞色素p450氧化还原酶缺陷症 先天性肾上腺皮质增生症 液相色谱-串联质谱法
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细胞色素P450氧化还原酶缺陷症IVF-ET助孕成功一例 被引量：2
7
作者 李晓芳 王婷 +1 位作者 师娟子 田莉 《生殖医学杂志》 CAS 2020年第11期1517-1518,共2页
细胞色素P450氧化还原酶缺陷症(PORD)为常染色体隐性遗传病。PORD临床表现形式多样,从无明显临床表现或仅月经紊乱到严重的两性畸形和骨骼畸形,甚至危及胎儿生命。本病例患者突变位点为R223X和Y607C,查体未见特殊,基础孕酮升高,且双侧... 细胞色素P450氧化还原酶缺陷症(PORD)为常染色体隐性遗传病。PORD临床表现形式多样,从无明显临床表现或仅月经紊乱到严重的两性畸形和骨骼畸形,甚至危及胎儿生命。本病例患者突变位点为R223X和Y607C,查体未见特殊,基础孕酮升高,且双侧卵巢反复出现黄素囊肿。向患者夫妇详细解释常染色体隐性遗传病遗传特点,患者夫妇拒绝对男方做进一步的基因检测。经过内科给予口服地塞米松纠正孕酮水平,最终该夫妇通过IVF助孕成功妊娠并获得活产。 展开更多
关键词 细胞色素p450氧化还原酶缺陷症 突变位点 卵巢囊肿 体外受精
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人细胞色素P450氧化还原酶的克隆表达和抗体的制备
8
作者 程婕 龚毅 +1 位作者 陈悦 杨凌 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2006年第1期70-76,共7页
细胞色素P450还原酶(CPR)是人细胞色素P450酶系的电子供给者,对后者活性的发挥起到重要作用.本研究将从人胚胎cDNA文库中得到的人CPR的编码基因,连接入pT7450表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达并纯化.每升发酵液可得到纯化蛋白4... 细胞色素P450还原酶(CPR)是人细胞色素P450酶系的电子供给者,对后者活性的发挥起到重要作用.本研究将从人胚胎cDNA文库中得到的人CPR的编码基因,连接入pT7450表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达并纯化.每升发酵液可得到纯化蛋白49 mg,占总蛋白含量的10%,以细胞色素C为底物检测酶活性,比活为65 u/mg.利用纯化的CPR作为抗原,常规免疫纯系大耳家兔,获得高效价、高特异性的抗血清,抗体滴度为1∶200 000(ELISA法),纯化后抗体应用于不同组织中CPR含量的评价,证明重组CPR及其抗体可用于细胞色素P450的体外药物代谢及细胞色素P450与CPR作用机理的研究. 展开更多
关键词 人细胞色素p450还原酶 克隆 表达 抗体 药物代谢
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细胞色素P450氧化还原酶缺陷症研究进展 被引量：5
9
作者 白华磊(综述) 朱岷(审校) 《儿科药学杂志》 CAS 2020年第3期55-59,共5页
细胞色素P450氧化还原酶缺陷症(cytochrome P450 oxidoreductase deficiency,PORD)是一种较罕见的常染色体隐性遗传病,典型表现包括类固醇合成异常、两性畸形及Antley-Bixler综合征(Antley-Bixler syndrome,ABS)样骨骼畸形等[1-4]。细... 细胞色素P450氧化还原酶缺陷症(cytochrome P450 oxidoreductase deficiency,PORD)是一种较罕见的常染色体隐性遗传病,典型表现包括类固醇合成异常、两性畸形及Antley-Bixler综合征(Antley-Bixler syndrome,ABS)样骨骼畸形等[1-4]。细胞色素P450氧化还原酶(cytochrome P450 oxidoreductase,POR)可作为细胞色素P450酶(cytochrome P450,CYP)的电子转运体,参与类固醇激素的合成等[2-3]。PORD可导致性激素和糖皮质激素合成障碍,因此它属于先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia,CAH)的一种亚型[1-3]。Flück C E等[1]于2004年首次描述了PORD病例,至今已报道了140余例。本文汇总了常见POR基因突变类型、体外功能研究及临床病例,并从分子水平到疾病诊疗等方面介绍PORD的研究进展。 展开更多
关键词 先天性肾上腺皮质增生症 基因突变类型 疾病诊疗 细胞色素p450酶 缺陷症 类固醇激素 骨骼畸形 p450
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细胞色素P450氧化还原酶缺陷症患者经体外受精-胚胎移植成功妊娠分娩1例报道及文献复习
10
作者 刘娜娜 甄秀梅 +1 位作者 李蓉 王海宁 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期949-952,共4页
目的探讨细胞色素P450氧化还原酶缺陷症(cytochrome P450 oxidoreductase deficiency,PORD)合并不孕症的早期发现、鉴别诊断及有效治疗。方法回顾性分析1例PORD患者的临床诊治资料。结果该患者疾病特点包括原发性闭经、不孕、生殖系统... 目的探讨细胞色素P450氧化还原酶缺陷症(cytochrome P450 oxidoreductase deficiency,PORD)合并不孕症的早期发现、鉴别诊断及有效治疗。方法回顾性分析1例PORD患者的临床诊治资料。结果该患者疾病特点包括原发性闭经、不孕、生殖系统轻度畸形、双侧卵巢多发黄素化囊肿、高孕酮血症,经内分泌科检验指标和基因筛查确诊PORD,给予口服地塞米松,进行体外受精-胚胎移植后成功妊娠,顺利分娩一健康儿。结论PORD属于罕见的常染色体隐性遗传病,存在类固醇激素代谢障碍,疾病特征多样,合并不孕时易被误诊,需要及时鉴别诊断,给予恰当的地塞米松治疗后,可以经过辅助生殖技术获得成功妊娠。 展开更多
关键词 受精 体外 胚胎移植 先天性肾上腺增生 细胞色素p450氧化还原酶
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新生儿细胞色素P450氧化还原酶缺乏症1例
11
作者 郑璇儿 张永 +2 位作者 梁润强 林颖仪 王俊平 《中华新生儿科杂志（中英文）》 CAS CSCD 2023年第3期182-183,共2页
细胞色素P450氧化还原酶缺乏症是一种罕见病,临床表现多样,主要为骨骼畸形、性发育障碍和肾上腺功能不全。部分病例症状严重,可在围生期死亡。本文报道1例因POR基因变异导致的细胞色素P450氧化还原酶缺乏症早产儿的诊疗过程,加强临床医... 细胞色素P450氧化还原酶缺乏症是一种罕见病,临床表现多样,主要为骨骼畸形、性发育障碍和肾上腺功能不全。部分病例症状严重,可在围生期死亡。本文报道1例因POR基因变异导致的细胞色素P450氧化还原酶缺乏症早产儿的诊疗过程,加强临床医生对该病的认识。 展开更多
关键词 细胞色素p450氧化还原酶缺乏症 pOR基因 新生儿
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细胞色素P450氧化还原酶在发育中的作用 被引量：10
12
作者 戴永国 赵艳娟 +1 位作者 汪晖 郭喻 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2019年第3期506-511,共6页
细胞色素P450氧化还原酶(POR)是一种电子供体,参与许多发育相关的内源性物质的代谢,从而影响机体的生长发育。本文就POR在发育相关内源性物质代谢中的作用以及POR缺陷导致的发育不良等方面进行综述。
关键词 细胞色素p450氧化还原酶 生长发育 细胞色素p450 细胞色素p450氧化还原酶缺陷综合征
原文传递
细胞色素P450氧化还原酶缺乏症的POR基因突变研究
13
作者 王连 郭媛媛 +2 位作者 周秉博 蔺朋武 郝胜菊 《中国优生与遗传杂志》 2022年第5期837-839,共3页
目的分析1例细胞色素P450氧化还原酶缺乏症患者的临床和基因突变特点,为明确患者的诊断提供依据。方法收集甘肃省妇幼保健院1例因肾上腺皮质增生而就诊的患者的临床资料,并进行高通量测序,分析细胞色素氧化还原酶缺乏症POR基因突变与临... 目的分析1例细胞色素P450氧化还原酶缺乏症患者的临床和基因突变特点,为明确患者的诊断提供依据。方法收集甘肃省妇幼保健院1例因肾上腺皮质增生而就诊的患者的临床资料,并进行高通量测序,分析细胞色素氧化还原酶缺乏症POR基因突变与临床表型的相关性。结果发现患者POR基因存在c.1820A>G(p.Y607C)和c.830+5G>A(splicing)复合杂合突变,其中c.830+5G>A(splicing)为国内外首次报道。结论除了经典的PORD外,POR基因还有一些致病性较轻的突变。 展开更多
关键词 细胞色素p450氧化还原酶缺乏症 pOR基因 突变
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人源细胞色素P450 2E1与细胞色素P450氧化还原酶的共表达 被引量：2
14
作者 徐彬彬 张海风 +3 位作者 刘秀 赵勤 王俊平 单杰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第4期498-502,共5页
目的利用大肠埃希菌(E.coli)表达系统异源表达细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1),并与细胞色素P450氧化还原酶(cytochrome P450 oxidoreductase,POR)实现共表达,使其具有代谢活性,为药物代谢的研究提供单一性的酶源。方法... 目的利用大肠埃希菌(E.coli)表达系统异源表达细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1),并与细胞色素P450氧化还原酶(cytochrome P450 oxidoreductase,POR)实现共表达,使其具有代谢活性,为药物代谢的研究提供单一性的酶源。方法以人肝组织RNA为模板,RT-PCR扩增CYP2E1基因,插入pCW空载体,构建重组表达质粒pCW-2E1,转化E.coli DH5α,IPTG诱导表达,表达产物经Western blot鉴定;利用双启动子原理构建CYP2E1与POR共表达的重组质粒pCW-2E1-POR,采用对氨基苯酚法检测CYP2E1重组酶的代谢活性,并对不同培养时间(18、28、38 h)的代谢活性进行比较。结果质粒pCW-2E1经PCR鉴定,证明构建正确;表达的重组人CYP2E1蛋白相对分子质量约56 000,主要以可溶性形式表达。质粒pCW-2E1-POR经PCR及酶切鉴定,证明构建正确;导入质粒pCW-2E1-POR的重组菌提取的蛋白样品具有明显的代谢活性,培养18、28、38 h后,代谢活性均值分别为(0.195±0.004)、(0.189±0.003)和(0.192±0.004)nmol/(min·mg),差异无统计学意义(P>0.05),但与导入质粒pCW-2E1的重组菌提取的蛋白样品的代谢活性相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了具有代谢活性的CYP2E1重组酶,且3个培养时间段之间的代谢活性无明显差异。 展开更多
关键词 细胞色素p450 2E1 细胞色素p450氧化还原酶 原核细胞 基因表达 代谢活性
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长链非编码RNA LINC00987通过细胞色素P450途径促进AML细胞凋亡的机制研究
15
作者 杨彭月 刘暄 +3 位作者 王艳 徐玲 李扬秋 余锡宝 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 2024年第2期265-273,共9页
目的:探讨长链非编码RNA LINC00987在抗肿瘤药物诱导的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞凋亡中的作用及分子机制。方法:通过RT-qPCR检测AML中的LINC00987表达水平。构建稳定敲减LINC00987基因的Molm13细胞(shLINC00987)... 目的:探讨长链非编码RNA LINC00987在抗肿瘤药物诱导的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞凋亡中的作用及分子机制。方法:通过RT-qPCR检测AML中的LINC00987表达水平。构建稳定敲减LINC00987基因的Molm13细胞(shLINC00987),通过Annexin V/PI检测LINC00987低表达对阿糖胞苷诱导AML细胞凋亡的影响。对LINC00987共表达基因进行信号通路富集,分析LINC00987的表达对细胞色素家族基因的影响。结果:与健康对照组相比,lncRNA LINC00987在AML细胞系和AML病人标本中均显著降低,而在抗AML治疗后缓解组中高表达;此外,低表达LINC00987与AML患者预后不良有关。抗肿瘤药物阿糖胞苷、阿霉素、三氧化二砷和维奈托克可显著诱导AML细胞系Molm13和MV411的LINC00987表达。下调LINC00987的表达可抑制阿糖胞苷诱导的Molm13细胞凋亡。进一步研究发现,LINC00987共表达基因可富集于细胞色素P450(cytochrome,P450,CYP450)介导的氧化应激通路/网络,且LINC00987的表达与CYP450家族基因CYP11B1、CYP2U1和CYP2C9的表达水平呈正相关。下调LINC00987的表达则可抑制阿糖胞苷诱导的CYP11B1、CYP2U1和CYP2C9的mRNA表达。结论:LINC00987可以作为AML的预后标志物,其可能通过CYP450介导的氧化应激途径促进阿糖胞苷诱导的AML细胞凋亡。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 LINC00987 细胞色素p450 阿糖胞苷 细胞凋亡
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两例细胞色素P450氧化还原酶缺陷症的临床特点和分子诊断 被引量：7
16
作者 王文萃 叶蕾 +6 位作者 杨祖威 贾慧英 张婕 赵萸 王卫庆 宁光 孙首悦 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期926-930,共5页
目的 分析2例细胞色素氧化还原酶缺陷症患者的临床和基因突变特点.方法 收集瑞金医院2例细胞色素氧化还原酶缺陷症患者的临床资料,进行POR基因测序,结合国内外病例报道进行回顾分析.结果 患者1:46,XX,社会性别女,16岁,出生时肛门闭锁,... 目的 分析2例细胞色素氧化还原酶缺陷症患者的临床和基因突变特点.方法 收集瑞金医院2例细胞色素氧化还原酶缺陷症患者的临床资料,进行POR基因测序,结合国内外病例报道进行回顾分析.结果 患者1:46,XX,社会性别女,16岁,出生时肛门闭锁,阴蒂肥大,至青春期后月经不规则;患者2:46,XX,社会性别女,32岁,月经不规则,不孕不育,2例患者均无骨骼畸形表现.基因检测示患者1携带POR基因纯合错义突变(R457H);患者2携带POR基因杂合错义突变(R223X/Y607C),其中突变位点R223X和Y607C均为国内首次报道.结论 细胞色素氧化还原酶缺陷症为POR基因突变引起,临床表现多样,主要表现为类固醇激素合成障碍伴或不伴类Antley-Bixler综合征,其明确诊断应依赖于类固醇激素检查和POR基因检测. 展开更多
关键词 细胞色素氧化还原酶缺陷症 先天性肾上腺皮质增生症 pOR基因
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一个细胞色素P450氧化还原酶缺陷症家系的临床特征及遗传学病因研究 被引量：4
17
作者 李洪英 董睿 +4 位作者 张开慧 律玉强 高敏 盖中涛 刘毅 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2020年第9期1005-1008,共4页
目的对1例特殊面容、性发育障碍、怀疑为细胞色素P450氧化还原酶缺陷症的患儿及其同症姐姐进行临床和遗传学分析,为患者的临床诊断提供依据。方法提取先证者及其父母、姐姐基因组DNA,应用二代外显子目标区域捕获测序技术对先证者进行基... 目的对1例特殊面容、性发育障碍、怀疑为细胞色素P450氧化还原酶缺陷症的患儿及其同症姐姐进行临床和遗传学分析,为患者的临床诊断提供依据。方法提取先证者及其父母、姐姐基因组DNA,应用二代外显子目标区域捕获测序技术对先证者进行基因变异分析,并对疑似致病性变异进行Sanger测序验证和家系分析。结果基因测序结果显示先证者和姐姐的POR基因存在c.1370G>A和c.517-19_517-10delGGCCCCTGTGinsC复合杂合变异,其中c.517-19_517-10delGGCCCCTGTGinsC变异未见报道。患儿母亲携带POR基因c.517-19_517-10delGGCCCCTGTGinsC杂合变异,父亲携带POR基因c.1370G>A杂合变异,因此两个变异分别遗传自父母。结论POR基因变异分析结果明确了姐弟二人为细胞色素P450氧化还原酶缺陷症。新发现的c.517-19_517-10delGGCCCCTGTGinsC变异扩大了POR基因的变异谱。 展开更多
关键词 细胞色素p450氧化还原酶缺陷症 pOR基因 性发育障碍 骨骼畸形
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烟草甲细胞色素P450还原酶基因的分子特征与表达模式分析
18
作者 吴怡蓓 夏鹏亮 +2 位作者 张廷伟 严毅 杨文佳 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2023年第1期124-132,共9页
烟草甲Lasioderma serricorne是一种重要的仓储害虫,长期化学防治导致烟草甲已对多种传统熏蒸剂产生抗性,但其对新型熏蒸剂甲酸乙酯仍处于敏感水平。因此明确其体内细胞色素P450还原酶(cytochrome P450 reductase, CPR)对甲酸乙酯的代... 烟草甲Lasioderma serricorne是一种重要的仓储害虫,长期化学防治导致烟草甲已对多种传统熏蒸剂产生抗性,但其对新型熏蒸剂甲酸乙酯仍处于敏感水平。因此明确其体内细胞色素P450还原酶(cytochrome P450 reductase, CPR)对甲酸乙酯的代谢解毒功能,对开展该药剂的抗性监测及延缓抗性的发生发展具有重要意义。本研究旨在克隆烟草甲LsCPR基因,分析其分子特征和表达特性,为进一步明确其在烟草甲对甲酸乙酯解毒代谢过程中的作用奠定基础。利用RT-PCR技术克隆烟草甲LsCPR基因的开放阅读框(open reading frame, ORF);利用生物信息学软件分析LsCPR编码蛋白的结构、特征和系统进化关系。采用实时定量PCR技术检测LsCPR在烟草甲不同发育阶段(低龄幼虫、高龄幼虫、蛹、低龄成虫、高龄成虫)、幼虫不同组织(表皮、肠道、脂肪体和马氏管)以及甲酸乙酯熏蒸胁迫后的表达模式。烟草甲LsCPR基因的ORF为2 046 bp(GenBank登录号:MZ423209),编码681个氨基酸,具有典型的昆虫CPR基因FMN区域、NADPH区域和FAD等保守结构域。系统发育分析表明,烟草甲LsCPR与鞘翅目昆虫聚为一支,且与赤拟谷盗Tribolium castaneum CPR亲缘关系最近。LsCPR在烟草甲不同发育阶段均有表达,在高龄幼虫期的表达水平较高;在幼虫体内的表达部位主要在肠道,其次为脂肪体和马氏管,而在表皮的表达水平最低。LC_(10)、LC_(30)和LC_(50) 3种浓度的甲酸乙酯处理24 h后,烟草甲LsCPR表达量随着胁迫浓度升高而上调且显著高于对照;甲酸乙酯LC_(50)处理烟草甲不同时间(3、6、12、24和48 h)后,LsCPR基因上调表达,24 h时达到表达高峰。推测LsCPR是参与烟草甲代谢甲酸乙酯的候选基因。 展开更多
关键词 烟草甲 细胞色素p450还原酶 基因克隆 表达模式 甲酸乙酯
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真菌一氧化氮还原酶细胞色素P-450nor 2 cDNA序列的测定 被引量：2
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作者 刘德立 Hirofumi SHOUN 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期108-110,共3页
真菌一氧化氮还原酶细胞色素Ｐ４５０ｎｏｒ２ｃＤＮＡ序列的测定刘德立（华中师范大学生命科学学院武汉４３００７０）ＨｉｒｏｆｕｍｉＳＨＯＵＮ（筑波大学应用生物化学系日本）在真菌的反硝化作用中，一种细胞色素Ｐ４５０起着... 真菌一氧化氮还原酶细胞色素Ｐ４５０ｎｏｒ２ｃＤＮＡ序列的测定刘德立（华中师范大学生命科学学院武汉４３００７０）ＨｉｒｏｆｕｍｉＳＨＯＵＮ（筑波大学应用生物化学系日本）在真菌的反硝化作用中，一种细胞色素Ｐ４５０起着一氧化氮还原酶的作用，被称为细胞色... 展开更多
关键词 真菌 一氧化氮还原酶 细胞色素 p-450nor2 CDNA
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细胞色素氧化酶P4502C19基因多态检测联合血清肝素辅助因子Ⅱ对下肢动脉硬化闭塞症介入术后再狭窄的预测价值
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作者 张毅 刘林波 +1 位作者 廖智杰 张恒 《血管与腔内血管外科杂志》 2023年第8期950-955,共6页
目的探讨细胞色素氧化酶P4502C19(CYP2C19)基因多态检测联合血清肝素辅助因子Ⅱ(HCⅡ)对下肢动脉硬化闭塞症(ASO)介入术后再狭窄的预测价值。方法收集2017年1月至2021年5月于绵阳市第三人民医院行介入治疗的146例ASO患者的临床资料,根... 目的探讨细胞色素氧化酶P4502C19(CYP2C19)基因多态检测联合血清肝素辅助因子Ⅱ(HCⅡ)对下肢动脉硬化闭塞症(ASO)介入术后再狭窄的预测价值。方法收集2017年1月至2021年5月于绵阳市第三人民医院行介入治疗的146例ASO患者的临床资料,根据随访期间再狭窄发生情况将其分为再狭窄组(n=27)和无再狭窄组(n=119)。收集患者性别、年龄、体重指数(BMI)、吸烟史、心脑血管病史、高同型半胱氨酸病史、病变血管支数、术前狭窄情况、支架植入情况、纤维蛋白原水平、总胆固醇水平、红细胞计数、CYP2C19基因多态性、HCⅡ活性,分析ASO介入术后再狭窄的影响因素。结果有吸烟史、支架植入、CYP2C19慢代谢型及HCⅡ活性均为ASO支架植入术后发生再狭窄的独立危险因素(P﹤0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线结果显示,HCⅡ活性预测ASO支架植入术后再狭窄的截断值为95.80%,曲线下面积(AUC)为0.809(95%CI:0.719~0.900),灵敏度为74.80%,特异度为88.24%,Kappa=0.566。CYP2C19基因多态检测对ASO支架植入术后再狭窄的预测灵敏度为66.67%,特异度为89.07%,Kappa=0.537。联合检测对ASO支架植入术后再狭窄的预测灵敏度为96.30%,特异度为86.55%,Kappa=0.682。结论ASO介入术后再狭窄与吸烟史、支架植入情况、CYP2C19基因多态性及HCⅡ活性有关,CYP2C19基因多态性及HCⅡ活性检测均可用于预测ASO介入术后再狭窄,但联合检测可提高其诊断效能。 展开更多
关键词 细胞色素氧化酶p4502C19 基因多态性 血清肝素辅助因子Ⅱ 下肢动脉硬化闭塞症
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