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活细胞计数试剂盒在检测5-氮杂-2’-脱氧胞苷对慢性粒细胞白血病细胞的增殖抑制作用中的应用 被引量:1
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作者 刘玥 帅春 +3 位作者 李杰生 尹虹 宋艳斌 马文丽 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期582-584,共3页
目的探讨活细胞计数试剂盒(CCK-8)在检测5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-dc)对慢性粒细胞白血病细胞的增殖抑制作用中的应用。方法采用CCK-8检测不同浓度5-Aza-2’-dc对K562细胞的增殖抑制作用,并检测其半数抑制浓度对K562细胞的细胞周... 目的探讨活细胞计数试剂盒(CCK-8)在检测5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-dc)对慢性粒细胞白血病细胞的增殖抑制作用中的应用。方法采用CCK-8检测不同浓度5-Aza-2’-dc对K562细胞的增殖抑制作用,并检测其半数抑制浓度对K562细胞的细胞周期和凋亡的影响。结果 5-Aza-2’-dc的半数抑制浓度为15.55nmol/L,采用该浓度处理K562细胞后,G2期发生阻滞,增殖抑制,并出现凋亡峰。结论不同浓度的5-Aza-2’-dc对K562细胞增殖的抑制作用不同,且呈浓度依赖关系。CCK-8检测法可运用于甲基化转移酶抑制剂对人慢性粒细胞白血病细胞增殖的影响。 展开更多
关键词 细胞计数试剂盒 5-氮杂-2’-脱氧胞苷 K562 增殖
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利用Jurkat细胞增殖法建立胸腺肽活性的检测方法
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作者 雷虹 田野 +4 位作者 王孝功 吴健中 王常鹤 陈妍珂 苟兴春 《广西医科大学学报》 CAS 2023年第8期1421-1426,共6页
目的:利用Jurkat细胞增殖法建立胸腺肽活性的检测方法,并进行优化、验证。方法:培养Jurkat细胞,加入不同浓度的胸腺肽制剂分别刺激24 h或48 h,然后通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测Jurkat细胞的增殖水平。同时,并对利用Jurkat细胞增... 目的:利用Jurkat细胞增殖法建立胸腺肽活性的检测方法,并进行优化、验证。方法:培养Jurkat细胞,加入不同浓度的胸腺肽制剂分别刺激24 h或48 h,然后通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测Jurkat细胞的增殖水平。同时,并对利用Jurkat细胞增殖法检测胸腺肽活性的方法的专属性、重复性、灵敏度、精密度及适用性进行验证。结果:最佳检测条件:胸腺肽使用浓度范围为20~200μg/mL;刺激时间为24 h;CCK-8染液孵育时间为3 h。胸腺肽活性在20~200μg/mL范围内,增殖相对提高率具有一定的浓度依赖性;重复性验证RSD均小于15%;Jurkat细胞增殖法检测破坏后的胸腺肽活性显著降低,且与E-玫瑰花环法检测的胸腺肽活性结果呈正相关关系(r=0.75,P<0.05)。结论:基于Jurkat细胞增殖法检测胸腺肽活性的方法具有准确客观、灵敏和稳定等优点,能够满足胸腺肽活性检测要求,可进一步推广。 展开更多
关键词 胸腺肽 活性 细胞计数试剂盒 E-玫瑰花环法
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抗癌药物筛选中三种细胞毒性检测法的比较研究 被引量:5
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作者 旷丽莎 丛蓉 +3 位作者 郭薇 黄璐 钱旻 梅兵 《华东师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第Z1期205-207,共3页
检测抗癌药物对肿瘤细胞生长代谢的影响从而对药物的敏感性做出预测是评估化疗药物药效的一条新途径.四氮唑盐酶还原法(Microculture Tetrozolium,MTT)是目前最常用的一种检测方法.磺酰罗丹明B法(Sulfor Rodamine B,SRB)是近几年由美... 检测抗癌药物对肿瘤细胞生长代谢的影响从而对药物的敏感性做出预测是评估化疗药物药效的一条新途径.四氮唑盐酶还原法(Microculture Tetrozolium,MTT)是目前最常用的一种检测方法.磺酰罗丹明B法(Sulfor Rodamine B,SRB)是近几年由美国癌症研究所(National Cancer Institute,NCI)发展起来的检测肿瘤细胞药敏性的一种新方法,目前在国内的应用也比较广泛.而CCK-8试剂(Cell Counting Kit-8)是日本株式会社同仁化学研究所新近研制的一种活细胞计数试剂盒.本实验对MTT、SRB及CCK-8三种测定药物细胞毒性的方法进行了比较研究. 展开更多
关键词 SRB 比较研究 试剂 株式会社 抑制率 三种方法 细胞毒性 MTT 细胞计数试剂盒 CCK 变异系数 毒性作用
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神经生长因子对颗粒细胞增殖检测方法的探讨 被引量:1
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作者 于洋 柳春 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第16期15-18,共4页
目的为了解神经生长因子(NGF)对小鼠卵巢腔前颗粒细胞促增殖情况并探索其机制,同时建立方便灵敏、无污染和毒性小的细胞增殖检测方法。方法用NGF刺激培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验分析,溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd... 目的为了解神经生长因子(NGF)对小鼠卵巢腔前颗粒细胞促增殖情况并探索其机制,同时建立方便灵敏、无污染和毒性小的细胞增殖检测方法。方法用NGF刺激培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验分析,溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)掺入标记,免疫荧光技术检测颗粒细胞在体外培养中的增殖情况和Brd U标记指数。结果 NGF明显促进颗粒细胞增殖,并且具有一定的时效关系。荧光显微镜下可见Brd U阳性标记的颗粒细胞,提示细胞处于增殖期。NGF组的Brd U标记指数为45.03%,明显高于对照组20.65%(P<0.01)。NGF使增殖期的细胞显著增多及增殖指数明显升高。结论该研究证实NGF能够促进颗粒细胞增殖,CCK-8分析和Brd U标记是高效、灵敏的标记腔前颗粒细胞增殖的方法,NGF促进颗粒细胞增殖与促进颗粒细胞DNA的合成有关系。 展开更多
关键词 神经生长因子 颗粒细胞 细胞计数试剂盒-8 溴脱氧尿嘧啶核苷 增殖
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胡桃醌对人胃癌细胞SGC-7901凋亡相关基因p53蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 王若汗 李庆杰 +1 位作者 成光宇 张凤清 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第14期3090-3094,共5页
目的研究胡桃醌导致人胃癌细胞(SGC-7901)凋亡的机制。方法通过细胞计数试剂盒(CCK)8筛选细胞,利用高通量测序获取胡桃醌处理的SGC-7901与对照组细胞的基因表达数据并筛选差异基因。然后通过Western印迹及实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)... 目的研究胡桃醌导致人胃癌细胞(SGC-7901)凋亡的机制。方法通过细胞计数试剂盒(CCK)8筛选细胞,利用高通量测序获取胡桃醌处理的SGC-7901与对照组细胞的基因表达数据并筛选差异基因。然后通过Western印迹及实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测胡桃醌对SGC-7901凋亡相关基因p53蛋白表达。结果不同浓度的胡桃醌诱导SGC-7901凋亡后p53基因的mRNA表达显著增强,胡桃醌浓度越高其表达量就越高。结论胡桃醌导致SGC-7901凋亡的机制可能是诱导细胞凋亡水平而发挥的,与调节凋亡相关基因p53表达相关。 展开更多
关键词 胡桃醌 免疫蛋白印迹法 细胞凋亡 细胞计数试剂盒-8 P53
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纳米羟基磷灰石对人脐带静脉血管内皮细胞的毒性评价 被引量:2
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作者 程光存 严中亚 +2 位作者 李春生 严宇 韦晓勇 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第16期2534-2539,共6页
背景:有研究应用脉冲激光沉积合成技术在人工心脏机械瓣膜上沉积胶原制备了新型纳米羟基磷灰石薄膜涂层。目的:观察此种新型纳米羟基磷灰石薄膜对人脐带静脉血管内皮细胞的毒性。方法:分别采用纳米羟基磷灰石薄膜常温浸提液、纳米羟基... 背景:有研究应用脉冲激光沉积合成技术在人工心脏机械瓣膜上沉积胶原制备了新型纳米羟基磷灰石薄膜涂层。目的:观察此种新型纳米羟基磷灰石薄膜对人脐带静脉血管内皮细胞的毒性。方法:分别采用纳米羟基磷灰石薄膜常温浸提液、纳米羟基磷灰石薄膜高温浸提液、高密度聚乙烯及苯酚溶液培养人脐静脉血管内皮细胞,72 h内倒置相差显微镜下观察细胞生长状况;培养7 d时采用CCK-8法检测细胞增殖与毒性分级。结果与结论:培养24 h,纳米羟基磷灰石薄膜常温浸提液组、纳米羟基磷灰石薄膜高温浸提液组和高密度聚乙烯组细胞生长良好,呈梭形,折光性强,3组细胞形态、数量无明显差异;苯酚溶液组细胞多为悬浮、圆形、固缩的死细胞;48 h时,除了苯酚溶液组外,其余3组细胞数量明显增加,细胞生长密集,至72 h时细胞生长旺盛,间隙显著减小。培养7 d内,纳米羟基磷灰石薄膜常温浸提液组、纳米羟基磷灰石薄膜高温浸提液组和高密度聚乙烯组细胞增殖活性无差异,均高于苯酚溶液组(P<0.05),纳米羟基磷灰石薄膜毒性级别为0至1级,表明纳米羟基磷灰石人工心脏机械瓣膜有良好的组织细胞相容性,无毒性作用。 展开更多
关键词 硬羟基磷灰石 内皮细胞 脐静脉 生物材料 材料相容性 羟基磷灰石 人脐带静脉血管内皮细胞 细胞毒性 细胞计数试剂盒 安徽省自然科学基金
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急性子不同提取部位对人膀胱癌EJ细胞株生长的抑制作用 被引量:3
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作者 蔡阳 宋文 +8 位作者 丁玉峰 杨俊 陈瑞宝 刘卓 杨竣 王涛 王晨 刘继红 叶章群 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期818-820,共3页
目的 观察急性子不同提取部位对人膀胱癌EJ细胞株生长的抑制作用.方法 将 急性子进行提取分离,得到水部、醇部、石油醚部、乙酸乙酯部及正丁醇部,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各提取部位对人膀胱癌EJ细胞株增殖的抑制作用;流式细... 目的 观察急性子不同提取部位对人膀胱癌EJ细胞株生长的抑制作用.方法 将 急性子进行提取分离,得到水部、醇部、石油醚部、乙酸乙酯部及正丁醇部,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各提取部位对人膀胱癌EJ细胞株增殖的抑制作用;流式细胞仪分析细胞周期分布及细胞凋亡.结果 急性子乙酸乙酯部、正丁醇部、水部、醇部、石油醚部对EJ细胞增殖均有一定抑制作用,呈剂量依赖关系,其对EJ细胞半数抑制浓度(IC50)依次为0.041、0.442、2.224、1.254、1.671 g/L.流式细胞仪检测结果显示,0.08 g/L的急性子乙酸乙酯部作用于EJ细胞24 h后,G2/M期细胞比例为(22.3±3.1)%,较空白对照组的(14.5±2.5)%显著增高(P<0.05).不同浓度的乙酸乙酯部作用于EJ细胞24h后,EJ细胞的凋亡率由对照组的(14.27±1.42)%分别增至(29.88±1.29)%、(36.91±2.35)%、(43.77±3.48)%、(77.73±3.18)%和(80.35±5.41)%.结论 急性子不同提取部位对人膀胱癌EJ细胞株的增殖均有一定抑制作用,其中乙酸乙酯部抑制作用最强,其机制可能与抑制细胞分裂和诱导细胞凋亡有关. 展开更多
关键词 急性子 膀胱癌 细胞计数试剂盒 细胞周期 凋亡
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