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利用细菌转座子构建适于家蚕的Bac-to-Bac快速基因表达系统
被引量:
13
1
作者
吴小锋
曹翠平
鲁兴萌
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期183-188,I0001,共7页
为了较好地解决家蚕杆状病毒基因表达系统(BmNPV expression system)在重组病毒构建和纯化过程中存在的重组率低、空斑分析技术繁琐、花费时间长等缺点,借鉴国外AcNPV Bac-to-Bac快速基因表达系统工作原理,对家蚕BmNPV基因组进行了改造...
为了较好地解决家蚕杆状病毒基因表达系统(BmNPV expression system)在重组病毒构建和纯化过程中存在的重组率低、空斑分析技术繁琐、花费时间长等缺点,借鉴国外AcNPV Bac-to-Bac快速基因表达系统工作原理,对家蚕BmNPV基因组进行了改造。通过同源重组的方法,将含有单拷贝数细菌F复制子、插入有细菌转座子整合靶位点、编码LacZα肽的部分DNA片段和抗性选择标记基因的基因片段重组入家蚕BmNPV基因组,替换多角体蛋白基因,获得了家蚕BmNPV病毒穿梭载体BmBacm id;并利用供体质粒上的表达盒和细菌转座子以及细菌转座子的基因定位转移作用,在细菌体内实现外源目的基因向家蚕BmNPV基因组上的转移整合,快速完成重组BmN-PV病毒的构建。
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关键词
家蚕
杆状病毒
细菌转座子
表达系统
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职称材料
在胡杨NHX基因内发现细菌转座子IS10-L的存在
被引量:
2
2
作者
李金耀
马纪
+3 位作者
蔡伦
曾幼玲
梅新娣
张富春
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期628-631,共4页
采用RT PCR扩增的方法 ,从新疆不同地区的野生植物胡杨中分别克隆获得 1kb和 2 3kb的cDNA片段 ,测序和序列分析表明这两个基因片段均包含NHX基因的部分读码框架 ,分别命名为PtNHX和PwNHX。PtNHX序列同源性分析结果显示胡杨NHX基因与滨...
采用RT PCR扩增的方法 ,从新疆不同地区的野生植物胡杨中分别克隆获得 1kb和 2 3kb的cDNA片段 ,测序和序列分析表明这两个基因片段均包含NHX基因的部分读码框架 ,分别命名为PtNHX和PwNHX。PtNHX序列同源性分析结果显示胡杨NHX基因与滨藜NHX基因同源性高达 98% ,与碱蓬同源性达到 86 % ,与拟南芥同源性为 84 % ,与水稻同源性为 80 % ,表明它是植物中高度保守的一种基因 ,同时说明野生植物胡杨中也存在与拟南芥相似的植物耐盐相关基因。PwNHX序列分析表明 ,该基因内部含有一种转座酶的读码框 ,大小约 135 0bp ,与已发表的Shigellaflexneri.转座子Tn10基因序列 (AF16 2 2 2 3)同源性为 99%。NHX基因的蛋白产物在植物的耐盐性方面起着重要的作用。推测PwNHX由于插入转座酶读码框可能会导致该基因的功能丧失。胡杨生存于盐碱地 ,其体内可能存在另一些机制使胡杨具有抗盐碱的能力。对于这些机制的研究可能有助于进一步了解植物的抗盐机制。利用PwNHX基因内的转座子作基因标签 ,可进一步研究胡杨的其它基因 ,从而有可能揭示胡杨叶子发育的变态过程、耐盐碱等性状。
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关键词
胡杨
NHX基因
细菌转座子
植物耐盐
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职称材料
细菌转座子和基因工程
3
作者
王敖全
《国外医学(分子生物学分册)》
CSCD
1992年第2期51-55,共5页
本文从3个方面介绍了细菌转座子及其应用:①转座子载体的设计原理和目前广泛应用的细菌转座子载体。②近年来人工构建的细菌转座子,着重介绍了常用的工程转座子的特性以及在分子生物学研究中的用途。③转座子用于基因操作,包括细菌基因...
本文从3个方面介绍了细菌转座子及其应用:①转座子载体的设计原理和目前广泛应用的细菌转座子载体。②近年来人工构建的细菌转座子,着重介绍了常用的工程转座子的特性以及在分子生物学研究中的用途。③转座子用于基因操作,包括细菌基因的体内、体外分子克隆和DNA核苷酸序列测定。还对已取得的成果作了介绍.
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关键词
细菌转座子
基因工程
原文传递
题名
利用细菌转座子构建适于家蚕的Bac-to-Bac快速基因表达系统
被引量:
13
1
作者
吴小锋
曹翠平
鲁兴萌
机构
浙江大学动物科学学院
出处
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期183-188,I0001,共7页
基金
国家重点基础研究发展计划"973"项目(编号2005CB121003)
农业部科技项目(编号2005-C5)
浙江省科技厅项目(编号2006C24015)
文摘
为了较好地解决家蚕杆状病毒基因表达系统(BmNPV expression system)在重组病毒构建和纯化过程中存在的重组率低、空斑分析技术繁琐、花费时间长等缺点,借鉴国外AcNPV Bac-to-Bac快速基因表达系统工作原理,对家蚕BmNPV基因组进行了改造。通过同源重组的方法,将含有单拷贝数细菌F复制子、插入有细菌转座子整合靶位点、编码LacZα肽的部分DNA片段和抗性选择标记基因的基因片段重组入家蚕BmNPV基因组,替换多角体蛋白基因,获得了家蚕BmNPV病毒穿梭载体BmBacm id;并利用供体质粒上的表达盒和细菌转座子以及细菌转座子的基因定位转移作用,在细菌体内实现外源目的基因向家蚕BmNPV基因组上的转移整合,快速完成重组BmN-PV病毒的构建。
关键词
家蚕
杆状病毒
细菌转座子
表达系统
Keywords
Bombyx mori
Baculovirus
Bacterial transposon
Expression system
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
在胡杨NHX基因内发现细菌转座子IS10-L的存在
被引量:
2
2
作者
李金耀
马纪
蔡伦
曾幼玲
梅新娣
张富春
机构
新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期628-631,共4页
基金
国家科技攻关西部科技行动项目基金资助 (No .2 0 0 1BA90 1A3 2)~~
文摘
采用RT PCR扩增的方法 ,从新疆不同地区的野生植物胡杨中分别克隆获得 1kb和 2 3kb的cDNA片段 ,测序和序列分析表明这两个基因片段均包含NHX基因的部分读码框架 ,分别命名为PtNHX和PwNHX。PtNHX序列同源性分析结果显示胡杨NHX基因与滨藜NHX基因同源性高达 98% ,与碱蓬同源性达到 86 % ,与拟南芥同源性为 84 % ,与水稻同源性为 80 % ,表明它是植物中高度保守的一种基因 ,同时说明野生植物胡杨中也存在与拟南芥相似的植物耐盐相关基因。PwNHX序列分析表明 ,该基因内部含有一种转座酶的读码框 ,大小约 135 0bp ,与已发表的Shigellaflexneri.转座子Tn10基因序列 (AF16 2 2 2 3)同源性为 99%。NHX基因的蛋白产物在植物的耐盐性方面起着重要的作用。推测PwNHX由于插入转座酶读码框可能会导致该基因的功能丧失。胡杨生存于盐碱地 ,其体内可能存在另一些机制使胡杨具有抗盐碱的能力。对于这些机制的研究可能有助于进一步了解植物的抗盐机制。利用PwNHX基因内的转座子作基因标签 ,可进一步研究胡杨的其它基因 ,从而有可能揭示胡杨叶子发育的变态过程、耐盐碱等性状。
关键词
胡杨
NHX基因
细菌转座子
植物耐盐
Keywords
Populus euphratica, NHX gene, RT PCR, salt tolerance, transposon
分类号
Q943 [生物学—植物学]
下载PDF
职称材料
题名
细菌转座子和基因工程
3
作者
王敖全
机构
中国科学院微生物研究所
出处
《国外医学(分子生物学分册)》
CSCD
1992年第2期51-55,共5页
文摘
本文从3个方面介绍了细菌转座子及其应用:①转座子载体的设计原理和目前广泛应用的细菌转座子载体。②近年来人工构建的细菌转座子,着重介绍了常用的工程转座子的特性以及在分子生物学研究中的用途。③转座子用于基因操作,包括细菌基因的体内、体外分子克隆和DNA核苷酸序列测定。还对已取得的成果作了介绍.
关键词
细菌转座子
基因工程
分类号
R394.8 [医药卫生—医学遗传学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用细菌转座子构建适于家蚕的Bac-to-Bac快速基因表达系统
吴小锋
曹翠平
鲁兴萌
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2006
13
下载PDF
职称材料
2
在胡杨NHX基因内发现细菌转座子IS10-L的存在
李金耀
马纪
蔡伦
曾幼玲
梅新娣
张富春
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
2
下载PDF
职称材料
3
细菌转座子和基因工程
王敖全
《国外医学(分子生物学分册)》
CSCD
1992
0
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已选择
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