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姜黄素类似物对人结肠癌HT-29细胞增殖与自噬的影响
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作者 黄屹沅 陈云 +1 位作者 陈瑞骥 王威 《现代医药卫生》 2023年第7期1094-1099,共6页
目的初步探究姜黄素类似物——WH-8对人结肠癌HT-29细胞增殖和自噬的影响。方法选用不同浓度WH-8作用于人结肠癌HT-29细胞,应用四甲基偶氮唑盐还原法观察药物对细胞的生长抑制作用;通过荧光染色技术和细胞成像技术观察WH-8作用下细胞自... 目的初步探究姜黄素类似物——WH-8对人结肠癌HT-29细胞增殖和自噬的影响。方法选用不同浓度WH-8作用于人结肠癌HT-29细胞,应用四甲基偶氮唑盐还原法观察药物对细胞的生长抑制作用;通过荧光染色技术和细胞成像技术观察WH-8作用下细胞自噬囊泡的变化;四甲基偶氮唑盐还原法检测经自噬特异性抑制剂3-MA预处理后WH-8对细胞生长抑制率的影响;蛋白质印迹法观察WH-8作用下细胞自噬特征性蛋白酵母自噬相关基因1(Beclin 1)和微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达情况。结果WH-8呈时间-剂量依赖性抑制人结肠癌HT-29细胞增殖,48 h平均半数抑制浓度为(12.5±1.3)μmol/L;一定浓度下WH-8可诱导细胞的自噬囊泡增多;3-MA可逆转WH-8对人结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用,差异有统计学意义(P<0.05);WH-8可诱导Beclin-1表达上调,且在一定时间内促进LC3Ⅰ向LC3Ⅱ转化。结论WH-8可抑制人结肠癌HT-29细胞增殖并诱导细胞自噬。 展开更多
关键词 姜黄素类似物 肠癌 结肠癌ht-29细胞 增殖 自噬
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基于JAK2/STAT3信号通路探讨对叶百部总生物碱对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响 被引量:3
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作者 杨雅钧 许立拔 +2 位作者 王孝勋 黄珍 黎燕兰 《广西医学》 CAS 2023年第11期1305-1309,1325,共6页
目的基于Janus激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路,探讨对叶百部总生物碱对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响。方法将人结肠癌HT-29细胞分为55μg/mL组、150μg/mL组和250μg/mL组进行实验,另设仅添加培养基的空白组... 目的基于Janus激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路,探讨对叶百部总生物碱对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响。方法将人结肠癌HT-29细胞分为55μg/mL组、150μg/mL组和250μg/mL组进行实验,另设仅添加培养基的空白组(含细胞)。除空白组外,其他组给予相应浓度的对叶百部总生物碱进行干预。干预24 h、48 h、72 h后,采用四甲基偶氮唑蓝法检测各组细胞增殖抑制率;干预48 h后,采用Hoechst 33258染色法观察各组细胞凋亡情况,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,采用Western blot检测各组细胞JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)的蛋白表达水平。结果与空白组比较,各浓度组细胞增殖抑制率增加;经Hoechst 33258染色后在各浓度组中可观察到典型的细胞凋亡形态改变,凋亡细胞数及细胞凋亡率均增加(均P<0.05);流式细胞术检测结果显示150μg/mL组和250μg/mL组细胞凋亡率增加(均P<0.05)。与空白组比较,各浓度组的p-JAK2蛋白和p-STAT3蛋白表达水平均下调(均P<0.05)。55μg/mL组、150μg/mL组和250μg/mL组的细胞增殖抑制率、凋亡细胞数及细胞凋亡率依次增加,p-JAK2蛋白和p-STAT3蛋白表达水平依次降低(均P<0.05)。结论对叶百部总生物碱可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路相关蛋白的活化,来抑制人结肠癌HT-29细胞增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 肠癌 ht-29细胞 对叶百部 总生物碱 细胞凋亡 细胞增殖 Janus激酶2/信号转导及转录激活因子3信号通路
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辽东楤木叶总皂苷对结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用及机制研究 被引量:9
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作者 尹丽颖 李凤金 +3 位作者 边晓燕 牛雯颖 敖鹏 肖洪彬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1545-1548,共4页
目的研究辽东楤木叶总皂苷(ETS)对HT-29细胞生长的抑制作用及作用机制。方法采用MTT法检测ETS对HT-29细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测ETS对HT-29细胞周期和凋亡的影响;Western blot法检测ETS对HT-29细胞PLK1蛋白表达的影响。结果 ET... 目的研究辽东楤木叶总皂苷(ETS)对HT-29细胞生长的抑制作用及作用机制。方法采用MTT法检测ETS对HT-29细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测ETS对HT-29细胞周期和凋亡的影响;Western blot法检测ETS对HT-29细胞PLK1蛋白表达的影响。结果 ETS对结肠癌HT-29细胞增殖有明显抑制作用,IC50值为39.62 mg·L-1。在10~40 mg·L-1剂量作用下,可剂量依赖性诱导HT-29细胞凋亡。ETS主要将细胞周期阻滞在G0/G1期,从而可剂量依赖性抑制肿瘤细胞增殖。ETS可明显抑制HT-29细胞PLK1蛋白的表达。结论 ETS体外可明显抑制HT-29细胞的生长,其抗肿瘤作用与细胞周期阻滞、细胞凋亡及抑制PLK1蛋白表达有关。 展开更多
关键词 辽东楤木 皂苷 结肠癌ht-29细胞 细胞周期 胞凋亡 PLK1蛋白
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扶正解毒祛瘀方联合奥沙利铂对人结肠癌HT-29细胞增殖与凋亡的影响及机制研究 被引量:7
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作者 赵秀梅 周冰 +3 位作者 张桂贤 柴仲秋 刘晓芸 刘洪斌 《中国药房》 CAS 北大核心 2017年第19期2613-2616,共4页
目的:研究扶正解毒祛瘀方(简称"扶正方")联合奥沙利铂(L-OHP)对人结肠癌HT-29细胞增殖与凋亡的影响及机制。方法:将HT-29细胞分为空白对照组(不加药物)、扶正方组(1 000 mg/L)、L-OHP组(31.25 mg/L)和联合用药组(1 000 mg/L... 目的:研究扶正解毒祛瘀方(简称"扶正方")联合奥沙利铂(L-OHP)对人结肠癌HT-29细胞增殖与凋亡的影响及机制。方法:将HT-29细胞分为空白对照组(不加药物)、扶正方组(1 000 mg/L)、L-OHP组(31.25 mg/L)和联合用药组(1 000 mg/L扶正方+31.25 mg/L L-OHP)。加入相应药物作用48 h后,采用MTT法检测细胞增殖情况,倒置显微镜下观察细胞形态的改变,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率,实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)法检测细胞中促凋亡基因Bax、抑凋亡基因Bcl-2 m RNA的表达,Western blot法检测细胞中Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,L-OHP组和联合用药组细胞增殖均受到抑制、S期和G_2/M期细胞比例升高、G_0/G_1期细胞比例降低(P<0.05),L-OHP组、扶正方组和联合用药组细胞凋亡率升高、细胞中Bax m RNA及蛋白的表达上调、细胞中Bcl-2 m RNA的表达下调(P<0.05),且联合用组变化较两药单用组更明显(P<0.05)。结论:扶正方与L-OHP联合应用可抑制HT-29细胞的增殖、促进细胞凋亡,且作用优于两药单用;其机制可能与上调细胞中Bax基因与蛋白表达、下调细胞中Bcl-2基因表达有关。 展开更多
关键词 扶正解毒祛瘀方 奥沙利铂 结肠癌ht-29细胞 增殖 凋亡 体外
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复合螺旋藻多糖对人结肠癌HT-29细胞株体外抗肿瘤作用的研究 被引量:4
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作者 徐小娟 张勇 +3 位作者 唐超 葛蔚 刘永举 王清吉 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期2164-2166,共3页
目的研究复合螺旋藻多糖对体外培养的人结肠癌HT-29细胞的抑制作用及其机制。方法将螺旋藻多糖(PSP)与银杏叶提取物(GBE)按一定比例复合,用不同浓度的复合制剂分别对细胞作用后,在显微镜下观察细胞形态学变化、用MTT法测其生长抑制率、P... 目的研究复合螺旋藻多糖对体外培养的人结肠癌HT-29细胞的抑制作用及其机制。方法将螺旋藻多糖(PSP)与银杏叶提取物(GBE)按一定比例复合,用不同浓度的复合制剂分别对细胞作用后,在显微镜下观察细胞形态学变化、用MTT法测其生长抑制率、PI及AnnexinV-FITC/PI染色后,流式细胞仪测细胞周期及凋亡率。结果不同比例和浓度的复合螺旋藻多糖对人结肠癌HT-29细胞均有抑制作用,并呈时间和剂量依赖性,抑制作用高于单一成分组;细胞阻滞于S期,凋亡细胞增加。结论复合螺旋藻多糖通过阻断细胞周期而抑制体外培养人结肠癌HT-29细胞的生长,并能够促进细胞凋亡,具有较好的抑肿瘤活性。 展开更多
关键词 螺旋藻多糖 结肠癌ht-29细胞 生长抑制 细胞周期 细胞凋亡
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吉祥草提取物对人结肠癌HT-29细胞体外抑制作用的研究 被引量:4
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作者 刘海 杨建琼 +2 位作者 熊亮 马华谋 徐小军 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1103-1105,共3页
目的研究吉祥草提取物对人结肠癌HT-29细胞的体外增殖抑制作用和诱导凋亡作用。方法 MTT法筛选吉祥草乙醇提取物及其不同溶剂萃取部分对HT-29细胞抑制作用的活性部位;通过凋亡染色观察细胞凋亡形态;应用流式细胞术AnnexinⅤ-FITC/PI双... 目的研究吉祥草提取物对人结肠癌HT-29细胞的体外增殖抑制作用和诱导凋亡作用。方法 MTT法筛选吉祥草乙醇提取物及其不同溶剂萃取部分对HT-29细胞抑制作用的活性部位;通过凋亡染色观察细胞凋亡形态;应用流式细胞术AnnexinⅤ-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡率。结果吉祥草正丁醇萃取物对HT-29细胞的抑制作用较强,且呈量效和时效关系,作用48 h时IC50值为66.59 mg.L-1,凋亡染色显示有典型的凋亡形态出现,流式细胞仪检测其能诱导HT-29细胞凋亡并呈剂量依赖关系。结论吉祥草正丁醇萃取物能抑制人结肠癌HT-29细胞增殖并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 吉祥草 抗肿瘤活性 细胞凋亡 结肠癌ht-29细胞
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益气健脾抗癌法对结肠癌HT-29细胞自噬的作用研究 被引量:3
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作者 王宁 于婷婷 +3 位作者 杨哲 宋文杰 冯晓飞 金迎 《辽宁中医杂志》 CAS 2022年第2期154-156,225,共4页
目的探索益气健脾抗癌法对体外培养的结肠癌HT-29细胞自噬作用及相关机制。方法将体外培养的结肠癌HT-29细胞分为高剂量益气健脾抗癌组,中剂量益气健脾抗癌组,低剂量益气健脾抗癌组,及不含药血清对照组。应用Western blot检测各组细胞中... 目的探索益气健脾抗癌法对体外培养的结肠癌HT-29细胞自噬作用及相关机制。方法将体外培养的结肠癌HT-29细胞分为高剂量益气健脾抗癌组,中剂量益气健脾抗癌组,低剂量益气健脾抗癌组,及不含药血清对照组。应用Western blot检测各组细胞中Beclin-1、LC3和p62蛋白表达量,吖啶橙染色检测细胞自噬。结果在作用48 h时,与不含药血清对照组相比,益气健脾抗癌法可激活HT-29细胞的自噬(P<0.05)。高剂量组较中、低剂量组对细胞的激活能力差异具有统计学意义,3个剂量组均可降低HT-29细胞的侵袭能力,高剂量组与其他组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论益气健脾抗癌法可以激活HT-29细胞的自噬,且与剂量呈正相关。 展开更多
关键词 结肠癌ht-29细胞 益气健脾抗癌 肠癌 生长抑制
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槲寄生碱Ⅰ对结肠癌HT-29细胞抑制作用研究
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作者 孙永慧 孙楠 +2 位作者 李靖 赵静 张静 《哈尔滨商业大学学报(自然科学版)》 CAS 2018年第1期13-15,共3页
研究槲寄生碱Ⅰ(N-桂皮酰基丁二胺)对结肠癌HT-29细胞生长的抑制作用.将体外培养结肠癌HT-29细胞接种到96孔板,细胞生长良好后,将给药组分为5个剂量组(0.8、0.4、0.2、0.1、0.05 mg/m L),进行干预,48 h后,采用MTT比色法观察槲寄生碱Ⅰ... 研究槲寄生碱Ⅰ(N-桂皮酰基丁二胺)对结肠癌HT-29细胞生长的抑制作用.将体外培养结肠癌HT-29细胞接种到96孔板,细胞生长良好后,将给药组分为5个剂量组(0.8、0.4、0.2、0.1、0.05 mg/m L),进行干预,48 h后,采用MTT比色法观察槲寄生碱Ⅰ对结肠癌HT-29细胞的抑制作用,并计算细胞抑制率.各实验组吸光度(A)随给药质量浓度的增加而降低,肿瘤抑制率逐渐增高.IC50值为0.499 mg/m L.槲寄生碱Ⅰ对结肠癌HT-29细胞生长有显著的抑制作用. 展开更多
关键词 槲寄生碱I 结肠癌ht-29细胞 抑制作用
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乳源酪蛋白糖巨肽对结肠癌HT-29细胞抗炎及血管生成因子表达水平的影响 被引量:3
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作者 王秋萍 贾彦 +6 位作者 曹江鸣 赵培 崔文静 马新颖 赵林森 闫亚丽 陈庆森 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第5期179-185,共7页
研究乳源酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP)对结肠癌细胞中的核转录因子(nucleartranscription factor,NF)-κB信号通路的作用,为其抗炎活性提供理论依据。本研究在前期探究"乳源酪蛋白糖巨肽对结肠癌HT-29细胞中COX-2... 研究乳源酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP)对结肠癌细胞中的核转录因子(nucleartranscription factor,NF)-κB信号通路的作用,为其抗炎活性提供理论依据。本研究在前期探究"乳源酪蛋白糖巨肽对结肠癌HT-29细胞中COX-2、iNOS、GST-π表达的影响"的基础上,首先用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激结肠癌HT-29细胞将NF-κB信号通路激活,采用免疫荧光法观测p65核移位来确定;随后用乳源CGMP干预激活NF-κB通路的HT-29细胞,用酶联免疫吸附剂测定细胞培养液中炎症因子和血管生成因子的表达水平,以探讨乳源CGMP消除结肠癌细胞活力的相关分子的变化。结果显示,1μg/mL的LPS能显著激活NF-κB信号通路,p65的核移位达到最佳水平;不同质量浓度的乳源CGMP均可不同程度地抑制HT-29细胞炎症因子和血管生成因子的表达水平。因此,乳源CGMP能够显著调节激活后的NF-κB信号通路,并有效抑制和改善结肠癌细胞的炎症状态,其机制为乳源CGMP通过有效抑制炎症因子和血管生成因子的表达,从而减缓结肠癌细胞的炎症程度。 展开更多
关键词 酪蛋白糖巨肽 结肠癌ht-29细胞 NF-ΚB 炎症因子 血管生成因子
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二烯丙基二硫对人结肠癌HT-29细胞G_1期的阻滞作用 被引量:9
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作者 黄幼生 苏琦 +4 位作者 周秀田 苏坚 廖前进 解娜 葛玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1128-1132,共5页
目的探讨二烯丙基二硫(DADS)对人结肠癌HT-29细胞G1期的阻滞作用及分子机制。方法采用MTT、细胞计数法、流式细胞术和免疫细胞化学方法分析DADS对体外培养的HT-29细胞增殖抑制作用、细胞周期分布及细胞周期相关蛋白表达的影响。结果MTT... 目的探讨二烯丙基二硫(DADS)对人结肠癌HT-29细胞G1期的阻滞作用及分子机制。方法采用MTT、细胞计数法、流式细胞术和免疫细胞化学方法分析DADS对体外培养的HT-29细胞增殖抑制作用、细胞周期分布及细胞周期相关蛋白表达的影响。结果MTT法显示,60、120μmol.L-1DADS作用HT-29细胞24 h后,生长抑制率分别达23.1%、45.6%。细胞计数法表明,常规培养HT-29细胞群体倍增时间为22.58 h,60μmol.L-1DADS作用HT-29细胞后,其细胞群体倍增时间延长到31.20 h。流式细胞仪分析结果显示,60μmol.L-1DADS阻滞HT-29细胞在G1期,与对照组相比,可使G1期细胞增加约2倍,而120μmol.L-1DADS显著地将细胞阻滞在G2/M期。免疫细胞化学分析表明在G1期阻滞同时有p21W af1蛋白表达上调,Cyc lin E、C-myc蛋白表达下降。结论低剂量DADS对HT-29细胞的抑制增殖作用可能与G1期阻滞有关,DADS对HT-29细胞G1期阻滞的分子机制可能与调节p21W af1、Cyc lin E、C-myc表达相关。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 肠癌 ht-29细胞 细胞周期 eye-lin E蛋白
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抗菌肽LL-37通过激活AMPK介导的自噬对结肠癌HT-29细胞凋亡的研究 被引量:1
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作者 谢亚锋 许志杰 +4 位作者 丁雅婷 闫圣玉 张侨 刘菀莹 刘丽兵 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第12期1845-1849,共5页
目的探讨抗菌肽LL-37对结肠癌HT-29细胞凋亡的影响及其分子机制。方法以结肠癌HT-29细胞作为研究对象,加入不同浓度(50、100、200μg/ml)的抗菌肽LL-37或联合AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)抑制剂多索吗啡(10μmol/L)处理48h后,采用流式细胞... 目的探讨抗菌肽LL-37对结肠癌HT-29细胞凋亡的影响及其分子机制。方法以结肠癌HT-29细胞作为研究对象,加入不同浓度(50、100、200μg/ml)的抗菌肽LL-37或联合AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)抑制剂多索吗啡(10μmol/L)处理48h后,采用流式细胞术检测HT-29细胞凋亡率,Westernblot实验检测HT-29细胞凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)、自噬相关蛋白(Beclin1、Atg5、LC3I和LC3II)和AMPK蛋白的表达。结果高浓度抗菌肽LL-37能促进结肠癌HT-29细胞凋亡(P<0.05),并上调自噬相关蛋白Bec-lin1、Atg5表达水平以及提高LC3II/LC3I值(P<0.05),并且伴随着AMPK异常激活(P<0.01);AMPK抑制剂联合干预能逆转抗菌肽LL-37对HT-29细胞的作用效果。结论抗菌肽LL-37通过激活AMPK介导的自噬促进结肠癌HT-29细胞的凋亡。 展开更多
关键词 结肠癌ht-29细胞 AMPK 抗菌肽LL-37 细胞自噬 细胞凋亡
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戊地昔布对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 韦金英 刘玉 +3 位作者 李宏博 王烨 张海强 韩彩丽 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期549-551,共3页
目的观察戊地昔布(Valdecoxib)对COX-2高表达的人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响。方法将体外培养HT-29细胞分为正常组(C)、药物处理组(V)及溶剂对照组(S)。采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测COX-2、caspase-3、cleaved caspase-... 目的观察戊地昔布(Valdecoxib)对COX-2高表达的人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响。方法将体外培养HT-29细胞分为正常组(C)、药物处理组(V)及溶剂对照组(S)。采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测COX-2、caspase-3、cleaved caspase-3、Bcl-2、p38 MAPK、p-p38MAPK。结果与正常组相比,药物处理组细胞凋亡明显增加(P<0.05),cleaved caspase-3和p-p38MAPK表达增高,Bax/Bcl-2比率明显升高(P<0.05)。Valdecoxib干预能够显著促进HT-29细胞凋亡,上调cleaved caspase-3和p-p38 MAPK的表达,增加Bax/Bcl-2比率。结论 COX-2选择性抑制剂Valdecoxib能够促进HT-29细胞凋亡部分可能是通过激活p38MAPK信号通路而实现的。 展开更多
关键词 肠癌 ht-29细胞 戊地昔布 凋亡
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丁酸钠对结肠癌HT-29细胞的增殖抑制作用及iNOS表达的影响 被引量:3
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作者 李凡 罗和生 +1 位作者 丁一娟 李曦 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第4期416-420,共5页
背景与目的:研究证明丁酸钠在体外对多种肿瘤细胞有抑制作用。本研究观察丁酸钠对结肠癌细胞株HT-29的生长抑制情况,以及对诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)表达水平及其对一氧化氮(NO)分泌的影响。方法:采用不同浓度的丁酸钠对HT-29细胞进... 背景与目的:研究证明丁酸钠在体外对多种肿瘤细胞有抑制作用。本研究观察丁酸钠对结肠癌细胞株HT-29的生长抑制情况,以及对诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)表达水平及其对一氧化氮(NO)分泌的影响。方法:采用不同浓度的丁酸钠对HT-29细胞进行干预,分别运用MTT法检测HT-29细胞株的增殖抑制情况,免疫细胞化学染色技术(SP法)对HT-29细胞胞浆内iNOS蛋白进行染色,图像分析系统检测胞浆内iNOS吸光度值(A值),Griess法检测HT-29细胞NO的分泌。结果:丁酸钠对HT-29细胞株增殖作用呈浓度、时间依赖性。在不同作用时间下,丁酸钠的IC50值不同(12h为15.4mmol/L,24h为5.7mmol/L,36h为2.5mmol/L,48h为0.9mmol/L)。丁酸钠也降低了HT-29细胞胞浆内iNOS的表达以及NO的分泌,亦呈浓度、时间依赖性。结论:丁酸钠能够抑制iNOS的表达水平,减少NO的分泌。这可能是它抑制结肠癌HT-29细胞增殖的作用机制之一。 展开更多
关键词 丁酸钠 肠癌 ht-29细胞 细胞增殖 抑制作用 INOS表达 一氧化氮合成酶
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下调miR-21对PDCD4表达及结肠癌HT-29细胞功能的影响研究 被引量:4
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作者 任宇鹏 宋纯 张昊 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期6-12,共7页
背景与目的:miR-21可能通过抑制PDCD4表达调控结肠癌浸润及转移等恶性行为。本研究通过下调miR-21表达后,检测结肠癌HT-29细胞功能的变化,并观察PDCD4在蛋白及mRNA表达水平的改变,探讨miR-21及PDCD4的表达在结肠癌恶性行为中的关系... 背景与目的:miR-21可能通过抑制PDCD4表达调控结肠癌浸润及转移等恶性行为。本研究通过下调miR-21表达后,检测结肠癌HT-29细胞功能的变化,并观察PDCD4在蛋白及mRNA表达水平的改变,探讨miR-21及PDCD4的表达在结肠癌恶性行为中的关系及机制。方法:构建靶向miR-21的干扰质粒simiR-21,转染HT-29细胞后,以实时定量PCR(qRT-PCR)法检测转染效率,MTT法检测转染后细胞增殖变化,流式细胞术检测转染后细胞调亡变化,Transwell检测迁移及浸润能力改变,蛋白质印迹法(Western blot)及qRT-PCR法检测干扰后PDCD4表达水平变化。结果:经qRT-PCR检测simiR-21在HT-29细胞转染效率为60%~65%,转染效率佳;MTT显示转染后72、96和120 h,HT-29增殖能力减弱(t=1.276,P<0.05;t=3.276,P<0.01;t=4.523,P<0.01);流式细胞术结果显示,与si-negative control及miR-21组对比转染后HT-29调亡率明显增加(t=2.132,P<0.05;t=3.524,P<0.05);Transwell结果显示,simiR-21转染细胞迁移能力降低(t=2.423,P<0.05;t=3.153, P<0.05),侵袭能力降低(t=3.245,P<0.05;t=5.236,P<0.05);Western blot检测结果显示,PDCD4蛋白在simiR-21细胞的表达水平明显上调(t=2.342,P<0.05;t=4.215,P<0.05);qRT-PCR检测结果显示,PDCD4 mRNA在simiR-21细胞的表达水平明显上调(t=2.261,P<0.05;t=3.492,P<0.05)。结论:simiR-21下调miR-21表达后,结肠癌HT-29细胞增殖能力受抑制,并促进其调亡,抑制迁移及浸润能力,PDCD4上调。miR-21可能通过下调PDCD4表达促进肿瘤细胞恶性行为,可作为结肠癌治疗新的靶向候选基因。 展开更多
关键词 肠癌 增殖 调亡 MIR-21 ht-29
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分化抑制因子1对结肠癌HT-29细胞增殖的影响 被引量:6
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作者 于游 张才全 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期2829-2832,共4页
目的检测分化抑制因子1(Id1)对结肠癌HT-29细胞VEGF表达的影响,探讨其在结肠癌增殖中的作用。方法 HT-29转染Id1表达质粒,RT-PCR方法和Western印迹法检测血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白的表达,MTT法检测各组细胞增殖情况;合成Id-1干... 目的检测分化抑制因子1(Id1)对结肠癌HT-29细胞VEGF表达的影响,探讨其在结肠癌增殖中的作用。方法 HT-29转染Id1表达质粒,RT-PCR方法和Western印迹法检测血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白的表达,MTT法检测各组细胞增殖情况;合成Id-1干扰序列转染HT-29细胞后,RT-PCR及Western印迹检测HT-29细胞VEGF mRNA和蛋白的表达情况,采用MTT法检测各组细胞增殖情况。结果 Id1表达质粒空白组、对照组(空载体组)、过表达组VEGF/GAPDH mRNA分别为:0.002 99±0.000 687、0.003 49±0.001 34、0.031 3±0.006 05(P<0.01);VEGF/GAPDH蛋白分别为:0.132±0.035 1、0.131±0.053 0、0.245±0.032 6(P<0.01),MTT实验显示相对对照组,过表达组增殖明显快(P<0.01)。Id-1干扰空白组、对照组(空载体组)、抑表达组VEGF/GAPDH mRNA分别为:0.006 16±0.000 829、0.006 26±0.000 447、0.002 3±0.000 308(P<0.01);VEGF/GAPDH蛋白分别为:0.450±0.039 3、0.464±0.023 1、0.231±0.027 3(P<0.01)。MTT实验显示相对对照组,抑表达组增殖明显减慢(P<0.01)。Id1过表达能显著上调VEGF mRNA和蛋白表达,提高细胞的生长,Id1抑制后能显著下调VEGF mRNA和蛋白表达,减缓细胞的生长。结论在结肠癌HT-29细胞中Id1为VEGF的上游基因,Id1通过Id1↑→VEGF↑途径来影响结肠癌细胞增殖,在肿瘤血管生成中发挥重要作用。Id1有望成为结肠癌治疗的一个新靶点。 展开更多
关键词 分化抑制因子1 肠癌 ht-29细胞 增殖 血管内皮生长因子
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伪士的宁对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响及其机制研究 被引量:3
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作者 冯振宇 孟霜 +3 位作者 常剑敏 周晓荣 史敏 赵建平 《中国药房》 CAS 北大核心 2020年第2期179-183,共5页
目的:探讨伪士的宁对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响及其机制。方法:取人结肠癌HT-29细胞,随机分为空白组和低、中、高剂量伪士的宁组(125、250、500μmol/L),加入不含药培养基或含相应浓度伪士的宁的培养基培养48 h。采用流式细胞仪检测... 目的:探讨伪士的宁对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响及其机制。方法:取人结肠癌HT-29细胞,随机分为空白组和低、中、高剂量伪士的宁组(125、250、500μmol/L),加入不含药培养基或含相应浓度伪士的宁的培养基培养48 h。采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况和线粒体跨膜电位;采用Western blotting法检测细胞中P53、Caspase-3、Caspase-9、兔源DNA修复酶(c-PARP)、Bcl-2的蛋白表达水平。结果:与空白组比较,低、中、高剂量伪士的宁组细胞凋亡率显著升高,线粒体跨膜电位均显著降低(P<0.01),且均呈现浓度依赖趋势。中、高剂量伪士的宁组细胞中P53、Caspase-3、Caspase-9、c-PARP蛋白表达水平较空白组均显著升高,低、中、高剂量伪士的宁组细胞中Bcl-2蛋白表达水平则显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:伪士的宁可能通过上调P53蛋白、下调Bcl-2蛋白的表达,改变线粒体膜电位,然后激活Caspase-3、c-PARP、Caspase-9的表达,进而激活内源性线粒体通路,发挥促进HT-29细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 伪士的宁 肠癌 ht-29细胞 凋亡 线粒体跨膜电位 机制 P53 CASPASE-3 CASPASE-9 兔源DNA修复酶 Bcl-2
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c-myc反义寡核苷酸对结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响 被引量:3
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作者 邵国利 吴爱国 +1 位作者 焦得闯 纪术峰 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第5期459-463,共5页
目的:研究体外c-myc反义寡核苷酸(ASODN)对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响.方法:利用脂质体LipofectamineTM2000介导将c-myc ASODN转染入大肠癌HT-29细胞中,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、Western blot方法检测c-myc基因... 目的:研究体外c-myc反义寡核苷酸(ASODN)对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响.方法:利用脂质体LipofectamineTM2000介导将c-myc ASODN转染入大肠癌HT-29细胞中,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、Western blot方法检测c-myc基因mRNA及蛋白的表达,MTT、流式细胞仪(FCM)检测c-myc ASODN对人结肠癌HT-29细胞增殖抑制及其对奥沙利铂敏感性影响.结果:转染c-myc ASODN后,HT-29细胞内c-mycm RNA水平显著降低(0.464±0.029vs0.974±0.027,0.945±0.012,均P<0.01).在HT-29细胞中存在分子质量62kDa的特异性条带,与c-myc分子质量相符,ASODN组在PVDF膜上的特异性条带明显弱于对照组;MTT结果显示转染c-myc ASODN48h后的HT-29细胞的增殖速度较对照组细胞明显减慢.FCM显示c-myc ASODN转染后72h后,奥沙利铂+c-myc ASODN组细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05).结论:体外c-myc ASODN可抑制c-myc mRNA及蛋白的表达,阻断c-myc可抑制HT-29细胞增殖并增强其对奥沙利铂的敏感性,可能为大肠癌的基因治疗提供新的靶点. 展开更多
关键词 c-myc 反义寡核苷酸 反义治疗 ht-29 细胞 肠癌
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益气健脾抗癌汤联合氟尿嘧啶对结肠癌HT-29细胞生长抑制的效果研究 被引量:3
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作者 王宁 杨哲 +2 位作者 宋文杰 冯晓飞 金迎 《辽宁中医杂志》 CAS 2021年第12期144-147,227,共5页
目的探索益气健脾抗癌汤联合氟尿嘧啶对于体外培养的结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用。方法将体外培养的结肠癌HT-29细胞分别分为高剂量益气健脾抗癌汤血清联合氟尿嘧啶组,中剂量益气健脾抗癌汤血清联合氟尿嘧啶组,低剂量益气健脾抗癌汤... 目的探索益气健脾抗癌汤联合氟尿嘧啶对于体外培养的结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用。方法将体外培养的结肠癌HT-29细胞分别分为高剂量益气健脾抗癌汤血清联合氟尿嘧啶组,中剂量益气健脾抗癌汤血清联合氟尿嘧啶组,低剂量益气健脾抗癌汤血清联合氟尿嘧啶组,氟尿嘧啶组,不含药血清对照组。采用CCK-8细胞增殖实验观察各组HT-29细胞增殖情况;应用流式细胞术观察各组HT-29细胞凋亡情况,侵袭实验(Transwell)用于观察HT-29细胞的侵袭能力。结果联合用药组及氟尿嘧啶组增殖抑制情况与不含药血清对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。高、中、低剂量益气健脾抗癌汤与氟尿嘧啶联合组均可降低HT-29细胞的增殖能力,在48 h,高剂量益气健脾抗癌汤与氟尿嘧啶联合组与氟尿嘧啶组、中、低剂量益气健脾抗癌汤与氟尿嘧啶联合组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。高剂量益气健脾抗癌汤与氟尿嘧啶联合组凋亡率(22.36%)高于中剂量益气健脾抗癌汤与氟尿嘧啶联合组(15.35%)、低剂量益气健脾抗癌汤与氟尿嘧啶联合组(12.74%)及氟尿嘧啶组(10.26%),差异具有统计学意义(P<0.05),且均优于不含药血清对照组(2.13%),差异具有统计学意义(P<0.05)。高、中、低剂量益气健脾抗癌汤与氟尿嘧啶联合组均可降低HT-29细胞的侵袭能力,高剂量益气健脾抗癌汤与氟尿嘧啶联合组与其他组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论益气健脾抗癌汤联合氟尿嘧啶可以降低结肠癌HT-29细胞侵袭,抑制HT-29细胞增殖,促进HT-29细胞凋亡。 展开更多
关键词 肠癌ht-29细胞 益气健脾抗癌汤 肠癌 氟尿嘧啶 生长抑制
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半枝莲提取物诱导结肠癌HT-29细胞凋亡的机制研究 被引量:23
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作者 彭军 林久茂 +1 位作者 魏丽慧 徐伟 《福建中医药大学学报》 2010年第6期35-38,共4页
目的探讨半枝莲提取物在体外诱导结肠癌HT-29细胞株凋亡的作用机制。方法采用人结肠癌细胞HT-29常规体外培养,随机设定对照组和不同浓度半枝莲提取物组,干预24 h。倒置显微镜观察细胞形态变化,MTT法测定不同浓度半枝莲提取物对HT-29细... 目的探讨半枝莲提取物在体外诱导结肠癌HT-29细胞株凋亡的作用机制。方法采用人结肠癌细胞HT-29常规体外培养,随机设定对照组和不同浓度半枝莲提取物组,干预24 h。倒置显微镜观察细胞形态变化,MTT法测定不同浓度半枝莲提取物对HT-29细胞增殖的影响,DNA Ladder试剂盒检测药物作用后细胞凋亡情况,AnnexinV-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡率,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位变化,应用比色法分析Caspase-9和Caspase-3的活化情况。结果半枝莲提取物干预HT-29细胞24 h后,HT-29细胞密度明显减少、细胞变小,可明显抑制HT-29细胞增殖,细胞凋亡增加,线粒体膜电位丧失,具有显著地剂量依赖,并出现明显的DNA Lad-der条带;Caspase-9和Caspase-3的活化随着药物浓度的升高而增加。结论半枝莲提取物能通过线粒体通路诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡而发挥其抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 半枝莲 肠癌 ht-29 细胞凋亡 线粒体
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白花蛇舌草提取物诱导结肠癌HT-29细胞凋亡的机制研究 被引量:20
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作者 林久茂 彭军 +4 位作者 魏丽慧 赵锦燕 庄群川 郑良朴 徐伟 《福建中医药》 2010年第5期49-51,64,共4页
目的探讨白花蛇舌草提取物在体外诱导结肠癌HT-29细胞株凋亡的机制研究。方法采用人结肠癌细胞HT-29常规体外培养,随机设定对照组和不同浓度白花蛇舌草提取物组,干预24 h。倒置显微镜观察细胞形态变化,MTT法测定不同浓度白花蛇舌草提取... 目的探讨白花蛇舌草提取物在体外诱导结肠癌HT-29细胞株凋亡的机制研究。方法采用人结肠癌细胞HT-29常规体外培养,随机设定对照组和不同浓度白花蛇舌草提取物组,干预24 h。倒置显微镜观察细胞形态变化,MTT法测定不同浓度白花蛇舌草提取物对HT-29细胞增殖的影响,DNA Ladder试剂盒检测药物作用后细胞凋亡情况,AnnexinV-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡率,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位变化,应用比色法分析Caspase-9和Caspase-3的活化情况。结果白花蛇舌草提取物干预HT-29细胞24 h后,HT-29细胞密度明显减少,细胞变小,可明显抑制HT-29细胞增殖,细胞凋亡增加,线粒体膜电位丧失,具有显著地剂量依赖,并出现明显的DNA Ladder条带;Caspase-9和Caspase-3的活化随着药物浓度的升高而增加。结论白花蛇舌草提取物能通过线粒体通路诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡而发挥其抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 白花蛇舌草 肠癌 ht-29 细胞凋亡
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