目的探讨天花粉蛋白通过全长型脾络氨酸激酶[full-length form of spleen tyrosine kinase,Syk(L)]基因去甲基化途径恢复Syk(L)表达对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭迁移的的抑制作用。方法采用CCK-8法及Transwell实验检测不同浓度天花粉在不...目的探讨天花粉蛋白通过全长型脾络氨酸激酶[full-length form of spleen tyrosine kinase,Syk(L)]基因去甲基化途径恢复Syk(L)表达对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭迁移的的抑制作用。方法采用CCK-8法及Transwell实验检测不同浓度天花粉在不同时间点对Hep-2细胞增殖及处理72h后细胞侵袭迁移能力的影响;采用MS-HRM法、Q-RT-PCR及Western blot法检测不同浓度天花粉蛋白对Hep-2细胞Syk(L)基因甲基化水平及其表达的影响。结果 CCK-8结果显示,天花粉蛋白对喉癌Hep-2细胞的增殖有抑制作用,且呈浓度、结果时间依赖性;Transwell结果显示,天花粉蛋白能显著抑制Hep-2细胞的侵袭迁移能力;MS-HRM结果显示,天花粉蛋白可以逆转Hep-2细胞Sky(L)基因的高甲基化状态,恢复Syk(L)m RNA及蛋白的表达。结论天花粉蛋白通过逆转Syk(L)基因启动子Cp G岛的甲基化状态,使喉癌Hep-2细胞中Syk(L)基因表达活化,恢复Syk m RNA及蛋白的表达,最终发挥抑癌基因的作用抑制Hep-2细胞恶性生物学行为,具有开发并成为抗肿瘤药物的潜在价值。展开更多
文摘目的探讨天花粉蛋白通过全长型脾络氨酸激酶[full-length form of spleen tyrosine kinase,Syk(L)]基因去甲基化途径恢复Syk(L)表达对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭迁移的的抑制作用。方法采用CCK-8法及Transwell实验检测不同浓度天花粉在不同时间点对Hep-2细胞增殖及处理72h后细胞侵袭迁移能力的影响;采用MS-HRM法、Q-RT-PCR及Western blot法检测不同浓度天花粉蛋白对Hep-2细胞Syk(L)基因甲基化水平及其表达的影响。结果 CCK-8结果显示,天花粉蛋白对喉癌Hep-2细胞的增殖有抑制作用,且呈浓度、结果时间依赖性;Transwell结果显示,天花粉蛋白能显著抑制Hep-2细胞的侵袭迁移能力;MS-HRM结果显示,天花粉蛋白可以逆转Hep-2细胞Sky(L)基因的高甲基化状态,恢复Syk(L)m RNA及蛋白的表达。结论天花粉蛋白通过逆转Syk(L)基因启动子Cp G岛的甲基化状态,使喉癌Hep-2细胞中Syk(L)基因表达活化,恢复Syk m RNA及蛋白的表达,最终发挥抑癌基因的作用抑制Hep-2细胞恶性生物学行为,具有开发并成为抗肿瘤药物的潜在价值。
