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茶尺蠖羧酸酯酶EoCarE592的重组表达及其对农药的降解能力测定
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作者 税良勇 赵忠祎 +4 位作者 冯印 谢晓倩 袁晓琴 毛新芳 刘忠渊 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期48-57,共10页
【目的】原核表达茶尺蠖Ectropis obliqua羧酸酯酶(carboxlesterase,CarE)基因EoCarE592,并探讨重组蛋白对农药的降解能力。【方法】构建原核表达载体pET-32a-EoCarE592,转化大肠杆菌Escherichia coli BL21异源表达,SDS-PAGE和Western b... 【目的】原核表达茶尺蠖Ectropis obliqua羧酸酯酶(carboxlesterase,CarE)基因EoCarE592,并探讨重组蛋白对农药的降解能力。【方法】构建原核表达载体pET-32a-EoCarE592,转化大肠杆菌Escherichia coli BL21异源表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白,并对包涵体蛋白变复性;通过固蓝B盐比色法的含量标准曲线测定重组EoCarE592酶活性以及温度、pH和金属离子对酶活性的影响;利用气相色谱检测EoCarE592在30℃pH 7.0和0,4,8,12,16,20及24 h时对200 mg/L的高效氯氟氰菊酯(lambda-cyhalothrin)、甲基对硫磷(methyl-parathion)和异丙威(isoprocarb)降解能力。【结果】通过大肠杆菌异源表达得到重组EoCarE592包涵体蛋白,经尿素变复性后得到酶活性29.8 U的重组EoCarE592,其最适温度30℃左右、最适pH 7.0~8.0左右、Mg^(2+)和K^(+)对酶活有促进作用;重组EoCarE592能在30℃,pH 7.0,24 h内对初始浓度为200 mg/L的高效氯氟氰菊酯、甲基对硫磷和异丙威降解率分别为81.30%,83.94%和79.83%。【结论】羧酸酯酶EoCarE592能降解高效氯氟氰菊酯、甲基对硫磷和异丙威,可能参与茶尺蠖的解毒过程。本研究为环境和果蔬中农药残留的降解奠定了基础。 展开更多
关键词 茶尺蠖 羧酸酯酶 原核表达 酶活性 农药降解
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羧酸酯酶4A在鼻咽癌中的表达及其预后和免疫浸润分析
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作者 陈巧丽 周晓莹 +3 位作者 张哲 黄光武 黄轶 李萍 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第2期177-185,共9页
目的:探索羧酸酯酶4A(CES4A)在鼻咽癌(NPC)中的异常表达及其与患者预后及其免疫浸润的潜在关联。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫组织化学染色法检测CES4A在NPC组织中的mRNA和蛋白表达水平,并分析CES4A表达水平与患者临床病理... 目的:探索羧酸酯酶4A(CES4A)在鼻咽癌(NPC)中的异常表达及其与患者预后及其免疫浸润的潜在关联。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫组织化学染色法检测CES4A在NPC组织中的mRNA和蛋白表达水平,并分析CES4A表达水平与患者临床病理特征、生存时间的关系。利用R语言开展GO、KEGG及免疫相关性分析。结果:与正常鼻咽组织比较,NPC中CES4A mRNA及蛋白表达水平显著降低,但与NPC的临床病理特征参数无显著关联。基于GEO数据集、RT-qPCR、免疫组织化学染色法数据绘制受试者工作特征(ROC)曲线,曲线下面积(AUC)分别为0.850(P<0.05)、0.6654(P=0.0037)、0.8098(P=0.0019)。低表达CES4A的NPC患者预后较差(P<0.001),CES4A是NPC患者的独立预后因素(P=0.00436,HR=0.168,95%CI:0.0492~0.5730)。CES4A与B细胞的肿瘤浸润呈正相关关系。结论:CES4A在NPC中的表达下调,可能为NPC诊断及患者不良预后的可靠分子标志物,且其与B细胞的肿瘤浸润减少有关,可能是NPC潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 鼻咽癌 羧酸酯酶4A 分子标志物 免疫浸润
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家蝇羧酸酯酶MdαE7抗药性相关基因突变检测及其进化起源分析
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作者 杨婵 潘婧 +1 位作者 李梅 邱星辉 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2023年第2期88-94,共7页
家蝇是公共卫生和畜牧业的重要害虫,抗药性已成为家蝇有效控制的重要障碍。以往的研究表明,家蝇羧酸酯酶MdαE7某些位点的突变可以导致对有机磷和拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性,但我国家蝇种群MdαE7基因突变的类型、分布和不同等位基因的... 家蝇是公共卫生和畜牧业的重要害虫,抗药性已成为家蝇有效控制的重要障碍。以往的研究表明,家蝇羧酸酯酶MdαE7某些位点的突变可以导致对有机磷和拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性,但我国家蝇种群MdαE7基因突变的类型、分布和不同等位基因的分子进化关系等相关信息还非常缺乏。本研究检测了我国5个省份家蝇样品的羧酸酯酶MdαE7基因突变的类型和分布状况,并对普遍存在的251位点突变的进化做了起源分析。结果表明,我国家蝇普遍存在MdαE7 G137D和W251L/S抗性突变,不同地区的抗性等位基因频率有所不同。除了常见的G137D和W251L/S外,在我国家蝇中还发现了4个其他氨基酸替换,即Y148F、P157S、S250T和E273D。基于55条MdαE7基因片段的DNA序列,鉴定出8种不同的单倍型。单倍型的分子进化分析表明MdαE7251位点的突变具有不同的进化起源。 展开更多
关键词 家蝇 抗药性 羧酸酯酶 MdαE7 进化起源
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羧酸酯酶1和羧酸酯酶2基因表达量与体质量指数的关系及其基因多态性分析
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作者 张健雄 李丹丹 +2 位作者 胡梦梦 程雪微 董瑞华 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第1期13-19,共7页
目的通过检测健康志愿者的羧酸酯酶1(carboxylesterase 1,CES1)和羧酸酯酶2(carboxylesterase 2,CES2)的基因多态性和基因表达水平,探索CES1和CES2在代谢中的作用。方法从48例健康志愿者获得血样并提取DNA,对DNA进行二代基因测序,并提取... 目的通过检测健康志愿者的羧酸酯酶1(carboxylesterase 1,CES1)和羧酸酯酶2(carboxylesterase 2,CES2)的基因多态性和基因表达水平,探索CES1和CES2在代谢中的作用。方法从48例健康志愿者获得血样并提取DNA,对DNA进行二代基因测序,并提取总RNA检测基因表达量。使用多元线性回归分析CES1和CES2基因表达量与性别、年龄、体质量指数(body mass index,BMI)的关系。结果CES1的基因表达量为141.8(72.7,237.8),CES2的基因表达量为74.4(30.8,133.6)。多元线性回归分析中,BMI与CES2的基因表达有关,性别、年龄和BMI与CES1的基因表达无关。发现CES120个基因变异,其中10个会引起氨基酸序列改变;发现CES26个基因变异,其中2个引起氨基酸序列改变。结论发现CES2的表达水平与BMI相关,CES1的表达水平与BMI无明显相关,基因预测结果提示CES1的遗传变异可能影响其功能表达。 展开更多
关键词 羧酸酯酶 基因多态性 基因表达量 体质量指数
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ATP结合盒转运蛋白B1与羧酸酯酶1基因多态性对达比加群酯药物谷浓度的影响
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作者 张咪 陈婷 +2 位作者 刘志宏 宋洪涛 胡涛桃 《解放军药学学报》 CAS 2023年第2期100-106,共7页
目的探讨ATP结合盒转运蛋白B1(ABCB1)及羧酸酯酶1(CES1)基因多态性与服用达比加群酯的患者药物谷浓度的相关性。方法选取2018年3月-2021年11月在福州某医院诊断为非瓣膜性房颤的69例患者作为研究对象。检测患者ABCB1及CES1的单核苷酸多... 目的探讨ATP结合盒转运蛋白B1(ABCB1)及羧酸酯酶1(CES1)基因多态性与服用达比加群酯的患者药物谷浓度的相关性。方法选取2018年3月-2021年11月在福州某医院诊断为非瓣膜性房颤的69例患者作为研究对象。检测患者ABCB1及CES1的单核苷酸多态性位点以及基因型,采用抗Ⅱa因子显色法测定患者服用达比加群酯后药物的谷浓度,分析ABCB1及CES1基因多态性与谷浓度的相关性,进一步研究相关位点对谷浓度达标的影响。结果本研究共发现11个单核苷酸多态性位点,且ABCB1 rs2235013与ABCB1 rs2235033处于连锁不平衡状态(D’=0.96,r2=0.82)。但ABCB1基因多态性对达比加群谷浓度无显著影响(P>0.05)。CES1 rs2302719突变型(TG,GG)患者的达比加群谷浓度高于野生型(TT)(51.98±8.06 vs 42.44±3.88,57.71±9.06 vs 42.44±3.88),并且CES1 rs2302719突变型(TG,GG)是患者谷浓度达标的保护因素,结果具有统计学意义(P<0.05)。结论ABCB1基因多态性对达比加群谷浓度的影响还需进一步探索。CES1 rs2302719次要等位基因(G)可增加达比加群谷浓度,并且不良反应的发生率可能更低。 展开更多
关键词 非瓣膜性房颤 达比加群酯 药物谷浓度 ATP结合盒转运蛋白B1 羧酸酯酶1
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脂多糖促进H_2O_2降低羧酸酯酶1/2活性抑制肝癌HepG2细胞存活
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作者 方坤 呼晓 齐玉山 《牡丹江医学院学报》 2017年第6期4-8,共5页
目的阐明LPS对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的作用及其潜在机理。研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对人肝癌HepG2细胞中羧酸酯酶1(Human carboxylesterase 1,CES1)、羧酸酯酶2(Human carboxylesterase 2,CES2)活性和表达的影响。方法 MT... 目的阐明LPS对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的作用及其潜在机理。研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对人肝癌HepG2细胞中羧酸酯酶1(Human carboxylesterase 1,CES1)、羧酸酯酶2(Human carboxylesterase 2,CES2)活性和表达的影响。方法 MTT检测不同剂量LPS(0mg/L,1.0mg/L,3.0mg/L,5.0mg/L,10.0mg/L)与H_2O_2(0.5mm)分别处理或共孵育12h,24h,48h对细胞增殖的影响。采用Tunel技术检测LPS对细胞凋亡的影响。酶学测定LPS对HepG2细胞中HCEs酶活性的影响。采用Real-time PCR和Western blot检测HepG2细胞中CES1、CES2在mRNA水平和蛋白水平变化。结果 LPS和H_2O_2(0.5mm)单独处理对HepG2细胞增殖和凋亡无显著影响。LPS与H_2O_2(0.5mm)共孵育剂量依赖性的降低HepG2细胞增殖,促进HepG2细胞凋亡,降低HCEs酶活性。此外,LPS和H_2O_2(0.5mm)共孵育可明显降低肝癌HepG2细胞中CES1和CES2的mRNA和蛋白水平的表达,降低趋势呈现剂量-效应关系。结论我们发现LPS和H_2O_2(0.5mm)共孵育能够显著降低细胞增殖,促进细胞凋亡。此机制可能与LPS明显降低肝癌HepG2细胞中CES1和CES2的表达和活性有关。提示肝肿瘤细胞在炎症状态下,羧酸酯酶对药物代谢的能力下降。本研究为临床肝癌治疗提供新的理论依据和治疗靶点。 展开更多
关键词 脂多糖(LPS) 肝癌HepG2细胞(HepG2) 羧酸酯酶1(CES1) 羧酸酯酶2(CES2)
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杀虫药剂和植物次生性物质对棉铃虫羧酸酯酶的诱导作用 被引量:38
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作者 高希武 赵颖 +2 位作者 王旭 董向丽 郑炳宗 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S1期7-13,共7页
棉铃虫Helicoverpaarmigera中肠羧酸酯酶(CarEs)比活力随幼虫发育阶段呈有规律的变化。5日龄以前CarEs比活力增长比较缓慢,5日龄以后CarEs比活力快速增长,8日龄开始CarEs比活力下降,直... 棉铃虫Helicoverpaarmigera中肠羧酸酯酶(CarEs)比活力随幼虫发育阶段呈有规律的变化。5日龄以前CarEs比活力增长比较缓慢,5日龄以后CarEs比活力快速增长,8日龄开始CarEs比活力下降,直到预蛹期,CarEs比活力又开始上升。用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离到的9条同功酶带中,E2、E4、E5、E6、E7和E9对β乙酸萘酯(βNA)的水解活性高于对α乙酸萘酯(αNA),E1、E3、和E8对上述两种底物的水解活性正好相反,对αNA活性高于对βNA。低剂量的对硫磷、马拉硫磷、倍硫磷、增效磷(SV1)、灭多威和溴氰菊酯对棉铃虫中肠CarEs比活力和对底物的亲和力具有明显的影响。药剂处理后48h,CarEs的比活力明显降低,对底物的亲和力则与药剂的种类有关。马拉硫磷处理后48h,在观察到的6条主要同功酶带中,E3的活性明显降低,其次是E6、E2和E1;而E5的活性则明显升高,E4的活性也有所升高。用含001%的芸香苷、2十三烷酮和槲皮素的人工饲料饲养棉铃虫经2代或7代后,CarEs比活力均明显升高。 展开更多
关键词 棉铃虫 羧酸酯酶 杀虫药剂 植物次生性物质
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多杀菌素对甜菜夜蛾多酚氧化酶和羧酸酯酶的影响 被引量:36
8
作者 王光峰 张友军 +3 位作者 柏连阳 吴青君 徐宝云 朱国仁 《农药学学报》 CAS CSCD 2003年第2期40-46,共7页
报道了多杀菌素对甜菜夜蛾 Sp odopetera exigua(Hübner)多酚氧化酶 (PPO)和羧酸酯酶(Car E)的影响 ,多杀菌素对甜菜夜蛾表现了很高的毒力 ,对三龄幼虫的 L C50 值为 0 .80 mg/ L。离体条件下 ,1.0× 10 -3~ 0 .5 mg/ L多杀... 报道了多杀菌素对甜菜夜蛾 Sp odopetera exigua(Hübner)多酚氧化酶 (PPO)和羧酸酯酶(Car E)的影响 ,多杀菌素对甜菜夜蛾表现了很高的毒力 ,对三龄幼虫的 L C50 值为 0 .80 mg/ L。离体条件下 ,1.0× 10 -3~ 0 .5 mg/ L多杀菌素对甜菜夜蛾多酚氧化酶的抑制率超过 5 0 % ,且表现为随药剂浓度的增加抑制能力增强的趋势。活体条件下 ,0 .1~ 0 .8mg/ L多杀菌素在处理的早期诱导虫体内多酚氧化酶的活性增加 ,但 12 h后却显著抑制多酚氧化酶的活性。 1.0× 10 -3~ 1.0 mg/ L多杀菌素在离体条件下对羧酸酯酶不表现任何抑制作用 。 展开更多
关键词 多杀菌素 甜菜夜蛾 多酚氧化酶 羧酸酯酶
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杀虫剂亚致死剂量对小菜蛾羧酸酯酶的影响 被引量:31
9
作者 夏冰 石泰 +1 位作者 梁沛 高希武 《农药学学报》 CAS CSCD 2002年第1期23-27,共5页
就阿维菌素和高效氯氰菊酯亚致死剂量对小菜蛾 Plutella xylostella L inneae羧酸酯酶(Car E)活性的影响进行了研究。用亚致死剂量的阿维菌素和高效氯氰菊酯分别处理阿维菌素敏感和抗性小菜蛾 ,使敏感品系 Car E比活力上升 ,抗性品系 Ca... 就阿维菌素和高效氯氰菊酯亚致死剂量对小菜蛾 Plutella xylostella L inneae羧酸酯酶(Car E)活性的影响进行了研究。用亚致死剂量的阿维菌素和高效氯氰菊酯分别处理阿维菌素敏感和抗性小菜蛾 ,使敏感品系 Car E比活力上升 ,抗性品系 Car E比活力下降。酶动力学研究表明 ,两种药剂亚致死剂量处理对小菜蛾 Car E与底物 α- NA亲和力的影响存在差异。在敏感品系中 ,阿维菌素和高效氯氰菊酯处理前后 Car E的 Km 值无明显变化 ;抗性品系中 ,用阿维菌素亚致死剂量处理后 ,小菜蛾体内 Car E的 Km 值显著高于对照 ,即其对 α- NA的亲和力比对照组明显降低 ,高效氯氰菊酯处理组 Car E的 Km 值与对照相比无明显变化。 展开更多
关键词 杀虫剂 亚致死剂量 小菜蛾 羧酸酯酶 影响 阿维菌素 高效氯氰菊酯
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繁殖寄主对赤眼蜂羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的影响 被引量:20
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作者 宗静 张帆 +3 位作者 孙光芝 李长春 高希武 郑炳宗 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第S1期70-76,共7页
通过测定赤眼蜂Trichogramma羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的活性、对底物的亲和力以及对抑制剂的敏感度研究了繁殖寄主对松毛虫赤眼蜂T .dendrolimi和螟黄赤眼蜂T .chilonis的影响。柞蚕卵和米蛾卵繁殖的赤眼蜂羧酸酯酶对底物的亲和力有不同... 通过测定赤眼蜂Trichogramma羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的活性、对底物的亲和力以及对抑制剂的敏感度研究了繁殖寄主对松毛虫赤眼蜂T .dendrolimi和螟黄赤眼蜂T .chilonis的影响。柞蚕卵和米蛾卵繁殖的赤眼蜂羧酸酯酶对底物的亲和力有不同程度的影响 ,柞蚕卵繁殖的赤眼蜂羧酸酯酶对α 乙酸萘酯或 β 乙酸萘酯的亲和力最高是米蛾卵的 2倍以上。繁殖寄主对乙酰胆碱酯酶对底物亲和力没有明显的影响。米蛾卵繁殖的松毛虫赤眼蜂羧酸酯酶活性明显高于柞蚕卵繁殖的种群 ,而米蛾卵繁殖的螟黄赤眼蜂种群羧酸酯酶的活性明显低于柞蚕卵繁殖的种群。用柞蚕卵繁殖的松毛虫赤眼蜂种群对对氧磷的敏感度明显低于米蛾卵繁殖的种群 ,而增效磷则正好相反。繁殖寄主对松毛虫赤眼蜂吉林种群乙酰胆碱酯酶对DDVP和毒扁豆碱的敏感度没有明显的影响 ,而在松毛虫赤眼蜂广东种群和螟黄赤眼蜂中 。 展开更多
关键词 赤眼蜂 繁殖寄主 羧酸酯酶 乙酰胆碱酯酶 杀虫药剂
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杨树次生代谢物质对光肩星天牛羧酸酯酶和谷胱甘肽S-转移酶的影响 被引量:14
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作者 张彦广 黄大庄 +2 位作者 王志刚 阎晔辉 尹家凤 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第6期123-128,共6页
Activities of carboxylesterase and glutathione S transferase in Anoplophora glabripennis larvae feeding on eight different kinds of poplar trees were tested. The results showed that the activities of the two enzymes w... Activities of carboxylesterase and glutathione S transferase in Anoplophora glabripennis larvae feeding on eight different kinds of poplar trees were tested. The results showed that the activities of the two enzymes were significantly different when the larvae feeding on different poplar trees. The contents of fourteen secondary metabolites in eight kinds of poplar trees were also tested with the method of high pressure liquid chromatography (HPLC). Stepwise regression analysis was carried out to test the relationship between the activities of the enzymes and secondary metabolites of poplar trees. The analysis results demonstrated that the contents of benzoic acid and catechin decreased together with the increase of carboxylesterase activity while the contents of catechol increased, but the content of p hydroxybenzoic acid decreased together with the increasing of glutathione S transferase activity while the content of phenol, coumaric acid, syringic, salicylic acid and salicin in poplar trees increased. 展开更多
关键词 光肩星天牛 羧酸酯酶 谷胱甘肽S-转移酶 杨树 次生代谢物质 相互关系
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抗性品系棉蚜乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的变异 被引量:25
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作者 李飞 韩召军 唐波 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期578-583,共6页
用浸叶法测定了采自我国不同地区 (泰安、莱阳、南京、北京和安阳 )的棉蚜品系Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ对久效磷、甲胺磷、抗蚜威和灭多威等杀虫剂的抗性水平 ,各棉蚜品系对杀虫剂的抗性依次为Ⅴ >Ⅳ >Ⅲ ,Ⅱ >Ⅰ。进一步研究表明 ... 用浸叶法测定了采自我国不同地区 (泰安、莱阳、南京、北京和安阳 )的棉蚜品系Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ对久效磷、甲胺磷、抗蚜威和灭多威等杀虫剂的抗性水平 ,各棉蚜品系对杀虫剂的抗性依次为Ⅴ >Ⅳ >Ⅲ ,Ⅱ >Ⅰ。进一步研究表明 ,Ⅴ和Ⅳ品系棉蚜乙酰胆碱酯酶对杀虫剂的敏感性显著下降 ,Ⅱ品系次之 ,Ⅲ和Ⅰ品系接近于敏感品系。Ⅴ和Ⅳ品系乙酰胆碱酯酶的Km值显著下降 ,表明酶发生了质的变化。不同棉蚜抗性品系的酯酶 (全酯酶和羧酸酯酶 )活性均显著升高 ,其中Ⅲ品系的酯酶活力为Ⅱ品系的 2倍。Ⅴ品系羧酸酯酶Km值达 2 4 6 0 4 μmol L ,而Ⅳ品系仅为 84 4 μmol L ,该两个品系羧酸酯酶发生了质的变化。研究结果表明 ,不同抗性程度的棉蚜品系均存在代谢抗性和靶标抗性。低抗水平的棉蚜品系 ,以代谢抗性为主 ,靶标抗性为辅 ;中抗水平的棉蚜品系 ,抑或由于解毒代谢酶的活性显著增强 ,也可能由于靶标的敏感性显著下降 ;而高抗水平的棉蚜品系 。 展开更多
关键词 棉蚜 抗性 乙酰胆碱酯酶 羧酸酯酶 抑制中浓度 米氏常数
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白背飞虱羧酸酯酶与乙酰胆碱酯酶的体躯与亚细胞分布特征 被引量:11
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作者 姚洪渭 蒋彩英 +1 位作者 叶恭银 程家安 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期5-10,共6页
白背飞虱 Sogatella furcifera( Horváth)羧酸酯酶 ( Ca E)和乙酰胆碱酯酶 ( Ach E)的体躯及亚细胞分布特征研究结果表明 ,若虫头、胸、腹部中 Ca E活性分别占 50 .8% ,2 6.0 %和 2 3.2 % ,雌成虫各占33.0 % ,2 3.5%和 4 3.5% ,雄... 白背飞虱 Sogatella furcifera( Horváth)羧酸酯酶 ( Ca E)和乙酰胆碱酯酶 ( Ach E)的体躯及亚细胞分布特征研究结果表明 ,若虫头、胸、腹部中 Ca E活性分别占 50 .8% ,2 6.0 %和 2 3.2 % ,雌成虫各占33.0 % ,2 3.5%和 4 3.5% ,雄成虫各占 2 6.5% ,2 3.2 %和 50 .3%。若虫、雌雄成虫的 Ach E活性均主要分布于头部 ,各占总活性的 87.7% ,71.1%和 74 .7%。差速离心结果表明 ,该飞虱 Ca E主要位于胞质溶胶层中 ,其活性占 57.0 %~ 66.9% ;Ach E活性在胞质溶胶层中仅占 5.8%~ 17.0 % ,而 62 .8%~ 76.9%的活性则分布于线粒体层、细胞核和细胞碎片层中。 展开更多
关键词 白背飞虱 羧酸酯酶 乙酰胆碱酯酶 亚细胞分布 抗药性 水稻害虫
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羧酸酯酶介导的小菜蛾对氟虫腈的抗性 被引量:9
14
作者 任娜娜 谢苗 +4 位作者 尤燕春 李建玉 陈伟军 程学敏 尤民生 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期288-296,共9页
【目的】羧酸酯酶(carboxylesterases,Car Es)是昆虫重要的解毒代谢酶之一,可以介导靶标昆虫对多种杀虫剂的代谢抗性。本研究检测了羧酸酯酶对小菜蛾Plutella xylostella抗药性的介导功能,旨在阐明羧酸酯酶在小菜蛾代谢解毒中的生理生... 【目的】羧酸酯酶(carboxylesterases,Car Es)是昆虫重要的解毒代谢酶之一,可以介导靶标昆虫对多种杀虫剂的代谢抗性。本研究检测了羧酸酯酶对小菜蛾Plutella xylostella抗药性的介导功能,旨在阐明羧酸酯酶在小菜蛾代谢解毒中的生理生化和分子机理。【方法】采用点滴法测定氟虫腈对小菜蛾敏感种群和抗氟虫腈种群的毒力,以及羧酸酯酶抑制剂磷酸三苯酯(triphenyl phosphate,TPP)对氟虫腈的增效作用;以LC30和LC50浓度的氟虫腈处理抗性小菜蛾,测定药剂处理后Car Es酶活性的变化;利用qRT-PCR技术分析Pxae22和Pxae31两个基因在小菜蛾不同发育阶段、组织和种群的表达模式;利用dsRNA干扰Pxae22和Pxae31后观察基因的表达变化和小菜蛾3龄幼虫对药剂敏感性的变化。【结果】TPP可以削弱小菜蛾3龄幼虫对氟虫腈的抗性,增效倍数约为6倍;使用较低剂量(LC30和LC50)氟虫腈处理小菜蛾3龄幼虫后,处理组Car Es比活力明显高于对照,提示氟虫腈对小菜蛾Car Es活性具有诱导作用。对羧酸酯酶基因Pxae22和Pxae31在小菜蛾不同发育阶段、4龄幼虫不同组织和不同种群3龄幼虫中的表达模式分析发现,这两个基因在小菜蛾4龄幼虫中的表达量最高;在4龄幼虫中以中肠组织中的表达量较高,头、表皮、脂肪体中的表达量很低;抗性种群中的表达量显著高于敏感种群。通过干扰Pxae22和Pxae31后的qRT-PCR验证,两个基因的表达量均显著降低,进一步的氟虫腈毒力测定发现,干扰Pxae22和Pxae31后的小菜蛾3龄幼虫对氟虫腈的敏感性分别增加了1.63倍和1.73倍。【结论】羧酸酯酶在小菜蛾对氟虫腈解毒代谢中具有重要作用;Pxae22和Pxae31是小菜蛾的两个抗性相关基因,其表达水平的变化直接影响小菜蛾对氟虫腈的敏感性。 展开更多
关键词 小菜蛾 抗药性 羧酸酯酶 介导抗性 表达水平 RNA干扰
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有机磷药剂对棉铃虫羧酸酯酶的抑制作用 被引量:15
15
作者 王旭 高希武 +1 位作者 郑炳宗 李海涛 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S1期14-20,共7页
该文分别以α乙酸萘酯和β乙酸萘酯为底物比较了22种常用有机磷药剂对棉铃虫Helicoverpaarmigera羧酸酯酶的抑制作用。结果表明,棉铃虫羧酸酯酶对底物空间构型比较敏感,敌敌畏、对氧磷、地亚农、喹硫磷、马... 该文分别以α乙酸萘酯和β乙酸萘酯为底物比较了22种常用有机磷药剂对棉铃虫Helicoverpaarmigera羧酸酯酶的抑制作用。结果表明,棉铃虫羧酸酯酶对底物空间构型比较敏感,敌敌畏、对氧磷、地亚农、喹硫磷、马拉氧磷、异稻瘟净、增效磷、杀螟松抑制棉铃虫羧酸酯酶的能力较强。有机磷药剂抑制棉铃虫羧酸酯酶能力与其化学结构显著相关,氧化型的有机磷抑制能力明显强于硫代型的有机磷;乙氧基取代的有机磷抑制能力明显强于甲氧基取代的有机磷。 展开更多
关键词 有机磷酸酯 羧酸酯酶 抑制中浓度
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家蚕羧酸酯酶基因克隆及差异表达 被引量:7
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作者 高贵田 陈克平 +2 位作者 姚勤 王林玲 陈慧卿 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期930-937,共8页
家蚕浓核病毒(Bombyx moridensonucleosis virus,BmDNV)是蚕业生产上危害比较严重的一类病毒。用完全抗浓核病中国镇江株(BmDNV-Z)的家蚕品系秋丰、感性品系华八及以华八为轮回亲本回交8代和自交8代构建的近等基因系BC8为材料,采用mRNA... 家蚕浓核病毒(Bombyx moridensonucleosis virus,BmDNV)是蚕业生产上危害比较严重的一类病毒。用完全抗浓核病中国镇江株(BmDNV-Z)的家蚕品系秋丰、感性品系华八及以华八为轮回亲本回交8代和自交8代构建的近等基因系BC8为材料,采用mRNA荧光差显技术首次分离克隆了家蚕羧酸酯酶(B.moricarboxylesterase,BmCarE)基因全长cDNA,并用实时荧光定量PCR检测了添毒后12h、36h、72h BmCarE在感、抗BmDNV-Z家蚕品系中肠内的表达差异。结果表明:(1)添毒后12h不同品系家蚕中肠BmCarE表达差异最大,抗性品系BC8和秋丰分别是感性品系华八的17.714倍和3.602倍,三者彼此间的差异达到极显著水平;(2)同一品系添毒后12h与添清水后12hBmCarE表达也有较大差异,BC8添毒是BC8添清水的15.08倍,秋丰添毒是秋丰添清水的3.39倍,差异达到极显著水平,而华八添毒和添清水的BmCarE表达量均低,二者差异不显著;(3)同一品系添毒后不同时间BmCarE表达也有较大差异,BC8和秋丰添毒后12h BmCarE表达量最高,显著高于各自添毒后36h和72h表达水平,而添毒后36h与72h表达无显著差异;华八添毒后12h、36h和72h,BmCarE表达无显著差异。上述结果提示羧酸酯酶基因可能与家蚕抗浓核病毒有一定关系。 展开更多
关键词 家蚕 羧酸酯酶基因 表达差异 近等基因系 RT-PCR
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四种杀虫剂对两种书虱羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的抑制作用 被引量:7
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作者 程伟霞 王进军 +2 位作者 赵志模 丁伟 王梓英 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期321-326,共6页
选用有机磷类杀虫剂 (敌敌畏、毒死蜱、对氧磷 )和氨基甲酸酯类杀虫剂 (丁硫克百威 ) ,通过生物测定 (药膜法 )和生化测定 (比色法 )比较了嗜卷书虱和嗜虫书虱对所选药剂的敏感差异性。根据LC50 可知嗜虫书虱对所选药剂比嗜卷书虱敏感... 选用有机磷类杀虫剂 (敌敌畏、毒死蜱、对氧磷 )和氨基甲酸酯类杀虫剂 (丁硫克百威 ) ,通过生物测定 (药膜法 )和生化测定 (比色法 )比较了嗜卷书虱和嗜虫书虱对所选药剂的敏感差异性。根据LC50 可知嗜虫书虱对所选药剂比嗜卷书虱敏感。离体酶活性分析结果显示嗜卷书虱和嗜虫书虱的羧酸酯酶只对敌敌畏敏感 ,且嗜卷书虱比嗜虫书虱更敏感 ;4种药剂对乙酰胆碱酯酶均有强烈的抑制作用 ,同样是嗜卷书虱比嗜虫书虱敏感。乙酰胆碱酯酶的动力学研究结果和离体酶活性测定相一致。聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示 ,4种杀虫剂离体条件下对 2种书虱的酯酶同工酶的抑制能力有明显差异 ,其中敌敌畏的抑制力最强 ;但对不同同功酶的抑制趋势 (对大分子的抑制似乎较强 )是一致的。酶的敏感性分析结果与生测结果比较表明 ,2种书虱的耐药力差异与其乙酰胆碱酯酶和酯酶对药剂的敏感性无关。如要弄清耐药力机制 ,需做进一步研究。 展开更多
关键词 杀虫剂 书虱 羧酸酯酶 乙酰胆碱酯酶 抑制作用
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取食不同寄主棉蚜的羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶特性比较 被引量:19
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作者 李飞 韩召军 吴智锋 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期57-60,共4页
以棉花、木槿和南瓜 3种寄主作物隔离饲养不同抗性程度的棉蚜 (171B、RR1和RR2 ) ,取食不同寄主后棉蚜羧酸酯酶的米氏常数 (Km)值无显著差异 ,而各品系之间酶的最大反应速度 (Vmax)差异显著。与取食棉花的棉蚜各品系相比 ,取食木槿的各... 以棉花、木槿和南瓜 3种寄主作物隔离饲养不同抗性程度的棉蚜 (171B、RR1和RR2 ) ,取食不同寄主后棉蚜羧酸酯酶的米氏常数 (Km)值无显著差异 ,而各品系之间酶的最大反应速度 (Vmax)差异显著。与取食棉花的棉蚜各品系相比 ,取食木槿的各品系乙酰胆碱酯酶对甲胺磷的敏感性均有所下降 ;取食南瓜的各品系以其抗性不同有所差异 ,抗性最高的RR2 品系的敏感性上升 ,而RR1品系的敏感性有所下降 ,171B品系的敏感性无显著性变化。在不同处理之间 ,棉蚜AChE的酶学特性 (Km 值和Vmax)也发生了不同程度的改变 ,文中对可能导致这种变化的原因进行了讨论分析。 展开更多
关键词 棉蚜 羧酸酯酶 乙酰胆碱酯酶 特性比较 寄主作物 酶学特性
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寄主植物对松墨天牛的营养效应及对体内酯酶与羧酸酯酶活性的影响 被引量:10
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作者 杨建霞 郝德君 +1 位作者 周曙东 戴华国 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第1期97-101,共5页
分别用马尾松、雪松、火炬松、湿地松和黑松饲养松墨天牛,研究不同寄主植物对松墨天牛补充营养期的营养效应以及对体内酯酶与羧酸酯酶活性的影响。结果表明:不同寄主植物对补充营养期松墨天牛的营养效应、酯酶与羧酸酯酶的活性有显著影... 分别用马尾松、雪松、火炬松、湿地松和黑松饲养松墨天牛,研究不同寄主植物对松墨天牛补充营养期的营养效应以及对体内酯酶与羧酸酯酶活性的影响。结果表明:不同寄主植物对补充营养期松墨天牛的营养效应、酯酶与羧酸酯酶的活性有显著影响。用马尾松和雪松饲养的试虫,羽化后第5天体质量开始增加;其余3种树种饲养的试虫,至第7天体质量才开始增加。取食马尾松的松墨天牛雌、雄成虫,其相对取食量、相对代谢率和食物利用率均高于取食其他4种寄主植物的试虫;取食马尾松的松墨天牛雌、雄成虫体内酯酶和羧酸酯酶的活性也显著高于取食其他寄主的试虫;试验结果表明:马尾松是松墨天牛补充营养期的最适寄主。 展开更多
关键词 松墨天牛 寄主植物 营养效应 酯酶 羧酸酯酶
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