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大肠杆菌表达耐热DNA聚合酶的纯化和鉴定 被引量：1
1
作者 葛银林 邹承淑 +1 位作者 闫梅英 邵济钧 《青岛医学院学报》 1998年第4期235-236,共2页
目的探讨工程菌表达的耐热ＤＮＡ聚合酶的纯化方法。②方法收集ＩＰＴＧ诱导带有耐热ＤＮＡ聚合酶（ＴＤ聚合酶）基因表达质粒的工程菌株ＤＨ－ＴＤ４，用溶菌酶裂解，６０℃处理后，上清液用硫酸铵沉淀，根据溶解度差异进行粗分级，然... 目的探讨工程菌表达的耐热ＤＮＡ聚合酶的纯化方法。②方法收集ＩＰＴＧ诱导带有耐热ＤＮＡ聚合酶（ＴＤ聚合酶）基因表达质粒的工程菌株ＤＨ－ＴＤ４，用溶菌酶裂解，６０℃处理后，上清液用硫酸铵沉淀，根据溶解度差异进行粗分级，然后进行离子交换层析细分级，并经聚合酶链式反应（ＰＣＲ扩增）鉴定其活性。③结果纯化的ＴＤ聚合酶具有良好的聚合活性。④结论溶解度差异与离子交换层析是工程菌表达的耐热ＤＮＡ聚合酶纯化的主要步骤。 展开更多
关键词 纯化 大肠杆菌 聚合酶链反应 耐热dna聚合酶
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重组耐热DNA聚合酶的中试制备及鉴定 被引量：1
2
作者 张继东 刘国良 +1 位作者 许海鸿 曹晓静 《药物生物技术》 CAS CSCD 1999年第1期32-35,共4页
耐热ＤＮＡ聚合酶在大肠杆菌中得到表达。在实验室表达、鉴定分析的基础上，进行了中试制备及鉴定。１０批酶的中试结果表明，该工程菌复活率达到１００％，表达性能稳定，每１００ｍｌ细菌培养物产酶平均达到１．７６×１０６Ｕ，... 耐热ＤＮＡ聚合酶在大肠杆菌中得到表达。在实验室表达、鉴定分析的基础上，进行了中试制备及鉴定。１０批酶的中试结果表明，该工程菌复活率达到１００％，表达性能稳定，每１００ｍｌ细菌培养物产酶平均达到１．７６×１０６Ｕ，比活平均达到２．６２×１０４Ｕ／ｍｇ蛋白。经初步应用，能够催化ＰＣＲ扩增反应。 展开更多
关键词 耐热dna聚合酶 制备 鉴定
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地芽孢杆菌属DYth03 DNA聚合酶基因的克隆、表达及性质分析
3
作者 罗淑娅 李侃 徐丽美 《台湾海峡》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期17-20,共4页
从东太平洋热液区E53站位的深海沉积物样品中分离出1株能在65℃生长的嗜热菌(DYth03).该菌的16S rDNA序列与地芽孢杆菌属(Geobacillus)内各种之间的同源性为98%以上.克隆得到DYth03的DNA聚合酶基因(DYth-pol),序列分析表明该基因全长为2... 从东太平洋热液区E53站位的深海沉积物样品中分离出1株能在65℃生长的嗜热菌(DYth03).该菌的16S rDNA序列与地芽孢杆菌属(Geobacillus)内各种之间的同源性为98%以上.克隆得到DYth03的DNA聚合酶基因(DYth-pol),序列分析表明该基因全长为2 631 bp,G+C含量为55.5%,推测编码为876个氨基酸,与BstDNApolI的同源性最高(达98%).将该聚合酶基因克隆到pTTQ-h表达载体上,并在大肠杆菌DH1中进行表达.对纯化到的表达产物进行酶活性测定,结果表明该酶具有聚合酶活性和5’-3’外切酶活性. 展开更多
关键词 海洋生物学 嗜热菌 地芽孢杆菌属(Geobacillus) 16S rdna 耐热dna聚合酶 基因表达 东太平洋
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实时荧光定量聚合酶链反应技术及应用 被引量：2
4
作者 赵紫琴 陆凤先 《中国药物与临床》 CAS 2006年第4期248-251,共4页
关键词 实时荧光定量聚合酶链反应技术 耐热dna聚合酶 Green PCR) RQ-PCR 荧光标记引物 dna嵌合剂 杂交探针 SYBR CHAIN
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PCR技术与基因诊断
5
作者 化罗明 臧爱民 李坚如 《医学研究与教育》 CAS 1997年第1期47-49,41,共4页
PCR技术即多聚酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),是近年发展起来的一种体外扩增特异DNA片段的技术。被誉为是当代分子生物学技术最重要的发展之一。自1985年Mullis建立PCR技术以来,短短几年间已广泛用于分子生物学、微生物学、遗... PCR技术即多聚酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),是近年发展起来的一种体外扩增特异DNA片段的技术。被誉为是当代分子生物学技术最重要的发展之一。自1985年Mullis建立PCR技术以来,短短几年间已广泛用于分子生物学、微生物学、遗传学、法医学以及肿瘤研究等生命科学领域,Mullis也因这一发明而获得1993年诺贝尔化学奖。 展开更多
关键词 PCR技术 基因诊断 多聚酶链式反应 特异性 分子生物学技术 诺贝尔化学奖 特异dna片段 耐热dna聚合酶 PCR产物 遗传学
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本刊外文书写正斜体的要求
6
《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期710-710,共1页
生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体，属的首字母大写，余用小写，如：Helicobacter pylori，Escherichia coli。属以上的名称用拉丁文正体。限制性内切酶前3个字母用斜体，后面的字母和编号用正体，如：EcoR Ⅰ，Hin... 生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体，属的首字母大写，余用小写，如：Helicobacter pylori，Escherichia coli。属以上的名称用拉丁文正体。限制性内切酶前3个字母用斜体，后面的字母和编号用正体，如：EcoR Ⅰ，HindⅢ，Xba Ⅰ，Sau3A Ⅰ。耐热DNA聚合酶用斜体表示，首字母大写，如：Taq、Pfu、Tth DNA聚合酶。氨基酸和碱基的缩写：氨基酸缩写用3个字母表示时，仅第1个字母大写，其余小写，正体。碱基缩写为大写正体。 展开更多
关键词 HELICOBACTER 耐热dna聚合酶 书写 外文 限制性内切酶 HindⅢ 氨基酸 生物学
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本刊外文书写正斜体的要求
7
《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期807-807,共1页
生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体,属的首字母大写,余用小写,如：Helicobacter pylori,Escherichiacoli。属以上的名称用拉丁文正体。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编号用正体,如：EcoRⅠ,HindⅢ,XbaⅠ,... 生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体,属的首字母大写,余用小写,如：Helicobacter pylori,Escherichiacoli。属以上的名称用拉丁文正体。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编号用正体,如：EcoRⅠ,HindⅢ,XbaⅠ,Sau3AⅠ。耐热DNA聚合酶用斜体表示,首字母大写,如：Taq、Pfu、TthDNA聚合酶。 展开更多
关键词 耐热dna聚合酶 书写 外文 限制性内切酶 EcoRⅠ HindⅢ XbaⅠ 生物学
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本刊外文书写正斜体的要求
8
作者 本刊编辑部 《海军医学杂志》 2013年第5期299-299,共1页
生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体，属的首字母大写，余用小写，如：Helicobacter pylori，Escherichia oli。属以上的名称用拉丁文正体。 限制性内切酶前3个字母用斜体，后面的字母和编号用正体，如：EcoR Ⅰ、Hind... 生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体，属的首字母大写，余用小写，如：Helicobacter pylori，Escherichia oli。属以上的名称用拉丁文正体。 限制性内切酶前3个字母用斜体，后面的字母和编号用正体，如：EcoR Ⅰ、Hind Ⅲ、XbaⅠ、Sau3AⅠ。 耐热DNA聚合酶用斜体表示，首字母大写，如：Taq、Pfu、Tth DNA聚合酶。 氨基酸和碱基的缩写：氨基酸缩写用3个字母表示时，仅第1个字母大写，其余小写，正体。碱基缩写为大写正体。 展开更多
关键词 耐热dna聚合酶 书写 外文 限制性内切酶 XbaⅠ 氨基酸 生物学 拉丁文
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