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聚蔗糖对猪精液冷冻保存效果的影响
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作者 王芳 马红 刘娣 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期224-227,共4页
为研究聚蔗糖对猪精液冷冻保存效果的影响,本实验分别在基础稀释液中添加不同浓度(0、10、20、30、40、50μg/mL)的聚蔗糖,检测冷冻后精子的活率、线粒体活性、质膜完整性、顶体完整性、DNA完整性,分析聚蔗糖对大白猪精液的冷冻保存效... 为研究聚蔗糖对猪精液冷冻保存效果的影响,本实验分别在基础稀释液中添加不同浓度(0、10、20、30、40、50μg/mL)的聚蔗糖,检测冷冻后精子的活率、线粒体活性、质膜完整性、顶体完整性、DNA完整性,分析聚蔗糖对大白猪精液的冷冻保存效果。结果表明:与对照组相比,20、30、40、50μg/mL聚蔗糖组冻后猪精子的活率显著提高;20、30、40μg/mL聚蔗糖组的线粒体活性显著提高;10、20、30、40μg/mL聚蔗糖组的质膜完整性显著提高;20、30、40、50μg/mL聚蔗糖组的顶体完整性显著提高;10、20、30、40、50μg/mL聚蔗糖组的DNA完整性显著提高。本实验结果说明在基础稀释液中添加30μg/mL的聚蔗糖能有效提高猪精液的冷冻保存效果。 展开更多
关键词 聚蔗糖 精液 冷冻保存 精子质量
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聚蔗糖水凝胶的制备及其在药物控制释放中的应用 被引量:1
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作者 张春艳 杨华 王力升 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第23期14361-14363,共3页
[目的]研究聚蔗糖水凝胶的制备工艺,并考察制备工艺对溶胀度和牛血清蛋白(BSA)释放性能的影响。[方法]以环氧氯丙烷为交联剂,在碱性条件下制备聚蔗糖水凝胶,用BSA作为模型药物考察其释放性能。[结果]当聚蔗糖溶液浓度为16.7 g/L,交联剂... [目的]研究聚蔗糖水凝胶的制备工艺,并考察制备工艺对溶胀度和牛血清蛋白(BSA)释放性能的影响。[方法]以环氧氯丙烷为交联剂,在碱性条件下制备聚蔗糖水凝胶,用BSA作为模型药物考察其释放性能。[结果]当聚蔗糖溶液浓度为16.7 g/L,交联剂用量为0.85 mol/L,反应温度为45℃,反应时间为5 h时,制得的聚蔗糖水凝胶弹性和硬度较好,其溶胀度在5.5~7.5。聚蔗糖水凝胶对BSA的释放性能表明,聚蔗糖水凝胶的交联程度决定BSA的释放速率,适当增加聚蔗糖水凝胶的交联程度有利于药物的缓慢释放。[结论]可以通过调控聚蔗糖水凝胶的溶胀度调节包埋在此水凝胶中BSA的释放速率。 展开更多
关键词 聚蔗糖水凝胶 制备 溶胀度 牛血清蛋白 控制释放
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制备条件对聚蔗糖微球粒径及溶胀度的影响
3
作者 张春艳 《广西科学》 CAS 2013年第3期254-257,共4页
为了研究聚蔗糖微球的制备工艺及其溶胀性能,以聚蔗糖Ficoll-400为原料,环氧氯丙烷为交联剂,利用反相悬浮聚合法制备聚蔗糖微球,考察聚蔗糖水溶液浓度、交联剂用量、表面活性剂用量、反应温度和反应时间等制备条件对聚蔗糖微球粒径... 为了研究聚蔗糖微球的制备工艺及其溶胀性能,以聚蔗糖Ficoll-400为原料,环氧氯丙烷为交联剂,利用反相悬浮聚合法制备聚蔗糖微球,考察聚蔗糖水溶液浓度、交联剂用量、表面活性剂用量、反应温度和反应时间等制备条件对聚蔗糖微球粒径和溶胀度的影响。结果显示:聚蔗糖水溶液浓度范围20%~25%,乳化剂浓度范围3.3%~4.9%,反应温度范围60-70℃,反应时间1.5~2h时聚蔗糖微球成球性好,粒度分布均匀;聚蔗糖微球的溶胀性能也受制备条件的影响,其溶胀度9.81~20.77,表明其具有较好的溶胀性能。 展开更多
关键词 聚蔗糖微球 制备 粒径 溶胀度
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添加阿拉伯半乳聚糖或聚蔗糖对牛取样胚胎冷冻效果的影响 被引量:2
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作者 韩伟 冯春涛 +4 位作者 毕江华 陈龙 刘潇 裴燕 余文莉 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第8期133-136,共4页
胚胎取样后由于透明带受损、细胞数减少使得冷冻存活率低于常规胚胎,本试验通过在冷冻液中添加聚蔗糖和阿拉伯半乳聚糖分析其对取样胚胎冷冻效果的影响。通过将各种冷冻液的胚胎回收率、培养24和48h发育率同对照组进行比较,结果发现,在... 胚胎取样后由于透明带受损、细胞数减少使得冷冻存活率低于常规胚胎,本试验通过在冷冻液中添加聚蔗糖和阿拉伯半乳聚糖分析其对取样胚胎冷冻效果的影响。通过将各种冷冻液的胚胎回收率、培养24和48h发育率同对照组进行比较,结果发现,在阿拉伯半乳聚糖系列冷冻液中,0.03EAS1冷冻效果最好;在聚蔗糖系列冷冻液中,0.6EFS1冷冻效果最好,且移植妊娠结果同培养结果一致。 展开更多
关键词 取样胚胎 阿拉伯半乳 聚蔗糖 冷冻液
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添加阿拉伯半乳聚糖或聚蔗糖对取样体外胚胎冷冻效果的研究
5
作者 韩伟 毕江华 +4 位作者 冯春涛 陈龙 刘潇 裴燕 余文莉 《中国奶牛》 2013年第19期39-41,共3页
本试验对切割取样后和透明带完整的体外受精胚胎进行冷冻-解冻、培养后,比较在常规乙二醇冷冻液(EG FREEZE)中添加0.276%阿拉伯半乳聚糖(EAS)或5.52%聚蔗糖(EFS)后的冷冻效果。结果表明,对切割取样后的胚胎,添加0.276%阿拉伯半乳聚糖(E... 本试验对切割取样后和透明带完整的体外受精胚胎进行冷冻-解冻、培养后,比较在常规乙二醇冷冻液(EG FREEZE)中添加0.276%阿拉伯半乳聚糖(EAS)或5.52%聚蔗糖(EFS)后的冷冻效果。结果表明,对切割取样后的胚胎,添加0.276%阿拉伯半乳聚糖(EAS)冷冻效果最好,胚胎回收率、4h形态完整率、培养24h发育率分别为90.00%、55.56%、11.11%;但是对透明带完整的胚胎,常规乙二醇冷冻液(EG FREEZE)冷冻效果最好,胚胎回收率、4h形态完整率、培养24h发育率分别为100.00%、55.56%、22.22%。 展开更多
关键词 体外胚胎 冷冻 阿拉伯半乳 聚蔗糖
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葡聚糖蔗糖酶在食品级乳酸菌中重组表达
6
作者 蒲元浩 彭凯歌 +3 位作者 刘晓宇 孟庆泳 赵芳坤 桑亚新 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第18期157-164,共8页
为研究葡聚糖在乳酸菌中的合成情况以及结构分析,本研究将葡聚糖蔗糖酶DsrB与带有SP45分泌信号肽的乳酸乳球菌表达载体pNZ8148质粒载体进行连接,电转入乳酸乳球菌NZ9000中进行异源表达。经由一系列醇沉、三氯乙酸去除蛋白质、二次醇沉... 为研究葡聚糖在乳酸菌中的合成情况以及结构分析,本研究将葡聚糖蔗糖酶DsrB与带有SP45分泌信号肽的乳酸乳球菌表达载体pNZ8148质粒载体进行连接,电转入乳酸乳球菌NZ9000中进行异源表达。经由一系列醇沉、三氯乙酸去除蛋白质、二次醇沉、透析以及纯化等步骤得到多糖溶液。采用高效液相色谱法检测单糖组成;利用HPSEC测定葡聚糖的分子量;通过傅里叶红外技术、核磁共振技术以及扫描电镜分析多糖的结构并观察多糖表面特征。结果表明,将葡聚糖蔗糖酶在乳酸菌中进行表达,在蔗糖浓度为10%的条件下,葡聚糖产量为10.54 g/L;单糖组成显示仅含有葡萄糖一种单糖;胞外多糖分子量测定结果为2.4×10^(6) Da;由傅里叶红外和核磁联合表明体外合成的胞外多糖仅含有α-(1,6)糖苷键;扫描电镜表示胞外多糖表面呈现为多孔状结构。在乳酸菌中异源表达,实现了葡聚糖的食品级生产,为葡聚糖于食品中应用提供了理论基础。 展开更多
关键词 蔗糖 胞外多糖 食品级生产 重组表达
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乳酸菌葡聚糖蔗糖酶的研究进展
7
作者 石贺 于连升 +3 位作者 齐心彤 钱志刚 阚连宝 杜仁鹏 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第4期354-361,共8页
葡聚糖蔗糖酶(Glucansucrase)(EC.2.4.5.1)是一类α-转糖苷酶(Glucosyltransferase),主要由明串珠菌属(Leuconostoc)、链球菌属(Streptococcus)及乳杆菌属(Lactobacillus)等乳酸菌产生。葡聚糖蔗糖酶的结构和催化机制具有多样性,是生物... 葡聚糖蔗糖酶(Glucansucrase)(EC.2.4.5.1)是一类α-转糖苷酶(Glucosyltransferase),主要由明串珠菌属(Leuconostoc)、链球菌属(Streptococcus)及乳杆菌属(Lactobacillus)等乳酸菌产生。葡聚糖蔗糖酶的结构和催化机制具有多样性,是生物合成胞外多糖的一种重要工具酶。本文主要综述了乳酸菌葡聚糖蔗糖酶的来源、分类、结构、反应机制,以及介绍培养基组成、培养条件对酶产量的影响,重点阐述葡聚糖蔗糖酶的优化方法、分离纯化过程及酶学性质,并对其发展趋势进行展望,以期为葡聚糖蔗糖酶在相关领域开展研究提供参考。 展开更多
关键词 蔗糖 结构 催化机理 优化 分离纯化 应用
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生物信息学分析葡聚糖蔗糖酶的结构和功能特性
8
作者 蔡华扬 于连升 +2 位作者 李腾鑫 林宜萌 杜仁鹏 《中国农学通报》 2024年第18期105-114,共10页
葡聚糖蔗糖酶是一种重要的糖基转移酶(Glucosyltransferase,GTF),对于乳酸菌合成胞外多糖具有关键作用,能够以蔗糖为底物合成葡聚糖或低聚糖,是乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB)合成胞外多糖(Exopolysaccharide,EPS)的关键酶蛋白。然... 葡聚糖蔗糖酶是一种重要的糖基转移酶(Glucosyltransferase,GTF),对于乳酸菌合成胞外多糖具有关键作用,能够以蔗糖为底物合成葡聚糖或低聚糖,是乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB)合成胞外多糖(Exopolysaccharide,EPS)的关键酶蛋白。然而乳酸菌代谢系统复杂,EPS生物合成机制未得到全面解析,限制了EPS的应用。为了进一步解析乳酸菌EPS的生物合成机制,表征不同来源葡聚糖蔗糖酶的结构,探明酶的催化调控机制是必要手段。本研究以肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)DRP105的葡聚糖蔗糖酶gtfB基因为目标序列,利用生物信息学技术对葡聚糖蔗糖酶GtfB结构和功能进行了预测分析。研究结果显示:GtfB属于GH70家族,是一种胞外酶,不存在跨膜区,含有7个保守区域和39条重复序列。其理论分子量为308986.21,理论等电点为4.59,属于酸性蛋白质。磷酸化位点含110个Thr、89个Ser、53个Tyr,GtfB含有5个结构域,呈U型折叠,活性中心在A结构域,含有(β/α)8桶状结构。分子对接预测分析表明,蔗糖与GtfB的活性口袋结合紧密。这些结果初步探明了GtfB具有葡聚糖蔗糖酶的特征结构和功能,证明其在乳酸菌EPS合成途径中的关键调控作用,为其在EPS生产过程中的应用提供了理论基础。 展开更多
关键词 肠膜明串珠菌 蔗糖 生物信息学分析 结构预测 分子对接
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重组左聚糖蔗糖酶生产左聚糖工艺优化 被引量:2
9
作者 梁文凤 侯媛媛 +4 位作者 郭晓磊 陈硕昌 朱萍 蒙健宗 杨辉 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2023年第2期80-86,共7页
利用5 000 L发酵罐中试所得的大肠杆菌重组枯草芽孢杆菌左聚糖蔗糖酶酶制剂转化蔗糖生产左聚糖,并优化其工艺条件。选择反应pH值、反应温度和蔗糖质量浓度为主要影响因素,分别以蔗糖转化率和左聚糖产量为响应值,利用Box-Behnken响应面... 利用5 000 L发酵罐中试所得的大肠杆菌重组枯草芽孢杆菌左聚糖蔗糖酶酶制剂转化蔗糖生产左聚糖,并优化其工艺条件。选择反应pH值、反应温度和蔗糖质量浓度为主要影响因素,分别以蔗糖转化率和左聚糖产量为响应值,利用Box-Behnken响应面试验对酶法合成左聚糖工艺条件进行优化。响应面试验结果表明:在重组左聚糖蔗糖酶浓度1.6 U/mL、反应pH6.3、反应温度26℃、410 g/L蔗糖的条件下反应30 h,得到的左聚糖产量最高,为(138.59±2.90)g/L,比优化前提高了约80%。在酶浓度1.6 U/mL、反应pH6.5、反应温度24℃、310 g/L蔗糖的条件下反应30 h,得到最高蔗糖转化率(36.73±0.60)%,比优化前提高了约19%。上述优化条件在5 L反应体系中可保持稳定的生产效率,为规模化酶法生产左聚糖的工业应用提供了技术基础。 展开更多
关键词 重组左蔗糖 工艺优化 响应面法 蔗糖转化率
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重组耐热融合型左聚糖蔗糖酶的表达优化
10
作者 黄叶梅 杨海波 +3 位作者 郭晓磊 李蕾 赵资 杨辉 《轻工科技》 2023年第2期1-4,39,共5页
为提高重组耐热融合型左聚糖蔗糖酶(TPS-SacB-T305A)在大肠杆菌中的表达量,在单因素条件优化的基础上,将重组耐热融合型左聚糖蔗糖融合酶的水解活力(OD_(540nm))作为响应值R进行Box-Behnken实验。所得优化条件为:接种量3.0%(v/v),诱导... 为提高重组耐热融合型左聚糖蔗糖酶(TPS-SacB-T305A)在大肠杆菌中的表达量,在单因素条件优化的基础上,将重组耐热融合型左聚糖蔗糖融合酶的水解活力(OD_(540nm))作为响应值R进行Box-Behnken实验。所得优化条件为:接种量3.0%(v/v),诱导时间为20 h,IPTG浓度为0.9 mmol/L,诱导温度为23℃,此时响应值R=1.33。利用此优化条件在摇瓶中发酵产重组耐热融合型左聚糖蔗糖酶,经破细胞提取粗酶液,其水解活力的均值达123 U/mL,比单因素优化结果提高了28.65%。本研究为该新型重组酶的后续应用性质和耐热机理的深入研究提供了实验材料和研究基础。 展开更多
关键词 耐热 融合型左蔗糖 表达优化 响应面
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乳酸菌葡聚糖蔗糖酶及其胞外多糖功能的研究进展 被引量:3
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作者 张玉婕 孙晓灵 +1 位作者 吴宝美 王斌斌 《生物化工》 2023年第2期181-188,199,共9页
葡聚糖蔗糖酶作为一种应用广泛的工具酶,在乳酸菌的代谢过程中起重要作用。本文综述了由乳酸菌所产葡聚糖蔗糖酶的最新研究进展,包括乳酸菌所产葡聚糖蔗糖酶的分类、功能、转录表达分析、酶的改造以及乳酸菌胞外多糖的理化性质等内容,... 葡聚糖蔗糖酶作为一种应用广泛的工具酶,在乳酸菌的代谢过程中起重要作用。本文综述了由乳酸菌所产葡聚糖蔗糖酶的最新研究进展,包括乳酸菌所产葡聚糖蔗糖酶的分类、功能、转录表达分析、酶的改造以及乳酸菌胞外多糖的理化性质等内容,以期对乳酸菌葡聚糖蔗糖酶及胞外多糖的研究提供理论参考。 展开更多
关键词 乳酸菌 蔗糖 胞外多糖 功能 理化性质
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葡聚糖蔗糖酶及其家族在结构与功能上的研究进展
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作者 黎志德 刘桂云 +2 位作者 常国炜 梁达奉 黄曾慰 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2023年第12期336-344,共9页
葡聚糖蔗糖酶是一类从蔗糖合成具有不同结构和物理化学性质的α-葡聚糖的酶工具。这些α-葡聚糖在食品、医学和生物材料等方面具有多种商业应用价值,特别是用于开发填充型甜味剂、益生元和面团改良剂。糖苷水解酶第70家族的其他亚家族... 葡聚糖蔗糖酶是一类从蔗糖合成具有不同结构和物理化学性质的α-葡聚糖的酶工具。这些α-葡聚糖在食品、医学和生物材料等方面具有多种商业应用价值,特别是用于开发填充型甜味剂、益生元和面团改良剂。糖苷水解酶第70家族的其他亚家族的发现将反应底物扩展到淀粉和糊精,丰富了产物中糖苷键的种类和组成方式,扩大了合成新型α-葡聚糖的范围。序列比对和构象分析结果表明:通过对关键氨基酸残基进行突变或修饰,可有效改变产物的糖苷键构成、分子量和支化程度;GtfB、GtfC和GtfD是GtfA亚家族和糖苷水解酶第13家族的进化中间产物。该综述介绍了α-葡聚糖的分类和常见的糖苷水解酶第70家族成员,对酶构效关系方面的关键进展进行分析,并展望通过酶工程技术去理性设计更高效、更稳定、更个性化的α-葡聚糖合成工具。 展开更多
关键词 α-葡 蔗糖 蛋白质结构 生物合成
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蔗糖聚合物 被引量:6
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作者 侯信 张哲国 程男 《高分子通报》 CAS CSCD 2004年第3期93-98,共6页
蔗糖是自然界中分布最广的二糖 ,其价格低、纯度高、可再生 ,以其作为原料可以得到许多特殊的化学和生物产品。本文综述了蔗糖聚合物的最新研究发展 ,介绍了不同蔗糖聚合物的制备途径以及它在医药、生物等领域的应用。
关键词 蔗糖合物 制备 性质 燕糖水凝胶 聚蔗糖 蔗糖环氧合物 蔗糖
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聚蔗糖羧甲基化改性研究 被引量:2
14
作者 张春艳 杨华 《食品科技》 CAS 北大核心 2012年第12期244-248,共5页
以Ficoll-400为原料,采用氯乙酸法在碱性条件下进行羧甲基化改性。以产物取代度(DS)为评价指标,通过单因素和正交实验对改性条件进行优化。结果表明:溶胀介质为85%乙醇,n(聚蔗糖):n(氯乙酸):n(氢氧化钠)=1:4.8:5.5,反应温度为70℃,反应... 以Ficoll-400为原料,采用氯乙酸法在碱性条件下进行羧甲基化改性。以产物取代度(DS)为评价指标,通过单因素和正交实验对改性条件进行优化。结果表明:溶胀介质为85%乙醇,n(聚蔗糖):n(氯乙酸):n(氢氧化钠)=1:4.8:5.5,反应温度为70℃,反应时间为10h时,产物的DS可达0.6412。该改性方法工艺简单,易于控制,可以为其他多糖的羧甲基化改性提供参考。 展开更多
关键词 聚蔗糖 羧甲基化 取代度
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聚蔗糖微球缓释载体的研制
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作者 张春艳 杨华 《高分子通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期67-72,共6页
药物输送系统(drug delivery system,DDS)主要包括药物和载体两部分,微球(microspheres)是以适宜的高分子材料制成的一种应用较为广泛的新型药物载体。本文研究了聚蔗糖微球的制备方法以及作为药物缓释载体的可行性。以Span-80为表面活... 药物输送系统(drug delivery system,DDS)主要包括药物和载体两部分,微球(microspheres)是以适宜的高分子材料制成的一种应用较为广泛的新型药物载体。本文研究了聚蔗糖微球的制备方法以及作为药物缓释载体的可行性。以Span-80为表面活性剂,环氧氯丙烷为交联剂,Ficoll-400水溶液为水相(W),氯苯为油相(O),采用反相悬浮聚合法制备了一系列粒径<100μm、圆球率高的聚蔗糖微球。以牛血清蛋白(BSA)为模型药物,研究其作为药物载体的缓释性能。释放实验表明其最大释放率为95%,适当提高其交联程度有利于BSA的缓慢释放。 展开更多
关键词 聚蔗糖微球 缓释载体 研制
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肠膜明串珠菌葡聚糖蔗糖酶基因的克隆与表达 被引量:6
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作者 农万廷 韦宇拓 黄日波 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期29-32,共4页
利用PCR方法从肠膜明串珠菌葡聚糖亚种(Leuconostoc mesenteroides subsp dextrani-cum)基因组DNA中扩增出了葡聚糖蔗糖酶基因dsrD并将其连接到表达载体pET-30(a),得到重组质粒pET-30-dsrD,将重组质粒转化到大肠杆菌菌株Rosetta中,重组... 利用PCR方法从肠膜明串珠菌葡聚糖亚种(Leuconostoc mesenteroides subsp dextrani-cum)基因组DNA中扩增出了葡聚糖蔗糖酶基因dsrD并将其连接到表达载体pET-30(a),得到重组质粒pET-30-dsrD,将重组质粒转化到大肠杆菌菌株Rosetta中,重组菌株SDS-PAGE结果显示有明显的170kD特异蛋白条带出现。经测定酶活力达1.2U/mL,约是原始菌株的30倍。 展开更多
关键词 肠膜明串珠菌 蔗糖酶基因 克隆 表达
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蔗糖聚酯毒性研究——蔗糖聚油酸酯对小鼠经口急性毒性和蓄积毒性 被引量:5
17
作者 谢德明 郑建仙 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期65-66,共2页
考察了采用化学方法合成的蔗糖聚油酸酯(纯度在98% 以上)对昆明种小白鼠经口急性毒性和蓄积毒性实验,其经口LD50 大于15 000 m g/kg,其蓄积系数k 为6.65,说明该蔗糖聚油酸酯属于无毒级物质,在小鼠体内几乎... 考察了采用化学方法合成的蔗糖聚油酸酯(纯度在98% 以上)对昆明种小白鼠经口急性毒性和蓄积毒性实验,其经口LD50 大于15 000 m g/kg,其蓄积系数k 为6.65,说明该蔗糖聚油酸酯属于无毒级物质,在小鼠体内几乎不具蓄积作用。 展开更多
关键词 蔗糖油酸酯 蔗糖 毒性 脂肪替代品
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蔗糖聚酯合成反应机理研究 被引量:8
18
作者 谢德明 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期58-60,共3页
对合成酯化度在 6 以上的蔗糖聚脂肪酸酯的反应机理进行了详细的探讨,提出了蔗糖聚酯合成反应的三步反应机理,即蔗糖负离子形成——相转移——亲核取代。较好地解释了各种反应现象,并提出了相转移催化剂的筛选原则,要求相转移催化... 对合成酯化度在 6 以上的蔗糖聚脂肪酸酯的反应机理进行了详细的探讨,提出了蔗糖聚酯合成反应的三步反应机理,即蔗糖负离子形成——相转移——亲核取代。较好地解释了各种反应现象,并提出了相转移催化剂的筛选原则,要求相转移催化剂在反应条件下能稳定存在,其阳离子部分具有较强的亲脂性。 展开更多
关键词 蔗糖 合成 相转移催化 SPEs 蔗糖脂肪酸酯
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嗜热菌XZ2K2葡聚糖蔗糖酶基因的克隆与表达
19
作者 苏龙 韦宇拓 黄日波 《化学与生物工程》 CAS 2006年第7期42-44,47,共4页
提取嗜热菌XZ2K2的基因组DNA。通过对基因库中葡聚糖蔗糖酶基因序列进行分析比较,设计了两对引物。通过构建基因组文库,进行PCR筛选,扩增出4.5 kb的同源片段。DNA序列分析表明,该片段与已经报道的葡聚糖蔗糖酶编码基因(dex基因)具有90%... 提取嗜热菌XZ2K2的基因组DNA。通过对基因库中葡聚糖蔗糖酶基因序列进行分析比较,设计了两对引物。通过构建基因组文库,进行PCR筛选,扩增出4.5 kb的同源片段。DNA序列分析表明,该片段与已经报道的葡聚糖蔗糖酶编码基因(dex基因)具有90%的同源。将该片段与载体pSE380连接,构建了重组质粒pSE380-dex。然后用化学方法将重组质粒转化到大肠杆菌JM109中,获得重组子pSE380-dex。进一步的实验表明,嗜热菌的dex基因可以在JM109中表达。 展开更多
关键词 嗜热菌 基因库 蔗糖 表达
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葡聚蔗糖分离法不适于脓毒症患者外周血中单核细胞的分离
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作者 黄彬(编译) 胡森(审校) 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期91-91,共1页
为了测定用葡聚蔗糖分离法(Ficoll)对脓毒症患者外周血单核细胞和粒细胞分离情况,荷兰学者研究了脓毒症患者和健康对照者外周血单核细胞和粒细胞的细胞数量和纯度。细胞数量和纯度使用细胞离心涂片器和流体细胞计数免疫荧光法测定。... 为了测定用葡聚蔗糖分离法(Ficoll)对脓毒症患者外周血单核细胞和粒细胞分离情况,荷兰学者研究了脓毒症患者和健康对照者外周血单核细胞和粒细胞的细胞数量和纯度。细胞数量和纯度使用细胞离心涂片器和流体细胞计数免疫荧光法测定。研究结果显示,在脓毒症患者的血清悬浮细胞层中单核细胞只占11%~52%,粒细胞占48%~89%; 展开更多
关键词 外周血单核细胞 脓毒症患者 分离法 聚蔗糖 荧光法测定 不适 细胞数量 细胞分离
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