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炎调方调控Rho/ROCK信号通路对脓毒症急性胃肠损伤小鼠肠上皮细胞凋亡的研究
1
作者 陈乾 王帝 +5 位作者 张定一 贾赛蕾 王丽辉 曹玉净 李鲜 李燕红 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期16-24,共9页
目的探讨炎调方调控Rho/ROCK信号通路对脓毒症急性胃肠损伤小鼠肠上皮细胞凋亡的影响。方法取70只BALB/c小鼠随机分为空白组、假手术组和造模小鼠。除空白组、假手术组外,各组小鼠均采用盲肠结扎穿孔术(cecum ligation and puncture,CLP... 目的探讨炎调方调控Rho/ROCK信号通路对脓毒症急性胃肠损伤小鼠肠上皮细胞凋亡的影响。方法取70只BALB/c小鼠随机分为空白组、假手术组和造模小鼠。除空白组、假手术组外,各组小鼠均采用盲肠结扎穿孔术(cecum ligation and puncture,CLP)构建脓毒症急性胃肠损伤小鼠模型,将造模成功的小鼠随机分为模型组、炎调方低、中、高剂量组和ROCK抑制剂组。采用HE染色观察小鼠回肠组织病理学改变;ELISA法检测各组小鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10水平;免疫组织化学检测观察PCNA、Ki-67的表达;蛋白印迹法检测回肠组织凋亡指标cleaved caspase3蛋白、Bax蛋白表达;RT-qPCR检测小鼠回肠组织ROCK mRNA、MLC mRNA表达。结果较空白组和假手术组相比,模型组小鼠的Chiu’s病理评分、促炎介质(IL-1β、IL-6、TNF-α)水平、cleaved caspase3蛋白、Bax蛋白、ROCK mRNA、MLC mRNA水平升高(P<0.05),而抑炎介质(IL-10)水平和回肠组织中PCNA、Ki-67表达降低(P<0.05)。与模型组比较,炎调方各组随着剂量增加,回肠组织病理学改变均得到不同程度改善,其Chiu’s病理评分、血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平、cleaved caspase3蛋白、Bax蛋白、ROCK mRNA、MLC mRNA的表达降低(P<0.05),而IL-10水平、回肠组织中PCNA、Ki-67表达升高(P<0.05)。结论炎调方可能通过调控Rho/ROCK信号通路抑制脓毒症急性胃肠损伤小鼠的肠上皮细胞凋亡,从而具有减轻肠道组织炎症反应,最终达到防止肠黏膜组织损伤的作用。 展开更多
关键词 脓毒症急性胃肠损伤 肠上皮细胞凋亡 RHO/ROCK信号通路 炎调方
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鸡肠上皮细胞体外模型的构建及应用
2
作者 岑明珠 刘宇航 +3 位作者 欧建存 丘婷 郑朝军 张辉华 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期52-57,共6页
鸡肠上皮细胞作为体内更新最快的细胞,具有消化、吸收、分泌等重要的生理功能。细胞体外模型的建立为肠道疾病、营养物质的吸收消化机制及上皮细胞的凋亡、增殖、分化等研究提供了一套快速可靠的方法,为研究生理、营养、疾病控制及其他... 鸡肠上皮细胞作为体内更新最快的细胞,具有消化、吸收、分泌等重要的生理功能。细胞体外模型的建立为肠道疾病、营养物质的吸收消化机制及上皮细胞的凋亡、增殖、分化等研究提供了一套快速可靠的方法,为研究生理、营养、疾病控制及其他未知因素提供理想模型。本文对营养性添加、非营养性添加和病原微生物在肠上皮细胞中的研究作用机制进行综述,以期为禽业、兽药改良和研发提供参考。 展开更多
关键词 鸡 肠上皮细胞 分离培养 体外细胞模型
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紫菀酮通过抑制肠上皮细胞凋亡改善TNBS诱导的克罗恩病样结肠炎
3
作者 徐梦宇 杨子 +1 位作者 张文静 张小凤 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第3期319-325,共7页
目的研究紫菀酮(SHI)对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠克罗恩病(CD)样结肠炎的作用及潜在机制。方法18只野生型小鼠随机分为3组:对照组(WT组)、模型组(TNBS组)和SHI干预组(SHI组),每组6只。TNBS组小鼠肛门推注5%TNBS诱导CD样结肠炎... 目的研究紫菀酮(SHI)对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠克罗恩病(CD)样结肠炎的作用及潜在机制。方法18只野生型小鼠随机分为3组:对照组(WT组)、模型组(TNBS组)和SHI干预组(SHI组),每组6只。TNBS组小鼠肛门推注5%TNBS诱导CD样结肠炎;SHI组在TNBS造模的同时给予SHI灌胃干预[40 mg/(kg·d)],WT组和TNBS组每日给予等量的生理盐水灌胃。1周后处死小鼠,采用疾病活动度(DAI)评分、体质量改变、结肠长度、组织学炎症评分和小鼠结肠黏膜肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平评估肠炎程度。采用荧光素异硫氰酸酯-右旋糖酐(FITC)渗透性测定、肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)测定、细菌移位率评估肠屏障功能。通过TUNEL染色检测小鼠肠上皮细胞凋亡情况;通过Western blot检测小鼠凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)的表达量。采用网络药理学以及生信富集分析预测SHI干预对小鼠CD样结肠炎保护作用的可能途径。结果与WT组比较,TNBS组DAI评分、体质量降低幅度、组织学炎症评分和结肠黏膜TNF-α、IL-6、IL-1β水平显著升高(P<0.05);与TNBS组比较,SHI组DAI评分、体质量降低幅度、组织学炎症评分和结肠黏膜TNF-α、IL-6、IL-1β水平显著降低(P<0.05)。与WT组比较,TNBS组小鼠结肠长度缩短(P<0.05);与TNBS组比较,SHI组小鼠结肠长度增加(P<0.05)。网络药理学以及生信富集分析发现SHI可能通过拮抗肠上皮细胞凋亡治疗CD。与TNBS组比较,SHI组小鼠外周血FITC-dextran、I-FABP水平和肝脏、肠系膜淋巴结的细菌移位率较低(P<0.05)。TUNEL染色结果显示,与TNBS组比较,SHI组小鼠结肠组织中肠上皮细胞凋亡数量显著减少(P<0.05),Bax的表达下调,Bcl-2的表达上调(均P<0.05)。结论SHI可能通过抑制肠上皮细胞凋亡进而缓解TNBS诱导的小鼠CD样结肠炎。 展开更多
关键词 炎症性肠病 克罗恩病 紫菀酮 肠上皮细胞凋亡 肠道炎症
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miR-146b过表达对脂多糖刺激仔猪肠上皮细胞Toll样受体4基因表达和促炎因子产生的影响
4
作者 陶新 邓波 +2 位作者 门小明 刘淑杰 徐子伟 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期623-631,共9页
本研究旨在探讨miR-146b过表达对脂多糖(LPS)刺激仔猪肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)Toll样受体4(TLR4)基因表达和促炎因子产生的影响。首先利用LPS刺激IPEC-J2细胞,然后使用荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检测LPS刺激对IPEC-J... 本研究旨在探讨miR-146b过表达对脂多糖(LPS)刺激仔猪肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)Toll样受体4(TLR4)基因表达和促炎因子产生的影响。首先利用LPS刺激IPEC-J2细胞,然后使用荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检测LPS刺激对IPEC-J2细胞中TLR4和促炎因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和干扰素-γ(IFN-γ)等的mRNA表达以及对分泌到细胞培养液中促炎因子含量的影响。在此基础上,通过miR-146b mimic细胞转染试验,探讨miR-146b过表达对LPS刺激的IPEC-J2细胞中TLR4的mRNA表达和促炎因子产生的抑制作用。结果表明:1)与未刺激处理相比,LPS刺激处理的IPEC-J2细胞中TLR4、IL-1β、TNF-α、IL-8和IFN-γ的mRNA相对表达量极显著升高(P<0.01),细胞培养液中TNF-α、IL-8和IFN-γ含量极显著升高(P<0.01)。2)与LPS处理相比,LPS+miR-146b mimic处理的miR-146b的相对表达量极显著升高(P<0.01),IPEC-J2细胞中TLR4、TNF-α、IL-8和IFN-γ的mRNA相对表达量分别显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),细胞培养液中TNF-α、IL-8和IFN-γ含量极显著降低(P<0.01)。由此可见,miR-146b在LPS刺激的IPEC-J2细胞中可通过抑制促炎因子的产生发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 脂多糖 miR-146b 仔猪 肠上皮细胞 促炎因子
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原阿片碱改善脂多糖诱导肠上皮细胞凋亡、炎症和氧化应激反应的研究
5
作者 徐忠军 李君玉 +2 位作者 欧阳灿晖 谢云 叶艳清 《中国当代医药》 2023年第36期5-10,共6页
目的 探讨原阿片碱对脂多糖(LPS)诱导的肠上皮细胞炎症、凋亡和氧化应激的影响。方法 通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验筛选出5μg/ml的LPS处理NCM460细胞,同时加入不同浓度的原阿片碱(0、5、10、20μM)刺激细胞24 h。通过MTT法和流式细胞... 目的 探讨原阿片碱对脂多糖(LPS)诱导的肠上皮细胞炎症、凋亡和氧化应激的影响。方法 通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验筛选出5μg/ml的LPS处理NCM460细胞,同时加入不同浓度的原阿片碱(0、5、10、20μM)刺激细胞24 h。通过MTT法和流式细胞术检测NCM460细胞活力和凋亡率。通过Western blot免疫印迹法检测各处理组中凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平。通过ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的表达水平。通过ELISA检测抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)和髓过氧化物酶(MPO)的表达水平以及通过流式细胞术检测活性氧(ROS)表达水平,明确原阿片碱对NCM460细胞氧化应激反应的影响。结果 5μg/ml的LPS组的NCM460细胞活力低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。LPS+原阿片碱组NCM460细胞活力、Bcl-2蛋白高于LPS组,且呈剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。LPS+原阿片碱组NCM460细胞的凋亡率、Bax蛋白、TNF-α、IL-1β和IL-6、氧化应激分子SOD、MDA、T-AOC、MPO和ROS的表达水平低于LPS组,且呈剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 原阿片碱可通过降低细胞凋亡、炎症反应及氧化应激反应改善LPS诱导的肠上皮细胞炎性损伤。 展开更多
关键词 原阿片碱 脂多糖 肠上皮细胞 凋亡 氧化应激 炎症反应
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铁死亡及其在炎症性肠病中对肠上皮细胞作用机制的研究进展 被引量：1
6
作者 陈双兰 刘青松 +2 位作者 胡双元 张怡 刘蓉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2210-2215,共6页
炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)主要表现为慢性进行性胃肠道炎症,损害胃肠道黏膜。越来越多的研究证明,炎症部位存在失调的细胞死亡,导致肠道机械屏障的破坏和炎症反应的加重。铁死亡是一种新发现的铁依赖的、脂质氧化介... 炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)主要表现为慢性进行性胃肠道炎症,损害胃肠道黏膜。越来越多的研究证明,炎症部位存在失调的细胞死亡,导致肠道机械屏障的破坏和炎症反应的加重。铁死亡是一种新发现的铁依赖的、脂质氧化介导的细胞死亡形式。已有多篇文献报道了IBD患者的肠道出现铁死亡相关因子的异常,鉴于当前IBD具体发病机制尚不明确,且治疗尚存在诸多局限,因此,该文总结了近年来铁死亡机制的研究进展,并重点阐述了铁死亡在IBD发病机制中的潜在作用,为未来IBD发病机制的研究与治疗药物的开发运用提供方向。 展开更多
关键词 铁死亡 炎症性肠病 肠上皮细胞 氧化应激 机制 研究进展
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冬凌草甲素缓解脂多糖诱导的Caco-2肠上皮细胞屏障损伤和SIRT1/eIF2α信号通路活性的抑制
7
作者 张福生 王胜文 +1 位作者 艾世鹏 李冬扬 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2023年第1期55-62,68,共9页
目的 探索冬凌草甲素对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的肠上皮屏障障碍的影响及其生物学机制。方法将Caco-2细胞进行单层培养21 d使其分化后,分为对照组、LPS组(2μg/mL LPS处理24 h)、LPS+低剂量冬凌草甲素组(10μg/mL冬凌草甲... 目的 探索冬凌草甲素对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的肠上皮屏障障碍的影响及其生物学机制。方法将Caco-2细胞进行单层培养21 d使其分化后,分为对照组、LPS组(2μg/mL LPS处理24 h)、LPS+低剂量冬凌草甲素组(10μg/mL冬凌草甲素预处理30 min,2μg/mL LPS处理24 h)和LPS+高剂量冬凌草甲素组(40μg/mL冬凌草甲素预处理30 min,2μg/mL LPS处理24 h)。采用跨上皮电阻法和FITC-dextran 4通量法评估细胞单层屏障功能;CCK-8法检测细胞活力;乳酸脱氢酶(LDH)法检测LDH释放活性;DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧水平;ELISA法检测炎症因子IL-1β和TNF-α分泌水平;免疫荧光法检测细胞的屏障功能相关蛋白闭合蛋白(occludin)和闭锁小带蛋白1(zonula occludens protein 1, ZO-1)的表达分布情况;Western blot法检测SIRT1和p-eIF2α的相对表达水平。结果 与LPS组比较,冬凌草甲素能改善LPS诱导的肠上皮细胞单层屏障障碍,增加细胞活力并降低LDH的释放活性以及细胞中活性氧、IL-1β和TNF-α水平,还能促进闭合蛋白和ZO-1在细胞膜上的表达以及连续分布模式。Western blot检测显示,冬凌草甲素能增加SIRT1的表达,并降低e IF2α的磷酸化。以上作用以高剂量组更佳。结论 冬凌草甲素可缓解LPS导致的肠上皮细胞损伤和单层屏障障碍,SIRT1/eIF2α通路信号激活可能是冬凌草甲素发挥肠上皮细胞保护作用的机制之一。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 脂多糖 肠上皮细胞 肠上皮屏障 紧密连接
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乙酰紫堇灵通过抑制肠上皮细胞凋亡改善三硝基苯磺酸诱导的小鼠克罗恩病样结肠炎
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作者 李晴晴 黄菊 +9 位作者 孙洋 徐赟辉 王炼 张小凤 王月月 耿志军 宋雪 左芦根 李静 胡建国 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1306-1314,共9页
目的探究乙酰紫堇灵(Ace)对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠克罗恩病(CD)样结肠炎的作用及机制。方法将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为5组:WT组、TNBS组和Ace干预组(Ace-10组、Ace-20组和Ace-40组),每组8只。TNBS组和Ace干预组小鼠均... 目的探究乙酰紫堇灵(Ace)对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠克罗恩病(CD)样结肠炎的作用及机制。方法将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为5组:WT组、TNBS组和Ace干预组(Ace-10组、Ace-20组和Ace-40组),每组8只。TNBS组和Ace干预组小鼠均采用TNBS诱导建立结肠炎模型,Ace干预组分别给予10、20、40 mg/kg的Ace灌胃治疗,而TNBS组均给予等量生理盐水。通过监测体质量变化、疾病活动评分(DAI)、结肠长度测量、HE染色和组织学评分评估Ace对TNBS结肠炎小鼠的保护作用。小鼠结肠组织经免疫荧光检测Claudin-1、Western blot检测紧密连接蛋白(Claudin-1和ZO-1)和凋亡相关蛋白(C-caspase3、Bax和Bcl-2)以及Tunel染色检测肠上皮细胞凋亡的数量。采用结肠类器官经脂多糖诱导建立凋亡模型,分为Control组、脂多糖组及Ace组,采用免疫荧光检测Claudin-1以及Western blot检测Claudin-1、ZO-1、C-caspase3、Bax和Bcl-2的表达。利用网络药理学预测Ace抑制肠上皮细胞凋亡的分子机制可能与PI3K-AKT通路相关,采用Western blot验证小鼠结肠组织和结肠类器官中pPI3K和p-AKT的表达。体外凋亡模型中加入PI3K-AKT信号通路激活剂(740Y-P),Western blot验证结肠类器官中p-PI3K、pAKT、C-caspase3、Bax及Bcl-2的表达。结果与TNBS组相比,Ace治疗可显著缓解TNBS小鼠的体质量下降、结肠长度缩短、DAI评分和炎症评分升高(P<0.05)。在Ace组小鼠结肠组织中,免疫荧光结果显示:Claudin-1的表达上调(P<0.05);Western blot结果显示:Claudin-1、ZO-1和Bcl-2的蛋白水平升高,而C-caspase3和Bax的表达降低(P<0.05);Tunel染色结果显示:肠上皮细胞凋亡数量减少(P<0.05)。在体外凋亡模型中,经Ace干预后,免疫荧光和Western blot结果显示,结肠类器官组织中ZO-1和Claudin-1的表达升高(P<0.05)、C-caspase3和Bax表达降低,而Bcl-2表达升高(P<0.05)。KEGG通路富集预测发现PI3K-AKT信号通路与Ace治疗CD具有相关性,且Western blot结果表明,在体内外模型中经Ace干预后p-AKT和p-PI3K的表达显著降低(P<0.05)。另外,PI3K-AKT激活剂(740Y-P)促进p-PI3K、p-AKT、C-caspase3和Bax的表达,而抑制Bcl-2的表达(P<0.05)。结论Ace可能通过干扰PI3K/AKT信号的激活抑制肠上皮细胞凋亡,进而发挥对TNBS诱导的小鼠CD样结肠炎的保护作用。 展开更多
关键词 克罗恩病 乙酰紫堇灵 肠上皮细胞凋亡 PI3K/AKT
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群体感应分子3OC12HSL对猪回肠上皮细胞IPI-2I的影响
9
作者 高前磊 李川皓 +4 位作者 陈帅 李海花 张相伦 袁震 盛清凯 《山东农业科学》 北大核心 2023年第10期133-139,共7页
探讨群体感应分子3-氧代十二酰基高丝氨酸内酯(3OC12HSL)不同浓度和作用时间对猪回肠上皮细胞IPI-2I凋亡的影响及可能的作用机制。3OC12HSL浓度为0、50、100、200、400μmol/L,作用细胞时间分别为4、8、12、24 h。CCK-8法检测细胞活性,E... 探讨群体感应分子3-氧代十二酰基高丝氨酸内酯(3OC12HSL)不同浓度和作用时间对猪回肠上皮细胞IPI-2I凋亡的影响及可能的作用机制。3OC12HSL浓度为0、50、100、200、400μmol/L,作用细胞时间分别为4、8、12、24 h。CCK-8法检测细胞活性,ELISA检测炎症因子水平,流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光定量PCR检测凋亡相关基因的mRNA表达水平。结果显示,200μmol/L 3OC12HSL作用8 h,显著抑制IPI-2I细胞活性,抑制效果呈时间和浓度依赖性;200μmol/L 3OC12HSL极显著升高促炎因子IL-6、IL-8、IL-1、TNF-α的浓度(P<0.01);100μmol/L 3OC12HSL作用12 h时,IPI-2I细胞凋亡而极显著提高(P<0.01);作用12 h后,100μmol/L 3OC12HSL显著提高细胞凋亡关键基因Bax表达水平(P<0.05),极显著提高Fas、Caspase8、Caspase3表达水平(P<0.01),400μmol/L 3OC12HSL显著降低Bcl-2表达(P<0.05)。结果表明一定浓度的3OC12HSL可降低细胞活性,诱导细胞炎症,引起细胞凋亡,不利于生猪健康。 展开更多
关键词 群体感应 3-氧代十二酰基高丝氨酸内酯(3OC12HSL) 细胞凋亡 炎症因子 猪回肠上皮细胞
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基于NLRP3/caspase-1通路研究木犀草素对脂多糖诱导的肠上皮细胞焦亡的影响
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作者 李红心 张玉枝 +1 位作者 刘静 李涓 《医学分子生物学杂志》 CAS 2023年第2期154-159,共6页
目的探讨木犀草素对脂多糖(LPS)诱导的肠上皮细胞焦亡及核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族吡啉结构域蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)通路的影响。方法体外培养人肠上皮细胞HIEC-6,对其进行(1.0μg/mL)LPS诱导,并将细胞分为对... 目的探讨木犀草素对脂多糖(LPS)诱导的肠上皮细胞焦亡及核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族吡啉结构域蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)通路的影响。方法体外培养人肠上皮细胞HIEC-6,对其进行(1.0μg/mL)LPS诱导,并将细胞分为对照组、LPS组、LPS+(25、50、100μmol/L)木犀草素组、木犀草素+NLRP3激活剂尼日利亚菌素钠盐(NSS)组,除对照组外均添加1.0μg/mL的LPS。MTT法检测各组细胞活力;电阻仪检测单层上皮跨膜电阻(TEER);酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平;蛋白免疫印迹(WB)法检测各组细胞焦亡相关蛋白(GSDMD、GSDMD-N)及NLRP3、caspase-1、IL-1β的表达。结果与对照组比较,LPS组HIEC-6细胞活力、TEER值显著降低,细胞上清液LDH水平、TNF-α、IL-6、蛋白GSDMD、GSDMD-N、NLRP3、caspase-1、IL-1β表达显著升高(P<0.05);与LPS组比较,LPS+(25、50、100μmol/L)木犀草素组HIEC-6细胞活力、TEER值显著升高,细胞上清液LDH水平、TNF-α、IL-6、GSDMD、GSDMD-N、NLRP3、caspase-1、IL-1β表达显著降低(P<0.05);与LPS+100μmol/L木犀草素组比较,木犀草素+NSS组HIEC细胞活力、TEER值显著降低,细胞上清液LDH水平、TNF-α、IL-6、GSDMD、GSDMD-N、NLRP3、caspase-1、IL-1β表达显著升高(P<0.05)。结论木犀草素能够减轻LPS诱导的人肠上皮细胞HIEC-6焦亡和细胞炎性损伤,可能与NLRP3/caspase-1信号通路的抑制有关。 展开更多
关键词 木犀草素 脂多糖 肠上皮细胞 核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族吡啉结构域蛋白3 半胱氨酸蛋白酶1 炎性损伤
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异鼠李素对H_(2)O_(2)诱导的肠上皮细胞氧化应激损伤的保护作用 被引量：1
11
作者 王德宇 杨东亮 常刘 《陕西中医》 CAS 2023年第1期7-11,共5页
目的:评价异鼠李素对H_(2)O_(2)诱导的大鼠肠上皮细胞IEC-6氧化应激损伤的保护作用及机制。方法:MTT实验筛选异鼠李素对IEC-6细胞的安全作用浓度用于评价抗H_(2)O_(2)诱导的氧化应激损伤功效。设正常对照组、H_(2)O_(2)组、N-乙酰半脱氨... 目的:评价异鼠李素对H_(2)O_(2)诱导的大鼠肠上皮细胞IEC-6氧化应激损伤的保护作用及机制。方法:MTT实验筛选异鼠李素对IEC-6细胞的安全作用浓度用于评价抗H_(2)O_(2)诱导的氧化应激损伤功效。设正常对照组、H_(2)O_(2)组、N-乙酰半脱氨酸(NAC)组(10μmol/L)、异鼠李素低剂量组(20μmol/L)、异鼠李素中剂量组(40μmol/L)及异鼠李素高剂量组(100μmol/L)。正常对照组常规培养,H_(2)O_(2)组用500μmol/L H_(2)O_(2)处理,NAC及异鼠李素组分别用10μmol/L NAC,20、40、100μmol/L异鼠李素预处理细胞相应时间后,用500μmol/L H_(2)O_(2)继续培养。流式细胞术检测细胞凋亡及ROS水平,试剂盒检测细胞中MDA含量及SOD活性,Western blot检测细胞中Nrf2/HO-1、PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达。结果:与H_(2)O_(2)组相比,异鼠李素高剂量组IEC-6细胞活性显著增强(P<0.05)。流式细胞仪检测发现,异鼠李素高剂量组细胞凋亡率及ROS水平显著降低(P<0.05)。异鼠李素高剂量组细胞中MDA含量降低,SOD活性增强(P<0.05)。Western blot结果显示,异鼠李素高剂量组可增加p-Akt水平、促进Nrf2核移位及HO-1的表达(P<0.05)。结论:异鼠李素可能通过激活Nrf2/HO-1通路,缓解H_(2)O_(2)引起的氧化应激损伤。 展开更多
关键词 异鼠李素 肠上皮细胞 H_(2)O_(2) 氧化应激 Nrf2/HO-1 PI3K/Akt
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薏苡附子败酱散对肠上皮细胞屏障损伤的保护作用研究
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作者 彭君伟 周帆 陈江 《吉林中医药》 2023年第10期1199-1203,共5页
目的 探讨薏苡附子败酱散对LPS诱导的肠上皮(IEC-6)细胞屏障损伤的保护作用。方法 IEC-6细胞分为对照组,模型组,薏苡附子败酱散全方组(以下简称全方组),全方去附子组(以下简称去附子组)和单用附子组。除对照组外,其余各组加入10μg/mL L... 目的 探讨薏苡附子败酱散对LPS诱导的肠上皮(IEC-6)细胞屏障损伤的保护作用。方法 IEC-6细胞分为对照组,模型组,薏苡附子败酱散全方组(以下简称全方组),全方去附子组(以下简称去附子组)和单用附子组。除对照组外,其余各组加入10μg/mL LPS(前期预实验确定该浓度为最佳造模浓度),模型组分别加入10 mg/mL全方、8.82 mg/mL全方去附子、1.18 mg/mL单味附子。MTT法检测各组细胞活性;ELISA法检测相关炎症因子含量;Western Blot法检测Occludin、ZO-1蛋白表达量;Transwell法检测细胞屏障通透性。结果 与对照组比较,模型组IEC-6活率显著下降(P <0.01),炎症因子TNF-α和IL-6含量明显增加(P <0.01),Occludin、ZO-1蛋白表达量显著降低(P <0.01),肠黏膜通透性显著增加(P <0.01)。全方组、去附子组均能提高LPS损伤下IEC-6细胞的活率(P <0.01),降低TNF-α和IL-6分泌量(P <0.01),上调ZO-1、Occludin的表达(P <0.01),降低跨膜电阻值(TEER)(P <0.01)。全方组在提高细胞活率作用强于去附子组(P <0.05),在降低TNF-α和IL-6分泌上2组作用相当(P> 0.05),在增加ZO-1蛋白表达上,全方组强于去附子组,而对Occludin的表达,2组作用相当(P> 0.05)。单味附子无明显抗炎作用(P> 0.05),但可提高损伤细胞的活性(P <0.05)。单味附子仅对ZO-1蛋白有明显促表达作用(P <0.01),但仍可明显降低细胞通透性(P <0.01)。结论在肠上皮细胞屏障损伤的保护作用上全方>去附子>单用附子,附子可能在全方中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 薏苡附子败酱散 肠上皮细胞 肠上皮屏障
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肠上皮细胞的微生物调节与炎症性肠病
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作者 李敬毅 张健 《临床医学进展》 2023年第5期7917-7921,共5页
小肠是机体消化和吸收的重要场所,通过肠上皮细胞(IEC)吸收营养物质,肠上皮细胞(IEC)是肠道内外环境的媒介,也是机体免疫屏障的重要组成部分,它的存在使肠道内部处于一种稳态。炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)是一种慢性... 小肠是机体消化和吸收的重要场所,通过肠上皮细胞(IEC)吸收营养物质,肠上皮细胞(IEC)是肠道内外环境的媒介,也是机体免疫屏障的重要组成部分,它的存在使肠道内部处于一种稳态。炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)是一种慢性非特异性肠道炎症,由于IBD的病因尚未阐述清楚,发病机制复杂多样,使其传统治疗效果有限、副作用较多、且难以根治,使病人的生活质量下降,给患者和其家属及社会带来了巨大的负担,如今主流观点认为由于肠道微环境和免疫失衡有关,本综述旨在概述肠上皮细胞的微生物调节在IBD中发挥的作用。 展开更多
关键词 肠上皮细胞 炎症性肠病 微生物
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基于肠上皮细胞探讨外泌体与功能性消化不良机制研究
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作者 崔冬梅 康朝霞 陈皖倩 《系统医学》 2023年第22期187-190,共4页
功能性消化不良(functional dyspepia, FD)是胃肠道疾病中的一种类型之一,然而FD的病因及发病机制较为复杂。肠上皮细胞是胃肠道中重要的细胞类型,负责肠道黏膜的修复和再生。而外泌体是细胞分泌的囊泡,可分泌多种细胞外物质,如蛋白质... 功能性消化不良(functional dyspepia, FD)是胃肠道疾病中的一种类型之一,然而FD的病因及发病机制较为复杂。肠上皮细胞是胃肠道中重要的细胞类型,负责肠道黏膜的修复和再生。而外泌体是细胞分泌的囊泡,可分泌多种细胞外物质,如蛋白质、脂质、糖类等,参与调节肠道的功能,并且它含有的microRNA(miRNA)、信使RNA(mRNA)和蛋白质是细胞间通讯最突出的介质。越来越多的证据表明,肠上皮细胞释放的外泌体可促进肠道屏障的完整性、调节肠道菌群失调,促进免疫功能的修复。在本综述中,希望通过肠上皮细胞与外泌体之间的关系,进一步阐述外泌体与功能性消化不良的相关机制,为功能性消化不良的诊断与治疗提供新的认识。 展开更多
关键词 肠上皮细胞 外泌体 功能性消化不良 机制 综述
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小鼠胚胎食管和肠上皮细胞增殖与凋亡 被引量：2
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作者 汪维伟 李均 王正义 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期164-167,i003,共5页
目的:研究小鼠胚胎食管和肠上皮细胞的增殖与凋亡。方法:体视学方法观测E1117dICR胎鼠食管、十二指肠和结肠上皮的增殖与凋亡,免疫组化法显示Bcl2、P53、Bax在三段消化管上皮中的表达。结果:三段消化管的上皮细胞密度与凋亡小体密度和... 目的:研究小鼠胚胎食管和肠上皮细胞的增殖与凋亡。方法:体视学方法观测E1117dICR胎鼠食管、十二指肠和结肠上皮的增殖与凋亡,免疫组化法显示Bcl2、P53、Bax在三段消化管上皮中的表达。结果:三段消化管的上皮细胞密度与凋亡小体密度和分裂细胞密度间未见一致的相关性。凋亡小体分布食管上皮各层,而肠上皮中主要在游离面。Bcl2和p53在食管、小肠、结肠上皮细胞中表达峰值分别在E11d～13d和E11d～14d,Bax的表达峰值分别为E11d、E14d、E15d。结论:上皮细胞密度对上皮细胞分裂和凋亡的影响不明显。食管和肠上皮中凋亡小体分布的不同可能与形态发生方式不同有关。Bax和Bcl2可能分别具有促进和抑制肠上皮细胞凋亡的作用;p53与上皮细胞凋亡的关系不密切。 展开更多
关键词 小鼠胚胎 肠上皮细胞增殖 上皮细胞密度 上皮细胞凋亡 Bcl-2 结肠上皮细胞 上皮细胞分裂 凋亡小体 体视学方法 免疫组化法 Bax 十二指肠 食管上皮 形态发生 消化管 p53 ICR 相关性 体密度 游离面 分布 峰值
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鸡肠上皮细胞的分离及原代培养方法 被引量：28
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作者 马玉龙 许梓荣 +2 位作者 郭彤 尤萍 姜俊芳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期74-76,80,共4页
取18日龄鸡胚，研究鸡肠上皮细胞（IEC）分离及原代培养的方法。结果表明：较好的分离条件是肠组织经0.1g／L中性蛋白酶和300U／mL胶原酶Ⅺ联合消化；较佳的培养条件是细胞在含2．5％～5％胎牛血清的DMEM培养基中，39℃、5％～7．5％CO... 取18日龄鸡胚，研究鸡肠上皮细胞（IEC）分离及原代培养的方法。结果表明：较好的分离条件是肠组织经0.1g／L中性蛋白酶和300U／mL胶原酶Ⅺ联合消化；较佳的培养条件是细胞在含2．5％～5％胎牛血清的DMEM培养基中，39℃、5％～7．5％CO2下培养，IEC可在1～2d贴壁，6～7d明显增殖，11～12d汇合成片。 展开更多
关键词 肠上皮细胞 分离 原代培养 鸡胚
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三七皂苷Rg_1对失血性休克大鼠肠上皮细胞线粒体损伤保护作用的研究 被引量：18
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作者 柏干荣 陆松敏 +3 位作者 李萍 刘建仓 郭素清 陈凤 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第9期665-667,共3页
目的　观察大鼠失血性休克后肠上皮细胞线粒体编码基因细胞色素氧化酶 (COXⅠ ,COXⅡ ,COXⅢ )mRNA的表达变化 ,并探讨三七皂苷Rg1(Rg1)对其保护作用的分子机制 ,为休克的防治提供实验依据。方法　采用失血性休克模型 ,分离肠上皮细胞... 目的　观察大鼠失血性休克后肠上皮细胞线粒体编码基因细胞色素氧化酶 (COXⅠ ,COXⅡ ,COXⅢ )mRNA的表达变化 ,并探讨三七皂苷Rg1(Rg1)对其保护作用的分子机制 ,为休克的防治提供实验依据。方法　采用失血性休克模型 ,分离肠上皮细胞后进行RNA的提取 ,应用RT PCR检测大鼠失血性休克后及用Rg1治疗后COXⅠ ,COXⅡ ,COXⅢmRNA的表达变化情况。结果　大鼠失血性休克 1h ,COXⅠ ,COXⅡ基因表达开始增强 ,2h表达最强 ,以后随着休克时间延长 ,表达又逐渐减弱 ,失血性休克晚期 5h表达显著低于正常对照鼠 (P <0 .0 1) ;Rg1(5mg·kg-1)治疗后 ,可使COXⅠ ,COXⅡmRNA表达显著增强 (P <0 .0 1)。结论　失血性休克可引起大鼠肠上皮细胞线粒体编码基因COXⅠ ,COXⅡmRNA的明显改变 ,Rg1可提高其表达 ,对失血性休克肠上皮细胞线粒体损伤有明显的保护作用。 展开更多
关键词 三七皂苷 Rgl 失血性休克 大鼠 肠上皮细胞 线粒体损伤 细胞色素氧化酶
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灭活的双歧杆菌对肠上皮细胞粘附及其影响因素的研究 被引量：20
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作者 伦永志 黄敏 +1 位作者 袁杰利 康白 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2000年第6期314-316,共3页
目的　观察灭活的青春双歧杆菌对人大肠癌细胞系 CCL - 2 2 9的粘附以及影响粘附的因素。方法　通过与双歧杆菌活菌比较 ,灭活的双歧杆菌同样能粘附于肠上皮细胞 ,并且耗尽培养上清有利于双歧杆菌粘附。结果　粘附具有显著的浓度效应 ;... 目的　观察灭活的青春双歧杆菌对人大肠癌细胞系 CCL - 2 2 9的粘附以及影响粘附的因素。方法　通过与双歧杆菌活菌比较 ,灭活的双歧杆菌同样能粘附于肠上皮细胞 ,并且耗尽培养上清有利于双歧杆菌粘附。结果　粘附具有显著的浓度效应 ;粘附效果与孵育环境的 p H值有关 ;高温处理耗尽培养上清对粘附无明显影响。结论　灭活的双歧杆菌可能具有与活菌相同的生态效应。 展开更多
关键词 双歧杆菌 肠上皮细胞 粘附 灭活菌
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用嗜热菌蛋白酶进行人肠上皮细胞分离培养 被引量：17
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作者 张道杰 蒋建新 +3 位作者 陈永华 熊健琼 段朝霞 朱佩芳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1016-1018,共3页
目的　探讨人肠上皮细胞 (intestinalepithelialcell,IEC)的分离、培养及鉴定方法 ,为进一步研究IEC提供合适的细胞模型。方法　取 4～ 6个月合法引产胎儿小肠 ,用嗜热菌蛋白酶消化分离IEC ,接种于含多种促IEC生长的营养成分的DMEM培养... 目的　探讨人肠上皮细胞 (intestinalepithelialcell,IEC)的分离、培养及鉴定方法 ,为进一步研究IEC提供合适的细胞模型。方法　取 4～ 6个月合法引产胎儿小肠 ,用嗜热菌蛋白酶消化分离IEC ,接种于含多种促IEC生长的营养成分的DMEM培养液内 ,根据IEC和成纤维细胞贴壁时间的差异来纯化IEC ,通过观察IEC生长状态、形态特征、超微结构及检测上皮细胞膜抗原对IEC进行鉴定。结果　嗜热菌蛋白酶消化 2h可分离出大量的健全绒毛隐窝单位 ,进一步培养获得的IEC ,上皮细胞膜抗原均呈阳性。结论　选用嗜热菌蛋白酶作为分离IEC的消化酶 ,可获得较纯的IEC ,完全可供相关实验研究之用。 展开更多
关键词 嗜热菌蛋白酶 肠上皮细胞 原代培养
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肠缺血／再灌注时卡巴胆碱对肠上皮细胞凋亡的影响 被引量：19
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作者 胡森 邹晓防 +2 位作者 吕艺 陆江阳 盛志勇 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期463-466,I0001,共5页
目的研究肠缺血／再灌注（I／R）时卡巴胆碱对肠上皮细胞凋亡的影响及可能机制。方法雄性Wistar大鼠，戊巴比妥钠腹腔麻醉，结扎肠管造成长约8cm肠袋，采用夹闭肠系膜上动脉（SMA）阻断血流45min后恢复血流的方法，制备肠I／R损伤模型... 目的研究肠缺血／再灌注（I／R）时卡巴胆碱对肠上皮细胞凋亡的影响及可能机制。方法雄性Wistar大鼠，戊巴比妥钠腹腔麻醉，结扎肠管造成长约8cm肠袋，采用夹闭肠系膜上动脉（SMA）阻断血流45min后恢复血流的方法，制备肠I／R损伤模型。将动物按随机数字表法分为假手术组（n=40）、I／R模型组（n=40）和卡巴胆碱组（n=40）。卡巴胆碱组在阻断血流的同时向肠袋内注射卡巴胆碱（0．1mg／kg），I／R模型组给予等量生理盐水。分别在再灌注0、30、60、120和240min时，采用病理学方法按Chiu’s评分观察肠上皮细胞损伤；原位末端缺刻标记法（TUNEL）检测肠上皮细胞凋亡指数的变化；免疫组化法检测肠上皮细胞凋亡相关半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶（caspase-3）和Bcl-2蛋白表达的变化。结果与I／R模型组比较，卡巴胆碱组肠上皮细胞病理学变化较轻，凋亡指数明显降低，caspase-3阳性肠上皮细胞数明显减少，而Bcl-2阳性肠上皮细胞数明显增加（P均〈0．01）。结论卡巴胆碱能抑制I／R时肠上皮细胞caspase-3表达，增加Bcl-2表达，减少肠上皮细胞的凋亡。 展开更多
关键词 缺血/再灌注损伤 肠 卡巴胆碱 肠上皮细胞 凋亡
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