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Western blot鉴定背肩胛棕色脂肪黑皮质素4型受体的研究 被引量：1
1
作者 范奎奎 李强 +3 位作者 杨文雅 潘登 李海军 杜晨光 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期841-846,共6页
旨在探究Western blot检测低丰度蛋白表达及试验过程对检测结果的影响。本试验以6~8周龄C57/BL6小鼠背肩甲棕色脂肪组织(Brown adipose tissue,BAT)为试验材料,以低丰度表达的黑皮质素4型受体(Melanocortin-4-receptor,MC4R)为检测蛋白... 旨在探究Western blot检测低丰度蛋白表达及试验过程对检测结果的影响。本试验以6~8周龄C57/BL6小鼠背肩甲棕色脂肪组织(Brown adipose tissue,BAT)为试验材料,以低丰度表达的黑皮质素4型受体(Melanocortin-4-receptor,MC4R)为检测蛋白,不同蛋白处理方法及电转膜液的组分、pH为试验对照条件,探究蛋白提取方法、电转液的组分与pH对转膜效率的影响。结果显示,转膜初始电压及功率与转膜液中十二烷基磺酸钠(SDS)含量及pH极显著相关,恒流转膜时,转膜液中SDS含量与转膜电压及功率呈反比,pH为8.0时的转膜电压及功率极显著高于pH 7.6(P<0.01)和8.6的转膜电压及功率(P<0.001);MC4R及相关蛋白在醇类物混合裂解液(20%Methanol+1%Triton+1%SDS+RIPA)的蛋白处理组的表达显著优于单独RIPA的蛋白处理组(P<0.05),极显著优于Trizol的蛋白处理组(P<0.01)。综上,于MC4R蛋白而言,在裂解液的基础上添加增强剂(Triton和SDS),可促进蛋白提取的效率,提高抗体检测的灵敏性。上述结果有助于相关操作人员对主要细节的认识,提高试验的灵敏及重复性。 展开更多
关键词 蛋白印迹 背肩胛骨棕色脂肪组织 转膜液 黑皮质素-4型受体
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“益肾温阳,健脾疏肝”背俞穴埋线对围绝经期大鼠肥胖的影响及机制研究 被引量：1
2
作者 金颖 王庆谚 +4 位作者 戴俭宇 李记泉 白增华 马原 贾连群 《辽宁中医杂志》 CAS 2022年第12期189-193,共5页
目的 探讨“益肾温阳,健脾疏肝”背俞穴埋线对围绝经期大鼠肥胖的影响及其机制。方法 48只SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组和埋线组,每组12只,模型组、埋线组大鼠采用双侧卵巢切除术(OVX)制备围绝经期肥胖大鼠模型,埋线组采用... 目的 探讨“益肾温阳,健脾疏肝”背俞穴埋线对围绝经期大鼠肥胖的影响及其机制。方法 48只SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组和埋线组,每组12只,模型组、埋线组大鼠采用双侧卵巢切除术(OVX)制备围绝经期肥胖大鼠模型,埋线组采用肾俞穴、肝俞穴、脾俞穴埋线治疗。比较各组大鼠体质量变化、Lee′s指数、各部位脂肪重量与重量比,血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),棕色脂肪组织(BAT)中环磷酸腺苷(cAMP)含量及解偶联蛋白1(uncoupling protein, UCP1)、过氧化物酶增殖活化受体γ协同刺激因子1(PGC1)、氧化物酶增殖激活受体γ(PPARγ)mRNA与蛋白表达。结果 与假手术组相比,模型组大鼠体质量、Lee′s指数、各部位脂肪重量与白色脂肪重量比明显升高,血清TC、TG、LDL-C含量升高、HDL-C含量下降,BAT中cAMP含量及UCP1、PGC1、PPARγmRNA与蛋白表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。经穴位埋线治疗后,大鼠体质量、Lee′s指数、各部位脂肪重量与白色脂肪重量比降低,血清TG、LDL-C含量降低、HDL-C含量升高,BAT中cAMP含量、UCP1、PGC1、PPARγmRNA与蛋白表达上调,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 “益肾温阳,健脾疏肝”穴位埋线能够防治围绝经期大鼠肥胖,其机制可能是通过增加BAT内cAMP含量,上调UCP1、PGC1、PPARγmRNA与蛋白表达,加强脂肪组织能量代谢实现的。 展开更多
关键词 埋线 背俞穴 棕色脂肪组织 UCP1
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