胰十二指肠同源盒基因-1逆转录病毒表达载体的构建及其在肝干细胞中的稳定表达

1

作者 金彩霞 李文林 +3 位作者 朱吉 田棣 张南 胡以平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期834-836,共3页

目的:通过克隆胰十二指肠同源盒基因-1(pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1),构建表达PDX-1的逆转录病毒表达载体和稳定表达PDX-1的肝原始细胞系(liver epithelial progenitor cells,LEPCs),以研究肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。... 目的:通过克隆胰十二指肠同源盒基因-1(pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1),构建表达PDX-1的逆转录病毒表达载体和稳定表达PDX-1的肝原始细胞系(liver epithelial progenitor cells,LEPCs),以研究肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。方法:通过PCR方法克隆PDX-1基因全长,将其构建到pMSCVpuro逆转录病毒载体中获得pMSCV PDX-1 puro载体。将该载体导入Phoenix包装细胞系,进而采用乒乓转染的方法感染包装细胞PT67,获得高滴度稳定产毒的PT67细胞系。结果:成功构建了pMSCV PDX-1 puro载体,并转染PT67细胞。利用PT67细胞系产生的病毒上清可以高效的感染体外培养的肝干细胞LEPCs,获得稳定表达PDX-1基因的LEPCs(LEPCs PDX-1)。结论:PDX-1逆转录病毒表达载体的成功构建和稳定表达PDX-1的肝干细胞系的获得为研究LEPCs向胰腺细胞的转分化奠定了基础。 展开更多

关键词 胰十二指肠同源盒基因-1 逆转录病毒科 肝 干细胞

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胰十二指肠同源盒基因-1启动子在肝干细胞分化研究中的应用

2

作者 金彩霞 李文林 +3 位作者 朱吉 张南 田棣 胡以平 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2006年第5期337-339,共3页

背景与目的利用报告基因监测肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。材料与方法通过PCR从小鼠基因组中克隆胰十二指肠同源盒基因-1(Pancreaticduodenalhomeobox-1,PDX-1)启动子片段,构建PDX-1启动子调控的绿色荧光蛋白报告载体(pPDX-1EGFP),... 背景与目的利用报告基因监测肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。材料与方法通过PCR从小鼠基因组中克隆胰十二指肠同源盒基因-1(Pancreaticduodenalhomeobox-1,PDX-1)启动子片段,构建PDX-1启动子调控的绿色荧光蛋白报告载体(pPDX-1EGFP),并利用报告载体标记的肝原始细胞系(Liverepithelialprogenitorcells,LEPCs)观察肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。结果获得PDX-1启动子调控的绿色荧光蛋白报告载体及报告载体标记的LEPCs。结论pPDX-1EGFP报告载体的成功构建为研究LEPCs向胰腺细胞的转分化提供了简捷的分子工具。 展开更多

关键词 肝干细胞 胰十二指肠同源盒基因-1启动子 转分化 绿色荧光蛋白

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胰十二指肠同源盒1诱导不同代别干细胞分化为胰岛样细胞移植对1型糖尿病大鼠的疗效观察

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作者 袁慧娟 闫淑芳 +4 位作者 刘宏霞 杨俊朋 薛丰田 张会峰 赵志刚 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 2016年第7期422-427,共6页

目的：通过胰十二指肠同源盒1（PDX-1）转染不同代别大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）诱导分化为胰岛样细胞，进而移植治疗1型糖尿病SD大鼠，观察干细胞移植对1型糖尿病的疗效。方法采用PDX？1转染第3代和第5代BMSCs诱导为胰岛样细胞，双... 目的：通过胰十二指肠同源盒1（PDX-1）转染不同代别大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）诱导分化为胰岛样细胞，进而移植治疗1型糖尿病SD大鼠，观察干细胞移植对1型糖尿病的疗效。方法采用PDX？1转染第3代和第5代BMSCs诱导为胰岛样细胞，双硫腙染色鉴定并测定其胰岛素分泌水平。链脲佐菌素（STZ）制备1型糖尿病SD大鼠模型，将45只成模SD大鼠按随机数字表法分为3组：移植组A、移植组B、模型对照组，每组均为15只，分别经尾静脉注入第3代BMSCs＋PDX-1、第5代BMSCs＋PDX-1、等量生理盐水干预28 d；另取15只健康SD大鼠作为正常对照组，经尾静脉注入等量生理盐水。监测各组大鼠移植第0、7、14、21和28天血糖、空腹胰岛素和C肽水平；第21天4组大鼠均行糖耐量实验；第28天取各组大鼠胰腺组织进行免疫组化观察细胞存活及胰岛细胞状况。采用单因素方差分析进行组间数据比较。结果自移植第14天，移植组A和B血糖开始下降，胰岛素和C肽量开始升高，其中第21和28天移植B组的血糖均显著低于A组[（21.90±0.26）比（23.60±1.49） mmol/L、（21.80±1.32）比（24.20±2.06） mmol/L，t=9.65、12.73，均P〈0.05]，而同时点胰岛素和C肽显著高于A组（t=8.73、12.51、18.36、25.12，均P〈0.05）。糖耐量实验显示移植组B血糖曲线下面积显著小于移植组A [（1809.0±2.6）比（2301.0±6.8） mmol·L^-1·min，t=5.241，P〈0.05]。免疫荧光检测显示移植组A和移植组B大鼠胰腺组织中均有胰岛素阳性细胞存活，移植组B中胰岛素阳性细胞比例显著高于移植组A （48.0%±1.3%比32.8%±3.2%，t=8.38，P〈0.05）。结论 PDX？1转染的第5代BMSCs对1型糖尿病大鼠的疗效优于PDX？1转染的第3代BMSCs。 展开更多

关键词 糖尿病 1型 胰十二指肠同源盒1 大鼠骨髓间充质干细胞 胰岛素样细胞

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胰高血糖素样肽-1对胰岛素分泌传导通路中胰十二指肠同源盒-1基因的调控作用

4

作者 吴美芬 武革 《国际免疫学杂志》 CAS 2012年第2期118-120,共3页

胰高血糖素样肽-1（GLP-1）是-种肠促胰岛素，它通过多种复杂的机制使血糖降低的同时，促进胰岛β细胞增殖与再生；胰十二指肠同源盒-1（PDX-1）是β细胞内重要的转录因子，参与β细胞胰岛素基因的转录调控，GLP-1通过上调PDX-1基因蛋... 胰高血糖素样肽-1（GLP-1）是-种肠促胰岛素，它通过多种复杂的机制使血糖降低的同时，促进胰岛β细胞增殖与再生；胰十二指肠同源盒-1（PDX-1）是β细胞内重要的转录因子，参与β细胞胰岛素基因的转录调控，GLP-1通过上调PDX-1基因蛋白的表达而影响胰岛β细胞增殖与再生。 展开更多

关键词 糖尿病 胰岛素 胰高血糖素样肽-1 胰十二指肠同源盒-1

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表现为妊娠期高血糖的胰十二指肠同源盒1基因突变家系的临床及遗传学研究 被引量：2

5

作者 邓明群 肖新华 +2 位作者 宋英娜 李晓青 平凡 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期48-52,共5页

目的探讨一个以妊娠期高血糖为主要表现的胰十二指肠同源盒1(PDX1)基因突变家系的临床表现及分子遗传学机制。方法回顾性研究一个孕期发现的高血糖家系,其先证者表现为妊娠期高血糖且营养不良,进行单基因糖尿病目标基因二代测序捕获和... 目的探讨一个以妊娠期高血糖为主要表现的胰十二指肠同源盒1(PDX1)基因突变家系的临床表现及分子遗传学机制。方法回顾性研究一个孕期发现的高血糖家系,其先证者表现为妊娠期高血糖且营养不良,进行单基因糖尿病目标基因二代测序捕获和一代测序验证,比对遗传学数据库,分析突变位点的人群突变频率及物种保守性,并采用Mutation Taster、Polyphen-2、FATHMM等软件进行生物信息学分析,根据美国医学遗传学与基因组学学会分级进行致病性判定,根据基因检测结果对患者的诊治方案进行调整,并回顾文献中PDX1基因突变在妊娠期高血糖中的研究。结果基因检测提示PDX1基因突变(p.D64E),该突变位点物种保守性高,家系验证提示PDX1基因突变与糖尿病表型共分离,是新发现的位点。先证者除β细胞功能缺陷之外,还合并胰腺外分泌功能障碍,进行胰岛素及胰酶补充治疗后患者孕重增加满意,生化指标恢复正常。回顾文献发现,PDX1基因突变在高加索人种中可导致妊娠期高血糖及围产期不良结局。结论本研究发现在中国人群中反复出现的妊娠期高血糖可由PDX1基因突变导致,提示对该类患者应进行胰腺外分泌功能检测,如有异常应及时进行功能替代,进而实现精准诊疗。同时提示在妊娠期高血糖人群中建立单基因糖尿病筛查的重要性。 展开更多

关键词 糖尿病 妊娠 胰十二指肠同源盒1 青少年的成人起病型糖尿病

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胰十二指肠同源异型盒基因-1多态性与2型糖尿病的相关性 被引量：1

6

作者 谭英姿 李俊燕 +1 位作者 陶枫 陆灏 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第24期6136-6138,共3页

目的探讨胰十二指肠同源异型盒基因(PDX)-1多态性位点(rs4415872,rs1124607和rs4581569)与上海汉族人群2型糖尿病的关系。方法选取1 285例正常健康个体为对照组,经确诊的1 245例2型糖尿病患者为病例组。收集静脉血液标本1 ml,提取全基因... 目的探讨胰十二指肠同源异型盒基因(PDX)-1多态性位点(rs4415872,rs1124607和rs4581569)与上海汉族人群2型糖尿病的关系。方法选取1 285例正常健康个体为对照组,经确诊的1 245例2型糖尿病患者为病例组。收集静脉血液标本1 ml,提取全基因组DNA。应用Taqman基因分型技术进行多态性检测。结果与对照组相比,PDX-1基因rs1124607位点的基因型和等位基因频率分布在病例组中具有统计学意义[基因型:P=7.82×10^(-5);等位基因:P=0.000 9,OR=0.780(0.688~0.886)]经Bonferroni矫正后仍具有统计学差异(基因型:P=2.35×10^(-4);等位基因:P=0.000 3)。结论 PDX1基因rs1124607位点可能与上海汉族人群2型糖尿病具有相关性。 展开更多

关键词 2型糖尿病 基因多态性 胰十二指肠同源异型盒基因

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白细胞介素10基因对未发病非肥胖型糖尿病小鼠肝脏胰-十二指肠同源盒1表达的影响 被引量：2

7

作者 于淑凤 任安霞 +1 位作者 张丽娟 李堂 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第27期4371-4378,共8页

背景:研究发现肝脏细胞在给予转入胰-十二指肠同源盒1基因后可合成胰岛素,抗CD20单克隆抗体可抑制产胰岛素的肝脏细胞发生自身免疫反应,但机制尚不明确。目的:了解腺病毒介导的小鼠白细胞介素10(Adenovirus vector-mediated murine inte... 背景:研究发现肝脏细胞在给予转入胰-十二指肠同源盒1基因后可合成胰岛素,抗CD20单克隆抗体可抑制产胰岛素的肝脏细胞发生自身免疫反应,但机制尚不明确。目的:了解腺病毒介导的小鼠白细胞介素10(Adenovirus vector-mediated murine interleukin,Ad-mI L-10)及抗CD20单克隆抗体联合干预未发病非肥胖糖尿病模型小鼠,对其肝脏细胞以及肝脏胰-十二指肠同源盒1表达的影响。方法:3-5周龄雌性未发病非肥胖糖尿病模型小鼠40只,随机分为抗CD20单克隆抗体组、抗CD20单克隆抗体+白细胞介素10组、白细胞介素10组和对照组,分别于第1,8,15,21天尾静脉注射抗CD20单克隆抗体、抗CD20单克隆抗体+Ad-m IL-10、Ad-mI L-10和生理盐水。结果与结论:12周后,与对照组相比,经抗CD20单克隆抗体和/或白细胞介素10治疗的未发病非肥胖糖尿病模型小鼠血糖水平明显降低,而血清和肝脏中胰岛素、白细胞介素10和CD20表达明显增加,同时肝脏中胰-十二指肠同源盒1表达水平增加;且经抗CD20单克隆抗体和白细胞介素10联合对上述指标的影响高于单独应用;但无论是联合干预还是单独干预均对小鼠肝脏炎症病变无明显影响。证实CD20单抗及白细胞介素10基因联合干预为促使非肥胖糖尿病模型小鼠肝脏胰-十二指肠同源盒1表达机制之一。 展开更多

关键词 糖尿病 1型 抗原 CD20 白细胞介素10 肝 实验动物 组织工程 单克隆抗体 胰-十二指肠同源盒1 非肥胖型糖尿病小鼠 1型糖尿病 胰岛素 肝脏 国家自然科学基金

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高脂状态下Exendin-4对胰岛βTc6细胞内胰-十二指肠同源盒-1表达、细胞增殖功能及胰岛素分泌能力的干预作用

8

作者 黄林晶 侯毅翰 +2 位作者 杨立勇 严孙杰 沈喜妹 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第20期4945-4947,共3页

目的 探讨Exendin-4在高脂状态下是否具有抗脂毒性及其相关机制是否涉及胰-十二指肠同源盒（PDX）-1。方法 不同浓度的Exendin-4培育βTc6细胞不同时间,再应用1 mmol/L游离脂肪酸（FFA）干预24 h,检测细胞内PDX-1表达及增殖能力和胰岛... 目的 探讨Exendin-4在高脂状态下是否具有抗脂毒性及其相关机制是否涉及胰-十二指肠同源盒（PDX）-1。方法 不同浓度的Exendin-4培育βTc6细胞不同时间,再应用1 mmol/L游离脂肪酸（FFA）干预24 h,检测细胞内PDX-1表达及增殖能力和胰岛素分泌功能。结果 1Exendin-4干预6 h,各组细胞PDX-1表达、细胞增殖能力和胰岛素分泌功能均未见明显改善;2当Exendin-4干预延长至12~24 h,随着干预浓度增高,细胞内PDX-1逐渐升高,细胞增殖能力和胰岛素分泌功能明显好转。结论 高脂状态下适宜浓度的Exendin-4干预一定时限可上调β细胞内PDX-1的表达,并改善细胞增殖功能及胰岛素分泌能力。 展开更多

关键词 EXENDIN-4 胰-十二指肠同源盒-1 胰岛素 游离脂肪酸 βTc6细胞

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印记基因过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α和胰十二指肠同源盒的表达和甲基化与新生儿出生结局的关系

9

作者 范海玲 卢兰琴 +2 位作者 王丽珍 周露丹 杜立中 《中国卫生检验杂志》 CAS 2017年第23期3449-3451,3454,共4页

目的研究印记基因PGC-1α和PDX1在无妊娠并发症孕妇分娩的异常出生体质量儿胎盘组织中的mRNA表达和甲基化的状态,探讨PGC-1α和PDX1甲基化状态对新生儿出生结局的影响。方法应用实时定量PCR技术和基因组DNA亚硫酸氢钠处理后直接测序法... 目的研究印记基因PGC-1α和PDX1在无妊娠并发症孕妇分娩的异常出生体质量儿胎盘组织中的mRNA表达和甲基化的状态,探讨PGC-1α和PDX1甲基化状态对新生儿出生结局的影响。方法应用实时定量PCR技术和基因组DNA亚硫酸氢钠处理后直接测序法检测高出生体质量组、低出生体质量组和正常出生体质量组胎盘组织中PGC-1α和PDX1的mRNA表达和甲基化。结果 PGC-1α、PDX1两基因低出生体质量组与正常出生体质量组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),PDX1在高出生体质量组与正常出生体质量组之间差异有统计学意义(P<0.05);PDX1甲基化水平与mRNA的表达呈负相关(r=-0.73,P<0.01)。在低出生体质量组和正常出生体质量组,PGC-1α和PDX1mRNA在胎盘中的表达与出生体质量呈正相关(r值分别为0.87、0.68,P<0.01)。结论 PGC-1α和PDX1的表达下调可能是发生低出生体质量儿的原因之一,甲基化水平的升高可能参与其表达下调,并且可能与低出生体质量儿的产生相关。 展开更多

关键词 印记基因 甲基化 过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α 胰十二指肠同源盒 出生体质量

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Pdx-1、Ngn3联合MafA诱导干细胞分化为胰岛素分泌细胞移植治疗1型糖尿病大鼠的效果

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作者 闫淑芳 袁慧娟 《河南医学研究》 CAS 2024年第9期1553-1557,共5页

目的通过胰十二指肠同源盒1(Pdx-1)、神经元素3(Ngn3)联合V型肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源基因A(MafA)共转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导分化为胰岛素分泌细胞(IPCs),移植治疗1型糖尿病大鼠并观察其疗效。方法Pdx-1、Ngn3和MafA共转染... 目的通过胰十二指肠同源盒1(Pdx-1)、神经元素3(Ngn3)联合V型肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源基因A(MafA)共转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导分化为胰岛素分泌细胞(IPCs),移植治疗1型糖尿病大鼠并观察其疗效。方法Pdx-1、Ngn3和MafA共转染BMSCs诱导为IPCs,链脲佐菌素(STZ)制备45只1型糖尿病SD大鼠模型,BMSCs组(15只)肾被膜下移植2×10^(6) BMSCs,IPCs组(15只)大鼠肾被膜下移植2×10^(6) IPCs,sham-operation组(15只)大鼠肾被膜下注入等量生理盐水,另取15只健康SD大鼠肾被膜下注入等量生理盐水作为normal组。监测各组大鼠移植第0、7、14、21、28 d空腹血糖及体重;第21天对各组大鼠均行葡萄糖耐量试验;第28天取各组大鼠肾脏组织进行免疫组化。结果BMSCs和IPCs组大鼠血糖随时间下降,移植第21天两组大鼠空腹血糖低于移植第0天,且均低于同期sham-operation组(P<0.05),移植第28天IPCs组大鼠空腹血糖低于BMSCs组(P<0.05)。糖尿病大鼠中IPCs组和BMSCs组腹腔葡萄糖耐量实验曲线下面积小于sham-operation组,且IPCs组曲线下面积最小(P<0.05)。BMSCs组和IPCs组大鼠肾脏组织可见棕色荧光的胰岛素表达,且IPCs组胰岛素荧光光密度高于BMSCs组(P<0.05)。结论Pdx-1-Ngn3联合MafA诱导BMSCs形成的IPCs移植后在糖尿病大鼠体内可降低糖尿病大鼠的空腹血糖。 展开更多

关键词 胰十二指肠同源盒1 神经元素3 V型肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源基因A 大鼠骨髓间充质干细胞 胰岛素分泌细胞 1型糖尿病

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抵抗素对胰岛β细胞胰-十二指肠同源盒因子-1表达及胰岛素分泌和细胞凋亡影响的观察 被引量：2

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作者 杨立勇 郑少娟 +1 位作者 沈喜妹 严孙杰 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期349-352,共4页

目的探讨抵抗素对胰岛β细胞胰-十二指肠同源盒因子-1(PDX-1)的表达、胰岛素分泌及细胞增殖、凋亡的影响。方法βTc6细胞分为对照(NC)组和抵抗素组(浓度20～200ng/ml),干预6、12、24h,CCK-8法测定细胞增殖能力,DNA Ladder检测细胞凋亡,R... 目的探讨抵抗素对胰岛β细胞胰-十二指肠同源盒因子-1(PDX-1)的表达、胰岛素分泌及细胞增殖、凋亡的影响。方法βTc6细胞分为对照(NC)组和抵抗素组(浓度20～200ng/ml),干预6、12、24h,CCK-8法测定细胞增殖能力,DNA Ladder检测细胞凋亡,RT-PCR检测PDX-1基因表达,放射免疫法测定胰岛素分泌。结果 (1)与NC组比较,20、40ng/ml抵抗素组各干预时段,胰岛β细胞的PDX-1表达、增殖活力、凋亡、胰岛素分泌差异均无统计学意义(P>0.05);(2)随抵抗素浓度在60～200ng/ml内增加,干预时间由6～24h延长,细胞PDX-1表达、增殖活力、胰岛素分泌均呈现浓度和时间依赖性降低(P均<0.05),且细胞凋亡条带逐渐明显。结论在一定的浓度和时间范围内,抵抗素可呈浓度和时间依赖性下调胰岛β细胞PDX-1表达,损害胰岛素分泌,抑制细胞增殖、诱导其凋亡。 展开更多

关键词 抵抗素 胰岛Β细胞 胰-十二指肠同源盒因子-1 胰岛素分泌 细胞凋亡

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PDX-1联合利拉鲁肽诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞的效果 被引量：4

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作者 闫淑芳 吴敬 +5 位作者 刘宏霞 杜少斐 张会峰 史晓阳 袁倩 袁慧娟 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2016年第2期161-166,共6页

目的:探讨胰十二指肠同源盒-1(PDX-1)联合利拉鲁肽诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为胰岛样细胞(IPCs)的效果。方法:构建真核表达载体p EGFP-pc DNA3.1(+)-PDX-1,脂质体介导其转染贴壁培养法分离得到的大鼠BMSCs,用潮霉素筛选稳定... 目的:探讨胰十二指肠同源盒-1(PDX-1)联合利拉鲁肽诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为胰岛样细胞(IPCs)的效果。方法:构建真核表达载体p EGFP-pc DNA3.1(+)-PDX-1,脂质体介导其转染贴壁培养法分离得到的大鼠BMSCs,用潮霉素筛选稳定转染细胞PDX-1-BMSCs。将BMSCs和PDX-1-BMSCs分别用50 nmol/L利拉鲁肽或培养液培养10 d,然后ELISA法检测细胞上清胰岛素浓度,real-time PCR法检测细胞中Tle、Nkx6.1、Ngn3、Nestin、PDX-1 mRNA的表达。结果:4组细胞诱导过程中形态上趋向胰岛样细胞分化;利拉鲁肽和PDX-1均可诱导BMSCs胰岛素分泌水平增加(P<0.05);PDX-1可促进BMSCs中PDX-1、Ngn3、Nkx6.1、Tle mRNA的表达(P<0.05);利拉鲁肽可促进PDX-1、Ngn3 mRNA的表达(P<0.05);两者有协同作用的趋势。结论:PDX-1联合利拉鲁肽可以诱导BMSCs向IPCs分化并分泌胰岛素。 展开更多

关键词 胰十二指肠同源盒-1 利拉鲁肽 大鼠 骨髓间充质干细胞 胰岛样细胞

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烟酰胺单核苷酸对RIN-m5f细胞中胰岛素分泌及PDX-1和FoxO1基因表达的影响(英文) 被引量：3

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作者 盛飞凤 任贤 +7 位作者 戴幸平 徐潇静 董敏 裴奇 屈健 周智广 周宏灏 刘昭前 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期958-963,共6页

目的:在细胞水平研究烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)对胰岛素分泌的调节作用及其对与胰岛素分泌相关的重要转录因子胰十二指肠同源盒基因(pancreatic and duodenalhomeobox-1,PDX-1)和分叉头框家族转录因子1(forkhead... 目的:在细胞水平研究烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)对胰岛素分泌的调节作用及其对与胰岛素分泌相关的重要转录因子胰十二指肠同源盒基因(pancreatic and duodenalhomeobox-1,PDX-1)和分叉头框家族转录因子1(forkhead box-containing protein O-1,FoxO1)基因表达的影响。方法:采用大鼠胰岛素ELISA试剂盒检测RIN-m5f细胞胰岛素分泌水平。用Real-time PCR检测RIN-m5f细胞PDX-1和FoxO1的mRNA表达水平。用Western印迹检测RIN-m5f细胞PDX-1蛋白表达水平。结果:用瑞格列奈10 nmol/L+NMN 100μmol/L处理RIN-m5f细胞48 h,与空白对照及DMSO对照组相比,胰岛素分泌量均显著增高(P<0.05);与NMN 50μmol/L组比较,胰岛素分泌量的增高也有统计学意义(P<0.05)。10,50和100μmol/L的NMN作用RIN-m5f细胞36 h,PDX-1的mRNA表达量均上调(依次为P<0.05,P<0.01,P<0.001)。100μmol/L剂量组与10μmol/L和50μmol/L剂量组比较差异也有统计学意义(P<0.001)。50,100和200μmol/L的NMN作用RIN-m5f细胞36或48 h,PDX-1的蛋白表达量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:NMN可以调控RIN-m5f细胞中胰岛素的分泌及PDX-1的mRNA表达水平。 展开更多

关键词 烟酰胺单核苷酸 胰十二指肠同源盒基因 分叉头框家族转录因子1 RIN-m5f

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PDX-1在人脂肪间充质干细胞分化为胰岛分泌细胞中的作用 被引量：4

14

作者 白国立 谭雪莹 史光军 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第25期17-19,共3页

目的探讨胰十二指肠同源盒基因1(PDX-1)在人脂肪间充质干细胞(ADSC)分化为胰岛分泌细胞中的作用。方法取复苏冻存的ADSC,随机分为实验组与对照组,实验组采用腺病毒转染方法将PDX-1转入ADSC,对照组无腺病毒感染。Western blotting法检测... 目的探讨胰十二指肠同源盒基因1(PDX-1)在人脂肪间充质干细胞(ADSC)分化为胰岛分泌细胞中的作用。方法取复苏冻存的ADSC,随机分为实验组与对照组,实验组采用腺病毒转染方法将PDX-1转入ADSC,对照组无腺病毒感染。Western blotting法检测实验组转染结果,ELISA法检测两组细胞胰岛素分泌量,RT-PCR法检测两组胰岛分泌相关基因Ngn3和Islet-1表达。结果转染PDX-1的ADSC于48 h后可检测到PDX-1基因的转录,而对照组则无PDX-1基因的转录。转染后15 d,实验组和对照组细胞在低糖环境下分泌的胰岛素量分别为(6.98±0.74)、(6.78±0.54)ng/m L,两组比较,P>0.05;高糖环境下分泌的胰岛素量分别为(13.38±0.62)、(6.50±0.66)ng/m L,两组比较,P<0.05。对照组中Ngn3和Islet-1不表达,实验组与对照组Islet-1相对表达量分别为5.150±0.177、1.000±0.089,Ngn3相对表达量分别为5.819±1.629、1.000±0.120,两组比较,P均<0.05。结论 PDX-1基因对人脂肪间充质干细胞分化为胰岛样细胞有促进作用。 展开更多

关键词 糖尿病 脂肪间充质干细胞 腺病毒 胰十二指肠同源盒基因1 胰岛分泌细胞

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PDX-1基因转染人脂肪间充质干细胞向胰岛样细胞分化及移植治疗1型糖尿病 被引量：1

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作者 史光军 白国立 +2 位作者 谭雪莹 朱继军 许评 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第13期2062-2067,共6页

背景:近年研究发现脂肪间充质干细胞不仅具有多向分化潜能,在血糖平衡及激素产生方面也具有重要作用。目的:观察PDX-1基因转染脂肪间充质干细胞向胰岛样细胞的分化能力及移植后对糖尿病大鼠的治疗效果。方法:采用腺病毒转染方法将PDX-1... 背景:近年研究发现脂肪间充质干细胞不仅具有多向分化潜能,在血糖平衡及激素产生方面也具有重要作用。目的:观察PDX-1基因转染脂肪间充质干细胞向胰岛样细胞的分化能力及移植后对糖尿病大鼠的治疗效果。方法:采用腺病毒转染方法将PDX-1基因转入人脂肪间充质干细胞,双硫腙染色鉴定细胞分化情况,ELISA法检测细胞胰岛素分泌水平。从20只雄性SD大鼠中随机取4只作为对照组,注射生理盐水,其余16只按65 mg/kg的剂量注射链脲霉素建立糖尿病模型,再随机等分为移植组和糖尿病组,移植组大鼠尾静脉注射PDX-1基因转染脂肪间充质干细胞。结果与结论:(1)转染后15 d,转染组胰岛素阳性细胞数量、胰岛素分泌量均高于未转染组(P<0.05);(2)移植组大鼠空腹血糖水平显著下降(P<0.05),体质量明显增加(P<0.05),而糖尿病大鼠空腹血糖维持在较高水平,且体质量显著下降;(3)结果提示,导入PDX-1基因对人脂肪间充质干细胞分化为胰岛样细胞具有促进作用,PDX-1转染脂肪间充质干细胞移植能有效治疗大鼠糖尿病,但具体机制尚待进一步研究。 展开更多

关键词 干细胞 移植 脂肪间充质干细胞 胰十二指肠同源盒基因1 腺病毒 基因转染 胰岛样细胞 糖尿病 血糖 体质量

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腺相关病毒介导的pdx-1基因表达促进糖尿病大鼠肝脏细胞向胰岛素产生细胞转化的研究(英文) 被引量：1

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作者 李华 李欣燕 许瑞安 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第6期614-619,共6页

目的:胰十二指肠同源盒基因-1(pancreatic duodenal homeobox-1,pdx-1)是胰岛发育和分化过程中重要的转录因子。本实验旨在研究腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的pdx-1基因的表达是否可以诱导糖尿病大鼠肝脏细胞分化成产生... 目的:胰十二指肠同源盒基因-1(pancreatic duodenal homeobox-1,pdx-1)是胰岛发育和分化过程中重要的转录因子。本实验旨在研究腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的pdx-1基因的表达是否可以诱导糖尿病大鼠肝脏细胞分化成产生胰岛素的细胞,以进一步为糖尿病的细胞替代疗法提供信息。方法:门静脉途径注射AAV-pdx-1或AAV对照载体到大鼠体内。6周后,用RT-PCR和免疫细胞化学法检测肝脏中胰岛素的基因表达及测定大鼠血糖、体重的变化。结果:AAV-pdx-1治疗组明显提高了糖尿病大鼠肝脏中胰岛素的基因表达和胰岛素阳性细胞数,改善了糖尿病大鼠的高血糖状态及增加了体重。结论:AAV-pdx-1可诱导糖尿病大鼠肝脏细胞分化成产生胰岛素的细胞,缓解了糖尿病状态。其分化的机制及分化的肝脏细胞亚群需进一步实验研究,以提高分化效率。 展开更多

关键词 腺相关病毒 胰十二指肠同源盒基因-1 胰岛素 糖尿病 高血糖

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PDX-1与胰岛B细胞功能 被引量：1

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作者 张旭东 张雷 《医学综述》 2008年第16期2415-2418,共4页

胰岛B细胞分泌胰岛素,而胰岛素是体内惟一的降血糖激素,对于维持机体血糖的动态平衡起着决定性的作用。胰岛B细胞分泌的调节机制十分复杂,至今仍未完全阐明。胰十二指肠同源盒1(PDX-1)参与胰腺早期发育和较晚期B细胞的分化,在成年机体... 胰岛B细胞分泌胰岛素,而胰岛素是体内惟一的降血糖激素,对于维持机体血糖的动态平衡起着决定性的作用。胰岛B细胞分泌的调节机制十分复杂,至今仍未完全阐明。胰十二指肠同源盒1(PDX-1)参与胰腺早期发育和较晚期B细胞的分化,在成年机体内通过调节一系列基因的表达来维持B细胞的形态和正常功能,尤其是通过调控胰岛素及胰岛素相关基因如葡萄糖激酶、葡萄糖转运蛋白2等基因的表达,促进胰岛素分泌和维持胰岛B细胞的正常功能,其在胚胎期胰岛细胞发育、增殖、分化和成熟以及胰岛B细胞分泌功能的调节中扮演着重要角色。PDX-1还可以诱导非胰岛素分泌细胞如肝细胞等转化为胰岛素分泌细胞,在糖尿病的治疗方面也表现出了巨大的潜力。 展开更多

关键词 胰十二指肠同源盒1 胰岛B细胞 基因表达调控 糖尿病

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Apelin对葡萄糖的毒性作用及对胰岛细胞PDX-1表达的影响

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作者 黄炫赓 黎英荣 +4 位作者 郑晓菲 潘海林 苏宏业 夏宁 肖常青 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第33期4633-4635,共3页

目的探讨Apelin对葡萄糖毒性作用及对胰岛细胞胰十二指肠同源盒蛋白-1(PDX-1)表达的影响。方法在不同葡萄糖浓度下(正糖组5.6mmol/L,高糖组16.7mmol/L,极高糖组33.3mmol/L),+/-Apelin-36培养胰岛β细胞株NIT-1细胞3d,然后测定基础和葡... 目的探讨Apelin对葡萄糖毒性作用及对胰岛细胞胰十二指肠同源盒蛋白-1(PDX-1)表达的影响。方法在不同葡萄糖浓度下(正糖组5.6mmol/L,高糖组16.7mmol/L,极高糖组33.3mmol/L),+/-Apelin-36培养胰岛β细胞株NIT-1细胞3d,然后测定基础和葡萄糖刺激后胰岛细胞胰岛素分泌量,测定细胞内胰岛素含量和PDX-1蛋白及mRNA表达。结果与正糖组比较,高糖组和极高糖组的基础和葡萄糖刺激后胰岛素分泌、细胞内胰岛素均明显减少,PDX-1蛋白表达下降(P<0.05);与未加Apelin组比较,加Apelin高糖组和极高糖组的基础和葡萄糖刺激后胰岛素分泌、细胞内胰岛素明显减少,PDX-1蛋白表达下降(P<0.05);6组胰岛细胞的胰岛素水平与PDX-1蛋白表达呈正相关,与PDX-1mRNA表达无关。结论 Apelin可能通过降低PDX-1蛋白表达参与葡萄糖毒性作用,引起胰岛素分泌减少,从而在糖尿病的发病机制中发挥作用。 展开更多

关键词 APELIN 胰十二指肠同源盒蛋白-1 葡萄糖毒性

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小鼠骨髓间充质干细胞向胰岛素分泌细胞诱导分化过程中调控PDX-1基因表达miRNAs的鉴定 被引量：3

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作者 王涛 马云胜 穆长征 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期204-210,共7页

目的实现小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向胰岛素分泌细胞(IPCs)的诱导分化并对分化过程中可能调控胰十二指肠同源异型盒基因-1(PDX-1)基因表达miRNAs进行鉴定。方法首先分离培养BMSCs,应用conophylline和尼克酰胺将其诱导分化为IPCs,采... 目的实现小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向胰岛素分泌细胞(IPCs)的诱导分化并对分化过程中可能调控胰十二指肠同源异型盒基因-1(PDX-1)基因表达miRNAs进行鉴定。方法首先分离培养BMSCs,应用conophylline和尼克酰胺将其诱导分化为IPCs,采用双硫腙(DTZ)染色和免疫荧光检测胰岛素的表达。然后采用靶基因预测软件miRanda和Target Scan对调控PDX-1基因表达miRNAs进行预测并通过双荧光素酶报告基因系统鉴定。实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测诱导分化过程中miRNAs及PDX-1的表达。结果诱导分化后的细胞双硫腙染色呈猩红色,免疫荧光化学显示有胰岛素表达。生物信息学方法预测得到4个可能调控PDX-1表达的miRNAs,通过双荧光素酶报告基因系统检测发现其中的miR-149和miR-346能结合到PDX-1 mRNA的3’UTR并有效抑制其表达。Real-time PCR检测结果表明,miR-149和miR-346的表达水平与PDX-1表达呈负相关。结论 miR-149和miR-346能负性调控IPCs诱导分化过程中PDX-1的表达。 展开更多

关键词 微小RNA 胰十二指肠同源异型盒基因-1 胰岛素分泌细胞 实时定量聚合酶链反应 小鼠

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胰岛类器官基础应用的研究现状与展望

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作者 吴玲玲 蒋鹏 +3 位作者 武桢 李万里 杨玉伟 高宏君 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期397-402,共6页

类器官指利用干细胞的全能性,将其在体外进行培养,使其不断进行自我更新和自我组织,形成结构和功能与原始器官相似的组织。类器官具有与原始组织保持相似外观和功能的特点,已广泛应用于基础研究及临床研究。目前已经成功培养出肝、肾、... 类器官指利用干细胞的全能性,将其在体外进行培养,使其不断进行自我更新和自我组织,形成结构和功能与原始器官相似的组织。类器官具有与原始组织保持相似外观和功能的特点,已广泛应用于基础研究及临床研究。目前已经成功培养出肝、肾、胰、脑、肠等类器官,其中使用胰岛类器官是类器官领域研究的热点,但由于还未完全解决移植术后排斥反应等问题,目前胰岛类器官仅用于基础研究。本文对胰岛类器官的起源与发展、胰岛类器官的基础应用进行综述,旨在为胰岛类器官实现基础应用向临床应用转化及糖尿病的治疗提供参考。 展开更多

关键词 胰岛类器官 糖尿病 人类多能干细胞(hPSC) 胚胎干细胞(ESC) 诱导多能干细胞(iPSC) 器官移植 胰十二指肠同源盒1(Pdx1) 神经源素3(Ngn3)

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