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罗哌卡因对大鼠脂肪干细胞增殖、凋亡及成骨分化的影响观察
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作者 王静 唐琳 +3 位作者 宋双荣 苏小丽 任丽洁 王萍 《山东医药》 CAS 2024年第9期52-55,共4页
目的观察罗哌卡因对大鼠脂肪干细胞(ADSCs)增殖、凋亡及成骨分化的影响。方法分离并提取大鼠ADSCs,传代培养后,取对数生长期ADSCs分别加入含0 mg/mL、200 mg/mL、500 mg/mL罗哌卡因的培养基100µL,分别记为对照组、200 mg/mL组、500... 目的观察罗哌卡因对大鼠脂肪干细胞(ADSCs)增殖、凋亡及成骨分化的影响。方法分离并提取大鼠ADSCs,传代培养后,取对数生长期ADSCs分别加入含0 mg/mL、200 mg/mL、500 mg/mL罗哌卡因的培养基100µL,分别记为对照组、200 mg/mL组、500 mg/mL组。取各组细胞,继续培养24、48、72 h时,采用CCK-8实验观察细胞增殖能力。取各组细胞,继续培养24 h,使用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。取各组细胞,加入成骨诱导培养基,观察各组细胞成骨分化能力,包括成骨潜能(以ALP活性表示)、矿化能力(以OD值表示)和成骨相关蛋白骨钙素(OCN)表达水平。结果与对照组相比,200 mg/mL组、500 mg/mL组细胞培养24、48、72 h时的增殖能力均显著下降,且500 mg/mL组低于200 mg/mL组。对照组、200 mg/mL组、500 mg/mL组细胞凋亡率分别为2.78%±0.23%、4.15%±0.62%、5.88%±0.78%,组间相比,P均<0.05。与对照组相比,200 mg/mL组、500 mg/mL组细胞ALP活性、矿化能力、OCN蛋白表达水平均显著下降,且500 mg/mL组低于200 mg/mL组。结论200 mg/mL、500 mg/mL的罗哌卡因均可抑制大鼠ADSCs增殖能力,降低其成骨能力,促进其凋亡,且500 mg/mL罗哌卡因的抑制效果高于200 mg/mL。 展开更多
关键词 罗哌卡因 脂肪干细胞 细胞增殖 细胞成骨分化 细胞凋亡
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miR-210-5p对小鼠脂肪干细胞成骨分化的影响及作用机制分析
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作者 郑世雄 杨巍 刘合亮 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期127-133,共7页
[目的]观察miR-210-5p在小鼠脂肪干细胞增殖和成骨分化中的作用并探讨其作用机制.[方法]将小鼠脂肪干细胞分空白对照组、miR-210-5p模拟物阴性对照组、miR-210-5p模拟物组、miR-210-5p抑制物阴性对照组和miR-210-5p抑制物组,采用CCK-8... [目的]观察miR-210-5p在小鼠脂肪干细胞增殖和成骨分化中的作用并探讨其作用机制.[方法]将小鼠脂肪干细胞分空白对照组、miR-210-5p模拟物阴性对照组、miR-210-5p模拟物组、miR-210-5p抑制物阴性对照组和miR-210-5p抑制物组,采用CCK-8细胞计数法检测细胞增殖能力,茜素红染色观察钙盐矿化结节形成能力,用实时荧光定量PCR检测miR-210-5p水平及成骨分化标志物BMP2、Smad1、Smad5和Runx2 mRNA表达水平,进而用蛋白免疫印迹法检测BMP2、Smad1、Smad5和Runx2蛋白表达水平.[结果] miR-210-5p模拟物组细胞增殖活力显著升高(P<0.01),矿化结节显著增加,BMP2、Smad1、Smad5和Runx2 mRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0.01);miR-210-5p抑制物组细胞增殖活力显著降低(P<0.01),矿化结节显著降低,BMP2、Smad1、Smad5和Runx2 mRNA和蛋白表达水平显著下调(P<0.01).[结论] miR-210-5p可能通过调控BMP2/Smad信号通路促进小鼠脂肪干细胞增殖和成骨分化. 展开更多
关键词 miR-210-5p BMP2/Smad信号通路 小鼠脂肪干细胞 成骨分化
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过表达或沉默lncRNA SNHG8的脂肪干细胞对血管内皮细胞功能障碍的影响
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作者 陈自强 胡晓咏 +5 位作者 杨朝颖 邹婷 吕忠英 张颖 王欢 李红建 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期18-27,共10页
目的:研究过表达或沉默长链非编码RNA(lncRNA)SNHG8的脂肪干细胞(ADSCs)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活力、迁移、成管及表达血管活性因子的影响。方法:(1)流式细胞术及成脂、成骨诱导实验鉴定病态肥胖患者来源的脂肪干细胞(O-ADSCs);RT-... 目的:研究过表达或沉默长链非编码RNA(lncRNA)SNHG8的脂肪干细胞(ADSCs)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活力、迁移、成管及表达血管活性因子的影响。方法:(1)流式细胞术及成脂、成骨诱导实验鉴定病态肥胖患者来源的脂肪干细胞(O-ADSCs);RT-qPCR检测健康人群来源的脂肪干细胞(H-ADSCs)及O-ADSCs内lncRNA SNHG8的表达。(2)Transwell建立ADSCs与HUVECs间接共培养48 h体系,设置O-ADSCs+HUVECs组、HADSCs+HUVECs组和HUVECs组,通过RT-qPCR和Western blot检测HUVECs内血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素1(ET-1)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的mRNA及蛋白表达水平。(3)进一步构建lncRNA SNHG8过表达或沉默慢病毒并感染O-ADSCs,设置O-ADSCs-OE-SNHG8+HUVECs组、O-ADSCs-OE-NC+HUVECs组、O-ADSCs-sh-SNHG8+HUVECs组和O-ADSCs-sh-NC+HUVECs组,共培养48 h后,通过CCK-8实验、划痕实验和小管形成实验分别检测HUVECs活力、迁移能力和成管能力;RT-qPCR和Western blot检测HUVECs内AngⅡ、ET-1和eNOS的mRNA及蛋白表达水平;硝酸还原酶法检测HUVECs内NO含量。结果:(1)所培养细胞经鉴定符合ADSCs特征;(2)与H-ADSCs比较,lncRNA SNHG8在O-ADSCs中显著高表达(P<0.01);(3)与H-ADSCs+HUVECs和HUVECs组相比,O-ADSCs+HUVECs组中HUVECs内AngⅡ和ET-1的mRNA及蛋白表达水平上调(P<0.01);(4)过表达lncRNA SNHG8的OADSCs可增强HUVECs的活力、迁移能力及成管能力,上调HUVECs中AngⅡ和ET-1的mRNA及蛋白表达水平,下调eNOS的mRNA及蛋白表达水平,减少HUVECs内NO含量(P<0.05);而沉默O-ADSCs中lncRNA SNHG8的表达则呈现相反的结果(P<0.05)。结论:(1)O-ADSCs可通过旁分泌作用增强内皮细胞活力、迁移能力及成管能力;(2)过表达lncRNA SNHG8的O-ADSCs促使内皮细胞分泌舒张-收缩因子失衡,导致血管内皮细胞功能障碍。 展开更多
关键词 肥胖相关性高血压 长链非编码RNA SNHG8 脂肪干细胞 人脐静脉内皮细胞
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深度烧伤痂脂肪干细胞源性外泌体蛋白组学差异的初步研究
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作者 巴雅力嘎 巴特 +3 位作者 李全 高雷 李芳 曹胜军 《川北医学院学报》 CAS 2024年第3期293-297,共5页
目的:分析不同脂肪组织来源干细胞源性外泌体(ADSC-Exos)蛋白质组学差异,为深度创面修复提供理论依据。方法:取烧伤痂组织与正常皮下脂肪组织,分离脂肪干细胞(ADSC),通过光镜观察、Western blot(WB)、成骨分化、成脂分化鉴定ADSC。差速... 目的:分析不同脂肪组织来源干细胞源性外泌体(ADSC-Exos)蛋白质组学差异,为深度创面修复提供理论依据。方法:取烧伤痂组织与正常皮下脂肪组织,分离脂肪干细胞(ADSC),通过光镜观察、Western blot(WB)、成骨分化、成脂分化鉴定ADSC。差速离心方法收集脂肪干细胞外泌体(ADSC-Exos),通过电镜观察、WB法、Nanosight分析仪鉴定ADSC-Exos;通过非标记定量蛋白质谱(LFQ)技术分析两组患者ADSC-Exos蛋白质表达水平差异。结果:成功分离ADSC,光镜下呈纤维状,WB显示细胞稳定表达CD29及CD105,成骨诱导分化细胞内见红色密集钙结节、成脂诱导分化细胞内存在折光性好的透亮脂滴。成功分离ADSC-Exos,电镜下呈双膜性结构,WB显示外泌体可稳定表达表面标志物CD63及CD81,Nanosight显示外泌体均匀对称分布,直径30~150 nm。两组表达水平差异蛋白质184种,差异倍数显著上调前10种蛋白:丝裂原活化蛋白激酶3、丝裂原活化蛋白激酶1、转化生长因子β-1前蛋白、细胞凋亡调节因子BAX、热休克蛋白HSP 90α、微管蛋白α-1B链、腺病毒E1B19kDa相互作用蛋白2、钙调素-3、热休克蛋白HSP 90β、蛋白激酶Cβ型;差异倍数显著下调前10种蛋白:激肽源B1、激肽源1、补体家族(C3、C1q C链、C1q B链、C5、C1q A、C4B、C4A、C9)。结论:烧伤痂下组织来源ADSC-Exos蛋白与正常组织的表达存在明显差异,可能与烧伤创面修复、抑制瘢痕过度增生及抗炎与机体免疫等密切相关。 展开更多
关键词 烧伤 外泌体 脂肪干细胞 蛋白组学
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关节腔内注射脂肪干细胞对颞下颌关节骨关节炎模型兔关节软骨破坏的修复作用及其机制
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作者 何静 孙高 +2 位作者 李男男 帕丽孜·阿不力克木 吴国民 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期71-78,共8页
目的:探讨关节腔内注射脂肪干细胞(ADSCs)对颞下颌关节骨关节炎(TMJOA)模型兔关节软骨破坏的修复作用,并阐明其可能的作用机制。方法:27只兔随机分为对照组、模型组和ADSCs组。提取兔ADSCs进行培养,采用碘乙酸钠(MIA)注射法制备兔TMJOA... 目的:探讨关节腔内注射脂肪干细胞(ADSCs)对颞下颌关节骨关节炎(TMJOA)模型兔关节软骨破坏的修复作用,并阐明其可能的作用机制。方法:27只兔随机分为对照组、模型组和ADSCs组。提取兔ADSCs进行培养,采用碘乙酸钠(MIA)注射法制备兔TMJOA模型。ADSCs组TMJOA模型兔颞下颌关节腔内连续2次注射1.0×10^(6)mL^(-1)ADSCs,对照组和模型组兔颞下颌关节腔内注射等量生理盐水,8周后取各组兔颞下颌关节行显微CT(Micro-CT)扫描,分析各组兔髁突组织的骨体积分数(BV/TV)、骨表面积/骨体积比(BS/BV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁间距(Tb.Sp)和骨小梁数(Tb.N),HE染色观察各组兔髁突组织病理形态表现,免疫组织化学染色法检测各组兔髁突组织中SRY相关高迁移率族盒基因9(SOX9)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)和血管内皮生长因子(VEGF)的定位情况和蛋白表达水平,Western blotting法检测各组兔髁突组织中SOX9、MMP-13和VEGF蛋白表达水平。结果:Micro-CT扫描,与对照组比较,模型组兔髁突组织的BV/TV、Tb.Th和Tb.N明显降低(P<0.05),BS/BV和Tb.Sp明显升高(P<0.05);与模型组比较,ADSCs组兔髁突组织的BV/TV、Tb.Th和Tb.N明显升高(P<0.05),BS/BV和Tb.Sp明显降低(P<0.05)。HE染色,对照组兔髁突软骨表面光滑,层次清晰,结构完整;与对照组比较,模型组兔髁突表面不规则,肥大层增厚,出现细胞缺失区和细胞簇状区;与模型组比较,ADSCs组兔髁突组织病理损伤明显减轻。免疫组织化学染色,与对照组和ADSCs组比较,模型组兔髁突组织中棕褐色颗粒增多,主要集中在肥大层,特别是骨软骨结合部位,髁突组织中SOX9、MMP-13和VEGF蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,ADSCs组兔髁突组织肥大层和骨软骨结合部位棕褐色颗粒明显减少,髁突组织中SOX9、MMP-13和VEGF蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。Western blotting法,与对照组比较,模型组兔髁突组织中SOX9、MMP-13和VEGF蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,ADSCs组兔髁突组织中SOX9、MMP-13和VEGF蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:关节腔内注射ADSCs可有效修复TMJOA的软骨破坏,减轻软骨损伤,减缓骨关节炎进展。 展开更多
关键词 颞下颌关节 骨关节炎 脂肪干细胞 软骨损伤 软骨修复
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脂肪干细胞基质胶在糖尿病创面治疗中的研究进展
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作者 任永恒(综述) 苗春雷 +1 位作者 白南 陈远征(审校) 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第1期98-103,共6页
随着糖尿病发病率的增加,由慢性持续性高血糖所引起的难愈性创面长期困扰着糖尿病患者。脂肪细胞外基质/基质血管组分凝胶(SVF-gel)中因含有高度浓缩的细胞外基质和基质血管组分(SVF),在为细胞及细胞因子功能的发挥提供最适微环境的同时... 随着糖尿病发病率的增加,由慢性持续性高血糖所引起的难愈性创面长期困扰着糖尿病患者。脂肪细胞外基质/基质血管组分凝胶(SVF-gel)中因含有高度浓缩的细胞外基质和基质血管组分(SVF),在为细胞及细胞因子功能的发挥提供最适微环境的同时,具有促进创面血管新生、抑制炎症反应和刺激上皮细胞增殖分化等功能,最终达到修复难愈性创面的目的。文章主要就SVF胶的制备、成分以及在糖尿病创面治疗中的机制和应用进行综述。 展开更多
关键词 SVF胶 细胞外基质 脂肪干细胞 糖尿病创面
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基因工程促进脂肪干细胞成骨分化的研究进展
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作者 薛芷忻 李烨 +1 位作者 鲁峰 廖云君 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第2期233-235,238,共4页
大节段骨缺损是骨科、整形外科的常见疾病,严重影响患者的外形和功能。目前临床上常用自体骨移植修复,但这种方法存在着供区骨组织有限、易坏死等缺点。在过去的几十年中,骨组织再生、干细胞移植等方法为修复大量骨组织缺失提供了新的... 大节段骨缺损是骨科、整形外科的常见疾病,严重影响患者的外形和功能。目前临床上常用自体骨移植修复,但这种方法存在着供区骨组织有限、易坏死等缺点。在过去的几十年中,骨组织再生、干细胞移植等方法为修复大量骨组织缺失提供了新的策略。脂肪干细胞(ASCs)是来自脂肪的多能干细胞,可以通过处理诱导分化为成骨细胞,实现骨再生,具有巨大的临床应用潜力。多年来,随着基因工程技术的不断发展,出现了许多对ASCs进行基因修饰以促进其成骨的方法. 展开更多
关键词 脂肪干细胞 成骨分化 基因工程 信号通路
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脂肪干细胞外泌体提高脂肪移植存活率的研究进展
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作者 尹从洋 公美华 +1 位作者 邹同荣(综述) 谢林海(审校) 《中国美容医学》 CAS 2024年第4期183-186,共4页
脂肪移植是外科治疗组织缺损、凹陷的重要治疗手段,脂肪细胞具有来源丰富、良好的组织相容性等优点,成为了整形外科治疗的一个重要手段。但是,传统的脂肪移植存在移植物存活率低、术后效果不稳定等局限,随着细胞辅助脂肪移植的发展,脂... 脂肪移植是外科治疗组织缺损、凹陷的重要治疗手段,脂肪细胞具有来源丰富、良好的组织相容性等优点,成为了整形外科治疗的一个重要手段。但是,传统的脂肪移植存在移植物存活率低、术后效果不稳定等局限,随着细胞辅助脂肪移植的发展,脂肪移植的存活率有了一定的提高,却没有根本解决高吸收率的问题,且可能存在致瘤等潜在风险。脂肪干细胞外泌体的发现有望改变这一现状。 展开更多
关键词 外泌体 脂肪干细胞 脂肪移植 炎症 血管化
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基于线粒体自噬探讨黄芪甲苷孵育的脂肪干细胞对糖尿病肾脏疾病大鼠的保护作用
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作者 高俊丽 李丽 +1 位作者 刘琨 王巍巍 《临床肾脏病杂志》 2024年第1期40-50,共11页
目的观察尾静脉移植黄芪甲苷(astragaloside,Ast)孵育的人脂肪干细胞(human adipose derived stem cell,h ADSC)对糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)大鼠肾损伤的修复作用,探讨其可能机制。方法将21只SD大鼠按随机数字表法... 目的观察尾静脉移植黄芪甲苷(astragaloside,Ast)孵育的人脂肪干细胞(human adipose derived stem cell,h ADSC)对糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)大鼠肾损伤的修复作用,探讨其可能机制。方法将21只SD大鼠按随机数字表法分为正常组(5只)、模型组(6只)、hADSC组(5只)及Ast-hADSC组(5只),后3组大鼠建立DKD模型,hADSC组及AsthADSC组尾静脉注射hADSC或Ast-hADSC悬液,每2周1次,共6次,模型组予等量生理盐水。检测肾功能、血脂、尿微量白蛋白/尿肌酐及尿蛋白定量,HE及Masson染色观察肾脏病理,激光共聚焦观察hADSC在肾脏定植情况,免疫组化及免疫蛋白印迹观察肾组织电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion channel,VDAC)、微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated-protein-lightchain-3,LC3)、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、自噬底物P62蛋白、磷酸酶及张力蛋白同源物诱导的蛋白激酶1(PTEN induced putative kinase 1,Pink1)及E3泛素连接酶(E3 ubiquitin,Parkin)蛋白的表达,透射电镜观察线粒体及自噬小体情况。结果(1)与模型组比较,hADSC组及Ast-hADSC组血清总胆固醇[(2.65±0.04)mmol/L、(2.30±0.29)mmol/L比(3.31±0.91)mmol/L]、尿微量白蛋白/尿肌酐[(58.91±11.86)mg/g、(44±23.82)mg/g比(101.03±46.88)mg/g]及24 h尿蛋白定量[(321.18±88.71)mg、(136.35±66.01)mg比(408.67±113.95)mg]均下降(P<0.05),体重[(240.20±26.43)g、(274.00±17.89)g比(193.60±18.57)g]增加(P<0.05);Ast-hADSC组体重,24 h尿蛋白定量较hADSC组疗效更显著(P<0.05)。(2)与模型组比较,hADSC组及Ast-hADSC组三酰甘油、低密度脂蛋白、尿素氮、高密度脂蛋白差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)肾脏病理:hADSC组及AsthADSC组大鼠肾损伤减轻,肾脏指数及肾小球截面积增大减轻(P<0.05);Ast-hADSC组改善更显著。(4)激光共聚焦:hADSC组及Ast-hADSC组可见少量红色荧光表达。(5)免疫组化及免疫蛋白印迹:hADSC组及Ast-hADSC组LC3、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Pink1、Parkin蛋白的表达增加(P<0.05),P62蛋白表达减少(P<0.05);Ast-hADSCs组疗效更显著。(6)透射电镜:模型组线粒体肿胀变形、碎片较多,自噬小体的数量较少;hADSC组及Ast-hADSC组可见较多的自噬小体,肿胀变形的线粒体及线粒体碎片较少;Ast-hADSC组疗效更显著。结论尾静脉移植hADSC可恢复DKD大鼠肾组织中线粒体自噬,减轻肾损伤,经Ast孵育后疗效更显著。 展开更多
关键词 糖尿病肾脏疾病 脂肪干细胞 黄芪甲苷 线粒体自噬
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泛素特异性蛋白酶42调节人脂肪干细胞成骨向分化
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作者 潘媛 顾航 +3 位作者 肖涵 赵笠君 汤祎熳 葛雯姝 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期9-16,共8页
目的:探索泛素特异性蛋白酶42(ubiquitin-specific protease 42,USP42)在人脂肪干细胞(human adipose-derived stem cells,hASCs)体内外成骨向分化中的作用。方法:用慢病毒转染hASCs,构建敲低和过表达USP42的稳定转染细胞系,通过碱性磷... 目的:探索泛素特异性蛋白酶42(ubiquitin-specific protease 42,USP42)在人脂肪干细胞(human adipose-derived stem cells,hASCs)体内外成骨向分化中的作用。方法:用慢病毒转染hASCs,构建敲低和过表达USP42的稳定转染细胞系,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及活性定量、茜素红S矿化结节染色及定量,检测实验组(敲低组和过表达组)及对照组在成骨诱导下hASCs成骨向分化能力的差异,通过定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测实验组及对照组成骨相关基因的表达水平,通过蛋白免疫印迹实验检测实验组及对照组成骨相关蛋白的表达水平,通过裸鼠异位成骨实验评价USP42在hASCs体内成骨向分化中的作用。结果:敲低组USP42的mRNA和蛋白表达显著低于对照组,过表达组显著高于对照组。成骨诱导7 d后,敲低组的ALP活性显著高于对照组,过表达组显著低于对照组;成骨诱导14 d后,敲低组茜素红S染色显著深于对照组,过表达组显著浅于对照组。qRT-PCR结果显示,成骨诱导14 d时,敲低组ALP、成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX)和Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,COLⅠ)的mRNA表达水平显著高于对照组,过表达组显著低于对照组。蛋白免疫印迹实验结果显示,成骨诱导14 d时敲低组runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、OSX和COLⅠ蛋白表达水平显著高于对照组,过表达组显著低于对照组。裸鼠皮下移植物苏木精-伊红染色结果显示,敲低组类骨组织百分比较对照组显著增高。结论:敲低USP42显著促进hASCs的体内外成骨向分化,过表达USP42显著抑制hASCs的体内成骨向分化,USP42可作为骨组织工程学潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 泛素特异性蛋白酶类 脂肪干细胞 细胞分化 骨和骨组织 再生医学
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脂肪干细胞及其衍生物促慢性创面愈合的研究进展
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作者 王一 龚思宇(综述) 姜笃银(审校) 《中国美容医学》 CAS 2024年第4期179-182,共4页
慢性创面一直是临床治疗中十分棘手的难题。脂肪干细胞(Adipose-derivedstemcells,ADSCs)因来源丰富,分离简单且容易扩增,多次传代后仍能保持其生物学特性等优点,已成为近年组织修复与再生研究的热点,利用ADSCs促进创面愈合也已被证明... 慢性创面一直是临床治疗中十分棘手的难题。脂肪干细胞(Adipose-derivedstemcells,ADSCs)因来源丰富,分离简单且容易扩增,多次传代后仍能保持其生物学特性等优点,已成为近年组织修复与再生研究的热点,利用ADSCs促进创面愈合也已被证明是一项十分具有前景的治疗策略。本文对ADSCs及其无脂肪细胞衍生物促慢性创面愈合的研究现状进行综述,以期为今后深入研究和临床应用提供参考。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 慢性创面 脂肪细胞衍生物 糖尿病 组织修复与再生
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脂肪干细胞胶在面部精细化填充中的应用
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作者 陈晓辉 王献路 +1 位作者 田伟 耿雅琼 《中国美容医学》 CAS 2024年第3期68-72,共5页
目的:探讨脂肪干细胞胶面部精细化填充的效果及对面部美学的影响。方法:选择2021年1月-2022年3月笔者医院收治的预进行面部填充的80例就医者为研究对象,按随机数字表法分为对照组与观察组,每组40例。对照组采用自体颗粒脂肪进行填充,观... 目的:探讨脂肪干细胞胶面部精细化填充的效果及对面部美学的影响。方法:选择2021年1月-2022年3月笔者医院收治的预进行面部填充的80例就医者为研究对象,按随机数字表法分为对照组与观察组,每组40例。对照组采用自体颗粒脂肪进行填充,观察组采用脂肪干细胞胶进行精细化填充。填充后6个月,比较两组就医者对填充效果的满意率、二次手术率、并发症发生率及面部美学(面部轮廓、面部容积与面部年轻化)评分。结果:术后6个月,观察组填充效果满意率高于对照组(P<0.05),观察组面部轮廓、面部容积及面部年轻化美学评分均高于对照组(P<0.05);观察组二次手术率低于对照组(P<0.05);两组并发症发生情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:与自体颗粒脂肪填充相比,脂肪干细胞胶面部精细化填充的效果更优,对面部美学的改善程度更佳。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 面部 精细化填充 自体颗粒脂肪 面部美学
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脂肪干细胞胶联合富血小板血浆治疗难愈性创面的临床效果 被引量:1
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作者 曾皓 张烁 +3 位作者 徐泽华 叶华 罗文跃 龙丽芸 《中国当代医药》 CAS 2023年第6期48-51,55,共5页
目的探讨脂肪干细胞胶联合富血小板血浆治疗难愈性创面的效果。方法选取2020年1月至2021年6月赣州人民医院收治的50例难愈性创面患者作为研究对象,根据病床号奇偶数分为常规组(25例)和研究组(25例)。常规组应用富血小板血浆治疗,研究组... 目的探讨脂肪干细胞胶联合富血小板血浆治疗难愈性创面的效果。方法选取2020年1月至2021年6月赣州人民医院收治的50例难愈性创面患者作为研究对象,根据病床号奇偶数分为常规组(25例)和研究组(25例)。常规组应用富血小板血浆治疗,研究组应用富血小板血浆联合脂肪干细胞胶治疗,比较两组的创面愈合率、愈合时间、视觉模拟评分法(VAS)评分、温哥华瘢痕量表(VSS)、生活质量评价量表(SF-36)、创面大小。结果研究组患者治疗7、14 d、治疗2个月的创面愈合率均高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者的创面愈合时间短于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者治疗后的VAS及VSS评分低于常规组,SF-36各项评分高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者治疗后的创面大小小于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者的不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论富血小板血浆联合脂肪干细胞胶治疗难愈性创面患者的效果显著,能够有效缩短创面愈合时间,提高治疗效果,值得推广。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 富血小板血浆 难愈性创面 创面愈合率
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脂肪干细胞外泌体传递miR-145调控增生性瘢痕成纤维细胞生物学特性的实验研究 被引量:1
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作者 阿丽米热·伊力哈木 卡米力江·买买提明 +1 位作者 美尔瓦提 李朝阳 《中国美容医学》 CAS 2023年第1期67-73,共7页
目的:探究脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSCs)来源的外泌体(Exosome,Exo)传递miR-145对增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblasts,HSF)生物学功能的影响。方法:从增生性瘢痕组织中分离培养HSF细胞,从脂肪组织中... 目的:探究脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSCs)来源的外泌体(Exosome,Exo)传递miR-145对增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblasts,HSF)生物学功能的影响。方法:从增生性瘢痕组织中分离培养HSF细胞,从脂肪组织中分离培养ADSCs,流式细胞术检测其表面标记物表达情况;采用含miR-145过表达慢病毒及阴性对照miR-NC慢病毒感染ADSCs,实时荧光定量PCR测定转染效果,并提取各转染组ADSCs上清液中Exo,获得含miR-145过表达的ADSCs来源Exo,利用透射电镜观察其形态、纳米颗粒跟踪分析仪检测粒径分布以及Western blot检测表面标志性蛋白CD63、CD81、CD9和TSG101的表达情况对提取的外泌体进行鉴定;添加外泌体培养HSF细胞,具体分组包括对照组、Exo组、miR-NCExo组、miR-145-Exo组,PKH26荧光标记的ADSC来源的Exos与HSF细胞培养,共聚焦荧光显微镜观察外泌体能否被细胞摄取,EdU检测各组HSF细胞的增殖能力,AnnexinⅤ-FITC/PI法检测各组HSF细胞的凋亡水平,Western blot检测各组细胞内凋亡相关蛋白(cleaved-caspase-3、Bax、Bcl-2)及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原(COL-Ⅰ、COL-Ⅲ)的蛋白表达水平。结果:成功分离到ADSCs,其表面标志物CD44、CD90及CD105均呈阳性表达;经miR-145过表达的慢病毒转染的miR-145-ADSCs组细胞中miR-145相对表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。分离到直径约100 nm、呈双层膜结构的杯状或球状以及外泌体标志蛋白CD63、CD81、CD9和TSG101均为阳性表达的ADSCs来源Exo;将ADSCs来源Exo与HSF细胞共培养后,Exo可被HSF细胞摄取,miR-145过表达的ADSCs来源Exo能够明显抑制HSF细胞增殖(P<0.05),促进其凋亡(P<0.05),上调促凋亡蛋白cleavedcaspase-3和Bax的蛋白相对表达量(P<0.05),抑制抗凋亡蛋白Bcl-2及COL-Ⅰ、COL-Ⅲ的蛋白相对表达量(P<0.05)。结论:脂肪干细胞来源的外泌体可通过传递miR-145抑制增生性瘢痕皮肤中成纤维细胞的增殖活性并促进其凋亡,其分子机制可能与上调cleaved-caspase-3和Bax的蛋白表达以及抑制Bcl-2、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ的蛋白表达有关。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 脂肪干细胞 外泌体 MIR-145 成纤维细胞
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脂肪干细胞用于肌腱损伤修复研究进展 被引量:1
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作者 徐文悦 赵娜 +3 位作者 王燕 许娜 刘文森 王龙涛 《动物医学进展》 北大核心 2023年第3期99-103,共5页
肌腱损伤在临床上已被列为常见疾病,患者常因长期的肌腱疼痛和肿胀,严重降低行动功能,影响生活质量。由于肌腱的自我修复力差,目前主要以手术干预及移植物替代作为治疗手段,但疗效不甚理想。随着干细胞研究的不断崛起,用干细胞修复肌腱... 肌腱损伤在临床上已被列为常见疾病,患者常因长期的肌腱疼痛和肿胀,严重降低行动功能,影响生活质量。由于肌腱的自我修复力差,目前主要以手术干预及移植物替代作为治疗手段,但疗效不甚理想。随着干细胞研究的不断崛起,用干细胞修复肌腱损伤已成为新的治疗手段。脂肪干细胞(ADSCs)具有多向分化潜能及旁分泌效能,且具有来源丰富、取材简单、对机体损伤小和不涉及伦理问题等优势,因此可以作为治疗损伤肌腱的良好细胞候选。论文综述了国内外ADSCs用于肌腱损伤修复的研究进展,总结了ADSCs对损伤肌腱发挥作用的机制,分析了ADSCs尚未突破的问题及发展方向,以期为ADSCs对肌腱损伤修复研究提供思路。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 肌腱损伤 旁分泌效应 腱分化
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脂肪干细胞来源外泌体通过miR-21a-5p/PTEN途径促进牙周膜干细胞成骨分化 被引量:1
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作者 徐秋 邱新毓 +2 位作者 仇珺 高洁 张浩 《北京口腔医学》 CAS 2023年第3期153-158,共6页
目的 研究脂肪干细胞(ADSCs)来源外泌体通过miR-21a-5p/第10号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物基因(PTEN)途径促进牙周膜干细胞(PDLSCs)成骨分化的效应。方法 培养ADSCs、分离外泌体并用磷酸盐缓冲液溶解备用。培养PDLSCs、进行成骨... 目的 研究脂肪干细胞(ADSCs)来源外泌体通过miR-21a-5p/第10号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物基因(PTEN)途径促进牙周膜干细胞(PDLSCs)成骨分化的效应。方法 培养ADSCs、分离外泌体并用磷酸盐缓冲液溶解备用。培养PDLSCs、进行成骨诱导分化并分组,外泌体组加入15μg/ml外泌体、对照组加入等体积磷酸盐缓冲液,NC组加入等体积磷酸盐缓冲液并转染NC序列,NC+外泌体组加入15μg/ml外泌体并转染NC序列,miR-21-5p敲低+外泌体组加入15μg/ml外泌体并转染miR-21-5p抑制物;诱导后21 d时进行茜素红染色并检测A540水平,诱导后7 d时检测miR-21a-5p、PTEN、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、Ⅰ型胶原(CoL-Ⅰ)的表达水平。培养PDLSCs并分为转染NC序列的NC组、转染miR-21a-5p模拟物的miR-21a-5p组,采用双荧光素酶报告基因验证miR-21a-5p靶向PTEN。结果 外泌体组PDLSCs的A540水平及miR-21a-5p、ALP、OCN、CoL-Ⅰ的表达水平均高于对照组,PTEN的表达水平低于对照组(P<0.05);miR-21a-5p组PDLSCs中PTEN的表达水平及野生型双荧光素酶报告基因的荧光值均低于NC组(P<0.05);miR-21-5p敲低+外泌体组PDLSCs的A540水平及miR-21a-5p、ALP、OCN、CoL-Ⅰ的表达水平均低于NC+外泌体组,PTEN的表达水平高于NC+外泌体组(P<0.05)。结论 ADSCs来源外泌体通过调控miR-21a-5p/PTEN途径促进PDLSCs成骨分化。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 牙周膜干细胞 外泌体 成骨分化 miR-21a-5p
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大鼠脂肪干细胞在纳米羟基磷灰石-壳聚糖-果胶/壳聚糖-明胶支架的成骨向分化研究 被引量:1
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作者 韩瑞金 张琪 +2 位作者 郝彤 李俊杰 王常勇 《生物医学工程与临床》 CAS 2023年第1期7-14,共8页
目的探索纳米羟基磷灰石-壳聚糖-果胶/壳聚糖-明胶(nHCP/CG)支架对大鼠脂肪干细胞(r ADSC)定向成骨分化的影响,为其临床应用提供理论支持。方法选择SD成年大鼠5只,体质量60~80 g,雌雄不限。从SD成年大鼠两侧腹股沟脂肪组织原代分离、培... 目的探索纳米羟基磷灰石-壳聚糖-果胶/壳聚糖-明胶(nHCP/CG)支架对大鼠脂肪干细胞(r ADSC)定向成骨分化的影响,为其临床应用提供理论支持。方法选择SD成年大鼠5只,体质量60~80 g,雌雄不限。从SD成年大鼠两侧腹股沟脂肪组织原代分离、培养并鉴定r ADSC,然后将其接种在nHCP/CG支架材料上,并以壳聚糖-明胶(CG)支架为对照。通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法、Live/Dead及苏木精-伊红(HE)染色法评价支架的细胞相容性;在添加和不添加成骨诱导剂培养条件下,以碱性磷酸酶(ALP)活性及多种免疫组织化学染色测定r ADSC在nHCP/CG支架中的成骨分化行为。结果r ADSC具有间充质干细胞的特性,其在nHCP/CG复合支架材料上活性较好。nHCP/CG支架较CG支架更利于r ADSC的黏附和增殖;r ADSC在nHCP/CG支架中培养1 d、3 d、7 d时细胞数量明显高于CG支架中的细胞数量(0.432±0.028 vs 0.174±0.004、0.532±0.017 vs 0.291±0.023、0.595±0.014 vs 0.754±0.038)且差异有显著统计学意义(P<0.01)。r ADSC在nHCP/CG支架和CG支架中培养14 d和21 d均表现出较高的ALP活性;第14天时,在CG支架诱导培养细胞的ALP活性大于常规培养(0.298±0.029 vs 0.224±0.008),差异有统计学意义(P<0.05);在nHCP/CG支架中培养14 d和21 d的细胞加入诱导剂(0.224±0.006 vs 0.271±0.010、0.181±0.012 vs 0.209±0.009),ALP活性小于常规培养且差异有统计意义(P<0.05)。无论是否添加成骨诱导剂,接种在nHCP/CG支架上的r ADSC茜素红染色、Von Kossa染色、Ⅰ型胶原及Ⅷ因子免疫组化染色均表达为阳性,说明nHCP/CG支架能够自发促进r ADSC向成骨细胞分化。结论r ADSC可作为骨组织工程的种子细胞;nHCP/CG支架材料能够提供支持r ADSC黏附和生长的微环境,具有良好的生物相容性,更为重要的是能够自发诱导r ADSC定向成骨分化,有望成为一种应用于临床的骨组织工程支架材料。 展开更多
关键词 纳米羟基磷灰石-壳聚糖-果胶/壳聚糖-明胶(nHCP/CG)支架 脂肪干细胞 成骨分化 血管化
原文传递
脂肪干细胞来源外泌体的骨组织工程研究进展 被引量:1
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作者 刘俊豪 熊永斌 +1 位作者 何永好(综述) 李春亮(审校) 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2023年第5期534-539,共6页
骨组织工程是一种通过生物材料和细胞等手段来修复骨缺损的方法。近年来,越来越多的研究表明,脂肪干细胞来源外泌体在骨组织工程方面具有广阔的应用前景。文章对脂肪干细胞来源外泌体在骨组织工程方面的研究进展进行综述,发现脂肪干细... 骨组织工程是一种通过生物材料和细胞等手段来修复骨缺损的方法。近年来,越来越多的研究表明,脂肪干细胞来源外泌体在骨组织工程方面具有广阔的应用前景。文章对脂肪干细胞来源外泌体在骨组织工程方面的研究进展进行综述,发现脂肪干细胞来源外泌体促进骨再生的机制主要有以下四种:一是通过抑制低氧缺血环境诱导的骨细胞凋亡,进而促进骨再生;二是通过调控与成骨相关的信号通路,促进间充质干细胞的增殖与迁移,进而促进骨再生;三是通过调整细胞因子表达等方式对脂肪干细胞进行预处理,进而促进骨再生;四是通过调控抗炎因子表达和自噬细胞极化等方式,促进软骨修复。这些机制为脂肪干细胞来源外泌体在骨组织工程方面的应用提供了理论基础。在治疗方法方面,相较于传统的注射法,使用丝素/壳聚糖、水凝胶或金属有机框架等组织工程支架负载外泌体,对骨缺损部位进行治疗,可将外泌体与支架进行良好结合,充分发挥外泌体的治疗效果,具有促进骨再生、治疗骨缺损的潜力。综上所述,脂肪干细胞来源外泌体在骨组织工程方面的研究取得了显著进展,其机制和治疗方法的不断完善,为其在骨组织修复领域的广泛应用提供了坚实的基础。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 外泌体 骨组织工程 骨关节炎
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过表达生长激素的脂肪干细胞促进成纤维细胞增殖与迁移
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作者 高仪轩 王凌峰 +5 位作者 巴特 李芳 曹胜军 李俊亮 周彪 陈强 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第1期8-14,共7页
背景:生长激素具有免疫调节、促进细胞增殖及蛋白合成等生理作用,已被证实可以促进急慢性创面愈合。目的:构建过表达生长激素的脂肪干细胞系(生长激素-脂肪干细胞),并探究其对成纤维细胞增殖迁移能力的影响及其分子机制。方法:①体外分... 背景:生长激素具有免疫调节、促进细胞增殖及蛋白合成等生理作用,已被证实可以促进急慢性创面愈合。目的:构建过表达生长激素的脂肪干细胞系(生长激素-脂肪干细胞),并探究其对成纤维细胞增殖迁移能力的影响及其分子机制。方法:①体外分离并鉴定脂肪干细胞;②构建生长激素过表达慢病毒,将脂肪干细胞分为生长激素组、空载组、对照组,以上3组分别转染生长激素过表达慢病毒、空载慢病毒或不进行传染;③RT-qPCR、Western blot、ELISA检测各组细胞内及上清中生长激素的mRNA和蛋白表达、ERK1/2通路相关基因的表达情况;④划痕实验和Transwell实验、MTS实验检测生长激素组和空载组细胞对成纤维细胞的迁移和增殖能力的影响、RT-qPCR检测生长激素-脂肪干细胞与成纤维细胞共培养后成纤维细胞内相关基因的表达变化;⑤ERK抑制剂抑制生长激素组细胞后,观察其与成纤维细胞共培养后成纤维细胞内相关基因的表达变化。结果与结论:①分离并鉴定脂肪干细胞,成功构建生长激素-脂肪干细胞系;②生长激素组细胞内生长激素的mRNA和蛋白表达较空载组和对照组显著升高(P<0.01),且上清中生长激素浓度更高;生长激素组细胞内ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达上调;③生长激素组较空载组促成纤维细胞迁移和增殖能力增强(P<0.05);④生长激素-脂肪干细胞与成纤维细胞共培养后成纤维细胞内基质金属蛋白酶2基因表达下调,Ⅰ型胶原蛋白基因表达上调,Ⅲ型胶原蛋白基因表达无显著变化;⑤抑制生长激素-脂肪干细胞内ERK蛋白后,成纤维细胞内上述基因mRNA表达差异消失;⑥结果表明,慢病毒转染法构建过表达生长激素的脂肪干细胞效率较高,且该细胞可持续分泌生长激素并促进成纤维细胞增殖迁移,该生理作用可能与上调细胞内ERK1/2信号通路有关。 展开更多
关键词 创面愈合 组织工程 脂肪干细胞 生长激素 ERK通路
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脂肪干细胞在糖尿病大鼠急性放射性皮肤损伤治疗中的作用
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作者 葛雨欣 曾小玲 +4 位作者 黄钰 唐黎 周晓 史春梦 盛小伍 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期445-452,共8页
目的研究脂肪干细胞(ADSCs)对糖尿病大鼠急性放射性皮肤损伤的治疗作用。方法采用高脂饲料喂养联合低剂量链脲佐菌素注射的方法,构建2型糖尿病大鼠模型;后续采用单次90 Gy放射线照射糖尿病大鼠腹股沟区皮肤,构建糖尿病大鼠放射性皮肤损... 目的研究脂肪干细胞(ADSCs)对糖尿病大鼠急性放射性皮肤损伤的治疗作用。方法采用高脂饲料喂养联合低剂量链脲佐菌素注射的方法,构建2型糖尿病大鼠模型;后续采用单次90 Gy放射线照射糖尿病大鼠腹股沟区皮肤,构建糖尿病大鼠放射性皮肤损伤模型。从雄性SD大鼠腹股沟区脂肪组织中分离、提取、鉴定、扩增脂肪干细胞,并将放射性皮肤损伤的糖尿病大鼠随机分为对照组(n=6)与实验组(ADSCs组,n=6)。实验组给予ADSCs移植,对照组仅给予PBS注射。于放射线造模后第3周,分别采用皮肤损伤反应评分、苏木精-伊红染色、免疫荧光染色、酶联免疫吸附测定(ELISA)、TUNEL染色等方法评价ADSCs对糖尿病大鼠放射性皮肤损伤模型的治疗效果。结果两组糖尿病大鼠随机血糖均≥16.70 mmol/L、胰岛数量显著减少。ADSCs组大鼠皮肤损伤反应评分在放射后第2周和第3周分别为(3.41±0.27)和(3.25±0.11),显著低于对照组(4.66±0.10)和(5.25±0.11)(均P<0.01);ADSCs组皮肤厚度为(526.54±67.92)μm,显著低于对照组[(1029.69±196.03)μm,P<0.05];ADSCs组在400倍镜视野下淋巴细胞数量为(126.52±13.77)个,显著低于对照组[(243.56±48.16)个,P<0.05];ADSCs组血清中TNF-α、IL-4的含量分别为(2.38±0.008)ng/L、(7.67±0.63)ng/L,显著低于对照组[(3.68±0.42)ng/L、(11.71±0.51)ng/L,均P<0.01],ADSCs组血清中IL-13的含量为(18.42±2.77)ng/L,与对照组(21.52±2.94)ng/L相近,差异没有统计学意义(P>0.05);ADSCs组TUNEL阳性细胞比例为(17.96±2.29)%,显著低于对照组[(30.87±3.41)%,P<0.05]。结论ADSCs通过降低皮肤损伤反应评分、抑制炎症细胞浸润和炎症因子释放以及抑制细胞凋亡等减轻糖尿病大鼠急性放射性皮肤损伤。 展开更多
关键词 放射疗法 放射性皮肤损伤 脂肪干细胞 凋亡
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