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TUNEL法原位检测心肌细胞凋亡的改进 被引量：18
1
作者 董小莉 谭宁 +2 位作者 符永恒 邓宇珺 孙凯亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1038-1040,共3页
目的:脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)是检测细胞凋亡的常用方法,但以往仍有TUNEL假阳性率高的报道。本实验目的在于探讨应用TUNEL检测心肌细胞凋亡时增强其特异性的方法。方法:缺血再灌注心肌组织的石蜡切片(2μm... 目的:脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)是检测细胞凋亡的常用方法,但以往仍有TUNEL假阳性率高的报道。本实验目的在于探讨应用TUNEL检测心肌细胞凋亡时增强其特异性的方法。方法:缺血再灌注心肌组织的石蜡切片(2μm)和冰冻切片(3μm)进行TUNEL染色。分为石蜡切片HE染色组,石蜡切片常规TUNEL组,冰冻切片改良TUNEL组。石蜡切片常规TUNEL组完全按照试剂盒说明书进行,光学显微镜下观察;冰冻切片改良TUNEL组使用荧光素(FITC)标记的dUTP及4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DA-PI)双重荧光染色,在共聚焦显微镜下观察。结果:TUNEL改良法凋亡背景清晰,阳性细胞主要分布在缺血再灌注损伤区域,其凋亡检出率与石蜡切片HE染色相比无显著差异(P>0.05);常规TUNEL组凋亡背景清晰度较差,非缺血再灌注损伤区域亦有大量阳性细胞出现,其凋亡率明显高于石蜡切片HE染色(P<0.01)。结论:冰冻切片改良TUNEL法可能是更适宜研究SD大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的方法。 展开更多
关键词 心肌细胞凋亡 冰冻切片 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法
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Fluoro-Jade B染色与TUNEL比较检测乙醇诱导神经细胞凋亡 被引量：1
2
作者 刘红亮 王靖凯 +3 位作者 邓锦波 胡磊 张路 刘彬 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期356-359,共4页
目的:建立利用Fluoro-Jade B(FJ-B)染色检测乙醇诱导PC12细胞及小鼠海马脑片上神经细胞凋亡的方法并与TUNEL比较.方法:利用不同浓度的乙醇分别诱导PC12细胞和小鼠海马脑片上神经细胞凋亡,用FJ-B染色检测神经细胞凋亡,同时用TUNEL检测进... 目的:建立利用Fluoro-Jade B(FJ-B)染色检测乙醇诱导PC12细胞及小鼠海马脑片上神经细胞凋亡的方法并与TUNEL比较.方法:利用不同浓度的乙醇分别诱导PC12细胞和小鼠海马脑片上神经细胞凋亡,用FJ-B染色检测神经细胞凋亡,同时用TUNEL检测进行比较,从凋亡率、单位面积阳性细胞数的统计结果分析、实验过程等方面评价2种方法的优缺点.结果:2种方法检测结果显示乙醇处理组与对照组相比差异有统计学意义,2种方法相同组间对比分析差异无统计学意义.结论:FJ-B染色与TUNEL在检测乙醇对神经细胞凋亡影响的结果无差异;且FJ-B染色更适合在脑片上检测神经细胞的凋亡. 展开更多
关键词 Fluoro-Jade染色 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 海马脑片 凋亡检测
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重组人钙调素对小鼠胚胎发育及凋亡的影响
3
作者 章汉旺 李慧 《生殖医学杂志》 CAS 2007年第4期264-268,共5页
目的探讨外源重组人钙调素(rhCAM)对小鼠早期胚胎体外发育及凋亡的影响。方法小鼠超促排卵,收集2-细胞胚胎置于含不同浓度rhCAM的IVF-30培养液中,观察并记录胚胎形态,TUNEL法检测囊胚细胞数及囊胚细胞凋亡情况。结果20μg/ml rhCAM组的... 目的探讨外源重组人钙调素(rhCAM)对小鼠早期胚胎体外发育及凋亡的影响。方法小鼠超促排卵,收集2-细胞胚胎置于含不同浓度rhCAM的IVF-30培养液中,观察并记录胚胎形态,TUNEL法检测囊胚细胞数及囊胚细胞凋亡情况。结果20μg/ml rhCAM组的胚胎体外培养48、72 h的囊胚形成率和孵化囊胚率均高于对照组,该组体外培养72 h囊胚细胞凋亡指数显著低于对照组。200μg/ml rhCAM组的胚胎囊胚形成率低于对照组,凋亡指数显著高于对照组。结论一定浓度的rhCAM可促进胚胎体外发育并可抑制胚胎细胞的凋亡。 展开更多
关键词 胚胎 钙调素 凋亡 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法
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依托咪酯乳剂对老年大鼠海马神经元凋亡及突触素表达的影响 被引量：1
4
作者 冯舒韵 杨承祥 +3 位作者 赵伟成 陈立成 郑雪琴 李云 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2016年第7期613-616,共4页
目的观察腹腔注射依托咪酯乳剂对老年大鼠海马神经元突触素表达的影响。方法选择18月龄的sD大鼠45只，用完全随机分组法分为3组（每组15只）：生理盐水组（N组）、依托咪酯组（E组）、脂肪乳组（L组）。实验第1-3天，E组腹腔注射依托咪... 目的观察腹腔注射依托咪酯乳剂对老年大鼠海马神经元突触素表达的影响。方法选择18月龄的sD大鼠45只，用完全随机分组法分为3组（每组15只）：生理盐水组（N组）、依托咪酯组（E组）、脂肪乳组（L组）。实验第1-3天，E组腹腔注射依托咪酯（乳剂）20mg／kg，L组腹腔注射20％脂肪乳20mg／kg，N组腹腔注射同等体积的生理盐水，每天1次，连续3d。实验第4天，处死大鼠，取右侧脑海马组织，固定，石蜡切片，进行细胞凋亡TUNEL检验、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（cysteinyl aspartate specific proteinase -3, caspase-3 ）Western blot检测及突触素免疫组化检验。结果TUNEL结果：海马CA1区神经元凋亡，与N组、L组比较，E组海马神经元凋亡细胞及凋亡指数无明显增加，差异无统计学意义（P〉0．05）。caspase-3表达结果：海马CA1区神经元easpase-3表达，与N组、L组比较，E组海马神经元活化caspase-3片段表达无明显增加，差异无统计学意义（P〉0．05）。突触素结果：海马CA1区神经元突触素表达，与N组、L组比较，E组海马含突触素的神经元个数无明显减少，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论腹腔注射依托咪酯乳剂20mg／kg对老年大鼠海马神经元的凋亡及突触素的表达无明显影响。 展开更多
关键词 依托咪酯 海马 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 突触素 天冬氨酸特异性半胱 氨酸蛋白酶
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促红细胞生成素干预大鼠腹主动脉阻断再通过程中各指标的变化
5
作者 张小建 周志强 吴万庆 《中国实用医刊》 2008年第9期34-35,共2页
目的观察大鼠腹主动脉阻断再通过程中肝、肾、心生化及Bcl-2和Bax基因蛋白免疫组化的变化及促红细胞生成素（Epo）的保护作用。方法采用健康雄性SD大鼠24只（体重250～300g），随机分成三组：缺血再灌注组（n=8）；促红细胞生成素（Epo... 目的观察大鼠腹主动脉阻断再通过程中肝、肾、心生化及Bcl-2和Bax基因蛋白免疫组化的变化及促红细胞生成素（Epo）的保护作用。方法采用健康雄性SD大鼠24只（体重250～300g），随机分成三组：缺血再灌注组（n=8）；促红细胞生成素（Epo）干预组（n=8）；假手术（Sham）组（n=8）。其中I／R和Epo组采用阻断腹主动脉3h，再通2h；Epo组于术前24h按5000IU／kg经腹腔注射Epo；Sham组单纯做开腹术，不做处理。术后取各只大鼠的下腔静脉血分析丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、血尿素痰（BUN）、血清肌酐（Scr）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）；各只大鼠均取肝肾心用免疫组化分析Bcl-2、Bax阳性区平均光密度；用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）分析各个标本的凋亡指数。结果I／R和Epo组的生化分析各个指标均高于Sham组．但Epo组低于I／R组（P〈0．05）。I／R和Epo组的Bcl-2和Bax阳性区平均光密度均高于Sham组，Epo组的Bcl-2阳性区平均光密度高于I／R组，Epo组的Bax阳性区平均光密度低于I／R组（P〈0.05）。Sham组TUNEL染色呈隐形，I／R和Epo组TUNEL染色呈阳性，Epo组的凋亡指数低于I／R组（P〈0.05）。结论阻断再通大鼠腹主动脉后，肝肾心发生损伤；Epo干预有助于减轻这种损伤。 展开更多
关键词 促红细胞生成素 缺血再灌注 阻断再通 生化 Bcl-2 BAX 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法
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