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弓形虫腺苷激酶基因的克隆、表达及多抗血清的制备 被引量:2
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作者 李霞 余莉 +2 位作者 罗庆礼 乔增培 沈继龙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期495-499,共5页
目的克隆弓形虫RH株腺苷激酶(AK)基因,构建原核表达载体pET28a/AK,表达AK重组蛋白,利用此重组蛋白免疫新西兰白兔制备多抗血清。方法收集、纯化弓形虫RH株速殖子,提取总RNA。设计合成的引物并引入BamHI和XhoI酶切位点,应用RT-PCR扩增弓... 目的克隆弓形虫RH株腺苷激酶(AK)基因,构建原核表达载体pET28a/AK,表达AK重组蛋白,利用此重组蛋白免疫新西兰白兔制备多抗血清。方法收集、纯化弓形虫RH株速殖子,提取总RNA。设计合成的引物并引入BamHI和XhoI酶切位点,应用RT-PCR扩增弓形虫AK基因片段,目的基因插入克隆载体pGEM-T,提取重组质粒,BamHI和XhoI双酶切获得目的基因,插入原核表达质粒pET28a中,重组子双酶切、PCR和测序鉴定,转化大肠杆菌E.coliBL21(DE3)并以IPTG诱导表达。亲和层析法纯化重组蛋白抗原,SDS-PAGE和Western blotting验证表达量和免疫活性,免疫新西兰白兔,收集多抗血清,ELISA测定多抗滴度,Western blotting鉴定免疫活性。结果从弓形虫RH株cDNA中扩增出1 092bp的AK目标基因片段,并构建原核表达载体,诱导含pET28a/AK的宿主菌获得了高浓度、与预期分子量大小相符的表达产物,经Ni2+亲和层析法纯化获得了高纯度的rAK蛋白,Western blotting显示rAK能够被TORCH试剂盒中的Tox-IgG阳性控制血清识别,获得了纯化的重组蛋白。rAK蛋白免疫新西兰白兔,获得滴度为1∶106多价抗血清。结论成功地从弓形虫RH株基因组DNA中获取了AK基因,构建了pET28a/AK重组质粒,并获得了高效表达,免疫新西兰白兔获得了高效价多克隆抗体,为弓形虫iRNA及弓形虫病的免疫诊断奠定了基础。 展开更多
关键词 弓形虫 腺苷激酶 基因 克隆 表达 多抗血清
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腺相关病毒介导的腺苷激酶过表达减轻高脂饮食诱导的小鼠葡萄糖耐量异常与肝脏脂肪变性 被引量:2
2
作者 吴越 高庆祥 +3 位作者 沈洋 屈淑平 程庆保 姜小清 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期769-774,共6页
目的探讨特异性上调肝细胞中腺苷激酶(ADK)表达对高脂饮食诱导的小鼠葡萄糖耐量异常与肝脏脂肪变性的影响。方法20只雄性C57BL/6J小鼠随机分为2组,每组10只,其中1组通过尾静脉注射将携带甲状腺素结合球蛋白(TBG)启动子驱动表达ADK的腺... 目的探讨特异性上调肝细胞中腺苷激酶(ADK)表达对高脂饮食诱导的小鼠葡萄糖耐量异常与肝脏脂肪变性的影响。方法20只雄性C57BL/6J小鼠随机分为2组,每组10只,其中1组通过尾静脉注射将携带甲状腺素结合球蛋白(TBG)启动子驱动表达ADK的腺相关病毒(AAV8-TBG-ADK)注入小鼠体内(AAV8-TBG-ADK组),另1组注射对照腺相关病毒AAV8-TBG(AAV8-TBG组)。上述2组小鼠接受腺相关病毒注射后,再分别随机分为2个亚组,每亚组5只,分别给予8周普通饮食或高脂饮食。造模过程中检测各组小鼠体质量变化。造模结束后处死小鼠,采用蛋白质印迹法与qRT-PCR检测各组小鼠肝脏ADK表达,葡萄糖耐量试验检测小鼠葡萄糖耐量情况,H-E染色、油红O染色检测肝组织病理改变及脂滴沉积,qRT-PCR检测小鼠肝组织中糖异生相关基因[葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)]和脂肪生成相关基因[胆固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC-1)、脂肪酸合成酶(FAS)、硬脂酰辅酶A脱氢酶1(SCD-1)]的mRNA水平。结果与普通饮食饲喂小鼠相比,高脂饮食可导致小鼠体质量增加、葡萄糖代谢紊乱和肝脏脂质沉积。与注射AAV8-TBG的小鼠相比,注射AAV8-TBG-ADK特异性上调小鼠肝脏ADK的表达后,对普通饮食和高脂饮食饲喂的小鼠体质量均无明显影响,但可减轻高脂饮食导致的葡萄糖耐量异常和肝脏脂质沉积(P均<0.05),并可抑制高脂饮食饲喂小鼠肝脏糖异生与脂肪生成相关基因的表达(P均<0.05)。结论利用腺相关病毒特异性上调肝细胞ADK表达可改善高脂饮食导致的小鼠葡萄糖耐量异常与肝脏脂肪变性。 展开更多
关键词 腺苷激酶 高脂饮食 葡萄糖耐量异常 非酒精性脂肪肝
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腺苷激酶小干扰RNA修饰的角膜内皮细胞诱导调节性T细胞的增生和分泌 被引量:1
3
作者 张万红 焦惠英 +1 位作者 阮燕飞 刘元真 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期337-341,共5页
目的探讨腺苷激酶(ADK)小干扰RNA(siRNA)修饰的角膜内皮细胞诱导调节性T细胞(Treg)增生和分泌的作用。方法取第3~5代人角膜内皮细胞,实验分为转染组和未转染组,转染组采用Lipofectamine■ 3000将FAM-ADK siRNA转染进入角膜内皮细胞,采... 目的探讨腺苷激酶(ADK)小干扰RNA(siRNA)修饰的角膜内皮细胞诱导调节性T细胞(Treg)增生和分泌的作用。方法取第3~5代人角膜内皮细胞,实验分为转染组和未转染组,转染组采用Lipofectamine■ 3000将FAM-ADK siRNA转染进入角膜内皮细胞,采用高效液相色谱法检测各组中腺苷的质量浓度。实验分为对照组[转染对照siRNA]、雷帕霉素组(转染对照siRNA后培养液中加入10 ng/ml雷帕霉素)和ADK siRNA组(转染ADK siRNA后培养液中加入10 ng/ml雷帕霉素),采用TUNEL染色检测细胞凋亡比例;采用流式细胞术检测内皮细胞表面细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)和E-选择素的表达。实验分为单独培养组(单纯淋巴细胞培养)、共培养组(淋巴细胞与角膜内皮细胞共培养)和ADK siRNA组(淋巴细胞与ADK siRNA转染的角膜内皮细胞共培养),流式细胞术检测各组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的比例;ELISA法检测各组上清液中白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β)的质量浓度。结果流式细胞术检测结果显示,95.1%的角膜内皮细胞表达siRNA,转染组上清液中腺苷的质量浓度为(38.020±6.658)ng/ml,较对照组的(1.663±0.581)ng/ml明显升高,差异有统计学意义(t=5.437,P=0.006)。TUNEL染色结果显示,雷帕霉素组角膜内皮细胞平均凋亡率较对照组明显升高,ADK siRNA组角膜内皮细胞平均凋亡率较雷帕霉素组明显降低,差异均有统计学意义(t=3.763,P=0.020;t=4.405,P=0.012)。流式细胞术检测结果显示,ADK siRNA组ICAM-1、VCAM-1和E-选择素的平均荧光强度分别为4.060±1.179、3.600±1.234和5.223±1.734,明显弱于对照组的11.600±2.427、11.030±2.291和24.270±4.332,差异均有统计学意义(t=2.794,P=0.049;t=2.857,P=0.046;t=4.081,P=0.015)。单独培养组、共培养组和ADK siRNA组淋巴细胞中Treg细胞比例总体比较,差异有统计学意义(F=12.890,P=0.007),其中ADK siRNA组淋巴细胞中Treg细胞的比例较共培养组明显升高,差异有统计学意义(t=3.650,P=0.022)。ELISA检测结果显示,单独培养组、共培养组和ADK siRNA组淋巴细胞上清液中IL-10和TGF-β的质量浓度总体比较,差异均有统计学意义(F=20.960,P=0.003;F=27.320,P=0.001),其中ADK siRNA组淋巴细胞上清液中IL-10和TGF-β的质量浓度均较共培养组明显升高,差异均有统计学意义(t=4.492,P=0.011;t=5.280,P=0.006)。结论ADK siRNA修饰的角膜内皮细胞能够诱导Treg细胞增生及分泌IL-10和TGF-β,为角膜移植的免疫耐受诱导提供了新的选择。 展开更多
关键词 腺苷激酶 角膜移植 内皮细胞 调节性T细胞
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腺苷与腺苷激酶在癫痫中的作用 被引量:3
4
作者 张笋 王维平 冯连元 《国际神经病学神经外科学杂志》 2008年第3期267-271,共5页
腺苷是广泛分布于中枢神经系统的兴奋性神经递质,具有明确的抗癫痫作用,但因为其对于中枢神经系统外靶器官的不良反应影响了临床的使用。腺苷激酶作为调节腺苷水平的关键环节,具有潜在的抗癫痫和神经保护作用,通过多种方法途径提高局灶... 腺苷是广泛分布于中枢神经系统的兴奋性神经递质,具有明确的抗癫痫作用,但因为其对于中枢神经系统外靶器官的不良反应影响了临床的使用。腺苷激酶作为调节腺苷水平的关键环节,具有潜在的抗癫痫和神经保护作用,通过多种方法途径提高局灶的腺苷水平成为目前癫痫治疗研究的热点。本文对腺苷和腺苷激酶在癫痫中的作用进行了系统综述,并介绍了以此为基础的新型抗癫痫治疗方法。 展开更多
关键词 腺苷激酶 癫痫
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马来酸桂哌齐特对不同条件下体外培养的人脑胶质瘤U251细胞腺苷激酶的影响
5
作者 杨月嫦 刘振宇 +2 位作者 张照环 庄建华 赵忠新 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第33期4073-4076,共4页
目的观察马来酸桂哌齐特(CM)对不同条件下体外培养的人脑胶质瘤U251细胞腺苷激酶(ADK)表达水平的影响,探讨CM是否可通过影响细胞内ADK表达水平而实现其神经保护作用。方法 2013年2月—2014年6月,将人脑胶质瘤U251细胞铺到6孔板,1孔为1组... 目的观察马来酸桂哌齐特(CM)对不同条件下体外培养的人脑胶质瘤U251细胞腺苷激酶(ADK)表达水平的影响,探讨CM是否可通过影响细胞内ADK表达水平而实现其神经保护作用。方法 2013年2月—2014年6月,将人脑胶质瘤U251细胞铺到6孔板,1孔为1组,分别为胎牛血清(FBS)+0.9%氯化钠溶液对照组(C组)、FBS+CM 0.5 mg/ml组(C+0.5组)、FBS+CM 1.5 mg/ml组(C+1.5组)、血清剥夺(SD)+0.9%氯化钠溶液对照组(SD组)、SD+CM 0.5 mg/ml组(SD+0.5组)、SD+CM 1.5 mg/ml组(SD+1.5组),进行正常体外细胞培养或SD体外缺血模式培养。提取细胞蛋白、RNA,采用Western blotting法检测人脑胶质瘤U251细胞ADK表达水平,RT-PCR法检测人脑胶质瘤U251细胞ADK mRNA表达水平。结果 6组ADK表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。SD+0.5组ADK表达水平低于C组(P<0.05)。6组ADK mRNA表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。SD+0.5组ADK mRNA表达水平低于C组、SD+1.5组(P<0.05)。结论 SD体外缺血模式培养下,CM在一定浓度范围内可能通过增强人脑胶质瘤U251细胞的ADK表达抑制作用来实现其神经保护作用。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 腺苷激酶 马来酸桂哌齐特 血清剥夺 缺血 U251细胞
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联合应用全反式维甲酸与单纯疱疹病毒腺苷激酶基因对髓母细胞瘤的协同杀伤作用研究
6
作者 蒲珂 李少一 +2 位作者 马丽 高芸 刘云会 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期596-598,602,共4页
目的评估全反式维甲酸(ATRA)联合单纯疱疹病毒腺苷激酶(HSV-tk)基因对髓母细胞瘤细胞系Daoy的杀伤作用。方法观察不同浓度ATRA对Daoy细胞生长的抑制作用;HSV-tk基因稳定转染人的髓母细胞瘤细胞系Daoy,获得Daoy-tk细胞;Daoy-tk细胞与Dao... 目的评估全反式维甲酸(ATRA)联合单纯疱疹病毒腺苷激酶(HSV-tk)基因对髓母细胞瘤细胞系Daoy的杀伤作用。方法观察不同浓度ATRA对Daoy细胞生长的抑制作用;HSV-tk基因稳定转染人的髓母细胞瘤细胞系Daoy,获得Daoy-tk细胞;Daoy-tk细胞与Daoy细胞按不同比例混合,给予不同浓度的更昔洛韦(GCV)和一定浓度的ATRA,7d后应用噻唑蓝(MTT)法测定细胞生存率。结果 ATRA在0.5~1μmol/L时即可对Daoy细胞生长产生抑制作用;Daoy-tk与Daoy细胞比例达到1:4时仍有明显的抗肿瘤作用,联合应用1μmol/L的ATRA后能显著提高HSV-tk基因对Daoy细胞的杀伤率。结论 ATRA与HSV-tk/GCV系统联合应用,能增强对人的髓母细胞瘤的杀伤作用。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 单纯疱疹病毒腺苷激酶 更昔洛韦 髓母细胞瘤
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腺苷激酶-1在非小细胞肺癌患者血清中的表达与肺癌临床病理学特点及预后的关系 被引量:4
7
作者 付刚 《黑龙江医学》 2020年第4期474-477,共4页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中腺苷激酶-1(TK-1)的水平及与患者临床病理学特征、预后的关系。方法选取2010年1月-2013年4月在焦作市第二人民医院进行诊治的78例NSCLC患者作为NSCLC组,同时测定30例健康对象(健康组)的血清TK-1,... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中腺苷激酶-1(TK-1)的水平及与患者临床病理学特征、预后的关系。方法选取2010年1月-2013年4月在焦作市第二人民医院进行诊治的78例NSCLC患者作为NSCLC组,同时测定30例健康对象(健康组)的血清TK-1,进行比较分析,探讨血清TK-1水平与NSCLC患者预后的关系。结果 NSCLC组患者的血清TK-1水平及阳性率均显著的高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05);NSCLC组患者的血清TK-1阳性率均与患者的分化程度、TNM分期、病灶最大径、淋巴结转移具有显著的相关性(P<0.05);血清TK-1阳性NSCLC患者的3年存活率28.57%显著的低于TK-1阴性患者的51.16%(P<0.05);血清TK-1阳性NSCLC患者的中位生存时间21个月显著的短于阴性患者的27个月(P<0.05)。结论 NSCLC患者血清TK-1水平及阳性率显著的升高,并且与NSCLC患者的临床病理学特征及预后具有密切的关系。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 腺苷激酶-1 病理学特征 预后
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腺苷激酶抑制剂对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤早期氧化应激和神经元凋亡的影响 被引量:6
8
作者 魏园园 栗延伟 +1 位作者 郭升 谭军 《新乡医学院学报》 CAS 2020年第10期921-924,共4页
观察腺苷激酶抑制剂ABT-702对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤早期氧化应激和神经元凋亡的影响。方法将60只健康Sprague Dawley雄性大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注(IR)组和ABT-702干预组,其中IR组和ABT-702干预组大鼠按照恢复灌注的时间... 观察腺苷激酶抑制剂ABT-702对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤早期氧化应激和神经元凋亡的影响。方法将60只健康Sprague Dawley雄性大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注(IR)组和ABT-702干预组,其中IR组和ABT-702干预组大鼠按照恢复灌注的时间点分为IR 2 h组、IR 6 h组和ABT-7022 h组、ABT-7026 h组,每组12只。IR组和ABT-702干预组大鼠参照改良的Zea-longa线栓法制备大脑中动脉栓塞模型,假手术组大鼠仅分离颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉,不插入线栓。IR组大鼠于恢复灌注时腹腔注射二甲基亚砜稀释液(3 mL·kg^-1),ABT-702干预组大鼠于恢复灌注时腹腔注射ABT-702(1.5 mg·kg^-1),假手术组大鼠不给予任何干预措施。采用酶联免疫吸附测定法检测脑缺血半暗带组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、脂质过氧化物产物丙二醛(MDA)水平及凋亡因子caspase-3活性。结果IR 2 h组、IR 6 h组、ABT-7022 h组、ABT-7026 h组大鼠脑组织中SOD活性均低于假手术组(P<0.05);ABT-7022 h组大鼠脑组织中SOD活性显著高于IR 2 h组(P<0.05);ABT-7026 h组大鼠脑组织SOD活性显著高于IR 6 h组(P<0.05)。IR 2 h组、IR 6 h组、ABT-7022 h组、ABT-7026 h组大鼠脑组织中MDA含量均高于假手术组(P<0.05);ABT-7022 h组大鼠脑组织中MDA含量显著低于IR 2 h组(P<0.05);ABT-7026 h组大鼠脑组织中MDA含量显著低于IR 6 h组(P<0.05)。IR 2 h组、IR 6 h组、ABT-7022 h组、ABT-7026 h组大鼠脑组织中caspase-3活性均高于假手术组;ABT-7022 h组和IR 2 h组大鼠脑组织中caspase-3活性比较差异无统计学意义(P>0.05);ABT-7026 h组大鼠脑组织中caspase-3活性显著低于IR 6 h组(P<0.05)。结论ABT-702在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤早期可能通过抑制自由基的产生而发挥抗氧化作用,同时能减轻缺血半暗带区神经元凋亡,从而对脑组织缺血再灌注损伤早期起保护作用。 展开更多
关键词 ABT-702 腺苷激酶抑制剂 脑缺血再灌注损伤 超氧化物歧化酶 丙二醛
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柠檬苦素通过抑制腺苷激酶活性改善小鼠迟发型超敏反应 被引量:2
9
作者 欧阳春 丁翔 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期950-953,共4页
目的建立DNFB诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)模型,探讨柠檬苦素对小鼠DTH反应的影响并探索其作用机制。方法在小鼠DTH激发期腹腔注射柠檬苦素(5、10、20 mg/kg)以及地塞米松(DEX,1 mg/kg),考察化合物体内对小鼠耳肿胀程度的影响。构建... 目的建立DNFB诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)模型,探讨柠檬苦素对小鼠DTH反应的影响并探索其作用机制。方法在小鼠DTH激发期腹腔注射柠檬苦素(5、10、20 mg/kg)以及地塞米松(DEX,1 mg/kg),考察化合物体内对小鼠耳肿胀程度的影响。构建腺苷激酶活性无细胞检测系统,考察柠檬苦素对腺苷激酶活性的抑制作用。利用高效液相色谱法(high performanceliquid chromatogroaphy,HPLC)检测小鼠耳组织局部腺苷浓度,考察柠檬苦素体内对腺苷激酶活性的抑制效应。进一步通过腺苷受体拮抗剂干预,验证腺苷在柠檬苦素治疗效果中的作用。结果 DTH小鼠耳肿胀程度以及HE染色结果均表明激发期给予柠檬苦素可以显著改善小鼠DTH。腺苷激酶活性实验证明柠檬苦素体外可以抑制腺苷激酶的活性,HPLC结果显示柠檬苦素体内可促进小鼠耳组织局部腺苷累积。腺苷受体拮抗剂咖啡因可拮抗柠檬苦素对小鼠DTH的抑制效果。结论柠檬苦素可抑制腺苷激酶活性,影响体内腺苷代谢,导致耳组织局部腺苷累积,改善小鼠迟发型超敏反应。 展开更多
关键词 迟发型超敏反应 柠檬苦素 腺苷激酶
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腺苷激酶在乳腺癌中的表达及临床意义 被引量:1
10
作者 王颖颖 李飞飞 +1 位作者 杨书云 沈勤 《南通大学学报(医学版)》 2014年第6期475-477,共3页
目的:探讨腺苷激酶(Adenosine kinase,ADK)在乳腺癌组织中的表达情况,并分析其与乳腺癌临床病理特征之间的关系。方法:采用免疫印迹方法检测8对乳腺癌组织和对应癌旁组织中ADK的蛋白表达水平;免疫组织化学方法分析79例乳腺癌组织中ADK... 目的:探讨腺苷激酶(Adenosine kinase,ADK)在乳腺癌组织中的表达情况,并分析其与乳腺癌临床病理特征之间的关系。方法:采用免疫印迹方法检测8对乳腺癌组织和对应癌旁组织中ADK的蛋白表达水平;免疫组织化学方法分析79例乳腺癌组织中ADK的表达;χ2检验分析ADK表达与临床病理因素之间的关系。结果:乳腺癌组织中ADK的蛋白表达明显高于对应癌旁组织。免疫组织化学结果显示ADK的表达在不同病理分级乳腺癌患者中差异有统计学意义(P<0.05),与其他病理因素无明显相关性(P>0.05)。结论:ADK在乳腺癌组织中表达上调,提示ADK可能成为乳腺癌潜在的标志物及治疗靶点。 展开更多
关键词 腺苷激酶 预后
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腺苷激酶-1在非小细胞肺癌患者血清中的表达与肺癌临床病理学特点及预后的关系 被引量:4
11
作者 陈淦雄 李淦清 《中国医学创新》 CAS 2021年第7期142-145,共4页
目的:探讨腺苷激酶-1(TK-1)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中的表达与肺癌临床病理学特点及预后的关系。方法:选择2016年1月-2017年1月本院诊治的NSCLC患者107例和同时间段内体检的健康者100例的资料进行回顾性分析,比较NSCLC患者与健... 目的:探讨腺苷激酶-1(TK-1)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中的表达与肺癌临床病理学特点及预后的关系。方法:选择2016年1月-2017年1月本院诊治的NSCLC患者107例和同时间段内体检的健康者100例的资料进行回顾性分析,比较NSCLC患者与健康者的血清TK-1水平。依据血清TK-1的阳性与阴性对NSCLC人群分组,对比病理学特征。结果:NSCLC患者的血清TK-1阳性率和血清TK-1浓度均高于健康者(P<0.05)。血清TK-1阳性患者的病灶分化程度、TNM分期、病灶直径、淋巴结转移情况与血清TK-1阴性患者比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清TK-1阳性患者的平均生存时间为23.558个月,血清TK-1阴性患者的平均生存时间为28.617个月(P<0.05)。结论:NSCLC人群的血清TK-1浓度提升,血清TK-1的水平与多种临床病理学特征具有关联,血清TK-1的水平对于NSCLC患者的预后推测具有重要的参考意义。 展开更多
关键词 腺苷激酶-1 非小细胞肺癌 临床病理学
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血斑酸性磷酸酶、腺苷激酶、腺苷脱氨酶和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶同时电泳分型
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作者 邱宁 李伯龄 +1 位作者 黄力力 周静 《中国法医学杂志》 CSCD 1989年第2期83-86,共4页
本文作者介绍了利用薄层淀粉凝胶电泳对血斑酸性磷酸酶(EAP)、腺苷激酶(AK)、腺苷脱氨酶(ADA)和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGD)同时电泳分型的方法,同时报道了这四种酶在北京地区汉族人中的表型分布和基因频率.
关键词 淀粉凝胶电泳 酸性磷酸酶 腺苷激酶
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子痫前期患者血清腺苷活化蛋白激酶水平与可溶性血管内皮生长因子受体-1及氧化应激的相关性
13
作者 龙彬梅 黄超林 《成都医学院学报》 CAS 2024年第2期318-321,共4页
目的 分析子痫前期(PE)患者血清腺苷活化蛋白激酶(AMPK)水平与可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)及氧化应激的相关性。方法 选取2020年6月至2023年4月在成都医学院第一附属医院治疗的67例PE患者为试验组,选择本院同期住院的正常分... 目的 分析子痫前期(PE)患者血清腺苷活化蛋白激酶(AMPK)水平与可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)及氧化应激的相关性。方法 选取2020年6月至2023年4月在成都医学院第一附属医院治疗的67例PE患者为试验组,选择本院同期住院的正常分娩孕妇50名为对照组。比较两组AMPK、sFlt-1和氧化应激反应水平[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化物(SOD)];分析试验组不同严重程度的PE患者AMPK、sFlt-1、MDA、SOD水平差异;利用多变量逻辑回归方法对妊娠女性发病风险因子进行分析;分析试验组患者AMPK、sFlt-1与氧化应激的相关性。结果 试验组患者AMPK、sFlt-1、MDA水平均高于对照组,SOD水平低于对照组(P<0.05);轻度PE组的AMPK、sFlt-1、MDA水平均低于重度PE组,SOD高于重度PE组(P<0.05);两组妊娠期患糖尿病情况和AMPK、sFlt-1、MDA、SOD水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);经多元Logistic回归分析显示,妊娠期合并糖尿病和AMPK、sFlt-1、MDA、SOD水平是影响孕妇发生PE的危险因素(P<0.05);Pearson相关性分析显示,PE患者AMPK、sFlt-1与MDA水平呈正相关,与SOD水平呈负相关(P<0.05)。结论 PE患者AMPK、sFlt-1水平出现异常升高,AMPK、sFlt-1水平与氧化应激指标存在一定相关性。 展开更多
关键词 子痫前期 血清活化蛋白激酶 可溶性血管内皮生长因子受体-1 氧化应激
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腺苷激酶在难治性癫痫患者脑组织中过量表达
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作者 赫丹丹 兰春伟 +3 位作者 寇雨霏 刘涛 王清勇 段淑荣 《中国医师杂志》 CAS 2023年第9期1355-1358,共4页
目的观察腺苷激酶(ADK)在难治性癫痫患者海马内的表达,进而探讨ADK在难治性癫痫发病机制中的作用。方法收集哈尔滨医科大学附属第一医院因难治性癫痫手术切除海马组织的患者13例,作为癫痫组;同时收集颅脑外伤行清创术患者(相对正常的颞... 目的观察腺苷激酶(ADK)在难治性癫痫患者海马内的表达,进而探讨ADK在难治性癫痫发病机制中的作用。方法收集哈尔滨医科大学附属第一医院因难治性癫痫手术切除海马组织的患者13例,作为癫痫组;同时收集颅脑外伤行清创术患者(相对正常的颞叶脑组织)4例(既往无癫痫发作史),该4例患者为对照组。利用双荧光免疫组织化学、实时定量PCR(RT-Real-time PCR)、蛋白免疫印迹等方法从组织水平、基因水平、蛋白水平检测两组标本ADK的表达情况。结果在人脑中,ADK主要在星形胶质细胞核中表达。通过组织学观察,ADK在正常脑组织内有微弱表达,而在难治性癫痫患者脑组织中胶质细胞明显增生,同时有ADK的过量表达。癫痫组ADK阳性胶质细胞百分比为(53.90±17.59)%,对照组为(23.82±4.18)%,差异有统计学意义(P<0.01)。从基因水平,利用RT-Real-time PCR法发现癫痫组ADK mRNA高于对照组表达量,其2^(-△△Cp)为13.36,表达量是对照组的13.36倍。在蛋白水平,利用蛋白免疫印迹方法发现癫痫组ADK蛋白表达高于对照组(P<0.01)。结论ADK在人的正常脑组织星形胶质细胞核内有微弱表达。而在难治性癫痫患者脑组织中,星形胶质细胞显著增生并且有ADK的过量表达。ADK在人类难治性癫痫的发生发展过程中可能起到了重要作用。 展开更多
关键词 腺苷激酶 难治性癫痫 海马
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乌珠穆沁羊与小尾寒羊一磷酸腺苷激活蛋白激酶酶活性与肉品质的关系研究
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作者 薛宝玲 宋晓彬 格日勒图 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第20期245-251,共7页
目的研究乌珠穆沁羊与小尾寒羊不同生长阶段、不同部位骨骼肌一磷酸腺苷激活蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)活性、糖酵解与肉质相关指标的内在变化规律。方法通过夹心酶联免疫吸附法测定6月龄和8月... 目的研究乌珠穆沁羊与小尾寒羊不同生长阶段、不同部位骨骼肌一磷酸腺苷激活蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)活性、糖酵解与肉质相关指标的内在变化规律。方法通过夹心酶联免疫吸附法测定6月龄和8月龄乌珠穆沁羊与小尾寒羊的股二头肌、背最长肌与臂三头肌AMPK活性,比色法测定乳酸(lactic acid,LA)含量,微量法测定肌糖原含量和分光光度法测定己糖激酶(hexokinase,HK)含量以及常规法测定肉品质等相关性指标。结果两个品种的肉羊之间AMPK活性无显著差异(P>0.05);AMPK活性升高,同时pH24、L^(*)、b^(*)与剪切力降低,8月龄LA及a^(*)、6月龄肌糖原含量和HK活性升高(P<0.05)。被激活的AMPK能够刺激产能过程糖酵解的HK活性、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶,酶活性与LA含量呈正相关,宰后呼吸方式的改变导致pH快速下降,剪切力与熟肉率增大,嫩度降低。结论宰后羊肉AMPK活性与糖酵解和肉品质之间存在一定的相关性。AMPK活性以及糖酵解的程度不同,可能导致了肉的剪切力、瘦肉率以及嫩度等差异,AMPK活性增强糖酵解的关键酶被激活活性增加,加快糖酵解进程从而影响肉品质。 展开更多
关键词 乌珠穆沁羊 小尾寒羊 一磷酸激活蛋白激酶 糖酵解 肉品质
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肺癌患者血清骨桥蛋白、腺苷激酶1和Dikkopf 1表达水平及其临床意义 被引量:12
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作者 吴树强 廖和和 +3 位作者 王甲林 任明智 黄慧云 赵朝华 《肿瘤研究与临床》 CAS 2019年第3期149-153,共5页
目的探讨肺癌患者血清骨桥蛋白(OPN)、腺苷激酶1(TK1)和分泌型蛋白Dikkopf1(DKK1)的表达水平及其临床意义。方法选取2017年2月至2018年4月在西安医学院第一附属医院接受治疗的肺癌患者60例(肺癌组),以同期接受体检的60名健康成年人作为... 目的探讨肺癌患者血清骨桥蛋白(OPN)、腺苷激酶1(TK1)和分泌型蛋白Dikkopf1(DKK1)的表达水平及其临床意义。方法选取2017年2月至2018年4月在西安医学院第一附属医院接受治疗的肺癌患者60例(肺癌组),以同期接受体检的60名健康成年人作为健康对照。比较肺癌组和健康对照组间、不同临床病理特征肺癌患者间血清OPN、TK1和DKK1水平的差异。两组间计量资料比较采用t检验。结果肺癌组患者血清OPN、TK1和DKK1水平分别为(38.56±3.18)μg/L、(4.69±1.03)pmol/L、(3.76±0.89)ng/ml,均分别高于健康对照组的(15.98±2.06)μg/L、(1.01±0.22)pmol/L、(1.21±0.24)ng/ml(t值分别为-46.162、-27.064、-21.428,均P<0.01)。不同年龄和性别的肺癌患者血清OPN、TK1和DKK1水平差异均无统计学意义(均P>0.05);Ⅲ~Ⅳ期肺癌患者血清OPN、TK1和DKK1水平分别为(57.18±3.12)μg/L、(6.26±1.28)pmol/L和(4.98±1.03)ng/ml,均高于Ⅰ~Ⅱ期肺癌患者的(30.35±2.96)μg/L、(3.49±0.67)pmol/L、(3.01±0.96)ng/ml(t值分别为-34.156、-10.690、-7.665,均P<0.01)。非小细胞肺癌患者血清OPN、TK1和DKK1水平分别为(55.13±5.02)μg/L、(5.96±1.11)pmol/L、(5.02±1.32)ng/ml,均高于小细胞肺癌患者的(29.68±3.16)μg/L、(3.13±0.98)pmol/L、(2.86±0.56)ng/ml(t值分别为-22.353、-10.213、-7.688,均P<0.01)。结论肺癌患者血清OPN、TK1和DKK1水平较高,且其水平与肺癌分型和分期有关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 小细胞肺癌 非小细胞肺 骨桥蛋白质 腺苷激酶 Dikkopf 1
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氯化锂-毛果芸香碱点燃癫大鼠模型中腺苷激酶表达的动态改变 被引量:4
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作者 康慧聪 刘晓艳 +5 位作者 胡琦 许峰 李巷 刘志广 王媛 朱遂强 《中国临床神经科学》 2009年第3期225-230,共6页
目的:观察氯化锂-毛果芸香碱慢性点燃大鼠在点燃过程中脑内腺苷激酶(ADK)表达的动态演变情况,探讨癫发作与ADK的关系及时间演变特征,以评价ADK在癫发病机制中的作用。方法:氯化锂-毛果芸香碱点燃大鼠模型,分模型组、对照组和正常组... 目的:观察氯化锂-毛果芸香碱慢性点燃大鼠在点燃过程中脑内腺苷激酶(ADK)表达的动态演变情况,探讨癫发作与ADK的关系及时间演变特征,以评价ADK在癫发病机制中的作用。方法:氯化锂-毛果芸香碱点燃大鼠模型,分模型组、对照组和正常组。采用RT-PCR及Western blot的方法监测发作后24h和1、6个月时大鼠脑内ADK表达的动态改变情况。结果:氯化锂-毛果芸香碱点燃后24h时,RT-PCR及Western blot检测ADK的表达均低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);在点燃进入慢性期后的1和6个月时则相反,ADK表达较点燃前明显增高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。ADK表达6个月时较1个月时更高(P<0.05或P<0.01),即慢性期ADK的表达增高随时间延长越加明显。结论:ADK在点燃过程中呈现双向改变特征,急性期表达降低,促进细胞外腺苷浓度的增高;进入慢性期,反复的癫发作导致了ADK的过表达,这可能是导致癫反复发作而无法控制的重要因素。 展开更多
关键词 氯化锂-毛果芸香碱慢性点燃 系统 腺苷激酶
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氯喹对戊四氮慢性致痫大鼠脑皮质及海马腺苷激酶表达的影响 被引量:1
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作者 于宁 朱玉红 +2 位作者 荆丽丽 杨东霞 吴淑华 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期343-346,共4页
目的观察氯喹对戊四氮致痫大鼠皮质和海马区腺苷激酶(AOK)表达的影响,探讨ADK与癫痫发作的关系及氯喹在癫痫发生过程中的作用。方法30只健康雄性SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、戊四氮fPTZ)致痫组和氯喹干预组,每组10只。观察... 目的观察氯喹对戊四氮致痫大鼠皮质和海马区腺苷激酶(AOK)表达的影响,探讨ADK与癫痫发作的关系及氯喹在癫痫发生过程中的作用。方法30只健康雄性SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、戊四氮fPTZ)致痫组和氯喹干预组,每组10只。观察大鼠行为学表现,记录其脑电改变,采用免疫组化法检测3组大鼠皮质和海马区ADK的表达。结果对照组大鼠无癫痫发作,PTZ致痫组大鼠出现Racine评分中Ⅳ~V级严重发作.氯喹干预组大鼠出现I~Ⅲ级发作.差异有统计学意义(P〈0.05)。PTZ致痫组大鼠脑电记录呈频发高幅的痫样波,氯喹干预组大鼠脑电记录显示慢波、小棘波。PTZ致痫组大鼠脑内ADK表达明显增强,以海马区最为显著,与对照组相比差异均有统计学意义(P〈0.05)。氯喹干预组大鼠脑内ADK表达降低,但距离正常水平仍有较大差距,与对照组相比差异有统计学意义(P〈0.05)。结论癫痫脑组织中存在ADK的表达异常.氯喹可以抑制这种表达.有效控制癫痫发作。 展开更多
关键词 腺苷激酶 氯喹 星形胶质细胞 戊四氮 癫痫
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一磷酸腺苷激酶在肿瘤细胞增殖及自噬中的研究进展 被引量:3
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作者 耿琛琛 李丹妮 李丰 《解剖科学进展》 CAS 2010年第6期578-580,582,共4页
一磷酸腺苷激酶(AMPK)以异质三联体形式存在于所有真核细胞内,是维持机体能量稳态的感受器。AMPK的激活主要来自avicinD、LKB1等,而AMPK主要激活底物是TSC2、p53和p27kip1,其中TSC2是mTOR的负性调控元件,它的激活可以间接地抑制细胞增殖... 一磷酸腺苷激酶(AMPK)以异质三联体形式存在于所有真核细胞内,是维持机体能量稳态的感受器。AMPK的激活主要来自avicinD、LKB1等,而AMPK主要激活底物是TSC2、p53和p27kip1,其中TSC2是mTOR的负性调控元件,它的激活可以间接地抑制细胞增殖;p53也可抑制mTOR通路,中断细胞增殖;活化的p27kip1可以诱导自噬,促进细胞死亡,抑制肿瘤生长。这些都表明AMPK在肿瘤细胞增殖和自噬中发挥作用。由于在许多肿瘤细胞中可以发现失活的AMPK,因而研究AMPK与肿瘤发展及细胞自噬的关系,将可能为肿瘤治疗找到新靶点。 展开更多
关键词 肿瘤细胞增殖 细胞自噬 腺苷激酶 磷酸 P27^KIP1 AMPK 抑制细胞增殖 抑制肿瘤生长
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腺苷激酶活化在幼鼠癫痫形成中的作用 被引量:1
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作者 张海菊 余诗倩 姚宝珍 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2022年第6期908-912,共5页
目的:探讨腺苷激酶(ADK)在幼鼠癫痫形成中的作用和相关机制。方法:海人藻酸(KA)诱导幼鼠痫性发作(SE),检测静止期(SE后14 d)和慢性自发性癫痫(SRS)形成期(SE后42 d)ADK的表达;部分幼鼠腹腔注射腺苷受体拮抗剂ABT⁃702,分为对照组(NC)、... 目的:探讨腺苷激酶(ADK)在幼鼠癫痫形成中的作用和相关机制。方法:海人藻酸(KA)诱导幼鼠痫性发作(SE),检测静止期(SE后14 d)和慢性自发性癫痫(SRS)形成期(SE后42 d)ADK的表达;部分幼鼠腹腔注射腺苷受体拮抗剂ABT⁃702,分为对照组(NC)、致痫组(SE)和SE后ABT⁃702干预组(SE+ABT⁃702)。观察SRS在各组的差异,检测SRS形成期各组ADK,腺苷A1受体(A1R)和A2αR蛋白表达差异;尼氏染色观察海马神经元丢失和促炎性因子IL⁃18和IL⁃1β的表达在各组的差异。结果:KA诱导SE发作后,静止期及SRS形成期海马区ADK表达均增加;ABT⁃702抑制SRS慢性期ADK的活化,降低SRS发生率,抑制抑制海马神经元丢失;SE组ADK活化激活A2αR,诱导促炎性因子IL⁃18和IL⁃1β,ABT⁃702抑制A2αR及促炎性因子IL⁃18和IL⁃1β的活化。结论:SE诱导ADK持续活化,癫痫形成期腺苷A2α受体被激活,诱导海马神经元丢失和促炎性因子IL⁃18和IL⁃1β释放,在幼鼠慢性癫痫形成发挥重要作用。 展开更多
关键词 癫痫形成 腺苷激酶 受体 炎症 海人藻酸
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