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半滑舌鳎膜孕激素受体基因克隆与组织表达分析 被引量:8
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作者 史宝 李晓晓 +4 位作者 柳学周 徐永江 王珊珊 刘芝亮 王妍妍 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2013年第3期61-67,共7页
采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)方法,首次获得全长为1319bp的半滑舌鳎膜孕激素受体(mPRα)的cDNA序列;将推断的氨基酸序列与其他物种mPRα氨基酸序列进行多重比较分析,发现存在7个跨膜区域。使用MEGA4.0临位相联法和ClustalX方法对mP... 采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)方法,首次获得全长为1319bp的半滑舌鳎膜孕激素受体(mPRα)的cDNA序列;将推断的氨基酸序列与其他物种mPRα氨基酸序列进行多重比较分析,发现存在7个跨膜区域。使用MEGA4.0临位相联法和ClustalX方法对mPRα的氨基酸序列进行聚类分析和序列相似度分析。结果表明,半滑舌鳎mPRα与漠斑牙鲆、大西洋绒须石首鱼以及青鳉等鱼类的mPRα聚为一支,亲缘关系较近,相似度较高,分别为94%、93%和90%;而与高等哺乳动物人和牛相似性均为53%,亲缘关系较远。应用半定量RT-PCR技术分析了mPRαmRNA在性成熟雌性半滑舌鳎不同组织的表达,结果表明,mPRαmRNA组织表达具有广泛性,但表达量存在差异,在脑、肾、脾和卵巢等组织表达丰富,在肝、胃和肌肉组织表达较弱。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 膜孕激素受体基因 基因克隆 组织表达
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半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)新型膜孕激素受体基因(mPRL)在卵母细胞成熟过程中的表达特征 被引量:2
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作者 史宝 柳学周 +3 位作者 徐涛 李晓妮 徐永江 张金勇 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第1期10-17,共8页
为进一步提高半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)人工育苗技术的水平,对半滑舌鳎新型膜孕激素受体(mPR-like,mPRL)基因的表达特征和作用机制进行了研究。应用实时定量PCR方法分析mPRL mRNA在卵子形成过程中的时序表达,发现半滑舌鳎mPRL m... 为进一步提高半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)人工育苗技术的水平,对半滑舌鳎新型膜孕激素受体(mPR-like,mPRL)基因的表达特征和作用机制进行了研究。应用实时定量PCR方法分析mPRL mRNA在卵子形成过程中的时序表达,发现半滑舌鳎mPRL mRNA相对表达量的最高值出现在性成熟阶段卵巢的Ⅴ时相卵母细胞。原位杂交分析mPRL mRNA在繁殖相关组织的细胞学定位,发现mPRL mRNA分布在半滑舌鳎性成熟阶段卵巢的卵母细胞膜上;在脑的神经元和垂体内分散的细胞中,mPRL mRNA阳性信号较强。制备半滑舌鳎mPRL的多克隆抗体,采用Western blotting方法检测半滑舌鳎mPRL蛋白在不同组织的表达特征,发现mPRL蛋白的表达量在卵巢、脑、垂体中相对较高,在肝脏、头肾、肾脏中表达量相对较少。免疫组化结果显示,半滑舌鳎mPRL蛋白在卵巢、脑和垂体的细胞学定位与mPRL mRNA定位一致。应用实时定量PCR和Western blotting方法检测促性腺激素调控下半滑舌鳎不同时相卵母细胞mPRL基因mRNA和蛋白的表达变化,结果显示,促性腺激素对半滑舌鳎卵母细胞中mPRL基因mRNA和蛋白表达都有一定的上调作用,特别是对Ⅴ时相卵母细胞中mPRL mRNA和蛋白的表达量提升明显;发现表达量与促性腺激素调控作用具有剂量依存关系。半滑舌鳎mPRL在繁殖相关组织的表达特征表明其通过脑–垂体–卵巢轴参与繁殖调控,同时也揭示了mPRL介导卵母细胞成熟机制。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 新型膜孕激素受体 卵母细胞成熟 MRNA表达 蛋白表达
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膜孕激素受体(mPRα)在半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)卵母细胞成熟过程中的表达特征 被引量:1
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作者 李晓妮 柳学周 +2 位作者 史宝 徐永江 张金勇 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第1期25-33,共9页
通过实时荧光定量PCR方法(qRT-PCR)检测半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)雌性性成熟不同时期、不同时相卵母细胞中膜孕激素受体(mPRα)的表达,通过qRT-PCR和Western blotting方法检测促性腺激素(HCG)对成熟期半滑舌鳎卵母细胞mPRα表... 通过实时荧光定量PCR方法(qRT-PCR)检测半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)雌性性成熟不同时期、不同时相卵母细胞中膜孕激素受体(mPRα)的表达,通过qRT-PCR和Western blotting方法检测促性腺激素(HCG)对成熟期半滑舌鳎卵母细胞mPRα表达的影响,同时,采用原位杂交、免疫组化和Western blotting方法研究雌性性成熟半滑舌鳎mPRα mRNA和蛋白在各组织中的表达。对半滑舌鳎性成熟不同时期、不同时相卵母细胞中mPRα mRNA的定量研究结果显示,在成熟时期半滑舌鳎Ⅴ时相卵母细胞的mPRα mRNA表达量最高。HCG对成熟期半滑舌鳎卵母细胞mPRα表达的影响研究结果显示,20 IU/ml HCG比10 IU/ml HCG对成熟时期半滑舌鳎卵母细胞mPRα mRNA和蛋白表达的促进作用更明显,进一步证明mPRα介导孕激素参与了卵母细胞成熟的调控。对mPRα组织表达的定量和定位研究中,Western blotting结果显示,在半滑舌鳎的卵巢、垂体、脑、头肾、肾、肝脏组织中均有mPRα蛋白表达,且在脑、垂体和卵巢中表达量较高,表明mPRα在不同组织中都发挥着一定的作用,且在内分泌相关组织如脑、垂体和卵巢中的作用更明显。原位杂交和免疫组化结果显示,mPRα mRNA和蛋白表达明显定位在卵母细胞膜上,且在其他组织的外周和管腔结构表达。本研究为进一步研究mPRα在膜上的信号转导机制提供了理论基础和形态学依据。 展开更多
关键词 膜孕激素受体 半滑舌鳎 原位杂交 免疫组化 WESTERN BLOTTING 实时荧光定量PCR
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性成熟雌性牙鲆(Paralichthysolivaceus)新型膜孕激素受体(mPRL)的定性定量表达分析
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作者 史宝 柳学周 +3 位作者 徐涛 李晓妮 徐永江 张金勇 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第1期18-24,共7页
在牙鲆(Paralichthys olivaceus)繁殖周期,新型膜孕激素受体基因(mPR-Like,mPRL)在脑–垂体–性腺轴的表达变化规律与性腺发育成熟密切相关。为进一步研究牙鲆mPRL作用机制,本研究对其mRNA和蛋白的表达特征进行了分析。应用实时定量PCR... 在牙鲆(Paralichthys olivaceus)繁殖周期,新型膜孕激素受体基因(mPR-Like,mPRL)在脑–垂体–性腺轴的表达变化规律与性腺发育成熟密切相关。为进一步研究牙鲆mPRL作用机制,本研究对其mRNA和蛋白的表达特征进行了分析。应用实时定量PCR方法分析mPRL mRNA在卵子形成过程中的时序表达,发现牙鲆mPRL mRNA相对表达量的最高值出现在性成熟阶段卵巢的Ⅴ时相卵母细胞。原位杂交分析mPRL mRNA在繁殖相关组织中的细胞学定位,发现mPRL mRNA主要分布在牙鲆性成熟阶段卵巢的卵母细胞膜上;在脑组织的神经元附近区域mPRL mRNA阳性信号也较强。制备牙鲆mPRL的多克隆抗体,采用Western blotting方法检测牙鲆mPRL蛋白在不同组织的表达特性,发现mPRL蛋白表达量在卵巢和脑组织中相对较高,在肝脏、头肾、肾脏中表达量相对较少。免疫组化结果显示,牙鲆mPRL蛋白在卵巢和脑组织的细胞学定位与mPRL mRNA定位一致。牙鲆mPRL在繁殖相关组织的表达特征说明其参与卵母细胞成熟的过程,并通过内分泌方式参与牙鲆的繁殖调控。 展开更多
关键词 牙鲆 新型膜孕激素受体 MRNA表达 蛋白表达
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半滑舌鳎新型膜孕激素受体基因分子特征及其在卵巢发育过程的作用 被引量:10
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作者 柳学周 史宝 +3 位作者 李晓晓 徐永江 王珊珊 李晓妮 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期608-619,共12页
为进一步提高半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)人工育苗技术水平,对半滑舌鳎新型膜孕激素受体(m PR-like)基因进行研究。采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)方法,获得全长为2 002 bp的半滑舌鳎新型膜孕激素受体的c DNA序列... 为进一步提高半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)人工育苗技术水平,对半滑舌鳎新型膜孕激素受体(m PR-like)基因进行研究。采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)方法,获得全长为2 002 bp的半滑舌鳎新型膜孕激素受体的c DNA序列;二级结构分析表明,该蛋白存在7个跨膜区域;三级结构分析表明该蛋白有多个结合位点。使用MEGA4.0临位相联法和Clustal X方法对m PR-like的氨基酸序列进行聚类分析和序列相似度分析,发现半滑舌鳎m PR-like与青鳉(Oryzias latipes)和三刺鱼(Gasterosteus aculeayus)的m PR-like聚为一支,相似度分别为68%和72%。应用实时定量PCR方法分析了m PR-like m RNA表达情况,发现m PR-like m RNA在性成熟雌性半滑舌鳎不同组织表达具有广泛性,但表达量存在差异,在脑、卵巢、心脏、鳃、脾和胃等组织表达丰富;在不同发育阶段卵母细胞中,m PR-like m RNA表达水平从II时相卵母细胞到V时相卵母细胞持续升高,而在VI时相卵母细胞的表达水平显著下降(P<0.05);在半滑舌鳎繁殖周期的脑和卵巢组织中,m PR-like m RNA的表达水平从性腺发育II期到V期持续升高,并且在V期达到最高峰(P<0.05),VI期表达量开始下降;在半滑舌鳎繁殖周期的垂体组织中,不同繁殖期m PR-like m RNA表达水平变化幅度不大,但在性腺发育V期时垂体中的表达量显著高于其他繁殖期(P<0.05)。放射免疫测定的结果表明,半滑舌鳎雌鱼血清中孕酮激素的含量变化在整个繁殖周期中差异显著(P<0.05),在性腺发育IV期含量迅速升高并在V期达到峰值。该基因在半滑舌鳎多种组织中的表达特征,预示其具有多种生理学作用;在卵母细胞和繁殖周期脑–垂体–卵巢的表达特征表明其参与卵母细胞成熟过程和生殖调控。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 新型膜孕激素受体 基因克隆 表达 孕酮激素
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乳腺癌中孕激素受体膜组分1表达与临床病理特征及预后的关系
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作者 李淑慧 《中外医学研究》 2023年第31期69-73,共5页
目的:探讨乳腺癌组织中孕激素受体膜组分1(PGRMC1)表达与临床病理特征及预后的关系。方法:通过回顾收集2014年1月—2017年12月福建医科大学附属福州市第一总医院病理科乳腺癌石蜡标本98例、乳腺良性病变组织标本50例和正常乳腺石蜡组织... 目的:探讨乳腺癌组织中孕激素受体膜组分1(PGRMC1)表达与临床病理特征及预后的关系。方法:通过回顾收集2014年1月—2017年12月福建医科大学附属福州市第一总医院病理科乳腺癌石蜡标本98例、乳腺良性病变组织标本50例和正常乳腺石蜡组织标本50例。采用免疫组织化学法检测组织PGRMC1表达情况,分析PGRMC1表达与乳腺癌临床病理特征及生存预后的关系。结果:乳腺癌组织中PGRMC1阳性表达率为60.20%,高于乳腺良性病变组织的28.00%和正常乳腺组织的8.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。PGRMC1阳性表达患者肿瘤大小>2 cm、组织学分级为Ⅲ级、有腋窝淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ期、雌激素受体(ER)阳性比例均显著高于PGRMC1阴性表达患者,差异有统计学意义(P<0.05);不同PGRMC1表达患者年龄、孕激素受体(PR)、Ki-67和人表皮生长因子受体2(HER)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。logistic回归分析显示,乳腺癌患者PGRMC1阳性表达独立相关的因素包括组织学分级、腋窝淋巴结转移、TNM分期和ER(P<0.05)。生存分析显示,PGRMC1阳性表达患者5年无复发率高于PGRMC1阴性表达患者,差异有统计学意义(P<0.05),PGRMC1阳性表达与PGRMC1阴性表达患者5年总生存率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PGRMC1与乳腺癌患者肿瘤直径、组织学分级、腋窝淋巴结转移、TNM分期、ER及生存预后有关,可作为临床抗肿瘤治疗及预后预测的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 乳腺癌 孕激素受体组分1 临床病理特征 预后
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膜孕激素受体亚型及核孕激素受体在复发性自然流产中表达及临床意义 被引量:4
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作者 赵伟 孙兆亮 +1 位作者 王萍 牟晓莉 《临床军医杂志》 CAS 2021年第4期398-399,402,共3页
目的探讨膜孕激素受体(mPR)亚型(mPR-α、mPR-β)及核孕激素受体(NPR)在复发性自然流产(RSA)中的表达及临床意义。方法将德州市人民医院自2018年1月至2020年8月收治的92例RSA患者纳入RSA组,将同期体检的94例正常育龄女性纳入正常组。采... 目的探讨膜孕激素受体(mPR)亚型(mPR-α、mPR-β)及核孕激素受体(NPR)在复发性自然流产(RSA)中的表达及临床意义。方法将德州市人民医院自2018年1月至2020年8月收治的92例RSA患者纳入RSA组,将同期体检的94例正常育龄女性纳入正常组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测两组研究对象子宫内膜mPR-α、mPR-β及NPR mRNA的相对表达量。结果 RSA组子宫内膜mPR-βmRNA相对表达量为(0.472±0.023),低于正常组的(1.240±0.014),差异有统计学意义(P<0.05)。正常组子宫内膜mPR-αmRNA相对表达量为(2.249±0.048),RSA组为(2.376±0.080),差异无统计学意义(P>0.05)。正常组子宫内膜NPR mRNA相对表达量为(1.076±0.021),RSA组为(1.110±0.017),差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RSA患者子宫内膜mPR-βmRNA相对表达量低于正常育龄女性,mPR-β表达降低可能是导致RSA发生的一个原因。 展开更多
关键词 膜孕激素受体 孕激素受体 复发性自然流产
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孕激素膜受体1在乳腺癌的表达及其生物学意义 被引量:10
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作者 纪术峰 吴爱国 杨华峰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期635-638,共4页
目的探讨孕激素膜受体1(PGRMC1)在乳腺癌中的表达状况及与临床病理指标的可能关系。方法采用免疫组织化学方法回顾性分析检测60例乳腺癌PGRMC1的表达,并评价其与病理分级、临床分期、转移,化疗敏感性以及预后之间的关系。结果 60例乳腺... 目的探讨孕激素膜受体1(PGRMC1)在乳腺癌中的表达状况及与临床病理指标的可能关系。方法采用免疫组织化学方法回顾性分析检测60例乳腺癌PGRMC1的表达,并评价其与病理分级、临床分期、转移,化疗敏感性以及预后之间的关系。结果 60例乳腺癌组织PGRMC1表达阳性37例,阴性23例。PGRMC1的表达与乳腺癌淋巴结转移(P=0.004)、肿瘤大小(P=0.03)和临床分期(P=0.039)密切相关;与年龄(P=0.196)和肿瘤病理分级(P=0.526)无关。PGRMC1的表达与乳腺癌患者的总体生存率(Log-rank=15.638;P=0.0001)和无瘤生存率(Log-rank=4.443;P=0.035)有关。多因素分析结果提示PGRMC1是乳腺癌独立的预后因子(P=0.002)。结论 PGRMC1的表达乳腺癌随转移和临床分期升高而增强,可能是乳腺癌的预后因素之一。 展开更多
关键词 乳腺癌 孕激素受体1 预后
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沉默孕激素膜受体1基因抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa增殖的研究 被引量:2
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作者 陆琳 孟伟 +3 位作者 郭洪波 董瑞红 胡海燕 沈媛 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第15期1951-1953,共3页
目的通过siRNA抑制子宫内膜癌细胞株Ishikawa孕激素膜受体1(progesterone receptor membrane component-1,PGRMC1)表达,探讨抑制子宫内膜癌细胞增殖的作用。方法应用Ambion公司siRNA设计工具设计以PGRMC1为靶标的siRNA并用该公司试剂盒... 目的通过siRNA抑制子宫内膜癌细胞株Ishikawa孕激素膜受体1(progesterone receptor membrane component-1,PGRMC1)表达,探讨抑制子宫内膜癌细胞增殖的作用。方法应用Ambion公司siRNA设计工具设计以PGRMC1为靶标的siRNA并用该公司试剂盒化学合成。MTT法检测转染siRNA后细胞增殖抑制率,RT-PCR检测转染siRNA后PGRMC1基因mRNA水平变化,Western blot检测蛋白表达变化。流式细胞仪检测转染组与对照组细胞周期变化;Annexin V阳性细胞百分比,对比细胞凋亡率;双氢二氯荧光黄染色阳性率判定细胞内ROS水平。结果 si-PGRMC1可显著抑制该基因mRNA及蛋白的表达,使细胞增殖受抑,G2期细胞比例明显增加,凋亡细胞比率明显增加,细胞内ROS水平也随之升高。结论 PGRMC1参与了调控子宫内膜癌细胞增殖。 展开更多
关键词 孕激素受体1 子宫内 SIRNA
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孕激素受体膜组分1(PGRMC1)对预测乳腺癌预后作用的研究 被引量:6
10
作者 张颖 阮祥燕 +2 位作者 米鑫 王刚乐 Alfred O.Mueck 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第4期548-552,共5页
目的探讨孕激素受体膜组分1(progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)在乳腺癌患者预后方面的作用及临床意义,为评估患者预后提供更多的预测依据。方法试验纳入2008年1月1日至2014年12月31日间初诊诊断为乳腺癌的患者50例... 目的探讨孕激素受体膜组分1(progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)在乳腺癌患者预后方面的作用及临床意义,为评估患者预后提供更多的预测依据。方法试验纳入2008年1月1日至2014年12月31日间初诊诊断为乳腺癌的患者50例,记录患者年龄、肿瘤直径、病理分级、淋巴结转移等预后相关因素,追踪随访患者预后情况,免疫组织化学方法检测乳腺癌组织标本雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)、Ki67、PGRMC1表达情况,并分析与患者预后之间的相关性。结果纳入试验的50名女性乳腺癌患者,乳腺癌组织ERa阳性表达率为48.0%,共24例;PR阳性表达率为42.0%,共21例;Ki67阳性表达率为4%,共2例;PGRMC1阳性表达率为70.0%,共35例。PGMRC1的表达与年龄、肿瘤病理分级之间无明显相关性,与肿瘤直径、淋巴结转移间有明显相关性(OR=1.60,95%CI:1.11-2.29;OR=1.12,95%CI:1.02-1.23),PGRMC1表达阳性程度越高,患者复发可能性越大(P=0.011),远期生存情况越差(P=0.028)。结论PGRMC1与常见预后因子肿瘤直径、淋巴结转移间存在关联,与患者疾病复发、远期生存情况存在关联,其很有可能成为乳腺癌患者预后的独立预测因子。 展开更多
关键词 乳腺癌 孕激素受体组分1 激素受体 预后因子
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孕激素受体膜组分1(PGRMC1)在乳腺癌发生风险方面的研究进展 被引量:3
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作者 张颖 阮祥燕 +2 位作者 田玄玄 张俊丽 Alfred O.Mueck 《首都医科大学学报》 CAS 2013年第4期496-500,共5页
乳腺癌是导致女性死亡的主要病因之一,因此现在对于相关标志物及治疗靶位点的研究非常重要。妇女健康启动项目(Women’s Health Initiative,WHI)研究10年随访结果,单一雌激素治疗组妇女的乳腺癌风险没有增加,反而有降低,雌孕激素联合治... 乳腺癌是导致女性死亡的主要病因之一,因此现在对于相关标志物及治疗靶位点的研究非常重要。妇女健康启动项目(Women’s Health Initiative,WHI)研究10年随访结果,单一雌激素治疗组妇女的乳腺癌风险没有增加,反而有降低,雌孕激素联合治疗组乳腺癌风险增高。此结果表明,在激素替代治疗(hormone replacement therapy,HRT)中孕激素对乳腺癌风险具有负面影响,许多体外研究发现某些合成孕激素对孕激素受体膜组分1(progesterone receptor membrane components,PGRMC1)表达阳性的人乳腺癌细胞有明显促增生作用。那么,WHI雌孕激素连续联合治疗组乳腺癌风险的增加是否可以用PGRMC1来解释?是否PGRMC1可以作为HRT乳腺癌易感者的潜在标志物?现就此方面的研究进行综述。 展开更多
关键词 孕激素受体组分1 乳腺癌 孕激素 激素
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孕激素受体膜成分1在子宫内膜癌中表达及对细胞增殖的影响 被引量:4
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作者 于丽 曾桢 +1 位作者 李婷 廖秦平 《中国性科学》 2016年第4期43-47,共5页
目的:检测子宫内膜癌组织中孕激素受体膜成分1(PGRMC1)的蛋白表达特点,分析其临床意义;并探讨PGRMC1对子宫内膜癌细胞增殖调控的影响。方法:采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测70例子宫内膜癌组织及28例对照子宫内膜组织中PGRMC1... 目的:检测子宫内膜癌组织中孕激素受体膜成分1(PGRMC1)的蛋白表达特点,分析其临床意义;并探讨PGRMC1对子宫内膜癌细胞增殖调控的影响。方法:采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测70例子宫内膜癌组织及28例对照子宫内膜组织中PGRMC1蛋白表达水平;应用细胞免疫组化方法检测三种人子宫内膜癌细胞系中PGRMC1的表达定位;将PGRMC1的小分子抑制剂Ag205以不同浓度分别刺激人子宫内膜癌细胞Ishikawa、Hec-1A、KLE 72小时,应用CCK-8(cell counting kit 8)方法检测Ag205对细胞活力的影响。结果:子宫内膜癌组织中PGRMC1表达较正常内膜显著升高(P=0.038);PGRMC1在各期子宫内膜癌组织中的表达无差异,但在Ⅰ期患者中,PGRMC1在Ⅰa期表达较Ⅰb期显著高(P=0.019);PGRMC1表达与子宫内膜癌组织中ER表达水平相关(P=0.015),但与分化程度、淋巴结转移及脉管癌栓无关,与PR、p53、Ki-67及bcl-2表达亦无显著相关性;20μM Ag205显著抑制三种子宫内膜癌细胞的增殖活力,其中以KLE细胞的抑制作用最明显,从最低浓度(5μM)即出现抑制效应,并随浓度增加抑制作用逐步增强。结论:子宫内膜癌内膜中PGRMC1表达显著增高;增高的PGRMC1参与调控子宫内膜癌细胞的增殖活性。 展开更多
关键词 子宫内 孕激素受体成分1 增殖活力 蛋白质免疫印迹法
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孕激素受体膜组分1促进雌孕激素诱导的乳腺癌细胞增生的研究——雌二醇与周期序贯及连续联合比较 被引量:2
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作者 李雪 阮祥燕 +3 位作者 谷牧青 蔡桂举 赵越 Alfred O.Mueck 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第2期237-243,共7页
目的研究孕激素受体膜组分1 (progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)对激素诱导的乳腺癌细胞的促增生作用,采用单用雌二醇(estradiol,E2)/周期序贯(sequential combination)/连续联合(continuous combination)不同的治疗... 目的研究孕激素受体膜组分1 (progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)对激素诱导的乳腺癌细胞的促增生作用,采用单用雌二醇(estradiol,E2)/周期序贯(sequential combination)/连续联合(continuous combination)不同的治疗方案,观察其对乳腺癌细胞增生的影响。方法采用脂质体转染法将T47D稳定转染后,对转染空质粒(T47D-HA-vector)或转染PGRMC1(T47D-HA-PGRMC1)的T47D乳腺癌细胞系,分别用E2(0. 1、0. 01、0. 001 nmol/L),或周期序贯/连续联合方案刺激6 d后,采用CCK-2法检测乳腺癌细胞的增生。结果单用E2(0. 1、0. 01、0. 001 nmol/L),T47D-HA-vector细胞未出现明显增生(P> 0. 05),T47D-HA-PGRMC1在E2浓度为0. 1 nmol/L时与对照组(56%,P <0. 05)及与T47D-HA-vector(36%,P <0. 05)比均出现明显增加的细胞增生;周期序贯方案,T47D-HA-PGRMC1在E2/炔诺酮(norethisterone,NET)(E2=0. 001 nmol/L)刺激时与对照组(82%,P <0. 05)及与T47D-HA-vector(63%,P <0. 05)比均显著地促进细胞增生。T47D-HA-vector在E2/NET(E2=0. 1nmol/L)刺激时与对照组相比显著地促进细胞增生(37%,P <0. 05),T47D-HA-PGRMC1在E2/屈螺酮(drospirenone,DRSP)或E2/NET(E2=0. 1 nmol/L)刺激时与对照组(105%,170%,P <0. 05)及与T47D-HA-vector(84%,133%,P <0. 05)比均显著地促进细胞增生;采用连续联合方案时,T47D-HA-PGRMC1在E2/DRSP或E2/NET(E2=0. 001 nmol/L)刺激时与对照组(77%,158%,P <0. 05)及与T47D-HA-vector(60%,136%,P <0. 05)比均显著地促进细胞增生。T47D-HA-vector在E2/NET(E2=0. 1nmol/L)刺激时与对照组相比显著地促进细胞增生(44%,P <0. 05),T47D-HA-PGRMC1在E2/DRSP或E2/NET(E2=0. 1 nmol/L)刺激时与对照组(129%,174%,P <0. 05)及与T47D-HA-vector(97%,131%,P <0. 05)比均显著地促进细胞增生。结论PGRMC1能够明显促进周期序贯/连续联合方案诱导的乳腺癌增生,与周期序贯方案相比,连续联合方案对T47D增生的促进作用更加明显。 展开更多
关键词 研究孕激素受体组分1 周期序贯方案 连续联合方案 乳腺癌 细胞增生
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孕激素受体膜组分1在乳腺癌发生机制中作用的研究进展 被引量:3
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作者 张颖 阮祥燕 Alfred O.Mueck 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第4期583-587,共5页
乳腺癌是导致女性死亡的主要癌症之一,但目前为止关于乳腺癌的发生机制尚未完全明确。唯一一项全球大型安慰剂对照研究,妇女健康启动项目(Women’s Health Initiative,WHI)指出,雌孕激素联合治疗组乳腺癌风险增高,单一雌激素治疗组妇女... 乳腺癌是导致女性死亡的主要癌症之一,但目前为止关于乳腺癌的发生机制尚未完全明确。唯一一项全球大型安慰剂对照研究,妇女健康启动项目(Women’s Health Initiative,WHI)指出,雌孕激素联合治疗组乳腺癌风险增高,单一雌激素治疗组妇女的乳腺癌风险没有增加,反而有降低,说明在激素补充治疗(hormone replacement therapy,HRT)治疗中孕激素对乳腺癌风险具有负面影响。针对此结论开展了很多体外研究,发现雌孕激素联合治疗可以明显促进孕激素受体膜组分1(progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)表达阳性的乳腺癌细胞的增生。针对此结论,北美绝经学会官方科学杂志Menopause对此给予特别的编者按:"WHI研究中雌孕激素联合治疗组妇女乳腺癌风险增加是否可以用PGRMC1的作用来解释?PGRMC1是否可以作为一个乳腺癌风险潜在的标志物?PGRMC1高表达者是否可确定为乳腺癌易感者?"本文将就此方面的研究进行综述。 展开更多
关键词 孕激素受体组分1 乳腺癌 激素受体 孕激素受体
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孕激素受体膜组分1对激素诱导下乳腺癌增殖影响的实验研究 被引量:5
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作者 赵越 程姣姣 《中国医药导报》 CAS 2019年第34期11-14,F0004,共5页
目的探讨孕激素受体膜组分1(PGRMC1)对激素诱导下乳腺癌增殖的影响。方法在体外研究基础上,选取BALB/c-nu雌性裸鼠36只,依据随机数字表法将其分为稳定表达PGRMC1(T47D/HA-PGRMC1)组和表达空质粒(T47D/HA-Vector)组,每组18只。细胞注射前... 目的探讨孕激素受体膜组分1(PGRMC1)对激素诱导下乳腺癌增殖的影响。方法在体外研究基础上,选取BALB/c-nu雌性裸鼠36只,依据随机数字表法将其分为稳定表达PGRMC1(T47D/HA-PGRMC1)组和表达空质粒(T47D/HA-Vector)组,每组18只。细胞注射前24 h,所有裸鼠颈部皮下包埋雌二醇(E2)缓释片,然后两组分别接种含T47D/HA-PGRMC1和T47D/HA-Vector的DMEM-F12培养液150μL/只,待肿瘤生长至100 mm^3左右时,将两组组内分为3个亚组,每个亚组6只,分别皮下包埋缓释片包括安慰剂(placebo)、炔诺酮(NET)、黄体酮(progesterone)即E2+placebo亚组、E2+progesterone亚组、E2+NET亚组。连续观察并记录肿瘤增殖情况,绘制肿瘤生长曲线。45 d后完整摘除肿瘤组织,免疫组化检测荷瘤体中PGRMC1与Ki-67表达情况。结果与T47D/HA-Vector组比较,T47D/HA-PGRMC1组瘤体增加了36%。T47D/HA-PGRMC1组中,与E2+placebo亚组比较,E2+NET亚组明显促进肿瘤生长,差异有高度统计学意义(P<0.01)。而E2+progesterone亚组与E2+placebo亚组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。T47D/HA-Vector组:E2+placebo亚组、E2+NET亚组、E2+progesterone亚组比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。T47D/HA-PGRMC1组中,E2+NET亚组Ki-67呈阳性表达,三亚组间PGRMC1、Ki-67表达量比较,差异有高度统计学意义(P<0.01)。E2+NET亚组中PGRMC1、Ki-67表达量显著高于E2+Placebo亚组和E2+progesterone亚组,差异均有统计学意义(均P<0.05);E2+placebo亚组和E2+progesterone亚组中PGRMC1、Ki-67表达量比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。T47D/HA-Vector组:三亚组间PGRMC1、Ki-67表达量比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。免疫组化结果提示PGRMC1与Ki-67表达呈正相关(r=0.839,P=0.002)。结论裸鼠体内实验中首次发现过表达PGRMC1在E2+NET刺激下可明显增加裸鼠肿瘤生长,而E2+progesterone并没有促进额外增殖,与体外实验结果一致。 展开更多
关键词 孕激素受体组分1 乳腺癌 黄体酮 炔诺酮
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孕激素膜受体的研究进展 被引量:3
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作者 王玉 杨清 《国外医学(计划生育.生殖健康分册)》 2006年第1期31-34,共4页
传统的观点认为孕激素受体(PR)位于细胞质与细胞核中,作为转录调节因子发挥经典的基因作用。近年来,大量研究表明在许多组织的细胞膜表面存在着孕激素膜受体(mPR),对mPR的克隆发现其结构与G蛋白偶联受体(GPCR)相似。mPR将细胞外的信号... 传统的观点认为孕激素受体(PR)位于细胞质与细胞核中,作为转录调节因子发挥经典的基因作用。近年来,大量研究表明在许多组织的细胞膜表面存在着孕激素膜受体(mPR),对mPR的克隆发现其结构与G蛋白偶联受体(GPCR)相似。mPR将细胞外的信号传导至细胞膜,通过信号转导通路在细胞内诱发快速的非基因作用,这种作用在卵母细胞的成熟及精子受精过程中具有重要意义。 展开更多
关键词 孕激素受体 非基因作用 G蛋白偶联受体 信号转导
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他莫昔芬治疗转染孕激素受体膜组分1乳腺癌裸鼠模型对乳腺肿瘤组织Ki-67表达的影响 被引量:4
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作者 张凌燕 阮祥燕 +2 位作者 蔡桂举 谷牧青 Alfred O.Mueck 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第4期533-538,共6页
目的探讨他莫昔芬(tamoxifen,TAM)对转染孕激素受体膜组分1 (progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)乳腺癌模型MCF-7乳腺肿瘤组织增生指数Ki-67表达的影响及其作用机制。方法乳腺癌MCF-7细胞进行培养、孵育及传代后转染含... 目的探讨他莫昔芬(tamoxifen,TAM)对转染孕激素受体膜组分1 (progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)乳腺癌模型MCF-7乳腺肿瘤组织增生指数Ki-67表达的影响及其作用机制。方法乳腺癌MCF-7细胞进行培养、孵育及传代后转染含有PGRMC1(MCF-7-HA-PGRMC1)或空质粒(MCF-7-HA-vector),去势小鼠(共48只)包埋雌激素(estradiol,E2)缓释片48 h后,然后分别将以上两种细胞接种至裸鼠,作为实验组及对照组。每组再分别用安慰剂、黄体酮、他莫昔芬、他莫昔芬联合黄体酮处理,种瘤56 d后实施安乐死,无菌操作下完整摘除肿瘤组织,免疫组织化学法检测荷瘤体中Ki-67表达情况。结果实验组肿瘤组织中Ki-67表达较对照组升高(P<0.001),差异有统计学意义;实验组中,与单独E2相比,E2+TAM可降低肿瘤组织中Ki-67的表达,差异有统计学意义(P<0.001);而E2+黄体酮并未促进Ki-67的表达(P>0.05)。与E2相比,E2+黄体酮+TAM组肿瘤组织中Ki-67的表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.001)。结论 PGRMC1可增加Ki-67表达、加快细胞增生,他莫昔芬治疗后可通过降低Ki-67表达拮抗PGRMC1导致的乳腺肿瘤细胞增生。 展开更多
关键词 他莫昔芬 孕激素受体组分1 乳腺癌模型 Ki-67
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孕激素膜受体1在40例卵巢癌中的表达及意义 被引量:2
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作者 任峻青 郑洪 《贵州医药》 CAS 2015年第4期308-309,共2页
近年来发现孕激素膜受体1(PGRMC1)是一种新型膜激素受体,广泛存在于细胞膜、微粒体及突触膜上。PGRMC1是作为一种接头蛋白并参与细胞信号转导通路,与肿瘤细胞增殖,侵袭密切相关。PGRMC1在乳腺癌、结肠癌、卵巢癌和肺癌等多种肿瘤细胞... 近年来发现孕激素膜受体1(PGRMC1)是一种新型膜激素受体,广泛存在于细胞膜、微粒体及突触膜上。PGRMC1是作为一种接头蛋白并参与细胞信号转导通路,与肿瘤细胞增殖,侵袭密切相关。PGRMC1在乳腺癌、结肠癌、卵巢癌和肺癌等多种肿瘤细胞和肿瘤组织系中高表达,表明PGRMC1促进肿瘤的生存和发展。目前关于PGRMC1在卵巢癌发生、发展过程中作用少有报道, 展开更多
关键词 孕激素受体1 卵巢癌
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孕激素受体膜组分1在绝经后激素治疗中乳腺癌风险预测的研究进展 被引量:4
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作者 蔡桂举 阮祥燕 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第13期1769-1773,共5页
乳腺癌是全世界女性常见和多发的恶性肿瘤之一,是导致女性死亡最主要的病因之一,相关肿瘤标志物及治疗靶点已成为研究热点。绝经后激素治疗(menopause hormone therapy,MHT)是防治绝经相关症状及绝经相关慢性病最有效的方法,但有增加乳... 乳腺癌是全世界女性常见和多发的恶性肿瘤之一,是导致女性死亡最主要的病因之一,相关肿瘤标志物及治疗靶点已成为研究热点。绝经后激素治疗(menopause hormone therapy,MHT)是防治绝经相关症状及绝经相关慢性病最有效的方法,但有增加乳腺癌风险的可能,其机制尚不清楚。妇女健康启动项目(Women′s Health Initiative,WHI)研究10年随访结果显示,单一雌激素治疗组妇女的乳腺癌风险没有增加,反而有降低,雌孕激素联合治疗组乳腺癌风险增高。前期研究发现某些合成孕激素对孕激素受体膜组分1(PGRMC1)表达阳性的人乳腺癌细胞有明显促增殖作用,近期研究也发现,血液PGRMC1浓度在乳腺癌患者中升高。PGRMC1如能发展为激素治疗前常规筛查的乳腺癌风险标志物将有重要意义。PGRMC1是否可以作为激素治疗中乳腺癌易感者的潜在标志物,本文就此方面的研究进行综述。 展开更多
关键词 孕激素受体组分1 绝经后激素治疗 乳腺癌 激素 孕激素
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