变异链球菌自溶素研究新进展 被引量：1

1

作者 韩耀伦 郝玉庆 《国际口腔医学杂志》 CAS 2008年第S1期53-55,共3页

自溶素是细菌自身产生的可降解细菌细胞壁的蛋白水解酶,与细菌细胞分裂、生物膜形成、表面黏附、遗传感受态和细胞壁更新有关。自溶素的活性受到严格调控。本文从变异链球菌自溶素的蛋白基因结构、自溶素功能及调控几个方面介绍变异链... 自溶素是细菌自身产生的可降解细菌细胞壁的蛋白水解酶,与细菌细胞分裂、生物膜形成、表面黏附、遗传感受态和细胞壁更新有关。自溶素的活性受到严格调控。本文从变异链球菌自溶素的蛋白基因结构、自溶素功能及调控几个方面介绍变异链球菌自溶素的研究现状。 展开更多

关键词 变异链球菌 自溶素结构 自溶素功能 自溶素调控

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肺炎链球菌自溶素基因的克隆、表达及蛋白纯化 被引量：3

2

作者 徐江红 陈兵 +2 位作者 章德广 郭建 顾凌澜 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期191-194,200,共5页

目的克隆肺炎链球菌自溶素(LytA)基因并在大肠埃希菌中表达及蛋白纯化。方法用PCR方法从肺炎链球菌基因组中克隆肺炎链球菌自溶素基因,然后将其插入原核表达载体pET32a(+),构建pET32a(+)-LytA重组质粒,经IPTG诱导使该基因在大肠埃希菌BL... 目的克隆肺炎链球菌自溶素(LytA)基因并在大肠埃希菌中表达及蛋白纯化。方法用PCR方法从肺炎链球菌基因组中克隆肺炎链球菌自溶素基因,然后将其插入原核表达载体pET32a(+),构建pET32a(+)-LytA重组质粒,经IPTG诱导使该基因在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,亲和层析法纯化目的蛋白,将获得的蛋白用Western blot鉴定。结果扩增出的DNA序列与GenBank中的LytA基因序列一致,成功构建了pET32a(+)-LytA重组质粒并在大肠埃希菌中高效表达,所表达的蛋白经Western blot证实为肺炎链球菌自溶素融合蛋白。结论成功克隆了肺炎链球菌自溶素基因,并将其在大肠埃希菌中表达、纯化,为新型肺炎链球菌疫苗的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 自溶素基因 克隆和表达

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单核细胞增生性李斯特菌自溶素研究进展 被引量：2

3

作者 崔焕忠 张辉 +2 位作者 范译文 康倩 钱爱东 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第11期290-293,共4页

自溶素是由细菌产生的可以降解细菌细胞壁的肽聚糖水解酶,参与细菌的分裂、细胞壁更新、细菌自溶等生理过程。自溶素也是细菌的重要毒力因子之一,参与细菌的黏附与侵袭,与细菌的致病性密切相关。本文对单核细胞增生性李斯特菌的胞壁水解... 自溶素是由细菌产生的可以降解细菌细胞壁的肽聚糖水解酶,参与细菌的分裂、细胞壁更新、细菌自溶等生理过程。自溶素也是细菌的重要毒力因子之一,参与细菌的黏附与侵袭,与细菌的致病性密切相关。本文对单核细胞增生性李斯特菌的胞壁水解酶p60、酰胺酶Ami、自溶素IspC、自溶素Auto与胞壁水解酶MurA等自溶素的蛋白结构、生理功能及致病性进行了简要介绍。 展开更多

关键词 单核细胞增生性李斯特菌 自溶素 研究进展

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猪链球菌2型新的感染相关因子自溶素的鉴定与分析 被引量：4

4

作者 顾宏伟 陆承平 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期68-72,共5页

根据Sanger研究所公布的猪链球菌2型(SS2)P1/7株的自溶素序列,设计检测引物,取SS2我国2次流行株、其它临床分离株和参考株,及猪链球菌1型、1/2型、7型和9型,共33株,分别以其DNA为模板,PCR扩增。结果表明,SS2除无毒株T15阴性外,其他临床... 根据Sanger研究所公布的猪链球菌2型(SS2)P1/7株的自溶素序列,设计检测引物,取SS2我国2次流行株、其它临床分离株和参考株,及猪链球菌1型、1/2型、7型和9型,共33株,分别以其DNA为模板,PCR扩增。结果表明,SS2除无毒株T15阴性外,其他临床分离株27株(含人源2株)均阳性;其它猪链球菌为,SS7阳性,SS1、SS1/2和SS9均阴性。同时设计引物向两侧扩增,以四川流行株ZY05719和江苏流行株HA9801的DNA为模板,扩增自溶素ORF完整的编码基因,软件分析结果显示,该基因含有6个重复的"GBS_Bsp-like"域和1个"N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酸酰胺酶"域,与SS2欧洲株有较高同源性(99.8%),但与SS2加拿大株差异较大。在DNASTAR分析所编码蛋白的抗原性的基础上,另设计引物,以ZY05719株DNA为模板,PCR扩增具有良好免疫原性的片段基因,并定向克隆至表达载体pET30a(+)中,进行重组表达,SDS-PAGE和Western blot表明,所获得重组自溶素具有良好反应原性。 展开更多

关键词 猪链球菌2型 感染相关因子 自溶素

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肺炎链球菌自溶素LytA小片段免疫活性的研究 被引量：1

5

作者 邹琴 杨光 +2 位作者 罗红 宫晓红 孙文平 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第3期52-55,共4页

通过对肺炎链球菌（ATCC49619）自溶素lytA全序列基因的克隆和表达，获得部分小片段蛋白，初步研究其免疫活性。根据GenBank中肺炎链球菌M66菌株lytA基因序列（FN549899.1）设计合成特异性引物，采用PCR技术从肺炎链球菌（ATCC49619）... 通过对肺炎链球菌（ATCC49619）自溶素lytA全序列基因的克隆和表达，获得部分小片段蛋白，初步研究其免疫活性。根据GenBank中肺炎链球菌M66菌株lytA基因序列（FN549899.1）设计合成特异性引物，采用PCR技术从肺炎链球菌（ATCC49619）基因组中扩增lytA全序列片段，构建克隆载体PGM T/lytA, 测序后与M66菌株比对显示，肺炎链球菌ATCC49619株碱基序列内存在新酶切位点BamHⅠ。以BamHⅠ、HindⅢ双酶切后，目的基因出现2个小片度，以约500 bp小片段构建重组表达载体pET32a（＋）/lytA′，经IPTG诱导后等电点洗脱法获取纯化的目的蛋白LytA′。将LytA′免疫小鼠，测定抗体效价，同时进行Western blot鉴定。测序显示肺炎链球菌ATCC49619菌株与M66菌株的lytA全基因序列同源性为98%，具有高度保守性，碱基不同主要位于下游部分，在444～450 bp之间新出现BamHⅠ酶切位点。构建的小片段重组表达质粒pET32a（＋）/lytA′在BL21（DE3）中高效表达，获得纯化蛋白LytA′，免疫BALB/c小鼠产生的抗体效价为1：32，经Western blot证实该蛋白具有较好的抗体结合活性，为进一步应用于疫苗及药物等相关研究奠定基础。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 自溶素 酶切 免疫活性

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肺炎链球菌自溶素和溶血素基因的PCR法鉴定 被引量：3

6

作者 杨永红 朱保权 +3 位作者 宁淑敏 安真光 王棣 王兴民 《微生物学免疫学进展》 2000年第2期49-53,共5页

肺炎链球菌是一种致病率和致死率很高的病原菌 ,若无丰富临床检测经验从临床标准中分离鉴定此菌较困难 ,本实验以寡核苷酸引物YH1 YH2、YH7 YH8分别扩增肺炎链球菌自溶素和溶血素基因的 35 4bp和 30 7bp的DNA片段 ,通过改变各种反应条... 肺炎链球菌是一种致病率和致死率很高的病原菌 ,若无丰富临床检测经验从临床标准中分离鉴定此菌较困难 ,本实验以寡核苷酸引物YH1 YH2、YH7 YH8分别扩增肺炎链球菌自溶素和溶血素基因的 35 4bp和 30 7bp的DNA片段 ,通过改变各种反应条件 ,建立了这两种病原因子基因的PCR检测方法。用此方法对 2 0株肺炎链球菌标准菌株及 7株对照菌株进行了鉴定 ;其扩增产物分别经限制性内切酶TthHB81和和AccI进行酶切以确认扩增产物是否正确 ;用酚 氯仿抽提纯化的全细胞DNA对PCR方法的检测灵敏度进行了测定 ;并利用此方法对 2 8份临床标本分离物进行了鉴定。结果　所有 2 0株肺炎链球菌均可分别用引物YH1 YH2、YH7 YH8扩增出 35 4bp和 30 7bp的DNA片段 ,而对照菌株均呈阴性 ;自溶素及溶血素基因的扩增产物分别经限制性内切酶TthHB81和AccI消化后产生的片段和预期的完全一致 ;两对产物均可从 10fg的全细胞DNA中扩增出目的DNA片段。所建立的两套PCR系统对 2 8份临床标本分离物进行鉴定 ,其中PCR阳性的 15份分离物经生化学特性检查被鉴定为肺炎链球菌。本试验所建立的两套PCR检测系统具有特异性强 ,灵敏度高及操作简单等优点 ,均可用于肺炎链球菌的鉴定。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 自溶素 溶血素 PC的鉴定 病原菌

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金黄色葡萄球菌酚溶调控蛋白α小肽敲除对自溶素AtlA蛋白表达的影响 被引量：1

7

作者 谭利 李思瑞 +4 位作者 姜北 张骁鹏 陈江 胡晓梅 黎庶 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第21期2066-2071,共6页

目的利用同源重组技术构建金黄色葡萄球菌Newman psmα基因缺失突变株,探究psmα缺失对金黄色葡萄球菌蛋白表达的影响。方法分别扩增psmα基因的上下游同源臂,根据同源重组原理,构建p BT2基因打靶载体,利用同源重组技术,构建psmα缺失的... 目的利用同源重组技术构建金黄色葡萄球菌Newman psmα基因缺失突变株,探究psmα缺失对金黄色葡萄球菌蛋白表达的影响。方法分别扩增psmα基因的上下游同源臂,根据同源重组原理,构建p BT2基因打靶载体,利用同源重组技术,构建psmα缺失的Newman突变株。并对野生株和突变株培养上清蛋白进行研究。结果突变株培养上清中一个相对分子质量约为135×103的蛋白表达水平较野生株明显减少甚至缺失;质谱分析提示该蛋白为金黄色葡萄球菌atl A基因编码的双功能自溶素前体蛋白(Atl A蛋白);实时荧光定量PCR结果显示psmα基因敲除株atl A基因的转录水平较野生株显著降低。结论 psmα缺失后能够降低atl A基因的转录表达水平。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 PSMα小肽 自溶素 ATL A蛋白

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自溶素(lytA)基因限制性片段长度多态性用于肺炎链球菌鉴定的实验研究 被引量：1

8

作者 温玉兰 陈会 +3 位作者 邓林强 胡锦辉 张国强 刘春风 《中国医药指南》 2013年第4期97-100,共4页

目的建立一种适用于临床的、操作简单的、高特异性的肺炎链球菌分子生物学鉴定技术。方法选取临床分离的肺炎链球菌102株及其他草绿色链球菌51株,分别采用OPT敏感试验、胆汁溶菌试验、商品化鉴定系统及自溶素基因片段长度多态性技术进... 目的建立一种适用于临床的、操作简单的、高特异性的肺炎链球菌分子生物学鉴定技术。方法选取临床分离的肺炎链球菌102株及其他草绿色链球菌51株,分别采用OPT敏感试验、胆汁溶菌试验、商品化鉴定系统及自溶素基因片段长度多态性技术进行鉴定。结果 102株肺炎链球菌中101株OPT抑菌环直径≥14mm,其中17株介于14～19mm之间,1株为OPT耐药肺炎链球菌,抑菌环仅6mm;102株胆汁溶菌试验结果均为阳性;自动化鉴定系统鉴定准确率为93.1%。51株草绿色链球菌中19株OPT出现抑菌环,其中7株抑菌环≥14mm;胆汁溶菌试验均为阴性。自溶素(lytA)基因限制性片段长度多态性对102株肺炎链球菌鉴定准确率为100%,且能完全区分其它草绿色链球菌。结论自溶素基因限制性片段长度多态性技术对肺炎链球菌鉴定具有很高的特异性和敏感性,临床可作为传统鉴定的方法学补充。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 自溶素 限制性片段长度多态性 鉴定

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肺炎链球菌自溶素研究进展 被引量：1

9

作者 邵致远 游雪甫 杨信怡 《中国医药生物技术》 2019年第3期245-248,262,共5页

肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)是一种革兰阳性(G+)条件致病菌,常定植于人鼻咽部,近一半健康人携带此菌[1]。当人体免疫力降低,定植的肺炎链球菌可穿透黏膜等防御体系引起多种感染。临床上,肺炎链球菌是导致社区获得性肺炎、脑... 肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)是一种革兰阳性(G+)条件致病菌,常定植于人鼻咽部,近一半健康人携带此菌[1]。当人体免疫力降低,定植的肺炎链球菌可穿透黏膜等防御体系引起多种感染。临床上,肺炎链球菌是导致社区获得性肺炎、脑膜炎、中耳炎等的重要病原之一。易感人群包括儿童、老年人,及伴有其他基础疾病(如肿瘤、红斑狼疮)的青壮年患者[2]。据报道,每年死于这类病原菌感染的人数与死于结核病的人数大体相当[3]。人体常见病原菌中,肺炎链球菌是少有的在生长进入稳定期后能观测到大量自溶的细菌[4]。与肺炎链球菌稳定期自溶现象直接相关的生物分子中,有一类称作自溶素(autolysin,Lyt)的蛋白最早引起人们关注。目前,在肺炎链球菌中已发现LytA、LytB、LytC三种自溶素,且生理功能各不相同。其中,肺炎链球菌所特有、自溶活性最强、研究最深入的是LytA[5-6]。本文重点围绕三种自溶素的结构、功能及部分应用有关的进展进行综述,为进一步揭示细菌自溶现象的生物学本质,并为相关领域研究工作提供参考。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 自溶素 病原菌感染 社区获得性肺炎 条件致病菌 人体免疫力 青壮年患者 常见病原菌

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猪链球菌自溶素的原核表达及其抗体间接ELISA检测方法的建立 被引量：1

10

作者 韩瑞 杨行 +2 位作者 张文波 陈佳玲 周晓丽 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第9期3508-3519,共12页

【目的】建立快速、准确检测猪链球菌自溶素(atl)抗体的间接ELISA方法。【方法】根据GenBank登录的猪链球菌atl基因序列设计1对引物,采用PCR方法从猪源链球菌中获得atl基因序列;构建pET-32a-atl和pGEX-4T-1-atl重组质粒,并将重组质粒转... 【目的】建立快速、准确检测猪链球菌自溶素(atl)抗体的间接ELISA方法。【方法】根据GenBank登录的猪链球菌atl基因序列设计1对引物,采用PCR方法从猪源链球菌中获得atl基因序列;构建pET-32a-atl和pGEX-4T-1-atl重组质粒,并将重组质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞中进行诱导表达;以表达纯化后的atl-His融合蛋白为免疫原,免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体;以兔多克隆抗体为一抗,用Western blotting方法检测atl-GST融合蛋白的反应原性;以纯化后的atl-GST融合蛋白为包被抗原,猪链球菌感染阳性血清作为标准血清,建立猪链球菌自溶素抗体的间接ELISA检测方法。利用本试验建立的ELISA方法与商用猪链球菌2型ELISA抗体检测试剂盒同时对184份血清样品进行检测并用本试验建立的方法进行临床样品检测。【结果】从猪链球菌中成功扩增出atl基因;构建的重组质粒,经诱导表达和纯化,获得大小为40 ku的atl-His和48 ku的atl-GST融合蛋白;经Western blotting验证,兔抗atl-His抗血清与atl-GST融合蛋白具有良好的反应原性;间接ELISA结果显示,该检测方法的阴阳临界值为0.318,阳性血清稀释至1∶1 280检测仍为阳性;批内批间变异系数均<10%,表明该方法具有良好的重复性及敏感性。本试验所建立的ELISA方法检测出96份阳性样品,商用猪链球菌2型ELISA抗体检测试剂盒检测出66份阳性样品,符合率为71.7%。应用建立的方法检测458份不同饲养阶段的猪血清样品,其中检出277份阳性样品,阳性率为60.4%。【结论】本试验成功建立了检测猪链球菌自溶素抗体的间接ELISA方法并进行了初步应用,为猪链球菌病血清流行病学调查奠定了基础。 展开更多

关键词 猪链球菌 自溶素 诱导表达 间接ELISA

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细菌自溶素的研究进展 被引量：2

11

作者 刘申 《中国实用医药》 2009年第12期226-228,共3页

细菌自溶素参与细菌很多重要的生理活动,如细胞分裂、孢子形成等。综述了自溶素参与的细菌生理功能、调控网络,及其在病原菌检测、新型抗菌制剂开发等方面的应用。

关键词 自溶素 细胞壁 新型抗菌制剂

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肺炎链球菌自溶素对感染性肺炎的诊断价值 被引量：9

12

作者 邹琴 孙文平 +2 位作者 杨光 周杰 罗红 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第21期4801-4804,共4页

目的通过基因原核表达技术获取肺炎链球菌自溶素LytA重组蛋白(rLytA),探讨其对感染性肺炎患者的血清学诊断价值。方法根据Genbank中肺炎链球菌M66菌株lytA基因序列(FN549899.1)设计合成特异性引物;采用PCR技术以肺炎链球菌基因组DNA为... 目的通过基因原核表达技术获取肺炎链球菌自溶素LytA重组蛋白(rLytA),探讨其对感染性肺炎患者的血清学诊断价值。方法根据Genbank中肺炎链球菌M66菌株lytA基因序列(FN549899.1)设计合成特异性引物;采用PCR技术以肺炎链球菌基因组DNA为模板扩增lytA基因序列;构建重组表达质粒pET32a(+)/lytA,经由IPTG诱导后通过等电点洗脱方法获取纯化的重组蛋白LytA;Western blot测定表达蛋白的抗体结合活性;以rLytA为抗原,建立ELISA反应模式,测定2013年3-6月36例临床诊断为CAP并经细菌学确定的患者血清标本中相应IgG和IgM抗体,评价对肺炎链球菌感染性肺炎的诊断价值。结果成功构建原核表达质粒pET32a(+)/lytA,表达的rLytA具有较好的抗体结合活性;CAP患者血清IgM和IgG类抗LytA的抗体滴度均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其诊断的敏感性均高于常规的痰培养和血培养(P<0.01)。结论以重组蛋白LytA为抗原建立ELISA反应模式可用于肺炎链球菌感染的血清学诊断,快速、客观,具有一定的应用价值。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 自溶素 原核表达 酶联免疫吸附试验

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肺炎链球菌自溶素LytA研究进展 被引量：5

13

作者 邹琴 罗红 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第1期88-91,共4页

自溶素是一种内源性酶,广泛存在于细菌表面,参与细菌分裂、细胞黏附、细菌自溶以及细胞壁的更新等重要生理活动。本文对肺炎链球菌自溶素LytA结构、功能、调控及应用研究现状进行了综述。

关键词 肺炎链球菌 自溶素 抗菌药 综述

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葡萄球菌自溶素的研究进展 被引量：4

14

作者 邓燕燕 罗红 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2011年第3期272-273,276,共3页

葡萄球菌是人和动物皮肤黏膜的专性寄生菌，目前临床常见的致病菌种主要有金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌。金黄色葡萄球菌可引起局部化脓感染，也可引起败血症、脓毒血症等全身感染。表皮葡萄球菌主要引起心内膜炎、败血症等，

关键词 葡萄球菌属 自溶素 耐药性 抗菌药

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肺炎链球菌自溶素基因的克隆表达及免疫印迹检测

15

作者 王艳华 田国忠 +1 位作者 高源 俞东征 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1299-1301,共3页

肺炎链球菌（streptococcus pneumoniae）可引起肺炎、脑膜炎、中耳炎、鼻窦炎及菌血症等多种严重疾病。肺炎链球菌引起的疾病在2岁以下儿童和65岁以上老年人中发病率最高。肺炎链球菌的主要致病因子除荚膜外，自溶素（autolysins）也... 肺炎链球菌（streptococcus pneumoniae）可引起肺炎、脑膜炎、中耳炎、鼻窦炎及菌血症等多种严重疾病。肺炎链球菌引起的疾病在2岁以下儿童和65岁以上老年人中发病率最高。肺炎链球菌的主要致病因子除荚膜外，自溶素（autolysins）也是其中一种重要的致病因子。肺炎链球菌最重要的自溶素，是N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酸酰胺酶，是一种能够水解细菌细胞壁的共价结合物的酶。细菌发生自溶后，释放的细胞壁组分可以使某些动物发生严重的炎症反应， 展开更多

关键词 肺炎链球菌 自溶素 免疫印迹检测 克隆表达 细菌细胞壁 基因 致病因子 L-丙氨酸

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单核细胞增生李斯特菌自溶素的功能与调控 被引量：1

16

作者 李唤弟 李素芳 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期964-969,共6页

单核细胞增生李斯特菌（ Listeria monocytogenes）是一种在环境中普遍存在的革兰氏阳性菌，无芽孢结构、兼性厌氧，能引起人和动物严重的食源性感染。食用被该菌污染的食物后，病原菌可经胃到达小肠，若突破肠屏障，可引起发热性肠胃... 单核细胞增生李斯特菌（ Listeria monocytogenes）是一种在环境中普遍存在的革兰氏阳性菌，无芽孢结构、兼性厌氧，能引起人和动物严重的食源性感染。食用被该菌污染的食物后，病原菌可经胃到达小肠，若突破肠屏障，可引起发热性肠胃炎，患者或携带者的排泄物经土壤又可能再次污染食物。若病原菌转移至肝脏，可引发隐形肝炎。对免疫功能低下或不全的个体，还可能导致败血症、脑膜炎及孕妇流产等病症，其致死率高达30％～40％［1］。自溶素（ autolysin ）是一类能够降解细菌自身细胞壁的肽聚糖水解酶，在细菌中普遍存在［2］。自溶素与细菌的多种生物学功能有关，如降解细胞壁、促使细胞分离及调节细胞壁更新。在感染宿主时自溶素可以协助细菌黏附并入侵宿主细胞，影响细菌在胞内及胞间的扩散力并诱导免疫细胞产生细胞因子。自溶素的生物学功能还体现在生物膜、鞭毛及孢子形成、遗传转化能力、蛋白分泌及自我溶解等方面，与细菌的致病力密切相关［1，3］。本文就自溶素的结构、基因功能和调控机制进行综述，旨在为自溶素功能研究提供参考。 展开更多

关键词 单核细胞增生李斯特菌 自溶素 调控 细菌黏附 食源性感染 生物学功能 革兰氏阳性菌 免疫功能低下

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肺炎链球菌自溶素与自溶相关性研究进展 被引量：1

17

作者 谢兴凤 罗红 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第12期I0002-I0004,F0003,共4页

自溶素是由细菌本身产生的能够水解细菌细胞壁的内源性蛋白水解酶,是一种共价结合物,参与细菌许多重要的生理活动。本文主要介绍了肺炎链球菌自溶素LytA、自溶素参与的生物学效应、自溶素的致病机理、自溶素与自溶的关系及其在新型抗菌... 自溶素是由细菌本身产生的能够水解细菌细胞壁的内源性蛋白水解酶,是一种共价结合物,参与细菌许多重要的生理活动。本文主要介绍了肺炎链球菌自溶素LytA、自溶素参与的生物学效应、自溶素的致病机理、自溶素与自溶的关系及其在新型抗菌药物方面的开发应用等内容。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 自溶素 自溶 综述

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肺炎链球菌小片段自溶素蛋白LytA′的体外抗菌活性探讨 被引量：1

18

作者 谢兴凤 罗红 +1 位作者 蒋久怡 任艳 《中国热带医学》 CAS 2022年第2期148-152,共5页

目的构建肺炎链球菌(ATCC49619)小片段自溶素基因lytA′的原核表达载体,通过大肠埃希菌表达系统进行原核表达获得一种新型肺炎链球菌小片段自溶素重组蛋白LytA′,初步探讨该蛋白的体外抗菌活性,并与青霉素G同时进行比较。方法设计lytA... 目的构建肺炎链球菌(ATCC49619)小片段自溶素基因lytA′的原核表达载体,通过大肠埃希菌表达系统进行原核表达获得一种新型肺炎链球菌小片段自溶素重组蛋白LytA′,初步探讨该蛋白的体外抗菌活性,并与青霉素G同时进行比较。方法设计lytA基因的特异性引物,并通过PCR方法从肺炎链球菌(ATCC49619)中扩增lytA基因,并将其插入原核表达载体PGM-T中,构建PGM-T/lytA重组质粒,使用限制性核酸内切酶BamHⅠ和HindⅢ消化PGM-T/lytA获得小片段自溶素基因lytA′。再构建表达质粒pET-32a(+)/lytA′并转化到感受态细胞大肠埃希菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达目的蛋白,使用透析袋等电点洗脱技术纯化回收目的蛋白LytA′;采用微量肉汤稀释法分别测定LytA′和青霉素G对肺炎链球菌(ATCC49619)的最小抑菌浓度(MIC),并将其作用于青霉素G敏感菌株肺炎链球菌(ATCC49619),初步探讨小片段自溶素蛋白LytA′的体外抗菌活性。结果成功构建重组质粒PGM-T/lytA和pET-32a(+)/lytA′。小片段自溶素重组蛋白表达良好,并显示出预期的抗菌活性。与生长对照组相比,LytA′和青霉素G在3 h时显示出明显的抗菌活性(t=14.2430,P<0.0110;t=7.4000,P<0.0220),抑菌效应持续至7 h(t=20.8380,P<0.0080;t=17.8890,P<0.0170),抑菌效应逐渐增强。此外,在7 h时,LytA′的抑菌活性明显强于青霉素G(t=6.7640,P<0.0270)。结论小片段自溶素重组蛋白LytA′对青霉素G敏感肺炎链球菌显示出一定的体外抑菌活性,且持续时间久,有成为抗肺炎链球菌感染治疗药物的可能性。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 自溶素蛋白 抗菌活性

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肺炎链球菌lytA和ply基因PCR方法检测 被引量：3

19

作者 王艳华 张砺 +1 位作者 李学春 海荣 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期478-479,共2页

肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae,S.p）在世界范围内仍然是一种重要的病原体,可引起肺炎、脑膜炎、中耳炎、鼻窦炎及菌血症等多种严重疾病〔1-2〕。为了及时准确地检测出疑似病例是否为肺炎链球菌感染,需要有灵敏特异的检测方法... 肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae,S.p）在世界范围内仍然是一种重要的病原体,可引起肺炎、脑膜炎、中耳炎、鼻窦炎及菌血症等多种严重疾病〔1-2〕。为了及时准确地检测出疑似病例是否为肺炎链球菌感染,需要有灵敏特异的检测方法。虽然从样本中分离到肺炎链球菌被公认为是金标准,但实际在肺炎链球菌性肺炎的成人病例中, 展开更多

关键词 肺炎链球菌 自溶素 溶血素 PCR

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金黄色葡萄球菌重组蛋白AtlG体外抗菌效应探讨 被引量：1

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作者 王运铎 邓燕燕 +2 位作者 罗红 孙文平 杨光 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期2521-2523,共3页

目的通过基因原核表达技术获取金黄色葡萄球菌(ATCC25923)自溶素片段AtlG重组蛋白,初步探讨其体外抗菌效应。方法根据GenBank中的atlG基因序列设计合成特异引物,采用PCR技术以金黄色葡萄球菌的基因组为模板扩增相应atlG基因序列;分别构... 目的通过基因原核表达技术获取金黄色葡萄球菌(ATCC25923)自溶素片段AtlG重组蛋白,初步探讨其体外抗菌效应。方法根据GenBank中的atlG基因序列设计合成特异引物,采用PCR技术以金黄色葡萄球菌的基因组为模板扩增相应atlG基因序列;分别构建克隆载体PMD19-T-atlG和表达载体pET-32а(+)/atlG;构建的表达载体经由IPTG诱导后通过等电点洗脱技术获取纯化的重组蛋白AtlG;采用微量肉汤稀释法测定AtlG对金黄色葡萄球菌及其苯唑西林耐药株的最低抑菌浓度(MIC),动态测定金黄色葡萄球菌及其耐药株对AtlG的药物敏感性,初步探讨重组蛋白AtlG的体外抗菌活性。结果成功构建了原核表达载体pET-32а(+)/atlG,表达的重组蛋白AtlG对金黄色葡萄球菌标准株和苯唑西林耐药株的MIC分别为16μg/ml和64μg/ml;相比于未加药物的对照组,rAtlG对标准株作用1h后细菌数显著降低(P=0.045),抑菌效果持续到5h测定点(P=0.006);对苯唑西林耐药株作用3h后显示出抑菌效果(P=0.003),5h后与对照组相比差异无统计学意义。结论 50μg/ml的rAtlG对金黄色葡萄球菌标准株抑菌作用发生快、持续时间长,对苯唑西林耐药株也有一定的抑菌作用,具有作为抗菌药物的可能性。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 自溶素 抗菌药物 最低抑菌浓度

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