目的:建立快速检测致病性小肠结肠炎耶尔森菌的多重PCR方法。方法:利用小肠结肠炎耶尔森菌的ail毒力基因以及该菌属的保守序列16 s rRNA基因,设计针对致病性小肠结肠炎耶尔森菌的PCR引物,进行多重PCR扩增。并对退火温度、Mg2+浓度以及...目的:建立快速检测致病性小肠结肠炎耶尔森菌的多重PCR方法。方法:利用小肠结肠炎耶尔森菌的ail毒力基因以及该菌属的保守序列16 s rRNA基因,设计针对致病性小肠结肠炎耶尔森菌的PCR引物,进行多重PCR扩增。并对退火温度、Mg2+浓度以及引物浓度等扩增条件进行优化。结果:研究证实本次多重PCR用于检测致病性小肠结肠炎耶尔森菌具有较高的特异性(100%)和敏感性(检测下限为102cfu/ml)。经过多次实验比较,PCR反应的退火温度为62℃,Mg2+浓度为2.5 mmol/L,引物A il和Yer浓度分别为200 nmol/L、100 nmol/L。结论:多重PCR较传统鉴定方法省时省力,对于监测小肠结肠炎耶尔森菌有重要意义。展开更多
