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我国猪群中多杀性巴氏杆菌的基因型分析 被引量：15
1
作者 彭忠 梁婉 +5 位作者 艾伟诚 王斐 华琳 汤细彪 陈焕春 吴斌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1064-1072,共9页
本研究旨在了解我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌(Pm)的主要基因型。利用荚膜基因分型、脂多糖(LPS)基因分型、多位点序列分型(MLST)对2013年12月—2017年12月4年间来源于我国各地区规模化猪场患有疑似呼吸系统疾病的病死猪肺、鼻拭子、... 本研究旨在了解我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌(Pm)的主要基因型。利用荚膜基因分型、脂多糖(LPS)基因分型、多位点序列分型(MLST)对2013年12月—2017年12月4年间来源于我国各地区规模化猪场患有疑似呼吸系统疾病的病死猪肺、鼻拭子、气管、肝等样品中分离鉴定的Pm进行基因型分析,并对23种主要毒力基因进行检测。结果表明,当前在我国猪群中流行的Pm的荚膜基因型为A(48.85%)、D(42.75%)、F(2.67%),优势基因型为A和D;LPS基因型为L3(25.00%)和L6(75.00%)型,优势基因型为L6;MLST基因型为ST3(21.25%)、ST10(27.50%)、ST11(42.50%)、ST12(2.50%)、ST16(2.50%)、ST74(1.25%)及ST75(2.50%),优势基因型为ST3、ST10和ST11。如果将荚膜基因型、LPS基因型和MLST基因型组合起来看,当前在我国猪群中流行的Pm的主要基因型为荚膜:脂多糖:MLST基因型A:L3:ST3(20.00%)、A:L6:ST10(26.25%)及D:L6:ST11(42.50%)。毒力基因检测的结果发现部分毒力基因的分布表现出一定的"基因型偏好性"。结果提示,D:L6:ST11是我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌的主要基因型,可能与我国猪群中由多杀性巴氏杆菌导致的呼吸道疾病密切相关。 展开更多
关键词 猪多杀性巴氏杆菌 荚膜基因型 脂多糖基因型 MLST基因型 毒力基因
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几株b型流感嗜血杆菌多糖结合物的免疫原性检定
2
作者 袁玉兰 郭京蓉 +1 位作者 周继唯 高华 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期346-350,共5页
目的从分子水平检定b型流感嗜血杆菌，研究不同菌株荚膜多糖结合物的免疫原性。方法提取基因组，通过型特异和荚膜型基因特异引物，利用PCR检定b型流感嗜血杆菌；不同纯化多糖分别与破伤风类毒素（TT）进行耦联结合，结合物原液经稀释... 目的从分子水平检定b型流感嗜血杆菌，研究不同菌株荚膜多糖结合物的免疫原性。方法提取基因组，通过型特异和荚膜型基因特异引物，利用PCR检定b型流感嗜血杆菌；不同纯化多糖分别与破伤风类毒素（TT）进行耦联结合，结合物原液经稀释免疫小鼠，通过两针免疫，采血进行免疫效力测定。结果5株b型流感嗜血杆菌通过PCR法均能获得预期大小的型特异（482bp）和荚膜型（343bp）基因片段，BLAST分析显示，各菌之间型特异和荚膜型序列比对，其同源性均为100％，各菌型特异和荚膜型序列分别与GenBank X78559．1和M19995．1序列比对，同源性分别为99％和100％；ELISA检测显示，4株不同菌株来源的荚膜多糖结合物（PRP-TT）的小鼠免疫效力差异无统计学意义。结论通过PCR法从分子水平检定b型流感嗜血杆菌，纯化的不同荚膜多糖结合物小鼠免疫原性基本一致。可供不同Hib多糖结合物免疫原性的研究参考数据。 展开更多
关键词 流感嗜血杆菌 血清型特异基因 荚膜型基因 荚膜多糖 免疫原性
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6株金黄色葡萄球菌菌株的鉴定 被引量：5
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作者 郭京蓉 袁玉兰 +2 位作者 周继唯 林海涛 焦小玲 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第12期1534-1538,1542,共6页
目的对6株金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.aureus,简称金葡菌）菌株进行鉴定,为研制相关疫苗提供参考。方法将稀释的6株疫苗研制用备选金葡菌菌株49521、12602、49525、12605、55804、10832及质控菌株25923、12228菌悬液划线... 目的对6株金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.aureus,简称金葡菌）菌株进行鉴定,为研制相关疫苗提供参考。方法将稀释的6株疫苗研制用备选金葡菌菌株49521、12602、49525、12605、55804、10832及质控菌株25923、12228菌悬液划线接种TSA平板及Columbia血平板,观察菌落形态,并涂片染色镜检;利用API Staph生化试剂盒、staphylase test血浆凝固酶检测试剂盒及30μg头孢西丁药敏纸片对菌株进行鉴定;利用PCR法鉴定菌株16S r RNA基因、荚膜基因型及mec A基因;用系列稀释的菌悬液经腹腔注射BALB/c小鼠,初步测定菌株毒力。结果6株金葡菌经平板培养,可见圆形、凸起、不透明、有光泽的菌落,Columbia血平板培养的菌落周围可见透明溶血环,镜检结果为革兰阳性球菌,呈单、双或葡萄串状排列。6株菌株的生化反应结果相同,且与质控菌株25923反应结果一致;6株菌株的凝固酶试验结果均为阳性,均对头孢西丁敏感,均未扩增出mec A基因片段,为甲氧西林敏感菌株（methicillin sensitive Staphylococcus aureus,MSSA）。6株菌株均扩增出1 544 bp的16S r RNA基因片段,与Gen Bank中的参考序列NR_075000.1的同源性均为99%;菌株49521、12605、55804、10832均扩增出340 bp的cap5基因片段,与Gen Bank中序列U81973.1的同源性为99%-100%;菌株12602、49525均扩增出171 bp的cap8基因片段,与Gen Bank中序列U73374.1的同源性均为100%。6株菌株的半数致死量（LD50）均在2.5×10^8-2.5×10^9 CFU之间。结论对6株疫苗研制用备选金葡菌进行了鉴定,为疫苗研制中菌株鉴定及不同荚膜型菌株的选择提供了参考。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 荚膜基因型 毒力
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