他莫昔芬(tamoxifen,TAM)作为雌激素受体阳性(estrogen receptor,ER+)乳腺癌的一线化疗药物使大多数患者受益,但原发性和继发性耐药问题严重影响临床治疗效果。深入研究ER+乳腺癌TAM耐药机制,改善治疗效果是当前亟待解决的问题。抑癌因...他莫昔芬(tamoxifen,TAM)作为雌激素受体阳性(estrogen receptor,ER+)乳腺癌的一线化疗药物使大多数患者受益,但原发性和继发性耐药问题严重影响临床治疗效果。深入研究ER+乳腺癌TAM耐药机制,改善治疗效果是当前亟待解决的问题。抑癌因子NDRG2(N-myc downstream regulated gene 2,NDRG2)在肿瘤发生发展中发挥重要作用,但是否参与ER+乳腺癌TAM耐药尚不清楚。本研究旨在探明NDRG2在ER+乳腺癌TAM耐药中发挥的作用和机制。通过RT-PCR与免疫印迹分析对比TAM敏感型和耐药型ER+乳腺癌细胞发现,NDRG 2的mRNA转录水平和蛋白质翻译水平在TAM耐药细胞中表达显著下调,且与耐药能力负相关(P<0.001);CCK-8细胞毒性实验和软琼脂克隆形成实验证实,在耐药细胞中过表达NDRG2可显著降低TAM药物半抑制浓度IC 50和软琼脂克隆形成率(P<0.001),逆转耐药表型。分子机制上,X-box结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)mRNA剪切实验与内质网相关降解(endoplasmic-reticulum associated degradation,ERAD)报告蛋白的结果显示,过表达NDRG2可增强耐药细胞中剪切型XBP1s mRNA转录与ERAD报告蛋白CD3ε-YFP表达(P<0.001),引发耐药细胞内质网强应激反应;免疫印迹检测结果显示,过表达NDRG2可显著提高耐药细胞中内质网应激感受器肌醇需要激酶1α(inositol requiring enzyme 1,IRE1α)的磷酸化水平及其下游因子,例如内质网EIP辅助因子(endoplasmic reticulum-localized DnaJ 4,ERdj4)、PKR蛋白激酶的细胞抑制剂(cellular Inhibitor of the PKR protein kinase,P58 IPK)、α甘露糖苷酶样应激蛋白(er degradation enhancingαmannosidase likeprotein,EDEM)和蛋白质二硫键异构酶家族A成员5(protein disulfide isomerase family a member 5,PDIA5)的表达水平(P<0.001)。小鼠异种移植瘤研究进一步证实,在耐药细胞中过表达NDRG2可增强TAM治疗效果,显著抑制耐药移植瘤生长(P<0.001)。以上研究结果表明,通过提高耐药细胞中NDRG2表达,增强TAM治疗引发的内质网强烈应激,可逆转ER+乳腺癌细胞耐药性,改善TAM治疗效果。研究结果为解决ER+乳腺癌TAM耐药问题提供了新的思路和有价值的潜在药物靶点。展开更多
目的:探讨他莫昔芬联合左炔诺孕酮对大鼠子宫肌瘤的影响及其作用机制。方法:选择SPF级成年雌性SD大鼠30只,采用苯甲酸雌二醇联合黄体酮腹腔注射建立子宫肌瘤模型。将大鼠随机分为对照组(正常大鼠2 ml 0.9%氯化钠溶液灌胃)、模型组(子宫...目的:探讨他莫昔芬联合左炔诺孕酮对大鼠子宫肌瘤的影响及其作用机制。方法:选择SPF级成年雌性SD大鼠30只,采用苯甲酸雌二醇联合黄体酮腹腔注射建立子宫肌瘤模型。将大鼠随机分为对照组(正常大鼠2 ml 0.9%氯化钠溶液灌胃)、模型组(子宫肌瘤大鼠2 ml 0.9%氯化钠溶液灌胃)、他莫昔芬组(子宫肌瘤大鼠1.70 mg/kg他莫昔芬灌胃)、左炔诺孕酮组(子宫肌瘤大鼠0.1 mg/kg左炔诺孕酮灌胃)和联合组(子宫肌瘤大鼠他莫昔芬联合左炔诺孕酮灌胃),每组6只,连续灌胃30 d。ELISA检测大鼠血清雌二醇(E2)、孕激素、促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)水平。测量子宫系数、左右宫颈角长度及宫角最大直径。HE染色观察子宫组织结构及内膜厚度。Western blot检测子宫组织Wnt5b、β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组血清E2、孕激素、FSH、LH水平升高(均P<0.05)。联合组血清E2、孕激素、FSH、LH水平低于他莫昔芬组和左炔诺孕酮组(均P<0.05)。模型组子宫系数、左右宫颈角长度、宫角最大直径及子宫内膜厚度较对照组增加(均P<0.05)。联合组子宫系数、左右宫颈角长度、宫角最大直径及子宫内膜厚度低于他莫昔芬组和左炔诺孕酮组(均P<0.05)。联合组子宫损伤程度较模型组减轻。模型组子宫组织Wnt5b、β-catenin蛋白表达高于对照组(均P<0.05)。联合组Wnt5b、β-catenin蛋白表达低于他莫昔芬组和左炔诺孕酮组(均P<0.05)。结论:他莫昔芬联合左炔诺孕酮能够缩小大鼠子宫肌瘤,改善子宫形态,抑制子宫平滑肌细胞增大,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin通路有关。展开更多
文摘他莫昔芬(tamoxifen,TAM)作为雌激素受体阳性(estrogen receptor,ER+)乳腺癌的一线化疗药物使大多数患者受益,但原发性和继发性耐药问题严重影响临床治疗效果。深入研究ER+乳腺癌TAM耐药机制,改善治疗效果是当前亟待解决的问题。抑癌因子NDRG2(N-myc downstream regulated gene 2,NDRG2)在肿瘤发生发展中发挥重要作用,但是否参与ER+乳腺癌TAM耐药尚不清楚。本研究旨在探明NDRG2在ER+乳腺癌TAM耐药中发挥的作用和机制。通过RT-PCR与免疫印迹分析对比TAM敏感型和耐药型ER+乳腺癌细胞发现,NDRG 2的mRNA转录水平和蛋白质翻译水平在TAM耐药细胞中表达显著下调,且与耐药能力负相关(P<0.001);CCK-8细胞毒性实验和软琼脂克隆形成实验证实,在耐药细胞中过表达NDRG2可显著降低TAM药物半抑制浓度IC 50和软琼脂克隆形成率(P<0.001),逆转耐药表型。分子机制上,X-box结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)mRNA剪切实验与内质网相关降解(endoplasmic-reticulum associated degradation,ERAD)报告蛋白的结果显示,过表达NDRG2可增强耐药细胞中剪切型XBP1s mRNA转录与ERAD报告蛋白CD3ε-YFP表达(P<0.001),引发耐药细胞内质网强应激反应;免疫印迹检测结果显示,过表达NDRG2可显著提高耐药细胞中内质网应激感受器肌醇需要激酶1α(inositol requiring enzyme 1,IRE1α)的磷酸化水平及其下游因子,例如内质网EIP辅助因子(endoplasmic reticulum-localized DnaJ 4,ERdj4)、PKR蛋白激酶的细胞抑制剂(cellular Inhibitor of the PKR protein kinase,P58 IPK)、α甘露糖苷酶样应激蛋白(er degradation enhancingαmannosidase likeprotein,EDEM)和蛋白质二硫键异构酶家族A成员5(protein disulfide isomerase family a member 5,PDIA5)的表达水平(P<0.001)。小鼠异种移植瘤研究进一步证实,在耐药细胞中过表达NDRG2可增强TAM治疗效果,显著抑制耐药移植瘤生长(P<0.001)。以上研究结果表明,通过提高耐药细胞中NDRG2表达,增强TAM治疗引发的内质网强烈应激,可逆转ER+乳腺癌细胞耐药性,改善TAM治疗效果。研究结果为解决ER+乳腺癌TAM耐药问题提供了新的思路和有价值的潜在药物靶点。
文摘目的:探讨他莫昔芬联合左炔诺孕酮对大鼠子宫肌瘤的影响及其作用机制。方法:选择SPF级成年雌性SD大鼠30只,采用苯甲酸雌二醇联合黄体酮腹腔注射建立子宫肌瘤模型。将大鼠随机分为对照组(正常大鼠2 ml 0.9%氯化钠溶液灌胃)、模型组(子宫肌瘤大鼠2 ml 0.9%氯化钠溶液灌胃)、他莫昔芬组(子宫肌瘤大鼠1.70 mg/kg他莫昔芬灌胃)、左炔诺孕酮组(子宫肌瘤大鼠0.1 mg/kg左炔诺孕酮灌胃)和联合组(子宫肌瘤大鼠他莫昔芬联合左炔诺孕酮灌胃),每组6只,连续灌胃30 d。ELISA检测大鼠血清雌二醇(E2)、孕激素、促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)水平。测量子宫系数、左右宫颈角长度及宫角最大直径。HE染色观察子宫组织结构及内膜厚度。Western blot检测子宫组织Wnt5b、β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组血清E2、孕激素、FSH、LH水平升高(均P<0.05)。联合组血清E2、孕激素、FSH、LH水平低于他莫昔芬组和左炔诺孕酮组(均P<0.05)。模型组子宫系数、左右宫颈角长度、宫角最大直径及子宫内膜厚度较对照组增加(均P<0.05)。联合组子宫系数、左右宫颈角长度、宫角最大直径及子宫内膜厚度低于他莫昔芬组和左炔诺孕酮组(均P<0.05)。联合组子宫损伤程度较模型组减轻。模型组子宫组织Wnt5b、β-catenin蛋白表达高于对照组(均P<0.05)。联合组Wnt5b、β-catenin蛋白表达低于他莫昔芬组和左炔诺孕酮组(均P<0.05)。结论:他莫昔芬联合左炔诺孕酮能够缩小大鼠子宫肌瘤,改善子宫形态,抑制子宫平滑肌细胞增大,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin通路有关。
