利用PC12细胞建立糖氧剥夺(OGD)体外脑卒中损伤模型,采用该模型对葛根异黄酮抗缺血性脑卒中活性进行筛选和验证。评价指标包括:细胞存活率检测、细胞内活性氧(ROS)含量检测、乳酸脱氢酶(LDH)释放率检测、细胞内钙离子(Ca^(2+))浓度检测...利用PC12细胞建立糖氧剥夺(OGD)体外脑卒中损伤模型,采用该模型对葛根异黄酮抗缺血性脑卒中活性进行筛选和验证。评价指标包括:细胞存活率检测、细胞内活性氧(ROS)含量检测、乳酸脱氢酶(LDH)释放率检测、细胞内钙离子(Ca^(2+))浓度检测和细胞凋亡程度检测,并利用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2基因相关启动子(Bcl-xL/Bcl-2asociated death promoter,BAD)的表达水平。结果显示,与模型组比较,葛根异黄酮保护组能够抑制细胞凋亡,降低细胞内ROS水平,降低LDH释放、抑制细胞内Ca^(2+)累积,并且Bcl-2表达水平升高,BAD表达水平降低,Bcl-2与BAD蛋白表达量比值上调。表明葛根异黄酮能减轻氧糖剥夺/复氧(OGD/R)造成的PC12细胞损伤,提升细胞存活率,葛根异黄酮可能具有一定的抗缺血性脑卒中活性。其作用机制可能与抑制神经细胞的凋亡,减少神经元丢失相关。展开更多
文摘利用PC12细胞建立糖氧剥夺(OGD)体外脑卒中损伤模型,采用该模型对葛根异黄酮抗缺血性脑卒中活性进行筛选和验证。评价指标包括:细胞存活率检测、细胞内活性氧(ROS)含量检测、乳酸脱氢酶(LDH)释放率检测、细胞内钙离子(Ca^(2+))浓度检测和细胞凋亡程度检测,并利用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2基因相关启动子(Bcl-xL/Bcl-2asociated death promoter,BAD)的表达水平。结果显示,与模型组比较,葛根异黄酮保护组能够抑制细胞凋亡,降低细胞内ROS水平,降低LDH释放、抑制细胞内Ca^(2+)累积,并且Bcl-2表达水平升高,BAD表达水平降低,Bcl-2与BAD蛋白表达量比值上调。表明葛根异黄酮能减轻氧糖剥夺/复氧(OGD/R)造成的PC12细胞损伤,提升细胞存活率,葛根异黄酮可能具有一定的抗缺血性脑卒中活性。其作用机制可能与抑制神经细胞的凋亡,减少神经元丢失相关。
