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传统蛋白免疫印迹技术常见异常结果及影响因素探究
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作者 洪铸 夏倩 +2 位作者 聂昌 王龙 杜春艳 《基层医学论坛》 2023年第28期89-91,共3页
蛋白免疫印迹技术(western blotting,WB)是检测蛋白质经济、有效的方法,已广泛应用于分子相关的领域,但其影响因素多、操作复杂,常出现异常结果。本研究使用传统蛋白免疫印迹技术法检测(Sprague-Damley,SD)大鼠肝脏、脾脏组织某些蛋白... 蛋白免疫印迹技术(western blotting,WB)是检测蛋白质经济、有效的方法,已广泛应用于分子相关的领域,但其影响因素多、操作复杂,常出现异常结果。本研究使用传统蛋白免疫印迹技术法检测(Sprague-Damley,SD)大鼠肝脏、脾脏组织某些蛋白质的表达,分析探讨常见异常结果及处理方法,为实验室和其他实验者提供参考。 展开更多
关键词 蛋白免疫印迹技术 抗体 SDS-PAGE
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蛋白免疫印迹法在G蛋白检测中的应用 被引量:34
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作者 熊仁平 周元国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期145-148,共4页
目的:建立一项用蛋白免疫印迹法测定鸟苷酸结合蛋白(G蛋白)含量的技术。方法:取冷冻组织块200mg置于4℃预冷的匀浆缓冲液中匀浆、离心后,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,电转移法转移至硝酸纤维素膜上,经5%脱脂奶粉封闭... 目的:建立一项用蛋白免疫印迹法测定鸟苷酸结合蛋白(G蛋白)含量的技术。方法:取冷冻组织块200mg置于4℃预冷的匀浆缓冲液中匀浆、离心后,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,电转移法转移至硝酸纤维素膜上,经5%脱脂奶粉封闭后,依序与抗G蛋白抗体和辣根过氧化物酶标记的IgG反应,化学发光法检测。结果:所得的G蛋白目标带清晰、明显,重复性好。不同种属大鼠主动脉、心房、心室、脑组织中Goα和Giα均为单一带,Fischer344大鼠Gsα主动脉为4条带,Sprague-Dawley和WKY/SHR大鼠主动脉Gsα为3条带,心房和心室Gsα为3条带,Fischer344和Wistar大鼠脑组织中Gsα只有两条带。Wistar大鼠肺组织浆和膜中Gqα、Giα均为单一带,Gsα两条带;肺组织膜中Goα为单一带,肺组织浆中未能检出Goα。结论:用Westernblot技术可较好地检测G蛋白含量和带型分布。不同种属动物及组织G蛋白亚型的含量和带型分布是不完全相同的。 展开更多
关键词 G蛋白 大鼠 蛋白免疫印迹
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斑点热群立克次体内蒙W-88蛛89102抗原的蛋白免疫印迹分析 被引量:2
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作者 范明远 赵立成 +2 位作者 毕德增 陈伟 侯芷英 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1990年第1期5-8,共4页
蛋白免疫印迹试验表明从内蒙通辽病人旺某血标本分离的斑点热群立克次体W-88株与西伯利亚立克次体(232株及246株)的蛋白图谱完全相同,具有2个分子量为130KD及181KD的主要抗原性多肽及1个反应较弱的分子量为110KD的抗原性多肽,此与其它... 蛋白免疫印迹试验表明从内蒙通辽病人旺某血标本分离的斑点热群立克次体W-88株与西伯利亚立克次体(232株及246株)的蛋白图谱完全相同,具有2个分子量为130KD及181KD的主要抗原性多肽及1个反应较弱的分子量为110KD的抗原性多肽,此与其它斑点热群立克次体不同。说明W-88株为西伯利亚立克次体。斑点热群立克次体中西伯利亚立克次体、立氏立克次体、康氏立克次体及派氏立克次体相互间抗原有较强的交叉反应。小蛛立克次体、澳大利亚立克次体与上述立克次体仅有微弱的交叉反应。说明斑点热群立克次体主要抗原分子有相同的决定簇。 展开更多
关键词 立克次体 蛋白免疫印迹 抗原
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蛋白免疫印迹法检测胃癌组织Cyr61和HIF-1α蛋白的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 许之美 司君利 +3 位作者 钮自宇 王贺 亓玉琴 隋爱华 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期1620-1624,共5页
目的侵袭转移是恶性肿瘤最重要的生物学行为之一,也是导致死亡率增加的主要原因,而肿瘤细胞发生转移的机制一直是研究的热点。研究旨在检测富含半胱氨酸61(Cyr61)蛋白和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白在胃癌组织中的表达水平,探讨两者... 目的侵袭转移是恶性肿瘤最重要的生物学行为之一,也是导致死亡率增加的主要原因,而肿瘤细胞发生转移的机制一直是研究的热点。研究旨在检测富含半胱氨酸61(Cyr61)蛋白和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白在胃癌组织中的表达水平,探讨两者与胃癌侵袭转移的关系。方法将标本分成3组,分别为49例胃癌组、49例配对的癌旁组(距癌2 cm)和49例配对的正常组(距癌5 cm以上),用免疫组织化学和蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测Cyr61和HIF-1α的蛋白表达水平,并分析两者与胃癌的临床病理特征的关系。结果免疫组织化学检测显示Cyr61在胃癌细胞的胞浆中表达,HIF-1α在胃癌细胞的胞浆/胞核中表达。进一步用Western blot检测结果显示,胃癌中Cyr61蛋白的表达水平(0.2767±0.02200)高于癌旁组织(0.2145±0.02209)和正常组织(0.1055±0.02082),癌旁组织高于正常组织(均P<0.01);胃癌中HIF-1α蛋白的表达水平(0.2663±0.02682)高于癌旁组织(0.2120±0.04087)和正常组织(0.1008±0.03867)(均P<0.01),癌旁组织高于正常组织(P<0.01)。Cyr61和HIF-1α蛋白表达的增强与肿瘤的分化程度、淋巴转移及TNM分期相关(均P<0.05)。SPERMAN等级相关分析证明了Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白的表达呈明显正相关(r=0.411,P<0.05)。结论 Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白在胃癌组织中呈高表达,可能与胃癌的侵袭转移有关。联合检测Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白对指导胃癌临床及判断预后有重要价值。 展开更多
关键词 胃肿瘤 富含半胱氨酸61 低氧诱导因子-1Α 免疫组织化学 蛋白免疫印迹
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蛋白免疫印迹杂交法研究葛根素对成骨细胞TGF-β1及Smad2/3蛋白表达的影响 被引量:12
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作者 钱康琦 孙玉明 詹秀琴 《长春中医药大学学报》 2013年第1期18-20,共3页
目的:观察采用蛋白免疫印迹杂交(Western Bloting)法探讨葛根素通过TGF-β1及其信号转导蛋白Smad 2/3对于促进成骨细胞增殖分化机制的研究。方法:原代培养新生小鼠成骨细胞,分别用空白对照组(含10%DMEM)及3种不同浓度分别为1μg/mL,0.1... 目的:观察采用蛋白免疫印迹杂交(Western Bloting)法探讨葛根素通过TGF-β1及其信号转导蛋白Smad 2/3对于促进成骨细胞增殖分化机制的研究。方法:原代培养新生小鼠成骨细胞,分别用空白对照组(含10%DMEM)及3种不同浓度分别为1μg/mL,0.1μg/mL,0.01μg/mL的葛根素干预液处理成骨细胞。采用MTT实验法检测葛根素对成骨细胞生长的影响,Western Bloting法检测葛根素对成骨细胞TGF-β1及其信号转导蛋白Smad 2/3表达的影响。结果:不同浓度的葛根素有促进成骨细胞生长的作用,并可以提高TGF-β1及其信号转导蛋白Smad 2/3的表达,呈浓度依赖性,分别与空白对照组相比有统计学意义(P<0.05)。结论:葛根素可以通过TGF-β1及Smad 2/3信号转导途径促进成骨细胞增殖与分化。 展开更多
关键词 蛋白免疫印迹杂交(Western Bloting) 葛根素 TGF-β1 Smad2/3 成骨细胞
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765份HIV-1抗体阳性吸毒者标本蛋白免疫印迹带型分析 被引量:19
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作者 刁丽梅 李杰 +4 位作者 王晔 林萍 鄢心革 于国龙 林鹏 《岭南皮肤性病科杂志》 2007年第4期205-207,共3页
目的:分析HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型,了解我省吸毒人群WB带型的分布特征。方法:对本实验室2001至2003年的HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型进行统计分析。结果:765份HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型中,gp160、gp120、p24、p66、p51带型的出... 目的:分析HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型,了解我省吸毒人群WB带型的分布特征。方法:对本实验室2001至2003年的HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型进行统计分析。结果:765份HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型中,gp160、gp120、p24、p66、p51带型的出现率都在96%以上,gp41、p31带型的出现率分别为93.86%和91.37%;WB全带型出现率为57.12%(437/765);性别与WB带型的出现率差异无统计学意义;不同年龄组与出现p24带型差异有统计学意义(Х2=19.5,P<0.01)。结论:抗env和gag基因编码蛋白的抗体gp160、gp120、gp41、p24阳性率高,是确证HIV-1感染的必备条件;我省的HIV亚型、传播途径和WB带型之间的关系有待进一步的研究。 展开更多
关键词 HIV-1抗体 蛋白免疫印迹(WB)法 WB带型 吸毒者
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蛋白免疫印迹法(WB)试验结果与HIV感染关系的分析 被引量:4
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作者 杨晓虹 许海生 《中国实用医药》 2010年第13期25-26,共2页
目的通过对蛋白免疫印迹法(WB)试验结果的观察,确定个体是否感染HIV以及HIV感染的状况。方法对60份抗-HIV初筛阳性血清使用蛋白免疫印迹法(WB)进行确认实验。结果在被检测样品中,HIV-1型确认试验阳性54例,占90%;HIV-1型确认试验阳性,且... 目的通过对蛋白免疫印迹法(WB)试验结果的观察,确定个体是否感染HIV以及HIV感染的状况。方法对60份抗-HIV初筛阳性血清使用蛋白免疫印迹法(WB)进行确认实验。结果在被检测样品中,HIV-1型确认试验阳性54例,占90%;HIV-1型确认试验阳性,且提示HIV-2阳性感染1例,占1.6%;HIV-1型确认试验弱阳性(不确定)3例,占5%;HIV-1型确认试验阳性2例,占3.3%。结论蛋白免疫印迹法(WB)试验确定个体有无HIV感染以及HIV感染情况提供依据。 展开更多
关键词 HIV感染 蛋白免疫印迹法(WB) 条带
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蛋白免疫印迹法试验结果与HIV感染关系的探讨 被引量:1
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作者 胡秀杰 包小兵 宋艳文 《职业与健康》 CAS 2005年第8期1162-1163,共2页
目的通过对蛋白免疫印迹法(WB)试验结果的观察,确定个体是否感染HIV以及HIV感染状况。方法对50份抗-HIV初筛阳性血清使用WB法进行确认实验。结果在被检测样品中,HIV-1型确认试验阳性45例,占90%;HIV-1型确认试验阳性,且提示HIV-2阳性感染... 目的通过对蛋白免疫印迹法(WB)试验结果的观察,确定个体是否感染HIV以及HIV感染状况。方法对50份抗-HIV初筛阳性血清使用WB法进行确认实验。结果在被检测样品中,HIV-1型确认试验阳性45例,占90%;HIV-1型确认试验阳性,且提示HIV-2阳性感染1例,占2%;HIV-1型确认试验弱阳性(不确定)2例,占4%;HIV-1型确认试验阴性2例,占4%。结论WB法试验为确定个体有无HIV感染以及HIV感染状况提供依据。 展开更多
关键词 HIV感染 蛋白免疫印迹法(WB) 条带 关系
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浅谈蛋白免疫印迹技术方法的改进 被引量:3
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作者 天丁 莫晓川 +1 位作者 曾佳 孟立科 《中国中医药咨讯》 2012年第1期146-146,共1页
目的:探索蛋白免疫印迹技术关键步骤的改良方法。方法:以小鼠为研究对象,采用改良的蛋白免疫技术分析小鼠肝脏CYPlAl的表达水平。结果:不仅缩短实验时间,而且获得的目标条带清晰,非特异性的本底显色浅。结论:改良的蛋白免疫印迹... 目的:探索蛋白免疫印迹技术关键步骤的改良方法。方法:以小鼠为研究对象,采用改良的蛋白免疫技术分析小鼠肝脏CYPlAl的表达水平。结果:不仅缩短实验时间,而且获得的目标条带清晰,非特异性的本底显色浅。结论:改良的蛋白免疫印迹技术一定程度上能够很好的分离目标蛋白,降低本底,获得比较满意的实验结果,有利于对蛋白质的进一步分析研究。 展开更多
关键词 蛋白免疫印迹技术 改良方法 CYPlAl 小鼠肝脏 免疫技术 实验时间 非特异性 实验结果
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蛋白免疫印迹技术 被引量:3
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作者 王永强 张敬礼 +2 位作者 陈智周 范振符 李振甲 《国外医学(临床生物化学与检验学分册)》 1992年第3期101-105,共5页
蛋白免疫印迹技术是一选择性地结合被分离混合物中各组分的分析技术。它结合了电泳分析容量大、分辨率高和免疫分析敏感性高、特异性强的优点。此技术已广泛应用于生物化学、分子生物学、免疫学和医学等领域。本文就该技术的基本原理和... 蛋白免疫印迹技术是一选择性地结合被分离混合物中各组分的分析技术。它结合了电泳分析容量大、分辨率高和免疫分析敏感性高、特异性强的优点。此技术已广泛应用于生物化学、分子生物学、免疫学和医学等领域。本文就该技术的基本原理和特点、种类、吸附材料、所用缓冲液、封闭系统以及应用过程中所遇问题、解决方法和最新进展做了简要综述。 展开更多
关键词 蛋白免疫印迹
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施氏假单胞菌胞内NapA/NapB蛋白的多克隆抗体制备及蛋白免疫印迹分析 被引量:1
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作者 周萌 柴晓利 《山东化工》 CAS 2019年第20期25-28,31,共5页
旨在探究利用蛋白免疫印迹手段测定施氏假单胞菌胞内关键酶NapA和NapB表达量的可行性。选取多肽片段合成免疫抗原,并用其免疫兔子获得相应的多克隆抗体。ELISA检测第三次免疫后两周的兔抗血清的效价,并将最终免疫产生的抗体用于施氏假... 旨在探究利用蛋白免疫印迹手段测定施氏假单胞菌胞内关键酶NapA和NapB表达量的可行性。选取多肽片段合成免疫抗原,并用其免疫兔子获得相应的多克隆抗体。ELISA检测第三次免疫后两周的兔抗血清的效价,并将最终免疫产生的抗体用于施氏假单胞菌样品的蛋白免疫印迹分析。制备的多肽抗原具有良好的免疫原性,NapB免疫原效果甚佳,血清效价大于1∶160000,NapA的效价也可达到1∶14000。免疫印迹试验结果的发光图像中内参条带清晰整齐,在目标蛋白条带区域也可以看到明显反应带。本研究制备出的抗体可用于施氏假单胞菌胞内NapA和NapB蛋白的免疫印迹分析,后续还可以改变实验条件通过内参蛋白进行半定量。 展开更多
关键词 反硝化脱氮 施氏假单胞菌 NapA/NapB 蛋白免疫印迹
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蛋白免疫印迹和全自动蛋白质定量分析的比较研究
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作者 雷虹 胡峰瑞 +1 位作者 陈妍珂 苟兴春 《生物医学》 CAS 2021年第2期113-119,共7页
目的:比较传统的蛋白免疫印迹和全自动蛋白质定量分析检测特异性蛋白质相对含量的差异,并进行方法学优化,为蛋白质定量分析提供技术参考。方法:分别使用两种系统对不同分子量的目标蛋白进行检测,比较两种系统的灵敏度、重复性和适用范... 目的:比较传统的蛋白免疫印迹和全自动蛋白质定量分析检测特异性蛋白质相对含量的差异,并进行方法学优化,为蛋白质定量分析提供技术参考。方法:分别使用两种系统对不同分子量的目标蛋白进行检测,比较两种系统的灵敏度、重复性和适用范围。结果:相比传统WB系统,全自动系统灵敏性、重复性和稳定性更高,并且可进行多分子同时检测,尤其在检测微量蛋白、分子量较大或较小的蛋白以及高通量方面具有优势。结论:全自动蛋白检测是一种灵敏、高效的检测特异性蛋白丰度变化的系统,值得在科研和医学检验中推广。 展开更多
关键词 蛋白免疫印迹 全自动蛋白质定量分析
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蛋白免疫印迹法同时检测大、小分子蛋白的实验条件改进 被引量:16
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作者 陈彩萍 冯志奇 +3 位作者 宋壮 陈超 温小安 袁浩亮 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第24期4618-4621,共4页
目的:蛋白免疫印迹法是现代生物医学研究中广泛应用于蛋白定性和半定量分析的实验技术。然而,常规采用传统单一浓度凝胶的蛋白免疫印迹法在应用过程中仍有不足之处,如不能同时检测分子量很大和很小的蛋白,因而有必要探索一种增大凝胶有... 目的:蛋白免疫印迹法是现代生物医学研究中广泛应用于蛋白定性和半定量分析的实验技术。然而,常规采用传统单一浓度凝胶的蛋白免疫印迹法在应用过程中仍有不足之处,如不能同时检测分子量很大和很小的蛋白,因而有必要探索一种增大凝胶有效分离范围的检测方法。本文提出采用组合凝胶来实现更大范围分子量蛋白的同时检测。方法:比较双浓度的组合凝胶与单一浓度凝胶的分离范围以及分析采用组合凝胶,蛋白免疫印迹法对大、小分子蛋白的检测效果。结果:12%/7.5%组合凝胶和15%/7.5%组合凝胶的分离范围显著大于相应的单一浓度凝胶。通过12%/7.5%组合凝胶,蛋白免疫印迹法同时检测到15-300 k Da范围内的大、小分子蛋白。结论:组合凝胶有助于蛋白免疫印迹法对分子量相差很大的蛋白进行同时检测分析,具有很强的实用性。 展开更多
关键词 蛋白免疫印迹 蛋白分析 组合凝胶 分离胶
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中国莱姆病伽氏疏螺旋体蛋白免疫印迹法诊断标准的研究 被引量:11
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作者 蒋毅 万康林 +1 位作者 耿震 侯学霞 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期594-598,共5页
目的研究中国莱姆病伽氏疏螺旋体基因型蛋白免疫印迹法(WB)的阳性诊断标准。方法采用中国莱姆病螺旋体伽氏疏螺旋体基因型参照菌株PD91作抗原,建立WB检测方法。采用Gel-Pro凝胶分析软件进行结果分析。病例组和对照组各组蛋白条带的频数... 目的研究中国莱姆病伽氏疏螺旋体基因型蛋白免疫印迹法(WB)的阳性诊断标准。方法采用中国莱姆病螺旋体伽氏疏螺旋体基因型参照菌株PD91作抗原,建立WB检测方法。采用Gel-Pro凝胶分析软件进行结果分析。病例组和对照组各组蛋白条带的频数分布比较采用χ2检验或Fisher′s精确检验,WB检测莱姆病阳性诊断标准确定采用ROC曲线。结果共检测127例莱姆病病例和504例对照的血清标本,经统计学分析得出我国莱姆病伽氏疏螺旋体检测中WB阳性诊断标准为:对于IgGP83/100、P58、P39、P30、OspC、P17、P66、OspA中至少有一条蛋白条带显色即可诊断为阳性,此标准敏感度为73.2%,特异度为99.4%;对于IgMP83/100、P58、OspA、P30、OspC、P17、P41中至少有一条蛋白条带显色则可诊断为阳性,此标准敏感度为50.4%,特异度为93.1%。结论建立了中国莱姆病伽氏疏螺旋体基因型WB阳性诊断标准,用于莱姆病的WB诊断具有较好的特异性。 展开更多
关键词 莱姆病 伽氏疏螺旋体 蛋白免疫印迹 诊断标准 莱姆病螺旋体 疏螺旋体 诊断标 标准 中国 FISHER
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113例男性HIV-1抗体阳性吸毒者蛋白免疫印迹带型分析 被引量:8
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作者 刘燕 严宇斌 +1 位作者 曾健君 方巧云 《中国热带医学》 CAS 2011年第11期1330-1331,共2页
目的分析HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型,了解惠州市男性吸毒人群WB带型的分布特征。方法对本实验室2007~2010年的HIV-1抗体确证检测阳性男性吸毒者的WB带型进行统计分析。结果 113份HIV-1抗体确证检测阳性男性吸毒者的WB带型中,gp160、g... 目的分析HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型,了解惠州市男性吸毒人群WB带型的分布特征。方法对本实验室2007~2010年的HIV-1抗体确证检测阳性男性吸毒者的WB带型进行统计分析。结果 113份HIV-1抗体确证检测阳性男性吸毒者的WB带型中,gp160、gp120带型的出现率均在100%,p66、p51、gp41、p31、p24带型的出现率均在96%以上,p55,p17带型的出现率分别为71.68%和80.53%;WB全带型出现率为59.30%(67/113);不同年龄组带型差异无统计学意义。结论抗env和gag基因编码蛋白的抗体gp160、gp120、gp41、p24阳性率高,是确证HIV-1感染的必备条件;惠州市的HIV亚型、传播途径和WB带型之间的关系有待进一步的调查和研究。 展开更多
关键词 HIV-1抗体 蛋白免疫印迹(WB)法 WB带型 男性 吸毒者
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蛋白免疫印迹试验在HIV确证检测中的漏检及原因分析 被引量:7
16
作者 张亚兰 郑海潮 +2 位作者 杨扬 于彤彤 卫晓丽 《中国艾滋病性病》 CAS 2014年第5期309-311,共3页
目的探讨蛋白免疫印迹试验(WB)在艾滋病病毒(HIV)确证检测过程中的漏检问题,可能的原因及解决方法。方法 40份酶联免疫吸附试验(ELISA)和(或)胶体金法筛查阳性、WB实验确证阴性的样本,分析其来源、S/CO值,并进行抗体追踪复检。结果 40... 目的探讨蛋白免疫印迹试验(WB)在艾滋病病毒(HIV)确证检测过程中的漏检问题,可能的原因及解决方法。方法 40份酶联免疫吸附试验(ELISA)和(或)胶体金法筛查阳性、WB实验确证阴性的样本,分析其来源、S/CO值,并进行抗体追踪复检。结果 40份样本中检出9份HIV阳性,28份阴性,3份样本流失。阴性者均来源于没有高危行为的普通人群,其中无偿献血人群13份,ELISA S/CO均<3。9份阳性样本中,6例为男男性行为人群(MSM),自愿咨询检测(VCT)3例。其中ELISA S/CO值<6的5例,>10的4例,6例最后考虑为窗口期感染,3例可能为WB试剂中反应膜出现问题。结论 WB检测漏检,可能是样本处于窗口期感染或试剂反应膜问题,实验室应综合分析筛查阳性而WB确证阴性的检测样本,要进行追踪检测,以确定其真实的HIV-1感染状况,防止漏检。 展开更多
关键词 艾滋病病毒 蛋白免疫印迹试验 抗体检测 确证试验 漏检
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大鼠脑组织中P-糖蛋白的免疫印迹检测方法 被引量:2
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作者 王冰 潘彦舒 +2 位作者 华茜 侯金才 李澎涛 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第3期329-331,共3页
目的:确定蛋白免疫印迹检测大鼠脑组织中P-糖蛋白的最佳实验条件。方法:将成年雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组。模型组分八个时间点,采用反复夹闭颈总动脉辅以硝普钠降压的方法制备脑缺血再灌注模型。正常组直接断头取脑分别进... 目的:确定蛋白免疫印迹检测大鼠脑组织中P-糖蛋白的最佳实验条件。方法:将成年雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组。模型组分八个时间点,采用反复夹闭颈总动脉辅以硝普钠降压的方法制备脑缺血再灌注模型。正常组直接断头取脑分别进行组织匀浆和提取微血管,而模型组断头取脑均提取微血管,利用蛋白免疫印迹检测大鼠脑内P-糖蛋白的表达水平。结果:最佳实验条件是:提取微血管,用裂解液C冰上裂解30min,然后40000g离心30min留上清,蛋白定量后在5*上样缓冲液中25℃处理30min。而模型组各时间点P-糖蛋白的表达量随时间的延长逐渐增多。结论:利用提取脑微血管的方法在上述实验条件下进行P-糖蛋白的检测方便、可行,明显优于脑组织匀浆;并且在脑缺血再灌注这种病理状态下脑组织内P-糖蛋白的表达呈现一定的时序特征。 展开更多
关键词 P-糖蛋白 蛋白免疫印迹 检测方法 脑缺血再灌注 微血管
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蛋白免疫印迹法检测胃癌中Cyr 61和HIF-1α蛋白的表达及其临床意义 被引量:3
18
作者 许之美 司君利 +2 位作者 王贺 亓玉琴 隋爱华 《临床消化病杂志》 2010年第6期323-326,共4页
目的本研究旨在检测Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白在胃癌组织中的表达水平,探讨二者与胃癌侵袭转移的关系。方法将标本分成3组,分别为49例胃癌组,49例配对的癌旁组(距癌2cm)和49例配对的正常组(距癌5cm以上),用蛋白免疫印记(Western blot)方... 目的本研究旨在检测Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白在胃癌组织中的表达水平,探讨二者与胃癌侵袭转移的关系。方法将标本分成3组,分别为49例胃癌组,49例配对的癌旁组(距癌2cm)和49例配对的正常组(距癌5cm以上),用蛋白免疫印记(Western blot)方法检测Cyr61和HIF-1α的蛋白表达水平,并分析二者与胃癌的临床病理特征的关系。结果胃癌中Cyr61蛋白的表达水平(0.2767±0.02200)显著高于癌旁组织(0.2145±0.02209)和正常组织(0.1055±0.02082),癌旁组织明显高于正常组织(P均<0.001);胃癌中HIF-1α蛋白的表达水平(0.2663±0.02682)显著高于癌旁组织(0.2120±0.04087)和正常组织(0.1008±0.03867)(P均<0.001),癌旁组织明显高于正常组织(P<0.001)。Cyr61和HIF-1α蛋白表达的增强与肿瘤的分化程度、淋巴转移及TNM分期显著相关(P均<0.05)。Sperman等级相关分析证明了Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白的表达呈明显正相关(r=0.411,P<0.05)。结论 Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白在胃癌组织中呈高表达,且Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白表达的增强可促进胃癌的侵袭转移。联合检测Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白对指导胃癌临床诊治及判断预后有重要价值。 展开更多
关键词 胃肿瘤 CYR61 HIF-1Α 侵袭转移 蛋白免疫印迹
原文传递
北海市2016年-2017年HIV抗体蛋白免疫印迹试验不确定结果分析 被引量:6
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作者 朱豪 杨国然 +3 位作者 白海涛 李师勤 韩沪影 陈小玲 《中国卫生检验杂志》 CAS 2020年第7期813-816,共4页
目的通过蛋白免疫印迹试验中艾滋病病毒(HIV)抗体不确定带型的特征,分析产生不确定结果的血清学特点及追踪随访结果,为尽早明确诊断提供科学依据。方法回顾性分析北海市2016年-2017年确证实验中出现的HIV抗体不确定结果资料,结合流行病... 目的通过蛋白免疫印迹试验中艾滋病病毒(HIV)抗体不确定带型的特征,分析产生不确定结果的血清学特点及追踪随访结果,为尽早明确诊断提供科学依据。方法回顾性分析北海市2016年-2017年确证实验中出现的HIV抗体不确定结果资料,结合流行病学随访、CD4+T淋巴细胞计数和病毒载量,分析不确定人群带型进展、转归和蛋白免疫印迹试验带型分布特点。结果64例不确定样本中,来源于医疗机构就诊者占40.6%(26例);自愿咨询检测者占29.69%(19例),无偿献血者占15.6%(10例),公安司法占10.9%(7例),哨点监测占3.1%(2例)。不确定样本共有12种带型,env类、gag类和pol类带型分别占23.44%、71.88%、4.69%。单一带型中,P24带型占的比例最高。完成随访的37例样本中,env类条带的阳转率为13.5%(5/37),pol类、gag类带型未发现阳转。结论gag类不确定最为常见,非特异性反应居多;env类带型的不确定结果阳转率较高,感染HIV的可能性更大;严格进行实验环节质量控制;谨慎对待不确定结果,结合其他辅助方法综合判断,提高检测准确率;对不确定结果的患者应加强随访,避免不确定样本流失。 展开更多
关键词 蛋白免疫印迹试验 艾滋病病毒抗体 不确定结果 追踪随访
原文传递
免疫印迹法检测绵羊朊蛋白prp^c的研究 被引量:1
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作者 乔俊文 赵德明 +3 位作者 吴长德 王志刚 周向梅 王秀菊 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第1期23-24,共2页
关键词 蛋白免疫印迹 化学检测法 prp^c 蛋白 病理组织学检查 海绵状脑病 绵羊 流行病学调查
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