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对虾白斑综合症病毒核衣壳蛋白VP664的鉴定研究 被引量：4
1
作者 熊生良 杨丰 《台湾海峡》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期46-52,共7页
对虾白斑综合症病毒核衣壳蛋白VP664是至今知道的分子量最大的结构蛋白,全长18 234bp,预计编码6 077个氨基酸.从编码vp664基因的两端各选600bp,分别命名为vp664n、vp664c进行原核表达,成功表达纯化了目的蛋白并制备抗体.蛋白印记杂交(We... 对虾白斑综合症病毒核衣壳蛋白VP664是至今知道的分子量最大的结构蛋白,全长18 234bp,预计编码6 077个氨基酸.从编码vp664基因的两端各选600bp,分别命名为vp664n、vp664c进行原核表达,成功表达纯化了目的蛋白并制备抗体.蛋白印记杂交(Western blot)实验中蛋白特异抗体只与完整的病毒和核衣壳裂解蛋白中的VP664蛋白反应,而不和膜蛋白反应,证明VP664基因所编码的蛋白在完整病毒颗粒上定位于核衣壳. 展开更多
关键词 分子生物学 蛋白印记杂交(Western blot) 表达纯化 核衣壳蛋白 对虾白斑 综合症病毒
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链状亚历山大藻组蛋白H3基因克隆与生长过程中的表达分析
2
作者 刘昊昕 Sadaf Riaz +3 位作者 刘源 Anam Khurshid 张巍 隋正红 《海洋科学》 CAS 北大核心 2019年第11期19-27,共9页
链状亚历山大藻(Alexandrium catenella)是一种典型的产毒赤潮甲藻。甲藻曾被认为没有组蛋白,但近年来在多种甲藻中检测到全部四个核心组蛋白的活跃转录,而目前对甲藻中组蛋白表达模式与具体功能还缺乏深入的研究。本文报道了链状亚历... 链状亚历山大藻(Alexandrium catenella)是一种典型的产毒赤潮甲藻。甲藻曾被认为没有组蛋白,但近年来在多种甲藻中检测到全部四个核心组蛋白的活跃转录,而目前对甲藻中组蛋白表达模式与具体功能还缺乏深入的研究。本文报道了链状亚历山大藻组蛋白H3变体之一H3.c的全长ORF序列的克隆和分析;分析了链状亚历山大藻生长过程中组蛋白H3在基因和蛋白水平的表达。目前研究发现的链状亚历山大藻H3变体共三个,其中H3.b在N末端序列与其他物种差异最大,为链状亚历山大藻特有的H3变体。对数生长期的组蛋白H3在基因与蛋白水平上均活跃表达,但表达量并不会随着爆发性增长而显著变化,其中H3.b的基因表达在对数末期呈现上调;培养至衰亡期,各H3变体表达均下调,尤其在蛋白水平上呈现明显衰减。结合前期研究,本文认为链状亚历山大藻三个H3均为复制非依赖型(RI)变体,一些变体可响应伴随藻不断生长而逐渐增强的细胞密度等复杂胁迫,推测其参与某些表观遗传修饰,调控生长进程;而衰亡期基于H3的表观遗传调控受到抑制。 展开更多
关键词 链状亚历山大藻 组蛋白H3 表观遗传调控 实时荧光定量PCR 蛋白免疫印记杂交
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Annexin Ⅱ在肺鳞癌、腺癌中的表达及意义 被引量：4
3
作者 许月新 刘东明 +2 位作者 段鸿梅 官忠艳 韩昱晨 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第5期375-380,共6页
背景与目的AnnexinⅡ是一类钙依赖性磷脂结合蛋白,在许多的细胞功能中发挥作用,已有研究显示annexinⅡ参与肿瘤的发生发展。本研究通过检测膜联蛋白Ⅱ(annexinⅡ)在肺癌组织中的表达情况,分析annexinⅡ与各临床病理因素间的关系。方法... 背景与目的AnnexinⅡ是一类钙依赖性磷脂结合蛋白,在许多的细胞功能中发挥作用,已有研究显示annexinⅡ参与肿瘤的发生发展。本研究通过检测膜联蛋白Ⅱ(annexinⅡ)在肺癌组织中的表达情况,分析annexinⅡ与各临床病理因素间的关系。方法应用免疫组组织化学(SP法)检测110例肺鳞癌和肺腺癌组织中annexinⅡ的表达;应用WesternBlot方法检测40例肺鳞癌和肺腺癌组织及相应癌旁正常肺组织中annexinⅡ蛋白的表达。结果在110例肺癌组织中,有67例为annexinⅡ高表达(60.9%),鳞癌为胞膜表达,腺癌为胞膜表达或胞膜与胞浆均有表达,但以胞膜表达为主。AnnexinⅡ的表达情况与肺癌患者的淋巴结转移(P=0.008)及TNM分期(P=0.002)相关。AnnexinⅡ蛋白在肺鳞癌、腺癌和癌旁组织中均有表达,在癌组织中的表达明显高于癌旁正常肺组织(P<0.001)。结论AnnexinⅡ蛋白的表达与肺鳞癌及腺癌的发展密切相关。 展开更多
关键词 膜联蛋白Ⅱ 肺肿瘤 免疫组织化学 蛋白印记杂交
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大鼠血管平滑肌细胞迁移与西洛他唑的干预效应 被引量：1
4
作者 王守力 韩雅玲 +7 位作者 于海波 邓捷 徐凯 梁明 李毅 苏庆丰 闫承慧 康建 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第15期69-71,i001,共4页
目的:探讨西洛他唑对原代培养大鼠血管平滑肌细胞迁移能力的影响及其可能的调控作用。方法:实验于2003-03/12在解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所完成。使用胶原酶消化法处理健康雄性SD大鼠,获得原代培养的鼠血管平滑肌细胞,加入... 目的:探讨西洛他唑对原代培养大鼠血管平滑肌细胞迁移能力的影响及其可能的调控作用。方法:实验于2003-03/12在解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所完成。使用胶原酶消化法处理健康雄性SD大鼠,获得原代培养的鼠血管平滑肌细胞,加入终浓度为0.5μmol/L西洛他唑培养72h为西洛他唑组,对照组为加入等量的Dulbecco改良的Eagle培养液培养的血管平滑肌细胞。应用细胞刮伤实验和基质金属蛋白酶活性测定分析西洛他唑对原代培养血管平滑肌细胞迁移能力的影响。应用蛋白质印记杂交方法分析给药前后血管平滑肌细胞内基质金属蛋白酶2,9和细胞外信号调节激酶蛋白的表达情况。结果:①细胞刮伤实验显示,与对照组比较,西洛他唑组血管平滑肌细胞迁移能力明显受抑,迁移距离明显缩短。明胶酶活性分析发现,西洛他唑组细胞基质金属蛋白酶活性明显低于对照组。②蛋白质印迹杂交分析发现,西洛他唑可引起原代培养血管平滑肌细胞迁移能力下降。西洛他唑组细胞内基质金属蛋白酶2,9蛋白表达明显低于对照组(14.34±0.70,12.65±0.98;93.67±1.90,83.67±1.05,t=67.86,85.65,P<0.05)。③蛋白质印迹杂交分析检测显示,西洛他唑组与对照组血管平滑肌细胞内信号调节激酶1,2蛋白表达无明显差异(P>0.05);细胞内磷酸化信号调节激酶蛋白表? 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞迁移 西洛他唑 干预效应 基质金属蛋白酶活性 基质金属蛋白酶2 培养的血管平滑肌细胞 细胞迁移能力 平滑肌细胞内 信号调节激酶 沈阳军区总医院 蛋白质印记杂交 细胞外信号调节 细胞内信号调节 原代培养
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结缔组织生长因子表达水平与垂体腺瘤侵袭性之间关系 被引量：1
5
作者 康现鑫 赵天书 +3 位作者 董白晶 汤加斌 林祖岩 刘晓谦 《临床神经外科杂志》 CAS 2013年第3期152-155,共4页
目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)在垂体腺瘤中表达水平与垂体腺瘤侵袭性之间的关系,为侵袭性垂体腺瘤的诊断和生物学治疗提供理论依据。方法采用实时定量聚合酶链反应(Real-timePCR)和蛋白免疫印记杂交(Westernblot)方法检测16例非侵袭... 目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)在垂体腺瘤中表达水平与垂体腺瘤侵袭性之间的关系,为侵袭性垂体腺瘤的诊断和生物学治疗提供理论依据。方法采用实时定量聚合酶链反应(Real-timePCR)和蛋白免疫印记杂交(Westernblot)方法检测16例非侵袭垂体腺瘤及52例侵袭性垂体腺瘤组织中CTGF的表达水平。结果 52例侵袭性垂体腺瘤和16例非侵袭性垂体腺瘤均可见CTGF的表达。在mRNA和蛋白水平上,侵袭性垂体腺瘤较非侵袭性垂体腺瘤CTGF表达高,且CTGF的表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论 CTGF在侵袭性垂体腺瘤中表达明显高于非侵袭性垂体腺瘤,且与肿瘤的大小相关。 展开更多
关键词 侵袭性垂体腺 结缔组织生长因子 实时定量聚合酶链反应 蛋白免疫印记杂交
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大鼠弥漫性轴突损伤后神经丝68蛋白水平减少 被引量：5
6
作者 亓树彬 孟宇宏 许百男 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2003年第1期47-50,共4页
目的　通过检测大鼠弥漫性轴突损伤 (DAI)后神经丝蛋白 68(NF68)水平 ,探讨弥漫性轴突损伤的病理机制。方法　用一种对大鼠头颅旋转装置致伤引发大鼠DAI。Sprague Dawley(SD)大鼠 1 8只随机分 3组 (30min ,2 4 ,72h组 ) ,每组 6只 ,在... 目的　通过检测大鼠弥漫性轴突损伤 (DAI)后神经丝蛋白 68(NF68)水平 ,探讨弥漫性轴突损伤的病理机制。方法　用一种对大鼠头颅旋转装置致伤引发大鼠DAI。Sprague Dawley(SD)大鼠 1 8只随机分 3组 (30min ,2 4 ,72h组 ) ,每组 6只 ,在不同时间点取脑白质、海马、胼胝体和脑干标本进行NF68印记杂交 (Westernblot) ,检查神经丝蛋白 68水平。结果　Westernblot看到对照动物NF68水平没有变化 ,而损伤动物明显NF68的丢失 ,特别是脑干。NF68蛋白水平减少在损伤后30min即出现直到损伤后 72h。在NF68丢失的同时伴有 31、 42 7和 52Kda低分子量蛋白条带的出现 ,在 2 4h最明显。结论　NF68降解是由病理性钙蛋白酶激活引起的。损伤后 2 展开更多
关键词 大鼠 弥漫性轴突损伤 神经丝68蛋白 蛋白质印记杂交 钙蛋白酶 颅脑损伤
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