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硫酸软骨素蛋白多糖在视网膜变性大鼠中的表达
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作者 黄玉苗 高朋芬 杨丽霞 《中华眼视光学与视觉科学杂志》 CAS 2012年第5期276-280,共5页
目的研究硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)在碘酸钠(NaIO3)诱导的视网膜色素上皮(RPE)细胞变性大鼠中的表达情况。方法实验研究。24只Sprauge—Dawley(SD)大鼠随机分为4组,正常对照组、造模7d组、造模14d组、造模28d组,每组6只。造... 目的研究硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)在碘酸钠(NaIO3)诱导的视网膜色素上皮(RPE)细胞变性大鼠中的表达情况。方法实验研究。24只Sprauge—Dawley(SD)大鼠随机分为4组,正常对照组、造模7d组、造模14d组、造模28d组,每组6只。造模组腹腔注射3%NaIO3(100mg/kg);取眼球做病理检查.苏木索一伊红(HE)染色及细胞凋亡检测,验证视网膜变性动物模型的建立;免疫荧光法观察视网膜变性大鼠视网膜上CSPGs表达的时空规律;逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)法检测CSPGs多功能蛋白聚糖(Versican)mRNA的表达情况;免疫组织化学法观察视网膜上小胶质细胞表达的巨噬细胞特异性抗原CD68的分布特点。多组比较采用单因素方差分析,两样本问比较采用独立样本t检验。结果注射NaIO3后,模型大鼠视网膜出现变性改变,且光感受器发生渐进性凋亡,造模7、14、28d组凋亡率分别为f21.0±3.5)%、(32.3±2.3)%、(41.7±2.6)%,各组间差异有统计学意义(F=205.27,P〈0.01)。造模7d组.CS-56、CD68在脉络膜、视锥视杆层、内核层、节细胞层表达;造模14d组,CS-56、CD68进一步出现在外核层;造模28d组,CSPGs继续迁移到外丛状层。随造模时间延长.各层荧光表达逐渐增强,CD68在视网膜各层的表达也明显增多,强度分别为:1.33±0.52、2.67±0.82、4.00±1.10和7.17±1.33,各组间差异有统计学意义(F=38.45,P〈0.01)。造模组VersicanmRNA表达(1.02±0.06)显著高于正常对照组f0.23±0.02),差异有统计学意义(t=-26.05,P〈0.01)。结论在碘酸钠诱导的视网膜变性动物模型中,随时间延长CSPGs表达范围扩大,表达量增加,并与小胶质细胞分布在大致相同区域,提示CSPGs可能来源于小胶质细胞。 展开更多
关键词 蛋白硫酸软骨素类 碘酸盐 视网膜炎 色素性 小神经胶质细胞
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硫酸软骨素蛋白多糖对周围神经有序再生作用的研究进展 被引量:4
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作者 何富林 杨东 朱庆棠 《中华创伤骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1097-1100,共4页
周围神经损伤后再生常会出现错配、卷曲及迷乱等新生轴突无序再生的情况,这是限制周围神经损伤后有效再生的重要原因之一,因此实现周围神经损伤后的有序再生,有助于提高再生的效率与功能恢复。硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)作为传统的轴突... 周围神经损伤后再生常会出现错配、卷曲及迷乱等新生轴突无序再生的情况,这是限制周围神经损伤后有效再生的重要原因之一,因此实现周围神经损伤后的有序再生,有助于提高再生的效率与功能恢复。硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)作为传统的轴突再生抑制性分子,在周围神经系统正常发育过程中具有重要作用。本文从CSPGs的分类、作用特点及其时空分布等方面来探讨其在促周围神经有序再生过程中所扮演的角色及应用转化的可能性,有助于增加轴突再生数量的神经移植物的设计,进一步指导周围神经移植物的仿生构建,从而促进周围神经损伤后的有序及有效再生。 展开更多
关键词 蛋白硫酸软骨素类 周围神经 神经再生
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细胞周期素依赖性激酶抑制剂olomoucine对大鼠脊髓损伤后轴突再生微环境的影响及其意义 被引量:7
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作者 田代实 王伟 +4 位作者 徐运兰 喻志源 谢敏杰 王萍 张贵斌 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第13期901-905,共5页
目的探讨细胞周期素依赖激酶抑制剂olomouc ine对脊髓损伤后轴突再生微环境的影响及意义。方法建立脊髓半切损伤模型,实验大鼠随机分为假手术组、损伤对照组和olomouc ine干预组,采用W estern印迹分析脊髓损伤后细胞周期相关蛋白的表达... 目的探讨细胞周期素依赖激酶抑制剂olomouc ine对脊髓损伤后轴突再生微环境的影响及意义。方法建立脊髓半切损伤模型,实验大鼠随机分为假手术组、损伤对照组和olomouc ine干预组,采用W estern印迹分析脊髓损伤后细胞周期相关蛋白的表达;应用免疫荧光技术检测损伤区域胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)以及生长相关蛋白43(GAP-43)的表达;采用改良的Gale联合评分法对大鼠瘫痪后肢进行运动功能评估。结果假手术组细胞周期素(cyc lin)A、B1、E和增殖细胞核抗原以及GFAP、CSPG和GAP-43的表达较弱;脊髓损伤后cyc linA、cyc linB1、cyc linE和细胞周期素(PCNA)等细胞周期相关蛋白的表达显著增高,星形胶质细胞明显活化增殖,GFAP和CSPG的表达明显增强(均P<0.01),GAP-43的表达高于假手术组(P<0.05);给予olomouc ine干预后,细胞周期相关蛋白的表达显著下调,损伤区域星形胶质细胞的增殖和胶质瘢痕形成受到抑制,胶质瘢痕产生的CSPG的表达明显减少,GAP-43的表达显著增高,瘫痪后肢的运动功能明显改善(均P<0.05)。结论olomouc ine可通过调控细胞周期,抑制脊髓损伤后胶质细胞的活化增殖和胶质瘢痕的形成,减少抑制因子CSPG的表达以及上调有利于轴突再生的GAP-43的表达,改善损伤后轴突再生微环境最终促进瘫痪后肢的运动功能恢复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 蛋白硫酸软骨素类 GAP-43蛋白 细胞周期
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人Lumican基因转基因鼠模型的建立 被引量:4
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作者 宋彦铮 赵燕燕 +2 位作者 张丰菊 于艳秋 马玲 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期37-41,共5页
目的建立携带突变位点(cDNA596T〉C)的人Lumican(LUM)基因的转基因鼠模型。方法实验研究。利用基因重组技术,将人工合成的LUM基因第二外显子596位碱基T替换为C,再克隆到质粒pRP.Des3d的多克隆位点,构建pRP.EX3d—EFlA〉LUM/f... 目的建立携带突变位点(cDNA596T〉C)的人Lumican(LUM)基因的转基因鼠模型。方法实验研究。利用基因重组技术,将人工合成的LUM基因第二外显子596位碱基T替换为C,再克隆到质粒pRP.Des3d的多克隆位点,构建pRP.EX3d—EFlA〉LUM/flag〉IRES/hrGFP质粒载体;然后用显微注射法将其转至BDFl小鼠受精卵雄原核中,存活的受精卵再移入美国癌症研究所(ICR)假孕雌鼠输卵管内,得到可表达LUM基因的F0代转基因小鼠C57一TgN(LUM)CCMU。经PCR、免疫印迹杂交法分析子代鼠中基因整合及表达的情况。结果得到31只新生仔鼠,PCR检测有6只LUM阳性转基因鼠,免疫印迹杂交法证明转基因阳性鼠转入的目的基因片段确实合成了相应蛋白质。稳定遗传3代,共获得128只仔鼠,经PCR检测其中有68只为LUM阳性,阳性率达53.13%。结论携带突变位点(cDNA596T〉C)的LUM基因的转基因鼠模型构建成功,为进一步探索LUM基因突变对病理性近视眼的发生发展及细胞外基质成分的影响提供了重要的研究平台。 展开更多
关键词 硫酸角质素 蛋白硫酸软骨素类 小鼠 转基因 模型 动物 近视 退行性
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Lumican转基因小鼠形觉剥夺性近视眼模型眼球生物学参数变化 被引量:7
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作者 孙明甡 宋彦铮 +2 位作者 张丰菊 陶俊 刘院斌 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期850-855,共6页
目的 探讨人突变Lumican基因转基因小鼠形觉剥夺性近视模型的眼球生物学参数的变化,比较人Lumican基因突变与形觉剥夺对小鼠眼轴、屈光度数及巩膜发育的影响.方法 实验研究.由50只人突变Lumican基因转基因鼠(10日龄)中随机选取34只,以... 目的 探讨人突变Lumican基因转基因小鼠形觉剥夺性近视模型的眼球生物学参数的变化,比较人Lumican基因突变与形觉剥夺对小鼠眼轴、屈光度数及巩膜发育的影响.方法 实验研究.由50只人突变Lumican基因转基因鼠(10日龄)中随机选取34只,以及46只同日龄野生C57BL/6J小鼠中随机选取32只,以眼睑缝合法建立单眼形觉剥夺模型,其余转基因小鼠(16只)及野生鼠(14只)不作处理.依据眼别将其分为6组:转基因小鼠未处理组(A组,16只,32只眼);转基因小鼠形觉剥夺眼组(B组,34只,34只眼);转基因小鼠形觉剥夺对侧眼组(C组,34只,34只眼);野生小鼠未处理组(D组,14只,28只眼);野生小鼠形觉剥夺眼组(E组,32只,32只眼);野生小鼠形觉剥夺对侧眼组(F组,32只,32只眼).各组小鼠8周龄(56日龄)时经复方托吡卡胺散瞳后行检影验光,测量双眼屈光度数,并以等效球镜度数表示.脱颈法处死小鼠后摘取眼球组织,行离体眼轴测量,后分离巩膜组织,实时荧光定量PCR(qPCR)技术于RNA水平上检测各组样本巩膜组织中Lumican基因表达情况.采用单因素方差分析联合LSD检验比较转基因小鼠与野生小鼠中形觉剥夺眼、对侧眼和未处理眼的基因水平表达量、屈光度及眼轴结果,转基因小鼠与野生小鼠间比较采用两独立样本t检验进行统计学分析.结果 巩膜组织中Lumican基因表达量在转基因小鼠形觉剥夺眼中表达增加,较对侧眼及未处理眼差异具有统计学意义(F=6.262;P<0.05);转基因小鼠形觉剥夺眼、对侧眼较野生小鼠相应眼表达也明显增加,差异具有统计学意义(t=4.772,2.218;P<0.05).形觉剥夺46 d后,转基因小鼠和野生小鼠形觉剥夺眼屈光度分别为(-0.38±1.10)和(0.14±1.26)D,相对于对侧眼及未处理眼差异有统计学意义(F=9.525,10.067;P<0.01);平均眼轴长度分别为(3.28±0.07)和(3.24±0.09) mm,和自身对照眼及正常对照眼相比差异有统计学意义(F=7.183,6.671;P<0.05).结论 人突变Lumican基因转基因小鼠形觉剥夺眼屈光度向近视方向漂移,眼轴增长,巩膜组织中Lumican基因表达较野生鼠明显升高,较对侧眼也有所升高.Lumican基因可能参与了病理性近视的形成机制,提示“基因+环境”双重因素对近视发生发展过程中可能造成交互影响. 展开更多
关键词 近视 退行性 硫酸角质素 蛋白硫酸软骨素类 小鼠 转基因 视觉障碍 屈光 轴长度
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