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RON受体酪氨酸激酶的过表达对结肠癌细胞移动/浸润能力的作用 被引量：2
1
作者 杜卫东 何超 +6 位作者 王达 黄学锋 毛伟芳 胡文献 马建军 刘强 张行 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期837-841,共5页
目的:研究酪氨酸激酶受体RON过表达对结肠癌细胞移动/浸润能力的影响。方法:将携有野生型RON(wt-RON)cDNA的质粒pDR2-wt-RON转染入结肠癌细胞株RKO,挑选稳定转染克隆,以过河实验和体外跨室趋化运动能力实验检测两者的移动/浸润能力;然后... 目的:研究酪氨酸激酶受体RON过表达对结肠癌细胞移动/浸润能力的影响。方法:将携有野生型RON(wt-RON)cDNA的质粒pDR2-wt-RON转染入结肠癌细胞株RKO,挑选稳定转染克隆,以过河实验和体外跨室趋化运动能力实验检测两者的移动/浸润能力;然后以siRNA敲除,比较两者的移动/浸润能力,以Western印迹检测E-cadherin表达的变化。结果:转染了wt-RON并且高表达后,RKO细胞的趋化移动能力明显高于未转染组(P<0.01)。过河实验,转染组过河时间为(42.50±4.12)h,而未转染组与载体对照组分别为(69.50±2.52)h与(70.50±3.42)h(P<0.01);而基因干扰后,趋化移动能力降低(P<0.01)。过河实验,RNAi组过河时间为(82.50±3.42)h,与未转染组(79.00±2.58)h相仿(P>0.05),psiRm-RON组(51.50±4.12)h(P<0.01)。转染wt-RON后,E-cadherin表达低于未转染组(P<0.05)。结论:wt-RON的高表达可以降低E-cadherin表达,降低肿瘤细胞间的黏附性,增加结肠癌细胞RKO的移动/浸润能力。实施RNAi(RNA interference)可降低RKO的移动/浸润能力。提示RON酪氨酸激酶受体的高表达可能是结肠癌浸润转移的机制之一。 展开更多
关键词 蛋白质体酪氨酸激酶 小干扰RNA 钙粘着糖蛋白类 结直肠肿瘤 肿瘤浸润 细胞运动
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受体型酪氨酸激酶RONΔ160对NIH-3T3细胞生长和移动浸润能力的作用 被引量：3
2
作者 邓晶 王晓炜 +2 位作者 劳伟峰 王达 黄学锋 《全科医学临床与教育》 2007年第4期301-304,F0003,F0002,共6页
目的研究受体型酪氨酸激酶RONΔ160对3T3细胞生长和移动浸润能力的作用。方法NIH-3T3细胞转染质粒pDR2-RONΔ160,建立稳定表达RONΔ160的3T3-RONΔ160细胞株;免疫沉淀法检测细胞RONΔ160的酪氨酸磷酸化;倒置显微镜观察细胞形态变化;软... 目的研究受体型酪氨酸激酶RONΔ160对3T3细胞生长和移动浸润能力的作用。方法NIH-3T3细胞转染质粒pDR2-RONΔ160,建立稳定表达RONΔ160的3T3-RONΔ160细胞株;免疫沉淀法检测细胞RONΔ160的酪氨酸磷酸化;倒置显微镜观察细胞形态变化;软琼脂培养法观察RONΔ160对NIH-3T3细胞生长能力的作用;体外跨室趋化运动实验检测RONΔ160对NIH-3T3细胞移动浸润能力的作用。结果成功建立3T3-RONΔ160细胞株,western blot证明其稳定表达RONΔ160蛋白;免疫沉淀试验结果显示RONΔ160具有自身酪氨酸磷酸化;软琼脂生长实验示转染组细胞生长克隆数为146.00±3.61,而未转染组和载体对照组分别为11.67±1.15和12.67±2.52,转染组与未转染组、载体对照组分别比较,差异均有统计学意义(t分别=51.60、151.19,P均<0.05);体外跨室趋化运动实验结果示转染组穿膜细胞数为458.50±4.95,而未转染组和载体对照组分别为20.00±5.66和21.50±4.95,转染组与未转染组、载体对照组分别比较,差异均有统计学意义(t分别=58.47、437.00,P均<0.05)。结论表达受体型酪氨酸激酶RONΔ160可使NIH-3T3细胞形态明显变化,并显著增强NIH-3T3细胞的生长能力和移动浸润能力。 展开更多
关键词 蛋白质体酪氨酸激酶 细胞生长 肿瘤浸润
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RON变异体RONΔ170对自身酪氨酸磷酸化变异体RONΔ160的显性抑制作用
3
作者 邓晶 张敷彪 +2 位作者 劳伟峰 王达 黄学锋 《全科医学临床与教育》 2009年第5期498-500,F0002,共4页
目的研究受体型酪氨酸激酶RON的变异体RONΔ170对RON的自身酪氨酸磷酸化变异体RONΔ160的作用。方法NIH-3T3和3T3-RONΔ160细胞转染质粒pcDNA3.1-RONΔ170,建立3T3-RONΔ170和3T3-RONΔ160Δ170细胞株;流式细胞仪检测RONΔ170蛋白的表达... 目的研究受体型酪氨酸激酶RON的变异体RONΔ170对RON的自身酪氨酸磷酸化变异体RONΔ160的作用。方法NIH-3T3和3T3-RONΔ160细胞转染质粒pcDNA3.1-RONΔ170,建立3T3-RONΔ170和3T3-RONΔ160Δ170细胞株;流式细胞仪检测RONΔ170蛋白的表达;免疫沉淀法检测RON的酪氨酸磷酸化;软琼脂培养法观察RONΔ170对3T3和3T3-RONΔ160细胞生长能力的作用。结果成功建立3T3-RONΔ170和3T3-RONΔ160Δ170细胞株,流式细胞仪胞膜蛋白检测法证明其稳定表达RONΔ170蛋白;免疫沉淀试验结果显示RONΔ170能明显抑制RONΔ160的RON酪氨酸磷酸化;软琼脂生长实验示3T3、3T3-RONΔ160、3T3-RONΔ170和3T3-RONΔ160Δ170细胞生长克隆数比较,差异有统计学意义(t=7.93,P<0.05)。结论受体型酪氨酸激酶RON的变异体RONΔ170无酪氨酸磷酸化功能,且具有显性抑制变异体特性。 展开更多
关键词 蛋白质体酪氨酸激酶 细胞生长 肿瘤浸润 显性抑制
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RON变异体RONA1-70对结肠癌细胞株HT29的抑制作用
4
作者 杨晓平 蒋祖福 +1 位作者 卜建国 劳伟峰 《浙江医学》 CAS 2010年第4期464-467,共4页
目的研究受体型酪氨酸激酶RON的剪切变异体△170对结肠癌细胞株HT29生长和移动浸润能力的抑制作用。方法HT29细胞转染质粒pcDNA3．1-RON△170，建立稳定表达RON△170的HT29-RONA170细胞株；免疫沉淀法检测细胞RON的酪氨酸磷酸化；软琼... 目的研究受体型酪氨酸激酶RON的剪切变异体△170对结肠癌细胞株HT29生长和移动浸润能力的抑制作用。方法HT29细胞转染质粒pcDNA3．1-RON△170，建立稳定表达RON△170的HT29-RONA170细胞株；免疫沉淀法检测细胞RON的酪氨酸磷酸化；软琼脂培养法观察RON△170对HT29细胞生长能力的作用；体外跨室趋化运动实验检测RONA170对HT29细胞移动浸润能力的作用。结果成功建立HT29-RONA170细胞株，流式细胞仪胞膜蛋白检测法证明其稳定表达RONA170蛋白；免疫沉淀试验结果显示RONA170能抑制HT29的RON酪氨酸磷酸化；软琼脂生长实验示转染组细胞生长克隆数为33．0±6．0，而未转染组和载体对照组分别为55．7±65和49．3±87（P〈0．01）；体外跨室趋化运动实验结果示转染组穿膜细胞数为231．5±27．6，而未转染组和载体对照组分别为3845±23．3和360．0±156（P〈0.01）。结论受体型酪氨酸激酶RON的变异体RONA170可抑制HT29细胞生长，并显著抑制其移动浸润能力，具有显性抑制变异体特性。 展开更多
关键词 蛋白质体酪氨酸激酶 细胞生长 肿瘤浸润
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