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Western blot检测家兔动脉组织蛋白质表达条件的优化 被引量：7
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作者 马艳琴 孙子龙 +2 位作者 王彬 郭超 陈鹏晓 《农学学报》 2011年第4期52-56,共5页
蛋白质免疫印记技术是研究和分析蛋白质的重要手段,由于其步骤繁杂、影响因素众多,常出现背景噪音高、非特异条带多、拖尾等问题,严重影响后续蛋白质定量分析。为建立最佳的检测家兔动脉组织中蛋白质表达的蛋白质免疫印记技术实验条件,... 蛋白质免疫印记技术是研究和分析蛋白质的重要手段,由于其步骤繁杂、影响因素众多,常出现背景噪音高、非特异条带多、拖尾等问题,严重影响后续蛋白质定量分析。为建立最佳的检测家兔动脉组织中蛋白质表达的蛋白质免疫印记技术实验条件,以家兔动脉组织血管细胞粘附分子-1为目标蛋白,从电泳条件、抗体浓度、抗体孵育时间、温度及方法、免疫显色方法等方面进行了改良,成功建立了快速、灵敏、特异的蛋白质免疫印记技术体系;并比较了3种常用的酶免疫显色技术:3,3’-二氨基联苯胺(3,3’-diaminobenzidine,DAB)显色、增强化学发光法(enhanced chemil luminescence,ECL)X光片曝光及ECL化学发光冷却电感耦合成像系统(cooled charged-coupled device,CCD)成像的敏感性。结果表明ECL化学发光法比DAB显色法敏感性高出2～10倍,其中CCD系统敏感性高于X光片4倍,且操作简便,是最理想的检测方法。 展开更多
关键词 蛋白质免疫印记技术 聚丙烯酰胺凝胶电泳 增强化学发光法 冷却电感耦合成像系统
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bFGF不能调节人结膜下Tenon’s囊成纤维细胞表型改变
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作者 谢冰 叶纹 +1 位作者 钟一声 沈玺 《细胞生物学杂志》 CSCD 2005年第5期549-553,共5页
探讨了碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)能否对人结膜下Tenon’s囊成纤维细胞(humansubconjunctivalTenon’scapsulefibroblast,HTCF)表型改变起诱导作用。在5例白内障手术中取人结膜下Tenon’s囊组织块培养... 探讨了碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)能否对人结膜下Tenon’s囊成纤维细胞(humansubconjunctivalTenon’scapsulefibroblast,HTCF)表型改变起诱导作用。在5例白内障手术中取人结膜下Tenon’s囊组织块培养成纤维细胞。用不同浓度bFGF(0、5、10、20ng/ml)诱导HTCF48h。免疫细胞化学技术、蛋白质印记免疫技术检测其平滑肌肌动蛋白(α-smoothmuscleactin,α-SMA)表达与正常HTCF有否差异。实验结果表明用不同浓度(0￣20ng/ml)bFGF诱导HTCF48h,虽能明显促进HTCF细胞的生长,但均不能上调细胞内α-SMA的表达。在0￣20ng/ml范围内,体外用bFGF诱导HTCF48h,不能诱导其改变为肌成纤维细胞。 展开更多
关键词 人结膜 Tenon’S囊成纤维细胞 细胞表型 碱性成纤维细胞生长因子 蛋白质印记免疫技术 肌成纤维细胞
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