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蛋白酶抗性人睫状神经营养因子突变体基因的构建及其在巴斯德毕赤酵母中的表达 被引量:3
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作者 赵洪亮 薛冲 +3 位作者 熊向华 张伟 朱厚础 刘志敏 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期394-397,共4页
AX15是一种比天然睫状神经营养因子具有更高的生物学活性、更好的稳定性和可溶性的hCNTF突变体。在巴斯德毕赤酵母中表达时AX15易发生降解。氨基酸序列分析表明降解位于由 12和 13位氨基酸残基组成的双碱性氨基酸之后。根据KEX2蛋白酶... AX15是一种比天然睫状神经营养因子具有更高的生物学活性、更好的稳定性和可溶性的hCNTF突变体。在巴斯德毕赤酵母中表达时AX15易发生降解。氨基酸序列分析表明降解位于由 12和 13位氨基酸残基组成的双碱性氨基酸之后。根据KEX2蛋白酶的底物专一性把双碱性氨基酸从RR变为RK ,构建了KEX2抗性的AX15突变体AX15 (R13K)。AX15 (R13K)的稳定性得到了显著的提高 ,在诱导 10 0h后也未发生降解。利用超滤浓缩和凝胶过滤得到了纯度 >90 %的AX15 (R13K)。TF 1细胞存活实验表明AX15 (R13K)具有与AX15相同的生物学活性。蛋白酶抗性人睫状神经营养因子突变体可能具有更好的体内稳定性 ,在临床应用上具有潜在的优势。 展开更多
关键词 睫状神经营养因子 巴斯德毕赤酵母 蛋白酶抗性
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一些化学和物理因素对羊瘙痒因子263K蛋白酶抗性的影响
2
作者 姚海兰 韩俊 +7 位作者 张宝云 高建梅 郭燕军 张瑾 肖新莉 聂凯 蔡昌学 董小平 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期40-45,共6页
朊病毒 (prion)具有超强的理化因素抵抗能力 ,可抵抗常规物理和化学因子对其感染性的灭活。为了研究不同理化因素对PrPSc蛋白酶抗性的影响 ,采用不同浓度的NaOH、NaOCl、SDS、温度变化以及 3%SDS与温度变化联合处理羊瘙痒因子 2 6 3K ,... 朊病毒 (prion)具有超强的理化因素抵抗能力 ,可抵抗常规物理和化学因子对其感染性的灭活。为了研究不同理化因素对PrPSc蛋白酶抗性的影响 ,采用不同浓度的NaOH、NaOCl、SDS、温度变化以及 3%SDS与温度变化联合处理羊瘙痒因子 2 6 3K ,再经蛋白酶K(ProteinaseK ,PK)消化 ,通过Westernblot检测观测PrPSc的PK抗性。结果发现 ,上述几种理化因素对羊瘙痒因子 2 6 3K的PK抗性有不同程度的破坏作用。NaOH浓度在 0 0 5mol/L以上 ,NaOCl游离氯含量在 0 1 %以上 ,温度在 1 2 1℃以上都能使PrPSc的PK抗性消失 ;而 1 %~ 5 %SDS不能使PrPSc的PK抗性完全消失 ,3%SDS与温度的联合作用可有效地破坏PK抗性 ,同时使所需温度降低。还发现 ,在较低浓度的化学因子或温度的条件下即可出现PK抗性的破坏 ,而在较高浓度或温度处理时才出现蛋白本身的消失。这些结果提示 ,与PrPSc感染性的结果相似 ,PK抗性可受相似浓度或强度的理化因素影响 ,具有明显的浓度或强度相关性 。 展开更多
关键词 朊病毒 蛋白酶抗性 温度 化学因子 传染海绵状脑病
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ADAM10处理增强铜离子诱导的重组朊蛋白的蛋白酶抗性
3
作者 陈操 吕燕 +1 位作者 石琦 董小平 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2016年第2期113-116,共4页
目的 分析ADAM10对铜离子诱导后的PrP蛋白的剪切特点.方法 常规方法表达、纯化人PrP全长蛋白(aa 23-230),利用氯化铜对纯化后的PrP蛋白进行诱导.用不同浓度的ADAM10对PrP蛋白进行处理,检测诱导后全长蛋白及剪切片段的PK抗性.结果 重组... 目的 分析ADAM10对铜离子诱导后的PrP蛋白的剪切特点.方法 常规方法表达、纯化人PrP全长蛋白(aa 23-230),利用氯化铜对纯化后的PrP蛋白进行诱导.用不同浓度的ADAM10对PrP蛋白进行处理,检测诱导后全长蛋白及剪切片段的PK抗性.结果 重组人PrP蛋白经Cu2诱导后具有部分抵抗PK消化的特点.Cu2+诱导后的PrP蛋白可被ADAM10剪切,具有剂量依赖性.ADAM10对Cu2+诱导的PrP蛋白处理后抵抗PK消化的能力明显加强.结论 ADAM10可以剪切Cu2+诱导的PrP蛋白,同时增加了处理后PrP蛋白的PK抗性. 展开更多
关键词 蛋白 铜离子 去整合素金属蛋白酶10 蛋白酶抗性 剪切
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基于分子结构评价的Bacillus subtilis β-1,4-内切木聚糖酶胰蛋白酶抗性的理性设计 被引量:1
4
作者 虞晓丹 吴秀秀 +2 位作者 姚冬生 刘大岭 谢春芳 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期80-88,共9页
饲料用酶在饲喂过程中,不可避免地会受到消化道中蛋白酶的破坏而令其使用效率受到影响,因此,饲料酶的蛋白酶抗性是其十分重要的性质之一。基于酶反应原理与计算化学理论对Bacillus subtilis 168β-1,4-内切木聚糖酶(Xyn A)的胰蛋白酶抗... 饲料用酶在饲喂过程中,不可避免地会受到消化道中蛋白酶的破坏而令其使用效率受到影响,因此,饲料酶的蛋白酶抗性是其十分重要的性质之一。基于酶反应原理与计算化学理论对Bacillus subtilis 168β-1,4-内切木聚糖酶(Xyn A)的胰蛋白酶抗性进行理性设计,最终得到三个突变体——Xyn A^(R121C)、Xyn A^(R121C/K98Q)和Xyn A^(K39I)。酶学性质分析显示Xyn A^(R121C)和Xyn A^(R121C/K98Q)与野生型(Xyn A)的最适反应温度均为60℃,Xyn A^(K39I)为40℃;突变体酶与野生型酶的最适p H都是6.0;人工肠液(p H 6.8,10 mg/ml胰蛋白酶溶液)处理野生型及其突变体后,Xyn A^(R121C/K98Q)和Xyn A^(R121C)的残留酶活力均明显比野生型高,它们的半衰期分别是野生型的2.02倍和1.52倍,Xyn A^(K39I)在胰蛋白酶溶液中的半衰期为90min,比野生型缩短了37 min。 展开更多
关键词 设计 木聚糖酶 蛋白酶抗性 酶稳定
原文传递
来源于链霉菌Streptomyces fradiae var.k11的抗蛋白酶甘露聚糖酶的基因克隆与鉴定 被引量:7
5
作者 邱振华 石鹏君 +1 位作者 刘素纯 姚斌 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2010年第4期114-120,共7页
通过设计简并引物和TAIL-PCR的方法从Streptomyces fradiaevar.k11中克隆得到一个β-l,4-甘露聚糖酶编码基因manS221,其全长1 359 bp,编码452个氨基酸,前端28个氨基酸为预测信号肽。构建表达载体pET-28a-manS221并转化大肠杆菌BL2l(DE3)... 通过设计简并引物和TAIL-PCR的方法从Streptomyces fradiaevar.k11中克隆得到一个β-l,4-甘露聚糖酶编码基因manS221,其全长1 359 bp,编码452个氨基酸,前端28个氨基酸为预测信号肽。构建表达载体pET-28a-manS221并转化大肠杆菌BL2l(DE3),特异性表达manS221基因,重组的甘露聚糖酶通过Ni-NTA亲和层析纯化。酶学性质分析表明,重组甘露聚糖酶最适温度为52℃,最适pH值为6.0,在pH5.0~9.0的范围内有良好的稳定性,并且对中性蛋白酶具有高抗性。这些优良的性质使得ManS221在食品、饲料和纺织工业生产中具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 链霉菌Streptomyces fradiae var.k11 甘露聚糖酶 manS221基因 蛋白酶抗性
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细胞浆中PrP蛋白的表达及其细胞毒性作用的研究 被引量:1
6
作者 王新 董辰方 +9 位作者 石琦 石崧 王桂荣 雷艳君 安润 徐琨 姜慧英 韩俊 赵玉军 董小平 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期277-281,共5页
为了探讨在胞浆中表达的PrP的理化特征以及对细胞活性的影响,我们构建了胞浆型PrP(CytoPrP)真核表达质粒,瞬时转染人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,通过蛋白酶敏感性实验检测CytoPrP及其蛋白酶抗性,利用MTT和Trypan Blue细胞计数检测CytoPrP... 为了探讨在胞浆中表达的PrP的理化特征以及对细胞活性的影响,我们构建了胞浆型PrP(CytoPrP)真核表达质粒,瞬时转染人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,通过蛋白酶敏感性实验检测CytoPrP及其蛋白酶抗性,利用MTT和Trypan Blue细胞计数检测CytoPrP的细胞毒性作用。结果显示,CytoPrP在胞浆内的存在受蛋白酶抑制剂的控制;与野生型PrP相比,CytoPrP具有相对较强的蛋白酶K(PK)抗性。MTT和细胞计数实验均显示,Cyto-PrP的存在可诱导明显的细胞毒性效应,而CytoPrP的细胞毒性作用受蛋白酶抑制剂含量的影响,呈剂量依赖关系。上述结果为研究CytoPrP在朊病毒病的发病机制中的意义提供了一定的科学数据。 展开更多
关键词 朊病毒 胞浆PrP 细胞毒作用 蛋白酶抗性
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淀粉样前体蛋白的原核表达、纯化及抗血清的制备和应用 被引量:1
7
作者 石琦 韩俊 +4 位作者 高晨 李锋 张宝云 周玉玲 董小平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期258-261,共4页
提取SH-SY5Y细胞的总RNA并合成单链cDNA,用PCR方法扩增出APP基因羧基端片段.测序后克隆至表达载体,在大肠杆菌M15中分别表达APP-C100和GST-APP-C100融合蛋白,纯化的GST-APP-C100分子量约为38kD,APP-C100约为18kD,此外在APP-C100纯化产... 提取SH-SY5Y细胞的总RNA并合成单链cDNA,用PCR方法扩增出APP基因羧基端片段.测序后克隆至表达载体,在大肠杆菌M15中分别表达APP-C100和GST-APP-C100融合蛋白,纯化的GST-APP-C100分子量约为38kD,APP-C100约为18kD,此外在APP-C100纯化产物中还存在有超过97kD的聚合物.体外蛋白酶消化实验显示纯化的GST-APP-C100和APP-C100单体对蛋白酶K消化敏感,而APP-C100聚合物具有抵抗蛋白酶消化能力.以GST-APP-C100免疫实验用兔后得到的APP抗血清经Western印迹鉴定可特异性识别重组及细胞内源性APP. 展开更多
关键词 淀粉样前体蛋白 原核表达 蛋白酶抗性 多克隆
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饲用酶蛋白的理性设计及其改良技术
8
作者 刘小芸 姚冬生 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期46-52,共7页
酶作为天然的生物催化剂,具有高催化效率和高底物选择特异性的特点,在工农业生产上有重要的应用价值。通过对酶蛋白的改造是获得优良性质酶蛋白的重要来源。针对饲用酶应用的特点,从酶蛋白理性分子设计策略及其技术方法角度综述了酶的... 酶作为天然的生物催化剂,具有高催化效率和高底物选择特异性的特点,在工农业生产上有重要的应用价值。通过对酶蛋白的改造是获得优良性质酶蛋白的重要来源。针对饲用酶应用的特点,从酶蛋白理性分子设计策略及其技术方法角度综述了酶的热稳定性及pH稳定性改造,蛋白酶抗性改造和酶蛋白的多性质改造等,以期为相关实验研究提供技术参考。 展开更多
关键词 分子设计 热稳定 pH稳定 蛋白酶抗性 糖基化
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羊瘙痒因子263K毒株感染金黄地鼠后鼠脑组织中检出PrP-res蛋白及其神经病理学研究 被引量:26
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作者 孙宪锋 董小平 +4 位作者 张宝云 侯星生 胥爱源 赵同兴 洪涛 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期48-53,共6页
羊瘙痒病是累及山羊及绵羊的可传播海绵状脑病。为了观察羊瘙痒因子 (Scrapie)的病原特征及病理组织改变特点 ,将羊瘙痒因子 2 6 3K毒株颅内接种至金黄地鼠。经过 81~ 110天的潜伏期 ,89%的动物发病 (17/19只 )。对发病地鼠的神经病理... 羊瘙痒病是累及山羊及绵羊的可传播海绵状脑病。为了观察羊瘙痒因子 (Scrapie)的病原特征及病理组织改变特点 ,将羊瘙痒因子 2 6 3K毒株颅内接种至金黄地鼠。经过 81~ 110天的潜伏期 ,89%的动物发病 (17/19只 )。对发病地鼠的神经病理学检测发现 ,海绵状空泡变性的检出率为 5 9% ,淀粉样斑的检出率为 17 6 %。利用免疫组化和蛋白酶消化后的Westernblotting检测证实 ,10 0 %的发病地鼠的脑组织中都出现蛋白酶抗性朊蛋白 (PrP res)。17只发病地鼠脑组织提取物中 ,PrP res的泳动位置和分子量大小完全一致 ,出现两条分子量在 2 5kD~ 31kD的反应带。尝试应用快速玻片印迹法检测病变组织中的PrP res,结果显示 ,与常规固定包埋切片的免疫组化检出效果相似。这提示脑组织印片法可成为临床检测克 雅氏病 (Creutzfeldt Jacobdisease ,CJD)患者脑组织活检标本中PrP res的快速、有效的方法。羊瘙痒因子 2 6 3K成功感染金黄地鼠再次证明 ,金黄地鼠是TSE感染因子良好的动物模型 ,发病率高 ,潜伏期短 ,发病动物PrP res的检出率明显高于典型病理改变的检出率。新生成的PrP res的电泳类型与接种的TSE因子有关 ,与宿主的个体差异无关 ,提示TSE感染因子的确存在“株”的现象。 展开更多
关键词 羊瘙羊因子263K 可传播海棉状脑病 神经病理学分析 蛋白酶抗性蛋白 羊瘙痒病
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梅花鹿朊蛋白核心片段的基因克隆与高效表达 被引量:1
10
作者 刘东 卢士英 +7 位作者 李岩松 李兆辉 王光明 张媛媛 周玉 宋杰 柳增善 任洪林 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第3期78-80,共3页
本试验根据梅花鹿朊蛋白基因序列设计引物,利用PCR的方法从梅花鹿基因组DNA中扩增朊病毒蛋白酶抵抗区域PrPres,将该片段分别与表达载体pET-Trx和pET-His连接,构建重组表达载体pET-Trx-PrPres和pET-His-PrPres。分别将两个重组表达载体转... 本试验根据梅花鹿朊蛋白基因序列设计引物,利用PCR的方法从梅花鹿基因组DNA中扩增朊病毒蛋白酶抵抗区域PrPres,将该片段分别与表达载体pET-Trx和pET-His连接,构建重组表达载体pET-Trx-PrPres和pET-His-PrPres。分别将两个重组表达载体转入E.coli BL21(DE3)plys宿主菌中,37℃诱导4h,经SDS-PAGE分析,Trx-PrPres和His-PrPres表达量分别为38.2%和30.1%。 展开更多
关键词 梅花鹿 蛋白 朊病毒 蛋白酶抗性 原核表达
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传染性海绵状脑病污染环境引发的风险 被引量:1
11
作者 张茜茜 周向梅 +1 位作者 赵德明 杨利峰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期75-78,共4页
传染性海绵状脑病(TSEs)又称朊蛋白疾病(Prion diseases),是一组能够感染人和动物的慢性、致死性、神经退行性疾病。目前普遍认为是由体内正常的朊蛋白(PrPC)错误折叠成具有部分蛋白酶抗性的PrPSc引起的。该病可引起多种动物与人... 传染性海绵状脑病(TSEs)又称朊蛋白疾病(Prion diseases),是一组能够感染人和动物的慢性、致死性、神经退行性疾病。目前普遍认为是由体内正常的朊蛋白(PrPC)错误折叠成具有部分蛋白酶抗性的PrPSc引起的。该病可引起多种动物与人发病,如人类克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob,CJD)、格氏病(Gerstmann-Scheinker,GSS). 展开更多
关键词 传染海绵状脑病 污染环境 神经退行疾病 风险 引发 PRPSC 蛋白酶抗性 错误折叠
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蛋白质工程在饲料用酶研发中的应用研究进展 被引量:3
12
作者 涂涛 罗会颖 姚斌 《合成生物学》 CSCD 2022年第3期487-499,共13页
饲料用酶制剂作为饲料添加剂领域最为热门的研究热点之一,以其无残留、无污染、无耐药性等强势优势被广泛推广和应用,极大促进了饲料行业的健康发展。其中,饲料用酶的催化性能是决定其应用功效的核心因素,如何提高饲料用酶的综合性能是... 饲料用酶制剂作为饲料添加剂领域最为热门的研究热点之一,以其无残留、无污染、无耐药性等强势优势被广泛推广和应用,极大促进了饲料行业的健康发展。其中,饲料用酶的催化性能是决定其应用功效的核心因素,如何提高饲料用酶的综合性能是饲料用酶制剂研发过程中面临的关键科学问题之一。本文从饲料用酶的实际应用需求出发,聚焦饲料用酶的热稳定性、pH依赖性、蛋白酶抗性和催化活性等4个方面,综述了计算机辅助的蛋白质理性设计技术在饲料用酶制剂研发中的应用研究进展,介绍了用于提升饲料用酶催化性能的有效分子设计策略。通过蛋白质工程技术在关键饲料用酶制剂研发中的应用案例介绍,展示了基于结构基础的酶分子设计技术在饲料用酶制剂研发中的应用前景。与此同时,作为一种应用导向极强的饲料添加剂,利用合成生物学的思想从酶蛋白全局角度出发综合提升饲料用酶催化性能的发展方向,将推动饲料用酶制剂环境适应性分子设计的研发迈向新的台阶。 展开更多
关键词 饲料用酶 蛋白质工程 分子设计 热稳定 pH依赖 蛋白酶抗性 催化活
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F8蛋白的突变和计算机辅助结构分析
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作者 龙金凤 徐宇虹 《广东化工》 CAS 2022年第14期28-32,共5页
F8是一种新生儿Fc受体(FcRn)的单链抗体(scFv)。对F8基因进行随机突变,优化序列并筛选出对胃蛋白酶耐受的突变蛋白。应用拉马钱德兰图分析蛋白结构二面角的合理性,并利用生物膜干涉技术(BLI)评价在pH~6时对Fc Rn的高亲和力的蛋白,筛选... F8是一种新生儿Fc受体(FcRn)的单链抗体(scFv)。对F8基因进行随机突变,优化序列并筛选出对胃蛋白酶耐受的突变蛋白。应用拉马钱德兰图分析蛋白结构二面角的合理性,并利用生物膜干涉技术(BLI)评价在pH~6时对Fc Rn的高亲和力的蛋白,筛选出的突变型F8(d11)蛋白为后续蛋白的口服研究奠定了基础。 展开更多
关键词 新生儿Fc受体 生物膜干涉 拉马钱德兰图 蛋白酶抗性 突变型蛋白
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Increasing Accumulation Level of Foreign Protein in Transgenic Plants Through Protein Targeting 被引量:7
14
作者 邓朝阳 宋贵生 +1 位作者 徐军望 朱祯 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第9期1084-1089,共6页
Targeting of the synthesized polypeptide in the cells is an important research field in modern cell biology. Cowpea trypsin inhibitor (cpti) gene has been modified and a fusion protein gene (sck) was produced by fusin... Targeting of the synthesized polypeptide in the cells is an important research field in modern cell biology. Cowpea trypsin inhibitor (cpti) gene has been modified and a fusion protein gene (sck) was produced by fusing a signal peptide sequence at cpti 5' end and an endoplasm reticulum (ER) retention signal peptide at cpti3' end respectively. The signal peptide can direct the newly synthesized polypeptide into ER, while ER retention signal can make the protein retained in the ER and its derivative protein body. ELISA test indicated that the accumulation level of foreign CpTI protein in sck transgenic tobacco (Nicotiana tabacum L.) was two times higher than cpti transgenic tobaccos and some individuals were four times higher. At the same time, sck transgenic tobacco has a high resistance to Lepidoptera pest due to the increased accumulation level of foreign CpTI protein. The strategy of foreign protein targeting can be used to increase the accumulation level of foreign protein in transgenic plants and can be widely applied to other related research field in plant genetic engineering. 展开更多
关键词 targeting protein ER localization modified gene Cowpea trypsin inhibitor transgenic tobacco pest resistance analysis
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朊粒和朊疾病的研究进展
15
作者 赵春霞 刘亚林 许琳 《南京军医学院学报》 2001年第4期240-243,共4页
近年来,以朊粒为病原体的一系列疾病即朊疾病愈来愈引起人们的观注,特别是其极强的传染性和极高的致死率引起相关学科的研究热潮。文章综述了朊粒及朊疾病的发现历史、朊粒的生物学特性、人类各种朊疾病的发病情况及实验室诊断的研究... 近年来,以朊粒为病原体的一系列疾病即朊疾病愈来愈引起人们的观注,特别是其极强的传染性和极高的致死率引起相关学科的研究热潮。文章综述了朊粒及朊疾病的发现历史、朊粒的生物学特性、人类各种朊疾病的发病情况及实验室诊断的研究。希望对人们认识、预防朊疾病有所帮助。 展开更多
关键词 朊粒 蛋白酶抗性蛋白 朊疾病
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当前流行的几种病毒
16
作者 国健 《中国药品监管》 2004年第2期61-63,共3页
禽流感病毒 禽流感(Avian influenza)是由A型流感病毒引起的一种禽类感染或疾病综合征,极易在禽鸟间散播,可引致家禽大量死亡,对家禽业带来不可估量的破坏。禽流感为一种人兽共患的烈性传染病。发生之时会造成巨大的经济损失。
关键词 疯牛病 禽流感病毒 胶质细胞 化妆品 蛋白酶抗性蛋白 致病力 HA基因 中枢神经系统 口蹄疫病毒 呼吸道症状
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The Technology Research of Anti-oxidation Peptide Preparation by Alkaline Protease Hydrolyzing Wheat Germ Meal 被引量:7
17
作者 刁大鹏 黄继红 +6 位作者 冯军伟 侯银臣 惠明 游倩倩 苏雪峰 王文 杨铭乾 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2014年第2期182-186,共5页
Wheat germ meal is the by production of oil extracting, and a great quantity of it has been wasted, thus the quantity of lost protein is great. In order to use wheat germ meal proteins adequately, wheat germ proteins ... Wheat germ meal is the by production of oil extracting, and a great quantity of it has been wasted, thus the quantity of lost protein is great. In order to use wheat germ meal proteins adequately, wheat germ proteins were hydrolyzed to anti-oxidation peptides by using alkaline protease. Through the single factor analysis and regression analysis, the optimized experiment conditions of hydrolysising wheat germ meal to wheat germ peptides were enzymatic quantity 0.8%(w/w), material to liquid ratio 1∶12.3, enzymolysis time 2.1 h. Under these conditions, the scavenging effect was 49.78%,the DH was 22% and peptides content in enzymatic hydrolysate was 1.9%(w/w).By SDS-PAGE electrophoresis,the molecular weight range of wheat germ peptides were below 10 ku and most were between 4.54 and 5.63 ku.The wheat germ proteins could be used ful y and grain resources would be saved. 展开更多
关键词 Ikaline protease Wheat germ meal Anti-oxidation peptides MOLECULARWEIGHT
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PEGylation of Hirudin and Analysis of Its Antithrombin Activity in vitro 被引量:14
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作者 秦海娜 修志龙 +3 位作者 张代佳 包永明 李晓晖 韩国柱 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2007年第4期586-590,共5页
Hirudin is the most anticoagulant drug found in nature, but its short serum half-life significantly inhibits its clinical anpplication. The PEGvlation of hirudin, the most promising anticoagulant drug, was performed i... Hirudin is the most anticoagulant drug found in nature, but its short serum half-life significantly inhibits its clinical anpplication. The PEGvlation of hirudin, the most promising anticoagulant drug, was performed in this paper. The optimal reaction conditions for PEG ylated hirudin were investigated, wh.en the PEGylation react, on.wasconducted under 4℃ after 10h, in the borate buffer at pH 8.5 .with the molar ratio 230 : 1 of PEG to hirudin, a higher modification extent was achieved. Finally, the bioactivity of PEGylated hirudin was measured in vitro.Compared with unmodified hirudin, 26% of anti-thrombin activity was retained. 展开更多
关键词 PEGylated protein HIRUDIN ANALYSIS anti-thrombin activity
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Targeting the cell cycle in esophageal adenocarcinoma:An adjunct to anticancer treatment 被引量:7
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作者 Martyn Dibb Yeng S Ang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2011年第16期2063-2069,共7页
Esophageal adenocarcinoma is a major cause of cancer death in men in the developed world.Continuing poor outcomes with conventional therapies that predominantly target apoptosis pathways have lead to increasing intere... Esophageal adenocarcinoma is a major cause of cancer death in men in the developed world.Continuing poor outcomes with conventional therapies that predominantly target apoptosis pathways have lead to increasing interest in treatments that target the cell cycle.A large international effort has led to the development of a large number of inhibitors,which target cell cycle kinases,including cyclin-dependent kinases,Aurora kinases and polo-like kinase.Initial phase Ⅰ/Ⅱ trials in solid tumors have often demonstrated only modest clinical benefits of monotherapy.This may relate in part to a failure to identify the patient populations that will gain the most clinical benefit.Newer compounds lacking the side effect profile of first-generation compounds may show utility as adjunctive treatments targeted to an individual's predicted response to treatment. 展开更多
关键词 Esophageal adenocarcinoma Cell cycle Cyclin-dependent kinase Aurora kinases Polo-like kinase
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Antioxidation Activities of Low-Molecular-Weight Gelatin Hydrolysate Isolated from the Sea Cucumber Stichopus japonicus 被引量:14
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作者 WANG Jingfeng WANG Yuming TANG Qingjuan WANG Yi CHANG Yaoguang ZHAO Qin XUE Changhu 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS 2010年第1期94-98,共5页
Gelatin extracted from the body wall of the sea cucumber (Stichopus japonicus) was hydrolyzed with flavourzyme. Low-molecular-weight gelatin hydrolysate (LMW-GH) of 700-- 1700 Da was produced using an ultrafiltrat... Gelatin extracted from the body wall of the sea cucumber (Stichopus japonicus) was hydrolyzed with flavourzyme. Low-molecular-weight gelatin hydrolysate (LMW-GH) of 700-- 1700 Da was produced using an ultrafiltration membrane bioreaetor system. Chemiluminescence analysis revealed that LMW-GH scavenges high free radicals in a concentration-dependent manner; IC50 value for superoxide and hydroxyl radicals was 442 and 285 μgmL-1, respectively. LMW-GH exhibited excellent inhibitory characteristics against melanin synthesis and tyrosinase activity in B16 cells. Furthermore, LMW-GH notably increased in- traeellular glutathione (GSH), which in turn suppressed melanogenesis. LMW-GH performs antioxidation activity, holding the potential of being used as a valuable ingredient in function foods, cosmetics and pharmaceuticals or nutriceuticals. 展开更多
关键词 sea cucumber low-molecular-weight gelatin hydrolysate antioxidation activity antimelanogenesis TYROSINASE reduced glutathione
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