【目的】蜜蜂卵、幼虫和蛹的发育具有明显的狭温性特征,低温胁迫会导致发育停滞。本研究旨在研究西方蜜蜂Apis mellifera工蜂预蛹低温胁迫后恢复化蛹的分子机制。【方法】比较在最适温度35℃发育的西方蜜蜂工蜂蛹(CK)和预蛹经20℃低温胁...【目的】蜜蜂卵、幼虫和蛹的发育具有明显的狭温性特征,低温胁迫会导致发育停滞。本研究旨在研究西方蜜蜂Apis mellifera工蜂预蛹低温胁迫后恢复化蛹的分子机制。【方法】比较在最适温度35℃发育的西方蜜蜂工蜂蛹(CK)和预蛹经20℃低温胁迫24 h后恢复化蛹的蛹(T)的转录组测序数据,筛选CK vs T比较组的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs);将DEGs进行GO功能注释和KEGG通路富集;选取5个抗氧化相关的DEGs(SOD2,Tpx4,GstS1,Prdx6和Cu-Zn)进行RT-qPCR验证。【结果】CK vs T比较组检测到1335个DEGs,其中853个DEGs上调,482个DEGs下调;GO富集结果显示,DEGs显著富集在细胞内核糖核蛋白复合物、NADH脱氢酶活性和抗氧化活性等GO条目上。KEGG富集结果显示,DEGs显著富集在氧化磷酸化、核糖体以及蛋白酶体通路。抗氧化相关5个DEGs(SOD2,Tpx4,GstS1,Prdx6和Cu-Zn)的RT-qPCR结果均显示上调表达,与转录组测序结果趋势一致。【结论】经低温胁迫的西方蜜蜂预蛹,当恢复正常发育温度后,通过提高能量代谢、蛋白质的合成分解以及抗氧化相关基因的表达来实现重启发育并完成化蛹。本研究有助于深入了解狭温性昆虫在经历低温胁迫后的发育恢复机制。展开更多
利用DNA重组技术在柞蚕蛹中表达重组人促红细胞生成素(Recombinant human erythropoietin,rhEPO),经过亲和层析纯化后,用SDS-PAGE分离纯化各组分,并通过电喷雾电离串联质谱技术(ESI-MS/MS)检测其糖基化修饰.结果显示,在柞蚕蛹中表达的rh...利用DNA重组技术在柞蚕蛹中表达重组人促红细胞生成素(Recombinant human erythropoietin,rhEPO),经过亲和层析纯化后,用SDS-PAGE分离纯化各组分,并通过电喷雾电离串联质谱技术(ESI-MS/MS)检测其糖基化修饰.结果显示,在柞蚕蛹中表达的rhEPO比活性约为1190 U/μg,其糖基化修饰位点与人体表达的EPO一致,有3个N-糖基化位点和1个O-糖基化位点.凝集素杂交实验结合质谱结果表明,柞蚕蛹表达的rhEPO的糖链中缺乏唾液酸修饰,而缺少唾液酸修饰的EPO通过鼻腔给药后在多种神经系统疾病的治疗中发挥着重要的作用.所得结果为进一步研究外源蛋白在柞蚕蛹-柞蚕核型多角体病毒(Anthraea pernyi nucleopolyhedrorirus,ApNPV)宿主载体表达系统表达后的糖基化与生物活性提供了依据.展开更多
目的:基于转录组测序技术,分析预测蛹虫草(XG)水提物影响人胃癌细胞BGC-823生长活性的主要调节性细胞死亡(Regulated Cell Death,RCD)信号通路。方法:MTT法测定XG水提物对胃癌细胞增殖能力的影响,转录组测序分析显著差异基因及其京都基...目的:基于转录组测序技术,分析预测蛹虫草(XG)水提物影响人胃癌细胞BGC-823生长活性的主要调节性细胞死亡(Regulated Cell Death,RCD)信号通路。方法:MTT法测定XG水提物对胃癌细胞增殖能力的影响,转录组测序分析显著差异基因及其京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集情况,获得凋亡、自噬、坏死性凋亡及铁死亡信号通路的hub基因(10个)。通过激光共聚焦、流式细胞术、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进一步验证XG水提物对胃癌细胞凋亡的诱导情况。结果:XG水提物对人胃癌细胞BGC-823生长活性的抑制作用具有剂量依赖特征。转录组测序共筛选到5885个差异表达基因,并在凋亡(P=0.001)及自噬(P=0.008)信号通路存在显著性富集,除铁死亡外,其它信号通路的hub基因的表达量均被显著性抑制,包括caspase依赖性凋亡信号通路的关键因子CASP3、CASP9、CASP7和APAF1,自噬小体形成相关的基因ULK1、ULK2、UVRAG、Atg14及Atg5。细胞学检测结果显示,胃癌细胞经XG水提物处理后呈典型的凋亡形态学特征,早期凋亡率为24.8%,细胞周期阻滞于G2/M期。qRT-PCR检测显示,BCL2、BCL2L1、CASP3、CASP9及XIAP的表达受到显著抑制(P<0.01),ENDOG和AIF表达量显著上调(P<0.01),与转录组测序结果一致。结论:蛹虫草主要通过caspase非依赖性线粒体凋亡途径抑制人胃癌细胞BGC-823的生长活性,同时可以影响自噬等信号通路的激活,为蛹虫草在功能性食品的开发提供理论支持。展开更多
蛹虫草(Cordyceps militaris(L.ex Fr.)Link.)是一种名贵的中药材,其具有较强抗氧化活性和抗肿瘤活性。本研究以008菌株为研究载体,经过形态观察和分子鉴定为Cordyceps militaris 008。在液体发酵条件下,首先通过单因素优化,在此基础上...蛹虫草(Cordyceps militaris(L.ex Fr.)Link.)是一种名贵的中药材,其具有较强抗氧化活性和抗肿瘤活性。本研究以008菌株为研究载体,经过形态观察和分子鉴定为Cordyceps militaris 008。在液体发酵条件下,首先通过单因素优化,在此基础上进行正交优化实验,确定其最优培养基,并对优化后的多糖进行抗氧化活性和抗肿瘤活性的研究。结果表明蛹虫草008最优培养基为:木糖量6%,酵母提取物量4.5%,K_(2)HPO_(4)量2.1%。培养条件为温度为21℃,转速为160r/min,装液量为80ml/250mL,接种量为10%,发酵2d。蛹虫草008所产粗多糖具有的较好的抗肿瘤活性,也具有一定的抗氧化活性。展开更多
文摘【目的】蜜蜂卵、幼虫和蛹的发育具有明显的狭温性特征,低温胁迫会导致发育停滞。本研究旨在研究西方蜜蜂Apis mellifera工蜂预蛹低温胁迫后恢复化蛹的分子机制。【方法】比较在最适温度35℃发育的西方蜜蜂工蜂蛹(CK)和预蛹经20℃低温胁迫24 h后恢复化蛹的蛹(T)的转录组测序数据,筛选CK vs T比较组的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs);将DEGs进行GO功能注释和KEGG通路富集;选取5个抗氧化相关的DEGs(SOD2,Tpx4,GstS1,Prdx6和Cu-Zn)进行RT-qPCR验证。【结果】CK vs T比较组检测到1335个DEGs,其中853个DEGs上调,482个DEGs下调;GO富集结果显示,DEGs显著富集在细胞内核糖核蛋白复合物、NADH脱氢酶活性和抗氧化活性等GO条目上。KEGG富集结果显示,DEGs显著富集在氧化磷酸化、核糖体以及蛋白酶体通路。抗氧化相关5个DEGs(SOD2,Tpx4,GstS1,Prdx6和Cu-Zn)的RT-qPCR结果均显示上调表达,与转录组测序结果趋势一致。【结论】经低温胁迫的西方蜜蜂预蛹,当恢复正常发育温度后,通过提高能量代谢、蛋白质的合成分解以及抗氧化相关基因的表达来实现重启发育并完成化蛹。本研究有助于深入了解狭温性昆虫在经历低温胁迫后的发育恢复机制。
文摘目的:基于转录组测序技术,分析预测蛹虫草(XG)水提物影响人胃癌细胞BGC-823生长活性的主要调节性细胞死亡(Regulated Cell Death,RCD)信号通路。方法:MTT法测定XG水提物对胃癌细胞增殖能力的影响,转录组测序分析显著差异基因及其京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集情况,获得凋亡、自噬、坏死性凋亡及铁死亡信号通路的hub基因(10个)。通过激光共聚焦、流式细胞术、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进一步验证XG水提物对胃癌细胞凋亡的诱导情况。结果:XG水提物对人胃癌细胞BGC-823生长活性的抑制作用具有剂量依赖特征。转录组测序共筛选到5885个差异表达基因,并在凋亡(P=0.001)及自噬(P=0.008)信号通路存在显著性富集,除铁死亡外,其它信号通路的hub基因的表达量均被显著性抑制,包括caspase依赖性凋亡信号通路的关键因子CASP3、CASP9、CASP7和APAF1,自噬小体形成相关的基因ULK1、ULK2、UVRAG、Atg14及Atg5。细胞学检测结果显示,胃癌细胞经XG水提物处理后呈典型的凋亡形态学特征,早期凋亡率为24.8%,细胞周期阻滞于G2/M期。qRT-PCR检测显示,BCL2、BCL2L1、CASP3、CASP9及XIAP的表达受到显著抑制(P<0.01),ENDOG和AIF表达量显著上调(P<0.01),与转录组测序结果一致。结论:蛹虫草主要通过caspase非依赖性线粒体凋亡途径抑制人胃癌细胞BGC-823的生长活性,同时可以影响自噬等信号通路的激活,为蛹虫草在功能性食品的开发提供理论支持。
文摘蛹虫草(Cordyceps militaris(L.ex Fr.)Link.)是一种名贵的中药材,其具有较强抗氧化活性和抗肿瘤活性。本研究以008菌株为研究载体,经过形态观察和分子鉴定为Cordyceps militaris 008。在液体发酵条件下,首先通过单因素优化,在此基础上进行正交优化实验,确定其最优培养基,并对优化后的多糖进行抗氧化活性和抗肿瘤活性的研究。结果表明蛹虫草008最优培养基为:木糖量6%,酵母提取物量4.5%,K_(2)HPO_(4)量2.1%。培养条件为温度为21℃,转速为160r/min,装液量为80ml/250mL,接种量为10%,发酵2d。蛹虫草008所产粗多糖具有的较好的抗肿瘤活性,也具有一定的抗氧化活性。
