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螺旋毛壳ND35 β-1,3-葡聚糖酶的诱导、性质及其抑菌作用
被引量:
19
1
作者
郭晓
高克祥
+4 位作者
印敬明
白复芹
马迎新
于丹
刘晓光
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期493-503,共11页
以病原菌Rhizoctonia solani的细胞壁为诱导物,模拟毛壳菌自然的重寄生过程,研究了内生真菌螺旋毛壳(Chaetomium spirale)ND35 β-1,3-葡聚糖酶的产酶条件、性质,尤其是不同碳源的调控作用。结果表明,不同种类的真菌细胞壁及几丁质 和...
以病原菌Rhizoctonia solani的细胞壁为诱导物,模拟毛壳菌自然的重寄生过程,研究了内生真菌螺旋毛壳(Chaetomium spirale)ND35 β-1,3-葡聚糖酶的产酶条件、性质,尤其是不同碳源的调控作用。结果表明,不同种类的真菌细胞壁及几丁质 和昆布多糖,均可诱导产生β-1,3-葡聚糖酶,而作为分解代谢产物的葡萄糖则抑制产酶。经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose 阴离子交换层析及Phenyl-Sepharose疏水层析,并通过SDS-PAGE鉴定,纯化了一种分子量约为73 kDa的内切β-1,3-葡聚 糖酶GLUC73。其最适反应温度为55℃,在40℃以下较稳定;最适pH值为5.5,在pH 5-9范围内均很稳定;酶活性受 Hg2+、Fe3+、Zn2+、Mg2+等金属离子不同程度的抑制,Mn2+和Co2+对酶有激活作用;以昆布多糖为底物时,该酶的米氏常数 Km为0.412 mg·mL-1,最大反直速度Vmax为3.876 U·mL-1。粗酶液同时具有β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶活性,离体抑 菌试验表明,对苹果炭疽病菌(Glomerella cingulata)、杨树腐烂病菌(Valsa sordida)、苹果树腐烂病菌(Valsa mali)的菌丝 生长和孢子萌发有明显的抑制作用。通过对β-1,3-葡聚糖进行免疫细胞化学标记和超微结构观察,间接证明了β-1,3-葡 聚糖酶在螺旋毛壳重寄生过程中的作用。
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关键词
螺旋毛壳菌nd35
β-1
3-葡聚糖酶
酶学性质
抑
菌
作用
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职称材料
内生菌螺旋毛壳抗生素和水解酶的协同抗真菌作用(英文)
被引量:
5
2
作者
高克祥
庞延东
+2 位作者
秦乃花
刘晓光
康振生
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期347-358,共12页
生防因子螺旋毛壳(Chaetomium spirale)ND35生长于含立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)菌丝细胞壁制备物的SM培养基中,从培养滤液提取的粗酶液强烈抑制Valsa sordida、Valsa mali、Glomerella cingulata和Curvulavia lunata病原真菌的菌...
生防因子螺旋毛壳(Chaetomium spirale)ND35生长于含立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)菌丝细胞壁制备物的SM培养基中,从培养滤液提取的粗酶液强烈抑制Valsa sordida、Valsa mali、Glomerella cingulata和Curvulavia lunata病原真菌的菌丝生长和孢子萌发。经DNS法检测,粗酶液同时具有β-1,3-葡聚糖酶(包括内切和外切酶)和几丁质酶活性,分别为0.19 U.mg-1和0.09 U.mg-1。生长于3%玉米粉浸渍液的螺旋毛壳ND35的培养滤液也能抑制上述病原菌的菌丝生长和孢子萌发。离体条件下检测了ND35产生的一纯化的具有分子量为73 kD的内切β-1,3-葡聚糖酶(GLUC73)和一纯化的抗生素对苹果炭疽病菌的分生孢子萌发和芽管延长的抑制效果。当内切β-1,3-葡聚糖酶使用浓度为180μg.mL-1时,抑制了测试真菌的孢子萌发,造成细胞壁的改变,导致了菌丝顶端的破裂;抗生素的有效抑菌中浓度ED50为1.75μg.mL-1。单独应用时,1.0μg.mL-1的抗生素或40μg.mL-1的内切β-1,3-葡聚糖酶没有或仅有很低的抑菌效果;两者组合导致孢子萌发约78%受抑制。甚至10μg.mL-1的内切β-1,3-葡聚糖酶也使1.5μg.mL-1抗生素的抑菌作用从低于25%增加到超过50%的抑菌效果。此外,80μg.mL-1的内切β-1,3-葡聚糖酶使1.0μg.mL-1抗生素的抑菌活性从0%提高到90%。抗生素和β-1,3-葡聚糖酶的协同抗菌活性可能在内生菌螺旋毛壳的植病生防中起重要作用。
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关键词
内生
菌
螺旋
毛
壳
nd
35
抗生素
水解酶
协同作用
抗
菌
活性
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职称材料
螺旋毛壳ND35抗生素的产生及其在病害生物防治中的作用
被引量:
20
3
作者
万慧
刘晓光
+2 位作者
曹荣花
高克祥
宋勇
《植物保护学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期51-56,共6页
内生菌螺旋毛壳Chaetomium spirale ND35是一株广谱拮抗性生防因子。为了阐明菌株ND35抗生素在植物病害生物防治中的作用机制,系统研究了抗生素的产生、提取纯化及其在离体和温室条件下的抑菌防病作用。菌株ND35的发酵液经乙酸乙酯萃取...
内生菌螺旋毛壳Chaetomium spirale ND35是一株广谱拮抗性生防因子。为了阐明菌株ND35抗生素在植物病害生物防治中的作用机制,系统研究了抗生素的产生、提取纯化及其在离体和温室条件下的抑菌防病作用。菌株ND35的发酵液经乙酸乙酯萃取,浓缩得黄褐色抗生素粗提液。平皿抑菌试验表明,抗生素粗提液对20余种植物病原真菌有抑制作用,浓度为400μg/mL时对病菌菌丝生长的抑制率范围从14.4%到72.6%。浓度为500μg/mL和1000μg/mL的抗生素粗提液对新月弯孢分生孢子萌发的抑制率分别是54.2%和75.9%。发酵时间也影响抗生素的产量,马铃著葡萄糖液体培养基中发酵15天时,抗生素产量最高。经薄层层析和高效液相色谱检测,证明有两个活性组分。温室试验表明,该抗生素粗提液稀释50倍液对玉米弯孢叶斑病的防治效果可达85.5%,稀释250倍液防治效果达63。3%。试验结果表明,抗生素是菌株ND35重要的生防决定因子之一,抗生素粗提液也展示了对玉米弯孢叶斑病具有较好的生防潜能。
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关键词
螺旋毛壳菌nd35
抗生素
植物病原真
菌
生物防治
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职称材料
题名
螺旋毛壳ND35 β-1,3-葡聚糖酶的诱导、性质及其抑菌作用
被引量:
19
1
作者
郭晓
高克祥
印敬明
白复芹
马迎新
于丹
刘晓光
机构
山东农业大学植物病理系
西北农林科技大学植物保护学院
出处
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期493-503,共11页
基金
国家自然科学基金资助项目(30100143)
文摘
以病原菌Rhizoctonia solani的细胞壁为诱导物,模拟毛壳菌自然的重寄生过程,研究了内生真菌螺旋毛壳(Chaetomium spirale)ND35 β-1,3-葡聚糖酶的产酶条件、性质,尤其是不同碳源的调控作用。结果表明,不同种类的真菌细胞壁及几丁质 和昆布多糖,均可诱导产生β-1,3-葡聚糖酶,而作为分解代谢产物的葡萄糖则抑制产酶。经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose 阴离子交换层析及Phenyl-Sepharose疏水层析,并通过SDS-PAGE鉴定,纯化了一种分子量约为73 kDa的内切β-1,3-葡聚 糖酶GLUC73。其最适反应温度为55℃,在40℃以下较稳定;最适pH值为5.5,在pH 5-9范围内均很稳定;酶活性受 Hg2+、Fe3+、Zn2+、Mg2+等金属离子不同程度的抑制,Mn2+和Co2+对酶有激活作用;以昆布多糖为底物时,该酶的米氏常数 Km为0.412 mg·mL-1,最大反直速度Vmax为3.876 U·mL-1。粗酶液同时具有β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶活性,离体抑 菌试验表明,对苹果炭疽病菌(Glomerella cingulata)、杨树腐烂病菌(Valsa sordida)、苹果树腐烂病菌(Valsa mali)的菌丝 生长和孢子萌发有明显的抑制作用。通过对β-1,3-葡聚糖进行免疫细胞化学标记和超微结构观察,间接证明了β-1,3-葡 聚糖酶在螺旋毛壳重寄生过程中的作用。
关键词
螺旋毛壳菌nd35
β-1
3-葡聚糖酶
酶学性质
抑
菌
作用
Keywords
Chaetomium spirale
nd
35
β-1,3-glucanase
properties
antifungal activity
分类号
S476.1 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
内生菌螺旋毛壳抗生素和水解酶的协同抗真菌作用(英文)
被引量:
5
2
作者
高克祥
庞延东
秦乃花
刘晓光
康振生
机构
西北农林科技大学植物保护学院
山东农业大学植物保护学院
山东农业大学植物保护学院
出处
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期347-358,共12页
基金
NationalNatureScienceFoundation(30100143,30571498)
YouthFoundationofShandongAgriculturalUniversity(23406)ThispaperispartcontentfromdissertationofGAOKe-xiang
文摘
生防因子螺旋毛壳(Chaetomium spirale)ND35生长于含立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)菌丝细胞壁制备物的SM培养基中,从培养滤液提取的粗酶液强烈抑制Valsa sordida、Valsa mali、Glomerella cingulata和Curvulavia lunata病原真菌的菌丝生长和孢子萌发。经DNS法检测,粗酶液同时具有β-1,3-葡聚糖酶(包括内切和外切酶)和几丁质酶活性,分别为0.19 U.mg-1和0.09 U.mg-1。生长于3%玉米粉浸渍液的螺旋毛壳ND35的培养滤液也能抑制上述病原菌的菌丝生长和孢子萌发。离体条件下检测了ND35产生的一纯化的具有分子量为73 kD的内切β-1,3-葡聚糖酶(GLUC73)和一纯化的抗生素对苹果炭疽病菌的分生孢子萌发和芽管延长的抑制效果。当内切β-1,3-葡聚糖酶使用浓度为180μg.mL-1时,抑制了测试真菌的孢子萌发,造成细胞壁的改变,导致了菌丝顶端的破裂;抗生素的有效抑菌中浓度ED50为1.75μg.mL-1。单独应用时,1.0μg.mL-1的抗生素或40μg.mL-1的内切β-1,3-葡聚糖酶没有或仅有很低的抑菌效果;两者组合导致孢子萌发约78%受抑制。甚至10μg.mL-1的内切β-1,3-葡聚糖酶也使1.5μg.mL-1抗生素的抑菌作用从低于25%增加到超过50%的抑菌效果。此外,80μg.mL-1的内切β-1,3-葡聚糖酶使1.0μg.mL-1抗生素的抑菌活性从0%提高到90%。抗生素和β-1,3-葡聚糖酶的协同抗菌活性可能在内生菌螺旋毛壳的植病生防中起重要作用。
关键词
内生
菌
螺旋
毛
壳
nd
35
抗生素
水解酶
协同作用
抗
菌
活性
Keywords
E
nd
ophytic Chaetomium spirale
nd
35
antibiotics
hydrolytic enzymes
synergism antifungal activity
分类号
S476 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
螺旋毛壳ND35抗生素的产生及其在病害生物防治中的作用
被引量:
20
3
作者
万慧
刘晓光
曹荣花
高克祥
宋勇
机构
山东农业大学植物保护学院
江苏大学生命科学研究院
山东省泰安市徂徕山林场
出处
《植物保护学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期51-56,共6页
基金
国家自然科学基金(30100143
30571498)
山东农业大学青年科技创新基金项目(23406)
文摘
内生菌螺旋毛壳Chaetomium spirale ND35是一株广谱拮抗性生防因子。为了阐明菌株ND35抗生素在植物病害生物防治中的作用机制,系统研究了抗生素的产生、提取纯化及其在离体和温室条件下的抑菌防病作用。菌株ND35的发酵液经乙酸乙酯萃取,浓缩得黄褐色抗生素粗提液。平皿抑菌试验表明,抗生素粗提液对20余种植物病原真菌有抑制作用,浓度为400μg/mL时对病菌菌丝生长的抑制率范围从14.4%到72.6%。浓度为500μg/mL和1000μg/mL的抗生素粗提液对新月弯孢分生孢子萌发的抑制率分别是54.2%和75.9%。发酵时间也影响抗生素的产量,马铃著葡萄糖液体培养基中发酵15天时,抗生素产量最高。经薄层层析和高效液相色谱检测,证明有两个活性组分。温室试验表明,该抗生素粗提液稀释50倍液对玉米弯孢叶斑病的防治效果可达85.5%,稀释250倍液防治效果达63。3%。试验结果表明,抗生素是菌株ND35重要的生防决定因子之一,抗生素粗提液也展示了对玉米弯孢叶斑病具有较好的生防潜能。
关键词
螺旋毛壳菌nd35
抗生素
植物病原真
菌
生物防治
Keywords
Chaetomium spirale
nd
35
antibiotics
phytopathogenic fungi
biocontrol
分类号
S476 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
螺旋毛壳ND35 β-1,3-葡聚糖酶的诱导、性质及其抑菌作用
郭晓
高克祥
印敬明
白复芹
马迎新
于丹
刘晓光
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
19
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职称材料
2
内生菌螺旋毛壳抗生素和水解酶的协同抗真菌作用(英文)
高克祥
庞延东
秦乃花
刘晓光
康振生
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
5
下载PDF
职称材料
3
螺旋毛壳ND35抗生素的产生及其在病害生物防治中的作用
万慧
刘晓光
曹荣花
高克祥
宋勇
《植物保护学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
20
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职称材料
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