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亚健康肾阴虚证的血浆蛋白质组学初步研究 被引量:26
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作者 孙晓敏 李晓勇 +4 位作者 靳文 王云丹 魏敏 赵晓山 罗仁 《四川中医》 北大核心 2008年第4期7-9,共3页
目的:初步观察亚健康肾阴虚证患者血浆蛋白质组的变化与表达差异,为进一步探讨亚健康的发生机制奠定基础。方法:采用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离亚健康肾阴虚证患者与正常人血浆总蛋白,银染显色;PDQuest软件对凝胶图象进行定性定量差异... 目的:初步观察亚健康肾阴虚证患者血浆蛋白质组的变化与表达差异,为进一步探讨亚健康的发生机制奠定基础。方法:采用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离亚健康肾阴虚证患者与正常人血浆总蛋白,银染显色;PDQuest软件对凝胶图象进行定性定量差异表达分析;从中选取差异表达蛋白质斑点,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDL-TOF-MS)分析,获取肽质量指纹图谱(PMF);通过Mscot-Wizard软件进行数据库搜索,鉴定蛋白质。结果:获得了重复性和分辨性较好的血浆双向凝胶电泳图谱;在亚健康肾阴虚证血浆较正常人血浆表达量升高的蛋白质斑点11个,表达量降低的蛋白质斑点6个;选取其中表达量升高相差10倍以上的3个蛋白质斑点进行PMF鉴定,得到1个匹配精确的蛋白质(热休克蛋白27)。结论:亚健康肾阴虚证血浆与正常人血浆中存在差异表达蛋白质,利用蛋白质组学技术有望对亚健康的发生机制进行阐释,并将促进中医证候研究的拓展和深入。 展开更多
关键词 亚健康肾阴虚证 血浆蛋白质组学 双向凝胶电泳 质谱分析
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小型猪心肌缺血血瘀证的血浆蛋白质组学研究 被引量:7
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作者 郭淑贞 刘蕾 +3 位作者 许文玉 王伟 韩静 柴欣楼 《中华中医药学刊》 CAS 2010年第10期2063-2066,共4页
目的:寻找血瘀证(心肌缺血)相关的血浆蛋白质组学特征。方法:采用前期建立的方法,以小型猪前降支主干放置Ameroid缩窄环结合动态观察的方法制备小型猪血瘀证模型。在证候时间窗内前腔静脉采血,枸橼酸钠抗凝,离心收集上清备用。血浆总蛋... 目的:寻找血瘀证(心肌缺血)相关的血浆蛋白质组学特征。方法:采用前期建立的方法,以小型猪前降支主干放置Ameroid缩窄环结合动态观察的方法制备小型猪血瘀证模型。在证候时间窗内前腔静脉采血,枸橼酸钠抗凝,离心收集上清备用。血浆总蛋白上样量1.3mg,同组样品等量混合后,采用双向凝胶电泳分析差异蛋白点。等电聚焦用IPG胶条24cm、PH范围3-11NL,SDS-PAGE浓度13%,考马斯亮蓝R350染色,凝胶扫描后,采用Imagemaster 2D Platinum 6.0软件进行凝胶的蛋白点检测、匹配。对匹配蛋白点的体积百分比进行比较,确定差异蛋白点。差异蛋白点胰蛋白酶酶切后,MALDI-TOF检测,数据库搜索,确定其相关信息。结果:模型组有10个明显的上调蛋白点。质谱鉴定结果提示,部分上调的差异蛋白为α1-酸性糖蛋白、α1-抗胰蛋白酶、胎球蛋白A、载脂蛋白A-I、载脂蛋白A-IV。结论:已鉴定的差异蛋白质主要为急性期反应蛋白及载脂蛋白等,炎症/抗炎是其互相联系的核心环节,提示在该心肌缺血血瘀证同时存在着炎症反应这一病理进程,炎症反应可能是血瘀证的病理机制之一,但仍有待进一步研究。 展开更多
关键词 血瘀证 心肌缺血 血浆蛋白质组学
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6周无负重游泳运动降低SHR大鼠血压的血浆蛋白质组学研究 被引量:4
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作者 冯红 武晶琼 +2 位作者 周春明 何庆华 温利 《天津体育学院学报》 CAS CSSCI 北大核心 2010年第5期400-403,共4页
目的:运用比较蛋白质组学技术,探讨6周无负重游泳运动降低SHR大鼠血压血浆蛋白质表达的变化,以期进一步阐述运动治疗高血压病的机制。方法:以雄性4周龄SHR大鼠16只及WKY大鼠16只为研究对象,将其随机分为SHR运动组、SHR安静组、WKY安静组... 目的:运用比较蛋白质组学技术,探讨6周无负重游泳运动降低SHR大鼠血压血浆蛋白质表达的变化,以期进一步阐述运动治疗高血压病的机制。方法:以雄性4周龄SHR大鼠16只及WKY大鼠16只为研究对象,将其随机分为SHR运动组、SHR安静组、WKY安静组、WKY运动组。SHR运动组及WKY运动组进行1 h/天,5天/周,共6周的无负重游泳运动。使用CODATM2单通道无创血压测量仪检测老鼠血压,对处理好的血浆样品进行二维凝胶电泳和质谱分析。结果:(1)6周无负重游泳运动可以有效降低SHR大鼠的血压。(2)通过质谱分析和数据库检索,成功鉴定了6个差异蛋白:rCG45257、锚定蛋白重复域13家族成员D、甲状腺素转运蛋白A链、Ras相关域1家族同型A、胎球蛋白B前体和γ-肌动蛋白。 展开更多
关键词 6周无负重游泳运动 高血压 血浆蛋白质组学 SHR
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血浆蛋白质组学在中医证候研究中的应用探讨 被引量:6
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作者 李喜悦 黄凌云 +1 位作者 张文生 王永炎 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2007年第5期581-582,共2页
证候一直是中医学术研究的核心内容,其整体、动态等特性与血浆蛋白质组学相似,故将后者应用到证候研究中将很可能解决“证”本质的问题,促进中医现代化进程。
关键词 证候 血浆蛋白质组学 探讨
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丹七片干预心肌缺血的血浆蛋白质组学研究 被引量:6
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作者 郭淑贞 啜文静 +4 位作者 王勇 冯玄超 廉洪建 郑磊 王伟 《中西医结合心脑血管病杂志》 2014年第11期1355-1357,共3页
目的探讨丹七片干预心肌缺血的作用机制。方法缩窄环法制备小型猪心肌缺血模型,给予丹七片每次9g/(只·天)临床等效剂量,4周。双向凝胶电泳-质谱联用法分析血浆蛋白表达谱变化。结果与模型组比较,丹七片下调蛋白点9个(丰度比值≤0.5... 目的探讨丹七片干预心肌缺血的作用机制。方法缩窄环法制备小型猪心肌缺血模型,给予丹七片每次9g/(只·天)临床等效剂量,4周。双向凝胶电泳-质谱联用法分析血浆蛋白表达谱变化。结果与模型组比较,丹七片下调蛋白点9个(丰度比值≤0.5)、上调蛋白点11个(比值≥1.5)。鉴定出的上调蛋白为载脂蛋白A1和载脂蛋白E。结论通过上调载脂蛋白A1和载脂蛋白E抑制缺血心肌过度的炎症反应,可能是丹七片干预心肌缺血的主要机制之一。 展开更多
关键词 心肌缺血 丹七片 血浆蛋白质组学
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伴与不伴糖尿病肾病的糖尿病视网膜病变患者血浆蛋白质组学研究 被引量:5
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作者 李志琛 刘颖 +5 位作者 何徐军 梅伟群 陈建斌 张华北 欧阳建 钱佳丽 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第13期2094-2098,共5页
目的研究伴与不伴糖尿病肾病(DN)的糖尿病视网膜病变(DR)患者血浆蛋白质组学,寻找差异表达蛋白,为筛选相关血浆标志物提供依据。方法入组16例T2DM患者,8例DR伴DN患者纳入DNDR组,8例单纯DR患者纳入DR组,利用蛋白质组非标记(label-free)... 目的研究伴与不伴糖尿病肾病(DN)的糖尿病视网膜病变(DR)患者血浆蛋白质组学,寻找差异表达蛋白,为筛选相关血浆标志物提供依据。方法入组16例T2DM患者,8例DR伴DN患者纳入DNDR组,8例单纯DR患者纳入DR组,利用蛋白质组非标记(label-free)定量技术对16例血浆标本进行检测,并行液相串联质谱分析(LC-MS/MS),计算蛋白质表达丰度,筛选差异蛋白并行生物信息学分析,包括基因本体(GO)和代谢与信号转导通路(Pathway)注释和富集分析、差异蛋白相互作用网络分析。ELISA法检测两组患者血浆IGFBP7、CPS1 水平,验证label-free 结果。结果以均数和中位数差异倍数均≥ 2.5 倍(上/下调)为标准,筛选出差异蛋白17个,上调11个,下调6个。GO富集分析显示结合蛋白在分子功能蛋白中占绝对优势。Pathway 富集分析示CPS1在丙氨酸,天冬氨酸和谷氨酸代谢中起作用。蛋白相互作用网络分析显示HSPG2、CPS1、IGFBP7、TLN1、KRT5之间有相互作用。ELISA法结果显示IGFBP7在DR组较DNDR组表达升高,CPS1在DR组较DNDR组表达降低。结论采用label-free定量技术发现DR组与DNDR组存在多种差异表达蛋白,这些差异蛋白提供了不同的候选相关血浆标志物和早期防治的靶点。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 糖尿病肾病 蛋白质非标定量技术 血浆蛋白质组学
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肥胖亚型和非肥胖亚型2型糖尿病患者血浆蛋白质组学分析 被引量:8
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作者 王俊 于微 +3 位作者 徐健 冯里茹 杨慧 刘小立 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期173-178,共6页
目的利用OFFGEL电泳-差异蛋白质组学法,比较肥胖亚型和非肥胖亚型糖尿病患者的差异蛋白,进一步阐释并比较肥胖亚型和非肥胖亚型糖尿病的形成机制。方法分别选择18~44岁男性肥胖亚型、非肥胖亚型2型糖尿病患者及健康对照样本各10例;血... 目的利用OFFGEL电泳-差异蛋白质组学法,比较肥胖亚型和非肥胖亚型糖尿病患者的差异蛋白,进一步阐释并比较肥胖亚型和非肥胖亚型糖尿病的形成机制。方法分别选择18~44岁男性肥胖亚型、非肥胖亚型2型糖尿病患者及健康对照样本各10例;血浆样品经高特异性免疫亲和法去除白蛋白和IgG后,进行溶液酶切,对多肽混合样品进行OFFGEL电泳;利用Nano HPLC-Chip-MS/MS系统对按等电点分离的多肽样品进行进一步分离和质谱鉴定,比较3组样本中的差异蛋白质,并进行功能注释和机制探讨。结果肥胖亚型、非肥胖亚型糖尿病患者组和对照组分别鉴定391、415、371种蛋白质,组间差异蛋白质比较和蛋白质注释结果表明脂联素在肥胖亚型糖尿病患者血浆中低表达,基质交感分子1在肥胖亚型糖尿病患者血浆中高表达;丝氨酸蛋白激酶ATM、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶WNK1等6种蛋白激酶在非肥胖亚型糖尿病患者血浆中表现出高表达。结论脂联素、基质交感因子1和一系列蛋白激酶在肥胖亚型、非肥胖亚型糖尿病的发病机制上可能存在差异。 展开更多
关键词 2型糖尿病 肥胖亚型 非肥胖亚型 血浆蛋白质组学
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血浆/血清蛋白质组学在心血管疾病的应用 被引量:3
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作者 杨艳玲 曹雪滨 《军医进修学院学报》 CAS 2011年第8期876-877,共2页
血清蛋白质组学可以鉴定疾病相关蛋白质,对研究心血管疾病的病理生理学机制、寻找新的血清标记物等提供了一个新的平台。
关键词 蛋白质 血浆/血清蛋白质 心血管疾病
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基于SELDI-TOF-MS技术的患亚临床低血钙症奶牛血浆蛋白质组谱分析 被引量:1
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作者 王朋贤 舒适 +5 位作者 王博 许楚楚 刘健男 夏成 吴凌 王哲 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1895-1903,共9页
旨在探讨患亚临床低血钙症奶牛血浆蛋白质组学的异常变化。收集32头患亚临床低血钙症奶牛和59头健康奶牛的血浆,应用SELDI-TOF-MS技术测得血浆蛋白质谱,经wilcoxon sum rank test分析两组峰值,结合Swissport蛋白质数据库鉴定,从而获得... 旨在探讨患亚临床低血钙症奶牛血浆蛋白质组学的异常变化。收集32头患亚临床低血钙症奶牛和59头健康奶牛的血浆,应用SELDI-TOF-MS技术测得血浆蛋白质谱,经wilcoxon sum rank test分析两组峰值,结合Swissport蛋白质数据库鉴定,从而获得组间差异表达蛋白,并进行决策树分析。结果获得了7个差异峰,经鉴定得到6种差异表达蛋白质。经决策树模型分析得出神经分泌蛋白VGF片段和淀粉样β蛋白4可能为诊断健康牛和亚临床低血钙症牛的生物标志物。应用SELDI-TOF-MS技术可有效分离健康牛与患病牛之间的血浆差异表达蛋白质,其中有可能存在能够成为该疾病的诊断标识物,其具体发生机制有待研究,该结果对探究奶牛亚临床低血钙症发病机制及其对机体生物学功能的影响具有重要的理论价值。 展开更多
关键词 奶牛 亚临床低血钙症 SELDI-TOF-MS 血浆蛋白质组学 差异表达的蛋白
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应用SELDI-TOF-MS技术对患脂肪肝奶牛血浆差异蛋白的分离鉴定及生物信息学特征 被引量:3
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作者 徐闯 朱奎玲 +9 位作者 陈媛媛 杨威 夏成 张洪友 吴凌 舒适 沈泰钰 于洪江 许秋实 张子扬 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1585-1598,共14页
【目的】脂肪肝是围产期奶牛主要代谢性疾病之一,50%产后奶牛受其影响。产后奶牛生产力降低、繁殖性能低下、免疫功能减弱、肝功能衰竭和过早死亡都与脂肪肝有关。表面增强激光解析/电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)是一种对生物样本蛋... 【目的】脂肪肝是围产期奶牛主要代谢性疾病之一,50%产后奶牛受其影响。产后奶牛生产力降低、繁殖性能低下、免疫功能减弱、肝功能衰竭和过早死亡都与脂肪肝有关。表面增强激光解析/电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)是一种对生物样本蛋白质研究的新型高敏感性蛋白质组学方法,文章旨在探讨脂肪肝奶牛血浆蛋白质组学特征。【方法】于黑龙江某集约化养牛场选择产后7—28d,1—2胎次荷斯坦奶牛40头。清晨空腹尾静脉采血10m L,应用肝素抗凝(150U)迅速离心(3 000 r/min,5 min)分离血浆,置于-80℃冰箱冷冻保存。依据血浆甘油三酯(TG>0.20 mmol·L-1),血浆β-羟丁酸(BHBA>1.2mmol·L-1)浓度和临床症状,将其分为试验组(T)20头和健康对照组(C)20头。应用SELDI-TOF-MS技术测得血浆蛋白质谱,利用Ciphergen Protein Chip Software(Version 3.1.1)对在试验组和对照组所有样品中得到的峰图进行分析,得到原始数据。将两组之间的数据峰值做wilcoxon sum rank test统计检验,用计算出的P值判断峰在两组中是否有显著差异。以0.01作为P值的阈值,筛选出P值小于0.01的差异峰。在得到的差异峰中,将差异峰的m/z值与Swissport蛋白数据库中多肽的理论荷质比(mass to charge ratio,m/z)进行比较,找到最相似的蛋白作为差异峰可能检测蛋白的预测结果。【结果】与对照组相比,试验组奶牛血浆蛋白质谱存在39个差异峰,在得到的39个差异峰中,将差异峰的m/z值与Swissport蛋白数据库中多肽的理论荷质比值进行比较,最终获得26个可预测的差异峰,预测蛋白11种。结果显示,相对于C组,11种预测蛋白在T组中均表达下调。通过生物信息学(Network,GO,Pathway)分析,应用Cytoscape软件对获得的11种蛋白进行牛类基因网络搜索,得到Networks分析结果图。在数据库中搜索到了试验结果中的淀粉样肽前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)和纤维蛋白原α链(fibrinogen alpha chain,FGA)两种差异蛋白,并得到其相关的Networks分析结果。应用Cytoscape软件中Bin GO插件对11种蛋白进行GO分析,并得到GO分析结果。对这些蛋白质经软件搜库得到已经注释的差异蛋白有9种,分别为FGA、血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A protein,SAA)、血浆蛋白酶c1抑制剂(plasma protease c1 inhibitor,SERPING1 or C1INH)、血清载脂蛋白-CⅢ(apolipoprotein c-Ⅲ,Apo CⅢ)、海帕西啶(hepcidin,HAMP)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN or SPP1)、甲状腺素运转蛋白(transthyretin,TTR)、胱蛋白酶抑制剂C(cystatin-c,CysC or CST)、神经分泌血管生长因子蛋白(neurosecretory protein,VGF)。应用KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)pathway数据库搜索。搜索结果显示只有6种蛋白质可在数据库中搜到,分别是FGA、SERPING1、APO-CⅢ、APP、CysC、SPP1。并得到其相关的Pathway分析结果。这些蛋白可能是与奶牛脂肪肝发病机制相关的物质。【结论】应用SELDI-TOF-MS技术有效的分离了健康牛与患病牛之间的血浆差异表达蛋白,均在肝脏代谢或脂肪肝疾病发生发展过程中起重要的调节作用,对探究奶牛脂肪肝发病机理及其对机体生物学功能的影响具有重要的理论价值。差异蛋白对奶牛脂肪肝的发病机理的影响尚待进一步研究。 展开更多
关键词 奶牛 脂肪肝 SELDI-TOF-MS 血浆蛋白质组学 差异表达蛋白
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基于NF-κB炎性通路探讨纤维连接蛋白在冠心病血瘀证的作用
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作者 罗晓欣 肖隋熙 +3 位作者 马至言 胡伊蕾 高翎薇 简维雄 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 2024年第9期1545-1553,共9页
目的利用蛋白质组学寻找抑制冠心病血瘀证的关键蛋白,并基于核因子(nuclear factoer,NF)-κB炎性信号通路和内皮细胞活化模型验证关键蛋白纤维连接蛋白(fibronectin 1,Fn)对冠心病血瘀证的作用。方法将冠心病血瘀证组患者和健康组受试... 目的利用蛋白质组学寻找抑制冠心病血瘀证的关键蛋白,并基于核因子(nuclear factoer,NF)-κB炎性信号通路和内皮细胞活化模型验证关键蛋白纤维连接蛋白(fibronectin 1,Fn)对冠心病血瘀证的作用。方法将冠心病血瘀证组患者和健康组受试者的血清进行相对定量和绝对定量的等比标记(isobaic tag for relative and absolute quantitation,ITRAQ)蛋白质组学分析,将差异蛋白进行GO和KEGG功能富集,从与冠心病密切相关的富集通路中筛选出关键蛋白Fn。利用60μg/mL的氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)构建内皮细胞活化模型,在内皮细胞活化模型中加入5μg/cm 2、10μg/cm 2、20μg/cm 23个浓度的血浆Fn或敲减内皮细胞来源Fn的方法进行干预。分组为空白组、模型组、对照组、Fn EC-KD组、Fn5组、Fn10组、Fn20组。细胞免疫荧光法和免疫印迹法检测各组NF-κB核位移和NF-κB蛋白表达水平,ELISA检测培养上清的细胞间黏附分子(intercellular cell adhesion molecule,ICAM)-1、血管细胞黏附分子(vascular cell adhesion molecule,VCAM)-1、前列环素I-2(Proataglandin-I-2,PGI2)、内皮素的蛋白含量。结果血清蛋白质组学结果显示健康组和冠心病血瘀证组存在121种差异蛋白,51种血瘀证组下调蛋白集中在补体与凝血级联、肌动蛋白细胞骨架的调节、细胞外基质-受体相互作用途径,70种血瘀证组上调蛋白集中在补体与凝血级联、肌动蛋白细胞骨架的调节、血小板活化、吞噬体途径。Fn与冠心病密切相关且在血瘀证患者中下调。细胞实验发现各组NF-κB总蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与空白组比较模型组NF-κB核位移增强,ICAM-1、VCAM-1、内皮素表达上调,PGI2分泌下调(P<0.05);与模型组比较,Fn5组、Fn10组、Fn20组NF-κB核位移减弱,VCAM-1、ICAM-1、内皮素分泌下调(P<0.05),PGI2分泌显著上调(P<0.05);与模型组比较,Fn EC-KD组NF-κB核位移减弱,VCAM-1、ICAM-1、内皮素表达含量明显降低(P<0.05),PGI2表达明显增加(P<0.05)。结论血浆Fn抑制内皮细胞活化和功能障碍,内皮细胞来源的Fn促进内皮细胞活化和功能障碍。 展开更多
关键词 血浆蛋白质组学 冠心病血瘀证 血浆纤维连接蛋白 内皮细胞活化
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糖尿病视网膜病变血浆差异蛋白分析 被引量:6
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作者 李志琛 陈建斌 +5 位作者 张华北 梅伟群 毛宁 欧阳建 钱佳丽 刘颖 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期42-50,共9页
目的利用蛋白质组学技术寻找糖尿病视网膜病变(DR)患者血浆中的差异蛋白,为筛选DR相关血浆标志物提供依据。方法选取在解放军第903医院诊治的2型糖尿病(T2DM)患者14例,其中合并中度以上非增殖性DR(NPDR)或增殖性DR(PDR)者作为DR组(n=8)... 目的利用蛋白质组学技术寻找糖尿病视网膜病变(DR)患者血浆中的差异蛋白,为筛选DR相关血浆标志物提供依据。方法选取在解放军第903医院诊治的2型糖尿病(T2DM)患者14例,其中合并中度以上非增殖性DR(NPDR)或增殖性DR(PDR)者作为DR组(n=8),不合并DR者作为NDR组(n=6)。对患者的血浆标本利用蛋白质非标记(label-free)定量技术行液相串联质谱分析(LC-MS/MS),检测血浆中各个蛋白的表达丰度,筛选两组间的差异蛋白,对其进行生物信息学分析,包括基因本体(GO)和代谢通路(Pathway)注释,GO和Pathway富集分析、差异蛋白相互作用网络分析。结果以均数和中位数差异倍数≥2.5倍为标准,共筛选出DR与NDR患者血浆中的差异蛋白41个,其中上调者26个,下调者15个。GO分析显示,差异蛋白中结合功能蛋白占绝对优势,生物过程中单一组织过程占比最高,细胞组分中细胞和细胞部分占比最高。Pathway富集性分析显示,上调最显著的原肌球蛋白4(TPM4)与肌肉收缩调节有关,下调最显著的血小板膜蛋白V(GPV)在细胞外基质受体相互作用中起重要作用。蛋白相互作用网络分析显示,3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)与巯基氧化酶1(QSOX1)、免疫球蛋白kappa基因座(IGK@)、TPM4、载脂蛋白C2(APOC2)、免疫球蛋白重链可变区4-31(IGHV4-31)之间可能有相互作用;妊娠区带蛋白质(PZP)与金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP2)之间可能有相互作用。结论采用蛋白质非标记定量技术发现DR与NDR患者血浆存在多种差异表达蛋白,这些差异蛋白提供了DR候选血浆标志物,并可能成为DR早期防治的候选靶点。 展开更多
关键词 糖尿病性视网膜病变 蛋白质非标记定量技术 血浆蛋白质组学
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蛋白质组学在先天性心脏病中的研究现状 被引量:2
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作者 何静 刘瀚旻 《中华妇幼临床医学杂志(电子版)》 CAS 2020年第6期627-633,共7页
随着数据库中大量DNA序列的积累,研究人员越来越意识到,仅具有心血管疾病患者完整的基因组序列和数千个基因的转录变化,不足以从分子角度阐明心血管疾病的发病机制。基因组序列中开放阅读框的存在,并不意味着功能基因的存在。随着后基因... 随着数据库中大量DNA序列的积累,研究人员越来越意识到,仅具有心血管疾病患者完整的基因组序列和数千个基因的转录变化,不足以从分子角度阐明心血管疾病的发病机制。基因组序列中开放阅读框的存在,并不意味着功能基因的存在。随着后基因组(postgenome)时代的到来,蛋白质组学(proteomics)作为一门采用大规模、高通量、系统化技术研究某一类型细胞、组织或体液中所有蛋白质组成及其功能的新兴学科,旨在从整体角度全面分析细胞内蛋白质表达水平和修饰状态的动态变化,了解细胞内蛋白质之间相互作用,从而揭示蛋白质功能和细胞生命活动规律。蛋白质组学专门从蛋白质角度研究生物学和病理生理学问题。先天性心脏病(CHD)作为我国活产儿首要的出生缺陷,是导致婴幼儿死亡和CHD相关并发症发生的主要原因之一,对CHD患儿早期诊断和干预是关键,超声检查是目前临床常用的CHD筛查策略,但是不适于对该病的早期筛查,而蛋白质组学可绘制心脏在任何时间和条件下表达的全部蛋白质,通过差异表达蛋白质分析,可确定与CHD病因及其进展、结果和治疗反应相关蛋白质变化。鉴定这些与CHD相关的特异表达蛋白质,研究其表达水平、翻译后修饰状态及功能特征,则是各种类型CHD病因及病理生理研究的基础和关键。笔者拟就蛋白质组学技术及分类、在CHD诊治及预后评估中的应用优势、最新研究现状、未来前景及展望进行阐述。 展开更多
关键词 蛋白质 先天性心脏病 血浆蛋白质组学 蛋白质 蛋白质技术 体液和分泌物 生物标记
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中医证侯血浆蛋白质双向凝胶电泳方法的建立及优化
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作者 孙晓敏 李玉萍 赵晓山 《热带医学杂志》 CAS 2012年第3期289-291,共3页
目的建立中医证侯血浆蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)方法并对其进行优化。方法以正常人血浆样品为研究对象,对白蛋白/IgG球蛋白去除后血浆样品、全血浆和热SDS法全血浆样品进行pH梯度2-DE分离,凝胶经硝酸银染色后,利用PDQuest软件对2-DE图... 目的建立中医证侯血浆蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)方法并对其进行优化。方法以正常人血浆样品为研究对象,对白蛋白/IgG球蛋白去除后血浆样品、全血浆和热SDS法全血浆样品进行pH梯度2-DE分离,凝胶经硝酸银染色后,利用PDQuest软件对2-DE图谱进行重复性分析,并对不同处理方法的全血浆2-DE图像的结果进行比较。结果与全血浆直接上样2-DE凝胶图谱比较,白蛋白/IgG球蛋白去除后血浆上样双向电泳蛋白有所增多,但由于白蛋白/IgG球蛋白去除过程中的非特异性吸附,造成了同一样品在蛋白质图谱上的明显差异;与全血浆直接上样和白蛋白/IgG球蛋白去除后血浆样品上样2-DE凝胶图谱比较,热SDS法处理血浆样品可以得到更多的蛋白质,且重复性好(P<0.05),凝胶硝酸银染色显示蛋白质点染色深、分散清楚。结论热SDS法全血浆上样2-DE分析法具有蛋白丢失少、操作简便、重复性好的特性,是证侯血浆蛋白质组学研究的有效手段。 展开更多
关键词 中医证侯 血浆蛋白质组学 双向凝胶电泳
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