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内皮祖细胞在血管组织工程中的应用 被引量:10
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作者 施森 何延政 刘勇 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1325-1328,共4页
目的:内皮祖细胞因其来源广泛,易于分离培养,增殖能力强及其自身多方面的特点已成为血管组织工程一种重要的种子细胞,但其进一步在体外成血管的条件与内皮祖细胞的相应特点及其在血管组织工程中的有关作用尚需要深入研究和认识。资料来... 目的:内皮祖细胞因其来源广泛,易于分离培养,增殖能力强及其自身多方面的特点已成为血管组织工程一种重要的种子细胞,但其进一步在体外成血管的条件与内皮祖细胞的相应特点及其在血管组织工程中的有关作用尚需要深入研究和认识。资料来源:应用计算机检索PUBMED 1997-01/2006-07期间的相关文章,检索词为“Endothelial progenitor cells,Tissue-engineered vascular,Tissue Engineering Blood Vessel”,并限定文章语言种类为English。资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:文章所述内容应与内皮祖细胞的特点或其在血管组织工程的相关研究进展相关。排除标准:重复研究或Meta分析类文章。资料提炼:共收集到136篇相关文献,30篇文献符合纳入标准,排除的106篇文献为内容陈旧或重复。符合纳入标准的30篇文献中,8篇涉及内皮祖细胞的生物学特性,14篇涉及内皮祖细胞作为种子细胞在组织工程中应用的优势,8篇涉及内皮祖细胞在构建组织工程化血管中的应用。资料综合:①内皮祖细胞可从骨髓、外周血、脾脏等部位分离出来,表达CD133并以此与内皮细胞相鉴别,它可向内皮细胞转化,也可向平滑肌等细胞横向转化。②内皮祖细胞能提高微血管密度及新生血管数量,许多研究表明内皮祖细胞可改善缺血症状、修复心内膜损伤;内皮祖细胞还可促进内皮再内皮化,保护内膜,保持内膜的完整性;结合到缺血血管,内皮祖细胞可提高通畅率防止再狭窄。③利用平滑肌及其它细胞外基质,内皮祖细胞可广泛应用于构建组织工程化血管并有着广阔的前景。结论:内皮祖细胞的相关研究需要在其血管表型、组织重塑过程中的作用及生物学特性等方面有所突破。作为组织工程种子细胞的一员,内皮祖细胞所具有的来源丰富、增殖能力强的优势,使之用于血管组织工程研究的前景十分广阔。 展开更多
关键词 细胞 内皮 血管/细胞学 组织工程 综述文献
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黄芪对高葡萄糖、游离脂肪酸培养的人血管内皮细胞一氧化氮含量的影响 被引量:9
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作者 谢席胜 黄宗文 +1 位作者 李秀钧 刘衡川 《中国临床康复》 CSCD 2004年第30期6683-6685,共3页
目的:探讨高葡萄糖和非酯化脂肪酸(freefattyacids,FFA)对人血管内皮细胞(vascularendothelialcell,VEC)产生的一氧化氮水平的影响和黄芪的干预作用,以及黄芪对糖尿病肾病治疗作用的可能机制。方法:以体外培养的人VEC为对象,观察以5.5mm... 目的:探讨高葡萄糖和非酯化脂肪酸(freefattyacids,FFA)对人血管内皮细胞(vascularendothelialcell,VEC)产生的一氧化氮水平的影响和黄芪的干预作用,以及黄芪对糖尿病肾病治疗作用的可能机制。方法:以体外培养的人VEC为对象,观察以5.5mmol/L葡萄糖(对照组),10,20和30mmol/L葡萄糖,0.125,0.250和0.500mmol/L非酯化脂肪酸、高浓度葡萄糖+高浓度油酸和/或棕榈酸,2,20和200g/L黄芪,低、中、高质量浓度黄芪+高浓度葡萄糖,高浓度油酸和/或棕榈酸+低、中、高质量浓度黄芪,高浓度葡萄糖+高浓度油酸和/或棕榈酸+低、中、高质量浓度黄芪培养液培养后,VEC上清液中一氧化氮的含量。结果:VEC经含30mmol/L葡萄糖及30mmol/L葡萄糖+0.500mmol/L棕榈酸培养后一氧化氮水平明显升高,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。经不同浓度黄芪处理后,一氧化氮升高组人VEC一氧化氮水平均有下降,以高质量浓度黄芪(200g/L)试验组最明显。相反,VEC在0.500mmol/L油酸、0.500mmol/L棕榈酸+0.500mmol/L油酸和30mmol/L葡萄糖+0.500mmol/L油酸+0.500mmol/L棕榈酸条件下培养后,一氧化氮水平明显下降,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。经不同浓度黄芪处理后,一氧化氮下降组人VEC一氧化氮水平有不同程度升高,但与对照组相比,差异仍? 展开更多
关键词 糖尿病肾病 内皮 血管/细胞学 葡萄糖 脂肪酸类 黄芪 一氧化氮
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银杏叶注射液对牛视网膜毛细血管周细胞的保护作用 被引量:4
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作者 倪劲松 王越晖 +3 位作者 陈兰悦 石博 王心蕊 吴家祥 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期368-371,F002,共5页
目的:研究糖基化终产物(AGEs)和银杏叶注射液对体外培养的牛视网膜毛细血管周细胞增殖、细胞周期和转化生长因子β(TGF- β)表达的影响,观察银杏叶注射液对周细胞的保护作用。方法:应用MTT比色分析法、流式细胞术及免疫荧光检测等方法... 目的:研究糖基化终产物(AGEs)和银杏叶注射液对体外培养的牛视网膜毛细血管周细胞增殖、细胞周期和转化生长因子β(TGF- β)表达的影响,观察银杏叶注射液对周细胞的保护作用。方法:应用MTT比色分析法、流式细胞术及免疫荧光检测等方法进行分析。结果:银杏叶注射液能促进AGEs作用下周细胞的增殖,浓度12 5~4 0 0 mg·L- 1 的银杏叶能明显促进AGEs作用下周细胞的增殖(P<0 .0 1) ,呈剂量依赖性。银杏叶注射液能明显抑制AGEs对周细胞细胞周期的影响及其促进凋亡的作用,使周细胞S期细胞减少,G2 - M期细胞增多,凋亡细胞数下降(P<0 .0 1) ,并能降低AGEs诱导周细胞TGF- β的表达。结论:AGEs可通过氧化应激对视网膜微血管周细胞产生损伤,应用抗氧化剂银杏叶注射液可以减少AGEs对周细胞的毒性作用。 展开更多
关键词 视网膜血管/细胞学 糖基化终产物 细胞 银杏叶 糖尿病视网膜病变
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重组人血管内皮抑素联合NP方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察 被引量:26
4
作者 黄纯 李凯 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2008年第4期283-285,共3页
目的:观察YH-16联合长春瑞滨和顺铂(NP)治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的近期疗效和安全性,同时探讨循环血管内皮细胞(CECs)与该方案疗效的相关性。方法:应用YH-16联合NP方案治疗晚期NSCLC11例,观察其近期疗效及毒副反应。流式细胞法检测... 目的:观察YH-16联合长春瑞滨和顺铂(NP)治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的近期疗效和安全性,同时探讨循环血管内皮细胞(CECs)与该方案疗效的相关性。方法:应用YH-16联合NP方案治疗晚期NSCLC11例,观察其近期疗效及毒副反应。流式细胞法检测治疗前后外周血CECs数量。结果:在可评价疗效的11例患者中,CR0例,PR1例,SD6例,PD4例。初治患者3例,PR1例,SD2例。复治患者9例,其中二线治疗3例,均为SD;三线治疗3例,SD1例,PD2例;四线治疗2例,均为PD。该方案用药期间,除Ⅰ~Ⅱ度恶心呕吐及骨髓抑制,3例出现轻度心慌,4例出现轻度乏力,不影响继续用药。7例临床受益患者CECs由(0.67±0.20)%下降为(0.43±0.20)%,4例临床进展患者CECs由(0.69±0.25)%上升为(1.08±0.63)%。结论:YH-16联合NP方案一线治疗NSCLC疗效满意,有可能使含铂一线甚至多线化疗失败者(身体状况良好者)继续临床受益;该方案安全性较好;CECs可能是一个较好的预测化疗联合抗血管生成治疗疗效的标志。 展开更多
关键词 非小细胞肺/药物疗法 血管生成抑制剂 内皮抑素类 内皮 血管/细胞学 血液循环
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中药复方对损伤人血管内皮细胞表达细胞间黏附分子的影响 被引量:16
5
作者 刘萍 章怡 张静生 《中国临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2006年第27期54-57,共4页
目的:观察经中药复方制剂处理后损伤的人血管内皮细胞表达细胞间黏附分子水平的变化,分析其抗动脉粥样硬化的可能途径。方法:实验于2004-01/2005-12在龙华医院科研实验中心完成。①选择SD大鼠70只,按随机数字表法分为7组,即正常对照组... 目的:观察经中药复方制剂处理后损伤的人血管内皮细胞表达细胞间黏附分子水平的变化,分析其抗动脉粥样硬化的可能途径。方法:实验于2004-01/2005-12在龙华医院科研实验中心完成。①选择SD大鼠70只,按随机数字表法分为7组,即正常对照组、模型组、西药组、中药复方0.4g/mL,0.8g/mL,1.6g/mL及3.2g/mL组,每组10只。以上各组大鼠分别灌胃生理盐水、生理盐水、1g/L氟伐他汀、0.4g/mL,0.8g/mL,1.6g/mL及3.2g/mL中药复方(以黄芪为君,栝楼、薤白为臣)生药,2mL/(次·只),分别腹主动脉采血,分离血清。②人血管内皮细胞HMEC-1与大鼠分组情况相同。除正常对照组外,其余各组HMEC-1细胞均通过高脂血清处理细胞建立细胞损伤模型。各组细胞分别应用相应组别的大鼠血清处理72h,应用酶联免疫吸附法测定培养上清液中可溶性细胞间黏附分子1表达水平,反转录-聚合酶链反应检测各组HMEC-1细胞可溶性细胞间黏附分子1mRNA表达水平。结果:各组HMEC-1细胞可溶性细胞间黏附分子1及其mRNA表达水平比较:中药复方0.4g/mL,0.8g/mL,1.6g/mL及3.2g/mL组细胞培养上清可溶性细胞间黏附分子1水平显著低于模型组[(4.33±0.19,4.44±0.34,3.46±0.17,4.33±0.27,6.27±0.25)μg/L(P<0.01)],其中中药复方1.6g/mL组作用最为明显,而且显著低于西药组(4.55±0.20)μg/L(P<0.01);以上各剂量中药同时能明显下调损伤的血管内皮细胞可溶性细胞间黏附分子1mRNA表达水平,其中中药复方3.2g/mL组作用最为明显,而且显著低于西药组[0.63±0.12,1.03±0.12(P<0.01)]。结论:以黄芪为君,栝楼、薤白为臣的中药复方制剂可明显下调损伤的血管内皮细胞培养上清液中可溶性细胞间黏附分子1及其mRNA表达水平,从而减少细胞间黏附及血管内皮损伤,其抗动脉粥样硬化的作用可能通过这一途径实现。 展开更多
关键词 黄芪 瓜蒌 薤白 冠状动脉硬化 内皮 血管/细胞学 细胞间粘附分子1
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超顺磁性氧化铁对血管内皮细胞的生物学影响及其磁共振成像效应 被引量:4
6
作者 谭延斌 武新英 +1 位作者 张景峰 张敏鸣 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期118-124,共7页
目的:研究磁共振对比剂超顺磁性氧化铁(SPIO)对血管内皮细胞生物学影响及磁共振成像的可能性,为SPIO对血管内皮细胞靶向性成像提供依据。方法:采用经典共沉淀法,合成柠檬酸包被的SPIO。实验组为浓度分别为0.01、0.05、0.10、0.15 mg/ml... 目的:研究磁共振对比剂超顺磁性氧化铁(SPIO)对血管内皮细胞生物学影响及磁共振成像的可能性,为SPIO对血管内皮细胞靶向性成像提供依据。方法:采用经典共沉淀法,合成柠檬酸包被的SPIO。实验组为浓度分别为0.01、0.05、0.10、0.15 mg/ml的SPIO,共同孵育人脐静脉血管内皮细胞,对照组为细胞在不含SPIO的培养液中孵育。采用普鲁士蓝染色,评价血管内皮细胞对SPIO的摄取情况。采用Calcein-AM法检测细胞活性的变化。通过免疫荧光染色对血管内皮细胞的肌动蛋白、微管蛋白进行荧光染色,评价血管内皮细胞骨架的变化。采用免疫荧光染色的方法,对局部粘着斑蛋白激酶(FAK)进行荧光染色,评价细胞迁移、粘附能力的变化。通过透射电镜观察SPIO在细胞内的分布及细胞内细胞器的变化。采用原子吸收分光光度计检测细胞内SPIO的含量。通过Philips 3.0T磁共振,对细胞琼脂凝胶细胞悬液进行磁共振扫描,了解磁共振扫描时信号的变化。结果:血管内皮细胞按浓度依赖式摄取SPIO。与对照组相比随SPIO孵育浓度的增加,SPIO对细胞的活性的毒性增加。与对照组相比细胞的肌动蛋白、微管蛋白纤维紊乱,FAK颗粒变粗,分布稀疏。SPIO主要位于胞质的溶酶体内,随孵育浓度的增加,溶酶体的数量增多,并出现大小不一空泡样结构。当SPIO浓度为0.15 mg/ml时,细胞内铁含量为(55.86±9.935)pg。磁共振扫描图像显示与SPIO共同孵育的细胞,信号出现明显的降低。结论:摄取SPIO的血管内皮细胞可以被MR检测到,但SPIO对血管内皮细胞的活性、骨架、粘附、迁移造成了一定影响,而这些影响与SPIO浓度有明显的依赖性。 展开更多
关键词 磁共振成像/方法 内皮 血管/细胞学 脐静脉/细胞学 细胞 培养的 染色与标记 显微镜检查 电子 扫描透射 超顺磁性氧化铁 体外试验 荧光染色
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过氧化氢体外诱导人血管内皮细胞损伤与人参皂苷Rb_1的保护效应 被引量:17
7
作者 何胜虎 张晶 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期254-257,共4页
目的:内皮细胞损伤可以导致心血管疾病及经皮冠状动脉介入术后再狭窄的发生。实验以过氧化氢(H2O2)体外诱导的人脐静脉损伤内皮细胞为对象,观察人参皂苷Rb1的保护作用,并探讨其可能的作用途径。方法:实验于2006-09/11在扬州大学医学院... 目的:内皮细胞损伤可以导致心血管疾病及经皮冠状动脉介入术后再狭窄的发生。实验以过氧化氢(H2O2)体外诱导的人脐静脉损伤内皮细胞为对象,观察人参皂苷Rb1的保护作用,并探讨其可能的作用途径。方法:实验于2006-09/11在扬州大学医学院中西医结合肿瘤研究所完成。①实验材料:人脐静脉血管内皮细胞(武汉大学培养物保存中心);人参皂苷Rb1(含量>95%,HPLC;由吉林大学化学学院提供)。②实验过程及分组:在体外培养的人脐静脉内皮细胞上建立H2O2损伤模型,实验分为正常对照组;H2O2损伤对照组:在培养基中加入2mmol/L的H2O2诱导损伤4h;人参皂苷Rb150,100,200μmol/L组:分别在培养基中先加入终浓度为50,100,200μmol/L的人参皂苷Rb1孵育24h,再加入相同的H2O2诱导损伤。试验重复6次。③实验评估:采用四甲基偶氮唑盐比色法测定各组细胞活力;硫代巴比妥酸法测定丙二醛含量;黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活性;酶联免疫吸附法检测血管内皮生长因子蛋白表达。结果:①与损伤对照组比较,不同剂量组人参皂苷Rb1可以提高H2O2诱导损伤的人脐静脉内皮细胞活性(P<0.01),并随着浓度的增高,细胞活力(A值)也增高,呈一定的剂量相关性。②与损伤对照组比较,不同剂量组人参皂苷Rb1可以降低H2O2诱导损伤的人脐静脉内皮细胞丙二醛含量、增加超氧化物歧化酶活性,随着浓度的增高,丙二醛含量降低,超氧化物歧化酶活性升高呈一定的剂量相关性。③与损伤对照组比较,不同剂量组人参皂苷Rb1可以促进H2O2诱导损伤的人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子蛋白的分泌,且随着人参皂苷Rb1浓度的增高,血管内皮生长因子蛋白表达也增高,呈一定的剂量相关性。结论:人参皂苷Rb1对氧化损伤的内皮细胞具有保护作用,其作用途径可能与保护了细胞的线粒体,提高了该细胞的抗氧化酶活性,上调了血管内皮生长因子的表达有关。 展开更多
关键词 内皮 血管/细胞学 人参皂甙 丙二醛 超氧化物歧化酶 血管内皮生长因子类
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MAPK在葡萄糖及AngⅡ致血管平滑肌细胞增殖反应中的作用 被引量:3
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作者 张严高 秦永文 +3 位作者 吴弘 王文清 文军慧 李闻捷 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第22期2026-2028,共3页
目的:研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径在葡萄糖(GS)和/或血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导大鼠动脉平滑肌细胞促增殖中的作用及其可能的调控机制.方法:实验以平滑肌细胞蛋白合成速率和蛋白含量为平滑肌细胞增殖的指标,以平滑肌细胞3H-亮... 目的:研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径在葡萄糖(GS)和/或血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导大鼠动脉平滑肌细胞促增殖中的作用及其可能的调控机制.方法:实验以平滑肌细胞蛋白合成速率和蛋白含量为平滑肌细胞增殖的指标,以平滑肌细胞3H-亮氨酸掺入率表示细胞蛋白质合成速率,通过3H-胸苷(3H-TdR)反映平滑肌细胞DNA的代谢及细胞增殖情况;并通过给予PD098059及高浓度葡萄糖(HG)预处理,观察它们对细胞蛋白合成、DNA代谢及细胞增殖的影响.结果:①AngⅡ(10-7mol/L)处理平滑肌细胞,3H-胸苷掺入率明显增高;HG(25×10-3mol/L)处理平滑肌细胞,3H-胸苷掺入率明显增高;AngⅡ+HG处理平滑肌细胞3H-胸苷掺入率显著增高.②AngⅡ增加3H-胸苷掺入的作用可明显被PD098059所抑制;AngⅡ+HG增高3H-胸苷掺入的作用也可被PD098059所抑制.③AngⅡ(10-7mol/L)处理平滑肌细胞,3H-亮氨酸掺入率明显增高;HG(25×10-3mol/L)处理平滑肌细胞,3H-亮氨酸掺入率增加;AngⅡ+HG处理平滑肌细胞3H-亮氨酸掺入率显著增加.④AngⅡ增加3H-亮氨酸掺入的作用可部分被PD098059所抑制;AngⅡ+HG增加3H-亮氨酸掺入的作用可显著被PD098059所抑制.结论:应用MAPK的特异性抑制剂PD098059抑制血管平滑肌细胞的增殖,证明MAPK激活在GS和/或AngⅡ导致平滑肌细胞增殖反应中有重要作用. 展开更多
关键词 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 细胞外信号调节MAP激酶类(ERKs) 血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ) 高糖 平滑 血管/细胞学 增殖反应
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重组人血管内皮抑制素联合TP方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察 被引量:4
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作者 刘静 王萍 +9 位作者 罗红兰 王昌峰 陈传喜 孙元利 杨林 仉丽 焦克文 桂瑞丰 陶朝慧 杨丽 《中国现代医生》 2010年第13期33-35,共3页
目的观察YH-16联合紫杉醇和顺铂(TP)治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的近期疗效和安全性,同时探讨循环血管内皮细胞(CECs)与该方案疗效的相关性。方法比较观察组和对照组治疗晚期NSCLC的近期疗效及毒副反应,采用流式细胞学法检测治疗前后... 目的观察YH-16联合紫杉醇和顺铂(TP)治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的近期疗效和安全性,同时探讨循环血管内皮细胞(CECs)与该方案疗效的相关性。方法比较观察组和对照组治疗晚期NSCLC的近期疗效及毒副反应,采用流式细胞学法检测治疗前后外周血CECs数量。结果观察组和对照组有效率(CR+PR)分别为62.50%和22.22%(P=0.035);临床受益率分别为87.50%和50.00%(P=0.030);两组Ⅲ~Ⅳ级白细胞减少发生率分别为31.25%和33.33%;Ⅲ~Ⅳ级血小板减少发生率分别为25.00%和27.78%;恶心、呕吐发生率分别为56.24%和50.00%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 YH-16联合TP疗效优于单独应用TP,不增加毒副反应,CECs可能是一个较好的预测化疗联合抗血管生成治疗疗效的标志。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 重组人血管内皮抑制剂 联合化疗 血管/细胞学
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携载VEGF基因的聚四氟乙烯血管材料对内皮细胞生长的促进作用 被引量:2
10
作者 陶思丰 陈力 +3 位作者 许远 田华 李国刚 陈健 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第12期1074-1076,共3页
目的:研究聚四氟乙烯(PTFE)血管材料携载血管内皮生长因子(VEGF)基因并促进内皮细胞生长的可行性.方法:将pCDI-hVEGF121/pCDI质粒溶液处理过的PTFE人工血管修剪成圆片,置于生理盐水中并于0.5,1,2,4,8,16,24,48和72h测... 目的:研究聚四氟乙烯(PTFE)血管材料携载血管内皮生长因子(VEGF)基因并促进内皮细胞生长的可行性.方法:将pCDI-hVEGF121/pCDI质粒溶液处理过的PTFE人工血管修剪成圆片,置于生理盐水中并于0.5,1,2,4,8,16,24,48和72h测定溶液的吸光度,计算出溶液的DNA浓度,绘出体外释放曲线.分离和培养人脐静脉内皮细胞,将内皮细胞种植到携带基因质粒的PTFE材料表面,在6,24,72和120h检测细胞增殖情况并用ELISA法检测培养液中VEGF蛋白的表达量.结果:体外释放曲线提示在0.5~4h的这段时间内,质粒释放较快,随后进入缓慢增长期,直至72h仍有质粒的释放.在24,72和120h时间点,VEGF质粒组PTFE材料上的内皮细胞数和增长倍率都明显高于空质粒组材料(P〈0.05),在6,24,72和120h时间点,VEGF质粒组培养液的VEGF蛋白水平和增长倍率也明显高于空质粒组(P〈0.01).结论:证实了PTFE材料携带VEGF基因转染内皮细胞并具有促进其生长的可能性. 展开更多
关键词 聚四氟乙烯 血管内皮生长因子类 人工血管 基因 内皮 血管/细胞学
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心血管疾病发病机制研究:细胞外信号调节激酶在血管紧张素Ⅱ引起血管平滑肌细胞增殖反应中的调节作用 被引量:2
11
作者 张严高 秦永文 +2 位作者 吴弘 文军慧 李闻捷 《中国临床康复》 CSCD 2004年第30期6614-6615,共2页
目的:研究细胞外信号调节激酶(extracellularsignal-regulatedkinase,ERKs)信号途径在血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)介导的大鼠血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecell,VSMC)促增殖等反应中的作用及其可能的调控机制。方法:选用... 目的:研究细胞外信号调节激酶(extracellularsignal-regulatedkinase,ERKs)信号途径在血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)介导的大鼠血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecell,VSMC)促增殖等反应中的作用及其可能的调控机制。方法:选用6周龄230g清洁级SD大鼠2只:本实验在长海医院中心实验室完成。实验依随机数字表分为正常对照组、AngⅡ诱导组、PD098059预处理组、U0126预处理组。每组均为3孔(n=3)。实验以通过3H-胸苷(3H-TdR)掺入率与3H-亮氨酸掺入率分别反映VSMC的DNA代谢与蛋白质合成代谢速率;并通过给予MAPK激酶特异性抑制剂PD098059及ERKs抑制剂UO126预处理,观察它们对细胞蛋白合成和DNA代谢及细胞增殖的影响。结果:①AngⅡ(1×10-7mmol/L)处理30minVSMC3H-胸苷掺入率和3H-亮氨酸掺入率均明显增高(增加207.2%,P<0.01);②AngⅡ增高3H-胸苷掺入的作用可明显被PD098059所抑制(增高抑制率52.3%,P<0.01)和完全被UO126所抑制(增高抑制率91.7%,P<0.01);③AngⅡ增高3H-亮氨酸掺入的作用可部分被PD098059所抑制(增加抑制率29.3%,P<0.05)和明显被UO126所抑制(增加抑制率64.6%,P<0.01)。结论:ERKs激活在血管紧张素Ⅱ导致VSMC增殖反应中具有重要作用,并可通过ERKs信号途径的特异性抑制剂的抑制效应,影响血管平? 展开更多
关键词 平滑 血管/细胞学 血管紧张素Ⅱ/药理学 信号传导 蛋白激酶/代谢
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应用分离微血管段方法培养人脑微血管内皮细胞及对血管内皮细胞生长因子基因表达和细胞超微结构的观察(英文) 被引量:2
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作者 赵明光 唐涛 +2 位作者 高永中 浦佩玉 魏学忠 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第21期211-213,i004,共4页
背景:观察缺氧状态下脑血管内皮细胞的血管内皮细胞生长因子表达及细胞超微结构变化,可为从细胞和分子水平认识血管生成及其相关的细胞因子参与缺血性脑血管疾病的病变过程。目的:构建分离微血管段体外培养人脑微血管内皮细胞的方法,并... 背景:观察缺氧状态下脑血管内皮细胞的血管内皮细胞生长因子表达及细胞超微结构变化,可为从细胞和分子水平认识血管生成及其相关的细胞因子参与缺血性脑血管疾病的病变过程。目的:构建分离微血管段体外培养人脑微血管内皮细胞的方法,并观察血管内皮细胞生长因子基因表达与细胞超微结构变化。设计:随机对照的技术方法研究。单位:一所军区总医院的神经外科,一所大学医院的神经外科。对象:2002年沈阳军区总医院神经外科脑动静脉畸形患者18例(SpetzlerⅡ~Ⅲ级),全部病例术前均经全脑血管造影证实。取材于手术中切除的完整脑动静脉畸形新鲜标本周围粘连的新鲜脑组织,采用匀浆、过滤和酶消化技术分离微血管内皮细胞。将在培养瓶内生长良好的细胞分成缺氧2,4,8h组和对照组4组,每4瓶为1组。方法:缺氧条件模拟:体积分数0.95N2,体积分数0.05CO2。免疫组化方法检测细胞中第八因子相关抗原(FⅧ-RA)表达。选用RT-PCR技术观察每组内皮细胞血管内皮细胞生长因子mRNA表达,同时以ELISA方法检测每组细胞上清液中血管内皮细胞生长因子蛋白含量,透射电镜观察细胞超微结构的变化。主要观察指标:对照组和各缺氧组血管内皮细胞中血管内皮细胞生长因子mRNA表达和细胞上清液中血管内皮细胞生长因子蛋白含量,以及细胞超微结构的变化。结果:相差显微镜下,培养的活细胞具有单层“卵石样”排列的典型特征,90%以上的细胞为FⅧ-RA阳性染色。缺氧4h细胞血管内皮细胞生长因子mRNA和蛋白表达为0.98±0.19,(180.77±20.15)ng/L,较对照组显著升高[0,(26.20±6.33)ng/L,P<0.01],8h后表达下调[0.35±0.07,(31.68±8.34)ng/L],并出现线粒体肿胀、内质网扩张及溶酶体多囊泡形成。结论:采用分离微血管段方法培养人脑血管内皮细胞,操作简便易行,细胞纯度可靠。缺血缺氧早期血管内皮细胞生长因子表达不足以维持细胞超微结构完整,随缺氧时间延长细胞可发生损伤性变化。 展开更多
关键词 内皮 血管/细胞学 缺氧 内皮生长因子
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体外诱导成人外周血干细胞向血管内皮细胞分化 被引量:2
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作者 吴维 胡何节 余继海 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第2期151-153,共3页
目的研究人外周血干细胞(PBSC)向血管内皮细胞分化。方法以血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对经重组人粒细胞集落刺激因子刺激后采集的PBSC进行诱导培养,观察细胞形态的变化,运用流式细胞术检测诱导后的细胞... 目的研究人外周血干细胞(PBSC)向血管内皮细胞分化。方法以血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对经重组人粒细胞集落刺激因子刺激后采集的PBSC进行诱导培养,观察细胞形态的变化,运用流式细胞术检测诱导后的细胞表达CD31和vWF情况,并用透射电镜观察细胞的超微结构。结果经VEGF和bF-GF诱导后的细胞形态上表现内皮细胞特征,经流式细胞仪测定表达血管内皮细胞特有表面标志CD31和vWF,透射电镜细胞胞浆内可见特征性Weible-Palade小体。结论外周血干细胞在VEGF和bFGF诱导下,可分化为内皮细胞。 展开更多
关键词 内皮 血管/细胞学 细胞 细胞分化
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氧化苦参碱抑制肝癌细胞诱导血管内皮细胞增殖作用的研究 被引量:28
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作者 王兵 王国俊 +2 位作者 蔡雄 张大昕 姚阳 《肿瘤防治杂志》 2003年第7期707-709,共3页
目的 :探讨氧化苦参碱 (OM )对肝癌细胞诱导血管内皮细胞 (VEC)增殖的抑制作用。方法 :用MTT法检测不同浓度OM对VEC、人肝癌SMMC 772 1细胞增殖及SMMC 772 1细胞诱导VEC增殖的影响。结果 :OM浓度为 2 .5~ 1 0mg mL时 ,对VEC增殖的抑制... 目的 :探讨氧化苦参碱 (OM )对肝癌细胞诱导血管内皮细胞 (VEC)增殖的抑制作用。方法 :用MTT法检测不同浓度OM对VEC、人肝癌SMMC 772 1细胞增殖及SMMC 772 1细胞诱导VEC增殖的影响。结果 :OM浓度为 2 .5~ 1 0mg mL时 ,对VEC增殖的抑制率为 4 .6 %~ 36 .4 % ;OM浓度为0 31 3~ 1 0mg mL时 ,对肝癌细胞增殖的抑制率为 2 5 3%~ 88 6 1 % ;经浓度为 1 2 5~ 1 0mg mLOM作用后的肝癌细胞培养液对VEC增殖的抑制率为 7 6 9%~ 38 4 6 % ;OM浓度为 0 6 2 5~ 1 0mg mL时 ,对肝癌细胞培养液诱导的VEC增殖的抑制率为 3 5 7%~ 5 7 5 4%。结论 展开更多
关键词 细胞/药理学 内皮 血管/细胞学 氧化苦参碱/药理学 生长抑制物
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血管平滑肌细胞凋亡与阿托伐他汀的干预效应 被引量:1
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作者 许宜冠 周胜华 +2 位作者 祁述善 刘启明 李旭平 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第39期35-37,i0001,共4页
目的:观察阿托伐他汀对血管平滑肌细胞凋亡的影响,并探讨凋亡抑制因子Survivin蛋白表达的意义。方法:实验于2004-04/2005-03在医学遗传学国家重点实验室中南大学湘雅二医院中心实验室完成。①取培养五六代的5只1月龄健康雄性大鼠主动脉... 目的:观察阿托伐他汀对血管平滑肌细胞凋亡的影响,并探讨凋亡抑制因子Survivin蛋白表达的意义。方法:实验于2004-04/2005-03在医学遗传学国家重点实验室中南大学湘雅二医院中心实验室完成。①取培养五六代的5只1月龄健康雄性大鼠主动脉中层平滑肌细胞,进行干预前于六孔培养板中放置无菌盖玻片,细胞长满盖玻片的90%时开始干预,分为4组进行干预:正常对照组:培养的平滑肌细胞未用阿托伐他汀干预;阿托伐他汀0.1μmol/L组:用浓度为0.1μmol/L的阿托伐他汀干预培养的平滑肌细胞;阿托伐他汀1.0μmol/L组:用浓度为1.0μmol/L的阿托伐他汀干预培养的平滑肌细胞;阿托伐他汀10.0μmol/L组:用浓度为10.0μmol/L的阿托伐他汀干预培养的平滑肌细胞。②分别于干预后6,12,24,48,72h采用Hoechst33258荧光染色观察血管平滑肌细胞凋亡情况;用免疫组化法检测血管平滑肌细胞凋亡抑制因子Survivin蛋白表达情况。③组间差异比较采用t检验。结果:①荧光染色检测血管平滑肌细胞凋亡结果显示,阿托伐他汀干预培养的大鼠血管平平滑肌细胞后,随干预时间延长和用药浓度增加,平滑肌细胞凋亡增加。阿托伐他汀干预72h后,血管平滑肌细胞凋亡率:阿托伐他汀0.1,1.0,10.0μmol/L组明显高于正常对照组(11.1%,27.2%,50.5%,3.8%,P<0.01),各组间两两比较差异明显(P<0.01)。②培养的血管平滑肌细胞Survivin因子表达情况:阿托伐他汀干预24h,血管平滑肌细胞凋亡抑制因子Survivin蛋白表达下降,干预48h~72h,血管平滑肌细胞Survivin因子未见表达。结论:①阿托伐他汀可诱导血管平滑肌细胞凋亡,其凋亡率呈时间和剂量依赖性。②阿托伐他汀致血管平滑肌细胞凋亡的作用可能与其下调凋亡抑制因子Survivin蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 平滑 血管/细胞学 细胞凋亡 羟甲基戊二酰基COA还原酶抑制剂
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丹参多酚酸盐对电离辐射损伤血管内皮细胞影响的初步研究 被引量:7
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作者 杨顺清 洪小苏 《中国误诊学杂志》 CAS 2008年第36期8829-8831,共3页
目的:观察不同浓度的丹参多酚酸盐对电离辐射后人脐静脉内皮细胞(HUVEC)系ECV-304增殖抑制的影响,初步了解丹参多酚酸盐对血管内皮细胞的抗辐射保护作用。方法:ECV-304未干预组和不同浓度的丹参多酚酸盐干预组用4Gy的6MV-X射线进行照射... 目的:观察不同浓度的丹参多酚酸盐对电离辐射后人脐静脉内皮细胞(HUVEC)系ECV-304增殖抑制的影响,初步了解丹参多酚酸盐对血管内皮细胞的抗辐射保护作用。方法:ECV-304未干预组和不同浓度的丹参多酚酸盐干预组用4Gy的6MV-X射线进行照射,照前和照后24h分别用MTT法,观察药物对细胞增殖抑制的影响。结果:与照前对比,照后24h未干预组细胞增殖抑制率达到84%,而干预组随着药物浓度的增加,细胞的受抑制率逐渐降低。结论:丹参多酚酸盐对电离辐射损伤血管内皮细胞具有明显的保护作用,且具有药物浓度依赖性。 展开更多
关键词 辐射损伤/中药疗法 丹参酚/药理学 内皮 血管/细胞学/药物作用 内皮细胞/病理学/药物作用 人类
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干预糖尿病患者血管病变:二氯醋酸二异丙胺对内皮细胞的功能效应 被引量:1
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作者 万沁 童南伟 吴惠 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第39期66-68,共3页
目的:了解丙酮酸脱氢酶激活剂二氯醋酸二异丙胺对内皮细胞功能指标的影响。方法:将传代培养的人脐静脉内皮细胞接种至6孔板,培养48~72h至90%融合。将每孔分别分组:对照组:葡萄糖浓度为5.5mmol/L;高糖组:葡萄糖浓度为30mmol/L;二氯醋酸... 目的:了解丙酮酸脱氢酶激活剂二氯醋酸二异丙胺对内皮细胞功能指标的影响。方法:将传代培养的人脐静脉内皮细胞接种至6孔板,培养48~72h至90%融合。将每孔分别分组:对照组:葡萄糖浓度为5.5mmol/L;高糖组:葡萄糖浓度为30mmol/L;二氯醋酸二异丙胺+高糖组:浓度为1×10-5,1×10-4,1×10-3mol/L的二氯醋酸二异丙胺,加高糖处理48h。用2.5g/L胰酶消化收集细胞;固定后充分混匀制成1×109L-1细胞悬液;加RNA酶A37℃水浴45min;加入碘化丙啶50g/L混匀,4℃避光放置60min,尼龙网滤过,上流式细胞仪分析细胞DNA含量,计数10000个细胞,以亚G1峰细胞为凋亡细胞,计算细胞凋亡率。以体外原代培养的人脐静脉内皮细胞为靶细胞观察二氯醋酸二异丙胺对高糖诱导的血管内皮细胞功能指标一氧化氮和可溶性细胞间黏附分子1及细胞凋亡的影响;用改进的DPN诱导分析法检测二氯醋酸二异丙胺对人脐静脉内皮细胞中丙酮酸脱氢酶活性的影响。结果:①高糖组细胞一氧化氮浓度[(590.77±56.00)μmol/L]明显低于对照组[(799.47±51.77)μmol/L,P<0.01],可溶性细胞间黏附分子1水平明显高于对照组(P<0.001)。二氯醋酸二异丙胺+高糖组细胞一氧化氮浓度明显高于高糖组(P<0.05~0.01),可溶性细胞间黏附分子1水平明显低于高糖组(P<0.01)。②不同浓度的二氯醋酸二异丙胺可呈浓度依赖性激活丙酮酸脱氢酶活性,高浓度组与中、低浓度二氯醋酸二异丙胺组相比,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:二氯醋酸二异丙胺可以通过对丙酮酸脱氢酶的激活来纠正内皮细胞功能紊乱。 展开更多
关键词 内皮 血管/细胞学 丙酮酸脱氢酶 细胞凋亡
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缓激肽对大鼠脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞及胶质瘤细胞影响的体外研究 被引量:1
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作者 王义宝 刘云会 +1 位作者 薛一雪 王萍 《肿瘤防治杂志》 2005年第21期1601-1605,共5页
目的:体外探讨缓激肽(bradykinin,BK)的作用靶点细胞及BK选择性开放血脑屏障的可能机制。方法:通过免疫荧光测定脑血管内皮细胞、胶质细胞及C6细胞在不同剂量BK作用前后的细胞内钙离子变化,并且通过WesternBlot测定三组细胞的BKB2受体... 目的:体外探讨缓激肽(bradykinin,BK)的作用靶点细胞及BK选择性开放血脑屏障的可能机制。方法:通过免疫荧光测定脑血管内皮细胞、胶质细胞及C6细胞在不同剂量BK作用前后的细胞内钙离子变化,并且通过WesternBlot测定三组细胞的BKB2受体表达水平。结果:小剂量BK可以引起肿瘤细胞内的钙离子水平升高,而只有大剂量BK才能触发星形胶质细胞内的钙离子水平变化,脑血管内皮细胞对大、小剂量BK均无任何反应;三组细胞BKB2受体的WesternBlot整合密度值(integrateddensityvalue,IDV)分别为5000.12±1110.21(n=2)、18480.88±4119.86(n=3)和63032.13±2802.71(n=4),组间比较差异有统计学意义。结论:BK的直接作用靶点是星形胶质细胞及肿瘤细胞,两种细胞B2受体表达水平差异是小剂量BK选择性开放血肿瘤屏障的物质基础;BK可能通过某些细胞间信使起到调节脑血管内皮细胞通透性的作用。 展开更多
关键词 缓激肽/药理学 血管循环 内皮 血管/细胞学 星形细胞 神经胶质瘤/病理学
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血管内皮生长因子对急性髓系白血病细胞体外作用研究
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作者 王一 肖志坚 +3 位作者 刘澎 姜文奇 刘宗潮 韩忠朝 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第14期1089-1091,1094,共4页
目的:探讨血管内皮生长因子(vascu-larendothelialgrowthfactor,VEGF)对白血病细胞生物学特性的影响。方法:台盼蓝拒染实验观察VEGF对白血病细胞增殖的影响,流式细胞术检测VEGF对化疗药物阿糖胞苷(Ara-C)所诱导的白血病细胞凋亡和胞内... 目的:探讨血管内皮生长因子(vascu-larendothelialgrowthfactor,VEGF)对白血病细胞生物学特性的影响。方法:台盼蓝拒染实验观察VEGF对白血病细胞增殖的影响,流式细胞术检测VEGF对化疗药物阿糖胞苷(Ara-C)所诱导的白血病细胞凋亡和胞内抗凋亡蛋白bcl-2表达的影响,用集落形成方法观察VEGF对白血病祖细胞增殖的影响。结果:50ng/mLVEGF作用白血病细胞24h,活细胞数为(3·63±1·27)×106mL-1,与阴性对照(3·23±1·60)×106mL-1差异无统计学意义。VEGF可以抵抗Ara-C200ng/mL诱导白血病细胞的凋亡。白血病细胞胞内bcl-2蛋白的阳性表达(70·78±13·36)%明显高于正常对照组(18·55±9·24)%,P=0·039。VEGF可显著延缓细胞内bcl-2表达。VEGF组:(50·85±30·46)%,阴性对照:(36·52±12·38)%。VEGF促进非红系(白血病)集落的形成。VEGF组:(49·9±29·2)/0·5mL,阴性对照:(36·5±12·4)/0·5mL,P=0·013;VEGF对红系和混合集落形成无明显影响。结论:VEGF能抵抗化疗药物Ara-C所致的白血病细胞凋亡,并促进白血病细胞集落的形成,以VEGF为AML治疗靶点可望改善患者的预后。 展开更多
关键词 内皮 血管/细胞学 内皮生长因子/血液 白血病 髓样 流式细胞
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银屑病皮损血管内皮细胞CD105的表达
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作者 马小玲 慈超 +2 位作者 刘雯蓓 王军 贾月琴 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第4期329-331,共3页
目的探讨转化生长因子β的结合蛋白CD105在银屑病皮损血管内皮细胞的表达及其作用。方法采用免疫组化方法检测TGF-β1、TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ和CD105在银屑病皮损及正常对照皮肤的血管内皮细胞的表达。结果与正常皮肤相同,TGF-β1、TGF-... 目的探讨转化生长因子β的结合蛋白CD105在银屑病皮损血管内皮细胞的表达及其作用。方法采用免疫组化方法检测TGF-β1、TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ和CD105在银屑病皮损及正常对照皮肤的血管内皮细胞的表达。结果与正常皮肤相同,TGF-β1、TGF-βRⅠ在银屑病皮损血管内皮细胞均无明显表达;TGF-βRⅡ在银屑病皮损和正常皮肤的血管内皮细胞均有明显表达,但两者差异无显著性;CD105在银屑病皮损血管内皮细胞的表达明显强于正常皮肤,差异有显著性(P<0·01)。结论CD105在银屑病皮损血管内皮细胞的表达明显上调可能与银屑病真皮浅层血管增生、炎症细胞浸润的病理机制有关。 展开更多
关键词 银屑病 内皮 血管/细胞学 新生血管 病理性 转化生长因子Β
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